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LAS EHRLICHIOSIS EN EL PERRO: PRESENTE Y FUTURO Sainz *, Inmaculada AmusateguiAngel Sainz *, Inmaculada Amusategui *, Fernando Rodrguez *, Miguel A.

Tesouro** * Dpto. Patologa Animal II. Facultad de Veterinaria de Madrid ** Dpto. Patologa Animal (Medicina Veterinaria). Facultad de Veterinaria de Len En este artculo nos referiremos fundamentalmente a las especies de Ehrlichia que por el momento tienen una mayor importancia real en el perro: E. canis y E. platys. No obstante, al final del artculo abordaremos otras especies de Ehrlichia capaces de infectar al perro y de producirle cuadro clnico, a las que se las est dando bastante importancia en estos ltimos aos. Estas especies son E.ewingii, E.equi, E.risticii, E.chaffeensis y el agente de la ehrlichiosis granuloctica humana (HGE). *, Fernando Rodrguez *, Miguel A. Tesouro** * Dpto. Patologa Animal II. Facultad de Veterinaria de Madrid ** Dpto. Patologa Animal (Medicina Veterinaria). Facultad de Veterinaria de Len En este artculo nos referiremos fundamentalmente a las especies de Ehrlichia que por el momento tienen una mayor importancia real en el perro: E. canis y E. platys. No obstante, al final del artculo abordaremos otras especies de Ehrlichia capaces de infectar al perro y de producirle cuadro clnico, a las que se las est dando bastante importancia en estos ltimos aos. Estas especies son E.ewingii, E.equi, E.risticii, E.chaffeensis y el agente de la ehrlichiosis granuloctica humana (HGE). Etiologa La ehrlichiosis canina es una enfermedad rickettsial causada por Ehrlichia spp. y transmitida por garrapatas. Todas las Ehrlichia spp. son microorganismos intracelulares que infectan leucocitos salvo Ehrlichia platys que se encuentra en plaquetas. Son varias las especies de Ehrlichia capaces de infectar al perro, aunque desde un punto de vista clnico es Ehrlichia canis la que ms importancia tiene. E.canis infecta el citoplasma de los linfocitos y los monocitos sanguneos de los perros afectados. Dentro de su ciclo biolgico se pueden distinguir diferentes formas: cuerpos elementales, que tienen un dimetro de 0,5-0,9 ( y se dividen por fisin binaria para dar lugar a los cuerpos iniciales, de 1,5-2,5 (, que a su vez se dividen producindose las tpicas mrulas (formadas incluso por ms de 40 cuerpos elementales) que pueden llegar a tener un tamao de 4-5 (. Transmisin En general, Ehrlichia spp. se transmite por la picadura de garrapatas. En concreto, en el caso de E.canis existe un nico vector conocido: Rhipicephalus sanguineus. Esta garrapata, al alimentarse de un perro con ehrlichiosis, puede ingerir glbulos blancos con Ehrlichia en su citoplasma. Este hecho es mucho ms frecuente si la garrapata se fija a perros en fase aguda de la enfermedad, ya que es en esta fase cuando se encuentran un mayor nmero de leucocitos infectados en sangre (Hibler et al, 1986). El potencial de la garrapata como vector y reservorio de esta enfermedad es muy alto. De hecho, una vez que la garrapata ha ingerido sangre, sta puede transmitir la infeccin hasta al menos 155 das despus. Las secreciones de las glndulas salivares de la garrapata constituyen la fuente de transmisin para el perro. Estas secreciones y la inflamacin causada por la picadura parecen favorecer la llegada de leucocitos a ese lugar, facilitndose la entrada de Ehrlichia spp. en los mismos. La transmisin de E.canis en la garrapata es de tipo transestadial, es decir, de larva a ninfa y de ninfa a adulto, sin que se haya podido demostrar hasta el momento la existencia de transmisin transovrica (de una generacin de garrapatas a la siguiente). Aunque no es la forma natural de transmisin de la enfermedad, se debe considerar que el empleo de sangres de perros donantes positivos a ehrlichiosis para ser transfundidas puede provocar su transmisin a los perros receptores. Existe un estudio que indica que la transfusin con sangre de perros con infeccin crnica, que haban contrado la infeccin 5 aos antes, provoc enfermedad a los perros receptores. Por ello, es recomendable confirmar que los perros empleados como donantes son negativos a ehrlichiosis. Patogenia El periodo de incubacin de la enfermedad es de 8 a 20 das. Clsicamente se describen 3 fases de la enfermedad (aguda, subclnica y crnica) aunque en la prctica clnica no se diferencian fcilmente. Una vez que E.canis ha entrado en clulas mononucleares, se disemina por sangre o linfa, coincidiendo con la fase aguda de la enfermedad. As E.canis puede alcanzar las clulas del sistema mononuclear-fagocitario del hgado, bazo y ganglios linfticos en los que causa una hiperplasia que en la clnica se suele traducir en un aumento en el tamao de estos rganos. Adems, E.canis se puede diseminar por un gran nmero de rganos (pulmn, riones, meninges) en los que suele provocar lesiones inflamatorias y vasculitis, fundamentalmente de origen inmunomediado. En algunos casos, el cuadro puede desencadenar una coagulacin intravascular diseminada que puede acabar con la vida del animal.

Como consecuencia de la infeccin se produce una respuesta inmunitaria humoral importante que a menudo no es capaz de eliminar el agente patgeno. Este fenmeno suele presentarse en la fase subclnica de la enfermedad en la que slo se detectan alteraciones en la analtica unidos a ttulos de anticuerpos positivos. Es especialmente frecuente la presencia de trombocitopenia y trombocitopatas motivadas fundamentalmente por procesos inmunomediados. Por la misma razn, en ocasiones se puede presentar leucopenia y anemia (sta ltima tambin debida en ocasiones a la presencia de cuadros hemorrgicos). Algunos animales con buena respuesta celular pueden superar la infeccin sin necesidad de ser tratados; sin embargo, en la mayora de los casos la enfermedad progresa a una fase crnica cuya severidad es variable. Esta severidad depende fundamentalmente del grado de afeccin de algunos rganos vitales. En este sentido, los casos con insuficiencia renal no suelen responder demasiado bien al tratamiento. Igualmente en ocasiones la mdula sea se puede afectar hasta el extremo de presentarse una aplasia medular que produce un cuadro de pancitopenia que suele desembocar en la muerte del animal. En principio no hay predisposicin de raza, edad o sexo a presentar esta enfermedad, considerndose que la respuesta inmune de cada paciente juega un papel importante en la patogenia. En cualquier caso, se ha descrito que tanto el Pastor Alemn como el Springel Spaniel pueden presentar cuadros clnicos ms graves, si bien este extremo no ha podido ser observado en nuestra experiencia clnica. . Sintomatologa La sintomatologa de la ehrlichiosis canina es muy variada. Especialmente durante la fase aguda la sintomatologa suele ser poco especfica por lo que el diagnstico no siempre es sencillo. Si no se diagnostica la enfermedad en fase aguda, sta progresa a la forma subclnica en la que slo se encuentran alteraciones laboratoriales en perros asintomticos. El cuadro clnico que ms a menudo encontramos es bastante inespecfico: fiebre, prdida de peso, apata y anorexia. Alrededor del 40% de los casos presentan linfadenomegalia, si bien sta no siempre es generalizada. Tambin se puede encontrar hepato y esplenomegalia. Tambin se consideran signos tpicos de la enfermedad los cuadros hemorrgicos, aunque stos slo aparecen en aproximadamente el 35% de los perros con ehrlichiosis. De todos los signos hemorrgicos observados (petequias y equimosis en piel y mucosas, hematuria, melena, hemorragias retinianas o conjuntivales, etc.) la epistaxis es el ms frecuente. Tambin podemos encontrar signos respiratorios (exudado nasal, tos) debido a la existencia de neumona intersticial. Son muchos los sntomas oftalmolgicos encontrados en perros infectados por Ehrlichia, destacando especialmente la presencia de uveitis anterior (habitualmente bilateral) y diferentes retinopatas. Ocasionalmente aparecen signos locomotores, especialmente cojeras intermitentes, debido a la existencia de poliartritis que suele ser causada por un depsito de inmunocomplejos a nivel articular. En estos casos se pueden detectar cuerpos de inclusin de Ehrlichia en lquido sinovial. Tambin se han descrito cuadros de polimiositis asociados a ehrlichiosis. Los signos neurolgicos que se han relacionado con la ehrlichiosis son muy variados y pueden estar causados por meningitis debida a fenmenos inflamatorios o por hemorragias en sistema nervioso. Ante un cuadro agudo de fiebre, ataxia, estupor y sndrome de neurona motora superior o inferior, se debe incluir la ehrlichiosis en el listado de diagnsticos diferenciales. Estos animales suelen presentar una rpida respuesta al tratamiento, recuperando por completo la funcionalidad neurolgica. Tambin se puede encontrar en perros con ehrlichiosis una insuficiencia renal debido a glomerulonefritis inmunomediada parecida a la que aparece en leishmaniosis.La sintomatologa cutnea asociada a esta enfermedad es fundamentalmente de tipo hemorrgico. No obstante, tambin se han descrito cuadros similares a los encontrados en reacciones de hipersensibilidad. Del mismo modo, se ha sugerido recientemente la asociacin de la ehrlichiosis con la pioderma profunda del Pastor Alemn. Por ltimo, la infertilidad en hembras y la presencia de abortos tambin se ha relacionado ocasionalmente con ehrlichiosis. Analtica sangunea y de orina La alteracin ms tpicamente detectada en perros con ehrlichiosis es la trombocitopenia que aparece aproximadamente en el 80% de los animales. Tambin encontramos anemia (que, a menudo, es no regenerativa) y, con menos frecuencia, leucopenia. Aunque a la ehrlichiosis canina se la denomin en el pasado pancitopenia tropical canina, tan slo el 15% de los perros enfermos presentan un descenso en el recuento de las 3 lneas celulares sanguneas. En relacin con la bioqumica sangunea, es habitual encontrar hiperproteinemia debida a un aumento de las beta y gamma-globulinas, normalmente policlonal, aunque en ocasiones se detectan en el proteinograma picos monoclonales. Tambin se suele presentar hipoalbuminemia asociada a proteinuria debido a glomerulonefritis. Ocasionalmente, la analtica sangunea puede poner de manifiesto alteraciones motivadas por la existencia de una insuficiencia renal y/o heptica. En el urianlisis, las dos alteraciones ms frecuentes son proteinuria y hematuria. usin compatible con Ehrlichia platys en el interior de una plaqueta en frotis sanguneo.

Inmunofluorescencia indirecta frente a E.canis (se observan formas de Ehrlichia fluorescentes en el citoplasma de clulas infectadas) Diagnstico A) Diagnstico etiolgico. El diagnstico se puede realizar observando mrulas o cuerpos de inclusin de E.canis en el citoplasma de linfocitos y monocitos en un frotis sanguneo teido con las tcnicas habituales (May-Grnwald-Giemsa(, Diff-Quick(, etc.). Desgraciadamente, E.canis aparece transitoriamente en la sangre y, especialmente, durante la fase aguda por lo que son muchos los perros con ehrlichiosis en los que no encontramos estos cuerpos de inclusin. Tambin se puede intentar establecer un diagnstico etiolgico a partir de muestras de mdula sea, ganglio, etc. B) Inmunodiagnstico. Debido a la baja sensibilidad del diagnstico etiolgico al que nos acabamos de referir, las tcnicas serolgicas y, en especial, la inmunofluorescencia indirecta (IFI) son las ms empleadas en la prctica clnica. La deteccin de un ttulo de anticuerpos positivo en un perro con signos clnicos o alteraciones en la analtica compatibles con ehrlichiosis permite realizar un diagnstico de la enfermedad. Las IgG tardan en aparecer entre 14 y 21 das despus de la infeccin por lo que en fases agudas podemos encontrar ttulos por debajo del umbral de positividad. En estos casos si se quiere confirmar el diagnstico se recomienda tomar una segunda muestra para poner de manifiesto la seroconversin, incluso tras haber instaurado un tratamiento especfico. En la actualidad existen en el mercado algunos tests comerciales de diagnstico de ehrlichiosis basados en la tcnica de ELISA. Aunque no son tcnicas habitualmente accesibles para el clnico, tanto el Western-blot como la PCR, empleados en laboratorios especializados, son especialmente tiles en casos dudosos y a la hora de distinguir infecciones por diferentes especies de Ehrlichia. C) Diagnstico diferencial. Como ya se ha comentado, la gran variedad de signos clnicos con los que puede cursar la ehrlichiosis hace que el diagnstico diferencial deba incluir muy variadas patologas. No obstante, la que con ms frecuencia se puede confundir con ehrlichiosis en la zona centro de nuestro pas es la leishmaniosis canina debido a la similitud de muchos de sus sntomas (hemorragias, apata, linfadenopata, prdida de peso, uveitis, etc.), especialmente en animales con hiperproteinemia. Tambin se deben descartar otras enfermedades transmitidas por garrapatas como la babesiosis o la hepatozoonosis, por la similitud tanto de sus vectores como, en ocasiones, de su sintomatologa. Aunque se trata de patologas mucho menos frecuentes que la ehrlichiosis, sta tambin debe diferenciarse de lupus eritematoso sistmico, mieloma, leucemia linfoctica crnica, leptospirosis, etc. D) Concurrencias con otras patologas. De cara al diagnstico, es interesante conocer que con cierta frecuencia se detectan otros procesos que se presentan de un modo concurrente a la ehrlichiosis en el mismo perro. En Madrid la patologa que ms a menudo aparece junto a la ehrlichiosis es la leishmaniosis. En perros diagnosticados de leishmaniosis y tratados especficamente frente a ella, cuando la respuesta teraputica no es demasiado buena y el proteinograma no termina de normalizarse a pesar de que el ttulo de anticuerpos frente a Leishmania infantum desciende, se debe descartar la presencia de ehrlichiosis. La elevada frecuencia de presentacin de esta concurrencia hace que, en nuestro caso, en todos aquellos perros en los que diagnosticamos leishmaniosis hagamos sistemticamente una IFI para el diagnstico de ehrlichiosis. Debido a la coincidencia de vectores, tambin se pueden encontrar perros con ehrlichiosis y babesiosis (especialmente en el Norte de Espaa) y/o hepatozoonosis. Tambin hemos diagnosticado varios casos de concurrencia de ehrlichiosis canina y moquillo, posiblemente debido a la inmunodepresin con que pueden cursar ambos procesos. Adems se pueden diagnosticar infecciones simultneas por varias especies de Ehrlichia (especialmente, E.canis y E.platys). Tratamiento Los dos frmacos ms empleados en el tratamiento de la ehrlichiosis canina son la doxiciclina y el dipropionato de imidocarb. La doxiciclina se suele emplear a dosis de 10 mg/kg/24 horas durante 28 das. Aunque en la bibliografa consultada aparecen muy variados protocolos de tratamiento con diferentes dosificaciones y duraciones, en nuestra experiencia, protocolos de tratamiento ms cortos pueden dar lugar a una mejora inicial del paciente, pero los sntomas en ocasiones vuelven a aparecer. El dipropionato de imidocarb se puede emplear, administrando 2 inyecciones de 5 mg/kg va SC, con un intervalo de 2 semanas entre ambas. El dipropionato de imidocarb est especialmente indicado en perros que tambin presentan babesiosis. Con relativa frecuencia se presentan efectos secundarios como disnea, sialorrea, diarrea, exudado nasal y taquicardia, que parecen ser debidos a un efecto anticolinesterasa del frmaco. Estos signos remiten tras la administracin de atropina. En la prctica clnica, en aquellos casos que presentan un cuadro severo, frecuentemente se instaura un tratamiento combinado a base de doxiciclina y de imidocarb. En nuestra experiencia no hemos observado diferencias significativas al comparar la eficacia teraputica observada al tratar casos slo con doxiciclina, slo con imidocarb y con ambos frmacos a la vez. El pronstico de la mayora de los casos es muy bueno, respondiendo favorablemente al tratamiento en 24-72 horas. La mayora de los casos que no responden presentan insuficiencia renal y/o aplasia medular severa. La mejora clnica precede en el tiempo a la normalizacin de la analtica. Los parmetros que ms rpidamente se normalizan son los recuentos de eritrocitos y de plaquetas. El proteinograma tarda en normalizarse entre 3 y 9 meses, siendo empleado rutinariamente para confirmar la presencia de una buena respuesta al tratamiento. Muchos perros

tratados, especialmente aquellos que presentan ttulos altos, experimentan ligeros descensos en el ttulo de anticuerpos tras el tratamiento pero continan siendo positivos durante largos periodos de tiempo (incluso varios aos) sin ninguna otra alteracin clnica ni laboratorial. An queda por determinar el significado real de esta persistencia en el ttulo de anticuerpos en algunos casos. Recientemente se ha propuesto el uso de enrofloxacina para el tratamiento de la ehrlichiosis canina a dosis de 5 mg/kg cada 24 horas durante 15 das. Sin embargo, otros ensayos han mostrado la falta de respuesta de perros con ehrlichiosis a este frmaco por lo que son necesarios ms estudios clnicos que aclaren la efectividad real de este producto en este proceso. En muchos casos no suele ser necesario instaurar un tratamiento de apoyo y slo con la terapia especifica se suele conseguir una buena respuesta. No obstante, en casos con anemia severa, estn indicadas las transfusiones sanguneas. Debido a la dificultad con la que, a veces, nos encontramos para diferenciar la ehrlichiosis de otras anemias y/o trombocitopenias inmunomediadas o autoinmunes, en la prctica inicialmente se puede instaurar un tratamiento combinado con corticoides, a la espera de los resultados serolgicos. Profilaxis La principal medida profilctica para evitar la infeccin debe estar dirigida al control de garrapatas, tanto en el animal como en el medio en el que se encuentre. Para ello, existen en el mercado mltiples productos para su empleo en el perro. En otras enfermedades transmitidas por garrapatas, parece necesario para que se produzca la transmisin que la garrapata est fijada durante al menos 24 horas, por lo que, en el caso de que las medidas comentadas no funcionen, se debe intentar la retirada precoz de las garrapatas. Algunos autores han sealado la posibilidad de emplear tetraciclinas a dosis bajas en zonas endmicas, con la controversia que estas medidas ocasionan debido a la posibilidad de creacin de resistencias. Las medidas profilcticas tambin deben aplicarse a aquellos animales diagnosticados de ehrlichiosis debido al riesgo de reinfecciones que estos animales tienen, ya que normalmente el medio en el que residen contina siendo el mismo. Otras especies de Ehrlichia Infeccin por Ehrlichia platys Ehrlichia platys infecta las plaquetas del perro causando en l una enfermedad que se denomina trombocitopenia cclica infecciosa. Los principales sntomas asociados con esta infeccin son fiebre y trombocitopenia cclicas, si bien existen bastantes dudas acerca del poder patgeno real de esta especie. Esta enfermedad se diagnostic inicialmente en 1978 en EEUU, aunque recientemente se ha descrito la presencia de un agente similar en distintos pases europeos, incluido el nuestro. En este sentido recientemente hemos confirmado por tcnicas serolgicas (IFI y Wester-blot) la presencia de anticuerpos frente a E.platys en perros de Madrid que presentaban mrulas intraplaquetarias. Algunos de estos perros no fueron tratados sin que se detectaran signos de enfermedad compatibles con ehrlichiosis. El diagnstico se basa en la observacin de mrulas intraplaquetarias en frotis sanguneos o en la deteccin de anticuerpos por tcnicas serolgicas (especialmente IFI). El tratamiento empleado es doxiciclina a las dosis recomendadas para la infeccin por E.canis. E.risticii Esta especie de Ehrlichia, que habitualmente infecta a caballos, tambin ha sido encontrada en Estados Unidos en perros con cuadro clnico compatible con ehrlichiosis pero negativos a E.canis. La sintomatologa tambin es parecida a la que se suele ver en perros infectados por E.canis, destacando la existencia de fiebre, apata, poliartritis y signos neurolgicos, hemorragias y vmitos. En la analtica sangunea se puede encontrar trombocitopenia, anemia y leucopenia. El tratamiento recomendado es doxiciclina (10 mg/kg/24 horas/28 das) si bien en algunos casos la respuesta teraputica no ha sido buena. Quizs algunos perros con cuadro de ehrlichiosis, sin un diagnstico exacto y negativos a E.canis, podran estar infectados por E.risticii. En este sentido, hemos encontrado recientemente algunos sueros de perros de la Comunidad de Madrid negativos a E.canis y positivos nicamente a E.risticii tanto por IFI como por Western-blot. En cualquier caso son necesarios ms estudios que investiguen si realmente esta infeccin est asociada a la presentacin de cuadro clnico en perros de nuestro pas. Ehrlichia granuloctica Son varias las especies de Ehrlichia (E.equi, E.ewingii, E.phagocytophila) que, en lugar de infectar linfocitos y monocitos caninos (como hace E.canis), infectan los leucocitos granulocticos, es decir, neutrfilos, eosinfilos y basfilos. La especie a la que se est otorgando una mayor importancia en los ltimos aos es la llamada Ehrlichia granuloctica humana, aislada tanto de perros en distintos pases del norte y centro de Europa como de personas. Al igual que ocurre con E.risticii, el cuadro clnico tambin se parece al de la ehrlichiosis clsica, destacando la presencia de sintomatologa inespecfica (fiebre, apata y linfadenomegalia). En la analtica sangunea destaca la presentacin de trombocitopenia y linfopenia. E. ewingii suele cursar con sintomatologa articular. El tratamiento de todas estas Ehrlichia spp. es a base de doxiciclina. En Espaa el nico hallazgo al respecto es la deteccin de cuerpos de inclusin compatibles con Ehrlichia spp. en el interior de neutrfilos y eosinfilos, sin llegar a conocerse cul es el agente causal.

En resumen, actualmente es poca la informacin disponible acerca de todas estas especies de Ehrlichia en perros de nuestro pas. Al mismo tiempo, algunos clnicos de Galicia vienen observando mrulas compatibles con Ehrlichia en el citoplasma de linfocitos y monocitos de perros con cuadro clnico de ehrlichiosis y con respuesta favorable al tratamiento especfico para ehrlichiosis. Algunos de estos casos han sido analizados por IFI y PCR frente a distintas especies de Ehrlichia (E..canis, E.risticii, E.ewingii), con resultados negativos, siendo en la actualidad desconocida la etiologa exacta de este proceso. No sera extrao que en un breve espacio de tiempo se encontraran en Espaa especies de Ehrlichia que hasta el momento no han sido descritas en nuestro pas. Referencias Anderson BE, Dawson JE, Jones DC, Wilson KH. 1991. Ehrlichia chaffeensis, a new specie associated with human ehrlichiosis. J. Clin. Microbiol., 29, 2838-2842. Bartsch RC, Greene RT. 1996. Post-therapy antibody titers in dogs with ehrlichiosis: follow-up study on 68 patients treated primarily with tetracycline and/or doxycycline. J. Vet. Intern. Med., 10, 271-274. Breitschwerdt EB, Hegarty BC, Hancock SI. 1998. Sequential evaluation of dogs naturally infected with Ehrlichia canis, Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia equi, Ehrlichia ewingii, or Bartonella vinsonii. J. Clin. Microbiol., 36, 2645-2651. Breitschwerdt EB, Hegarty BC, Hancock SI. 1998. Doxycycline hyclate treatment of experimental canine ehrlichiosis followed by challenge inoculation with two Ehrlichia canis strains. Antimicrob. Agents Chemother., 42, 362-368. Font J, Cair J, Calls A. Ehrlichiosis canina. Clnica Veterinaria de Pequeos Animales, 8, 141-148. Frank JR, Breitschwerdt EB. 1999. A retrospective study of ehrlichiosis in 62 dogs from North Carolina and Virginia. J. Vet. Intern. Med., 13, 194-201. Greene RT. 1995. Canine ehrlichiosis: clinical implications for humoral factors. En: Bonagura JD, ed. Kirks Current Veterinary Therapy XII. Small Animal Practice. WB Saunders: 376-383. Harvey JW. 1998. Canine thrombocytic ehrlichiosis. En: Greene CG, ed. Infectious diseases of the dog and cat (2nd ed.). WB Saunders: 147-149. Johansson KE, Pettersson B, Uhln M, Gunnarsson A, Malmqvist M, Olsson E. 1995. Identification of the causative agent of granulocytic ehrlichiosis in swedish dogs and horses by direct solid phase sequencing of PCR products from the 16S rRNA gene. Res. Vet. Science, 58, 109-112. Kakoma I, Hansen RD, Anderson BE, Hanley TA, Sims KG, Liu L, Bellamy C, Long MT, Baek BK. 1994. Cultural, molecular and immunological characterization of the etiologic agent for atypical canine ehrlichiosis. J. Clin. Microbiol., 32, 170-175. Kontos VI, Athanasiou LV. 1998. Use of enrofloxacin in the treatment of acute canine ehrlichiosis. Canine Practice, 23, 1014. Neer TM. 1998. Canine monocytic and granulocytic ehrlichiosis. En: Greene CG, ed. Infectious diseases of the dog and cat (2nd ed.). WB Saunders: 139-147. Sainz A, Amusategui I, Tesouro MA. 1999. Ehrlichia platys infection and disease in dogs in Spain. J. Vet. Diagn. Invest., 11, 382-384. Sainz A, Tesouro MA, Amusategui I, Rodrguez F, Mazzucchelli F, Rodrguez M. 2000. Prospective comparative study of 3 treatment protocols using doxycycline or imidocarb dipropionate in dogs with naturally ocurring ehrlichiosis. J. Vet. Intern. Med., 14, 134-139. Sainz A, Kim CH, Tesouro MA, Hansen R, Amusategui I, Koo HY, Kakoma I. 1999. Serological evidence of exposure to Ehrlichia risticii in dogs in Spain. Proceedings 5th Conference Society for Tropical Veterinary Medicine. Florida (USA). Tesouro MA, Amusategui I, Rodrguez F, Alonso A, Mir G, Sainz A. Deteccin de anticuerpos frente a E.canis en sangre de gatos de la zona centro de Espaa (Madrid). Proceedings IV SISIET. Setbal (Portugal). Woody BJ, Hoskins JD. 1991. Ehrlichial diseases of dogs. Vet. Clin. N. Am., 21, 75-98.

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