Laura del Olmo

TEMA 5: EL SISTEMA DEL COMPLEMENTO

Los anticuerpos fijan complementos por su porcin Fc de fragmentos constantes (cristalizable). La activacin del complemento es una de las funciones efectoras de los anticuerpos (tambin la neutralizacin de virus, etc.).

Introduccin histrica
El sistema del Complemento es uno de los componentes del sistema inmune que se conoce desde hace ms tiempo. Bordet y Ehrlich se dieron cuenta de que al poner en contacto un suero fresco con anticuerpos bacterianos e incubarlo a 37 las bacterias se lisaban; pero si lo incubaban a 56 las bacterias solo se aglutinaban y no se lisaban. Su conclusin fue que los anticuerpos son termoestables, por lo que deba de haber algn componente ms en el suero que fuera termolbil (que se destruye o altera con facilidad por la accin del calor) y que completase la accin de los anticuerpos para lograr la lisis, y a ese componente srico fue al que se denomin COMPLEMENTO.

DEFINICIN Y FUNCIN PRINCIPAL: LISIS CELULAR

Es un sistema compuesto por ms de 30 protenas (tanto sricas como de membrana o de superficie celular) cuya activacin en cadena o en cascada conlleva el ataque a las superficies celulares y culmina con la formacin de poros en las mismas superficies celulares o membranas de las clulas, lo que implica su lisis osmtica y muerte. Es un componente efector importante de la Inmunidad Innata (aunque hay que tener en cuenta la conexin que existen entre los 2 tipos de inmunidad).

FUNCIONES ADICIONALES O SECUNDARIAS

1. Favorece la opsonizacin (funcin de marcado de bacterias o microorganismos patgenos que hay que eliminar) mediante la unin de algunos fragmentos del complemento a receptores o fragmentos especficos en la superficie de las clulas fagocticas: opsoninas. 1

Laura del Olmo 2. Activa a varios tipos celulares, entre los que se encuentran los mastocitos o clulas cebadas, que dan lugar a una serie de reacciones similares a las alrgicas: reacciones ANAFILOTXICAS, y a estos fragmentos se les denomina ANAFILOTOXINAS. 3. Favorece la eliminacin de inmunocomplejos circulantes fundamentalmente en el hgado y tambin en el bazo. 4. Favorece la activacin de los Linfocitos B. 5. Promueve la fagocitosis, la quimiotaxis (movimiento de las clulas mediado por la traccin o repulsin por factores qumicos) y la inflamacin.

FUNCIONAMIENTO GENERAL Y NOMENCLATURA DE LAS PROTENAS DEL COMPLEMENTO

La mayora de ellas son elaboradas por el hgado y secretadas al plasma como proenzimas (en su forma no activa), que para ser activas requieren su escisin cataltica en 2 fragmentos por otra protena previa con capacidad enzimtica: a (Anafilotoxina): generalmente es el fragmento de menor tamao (salvo en C2) y se comporta como una anafilotoxina (fragmento del complemento capaz de desencadenar una reaccin anafilotxica a travs de su depsito en la superficie de un mastocito). EXCEPCIN! En C2 la escisin en 2 fragmentos dar lugar a un C2b < C2a, siendo C2a el ms grande y el que contina en la cascada de activacin. b (Bsico): generalmente es el fragmento de mayor tamao y el que contina en la cascada de activacin. Por ejemplo, cuando C3 se escinde por la enzima anterior a la cascada, da lugar a C3a y C3b. Algunos fragmentos del complemento van a sufrir ms de una escisin, por ejemplo el fragmento C3 se escinde primeramente en C3a y C3b, y su inhibicin total hace que se escinda en ms fragmentos inactivos: C3d, C3g Los componentes activos que se van originando a lo largo de la cascada se nombran con una barra sobre ellos ( denominan con una i delante (iC3b). ), y los fragmentos inactivos se

Laura del Olmo En el sistema del complemento y en cualquier aspecto funcional de sistema inmune existen una serie de elementos reguladores que lo frenan, unos elementos inhibidores que actan anulando la funcionalidad de los fragmentos que se generan.

Los fragmentos de C3 y C4 tienen receptores celulares en las membranas celulares que se denominan CR1, CR2, CR3 y CR4. Esto se debe a la va comn. Los receptores celulares de los fragmentos C3d y C3g no sern tan activos como los de C3a y C3b.

Los componentes de la va alternativa se denominan factor + una letra (A, B, C, D). Los complementos se activan y funcionan EN CASCADA (efecto de amplificacin): la activacin de un complemento activa al siguiente y se va amplificando el efecto.

VAS DE ACTIVACIN DEL COMPLEMENTO: (1) CLSICA, (2) ALTERNATIVA Y (3) VA DE LAS LECTINAS O DE LAS MBL
Como ya hemos explicado, el complemento es un conjunto de protenas sricas que se pueden encontrar circulando libres por el suero y tambin formando parte de las membranas, pero el complemento se va a activar en su forma circulante: las protenas sricas circulantes son las que se activan unas a otras en cascada (la activacin de la primera de ellas pone en marcha al resto, atribuyndoles una capacidad activadora de la siguiente protena) y lo hacen a travs de 3 vas cuyo objetivo final es lograr la lisis bacteriana: 1) VA CLSICA: solo se activa si hay anticuerpos, es decir, solo si hay un reconocimiento del anticuerpo por su antgeno (complejos antgenoanticuerpo) se podr desencadenar la cascada del complemento por la va clsica. 2) VA ALTERNATIVA: amplifica la va clsica porque utiliza como sustrato su producto C3b presente en las superficies bacterianas. 3) VA DE LAS LECTINAS O VA DE LAS MBL (Lectina unidora de Manosa): reconoce restos de azcares (como manosa) situados en clulas no humanas (bacterias, hongos).

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Las 3 vas confluyen en un punto comn (C3) y finalizan con la formacin de un sistema molecular denominado COMPLEJO DE ATAQUE A LA MEMBRANA (MAC), que es el que ejecuta la LISIS BACTERIANA o patgena (de la clula extraa).

Las 3 vas de activacin del complemento (clsica, alternativa y de las lectinas) van a confluir en C3. La va de las lectinas confluye en un paso previo (C4 C3). 1) VA CLSICA IMPORTANTE! No se activa al complemento por la va clsica si no hay un reconocimiento previo del anticuerpo por su antgeno.
Para que el complemento se active por la va clsica debe ocurrir la presencia de los anticuerpos y que estos estn reconociendo a su antgeno formando el complejo antgeno-anticuerpo.

1. Cuando el anticuerpo se deposita sobre el antgeno o cuando los anticuerpos estn unidos a antgenos, van a unir (por su regin Fc o cristalizable) al complejo trinuclear C1 (formado por 3 protenas: C1Q, C1R y C1S) o ste va a hacer contacto con ellos, lo que provoca el depsito de una molcula de C4 (protena que estaba en el medio) que es escindida enzimticamente en 2 fragmentos: C4a: fragmento pequeo que queda libre y que va a actuar como anafilotoxina (la menos potente). C4b: fragmento grande con capacidad cataltica que contina en la cascada de activacin quedndose pegado a la estructura anterior. 4

Laura del Olmo 2. La rotura de C4 hace que C4b adquiera capacidad enzimtica o cataltica, la cual ejercita sobre C2 (para activarla) dando lugar a otros 2 fragmentos: *C2a*: fragmento grande que queda unido a toda la estructura anterior (fundamentalmente a C4b) para continuar con la cascada. Recordemos que se trata de una excepcin ya que generalmente los fragmentos grandes y catalticos son los b. C2b: fragmento pequeo que queda libre. 3. As, tras las 2 escisiones anteriores se ha formado el complejo molecular C4b-2a (con una barra encima para indicar que es activo y que tiene capacidad enzimtica) denominado CONVERTASA DE C3 porque tiene capacidad cataltica sobre C3, escindindolo a su vez en 2 fragmentos: C3a: fragmento pequeo libre con gran capacidad anafilotxica. C3b: fragmento grande que se pega al complejo molecular anterior y forma el complejo C4b-2a-3b denominado CONVERTASA DE C5 porque tiene capacidad para catalizar y activar al siguiente componente de la cascada, a la molcula C5.

VA CLSICA: C1 C4: C4a y C4b C2: C2b y C2a = C4b-2a (CONVERTASA DE C3) C3: C3a y C3b = C4b-2a-3b (CONVERTASA DE C5) C5
La mayora de los fragmentos pequeos (C4a y C3a) que quedan libres adquieren capacidad anafilotxica en mayor o menor grado: C3a > C4a (C3a tiene mayor actividad anafilotxica que C4a).

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2) VA ALTERNATIVA: 2 fases (reposo y amplificacin)

Sus componentes se denominan factores + una letra y son exclusivos de esta va. Es una va que est permanentemente en activacin, y esta activacin sucede de manera espontnea en el suero, aunque es de bajo nivel o baja intensidad.

1. La activacin del complemento por la va alternativa produce la escisin permanente de C3 en: C3a y C3b. 2. El fragmento grande C3b es capaz de escindir al factor B (componente del complemento exclusivo de la va alternativa) en 2 fragmentos: Ba y Bb, dando lugar al complejo C3bBb denominado CONVERTASA DE C3 POR LA VA ALTERNATIVA. 3. La CONVERTASA DE C3 POR LA VA ALTERNATIVA (C3bBb) forma un bucle y es capaz de escindir ms molculas de C3 cuyos fragmentos quedan incorporados en este complejo, y as sucesivamente se va activando el complemento por la va alternativa.

VA ALTERNATIVA: C3 C3a y C3b FACTOR B: Ba y Bb = C3bBb (CONVERTASA DE C3 POR LA VA ALTERNATIVA)

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VA ALTERNATIVA: 2 FASES I. FASE DE REPOSO: est sucediendo de forma permanente en nuestro

suero en condiciones de salud (normales) y C3 se destruye rpidamente por hidrlisis (con molculas de agua). En ausencia de patgenos estas activaciones del complemento de baja intensidad conducen a la destruccin inmediata de C3 por hidrlisis (se escinde rpidamente con agua). II.

FASE DE AMPLIFICACIN: solo sucede en presencia de patgenos

(bacterias o restos antignicos) y conduce hasta C5. Si donde est sucediendo esta va aparece una bacteria o un resto antignico, no dar tiempo a que el C3 se combine con molculas de agua para escindirse, por tanto se fragmentar y se ir depositando sobre la pared bacteriana donde C3 es ms estable y donde podr elongarse para formar la CONVERTASA DE C3 POR LA VA ALTERNATIVA y finalizar con la lisis del patgeno.

Los fragmentos C3b se depositan sobre la bacteria o resto antignico y entonces la incorporacin del factor B ser mucho ms rpida e intensa, lo que permitir la elongacin de C3 hasta formar las CONVERTASAS DE C3 POR LA VA ALTERNATIVA (C3bBb), que van a romper ms C3 e incorporar C3b al complejo (elongacin) y esas molculas elongadas tienen capacidad de activar a C5 y de continuar hacia la va terminal de activacin del complemento que finaliza con la lisis bacteriana.

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3) VA DE LAS LECTINAS O DE LAS MBL

La activacin del complemento por esta va sucede por una protena trinuclear denominada PROTENA UNIDORA DE MANOSA o MBL (Mannose-Binding Lectine) que se activa gracias a la presencia de otros 2 componentes (SERIN-PROTEASAS ACTIVADORAS DE MBL o Mannose-Associated Serine Protease 1): MASP-1 y MASP2. Por tanto para que se pueda dar la activacin del complemento por la va de las lectinas es necesaria la previa activacin de MASP-1 y MASP-2.

La protena MBL se activa cuando aparece una bacteria con manosa en su pared, entonces las serin-proteasas (MASP-1 y MASP-2) actan sobre las MBL y les confieren la capacidad para actuar sobre C4, a partir del cual confluirn con el resto de la cascada: C4 C4b C2 C2a C3 C3b C5.

CONVERGENCIA DE LAS VAS SOBRE LA ACTIVACIN DE C3

Todas las CONVERTASAS DE C3 de las 2 vas CLSICA y ALTERNATIVA estn formadas por el fragmento C3b unido a C4b-2a en el caso de la VA CLSICA y a Bb en el caso de la VA ALTERNATIVA, y ambos complejos (C4b-2a-3b y C3bBb) se denominan CONVERTASAS DE C5, porque pueden escindir a C5 en 2 fragmentos y as activarlo: C5a: anafilotoxina de mayor potencia (con mayor actividad anafilotxica). C5b: fragmento que contina la cascada hacia su va terminal o ltica.

OJO! La VA DE LAS LECTINAS va a confluir con el resto de vas dos pasos antes de C3, en C4.

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CONVERGENCIA DE VAS: ambas vas (CLSICA y ALTERNATIVA) convergen en C3b que, ya sea unido a C4b-2a (VA CLSIVA) o a Bb (VA ALTERNATIVA), van a activar al C5, que es el componente inicial del Complejo de Ataque a la Membrana (MAC). OJO! La VA DE LAS LECTINAS tambin converge con las otras 2 vas pero lo har a nivel de C4, que tambin terminar confluyendo en C3b:

C4: C4b C2: C2a C3: C3b

VA LTICA O VA TERMINAL DE ACTIVACIN DEL COMPLEMENTO: FORMACIN DEL COMPLEJO DE ATAQUE A LA MEMBRANA (MAC)
La va terminal de activacin del complemento se llama VIA LTICA porque finaliza con la lisis de la clula antignica sobre la que est sucediendo esta cascada (lisis bacteriana). Todo este complejo (C5b) atrae y se une a C6, que activa a C7, C8, C9 y as sucesivamente van polimerizando varias molculas de C9 y depositndose sobre la superficie celular o membrana (bacteriana) y adquiriendo una forma de tubo hueco (transicin hidrfoba: se van hundiendo en la membrana), que es la estructura denominada MAC (Complejo de Ataque a la Membrana), que hace un PORO en la membrana celular por el que escapan los componentes celulares, provocando la muerte de la bacteria por LISIS OSMTICA.

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EFECTIVIDAD DEL COMPLEJO DE ATAQUE A LA MEMBRANA (MAC) FORMADO POR EL COMPLEMENTO

Gran efectividad en la erradicacin de: VIRUS BACTERIAS GRAM Escasa efectividad contra: Bacterias Gram +, debido a que tienen una pared ms gruesa formada por un pptidoglucano que impide la fijacin del MAC a la membrana citoplasmtica. Parsitos

FRAGMENTOS DEL ANAFILOTOXINAS

COMPLEMENTO

QUE

ACTAN

COMO

Los fragmentos que se liberan a lo largo de la activacin del complejo, generalmente los fragmentos a (de Anafilotoxina), tienen capacidad de anafilotoxinas, ya que tienen receptores especficos para ellos en las mastocitos. Los fragmentos anafilotxicos ms potentes son (segn orden decreciente de capacidad anafilotxica: C5a > C3a > C4a

FUNCIONES DE LAS ANAFILOTOXINAS

Atraen y activan a todas las clulas mieloides, no solo a los linfocitos, sino tambin a los neutrfilos, basfilos Inducen la liberacin de histamina por los mastocitos. Los mastocitos tiene receptores de membrana para las anafilotoxinas y cuando stas se depositan en sus receptores se induce la liberacin de histamina, que va a producir 2 consecuencias: Contraccin de la musculatura lisa. Vasodilatacin y aumento de la permeabilidad capilar (edema).

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La vasculatura de pequeo calibre tiene en su pared msculo liso, y cuando se contraen estas clulas de msculo liso quedan espacios mayores, por eso aumenta la permeabilidad por la que escapan los componentes (edema: acumulacin del componente lquido).

Indirectamente participa en el inicio de la respuesta especfica, porque al mediar estas actividades se conlleva a una mayor recuperacin de la linfa, la cual vehiculiza los antgenos a los rganos linfoides secundarios (ganglios), con lo que se facilita la respuesta inmune adaptativa.

REGULACIN DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO

Todos los captulos del sistema inmune tienen unos sistemas paralelos de regulacin o control de la respuesta inmune. La enorme capacidad destructiva del sistema del complemento hace necesario que exista un sistema de regulacin especfico formado por un complejo sistema de inhibidores (subconjunto de protenas inhibidoras del complemento), ya el complemento activado puede llegar a constituir un peligro para la vida. Su objetivo es evitar que la respuesta del complemento sea lesiva o exagerada contra estructuras que no deban. Este subconjunto de protenas inhibidoras se activa de forma inespecfica, ya que pertenecen a la inmunidad innata y se encuentran resumidas en la siguiente tabla:

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Hay 2 categoras de protenas inhibidoras del complemento, que actan deshaciendo convertasas:
SOLUBLES: circulan libres en el suero y en los fluidos extracelulares. C1 INHIBIDOR: inhibe la cascada del complemento actuando sobre el primer componente de la va clsica (C1). C4BP (C4 binding protein, protena de unin): inhibe la activacin del complemento actuando sobre C4 y acelera la destruccin de la C3 convertasa de la va clsica (C4b-2a). Adems ayuda al factor inhibidor I actuando como cofactor. FACTOR H: acelera la destruccin de la C3 convertasa de la va alternativa (C3bBb). FACTOR INHIBIDOR I (FI): rompe proteolticamente a C4b y C3b utilizando al C4BP en la va clsica y al FACTOR H en la va alternativa como cofactores.

ASOCIADAS A LA MEMBRANA DE LAS CLULAS: se disponen en la superficie celular, en la membrana de todas las clulas del organismo (muchos tipos celulares distintos). CR1 (Receptor de Complemento 1): acelera la disociacin de las C3 convertasas tanto de la va clsica (C4b-2a) como de la va alternativa (C3bBb). MCP (Protena Cofactor de Membrana): acta como cofactor en la protelisis de C3b y C4b por el FACTOR I soluble. DAF o DC55 (Decay accelerating factor, Factor Acelerador del gasto o de la inactivacin): inhibe la lisis de clulas propias, es decir, su funcin esencial es la de evitar la lisis de las clulas propias del organismo ante la activacin del complemento acelerando la disociacin de las convertasas de ambas vas. DC59: tambin inhibe la lisis de clulas propias o autlogas por el complemento evitando la polimerizacin y formacin del MAC.

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Laura del Olmo El complemento NO DISCRIMINA ENTRE LO PROPIO Y LO AJENO al organismo y hace su funcin ltica indiscriminadamente, es decir, ante la duda siempre va a responder atacando. Este sistema de protenas inhibidoras solubles y de membrana facilita que las clulas propias del organismo provistas de estos reguladores estn protegidas de la lisis del complemento, y que esta lisis solo se produzca sobre antgenos extraos.

Las clulas propias del cuerpo armadas con estas protenas inhibidoras quedan protegidas contra el complemento activado, el cual no va a distinguir si la clula es propia o ajena, por lo que siempre actuar produciendo su lisis, por eso se hace necesaria la existencia de este sistema de protenas reguladoras.

IMPORTANCIA CLNICA: existen individuos que tienen defectos genticos que afectan a las protenas reguladoras del complemento.
Dficit de C1 INHIBIDOR EDEMA ANGIONEURTICO FAMILIAR (AD) Herencia autosmica dominante. La activacin de su complemento no est correctamente regulada, por lo que ante cualquier estmulo (por ejemplo un simple cambio de temperatura) se activa la cascada de activacin del complemento y se desencadenan cuadros de tipo anafilctico (similares a la alergia). Sintomatologa: urticarias y edemas bruscos (salida brusca de plasma al espacio intersticial) que pueden afectar a la laringe causando una asfixia sbita.

Dficit de CD59 o DAF (CD55) HEMOGLOBINURIA PAROXSTICA NOCTURNA Ataques de hemlisis sbitas (destruccin brusca de las clulas sanguneas) que se manifiesta como hemoglobinuria nocturna (presencia de sangre en la orina que ocurre normalmente por las noches, asociada a cambios posturales).

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RECEPTORES DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO

Los ms importantes son CR1, CR2, CR3 y CR4. En general, los ligandos de estos receptores son fragmentos de C3 y de C4.
CR1: facilita el transporte y la eliminacin de inmunocomplejos y est presente en todas las clulas de la sangre excepto en las plaquetas. CR2: facilita la activacin de los Linfocitos B. CR3 y CR4: estn implicados en la promocin/estimulacin de la fagocitosis.

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