Evolucin de la heterostilia en Oxalis alpina. Responsables: Dr. Csar Domnguez Prez-Tejada y Dr. Juan Enrique Fornoni Agnelli.

Participantes: Dr. Francisco Molina Freaner - IE, Dr. Stephen Weller - Universidad de California, Irvine, Biol. Jos Rubn Prez Ishiwara - IE. Alumnos: Fernanda Baena - L, Adriana Lpez Villalobos - M. Paula Sosenski - D, . Jessica Prez Alquicira, D. Lneas de investigacin: Evolucion de los sistemas reproductivos en plantas, Evolucin Fenotpica, Evolucin de la sexualidad. Objetivos: (1) Reconstruir la historia evolutiva de las poblaciones de oxalis alpina en la region de las sky islands y (2) determinar la intensiddad de las fuerzas evolutivas que han propiciado la evolucion de la distilia a partir de la tristilia y sus consecuencias en la morfologia floral. La mayora de las especies de plantas con flores son hermafroditas y por lo tanto tienen el potencial de auto fertilizarse. Carlos Darwin (1900) fue el primero en demostrar los efectos nocivos de la endogamia y sugiri que esta presin selectiva ha jugado un papel fundamental en la evolucin de las plantas con flores. Aunque el tiempo mostr que Darwin tena razn, hoy sabemos que la diversificacin de los sistemas reproductivos de las Angiospermas es el resultado de un conjunto de fuerzas que interactan de manera compleja. Es indudable que los enfoques clsicos basados en la seleccin natural y la endogamia permanecen vigentes, sin embargo, ahora debemos agregar las aportaciones de la teora de Conflictos Genmicos (Domnguez 1995) y de la "Ecologa Histrica" (Avise 2000). Asimismo, el desarrollo de modelos que simulan la evolucin de los sistemas reproductivos (Charlesworth 1979. Frank 1990, Maurice 1992), y la utilizacin de nuevos mtodos para evaluarlos (Campbell 2000), permiten abordar preguntas que hace slo unos aos hubieran sido rresolubles. Aunque este campo de estudio se inici formalmente hace mas de 200 aos con el trabajo de Christian Konrad Sprengel (1793; en Vogel, S. 1996) la pregunta de cules son las fuerzas evolutivas involucradas en la diversificacin de los sistemas reproductivos de las Angiospermas contina siendo de gran inters y vigencia en la biologia evolutiva. La presente propuesta aborda esta pregunta y propone entender la dinmica evolutiva de uno de los sistemas reproductivos mas complejos, la tristilia, a travs de un estudio sobre la evolucin del sistema reproductivo heterostlico de Oxalis alpina (Oxalidaceae; seccin Inoxalis). Desde los tiempos de Darwin (1877) la heterostilia a servido como un sistema modelo para estudiar la evolucin de la reproduccin vegetal. La heterostilia es un sistema reproductivo caracterizado por un polimorfismo de dos (distilia) o tres (tristilia) morfos florales que generalmente estn asociados con un sistema de incompatibilidad (Barrett 1992). El morfo Pin de las especies distlicas tiene flores con estilos largos y anteras cortas, mientras que el morfo Thrum tiene anteras largas y estilos cortos (Fig. 1). Las cruzas que son capaces de producir semillas son aquellas que ocurren entre anteras y estigmas del mismo nivel. Darwin (1877) llam a estas cruzas "legtimas" debido a que stas son las nicas capaces de producir semillas. Las poblaciones de especies tristlicas estn compuestas por tres morfos. Como en el caso de las especies distlicas cada morfo es autoincompatible. Las cruzas compatibles ocurren entre las anteras y los estigmas que se encuentran al mismo nivel. Dado que hay tres morfos florales, hay seis categoras de polinizaciones legtimas. EI sistema de control gentico de la tristilia consiste de dos loci ligados (S y M), cada uno con dos alelos, y efectos epistticos de S sobre M (Barrett 1993). En teora, este sistema de control gentico debera producir poblaciones con frecuencias iguales de cada morfo (isopleta, Heuch 1979). El estudio de la heterostilia ha incluido aspectos muy diversos que van desde su origen evolutivo (Charlesworth y Chariesworth 1979, Charleworth 1979, Lloyd y Webb 1992), hasta la exploracin de las fuerzas selectivas que mantienen o modifican este sistema reproductivo. La heterostilia puede ser evolutivamente estable, evolucionar hacia la homostilia, la agamospermia, la dioecia, o variar entre la distilia y la tristilia (Weller 1976, Ganders 1979, Wyatt 1983, Richards 1986, Weller 1986, Berry st al. 1991, Barrett 1992, Weller 1992 y Weller et al. 1995). La labilidad evolutiva de la heterostilia, junto con su representacin en una gran cantidad de familias de Angiospermas (distilia

representada en 25 familias (Barrett 1992, y tristilia en 4 (Barrett 1993)), sugiere que sta ha surgido de manera independiente en ms de 20 ocasiones (Weller et al. 1995). La distilia y la tristilia ocurren en slo dos familias (Lythraceae y Oxalidaceae), y en ambos casos se piensa que la distilia se origin de la tristilia (Weller 1992). Antecedentes de la propuesta En esta investigacin proponemos estudiar las relaciones evolutivas entre la distilia y la tristilia en Oxalis alpina, una especie que se distribuye principalmente en Mxico pero que ocurre tambin en el suroeste de los Estados Unidos. Las poblaciones de O. alpina que ocurren en el lmite norte de su distribucin (Sonora, Arizona y Nuevo Mxico) son particularmente tiles para entender las relaciones evolutivas entre la distilia y la tristilia (Weller 1976, Weller 1986). Esta regin, conocida como Sky Islands (islas en el cielo), se caracteriza por la presencia de picos montaosos aislados por desiertos de baja elevacin. O. alpina slo se presenta en las partes altas de las montanas (por arriba de 2800 m), por lo que las poblaciones se encuentran aisladas unas de otras. La mayora de las poblaciones de la regin son tristlicas, aunque es posible encontrar una gran variacin en la frecuencia de los tres morfos. En general se observa que la prdida del morfo intermedio es lo que origina las poblaciones distlicas de esta especie. La frecuencia del morfo intermedio, aunque reducida, tiende a ser ms alta en las poblaciones de Sonora, mientras que las poblaciones distlicas estn concentradas en las montaas de Arizona (Weller 1979, Domnguez, Molina y Weller, datos sin publicar). La distribucin de las poblaciones sugiere que la distilia ha evolucionado en el lmite norte de la distribucin de esta especie. Es probable que la colonizacin de la regin por ancestros tristlicos ocurri durante el Pleistoceno cuando las condiciones eran ms fras y hmedas y esta especie ocupaba elevaciones menores. La sequa que sigui al Pleistoceno restringi la distribucin de O. alpina a los sitios elevados de las montaas y presumiblemente fragment y aisl a las poblaciones. De acuerdo con esto, el cambio climtico que sigui al Pleistoceno gener un archipilago montaoso en el desierto Sonorense que a su vez produjo una dinmica evolutiva equivalente a la de los archipilagos marinos. Por lo tanto, este fenmeno ofrece una oportunidad nica para estudiar las fuerzas evolutivas que han producido la variacin en el sistema reproductivo de las poblaciones de O. alpina desde su aislamiento a finales del Pleistoceno, y como estas fuerzas afectaron la evolucin del fenotipo floral. Una serie de estudios enfocados a determinar el sistema de incompatibilidad de O. alpina nos han permitido proponer una hiptesis sobre la evolucin de la distilia en esta especie (Weller 1976, Domnguez, Molna y Weller, datos sin publicar). Como mencionamos anteriormente en las especies tristlicas clsicas slo las polinizaciones legtimas (aquellas que ocurren entre anteras y estigmas del mismo nivel) son capaces de producir semillas. En estos casos las relaciones de incompatibilidad son simtricas ya que cada morfo floral es capaz de recibir y donar polen de y hacia los dos morfos restantes. En contraste, las reacciones de incompatibilidad de algunas poblaciones tristlicas de O. alpina se encuentran fuertemente modificadas. En esas poblaciones las reacciones de incompatibilidad de las anteras intermedias de los morfos corto y largo estn ausentes. Esto significa que las anteras intermedias del morfo corto (mS) son capaces de producir semillas con el estigma de las plantas de estilos largos (L) (cruza L x mS). Asimismo, la cruza entre las anteras intermedias del morfo largo (mL) con estigmas del morfo de estilos cortos (S) (S x mL) tambin produce semillas. Adems, la prdida de la reaccin de incompatibilidad de las anteras del morfo intermedio no parece tener ningn efecto sobre la produccin de semillas de las plantas de estilos intermedios (M x mS o M x mL). La modificacin de las reacciones de incompatibilidad de las anteras intermedias de los morfos largo (mL) y corto (mS) podra resultar en una desventaja selectiva para las plantas de morfo intermedio (M). Como mencionamos anteriormente, cada morfo tiene dos niveles de anteras, y en una situacin normal el polen de cada nivel solo produce semillas cuando alcanza los estigmas que se encuentran en su mismo nivel. La modificacin de las reacciones de incompatibilidad de O. alpina genera que las plantas de estilos cortos tengan dos vas de donacin de polen hacia las plantas de estilos largos (L x IS y L x mS). Una situacin similar ocurre con las plantas de estilos largos cuando donan polen hacia las de estilos cortos (S x sL y S x mL). En contraste, las plantas de estilos intermedios slo tienen una via de donacin de polen hacia las plantas de estilos cortos

(S x sM) o largos (L x lM). Estas observaciones sugieren que el polen del morfo intermedio podra competir desventajosamente con el de las plantas de estilos cortos y de estilos largos. Por otra parte, desde la perspectiva de la adecuacin femenina las plantas de estilos intermedios podran recibir menos polen que las de los otros dos morfos. La modificacin de la incompatibilidad produce que las plantas de morfo intermedio reciban polen de dos fuentes, mientras que las de los otros morfos tienen la capacidad de ser fecundadas con el polen de tres fuentes distintas. En otras especies tristllicas se ha observado que el xito reproductivo de los morfos es sensible a alteraciones en el flujo de polen y en la magnitud de la auto-incompatibilidad, indicando que ambos factores pueden afectar la frecuencia de los mortos en las poblaciones (Barrett y Glover 1985, Barrett et al. 1989). Hay al menos dos hiptesis alternativas para explicar la desaparicin del morfo intermedio; una relacionada con la actividad de los polinizadores y la otra con eventos azarosos como deriva gnica y efectos histricos. El principal polinizador de O. alpina es una abeja solitaria que colecta el polen (Heterosarus bakeri; Andrenidae) y que no muestra preferencia por alguno de los morfos florales, lo que sugiere que no produce flujos de polen asimtricos (Weller 1981). Por otra parte, los eventos azarosos no ofrecen una explicacin muy plausible, ya que es el morfo intermedio el que siempre se pierde en las poblaciones. No obstante, dado que existe un fuerte componente geogrfico (las poblaciones distlicas estn concentradas en las montaas de Arizona), es posible que la distilia se haya originado una sola vez y que despus coloniz las montaas adyacentes. Adems de las hiptesis relacionadas con el origen de la distilia en Oxalis alpina, existe otro grupo de preguntas evolutivas asociadas con las consecuencias de dicho evento. Una que destaca por su importancia tiene que ver con la dinmica selectiva que se produce por efecto de la prdida del morfo intermedio y que afecta la evolucin subsecuente de la morfologa floral. Tal como mencionamos anteriormente, el establecimiento de la distilia debera producir presiones de seleccin para incrementar la eficiencia de donacin y recepcin de polen en flores tpicas de un sistema tristlico que funcionan en ausencia de uno de los morfos. En teora, este ajuste debera ocurrir si hay suficiente variacin gentica (h2) y las covarianzas genticas son reducidas (Falconer y Mackay 1996). Esta prediccin requiere de examinar la existencia de correlaciones fenotpicas y genticas entre los caracteres que describen la morfologa floral y compararlas entre poblaciones tristlicas y distlicas. Con este propsito construiremos matrices de varianza-covarianza en las que resumiremos la variacin (fenotpica o gentica) de los atributos florales (diagonal principal), as como la asociacin entre ellos (elementos fuera de la diagonal principal). Esta herramienta es muy til, ya que si las covarianzas genticas son importantes podran restringir la evolucin de un carcter. Sin embargo, si la asociacin entre caracteres es dbil o nula los atributos que describen el fenotipo floral podran evolucionar de manera independiente. La integracin de esta informacin en la filogeografa permitir determinar la importancia del componente adaptativo y las correlaciones entre caracteres (evolucin de matrices fenotpicas) en la evolucin de la sexualidad de las plantas. Finalmente, toda la informacin que se obtenga durante el proyecto se integrar en un modelo terico que permitir predecir las frecuencias de los morfos florales en el equilibrio evolutivo. Como parmetros se utilizarn la probabilidad de flujo de polen (dentro y entre morfos), el nivel de compatibilidad (dentro y entre morfos), el nivel de depresin por endogamia por morfo, el xito reproductivo por morfo, y la frecuencia de los morfos. Obviamente, la respuesta a las preguntas que hemos planteado slo puede alcanzarse a travs de un enfoque que combine observaciones, experimentos de campo, modelacin, anlisis genticos, embriolgicos, y un anlisis histrico explcito. En resumen, la amplia variacin que se observa entre las poblaciones de O. alpina de la regin de las Sky Islands en las frecuencias del morto intermedio (cero a 33%) parece capturar todas las fases de la evolucin de un sistema reproductivo a otro (distilia a tristilia). Por lo tanto, estas poblaciones representan una oportunidad nica para investigar los detalles de esta transicin, y para evaluar diferentes hiptesis que expliquen no slo la prdida del morfo intermedio en Arizona y su disminucin en algunas poblaciones de Mxico, sino las consecuencias de dicha prdida en la evolucin de la sexualidad de las plantas.