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Gracias Arauco por la colaboracin con este video.

Para este experimento necesits:


Semillas (garbanzos, porotos o lentejas) Sal Detergente lquido Ablandador de carne o jugo de anan (pia) Alcohol etlico 95% (funciona tambin con isopropil) y paciencia, mucha paciencia

Ac va el procedimiento que tens que seguir:

1) Lo primero es tomar 1/2 taza de porotos, una pizca de sal (ser para darle sabor?) y una taza de agua. Todo eso se coloca en una licuadora y se procesa durante 15 segundos. Finalmente, la mezcla resultante se filtra para eliminar cualquier partcula de gran tamao. 2) A la mezcla que obtuviste agregale 2 cucharaditas de detergente lquido y revolv sin formar espuma. Luego dej reposar por 5-10 minutos. Sera conveniente que probaras con distintos detergentes ya que algunos no funcionarn tan bien como otros. Finalmente coloc la mezcla en 3 envases de prueba. 3) Agreg a cada envase una pizca de ablandador de carne y revolv muy des-pa-ci-to. Si lo hacs rpidamente tal vez no logres ver nada al final del experimento. Si no tens ablandador de carne (que por cierto es un producto muy yankie) pods utilizar jugo de anan o solucin para lentes de contacto.

4) Inclin el envase de la mezcla y vert muy lentamente alcohol etlico 95% (alcohol comn de cualquier botiqun) de modo que se forme una capa sobre la mezcla anterior de porotos. Vert tanto alcohol como mezcla hay en el envase.

El ADN comenzar a coagular como una masa blancuzca y subir hasta la parte donde est el alcohol. 5) Felicitaciones!!! Acabs de realizar tu primera extracin casera de ADN.

Puedes retirarlo con la ayuda de un palillo. En este caso las protenas y la grasa se quedan en la parte acuosa de la mezcla y el ADN asciende hasta llegar al alcohol. El ADN es una molcula muy larga y tiende agruparse. De ah la facilidad para retirarla. Puede ser necesario que intentes varias veces el experimento, con distintas fuentes de ADN, distintos detergentes y ablandadores; ya que muchas veces no sale como lo esperado y slo se puede tener paciencia para volver a intentarlo. Vamos que vale la pena!!! Suerte. Porqu funciona as? El agua con una pizca de sal es una mezcla isotnica. Es para que lo que se va a sacar de la semilla sufra lo menos posible. En la licuadora se rompe la cubierta de las semillas. Pero las clulas vegetales estn enteras (son demasiado pequeas). Para eso se usa el detergente. Zumo de pia, de papaya, ablandador de carne todo esto son enzimas que cortan las protenas. Se trata de romper lo que hay dentro de la clula dejando intacto el ADN. Al aadir el alcohol se consigue separar el ADN, que tiene ms afinidad con el alcohol que con el agua.
Este experimento ha sido traducido al espaol de su artculo original

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Extraccin de ADN

Objetivo

Utilizar unas sencillas tcnicas para poder extraer el ADN de un producto natural Observar la estructura fibrilar del ADN.

Introduccin
ADN es la abreviatura del cido desoxirribonucleico (en ingls, DNA). Constituye el material gentico de los organismos. Es el componente qumico primario de los cromosomas y el material del que los genes estn formados.

Materiales

Productos

Vasos de precipidos o vasitos de pltico. Tubos de ensayo Un cuchillo Palitos de pinchos Una batidora

Cebolla grandes frescas Kiwis Agua destilada Detergente lavavajillas Sal Zumo de pia o de papaya Alcohol de 96 muy fro

Realizacin prctica

1.- Cortamos la zona central de la cebolla en dados 2.- En un vaso de agua echamos 3 cucharaditas de detergente lavavajillas y una de sal y aadimos agua destilada hasta llenar el vaso. 3.- Mezclamos esta solucin con los trozos de cebolla 4.- Licamos el conjunto, con la batidora, a velocidad mxima durante 30 segundos 5.- Filtramos el lquido obtenido con un filtro de caf. 6.- Llenamos un cuarto de un tubo de ensayo con la disolucin filtrada. Aade otro tanto de zumo de pia y mezclamos bien. 7.- Aadimos un volumen de alcohol muy fro equivalente al del filtrado, cuidadosamente, hacindolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el filtrado. 8.- Dejamos reposar durante 2 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos capas. A continuacin introducimos la varilla y extraemos una maraa de fibras blancas de ADN.

Extrayendo ADN

Precauciones

Cuando aadas el alcohol fro debes hacerlo de forma que resbale por las paredes del tubo para que forme una capa sobre el filtrado. Puedes utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte.

Explicacin cientfica
La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula. A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. La solucin de lavavajillas y sal ayudada por la accin de la licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmtica y nuclear. Los zumos de pia y papaya contienen un enzima, la papana, que contribuye a eliminar las protenas que puedan contaminar el ADN. El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua.

ADN en la interfase agua-alcohol

Curiosidades y otras cosas

El ADN fue identificado inicialmente en 1868 por Friedrich Miescher, bilogo suizo, en los ncleos de las clulas del pus obtenidas de los vendajes quirrgicos desechados y en el esperma del salmn. l llam a la sustancia nuclena, aunque no fue reconocida hasta 1943 gracias al experimento realizado por Oswald Avery La estructura del ADN es una pareja de largas cadenas de nucletidos. La estructura de doble hlice del ADN fue descubierta en 1953 por James Watson y Francis Crick. Una larga hebra de cido nucleico est enrollada alrededor de otra hebra formando un par entrelazado. Dicha hlice mide 3,4 nm de paso de rosca y 2,37 nm de dimetro, y est formada, en cada vuelta, por 10,4 pares de nucletidos enfrentados entre s por sus bases nitrogenadas. Slo tenemos un 30% ms de genes que un diminuto gusano, el cual tiene solo un milmetro de longitud y posee 959 clulas, en tanto que nosotros alrededor de 100 billones. Y mientras que los seres humanos poseemos aproximadamente 100.000 millones de neuronas, el diminuto gusano cuenta unicamente con 302. En comparacin con el arroz nos va an peor, puesto que un grano de arroz tiene muchos ms genes que una persona, y todava no se le ha ocurrido ni la ms tonta de las ideas.

Bibliografa

Extraccin del ADN de una cebolla. Cmo ver su ADN con un experimento casero?. Extraccin de ADN Extraccin casera de ADN. Extraccin de ADN de tejidos vegetales. Curiosidades del ADN. Origami Dna model. Extraccin de ADN.

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Extraccin del ADN de una cebolla


M L. Tato

(PR-5)

El rincn de la Ciencia n 5, Marzo 2000

La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula. A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.

El material que se necesita es fcil de encontrar y el procedimiento es sencillo. Animo! e intenta hacerlo en casa. MATERIAL:
una cebolla grande fresca detergente lavavajillas sal agua destilada zumo de pia o papaya alcohol de 96 muy fro (puede sustituirse por vodka helado) un vaso de los de agua un vaso de cristal alto (se mantiene en la nevera hasta que vaya a utilizarse) un cuchillo una varilla de cristal una batidora

Cmo hacerlo?

Corta la zona central de la cebolla en cuadrados En un vaso de agua echa 3 cucharaditas de detergente lavavajillas y una de sal y aade agua destilada hasta llenar el vaso. Mezcla esta solucin con los trozos de cebolla Lica el conjunto, con la batidora, a velocidad mxima durante 30 segundos Filtra el lquido obtenido con un filtro de caf Llena hasta la mitad aproximadamente un vaso de cristal alto con la disolucin filtrada Aade 3 cucharaditas de caf de zumo de pia o papaya y mezcla bien Aade un volumen de alcohol muy fro equivalente al del filtrado, cuidadosamente, hacindolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el filtrado. Puedes utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte. Deja reposar durante 2 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos capas. A continuacin introduce la varilla y extrae una maraa de fibras blancas de ADN.

Qu ha ocurrido? La solucin de lavavajillas y sal ayudada por la accin de la licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmtica y nuclear. Los zumos de pia y papaya contienen un enzima, la papana, que contribuye a eliminar las protenas que puedan contaminar el ADN.

El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua.
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CMO EXTRAER ADN DE CUALQUIER COSA VIVIENTE


Cmo extraer ADN de cualquier cosa viviente
iADN! Quieres decir que puedo verlo? Cmo? Slo sigue estos tres sencillos pasos: Alcohol Detergente eNzimas (ablandador de carne) Es tan simple? iDime ms! Primero necesitas encontrar algo que contenga ADN. Ya que el ADN es el plano de instrucciones para la vida, cualquier cosa viviente contiene ADN.

Para este experimento preferimos usar arvejas (guisantes) verdes. Pero tambin hay montones de otras fuentes de ADN, como por ejemplo:

Espinacas Hgado de pollo Cebollas Brcoli

Aqu est la parte divertida. Pon en una licuadora:

Tu fuente de ADN (ms o menos 100 ml o 1/2 de taza de arvejas ) Un pellizco grande de sal de mesa (menos de un ml o 1/8 de cucharadita) Agua fra. El doble de la cantidad de tu fuente de ADN (ms o menos 200 ml o 1 de taza)

Licua todo a alta velocidad por 15 segundos. El licuado separa las clulas de las arvejas unas de otras, por lo que ahora tienes una muy diluida sopa de clulas de arvejas . Debido a que este paso es un revoltijo, ciertas fuentes de ADN no deben ser usadas, como por ejemplo:

Al perro Fido, la mascota de tu familia, El dedo gordo de tu hermana menor Bichos que atrapaste en el jardn

Y ahora, sigue estos tres pasos:

1. Vierte tu sopa de clulas de arvejas a travs de un colador dentro de otro contenedor (como una taza medidora por ejemplo). Cunta sopa de arvejas tienes? Aade como 1/6 de esa cantidad de detergente lquido (ms o menos 30 ml o dos cucharadas soperas) y

mzclalo. Deja reposar la mezcla entre 5 y 10 minutos. Vierte la mezcla en tubos de ensayo u en otros contenedores pequeos de vidrio, cada uno como 1/3 lleno.

Prueba usar uno de estos detergentes o el que sea que tengas a mano. Por qu estoy usando detergente?

2. Aade un pellizquito de enzima a cada tubo de ensayo y agtalo suavemente. iSe cuidadoso! Si lo agitas demasiado fuerte rompers en ADN hacindolo ms difcil de ver. Usa ablandador de carne como enzima. Si no puedes encontrar ablandador, intenta usar jugo de pia o solucin limpiadora para lentes de contacto. Qu es una enzima?

3. Ladea tu tubo de ensayo y lentamente vierte el alcohol (isoproplico al 7095% o alcohol etlico) sobre la pared del tubo de manera que forme una capa sobre la mezcla de arvejas. Sigue virtiendo hasta que tengas en el tubo aproximadamente la misma cantidad de alcohol que de mezcla de arvejas.

El ADN se elevar desde la mezcla de arvejas hasta la capa de alcohol. Puedes usar un palito de madera u otro tipo de gancho para arrastrar el ADN que est en el alcohol.

Qu es esa cosa pegajosa?

El alcohol es menos denso que el agua, por lo que flota en la parte superior. Debido a que se formaron dos capas separadas, toda la grasa y protena que rompimos en los dos primeros pasos y el ADN tiene que decir: "Mmmmm... a que capa debera de ir?" Esto es algo as como buscar en una recmara el lugar ms confortable para sentarse. Alguien escoger el silln, otros quizs escojan la mecedora. En este caso, la protena y la grasa irn al fondo, que es la capa acuosa, donde se sienten ms confortables, mientras que el ADN prefiere la capa superior, el alcohol. El ADN es una larga y pegajosa molcula a la que le gusta formar grumos.

iFelicitaciones! iAcabas de completar una extraccin de ADN! Ahora que has extrado exitosamente ADN de una fuente, ests listo para experimentar un poco ms all. Intenta trabajar con estas o con algunas de tus propias ideas:

Experimenta con otras fuentes de ADN. Qu fuentes producen ms ADN?, Cmo puedes compararlas entre si? Experimenta con distintos tipos de jabones y detergentes. El jabn en polvo funciona tan bien como el detergente lquido? y que hay del shampoo y el jabn lquido para el cuerpo?

Trata de saltarte alguno de los pasos o simplemente cmbialos. Te hemos dicho que necesitas realizar cada paso, pero es cierto? Avergualo por ti

mismo. Intenta cambiar la cantidad de alguno de los ingredientes utilizados.

Solamente las cosas vivas contienen ADN? Intenta extraer ADN de cosas que pienses que no deberan de tener ADN.

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