UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARABA CENTRO DE CINCIAS DA SADE DEPARTAMENTO DE CINCIAS DA SADE DISCIPLINA: FARMACOGNOSIA II

Biossntese de Produtos Naturais

PROFESSOR: JOS MARIA BARBOSA FILHO

sumrio
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. Conceitos Era das micas (genmica, transcriptmica, protemica, metabolmica) Entendendo a clula em nvel molecular Inovao na genmica Anlise metabolmica utilizando uma planta Diferenas entre metabolismo primrio e metabolismo secundrio Funes e importncia dos metablitos secundrios O bsico da organizao celular Fotossntese Metabolismo primrio (Carboidratos-Ciclo de Calvin) Metabolismo secundrio 11.1. Via acetato (cidos graxos, prostaglandinas, acetogeninas, etc) 11.2. Via mevalonato (Monoterpenos, sesquiter., diterpen. e triterpenos) 11.3. Via chiquimato (Fenilpropanides, lignides, cumarinas, alcal.etc) 11.4. Via biossntese mista (Flavonides, antraquinonas, outros alcalides, etc)

CONCEITOS Qual a diferena entre Biossntese, Biognese e Sntese Biomimtica?

Biossntese = a sntese dos constituintes qumicos, realizada pelo prprio organismo ou pela prpria clula. (Grego, Bios = vida, sn = reunio, ao conjunta, thesis = proposio formulada). Biognese = uma hiptese (no testada em laboratrio) que tenta explicar a formao dos metablitos secundrios nas plantas. Sntese biomimtica = So mtodos qumicos de sntese, no laboratrio, que testam a validade mecanstica de uma rota biogentica hipottica.
Ex.:
MeO Metiltiramina NH2

..

NH MeO O OH MeOH Riparina II MeO O OH

Salicilato de metila

Barbosa-Filho et al., Synthesis of several new phenylethylamides of substituted benzoic acids. Qumica 3 Nova, v. 13, n. 4, p. 332-334, 1990.

NOVOS CONCEITOS
Antes da era da bioinformtica, somente duas maneiras de fazer a experimentao em biologia eram disponveis: utilizando um organismo vivo (in vivo) ou em um sistema artificial (in vitro). Somado ao desenvolvimento de equipamentos poderosos para a miniaturizao e automao da aquisio de dados biolgicos em larga escala, deu campo para o surgimento de uma lista de novos termos, que no para de crescer. Estamos entrando na era das micas.
Genmica DNA Transcriptmica RNA Protemica Protenas Metabolmica Metablitos Prim./Secund.

Entendendo a clula a nvel molecular

A informao codificada do DNA transcrita em uma molcula de RNA mensageiro que traduzida em uma molcula de protena que, quando exercendo um papel estrutural, ir catalizar uma ou mais reaes qumicas dentro e/ou fora da clula, sendo portanto responsvel pela transformao de pequenas molculas qumicas chamadas de metablitos. Os metablitos, por sua vez, regulam a atividade das proteinas, o processo transcrio e traduo, alm de servirem de substratos para modificao e sntese das protenas e lipdios, e sntese de DNA e RNA. Portanto os metablitos so os produtos finais do 5 metabolismo celular

Biossntese de Produtos Naturais

Metabolmica = uma abordagem global que tem como objeto de estudo o conjunto de todos os metabolitos primrios e secundrios (metaboloma) de uma clula, tecido ou organismo (sistema biolgico). O objetivo final da metabolmica a identificao e quantificao do metaboloma de um sistema biolgico.

Metabolismo = a denominao que se d ao conjunto de reaes qumicas que continuamente est ocorrendo nas clulas. Rotas Metablicas (= Rotas Biossintticas) = So direcionadas pelas enzimas. Metablitos = So os compostos formados que podem ser primrio ou secundrio.

Eo

Que eu tenho a ver com isso ?

Reaes metablicas visam fundamentalmente, o aproveitamento de nutrientes para satisfazer as exigncias fundamentais das clulas.

Metablitos primrios
Produtos do metabolismo geral de todos os vegetais; funes essenciais: crescimento, respirao e fotossntese; So amplamente distribudos em todas as plantas.; exemplos os aminocidos, protenas, lipdios, nucleotdios, carboidratos, vitaminas, hormnios, etc.

Metablitos secundrios
Produtos do metabolismo especial; Embora no necessariamente essenciais garantem vantagens para sua sobrevivncia; Envolvidos com os processos de defesa e comunicao entre as espcies; Tm distribuio restrita a certas organismos;elementos de caracterizao; Sua presena pode ser utilizada para caracterizaes taxonmicas;
8 exemplos : alcalides, flavonides, taninos, cumarinas, lignides, etc

Funes e importncia dos metablitos secundrios

Antigamente produtos de excreo

Atualmente

adequao ao meio

Defesa contra herbvoros e microorganismos; Proteo contra raios UV; Atrao de polinizadores... Etc., etc., etc.

Elevada capacidade biossinttica enraizados no solo, no podem responder ao meio pelas vias possveis aos animais.

Funes e importncia dos metablitos secundrios rea alimentar; agronmica; perfumaria etc Farmacutica: Diversos compostos com atividade farmacolgica molculas potencialmente teis ao homem.

10

Importncia de vrios metablitos secundrios

rea farmacutica

Somente o conhecimento possibilita ao homem interferir racionalmente sobre o organismo produtor, de forma a direcionar sua produo.

por essa razo e porque a produo de frmacos (inclusive os de origem vegetal) diz respeito ao farmacutico, que o estudante de farmcia deve conhecer a biossntese dos metablitos vegetais.

A natureza prdiga e a observao de seus exemplos pode levar a idias novas no sentido de se produzir novos medicamentos.
11

Para estudar o metabolismo secundrio se faz necessrio uma pequena reviso sobre:
1. Organizao celular 2. Fotossntese 3. Conhecimento do metabolismo primrio

12

O bsico da organizao celular

Clula a menor unidade estrutural e funcional dos organismos Procariontes bactrias cianofceas e micoplasma Eucariontes protistas, fungos, vegetais e animais.

Procariontes todas as reaes ocorrem no mesmo compartimento.

Eucariontes organelas altamente especializadas, compartimentalizando as 13 reaes.

FOTOSSNTESE
Conceito a assimilao do gs carbnico na presena de gua e luz solar pelas plantas, atravs da funo clorofiliana, e, desassimilao de materia orgnica e oxignio Equao clssica da fotossntese
Fonte de Carbono inorgnico

nCO2

nH2O + Luz
Agente redutor Fonte de Energia

Clorofila

(CH2O)n

nO2
Vida

Carboidrato (Metab. Primrio) Metab. Secundrio

Ar que respiramos

14

Esquema geral das rotas biossintticas dos metablitos vegetais

CICLO DE CALVIN CO 2 + H 2O h + clorofila CARBOIDRATOS (monossacardios)

CIDOS NUCLICOS

OLIGOSSACARDIOS E POLISSACARDIOS (amido, celulose, etc.)

Purinas

Pirimidinas PIRUVATO Antibiticos

VIA CHIQUIMATO Fenilpropanides Lignides Cumarinas

VIA ACETATO

VIA MEVALONATO

Carotenides

CICLO DE KREBS

Geraniol Geranil geraniol Monoterpenos Farnesol

Esqualeno

POLICETDEOS cidos graxos cidos Acetogeninas orgnicos AMINOCIDOS Prostaglandinas Antraquinonas Flavonides Taninos Xantonas Pironas Peptdios

Triterpenos

Diterpenos Sesquiterpenos Esterides

Glic. cianogen. Tioglicosdios

PROTENAS ALCALIDES

15

BIOSSNTESE DOS CARBOIDRATOS Metablito primrio Ponto de partida para todas as outras classes

(1) 2-carboxi-3-ceto-1,5-difosforibitol, (2) cido 3-fosfoglicrico, (3) gliceraldeido 3-, (4) dihidroxi-acetona-, (5) frutose-1,6-di-, (6) eritrose-4-, (7) sedoheptulose-1,7-di-, (8) xilulose-5-, (9) ribose-5-, (10) ribulose5-, (11) ribulose-1,5-di-, (12) cido 2-fosfoglicrico, (13) cido fosfoenolpirvico, (14) cido oxalactico. 16 ( = Fosfato).

INTEGRAO: CICLO DE CALVIN / CICLO DE KREBS

Sada de matria orgnica do ciclo

Eritrose

CALVIN Ciclo de reduo do CO2 em matria orgnica

Frutose cido glicrico

CO2

Sada de matria orgnica do ciclo

Sada de matria orgnica do ciclo

cido pirvico

Sada de matria orgnica do ciclo

cido Oxalactico

CO2
KREBS Ciclo de oxidao do CO2 em matria inorgnica

Sada de matria orgnica do ciclo

cido Succnico

cido Oxoglu -trico

Sada de matria orgnica do ciclo

CO2

INTEGRAO: CICLO DE CALVIN / CICLO DE KREBS RESPONDA AS PERGUNTAS ABAIXO 1. Qual a grande diferena entre ciclo de Calvin e ciclo de Krebs? 2. Qual o metablito que serve de ligao entre o ciclo de Calvin e ciclo de Krebs? 3. No ciclo de Calvin e ciclo de Krebs existem quantos pontos que derivam metablitos para biossntese de outras classes de produtos naturais? Quais so esses pontos? 4. Durante o ciclo de Krebs so perdidas quantas molculas de CO2 por molcula de cido pirvico que entra? 5. Quais os cidos orgnicos que fazem parte do cclo de Krebs?

MELVIN CALVIN Qumico americano (1911-1997) recebeu o Prmio Nobel em 1961 pela investigao realizada sobre a assimilao de dixido de carbono pelas plantas.

19

1. Via metablica do ACETATO

A acetil-coenzima A (acetil-CoA), que provm do acetato, d origem a uma enorme variedade de metablitos, sendo a unidade acetato (C2) importantssima na formao de metablitos secundrios. Por unio seqencial de unidades C2 resultam cadeias de poliacetato que se formam por condensao de uma unidade inicializadora de acetil-CoA e unidades sucessivas de malonil-CoA (conforme pode ser visto na figura abaixo). As cadeias de poliacetato depois de formadas sofrem transformaes subseqentes (reduo, oxidao, ciclizao, rearranjo, etc.) que do origem a cidos graxos, acetogeninas, prostaglandinas, entre outros, conforme mostrado a seguir.
20

Exemplo de alguns metablitos secundrios da via Acetato

O O O H3C S-CoA Iniciador Acetil-S-CoA
esi es, d Redu
HO

O O O n
O

O S-CoA

S-CoA Continuador Malonil-S-CoA

O

H3C

dr

, et c lise hidr es, at a

O

Poli-B-cetocido-S-CoA
O
O O O O O O COOH

OH O O
O

1 Acet + 4 Mal
HO

1 Acet + 7 Mal
OH
COOH

O OH

CH3-(CH2)n-COOH cidos graxos

OH

O OH O

Cromonas Antraquinonas

Leucotrienos
21

2. Via metablica do MEVALONATO

H muitos anos atrs, verificou-se que um grande nmero de metablitos secundrios, tinham algo em comum: davam a entender que eram construdos a partir de unidades isopreno ( = 2-metilbutadieno-1,3).

OH

C10 Mentol

C15 Bisaboleno

COOH

C20

HO

C30 Lupeol

cido abitico

Sabe-se hoje que molculas desse tipo so formadas a partir de um precursor comum, chamado CIDO MEVALNICO. Vejamos como se forma o cido O mevalnico e toda classe dos terpenides: Monoterpenos, OH Sesquiterpenos, diterpenos, sesterpenos, triterpenos e teHO OH traterpenos.
cido mevalnico

BIOSSNTESE DO CIDO MEVALNICO

A PARTIR DELE, FORMAO DO 3,3-DIMETIL-ALIL-PIROFOSFATO (INICIADOR) E DO PIROFOSFATO DE 3-ISOPENTENILA (CONTINUADOR)
O SCoA AcSCoA O SCoA O 3 2 1 SCoA HO OH cido mevalnico O OH ATP ADP

+
O 3 O 1 SCoA 4 2 Aceto acetil SCoA

HO 4

O O H PO OP CO2 OP H H S-Enz
CONTINUADOS Pirofosfato de 3-isopentenila

Enz S OP

OP INICIADOR 3,3-Dimetil-alil-pirofosfato

23

FORMAO DOS TERPENIDES

OP INICIADOR 3,3-Dimetil-alil-pirofosfato

HEMITERPENOS (C5H8) OP
CONTINUADOS Pirofosfato de 3-isopentenila Isopreno

ESTERIDES
Os mono, sesqui e diterpenos so formados pelo encadeamento cabeacauda aos passo que os triterpenos e esterides pelo encadeamento caudacauda (dimerizao oxidativa).
H H OP Farnesil pirofosfato C15

OP

MONOTERPENOS (C10H16)
O

Geranil pirofosfato

Rotundifolona Mentha x villosa

O

SESQUITERPENOS (C15H24)
Nerolidol Nectandra amazonum
OH

OP

Farnesil pirofosfato x2 Dimerizao

OP H H

TRITERPENOS (C30H48)

HO HO HO

COOH

cido bssico Bumelia sartorum

H H

HH

DITERPENOS (C20H32)
OH
OP

Geraril-geranil pirofosfato

Labdano Erythroxylum catingae x2 TETRATERPENOS Dimeriz. B-Caroteno Daucus carota

ESQUALENO

(C40H64)
VEGETAIS CICLOARTENOL ANIMAIS LANOSTEROL MICRORGANISMOS ERGOSTEROL

OP

SESTERPENOS (C25)
HO O O

Geranil-fernesil pirofosfato

ESTIGMASTEROL CAMPESTEROL SITOSTEROL

COLESTEROL

VIT. D2

ZIMOSTEROL

Esclarina Organismo marinho

TRITERPENOS

24

LEOPOLD RUZICKA
Qumico suio (1887-1976). Reconheceu a regularidade estrutural dos terpenides atravs da unio de unidades de cinco carbonos da molcula de isopreno. Recebeu em 1939 o prmio Nobel.

JOHN CORNFORTH Qumico australiano (1917-.). Esclareceu a biossntese dos esterides. Recebeu o prmio Nobel em 1975
25

VIA DO CIDO CHIQUMICO

COOH

HCHO H COH HCOH CH2OP

COOH

CH2

COP COOH
HO OH OH

OH OH

OH

Eritrose-4fosfato

Fosfoenol piruvato

c. chiqumico

c. glico

HOOC

CH2COCOOH

COOH
COOH

CH2

c. antranlico

NH2

OH

c. prefnico

O OH

COOH

CH2CH(NH2)COOH

c. corsmico
CH2CH(NH2)COOH
CH2CH(NH2)COOH

N H

Triptofano
OH

Tirosina

Fenilalanina 26

Via biossinttica exclusiva

Fenilalamina Triptofano

Plantas ,fungos e bactrias

27

VIA DO CHIQUIMATO
BIOSSNTESE DE ALCALIDES
Representado por um nmero grande de estruturas

Biossntese de Produtos Naturais

um composto orgnico cclico contendo um nitrognio em um estado de oxidao negativo, que de distribuio limitada entre os seres vivos.

Originam-se de aminocidos Contribuio de outros percussores

VIA DO CHIQUIMATO Alcalides derivados do triptofano

INDOL-C2N
COOH

N H Triptofano

NH2

INDOL-C2N
H3CNHC O CH3

UNIDADE ISOPRNICA
COOH H2N

N CH3

N CH3

Fisostigmina

H3C

CH2OH NHCH3

N H

INDOL-C2N

Canoclavina

ALCALIDES DERIVADOS DE TRIPTOFANO TM O GRUPO INDOL-C2N EM SUA ESTRUTURA

29

VIA DO CHIQUIMATO
ALCALIDES DERIVADOS DE TIROSINA OU FENILALANINA
Protoalcalides, isoquinolnicos e benzilisoquinolnicos

HO

C6C2N
NH

Norlaudanosolina

HO

C6C2N

COOH

C6C2N
OH

NH2

OH

Tirosina - Fenilalanina
HO

C6C2N

Papaver spp.

Morfina

TM UNIDADES C6C2N EM SUA ESTRUTURA

O NCH3 HO

C6C2N

30

VIA DO CHIQUIMATO
A ORIGEM DOS FENILPROPANIDES
Compostos aromticos com uma cadeia lateral de trs tomos de carbono ligada ao anel aromtico
C6: FENILA C3: PROPENILA
COOH

CH2CH(NH2)COOH

geometria trans
COOH

PAL
NH3
Fenilalanina

HO

c. cinmico

c. p-cumrico

CH3O

COOH

CH3O

COOH

HO

COOH

HO OCH3

HO

HO

c. sinpico

c. ferlico

c. cafeico

*PAL Fenilalanina amonialiase

31

VIA DO CHIQUIMATO
A ORIGEM DOS FENILPROPANIDES
Acoplamento oxidativo
CH3O COOH
CH3O CH2OH

HO

HO

c. ferlico

lcool coniferlico

lignina
OH O

O O

C6C3

OCH3

OCH3

C6C3
O HO OCH3

O O

lignina Pinorresinol

OCH3

Dmeros de fenilpropanides

UM LIGNIDE

SUBESTRUTURA DA LIGNINA 32

VIA DO CHIQUIMATO CUMARINAS

So derivados da 5,6-benzo-2-pirona Oxidao cido trans-cinmico
Geometria cis

-cumrico
C6C3

HO

HO

HO

OH HO

HO

cido cis-cinmico Anel furnico

Uma cumarina simples

H3C HO H3C O O

OPP
Unidade isoprnica

HO

Marmesina - uma furanocumarina

Prenilao
33

Produtos derivados do cido chiqumico e do acetato

34

Produtos derivados do cido chiqumico e do acetato

Biossntese de antraquinonas
So produtos da oxidao de fenis.

35

Produtos derivados do cido chiqumico e do acetato

FLAVONIDES
Pigmentos de vegetais Funo de defesa e atrao polinizadores C6-C3-C6 Rota mista: cido chiqumico e do acetato, via cido malnico

36

Produtos derivados do cido chiqumico e do acetato

FLAVONIDES
CoAS C ll O CH2 COOH

Derivado do c. chiquimico

CoAS

CoAS C ll O

Cinamoil-CoA

SCoA

O
O O
OH OH

C6C3: CHIQUIM.

3 ACETATOS
HO O

HO

OH
OH O

Luteolina

OH

Uma chalcona

Uma flavona

BIOSSNTESE MISTA 37

Produtos originados a partir do cido ctrico

38

Produtos originados a partir do cido ctrico

BIOSSNTESE DE ALCALIDES
HO OH

Retronecina
N
H2N H2N COOH

Pirrolidnico

c. succnico
COOCH3 NCH3 O C ll O

ORNITINA

ALCALIDES COM ANEL HETEROCCLICO FORMADO POR 4 T. DE C

c. chiqumico lisina Anabasina

N H N

ornitina

Cocana

c. nicotnico

Piperidinico

Nicotiana spp.

H2N

H2N

Piridnico
lisina NH Citisina
N O

LISINA ALCALIDES COM ANEL HETEROCCLICO FORMADO POR 5 TOMOS DE C

Spartium junceum Fabaceae 39

Quinolisidnico

Produtos originados a partir do cido ctrico

METABLITOS DERIVADOS DE CIDOS AMINADOS

Aminocidos alifticos
R1 C R2 CH NH2
R1 C R2 C N H

H COOH

CO2

R1 C R2

H CH NOH

Aldoxima

R1 C R2

H C SH

Aminocidos sulfurados

Nitrila
R1 C R2 C N
R1 C R2 C N

NOH

OH
H S Glicose

R1 C R2

O C

Glicose N

OSO3H

GLICOSINOLATO 40

GLICOSDIO CIANOGNICO

Compostos nitrogenados com funo de proteo

Referncia bibliogrfica

SIMES, C. M. O. Farmacognosia, da planta ao medicamento. (6a Ed.) Captulo 16, Pg 403. Editora da Universidade Federal de Santa Catarina, Florianpolis, SC.

41