Transgnesis

La Unidad de Transgnesis (UT) tiene, como principal objetivo, la produccin de ratones modificados genticamente por la introduccin de molculas de ADN forneo en sus genomas (los denominados ratones transgnicos) y su suministro, segn sea requerido, a los diferentes grupos cientficos del CNIC de acuerdo con sus necesidades de investigacin. Desde un punto de vista biomdico, tales ratones representan una herramienta de suma importancia para estudiar y conocer la funcin gnica in vivo dentro de la complejidad de un organismo completo. Esto ha conducido al desarrollo de modelos animales de enfermedades humanas permitiendo la mejora del conocimiento de las enfermedades y, en algunos casos, para el desarrollo de nuevas y ms eficientes terapias. En nuestro caso, servirn como punto de partida para analizar procesos bsicos de la fisiologa y homeostasis cardiovasculares as como para ensayar nuevas terapias experimentales. Otros objetivos importantes de la UT son: (a) rederivar lneas de ratn a la zona estril de la Unidad Experimental, (b) criopreservar las valiosas cepas de ratn producidas y otras, (c) puesta a punto en nuestras instalaciones de nuevas tcnicas publicadas relacionadas con la biologa reproductiva y del desarrollo en el ratn, (d) producir modelos de enfermedades animales por la utilizacin de tcnicas quirrgicas, y (e) proporcionar las tcnicas de transgnesis en ratn ms modernas as como desarrollar nueva tecnologa propia segn las necesidades de los grupos de investigacin del CNIC. Para lograr exitosa y eficientemente todos estos objetivos, la unidad dispone de equipacin de vanguardia e instalaciones adecuadas. Entre otros, la unidad tiene dos laboratorios ubicados en la Unidad Experimental: uno es el llamado laboratorio de micromanipulacin/microinyeccin y el otro es el laboratorio de transferencias embrionarias. Entre las tcnicas utilizadas en la UT para la realizacin de sus actividades estn: 1. Produccin de ratones transgnicos por: a. Microinyeccin Pronuclear (microinyeccin directa de molculas de ADN en los proncleos de ovocitos fertilizados). b. Microinyeccin Subzonal o Perivitelina de ovocitos fertilizados con retrovirus/lentivirus modificados genticamente. 2. Produccin de ratones quimeras para la obtencin de ratones Knock-Out (KO) y Knock-In (KI) por: a. Agregacin de embriones de ocho clulas (E8C) con cluas madre embrionarias de ratn modificadas genticamente (ES-Cells). b. Microinyeccin de embriones de ocho clulas (E8C)/blastocistos con clulas madre embrionarias de ratn modificadas genticamente (ES-Cells). 3. Rederivacin de lneas de ratn por transferencia embrionaria. 4. Criopreservacin de lneas de ratn por: a. Congelacin de embriones.

b. Congelacin de esperma. 5. Fertilizacin in vitro (IVF). 6. Inyeccin Intracitoplsmica de Esperma (ICSI). Ms informacin en la pgina web de la UT (en construccin).