INFORME DE VISITA AL CENTRO DE ACUICULTURA MORRO SAMA TACNA

INTRODUCCION

La importancia de la acuicultura est creciendo da a da, lo que hace imperativo que se desarrollen mejores tcnicas de manejo o gestin de reproductores y de produccin de larvas, a fin de asegurar el xito en la produccin de semilla. En diversos rubros del cultivo acucola, la reproduccin artificial intensiva es la mejor manera de lograr una produccin de huevos de buena calidad, en una cantidad que satisfaga con oportunidad el requerimiento de post larvas o alevines de las granjas de engorde. Las tcnicas que se aplican con dicho fin permiten una incubacin y eclosin de los huevos en condiciones controladas, lo cual posibilita la obtencin de altas tasas de supervivencia de larvas. La produccin de semilla (post larvas o alevines) comprende bsicamente la cra y manejo de los reproductores, la produccin de huevos, su incubacin y la cra larvaria; labores que se complementan con tareas o acciones que facilitan la produccin, tales como mantenimiento de las instalaciones, equipos y materiales, as como registro y organizacin de los datos.

1. OBJETIVOS 1.1. Objetivo General: Conocer el desarrollo de las investigaciones y produccin de organismos acuticos en el centro de Acuicultura Morro Sama de Tacna. 1.2. Objetivos Especficos: Conocer el cultivo y manejo de Microalgas (Tetraselmis sp., Isochrysis sp., Nanochloris sp., Chaetoceros sp.). Conocer el cultivo y manejo de Rotferos. Conocer el cultivo y manejo de Artemia salina Conocer el cultivo y manejo de Abaln Californiano (Haliotis rufescens) Conocer el cultivo y manejo de Lenguado (Paralichthys adspersus) Conocer las Instalaciones y su funcionamiento dentro del centro Acucola.

2. MARCO TEORICO 2.1. Datos Generales del centro de Acuicultura Morro Sama de Tacna El centro de Acuicultura Morro Sama se encuentra ubicado en la localidad de Morro Sama, distrito de Sama Las Yaras, provincia de Tacna, Regin Tacna. Este centro esta especializado en la produccin de Lenguado, Microalgas, Microcrustaceos, Rotferos y Abalon Rojo de California. En la siguiente tabla se muestran algunos datos referenciales y generales de la zona. Y en las figuras 1 y 2 se muestran la vista panormica y satelital del centro acucola. Tabla N1: Datos Generales del Centro Acucola Morro Sama. UBICACIN las Longitud

Distrito Provincia Regin

Categora rea total

Inicio Actividades Trabajadores

70 53 12.26 Latitud Va referencial Carretera Costanera Tacna - Ilo Km. 80 de Acceso DPA Morro Sama. DATOS GENERALES Centro de Vas de Acceso Asfaltada y acuicultura Afirmada 30 Tacna Ciudad Hectreas principal cercana de 1997 Responsable del Vctor Chili Layme Centro acucola 10 6 Asociaciones de beneficiarios pescadores artesanales.

Sama Yaras Tacna Tacna

18 0 0.30

ESPECIES TRABAJADAS Lenguado (Paralichthys adspersus) Turbot (Scophthalmus maximus) Abalon Rojo de California (Haliotis rufescens) Alimento Vivo Cultivo Masivo de Alevines de Lenguado

Adaptacin de la Tecnologa de cultivo en la fase de engorde Adaptacin de la Tecnologa de cultivo en la fase de engorde Produccin masiva de Artemias, Rotiferos y Microalgas.

Figura N1: Vista Panormica del Centro Acucola de Morro Sama

Fuente: FONDEPES (2010)

Figura N2: Vista Satelital del Centro Acucola de Morro Sama

Fuente: FONDEPES (2010)

El centro de Acuicultura Morro Sama se encuentra ubicada a 75km de la carretera costanera Tacna Ilo; localizado entre el Faro de la Marina (600m) y el Puerto Pesquero Grau(1km), en el distrtito de Sama, provincia de Tacna .Departamento de Tacna Region Tacna . El area terrestre tiene una cobertura delimitada , por las siguientes coordenadas :. Vertice : B C D E F G H 175948.2 180033.9 180033.9 180026.6 180013.0 180013.0 175948.2 705255.1 705244.8 705256.0 705306.0 705306.0 705315.5 705303.8

DATOS FISICOS ,QUIMICOS Y CLIMATOLOGICOS DE LA ZONA Condiciones del mar : Temperatura .- El area oceanografica presenta temperaturas superficiales que varian entre 15.85 y 16.15 C, con un valor promedio de 15.96C.La temperatura del fondo presenta valores entre 15.05 y 15.50C con una gradiente ternica de 0.1C. Salinidad.- La salinidad superficial presenta valores entre 34.87 y 34.82 y en el fondo la salinidad fluctua entre 34.88 y 34.85. Oxigeno Disuelto.- La distribucion del oxigeno disuelto presenta valores de 7.28 a 7.11 ml/l en la superficie y de 6.74 a 5.05 ml/l en el fondo. Condiciones climaticas ambientales : Temperatura .- La temperatura media de la parte baja de las cuencas o zonas costeras oscila entre los 13.2C y 22.5C (Locumba ). Vientos .- Ligada a las interaccion Oceano Continente ,debido ala corriente submarina peruana-chilena fluye hacia el sur por debajo de los 80m y la corriente de Humbolt, con influencia de los vientos el Anticiclon del Pacifico Sur. Lluvias.- Se caracteriza por ser una de las zonas mas aridas 2.2. Instalaciones Para la implementacin de un Hatchery, es necesario asegurar un flujo mnimo de agua con las condiciones adecuadas de salinidad, temperatura y libre de agentes contaminantes como qumicos o bacterias para el correcto funcionamiento de la planta y no exponer el adecuado desarrollo de las especies cultivadas, as como adecuar la distribucin de los equipos encargados de la purificacin del agua a las condiciones del laboratorio.

2.2.1. Generalidades Un aspecto muy importante de toda instalacin requerida para cultivos, lo constituye la renovacin del agua, puesto que este elemento es el medio de cultivo para los organismos. El manejo del agua involucra principalmente el hecho de tener que trasladarla hasta las instalaciones de cultivo, lo cual implica definir un sistema de bombeo y disear una red de distribucin del agua, adems del tratamiento para lograr la calidad requerida. Por tratarse de agua de mar, se deben tomar medidas especiales para su manejo, debido a que es altamente corrosiva y puede tener gran contenido de materia orgnica. Finalmente, la infraestructura bsica debe incluir los elementos en donde se estabulen los animales para reproduccin, as como aquellos que se necesiten para su mantenimiento, como son las estructuras para alimentacin y circulacin del agua. Se puede considerar que existen tres tipos de hatchery : Experimentales; que funcionan en laboratorios para investigaciones especficas y donde el cultivo de larvas se realiza en pequea escala. Preindustriales; que producen a mediana escala. Industriales; que comercializan sus productos y trabajan en gran escala. En estos dos ltimos tipos es donde se producen los problemas tecnolgicos ms crticos. La instalacin y funcionamiento de hatcheries para la produccin masiva de semilla de moluscos slo se justifica cuando el abastecimiento adecuado de semilla natural es difcil de lograr, por que: La produccin natural es tan pequea que no es suficiente para satisfacer una alta demanda, O cuando la especie objeto del cultivo tiene un alto valor comercial que permite absorber los altos costos de produccin que significa la instalacin y funcionamiento del hatchery.

Dichos costos estn condicionados tanto por la necesidad de mano de obra calificada, como por la gran inversin que requiere la construccin, equipamiento, mantencin y los elevados gastos de energa necesaria para el suministro constante de agua de mar, aire, temperatura y otros elementos, con el fin de mantener en ptimas condiciones los organismos en cultivo, as como la produccin de alimento para ellos. Mientras ms largo sea el proceso de cultivo en el hatchery, mayores sern los costos de produccin; por esta razn generalmente los hatcheries estn destinados a cultivar organismos hasta el estado de postlarvas, para pasar de all al ambiente natural, en donde ser la naturaleza la que se encargar de suministrar el alimento y los requerimientos necesarios para su desarrollo, ocupndose el acuicultor de las labores adecuadas para mantener a los animales en cautiverio.

2.2.2. Descripcin general del laboratorio Cualquiera sean sus dimensiones, un hatchery comercial para semilla de moluscos y alevines deber estar constituido por las secciones siguientes: Succin y almacenamiento del agua La estacin de bombeo de agua de mar es un elemento esencial, ya que todo desperfecto que ocurra en el sistema sera catastrfico, por esta razn se requiere de equipos en duplicado y con repuestos. Tratamiento del agua Respecto al agua de mar, sta rara vez es utilizada en su estado natural, pasando por diferentes procesos de filtracin y purificacin que varan de un hatchery a otro. Sala de cultivo de microalgas En todos los hatcheries, el alimento para las larvas lo constituyen las algas monocelulares vivas. Tener xito en el cultivo larval implica primero tener xito en el cultivo de microalgas, sin el ms mnimo error. Esta sala debe tener un termostato para mantener la temperatura entre 18 a 20 C. Los cultivos se realizan a pequea escala (cepas axnicas) en recipientes con volmenes de 250 a 5 000 ml de capacidad. La iluminacin debe ser permanente . Invernadero para cultivo masivo de microalgas Con luz y temperatura ambiente, donde se realizar la produccin en masa de microalgas. Los tanques de cultivo debern ser de fibra de vidrio con 500 a ms litros de capacidad, con vlvula inferior de salida de agua. Sala de desove y fecundacin Donde se realiza el acondicionamiento de ejemplares adultos, los que luego sern inducidos al desove y posterior colecta de huevos; aqu mismo se puede realizar la cuarentena. Los recipientes a usarse pueden ser de forma cuadrada, de material plstico, de 150 litros de capacidad y con tubera de salida de agua.

Sala de cultivo larval Debe contar con tanques circulares de fibra de vidrio, con 500 a ms litros de capacidad, base piramidal y una vlvula de salida de agua en la parte inferior. Pre engorde de post larvas (obtencin de semillas) Debe contar con tanques de forma rectangular tipo "raceway", con alrededor de 5 m3 de capacidad. La separacin efectiva de estos diferentes elementos o secciones no siempre se toma en cuenta en algunos hatcheries, pero es algo muy necesario ya que las condiciones ambientales que se requieren, especialmente en materia de iluminacin y temperatura, as como la calidad del agua de mar, difieren de una seccin a otra.

2.2.3. Infraestructura de apoyo hidrulico Pre filtro Es un dispositivo que cumple la funcin de retener parte de las partculas en suspensin, materia orgnica, estadios larvales y juveniles de crustceos (cirrpedos), moluscos, equinodermos, cordados y algas; que se pueden introducir al sistema donde alguno de ellos se fijar y crecern produciendo una obstruccin en el ducto de agua. Los elementos filtrantes estn constituidos por tres capas de similar espesor: la primera que se ubica en el fondo, con piedras de cuarzo de tamao ms bien grande; la segunda intermedia, con piedras de tamao pequeo; y por ltimo la tercera capa superior, est compuesta de arena. Filtro de arena rpido Este sistema permite retener partculas de gran tamao, de aproximadamente 50 micras, con la finalidad de permitir un mejor funcionamiento y mayor durabilidad de los microfiltros, los que por el material con el que estn construidos suelen tener un alto costo. Por el elemento filtrante que utiliza, el filtro de arena tiene un costo menor y puede utilizarse durante un perodo prolongado. Por lo general, el material filtrante se renueva luego de 1-2 aos de operacin continua. Tanque de almacenamiento de agua Su uso proporciona algunas ventajas importantes como: disponer de una cantidad de agua que permite asegurar un suministro de ella a pesar de un corte de electricidad, adems de darle un perodo de reposo al agua, lo que resulta apropiado para mejorar su calidad. Tanque de acumulacin para retrolavado Cumple la funcin de mantener un stock de agua, que puede ser alimentado de la misma lnea del sistema de bombeo de agua de mar o de la lnea de agua dulce que exista; siendo recomendable el uso de este tipo de agua, por que ayuda a mantener ms limpio el interior de la tubera. El objetivo de este sistema es realizar el llamado back wash o retrolavado, que consiste en invertir el sentido de circulacin del agua por medio de una combinacin de vlvulas y caeras; envindola al pre filtro, provocando un

flujo contrario al normal para limpiarlo de la acumulacin de partculas que van obstruyendo el paso del agua. Bombas Existe una gran variedad de bombas, pero entre las ms usadas pueden mencionarse las centrfugas, consideradas apropiadas para este fin, no descartndose la posibilidad de usar las de otros tipos. El costo de una bomba centrfuga es reducido en comparacin con otros modelos, pudiendo encontrarse repuestos con relativa facilidad. Adems, estn construidas en distintos materiales, segn el fludo. Debe tenerse en cuenta el material, por cuanto al suministrar agua de mar la bomba puede ser rpidamente deteriorada por la corrosin. Para asegurar una vida prolongada y un agua de buena calidad, se recomienda el uso de equipos de plstico inyectado o de acero inoxidable, que son de mayor costo. Sin embargo, de no contarse con alternativas adecuadas, se puede emplear un equipo estndar de fierro fundido y de bronce, tomando las precauciones necesarias de control del contenido de metales disueltos en el medio. Cuando se instalan tuberas es necesario tener en cuenta la potencia de la bomba para determinar el dimetro de stas, y a la inversa si conocemos el dimetro de la tubera podemos seleccionar la bomba adecuada. Microfiltros Generalmente se utilizan en serie tres microfiltros de 5, 3 y 1 micra para eliminar partculas pequeas que puedan interferir en el cultivo de las larvas. Los microfiltros pueden ser de cermica o de algodn, siendo los ms recomendables los primeros, que adems son de mayor duracin. En la industria acucola existen otras alternativas de filtros, pero lo importante es contar con sistema sencillo, higinico y de fcil reposicin; por que cuando se ensucian demasiado o se tupen se contaminan, siendo conveniente su rpida sustitucin por otros. Adems, para una mayor duracin, es recomendable que sean lavados diariamente. Esterilizacin del agua Este sistema cumple la funcin de eliminar los microorganismos vivos que logran atravesar los filtros, que en su mayora son nocivos para las larvas o competidores por el alimento. Entre los mtodos ms conocidos de esterilizacin se tiene la pasteurizacin y la exposicin a la luz ultravioleta empleando un equipo que consta de varias lmparas; este ltimo es el mtodo ms usado, por el menor costo de energa que requiere su operacin. Calentamiento del agua La induccin al desove y el cultivo de larvas requieren que se acondicione la temperatura del agua, para lo cual es necesario utilizar una caldera u otro sistema alternativo que permita un control de la temperatura. Hay que tener en cuenta el material de los calentadores, los que por lo general son de titanio. Tambin son ampliamente utilizados aquellos que

cuentan con proteccin de porcelana, pero para pequeos volmenes de agua.

Aireacin En los cultivos de organismos, para asegurar una alimentacin adecuada, es necesario homogenizar el medio, a fin de evitar que el alimento se sedimente y que se formen gradientes de temperatura. Para mantener aireados todos los sistemas de cultivo del laboratorio, se requiere de un sistema de conduccin (tuberas) conectado a un equipo "blower" o soplador tipo root que proporciona aire mediante burbujeo. Independientemente del tamao del laboratorio o hatchery, en forma general estos son los equipos e instalaciones indispensables para su funcionamiento, los que pueden adaptarse segn los recursos disponibles de cada uno. Es recomendable que las instalaciones sean desmontables, ya que en determinado momento se puede producir una contaminacin de la lnea de suministro de agua de mar o de aire, por lo que se tendra que hacer una esterilizacin completa de los equipos y tuberas. En general, es recomendable realizar peridicamente una limpieza de todo el sistema. MATERIALES RECOMENDADOS PARA USO Las larvas son muy sensibles a los iones de metales disueltos, por lo que es preciso que se tomen precauciones para evitar el contacto directo del agua con metales. Adems, se debe tener en cuenta que la mayora de los metales reaccionan con el agua de mar, formando compuestos que pueden ser nocivos para las larvas. Por este motivo, se recomienda que el sistema de suministro de agua sea de material plstico; destacndose el PVC, polietileno, policarbonato, fibra de vidrio o fibra poliester, tefln, entre otros. Es necesario tener en cuenta que la utilizacin de productos clorados para la limpieza de las tuberas pueden provocar la formacin de compuestos txicos en contacto con ciertas resinas. As mismo, debe tenerse presente que en contacto con el agua de mar todos los plsticos originan productos txicos; por esta razn su envejecimiento previo en agua de mar es una necesidad. SELECCIN DE REA DE UBICACIN El lugar conveniente para la instalacin de un hatchery es aquel que cuenta con las siguientes caractersticas: Que el oleaje de la zona sea suave, lo que permite obtener mejor calidad de agua por existir una menor cantidad de partculas en suspensin, asegurando as un mejor funcionamiento y durabilidad de los equipos Que no exista ninguna amenaza de contaminacin de origen industrial, minero, agrcola o domstico Que se encuentre alejado de zonas de cultivos comerciales de moluscos, para evitar ser afectados por epizootias

 Que exista la posibilidad de construir la sala de bombas a orillas del mar y en lugar no muy alto, debido a restricciones que imponen las bombas. As mismo, el laboratorio o hatchery deber estar lo ms cerca posible de la sala de bombas, ya que toda distancia extra implica un mayor consumo de energa. A estas condiciones se deben agregar todas las precauciones necesarias para asegurar que las instalaciones no sean deterioradas por eventos naturales, como por ejemplo marejadas. En lo concerniente a la edificacin, su naturaleza e implementacin constituye tambin un elemento determinante, ya que es un ambiente en donde circular agua de mar que debe ser tratada antes de su utilizacin en los cultivos. La principal caracterstica de un hatchery debe ser la limpieza, esto excluye las construcciones demasiado ligeras as como los dispositivos interiores rgidos o fijos, en especial para el caso de las tuberas y los tanques, los que deben ser desmontables o mviles que permitan la limpieza peridica del ambiente. EDIFICACIONES DE APOYO Laboratorio de microscopa El control y seguimiento rutinario de todos los cultivos se realiza en un laboratorio dotado de microscopios, balanza y equipos auxiliares. Almacn general Funcionar como depsito de distintos equipos, as como del material de laboratorio y de insumos diversos. Oficinas Para realizar labores administrativas inherentes al laboratorio y para el procesamiento de datos. Figura N3: Instalaciones de Cultivo de Abalon Rojo (Haliotis rufescens) en Chile.

Fuente: FONDEPES (2010)

2.3.

Cultivos Auxiliares Los cultivos auxiliares son los que proporcionan alimento vivo, esencial durante el desarrollo larvario de peces, crustceos y moluscos. Bajo la denominacin de cultivos auxiliares se desarrolla el cultivo de microalgas (chlorella, isochrisis, Tetraselmis o Chaetoceros, entre otras muchas) y de microinvertebrados (rotferos, artemia, coppodos, cladceros, entre otros) destinados a la alimentacin de las especies objeto de los cultivos principales. Son cultivos paralelos a los de especies comerciales. (Wikipedia, 2010). Uno de los factores limitantes en acuicultura es la obtencin y produccin de alimentos que cubran las necesidades de las especies que se cultivan para su comercializacin. Adems, esa produccin de alimento, ha de resultar econmicamente rentable (Wikipedia, 2010). Mientras que en la naturaleza, el desarrollo y supervivencia de larvas y juveniles depende de la presencia de organismos planctnicos, que a su vez se producen cuando hay nutrientes adecuados (cadena trfica), en condiciones de cultivo hay que asegurar el aporte de nutrientes necesarios para que la especie objetivo se desarrolle en las mejores condiciones, por lo que es fundamental conocer la composicin qumica de los alimentos vivos, y, a su vez, el contenido nutricional de las especies utilizadas como alimento vivo est relacionado directamente con su alimento (Wikipedia, 2010). En el centro acucola de Morro Sama se observo que los cultivos auxiliares con los que contaban y desarrollaban fueron de Artemia Salina, Rotiferos, y Microalgas. 2.3.1. Cultivo de Microalgas

Son llamadas microalgas a una gran cantidad de especies que constituyen el fitoplancton que abarca desde organismos auttrofos hasta microflagelados y microciliados auxtrofos. Estas especies aportan un alto contenido nutricional para peces, crustceos y moluscos, adems de ofrecer facilidades de manejo en sistemas de cultivo tanto en laboratorio como en produccin a gran escala con fines comerciales. Debido a esto es necesario cultivar los diversos tipos de microalgas dndoles las condiciones y enriquecindoles con los nutrientes necesarios para darle mayor calidad a nuestros cultivos hidrobiologicos. En el centro acucola visitado la produccin de las principales especies son: Tetraselmis sp., Isochrysis sp., Nanochloris sp., Chaetoceros sp.). La produccin de estas especies, brindan una calidad y cantidad adecuada, la cual permitir abastecer los requerimientos necesarios para los cultivos que las necesitan. El creciente inters por invertir en la reproduccin de moluscos, peces y crustceos en nuestro pas, nos compromete a seguir mejorando los procesos de produccin en los diferentes niveles de cultivo, lo que permitir proporcionar informacin a futuro, que conlleve a una actividad menos costosa y ms rentable, teniendo como base principal el mitigar cualquier impacto negativo al medio marino.

La elaboracin de este informe obedece a la experiencia y recopilacin de datos obtenidos durante las labores que se desarrollaron en el centro acucola, siendo este el trabajo que elaboran el personal profesional y tcnico del Centro de Acuicultura Morro Sama Tacna FONDEPES. DATOS FISICO Y QUIMICOS La temperatura de la sala de microalgas deber estar entre 19-20C. La salinidad se encuentra en un promedio de 36.4 UPS. El pH en el rango varia de 7.5 8.5. El oxigeno disuelto (O2) entre 7-8mg/L. El Dixido de Carbono (CO2), se inyecta 30Lt/minuto a travs de la lnea de aire por 2 minutos cada 2 horas, solo a nivel de botellas. La Iluminacin, la intensidad varia dependiendo del nivel y/o la especie en cultivo. Se utilizan tubos fluorescentes de luz blanca de 40 watts.

MATERIALES Y EQUIPOS 1. MICROALGAS a. CEPAS DE PRODUCCION 2. Isochrysis galbana var. Tahiti. (proviene de Chile) Chaetoceros calcitrans. Chaeroceros gracilis. Isochrysis galbana var. Tahiti (cepa americana). Chaetoceros mulleri.. Nannochloris occulata. Tetraselmis suecica.

MATERIALES REACTIVOS QUMICOS Nitrato de sodio NaNO3 Fosfato de sodio NaH2PO4H2O Metasilicato de sodio Na2SiO39H2O Triz (hidroximetil amino metano) Na2SiO39H2O EDTA (acido etileno diamino tetraactico di sdico) Na2SiO39H2O Cloruro frrico FeCl36H2O Cloruro de manganeso MnCl24H2O Molibdato de sodio Na2MoO42H2O Sulfato de cobre CuSO45H2O Sulfato de Zinc ZnSO47H2O Cyanocobalamina (B12) Biotina (H) Tiamina Hidroclrica (B1) Acido clorhdrico puro (37%) Bayfolan (Abonos foliares) Biofolka (Abonos foliares) OTROS

Formol Aceite de inmersin Rojo de fenol

Ortotholodine Lugol Cloruro de potasio Buffer 4-7-10 Bacto Agar Agar Agar MATERIALES DE LIMPIEZA Y DESINFECCION

Hipoclorito de sodio (leja comercial) Hipoclorito de calcio al 70 % Avlonwill desinfectante hospitalario. Acido muritico Alcohol 96 Jabn bacteriolgico Detergente lava vajilla Filtros para aire de 1m Filtros para agua de mar, bobinados de 1m, 20 de largo Filtros de papel 0.45 m y 0.2 m, 47mm de dimetro Mangas de filtrar de 1 m y 16 de largo Otros MATERIALES DE VIDRIO

Matraz de Kitasato de 4Lt y accesorios de filtrado

Erlenmeyer de 2-1-0.5-0.25 Lt.

Pipetas graduadas de 10-5-1ml

Frascos ambar de 1-0.5-0.25 Lt

Placas petri

Tubos de ensayo con tapas y sin tapas

Beakers de 1-0.5Lt

Probetas de 100-50-25ml

Camaras Neubauer

Termmetros de temperaturas mximas y mnimas

Termmetros ambientales Viales para la obtencin de muestras

Otros MATERIAL DE PLASTICO, SILICONA Y FIBRA DE VIDRIO

Baldes de 20 y 8 Lt Jarras de 2-1-0.5-0.25lt Vasos graduados Pipetas Llaves para aire Tapers rectangulares de diferentes tamaos Vlvulas de ,1/4,1 Gradillas Botellas de 20Lt de capacidad (Carboys) Fuentes Escurridores Embudos Ts, crucetas y conectores Tapones de jebe y de silicona # 10 Mangueras de 1 Tanques de fibra de vidrio Azafates OTROS

Algodn Gasa quirrgica

 3.

Hilo nylon (macram) Cinta de embalaje Papel toalla Papel Kraft Papel aluminio Toallas absorbentes Asa bacteriolgica Mascaras antigases Mascarillas para polvo Lentes de proteccin Guantes de jebe Guardapolvos Mandiles plsticos Botas de jebe Pantalones de agua Piedras difusoras Estantera de madera Luminarias (fluorescentes de 40 watts y respectivos accesorios) Tuberas de PVC Papel parafilm 3M Cinta adhesiva para control de esterilizado a vapor Ollas a presin Baln de gas Cinta tefln Cinta aislante Brochas EQUIPOS Microscopio Olla esterilizadora elctrica Destilador de agua

Agitador magntico Balanza analtica Estufa para esterilizar material seco Autoclave

Refrigerador Cocina a gas

ACONDICIONAMIENTO DE AMBIENTE 1. LINEA DE AGUA SALADA Llenar con agua salada e hipoclorito de calcio a 1000ppm Reposar por 24 horas Eliminar el agua Se hace circular agua de mar en las siguientes 48 horas Probar con el reactivo ortotholodine para verificar si hay residuos de cloro. LINEA DE AIRE Al inicio de la lnea de aire hacer ingresar alcohol y dejar que circule por esta. Se prende el blower para que desplace el alcohol por toda la tubera y luego se apaga. Se deja que haga efecto el alcohol por varias horas. LIMPIEZA DE SALAS Durante la produccin se limpia las paredes, estantera de madera con el desinfectante hospitalario Avlonwill, semanalmente. Los pisos diariamente se trapean con agua e hipoclorito de calcio a 500 ppm. El pediluvio se limpia diariamente, eliminando el agua, limpiando y remplazandolo con agua e hipoclorito de 500ppm. Las mesas de cemento se limpia despus de los trabajos diarios con Avlonwill. Las ventanas, puertas, parte externa de tuberia de aire se limpia con un pao humedecido en alcohol semanalmente. Los vidrios de las mesas y estantes se limpian diariamente con alcohol. LIMPIEZA Y ESTERILIZADO DE MATERIALES MATERIALES DE VIDRIO Se prepara acido muritico mas agua en proporcin 1:1 En esta solucin se sumerge todo el material de vidrio, previo enjuague con agua dulce. Transcurrido como mnimo 6 horas, se enjuaga con abundante agua dulce cada recipiente, por 5 minutos. Se realiza una prueba para comprobar si queda algn residuo de acido con el reactivo rojo del fenol.

Se deja escurrir, se cubre con papel aluminio y se pone a esterilizar a 125C por 2 horas. MATERIAL DE PLASTICO BOTELLAS DE SIEMBRA Se prepara una solucin de acido muritico como la anterior proporcin y se adiciona una parte de esta en cada botella, tambien se lava con agua dulce previamente, se agita vigurosamente las botellas y se deja de un da para el otro. Al otro dia se enjuaga haciendo correr agua de mar filtrada e irradiada con luz UV por 15 minutos cada botella. Se enjuaga con agua dulce, se deja escurrir y se cubre la boca del recipiente con papel kraft sujeto con una liga o con papel aluminio. MATERIAL DE FILTRADO PARA AGUA DE MAR (filtros bobinadosmagas de filtrar.) Se sumergen en una solucin de agua dulce e hipoclorito de calcio a 1000 ppm diariamente despus del trabajo los filtros bobinados, las carcasas de los filtros y mangas de filtrar de un da para otro. Al da siguiente se escurre y se enjuaga a presin durante 5 minutos cada filtro y cada bolsa de filtrar durante 3 minutos. Se comprueba si no tiene residuos de cloro. OTROS MATERIALES PLASTICOS (Tapones-mangueras siliconadasjarras, embudos, vasos de muestreo) Se sumergen en una solucin de agua dulce con 500ppm de hipoclorito de calcio o hipoclorito de sodio, se deja de un da para el otro. Al otro da se enjuaga con abundante agua dulce. Se comprueba si no hay residuos de cloro y se deja escurrir. El material que es posible esterilizar en estufa, se envuelve en papel krat y se coloca en esta a 100 C por 2 horas.

2.

CALIDAD Y TRATAMIENTO DL AGUA DE MAR Recibir agua salada en filtros bobinados de 1m Pasarla por equipo Ultravioleta Usarla para lavar botellas PROCESO PARA EL CULTIVO DE MICROLGAS 1. SEMBRADO DE BOTELLAS A NIVEL DE 12 Y 18 LITROS Recibir agua salada en filtros bobinados de 1m Pasarla por equipo ultravioleta. Filtrar el agua en mangas de 1m Incorporar 0.5 ml de leja por cada litro de agua salada Declorinar con tiosulfato de sodio a 30 ppm Comprobar con ortotholodine Rotular con el nombre de la especie y fecha de siembra Agregar nutrientes (F/2 MEDIO GUILLARD & RYTHER 1962, GUILLARD 1965) segn Tabla n

Observar y contar con las muestras de microalgas (inoculo) Agregar inoculo Poner varilla para aire y tapon Llevar a cepario y colocar aire y luz. SEMBRADO DE MATRACES A NIVEL DE 1 LITRO

Recibir agua salada en filtros bobinados de 1m Pasarla por equipo ultravioleta. Filtrar el agua en mangas de 1m en un envase adecuado Incorporar 0.5 ml de leja por cada litro de agua salada Declorinar con tiosulfato de sodio a 30 ppm Comprobar con ortotholodine Agregar nutrientes (F/2 MEDIO GUILLARD & RYTHER 1962, GUILLARD 1965) segn Tabla n Llenar a 750ml de volumen los mateces Erlenmeyer de 1Lt de capacidad. Esterilizar en humedo el medio a 125C, 1bar de presion por 30 minutos Colocar varillas de aireacion Adicionar vitaminas a los medios de cultivo Prender las luces ultravioleta de la campana por una hora Dejar reposar por una hora Rotular con el nombre de la especie y fecha de siembra Observar y contar las muestras de microalgas (inoculo) Agregar inoculo junto a un mechero con buena flama Levar a cepario y colocar aire y luz SEMBRADO DE MATRACES A NIVEL DE 125 MILILITROS

Recibir agua salada en filtros bobinados de 1m Pasarla por equipo ultravioleta. Filtrar el agua en mangas de 1m en un envase adecuado Incorporar 0.5 ml de leja por cada litro de agua salada Declorinar con tiosulfato de sodio a 30 ppm Comprobar con ortotholodine Filtrar con papel filtro de 0.45 m en matraz kitasato con ayuda de una bomba de vaco Se sigue el procedimiento anterior pero ahora con el papel filtro de 0.2 m El agua filtrada es depositada en matraces Erlenmeyer de 2 lt. de capacidad los cuales son esterilizados en la autoclave a 125C, 1bar de presin por 30 minutos Agregar nutrientes (F/2 MEDIO GUILLARD & RYTHER 1962, GUILLARD 1965) segn Tabla n Vaciar solamente 100ml del medio a cada matraz erlenmeyer de 250ml de capacidad, colocar tapon de algodn y papel aluminio Esterilizar en la autoclave los medios a 125C a 1 bar de presion por 30 minutos Colocar los medios en la campana Adicionar vitaminas a lso medios de cultivo Prender las luces UV de la campana por 1 hora Dejar reposar por 1 hora Rotular con el nombre de la especie y fecha de siembra Observar y contar las muestras de microalgas (inoculo)

Agregar inoculo junto a un mechero con buena flama Levar a cepario y colocar aire y luz MANTENIMIENTO Y SEMBRADO DE CEPAS (TUBOS)

Recibir agua salada en filtros bobinados de 1m Pasarla por equipo ultravioleta. Filtrar el agua en mangas de 1m en un envase adecuado Incorporar 0.5 ml de leja por cada litro de agua salada Declorinar con tiosulfato de sodio a 30 ppm Comprobar con ortotholodine Filtrar con papel filtro de 0.45 m en matraz kitasato con ayuda de una bomba de vaco Se sigue el procedimiento anterior pero ahora con el papel filtro de 0.2 m El agua filtrada es depositada en matraces Erlenmeyer de 2 lt. de capacidad los cuales son esterilizados en la autoclave a 125C, 1bar de presin por 30 minutos Agregar nutrientes (F/2 MEDIO GUILLARD & RYTHER 1962, GUILLARD 1965) segn Tabla n Vaciar en matraz erlenmeyer de 500ml de capacidad Esterilizar en la autoclave los medios a 125C a 1 bar de presion por 30 minutos Adicionar vitaminas en la campana de siembra Sembrar los tubos a un nivel de 10ml en la campana de siembra Prender las luces UV de la campana por 1 hora Dejar reposar por 1 hora Observar y contar las muestras de microalgas (inoculo) Agregar inoculo junto a un mechero con buena flama Rotular con el nombre de la especie y fecha de siembra Levar a cepario y colocar aire y luz

2.3.2.

Cultivo de Artemias La Artemia es un magnfico alimento vivo en tanto en acuicultura como en acuarofilia, por sus caractersticas de desarrollo, su pequeo tamao de nauplio y metanauplio, que es adecuado para las larvas y juveniles de crustceos y de peces, y por su fcil manejo. El valor nutritivo de los nauplios recin eclosionados es muy alto, pero decrece rpidamente cuando no disponen de alimento. Se obtiene un enriquecimiento de nutrientes esenciales utilizando un sustrato de microalgas (vivas o secas), o con una mezcla artificial de nutrientes (lpidos, aminocidos, cidos grasos, etc.)(Wikipedia, 2010). Los cistes (huevos de resistencia) de Artemia se comercializan, generalmente deshidratados. Para iniciar un cultivo de Artemia, los cistes se introducen en agua de mar (hidratacin) en unos recipientes preferiblemente cilndricos para mayor facilidad de aireacin, a pequea concentracin (10 g de huevos por L), con iluminacin (2.000 lux) durante unos 10 minutos para excitar su actividad metablica; El agua ha de mantenerse a unos 28 C de temperatura con aireacin fuerte. Con estas condiciones se logra la eclosin (aparicin de las larvas) aproximadamente a las 24 h, siendo normal una tasa de supervivencia de un 80%.

Los huevos no eclosionados y las cscaras restantes de los cistes pueden ser perjudiciales para los peces y crustceos que los vayan a ingerir, Por lo que es necesario separar los nauplios recin eclosionados; para ello se utiliza su fototropismo (atraccin por la luz) o bien se disuelven los restos con productos qumicas que no daen a los nauplios. Tambin, si se quiere mejorar el coeficiente de eclosin, se recomienda descapsular los cistes. Las cubiertas duras de los cistes pueden eliminarse mediante una breve exposicin a una solucin de hipoclorito de sodio (leja); posteriormente, hay que hacer un lavado intenso para eliminar los restos de hipoclorito. En el centro de produccin acucola de Morro Sama se conto con un mtodo especifico para la produccin y enriquecimiento de la Artemia. Esta artemia eclosiona y se desarrolla a 28C, inicialmente es un Ciste luego pasa a ser un nauplio de Artemia. Estos nauplios son conservados luego de ser tamizados en una superficie, a un temperatura de 5C. La cantidad producida de nauplios satisface las necesidades de alimento de las larvas de Lenguado en sus primeras etapas de vida. Estas larvas de lenguado son alimentadas diariamente con 30 millones de nauplio de artemia dentro de las instalaciones del centro acucola. Los nauplios de artemia se obtienen a travs de huevos llamados cistes los cuales son comercializados en latas que suelen costar de 40 a 60 dlares, la mejora marca de cistes comerciales es INVE que brinda una mayor calidad de Artemia. Los nauplios de artemia al nacer se alimentan de su saco vitelino que contiene generalmente cidos grasos esenciales propios, los cuales se agotan por consumo propio, debido a ello es necesario adicionar al medio de cultivo cidos grasos artificiales. En la siguiente figura se muestra una de las latas de cistes de artemia salina utilizadas en el centro experimental. Figura N5: Lata de Cistes de Artemia Salina de la marca Biomarine.

Fuente: Propia (2010) Por otro lado 1 gramo de Cistes de artemia son aproximadamente 200000 Huevos. Tambin se comercializan Cistos descapsulador por los problemas que suelen generar las cascaras de los cistes (Ocasionan problemas esofgicos en las larvas de peces alimentados con estos). En el centro acucola de Morro Sama se tiene una densidad de larvas de Lenguado de aproximadamente 80000 larvas por tanque alimentadas

diariamente con 2.8 gramos de cistes de artemia (560000 huevos). En la siguiente figura se muestran los cistes de artemia Salina deshidratados antes de iniciar el proceso de produccin de este cultivo auxiliar.

Figura N6: Cistes de artemia salina deshidratados.

Fuente: Propia (2010) La produccin de artemia inicia con la hidratacin de los cistes de artemia, para ello en el centro acucola suelen utilizar cantidades de 10 gramos de cistes, la balanza utilizada fue de 0.1 gramos de precisin. Para hidratar estos cistes es necesario colocarlos en un recipiente con agua dulce por media hora. En la siguiente figura se muestran los cistes hidratados nuevamente antes de iniciar el proceso de descapsulacin.

Figura N7: Pesado de Cistes de artemia salina antes de iniciar la hidratacin.

Fuente: Propia (2010)

Figura N8: Cistes de artemia salina hidratados.

Fuente: Propia (2010)

Luego de ello preparamos una solucin que ser llamada solucin Descapsuladora la cual contendr 95 mililitros de Hipoclorito de Sodio (Leja a un 50% o 5 gramos por 100 ml), 45 mililitros de agua de mar y 1.5 gramos de NaOH (1.5 gramos). Si en un cultivo nos piden 10 millones de Nauplios de artemia tenemos que fijar la meta en 10.5 u 11 millones de nauplios debido a varios factores que impiden a que lleguemos a la meta solicitada (Mortalidad, infecundidad, etc.) Por otro lado preparamos una solucin de Tiosulfato (10 gramos en dos litros de agua) (ser aadido despus para neutralizar el NaOH). Por ultimo se utilizara un tamiz para la limpieza de los futuros nauplios (este permitir el paso del agua mas no de los nauplios). Este tamiz es de un tamao de 100 micras de abertura. Este es comercializado por Yardas y su costo por yarda es de 800 soles. En la siguiente figura se muestra el proceso de Tamizado y limpieza de los aun cistes de artemia salina.

Figura N9: Cistes de artemia salina hidratados.

Fuente: Propia (2010)

La solucin preparada con Tiosulfato es necesaria para eliminar restos de Leja, aqu se introducen los huevos solo por 30 segundos, no ms sino

estos empezaran a quemarse. En la siguiente figura se muestran los huevos decapsulados (Cascara disuelta por la accin de la leja y el NaOH). Ntese que hay algunos puntos blancos debido a la quemadura que ocasiono el Tiosulfato a los huevos ms dbiles. Figura N10: Cistes de artemia salina hidratados.

Fuente: Propia (2010)

Luego de la limpieza preparamos un recipiente de 12 litros para los 10 gramos de cistes que utilizamos, este recipiente debe contener 70% de agua de mar y 30% de agua dulce. Colocamos la artemia en este recipiente y lo dejamos por 24 horas esperando la eclosin y nacimiento de los nauplios de artemia. En la siguiente figura se muestra a los nauplios de artemia nacidos un da despus de la decapsulacin. Figura N11: Nauplios de Artemia recin nacidos.

Fuente: Propia (2010)

La descapsulacin tambin puede realizarse con acido actico a 28C. La artemia a los 10 das mide 400 micras. Estas son mantenidas y alimentadas con cidos grasos de la marca CELCO, este acido graso se aplica a 1 gramo por un milln de artemias, la composicin de este acido graso es DHA y EPA que cuestan 80 dlares el litro cada uno (en presentacin polvo y liquido).

2.3.3.

Cultivo de Rotiferos Los rotferos pertenecen al filo de los Nematelmintos (orden Monogonontes); son seudocelomados y hay ms de 1800 especies, que en su mayora son de agua dulce; tambin hay algunas especies marinas y otras terrestres que viven sobre musgos hmedos. Son organismos pluricelulares, de pequeo tamao, visibles a travs de microscopio ptico. Tienen un rgano rotatorio, con cilios, que realiza movimientos giratorios creando fuertes corrientes de agua que le sirven para captar su alimento. En general, son formas libres que forman parte del plancton, aunque tambin hay especies ssiles (Wikipedia, 2010). El cuerpo de un rotfero generalmente es transparente, a veces coloreado en la regin intestinal. Miden entre 100 micras y 3 mm; los machos son ms pequeos y menos desarrollados que las hembras, midiendo algunos tan slo 60 micras. El cuerpo de todas las especies presenta un nmero constante de clulas, que en el caso del gnero Brachionus (la especie Brachionus plicatilis es la ms importante en acuicultura) es de aproximadamente 1000; esas clulas no han de considerarse como identidades nicas, sino como un rea de plasma; el crecimiento del animal se produce por un aumento de plasma y no por la divisin de las clulas. En el cuerpo de un rotfero se diferencian tres partes:

cabeza, que es donde se encuentra el rgano rotatorio o corona rodeando la boca, que es ms o menos ventral tronco, donde est el tracto digestivo pie, que es una formacin anillada retrctil sin segmentacin, que termina en uno o cuatro dedos

En su ciclo vital, presentan alternancia en la reproduccin (sexual y asexual); hembras partenogenticas originan nuevas hembras partenogenticas, pero cuando las condiciones del medio son desfavorables se origina una generacin de hembras y machos que se reproducen sexualmente. El cultivo de Brachionus plicatilis se realiza en agua de mar mesohalina, filtrada a 1 micra y desinfectada con cloruro o con leja (y neutralizada con bisulfito sdico). Su alimentacin suele ser con levadura de panificacin, en una concentracin de 1 g por cada milln de rotferos (desleda en agua, cada 8 horas). Cuando es necesario, se complementa la levadura con vitaminas (E, B6 y B12) y/o con aceite de pescado. La temperatura ptima de cultivo es de 22 a 25 C La oxigenacin ha de aportar al menos un 80 % de saturacin, sin producir excesivo burbujeo. El pH debe mantenerse en torno de 7.5, porque a mayor pH menor produccin y a menor pH menor fertilidad. El tiempo entre dos generaciones es de aproximadamente tres das. En el centro de produccin acucola de Morro Sama se trabaja con dos especies de rotferos, Sama sp. y Chilea sp. Estos rotferos tienen una reproduccin partenognica (todas hembras). Las condiciones de cultivo deben ser ptimas, el cuerpo de agua del cultivo debe tener una concentracin salina de 25 ppm, 25C de temperatura, aireacin moderada, y 200 a 300 rotferos por mililitro. El inoculo se inicia con 200 rotferos por

mililitro y se alimentan estos con microalgas y con levadura. En la siguiente figura se observan las fases iniciales de cultivo de rotferos.

Figura N11: Inculos y siembra de rotferos en matraces de 400 mililitros.

Fuente: Propia (2010)

El cultivo de rotferos se da de un gramos por milln, en las instalaciones del centro acucola se cuenta con 5 cepas de rotferos siendo las mas importantes, las mencionadas anteriormente como Sama sp. y Chilea sp. Hay do tamaos de rotferos L y S, los L miden 200 micras y las S miden 300 micras. Es necesario ver el tamao de la boca de la larva de lenguado para ver si es que estos rotferos entran en ella o no. El rotfero es un alimento utilizado para todo tipo de larvas, es irremplazable, se reproducen cada 8 horas, estos suelen mantenerse en aproximadamente 10 rotferos por mililitro. Las cepas de 2 semanas se mantienen en recipientes de 50 mililitros. Al igual que en las microalgas este desarrollo va acompaado de un flujo de recipientes de diferentes tamaos. En la siguiente figura se muestran recipientes de 50 litros en los cuales se tiene un cultivo de rotferos en cantidades mayores. Figura N12: Tanques de cultivo de rotferos en grandes cantidades

Fuente: Propia (2010) Los rotferos se enriquecen con CELCO (0.1 gramos por milln de rotferos), estos se enriquecen cada 8 horas. Debido a la alimentacin es que se toman ciertas medidas aspticas para evitar contaminacin considerando que los cultivos son de tipo Axnico. 2.4. Cultivo de Lenguado (Paralichthys adspersus)

Los peces planos son despus de los salmnidos los que muestran las mejores perspectivas de desarrollo, dada su excelente calidad, alto precio y demanda en los mercados internacionales como Europa y Japn. El lenguado nativo Paralichthys adspersus, es un pez plano queconstituye una de las especies que sustentan la pesqueria artesanal en el Peru, no solo por su importancia comercial y por los tonelajes desembarcados ,sino tambien por la preferencia del consumidor debido a su exquisitez,alcanzando altos precios en el mercado local .Cit por M.Samame y J.Castaeda (1999) En 1984, en Chile se inician los primeros trabajos de investigacion de fecundacion artificial y mantenimiento de larvas de lenguado de ojos chicos (Paralichthys microps). Posteriormente en 1986, en el departamento de acuicutura de la universidad catolica de l norte , tambien se desarrollo un proyecto para determinar la factibilidad del cultivo de lenguado (P. microps, Paralichthys adspersus) La primera etapa del desarrollo del paquete tecnolgico es la produccin masiva de alevinos de lenguado, teniendo como base los trabajos preliminares realizados en el C.A.Morro Sama , para que de esa manera se asegure el abastecimiento de estos a la empresa privada ,brindando el soporte tcnico necesario para el surgimiento de esta actividad. MATERIALES Y EQUIPOS a) Semovientes Reproductores de lenguado nativo Paralichthys adspersus Rotiferos Brachionus plicatilis. Cistos de artemia Artemia sp Microalgas Nannochloris oculata e Isocrhysis galbana

b) Materiales de cultivo Tanques plancha metalica corrugada galvanizado cubierto con liner de PVC con un diametro de 4m con 6m3 de capacidad para los reproductores Tanques cilindroconicos, de fibra de vidrio de 500 y 1000 lt de capacidad para la incubacion y cultivo larvario respectivamente. Tanques rectangulares de fibra de vidrio color celeste (1.3x1.3x0.5m) con 1000L de capacidad pra la metamorfosis y alevinaje . c) Material complementario y de manejo Piedras difusoras Mangueras de 3/16 ,3/4 y 1 de dimetro. Tamices de (60,300,500 y 700) Baldes de plstico (4,8y 20 lt) Pipetas de plstico (1,5y10 ml)

d)

e)

f)

g)

Contadores manuales Termmetro digital y de canastilla Bandejas de plstico Canastas de plstico Ictiometro Plantillas de marcacin Placas petri de 5 y 10 ml Probetas de 50, 500 y 1000 ml Jarras de plstico de 1y 2 lt. Calcales de 15 x 12 cm Materiales de tratamiento del agua Filtros de discos mayor a 150 micras Filtros manga de 5 a 10 micras Batera de filtros cartuchos de 1.5 y 10 micras Material de limpieza ,desinfeccin y antibiticos Esponjas y paos absorbentes. Formalina al 37% Amonio cuaternario Leja Yodoforo Acido muritico Terramicina (Oxitetraciclina ) Material de enriquecimiento nutritivo de alimento vivo DHA selco Aqua Grow DHA Alimento micropeletizado de 300 a 1400 Equipos Estereoscopio Microscopio invertido Balanzas digitales de 100g y 6 kg Lmpara de luz ultra violeta Electrobomba de 1HP Blower 1 HP

MANEJO DE REPRODUCTORES a) Seleccin y acondicionamiento de reproductores Los criterios para la seleccin de reproductores son los siguientes Caractersticas biolgicas y morfolgicas externas (mayor peso , talla ,color natural, sin malformaciones,etc)

Fig.1 evaluacin de la talla del lenguado Aspectos sanitarios ( libre de enfermedades) Caractersticas de madurez gonadal para estabular lotes potenciales y lotes de reserva Se tendr en cuenta el sistema empleado por Peleteiro et. al (1993) para determinar la no utilidad de una hembra como reproductor considerando: no haber madurado el ltimo ao, no haber efectuado ninguna puesta en los dos ltimos aos y haber perdido peso desde el ltimo periodo de puesta. Para la seleccin de los machos se tendr en cuenta las mismas condiciones anteriores en funcin de los controles de fluidez seminal. Para el acondicionamiento de consideran los siguientes aspectos: El marcaje de reproductores; se efecta con plantillas de acero inoxidable empleando la tcnica de marcado criognico(quemadura en frio con N2 liquido) en el dorso del ejemplar .La marca permitir el seguimiento del desempeo de cada ejemplar durante el proceso. Estabulacin de los ejemplares en tanques circulares de 4 m de dimetro cubiertos con malla rachell (80% sombra ),con flujo continuo de agua marina de 0.8 L/s tirante de agua (0.5-0.6m) a densidades de 5.6Kg /m2, proporcin macho/ hembra de 1:1,bajo temperatura ambiente (13C a 20C)y exposicin de fotoperiodo natural(12-15 horas da) b) Control y Evaluacin de la Madurez Gonadal En los reproductores se realiza mensualmente el monitoreo del estado de maduracin gonadal y la valoracin de los productos sexuales ;tanto en machos como en hembras . El comportamiento de madurez sexual se da en dos temporadas definidas, la primavera, en otoo invierno de menor presencia de estadios avanzados y la

segunda primavera verano maduracin avanzad a.

con una mayor frecuencia de estadios de

La evaluacin de la madurez gonadal se realiza en base ala siguiente escala: Machos: la tala utilizada en Morro Sama valora subjetivamente la cantidad y viscosidad de la fluidez seminal que se extrae de cada uno de los ejemplares machos mediante suaves masajes en la zona abdominal. Escala de calificacin subjetiva: NF F/2 F FF No Fluye Fluyendo medio poca cantidad de semen y baja consistencia (diluido) Fluyente bueno repetidas fricciones (semen consistente ) Muy fluente a la primera friccin y en abundante cantidad( semen muy consistente )

Hembras: Se realiza utilizando la tabla de maduracin para turbo Scophthalmus maximus L.(Peleteiro, et.al 2001), la misma que ha sido modificada y adaptada para el lenguado nativo , que distingue los siguientes estadios de maduracin, en funcin a la percepcin de las caractersticas externas de las gnadas. ESTADIO I Se observa un pequeo abultamiento en el comienzo del lbulo inferior . ESTADIO II.- La dilatacin alcanza toda la longitud del lbulo inferior ESTADIO III Est completamente dilatado el lbulo superior , que en algunos casos puede llegar a ocupar toda la cavidad abdominal y se considera como el estadio de prepuesta. ESTADIO IV.-La hembra inicia la puesta. c) REGISTRO DE PARAMETROS FISICOS Y QUIMICOS Se efectuara diariamente la lectura y registro de la temperatura del agua con una frecuencia de cada dos horas en lo estanques de cultivo del plantel de reproductores .Se registran datos climatolgicos del cielo, viento y de las condiciones del mar. d) ALIMENTACION El suministro de alimento es ad libitum, con una frecuencia interdiaria (con tasas de alimentacin aproximadas entre 0.5- 1% del peso de la biomasa da). La alimentacin es mixta, empleando pescado fresco (Pejerrey, caballa, anchoveta, jurel, etc) y pasta hmeda preparada artesanalmente a base de pescado fresco, harina de pescado y aceite de pescado descritas en la tabal 1 y tabla 2.

Fuente: FONDEPES 2009

Fuente: FONDEPES 2009 Se aplica dietas diferenciadas en dos periodos una dieta de recuperacin (EneroAbril),suministrad despus del periodo de reproduccin y una dieta enriquecida (Mayo a Diciembre ) CON VITAMINAS B,C,E y cidos grasos altamente insaturados tipo omega 3y 6 suministrada tres meses antes del periodo de puestas. e) LIMPIEZA Se efecta quincenalmente preparndose previamente una solucin desinfectante en un recipiente aparte , ene le cual se sumerge los materiales que se van a usar dentro de los tanques de reproductores .luego se baja el nivel del agua y simultneamente con la ayuda de escobillones se remueve el material orgnico adherido a las paredes internas, piso del liner, de tal forma que pueda eliminarse restos de alimento no consumido , desechos del catabolismo por la salida central de estanque . f) ASPECTOS SANITARIOS Se realiza tratamiento preventivo bsicamente con baos estticos con formalina al 37% a una concentracin de 167 ppm por 30 minutos. DESOVE Y COLECTA DE HUEVOS a) Desove.El desove es espontneo, este ocurre durante las primeras horas de la noche (desde las 6pm) en los tanques de acondicionamiento, pudiendo

cada hembra desovar de 2 a 5 veces por temporada en intervalo de 2 a 15 das. El numero de huevos por desove es variable, pudiendo llegar a 180000 por kilo de hembra. b) Colecta.Los tanques cuentan para el propsito, con un sistema de recoleccin de huevos basado en el principio de rebose, aprovechando la flotabilidad de los huevos fecundados y no fecundados, el que los transporta con el agua al exterior del tanque y los deposita en un colector de malla de 500 micras. Los huevos son filtrados y lavados con agua de mar micro filtrada e irradiada con UV, a travs de tamices superpuestos de menor a mayor luz de malla con la finalidad de separar todo material orgnico extrao(excretas,algas,etc).

Fig.2 huevos embrionados de Paralichthys adspersus

Efectuar la separacin de los huevos viables y no viables (gametos). Los gametos no fecundados o lo huevos fecundados daados, al cabo de media hora decantan al fondo por su mayor densidad, debido a la precipitacin de sus protenas y los huevos viables flotan en la columna de agua del recipiente que los contiene. La separacin de los gametos inviables se logra aflojando la llave de desfogue en la parte inferior del tanque con apenas un chorro de agua, colectndose en un recipiente para su posterior evaluacin. Los huevos viables son desinfectados con una solucin germicida (yodofro soluble) a una concentracin de 100ppm por 15 minutos y trasladados al tanque de incubacin. INCUBACION, DESARROLLO EMBRIONARIO PRE-LARVA a) INCUBACION La incubacin de los huevos se realiza en tanques cilindro cnicos de500litros de capacidad con agua de mar filtrada a 1micra,irradiada con luz UV ,aireacin leve ,temperatura ambiente,con fotoperiodo natural y

circuito de agua cerrado. Los huevos son colocados a una densidad aproximada de 500 huevos /litro. Donde permanecen aproximadamente por 48 horas. Para determinar la eficiencia de los desoves se realiza una evaluacin cualitativa y cuantitativa a una muestra de los huevos y se califica segn los siguientes criterios. Porcentaje de viabilidad superior al 60% determinado por el nmero de huevos que muestra la primera divisin celular. Transparencia, tamao y esfericidad. Medicin del dimetro de los huevos ,en promedio registra 800micras. Si no cumplen con estas caractersticas, la puesta o el batch deben descartarse.

En la etapa de formacin del embrin en lo posible evitar los choques trmicos y mecnicos que afectan la viabilidad del embrin. La eclosin a 16C debe producirse entre las 40 y 54 horas posteriores a la fecundacin, y al finalizar se debe determinar el porcentaje de eclosin. b) PRE-LARVAS. Despus de la eclosin, las pre-larvas se mantienen en las mismas incubadoras para que continen su desarrollo. Aproximadamente 60 horas cuando ya sea posible observar la pigmentacin de los ojos y la apertura de la boca. La densidad promedio es de 400 pre-larvas/litro (referencial Morro Sama). Para la evaluacin de resultados de esta etapa se toma la siguiente informacin. Determinar la densidad pre-larval tomando una muestra de 140ml a las pocas horas de ocurrida la eclosin Evolucin del periodo de pigmentacin de ojos y apertura de la boca mediante la observacin de una muestra. Determinacin del porcentaje de supervivencia. Registro de los parmetros fsico, qumicos. Calculo del porcentaje de mortalidad.

CULTIVO LARVARIO a) Acondicionamiento de los Tanques de Cultivo El cultivo se realiza bajo el sistema semi-continuo y con la tcnica del agua verde (con inoculo de microalgas N.oculata 1x10^6cel/ml e I.galbana 0.8x10^-6cel/ml).

Se llenan los tanques de cultivo de 0.5 y1m3 con agua microfiltrada e irradiada con UV,arireacion moderada y se adiciona alimento vivo (B.plicatilis),segn dosis establecidas en la tabla 3 Siembra de larvas a una densidad de 25 larvas/litro.

b) Monitoreo y Evacuacin Larvaria Registro de horario, parmetros fsicos y qumicos de la unidad de cultivo Roteiferos: se tomaran dos muestras de 10ml del cultivo (maana y tarde) para determinar el consumo de alimento y reponer la cantidad necesaria de rotiferos al tanque para mantener la dosis alimentaria. Artemia: se tomaran tres muestras de 10 ml del cultivo (maana y tarde)para determinar el consumo de alimento y reponer la cantidad necesaria de aretemias al tanque para mantener la dosis alimentaria . Microalgas: se sacara una muestra (cada tres dias ) y se realizara el conteo del numero de celulas en la camara de Neubauer para determinar el volumen de microalgas requeridas para mantener la concentracion establecida. Supervivencia : cada dos dias se estimara el numero de larvas Por volumetria para determinar la tasa de supervivencia parcial y total calculado.

Crecimiento : se tomaran muestras vivas de cinco larvas cada tres dias ,registrando su talla para detrminar la tasa especifica de crecimiento(SGR) Mortalidad: calculo del porcentaje de mortalidad . c) Limpieza y recambio de agua En lo concerniente a limpieza existen dos tipos : la limpieza parcial,que es realizada diariamnete y la limpieza total, que es realizad con intervalos de 10 dias. Se procede de la siguiente manera : La limpieza parcial de los tanques de cultivo se lleva acabo en la maana y la tarde con esponjas de los tanquesy paos absorventes embebidos en una solucion de amonio cuaternario (20ppm), para limpiar las paredes internas del tanque , luego de bajar el nivel del agua. La limpieza total del estanque de cultivo se lleva a cabo con una solucion de yodoforo soluble(200ppm). Eliminacion de material organico extrao mediante sifoneo del fondo del estanque ,previo movimiento del agua en forma de remolino.

 Los recambios de agua se realizan apartir del cuarto dia de cultivo ,dos veces al dia efectuando reemplazo desde el 20 a 82% del volumen por dia . d) Alimentacion: La alimentacion de las larvas es a base de : Rotiferos: enriquecidos con acidos grasos insaturados (DHA, EPA y ARA), en unmedio latamente concentrado durante 6hotras. La racion suministrada a las larvas sera suficiente para mantener una densidad de de 5-10 roteiferos /ml en el tanque, la frecuencia de alimentacion sera 2 veces al dia vease tabla 3.

Artemia: enriquecidos con DHAson suministrados a partir del decimo dia de cultivo larvario inicalmente con nauplio Ao y posteriormente con metanauplios Al, la dosis y ritmo alimenticio se describe en la tabla 3. .

Metamorfosis y weaning a) Iniciacin. La metamorfosis de la larva se inicia entre los das 28y 35 despus de producida la eclosin y dura aproximadamente 10 das. Se evidencia progresivos cambios, con migracin de ojo izquierdo en direccin anterodorsal y desarrollo de las espinas de la aleta caudal, anal y dorsal, hasta lograr la simetra caracterstica de la especie.

Fig.3 metamorfosis del lenguado

b) Limpieza Se efectuara de la siguiente manera La limpieza parcial de los tanques de cultivo se lleva a cabo en la maana y en la tarde con esponjas y paos absorbentes embebidos en una solucin de amonio cuaternario (20ppm), para limpiar paredes internas del tanque, luego de bajar el nivel del agua. La limpieza total del cultivo, se llevara a cabo cada cinco das con solucin de yodofro soluble (200ppm). Eliminacion de material organico extrao mediante sifoneo del fondo del estanque ,previo movimiento del agua en forma de remolino. Los recambios de agua son de 80% del volumen por dia ,se realizan con manqueras de plastco y se filtran pasando a traves de tamices de 700 micras. c) Alimentacin.Se inicia de la siguiente forma: En la etapa de weaning, ocurre el cambio de alimentacin; gradual del alimento vivo al inerte y se inicia desde el da 40 al 50 de cultivo larval.

Despus del da 50, los ejemplares tienen que estar adaptados totalmente al alimento inerte. Cultivo de Alevines a) Cosecha y siembra de alevines Se lleva a cabo las siguientes actividades: Llenado de los tanques rectangulares de fibra de vidrio color celeste con 1000 lt , de capacidad con agua microfiltrada e irradiada con UV. Suministrndoles una aireacin moderada. Siembra de alevines a una densidad de carga de 1.2 kg/m2 (aproximadamente 500alevines/m2). c) Monitoreo y evaluacin de alevines Registro diario de parmetros fsicos y qumicos de la unidad de cultivo Supervivencia cada semana se estimara el numerode alevines para determinar la tasa de supervivencia parcial y total. Crecimiento : se tomaran muestras vivas de cinco larvas cada semana ,registrando su talla para determinar la tasa instantanea de crecimiento(K) y la tasa de crecimiento especifico (SGR). Mortalidad: calculo del porcentaje de mortalidad . d) Limpieza y recambio de agua En lo concerniente a limpieza existen dos tipos : la limpieza parcial,que es realizada diariamnete y la limpieza total, que es realizad con intervalos de 10 dias. Se procede de la siguiente manera : La limpieza parcial de los tanques de cultivo se lleva acabo en la maana y la tarde con esponjas de los tanquesy paos absorventes embebidos en una solucion de amonio cuaternario (20ppm), para limpiar las paredes internas del tanque , luego de bajar el nivel del agua. La limpieza total del estanque de cultivo se lleva a cabo con una solucion de yodoforo soluble(200ppm). Eliminacion de material organico extrao mediante sifoneo del fondo del estanque ,previo movimiento del agua en forma de remolino. Los recambios de agua se realizan apartir del cuarto dia de cultivo ,dos veces al dia efectuando reemplazo desde el 20 a 80% del volumen por dia . e) Seleccin y Estabulacion por tallas Se realizaran dos tipos de seleccin parcial y total, dependiendo del estadio de desarrollo , y se aplicara de la siguiente forma: La seleccin parcial s e realizara cada dos dias, afin de retrirar los ejemplares menos desarrollados o con malformaciones.

 La seleccin total ,o clasificacionpor tallas se realizara mensualmente , separando los ejemplares muy grandes medianos y pequeos que so estabulados en los tanques de cultivo correspondiemtes. f) Alimentacion La aliumentacion de los alevinos se realizara con alimento micropelletizado, con rangos de 300 a 1300 micras de diametro, con tasa de alimentacion decreciente de 5%, 4% y 3% y sumistro diario

Ventajas a) La produccin de alevines bajo condiciones controladas en hatchery permite asegurar el abastecimiento masivo y constante de estos as como establecer programas de mejoramiento de progenie mediante selecciones. b) Lograr la determinacin del comportamiento individualizado de la maduracin gonadal y la calidad de desove y huevos por reproductor y batch. c) conseguir supervivencias elevadas por encima del 5% en los cultivos larvarios desde la etapa de pre-larvas hasta alevines.

2.5. Cultivo de Abaln Rojo de California (Haliotis rufescens) (ADJUNTO) 3. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Los cultivos tanto de Artemia como Rotferos necesitan de nutrientes algo caros, como por ejemplo los cidos grasos que contienen DHA y EPA son obtenidos a travs del CELCO, lo mismo sucede para los Rotferos, que son enriquecidos con CELCO, una opcin algo mas barata es la utilizacin de microalgas para la alimentacin y nutricin de estos. Debido a que estas ya contienen de por si estos cidos grasos adems de dar ciertas ventajas al medio (Filtracin y generacin de oxigeno).

4. BIBLIOGRAFIA Wikipedia 2010. Le enciclopedia en Linea. Van Wyk, Peter (2005). Nutrition and Feeding of Litopenaeus vannamei in Intensive Culture Systems. Martnez Crdova Rafael (1993). Camaronicultura, Bases tcnicas y

Cientficas para el cultivo de camarones Peneidos. FAO (2010), El Langostino. Programa de informacin de especies acuticas de La Organizacin de las naciones unidas para la Agricultura y la Alimentacin.