Salud y Adolescencia Trabajo Prctico N 4

Anlisis del Cariotipo Humano Parte I

INTRODUCCIN
El cariotipo es el complemento cromosmico particular de un individuo y viene definido por el nmero y morfologa de los cromosomas en la metafase mittica. En la especie humana la dotacin cromosmica es de 2n = 46 (22 pares de autosomas y un par de cromosomas sexuales). Utilizando tcnicas de tincin estndar los cromosomas aparecen uniformemente teidos en metafase y se clasifican en 7 grupos de la A a la G atendiendo a su longitud relativa y a la posicin del centrmero que define su morfologa. Los autosomas se numeran del 1 al 22 ordenados por tamaos decrecientes y por la posicin del centrmero. Los cromosomas sexuales X e Y constituyen un par aparte, independientemente del resto. El objetivo de esta prctica es aprender a reconocer los cromosomas humanos, elaborar un cariotipo a
partir de una fotografa y saber determinar las anomalas cromosmicas ms frecuentes.

Desarrollo
La dotacin cromosmica normal de la especie humana se expresa de la siguiente forma: M: 46, XX V: 46, XY

En el cariotipo humano los cromosomas se ordenan de mayor a menor. Hay cromosomas grandes, medianos y pequeos. Al ordenar los cromosomas se constituyen 7 grupos atendiendo no slo al tamao sino tambin a la forma de las parejas cromosmicas, dentro del cariotipo humano podemos encontrar cromosomas metacntricos (tienen los dos brazos aproximadamente iguales en longitud), submetacntricos (con un brazo ms pequeo que otro) y acrocntricos (con un brazo corto muy pequeo). Concretamente en el cariotipo humano hay 7 grupos de cromosomas. Dentro de cada grupo vamos a ordenar y reconocer cada cromosoma con la ayuda de un idiograma: Figura 1: IDIOGRAMA HUMANO

Salud y Adolescencia Trabajo Prctico N 4

Un idiograma es la representacin esquemtica del tamao, forma y patrn de bandas de todo el complemento cromosmico, los cromosomas se sitan alineados por el centrmero, y con el brazo largo siempre hacia abajo. Los grupos que comprende el cariotipo humano son los siguientes: - Cromosomas grandes Grupo A, (cromosomas 1, 2 y 3), meta y submetacntricos Grupo B, (cromosomas 4 y 5), submetacntricos - Cromosomas medianos Grupo C, (cromosomas 7, 8, 9, 10, 11, 12 y adems los cromosomas X), Grupo D, (cromosomas 13, 14 y 15) acrocntricos - Cromosomas pequeos Grupo E, (cromosomas 16, 17 y 18) submetacntricos Grupo F, (cromosomas 19 y 20) metacntricos Grupo G, (cromosomas 21 y 22) acrocntricos Por acuerdo los cromosomas sexuales X e Y se separan de sus grupos correspondientes y se ponen juntos aparte al final del cariotipo. Todos los cromosomas autosmicos estn ordenados en orden submetacntricos

decreciente de tamao, excepto el cromosoma 21 que ahora se sabe que es ms pequeo que el 22

FIGURA 2: Imagen de un cariotipo humano normal correspondiente a una mujer.

Salud y Adolescencia Trabajo Prctico N 4

Figura 3: hombre

Imagen de Cariotipo Humano normal correspondiente a un

A
1 2 3 4 5

C
6 7 8 9 10 11 12

D
13 14 15 16 17 18

E
Cromosomas

Sexuales

19

20

21

22

Salud y Adolescencia Trabajo Prctico N 4

Actualmente se ha llegado a profundizar bastante en el conocimiento del cariotipo humano y se sabe que es relativamente frecuente la aparicin de anomalas cromosmicas. Por ejemplo, cerca de un 25% de los abortos ocurridos antes de la octava semana de gestacin tienen cariotipos anormales y un 0,5% de los recin nacidos presentan aneuploidas. Estas alteraciones no slo pueden producir anomalas en el propio individuo portador sino que, por tratarse de anomalas genticas, pueden transmitirse a la descendencia en el caso de que afecten a las clulas germinales. La deteccin anticipada de anomalas cromosmicas permite dictaminar las posibilidades de que la descendencia de una pareja portadora de una de ellas pueda presentarla o no. Para ello es preciso conocer el cariotipo de cada progenitor, lo que permite emitir un diagnstico de su posible descendencia, con lo que el individuo ser consciente de sus posibilidades. El estudio del cariotipo tiene tambin su aplicacin en el diagnstico prenatal. Es posible determinar la constitucin cromosmica del feto antes de su nacimiento pudiendo as observarse si presenta alguna anomala cromosmica detectable. Hoy en da, el diagnstico prenatal se practica a posteriori del inicio de la gestacin y los resultados positivos suelen plantear conflictos ticos y emocionales.

En el siguiente trabajo prctico analizaremos diferentes cariotipos humanos que presentan mutaciones cromosmicas que lo alejan del nmero diploide normal .
A continuacin se describen los casos ms comunes de mutaciones cromosmicas conocidas en el Homo sapiens sapiensMutaciones cromosmicas o estructurales Definicin Las mutaciones cromosmicas son modificaciones en el nmero total de cromosomas, la duplicacin o delecin de genes o de segmentos de un cromosoma y la reordenacin del material gentico dentro o entre cromosomas. Pueden ser vistas al microscopio, sometiendo a los cromosomas a la tcnica de bandas. De esta manera se podr confeccionar el cariotipo.

1. 2.

Las alteraciones de la dotacin diploide de cromosomas se denominan aberraciones cromosmicas o mutaciones cromosmicas. Hay 3 tipos de mutaciones cromosmicas: Reordenamientos cromosmicos: implican cambios en la estructura de los cromosomas (duplicacin, delecin, inversin y translocacin). Aneuploidas: supone un aumento o disminucin en el nmero de cromosomas. Poliploidia: presencia de conjuntos adicionales de cromosomas. La aneuploidia: da lugar a monosomas, trisomas, tetrasomas, etc. La poliploidia: dotaciones de cromosomas pueden tener orgenes idnticos o distintos, dando lugar a autopoliploides y alopoloploides, respectivamente. Las deleciones y duplicaciones pueden modificar grandes segmentos del cromosoma. Las inversiones y translocaciones dan lugar a una pequea o ninguna prdida de informacin gentica. Los lugares frgiles son constricciones o brechas que aparecen en regiones particulares de los cromosomas con una predisposicin a romperse en determinadas condiciones.

3.

Salud y Adolescencia Trabajo Prctico N 4

El estudio de las series normales y anormales de cromosomas se conoce como citogentica.

Variacin en el nmero de cromosomas En las clulas somticas hay un mecanismo que inactiva a todos los cromosomas X menos uno, la ganancia o perdida de un cromosoma sexual en genoma diploide altera el fenotipo normal , dando lugar a los sndromes de Klinefelter o de Turner, respectivamente. Tal variacin cromosmica se origina como un error aleatorio durante la produccin de gametos. La no disyuncin es el fallo de los cromosomas o de las cromatidas en separarse y desplazarse a los polos opuestos en la meiosis. Cuando esto ocurre se desbarata la distribucin normal de los cromosomas en los gametos. El cromosoma afectado puede dar lugar a gametos anormales con dos miembros o con ninguno. La fecundacin de estos con un gameto haploide normal da lugar a zigotos con tres miembros (trisoma) o con solo uno (monosoma) de este cromosoma. La no disyuncin da lugar a una serie de situaciones aneuploides autosmicas en la especie humana y en otros organismos. Sndrome de Klinefelter El sndrome de Klinefelter se considera la anomala gonosmica ms comn en los humanos. Los afectados presentan un cromosoma X supernumerario lo que conduce a fallo testicular primario con infertilidad e hipoandrogenismo. A pesar de la relativa frecuencia del padecimiento en recin nacidos vivos, se estima que la mitad de los productos 47, XXY se abortan de manera espontnea. Sndrome de Turner El sndrome de Turner o Monosoma X es una enfermedad gentica caracterizada por presencia de un solo cromosoma X. Fenotpicamente son mujeres (por ausencia de cromosoma Y). A las mujeres con sndrome de Turner les falta parte o todo un cromosoma X. La falta de cromosoma Y determina el sexo femenino de todos los individuos afectados, y la ausencia del segundo cromosoma X determina la falta de desarrollo de los caracteres sexuales primarios y secundarios. Esto confiere a las mujeres que padecen el sndrome de Turner un aspecto infantil e infertilidad de por vida. Aneuploida La aneuploida es la alteracin en la cantidad de uno de los tipos de cromosomas homlogos. Monosoma La prdida de un cromosoma da lugar a un complemento 2n -1 y se llama monosoma. La incapacidad para sobrevivir de los individuos monosmicos en muchas especies animales es desconcertante, ya que al menos hay una copia de cada gen en el homlogo restante. Una explicacin posible se refiere al desenmascaramiento de letales recesivos que son tolerados en los heterocigotos que llevan los correspondientes alelos silvestres. Si un organismo heterocigoto para un solo gen letal recesivo pierde el cromosoma homlogo que lleva el alelo normal, el cromosoma desapareado dar lugar a la muerte del organismo. Otra explicacin posible es que la informacin gentica en el desarrollo temprano est regulada cuidadosamente, de tal manera que se requiere un delicado equilibrio de los productos gnicos para asegurar un desarrollo normal Ejemplo: maz, tabaco, hierba del asno y entre otras plantas. Tales plantas monosmicas son casi siempre menos viables que las diploides de donde provienen. Monosoma parcial en la especie humana En la especie humana no se han documentado monosomas autosmicas ms all del nacimiento. Los individuos con tales dotaciones cromosmicas, que no sobreviven al desarrollo embrionario y fetal. Sin embrago, hay casos de supervivientes con monosomas parciales, en donde se pierde solo parte de un cromosoma (deleciones segmentales). Jerome LeJeune en 1963, describi los sntomas clnicos del

Salud y Adolescencia Trabajo Prctico N 4

sndrome del Cri-du-Chat. Este sndrome est asociado con la perdida de una pequea parte del brazo corto del cromosoma 5. Trisoma ( 2n + 1) La trisomia implica la adicin de un cromosoma a un genoma diploide. Los efectos de las trisomas van en paralelo a los de las monosomas. La adicin de un cromosoma extra da lugar a individuos algo ms viables que en el caso de la prdida de un cromosoma. La variacin de los cromosomas sexuales del tipo trisomia tiene un efecto menos grave en el fenotipo que las variaciones autosmicas. En la especie humana, la adicin de u cromosoma extra X o Y a una mujer o un varn da lugar a individuos viables que presentan diversos sndromes. La adicin de un autosoma grande a la dotacin diploide tiene graves efectos y normalmente es letal durante su desarrollo. Tanto en vegetales como en animales, las trisomas se pueden detectar mediante observacin citolgica de la divisin meitica. Ya que hay tres copias de una de los cromosomas, las configuraciones de apareamiento son normalmente irregulares. En una regin dada a lo largo del cromosoma slo dos de los tres homlogos pueden establecer sinapsis, aunque regiones diferentes del tro pueden estar apareadas. Cuando estn en sinapsis tres copias de un cromosoma, la configuracin se denomina trivalente. En algunos casos, en lugar de un trivalente se pude encontrar un bivalente y un univalente (un cromosoma no emparejado) en la primera divisin meitica. As, la meiosis produce gametos con una composicin cromosmica de (n + 1), que pude perpetuar la situacin trismica. Sndrome de Down La nica trisoma autosmica de la especie humana de la que sobrevive un nmero significativo de individuos ms all del ao despus del nacimiento fue descubierta por Langdon Down en 1866. El sndrome es consecuencia de la trisoma del cromosoma 21, un cromosoma del grupo G1, y se llama sndrome de Down, o simplemente trisoma del 21. Los enfermos con sndrome de Down presentan estatura baja, cabeza redondeada, frente alta y aplanada, y lengua y labios secos y fisurados. Presentan epicanto, pliegue de piel en la esquina interna de los ojos. Las palmas de las manos muestran un nico pliegue transversal, y las plantas de los pies presentan un pliegue desde el taln hasta el primer espacio interdigital (entre los dos primeros dedos). En muchos casos padecen cardiopatas congnitas y tienden a desarrollar leucemia. El cociente de inteligencia (CI) vara desde 20 hasta 60 (una inteligencia media alcanza el valor 100), pero con procedimientos educativos especficos y precoces, algunos enfermos consiguen valores ms altos. La incidencia global del sndrome de Down se aproxima a uno de cada 700 nacimientos, pero el riesgo vara con la edad de la madre. La incidencia en madres de 25 aos es de 1 por 2000 nacidos vivos, mientras que en madres de 35 aos es de 1 por cada 200 nacimientos y de 1 por cada 40 en las mujeres mayores de 40 aos. Para detectar la anormalidad cromosmica durante el periodo prenatal se pueden emplear la amniocentesis y la biopsia de vellosidades corinicas. Algunas alteraciones sanguneas maternas pueden sugerir la gestacin de un hijo con sndrome de Down: niveles bajos de alfafetoprotena y niveles anormales de estriol no conjugado y [[gonadotrofina corinica humana]. La anomala cromosmica causante de la mayora de los casos de sndrome de Down es la trisoma del 21, presencia de tres copias de este cromosoma. Por tanto, los pacientes presentan 47 cromosomas en vez de 46 (cifra normal del genoma humano) en todas sus clulas. Esta anomala es consecuencia de la fertilizacin de un vulo patolgico de 24 cromosomas por un espermatozoide normal de 23 cromosomas, aunque tambin a veces la anomala es generada por el espermatozoide. En una clula germinal, la pareja de cromosomas 21 se mantiene unida y pasa a uno slo de los dos vulos o espermatozoides derivados de ella. En un tipo ms raro de sndrome de Down, producido por translocacin, parte del material gentico de uno de los cromosomas 21 se queda adherido al otro de los cromosomas 21. Algunos enfermos presentan alteraciones cromosmicas slo en algunas clulas de su organismo, no en todas; en este caso se dice que presentan un mosaicismo. Sndrome de Patau Klaus Patau y sus colaboradores (1960) observaron un nio con graves malformaciones del desarrollo y un cariotipo de 47 cromosomas. El cromosoma extra tena un tamao medio, uno de los acrocntricos del grupo D, que ahora se denomina cromosoma 13. La trisoma del 13, que se denomina sndrome de Patau (47, +13). Los nios se cree que son sordos, tienen una caracterstica fisura labio-palatina y polidactilia. Las autopsias han revelado malformaciones congnitas en muchos sistemas orgnicos, indicativas del desarrollo anormal que se produce a las cinco o seis semanas de gestacin. El promedio de

Salud y Adolescencia Trabajo Prctico N 4

supervivencia de estos nios es de unos tres meses. La edad promedio de los padres de nios afectados es mayor que la de los padres de los nios normales, pero no es tan alta como la edad promedio materna en los casos del sndrome de Down. Este caso slo ocurre en 1 de cada 19.000 nacimientos. Sndrome de Edwards

John H. Edwards y sus compaeros (1960) publicaron el caso de un nio trismico para un cromosoma del grupo E, que ahora se sabe es el cromosoma 18. Esta aberracin de la trisoma del 18 (47, +18) tambin se denomina sndrome de Edwards. El fenotipo de estos nios, ilustra que la presencia de un autosoma extra produce malformaciones congnitas y una menor esperanza de vida. Estos nios son ms pequeos de lo normal. Sus crneos estn alargados segn el eje antero-posterior y sus orejas son deformes y situadas ms bajo de lo normal. El cuello ancho, dislocacin congnita de la cadera y mentn deprimido. El promedio de supervivencia es menos de cuatro meses. La muerte se produce normalmente por neumona o fallo cardaco. La edad media materna es alta, los bebs con el sndrome de Edwards son preponderantemente mujeres.
MATERIALES Y MTODOS Materiales Hoja en blanco Cromosomas sueltos Goma de pegar

Mtodos Ordenar los cromosomas en la hoja en blanco formando el cariotipo correcto en cada caso. Luego responda el siguiente cuestionario

Preguntas de la prctica:
1. Lea nuevamente la introduccin del presente trabajo prctico y determine que anomala presenta el cariotipo entregado. Explique como lleg a la conclusin sobre la anormalidad que presenta el cariotipo analizado y describa que problemas presentan los individuos con esas anormalidades 2.- Qu caractersticas permiten diferenciar, en general, unos cromosomas de otros? 3.- Qu clulas del organismo llevan el cariotipo diploide completo? 4.- Qu mecanismos cromosmicos producen anomalas del cariotipo humano? 5.- Se manifiestan siempre las alteraciones cromosmicas en el fenotipo del individuo que las transmite? Explique. 6. Cmo se realiza un cariotipo y en qu momento de la vida celular debe obtenerse la muestra para realizar el estudio?

Parte II

Salud y Adolescencia Trabajo Prctico N 4

Observacin de ncleos en mitosis en clulas vegetales y animales 1. Se observarn preparados histolgicos permanentes de clula vegetales con ncleos en diferentes etapas mitticas. 2. Se realizara el montaje y observacin de un preparado fresco de clulas animales.

Materiales y mtodos. Montaje y preparacin de clulas animales. 1. Raspe la cara interna de las mejillas con una paleta de plstico previamente desinfectada. 2. Extienda el resultado del raspado sobre un cubreobjetos coloque etanol. 3. Agregue unas gotas de colorante (hemotoxilina) y coloque el cubreobjetos. 4. Observe al microscopio y dibuje. Nota: Los ncleos de las clulas femeninas presentan una zona de condensacin en el ncleo cercana a la periferia conocida como heterocromatina. Esta regin tambin llamada corpsculo de Barr es cromatina inactiva y slo aparece en los ncleos femeninos

Bibliografa Mackean, D. G. , 1996. GCSE Biology. Ed. J. Murray Pag 10 Web sites http://es.wikipedia.org/wiki/Mutaci%C3%B3n consulta 22/08/09 6.52 p.m.