UNIVERSIDADE IGUAU CAMPUS V (ITAPERUNA) CURSO: FARMCIA DISCIPLINA: ANLISES CLNICAS MDULO: PARASITOLOGIA

1 Aula 1 Apostila; Exame parasitolgico de fezes pelo mtodo de Hoffmann e mtodo de Willis; Exame parasitolgico de sangue por gota espessa e camada delgada; preparao de lminas; colorao com lugol (exame de fezes); colorao com pantico (camada delgada); focalizao de lminas; visualizao de protozorios e helmintos disponveis (usar segunda apostila). 2 Aula reviso da visualizao microscpica de protozorios e helmintos (uso da segunda apostila). 3 Aula avaliao; dever conter diagnstico (denominao cientfica correta do parasito), forma evolutiva (forma evolutiva em que se encontra o parasito focalizado) e 3 caractersticas que permitam reconhecer o parasito em questo.

PARASITOLOGIA APOSTILA I A amostra de fezes normal contm bactrias, celulose e outros alimentos no digeridos, secrees gastrintestinais, pigmentos biliares, clulas provenientes das paredes intestinais, eletrlitos e gua. So muitas as espcies de bactrias que constituem a flora normal dos intestinos e contribuem para o processo digestivo; o seu metabolismo que produz o forte odor caracterstico das fezes. O intestino recebe enzimas digestivas, secretas principalmente pelo pncreas, que agem na metabolizao e na absoro de protenas, carboidratos e gorduras. So elas: tripsina, quimiotripsina, aminopeptidase e lpase. Os sais biliares contribuem para a digesto das gorduras, e acredita-se que o pigmento biliar, na forma de urubilina, seja responsvel pela cor castanha normal das fezes; conseqentemente, a obstruo do fluxo de bile para o intestino produzir fezes claras e gordurosas. Exame Exame parasitolgico de sangue Mtodo Direto gota espessa Camada delgada Utilizao verifica-se os parasitos vivos, movimentando-se identificao da forma e espcie de vrios parasitos diagnstico epidemiolgico

Exame

Princpio sedimentao espontnea sedimentao por centrifugao flutuao espontnea flutuao por centrifugao Hidrotermotropismo positivo fita gomada

Mtodo Hoffmann MIFc Willis Faust Baermann-Moraes, Rugai Graham

Forma Observada cistos, ovos cistos, ovos ovos leves (ancilostomdeos) ovos leves (ancilostomdeos) larvas ovos (Enterobius vermicularis)

Exame Parasitolgico de fezes

Mtodos mais utilizados no laboratrio clnico: - Exame parasitolgico de sangue: Direto: A gota de sangue coletada no centro de uma lmina, coberta com lamnula e examinada imediatamente aps, pois a coagulao rpida. Caso queira retardar a coagulao, pode adicionar uma ou duas gostas de salina. Gota espessa: Colocar 5 mm3 de sangue na lmina, espalhar, com auxlio de outra lmina, essa gota numa rea de 1 cm2 e deixar secar ao ar durante seis a 36 horas; Corar pelo pan-tico e deixar secar. Camada delgada: Colocar uma gota de sangue na extremidade direta de uma lmina e com uma extensora, segurar por cima coma mo direita e, com uma inclinao de 45, encostar adiante da gota; deixar a gota se espalhar pela borda da extensora e puxar a gota at o fim da lmina; secar por agitao vigorosa imediatamente; corar pelo pan-tico e deixar secar.

- Exame parasitolgico de fezes: Hoffmann: Colocar aproximadamente 2g de fezes em um frasco com cerca de 5mL de gua e homogeneizar; Filtrar a suspenso para um clice cnico, utilizando uma peneira e uma gaze dobrada em quatro; Lavar os detritos retidos com 200mL de gua e utilizando o basto de vidro; Completar o volume do clice com gua; Deixar essa suspenso em repouso durante duas a 24 horas; Observar o sobrenadante: se estiver muito turvo, trocar a gua e deixar em repouso mais 60 minutos (cuidado para no desprezar o sedimento; despreza-se somente o sobrenadante); se o sobrenadante estiver lmpido, colher a amostra. Para colher, pode-se fazer dois processos: 1) colher o sedimento utilizando uma pipeta; 2) desprezar o sobrenadante, homogeneizar o sedimento e recolher uma gota deste. O segundo processo mais recomendado. Aps colocar uma gota do sedimento na lmina, corar com uma gota de lugol e cobrir com lamnula. Examinar em objetivas de 10x e/ou 40x. Recomenda-se examinar no mnimo duas lminas de cada amostra. Willis: Colocar 10g de fezes em um frasco. Diluir as amostras em soluo saturada de acar ou sal (NaCl). Completar o volume at a borda do frasco. Colocar na boca do frasco uma lmina, que devera estar em contato com o lquido. Deixar em repouso por cinco minutos. Aps o tempo de repouso, retirar rapidamente a lmina, voltando a parte molhada para cima. Examinar ao microscpio com objetiva de 10x e/ou 40x; O uso de lamnula facultativo.

Outras provas freqentes no exame de fezes 1- Exame macroscpico a) Cor e consistncia: a consistncia das fezes pode ser aquosa, pastosa, formada ou dura. Aparncia Preta Possvel Causa Hemorragia da parte superior do tubo digestivo; Terapia com ferro; Carvo; Bismuto (anticidos). Hemorragia da parte inferior do tubo digestivo; Compostos de piridina; Colorao por beterraba e alimentos; Uso de rifampicina. Obstruo do ducto biliar; Uso de brio. Ruibarbo. Biliverdina; Verduras; Antibiticos. Esteatorria. Estenose intestinal. Constipao; Neoplasia; Colite.

Vermelha

Amarelo claro, branca, cinza Amarela Verde Volumosas/espumosas Em forma de fita Muco

2- Microscpico a) Pesquisa de leuccitos usado para determinar a causa da diarria. Observa-se leuccitos sempre que as paredes intestinais so afetadas como ocorre na colite ulcerativa e na infeco por agentes bacterianos patognicos; No so observados em infeces por bactrias que causam diarria por produo de toxinas (e no por invaso intestinal), por vrus e parasitas. A invaso por agentes patognicos indicada pela presena de apenas trs neutrfilos p/c. As amostras podem ser examinadas a fresco ou coradas com azul de metileno ou Wright. b) Parasitolgico 3- Bioqumico a) Sangue oculto usado para deteco de sangue. Usa-se as seguintes substncias bioqumicas para esta reao: benzidina, orto-toluidina e goma guaiacol. Todas elas utilizam a atividade pseudoperoxidase da hemoglobina que reage com o perxido de hidrognio para oxidar um composto incolor e convert-lo em um composto corado. A atividade pseudoperoxidase, chave para esta reao, tambm est presente na hemoglobina animal, em certos vegetais e em algumas bactrias intestinais. Atualmente, provas mais sensveis para deteco de sangue oculto como a prova imunolgica (especfica para hemoglobina humana) e quantitativa (detecta hemoglobina e porfirina) vem substituindo o primeiro mtodo citado.

b) Anlise de gordura fecal: em casos de suspeita de esteatorria ou para monitorar pacientes em tratamento de distrbios de absoro. c) Tripsina (-1-anti-tripsina): protena resistente degradao pelas enzimas digestivas, sendo utilizada como marcador endgeno de perda protica pelo tubo digestivo. As patologias que causam perda protica pelo intestino so classificadas como enteropatias com perda protica. d) Carboidratos (substncias redutoras): importatne na avaliao da diarria em lactentes e til no diagnstico das deficincias enzimticas, sobretudo de lactase, onde a m absoro dos diferentes acares determina o aparecimento de substncia redutoras nas fezes. Pode ser acompanhada da determinao do pH (que nas fezes normais varia de 7 a 8) que diminui quando a utilizao de carboidratos pelas bactrias intestinais elevada.

PARASITOLOGIA APOSTILA II I- Protozorios 1- Giardia lamblia Cisto: forma ovalada, presena de ncleos, axonema e corpo parabasal;

Trofozoto: forma piriforme, regio anterior mais larga, dois ncleos do tipo vesiculoso e axonema que divide o flagelado ao meio.

2- Entamoeba coli Cisto: presena de membrana cstica, apresenta de 4 a 8 ncleos, forma circular.

3- Entamoeba histolytica/dispar Cisto: presena de membrana cstica, apresenta at 4 ncleos, forma circular.

Trofozoto: apresenta grande ncleo com cariossomo central e puntiforme e hemcias no citoplasma.

4- Trichomonas vaginalis Trofozota: tem forma arredondada, com ncleo, blefaroplasto, de onde saem dois dos quatro flagelos, membrana ondulante que se estende at a metade do corpo do flagelado. observado em secreo vaginal e uretral.

II- Helmintos 1- Platelmintos b) Taenia sp No se diferencia a espcie (solium ou saginata) pela visualizao do ovo, por isso usa-se o termo sp aps o nome do gnero (espcie desconhecida). Tem estrutura sub-esfria com dupla membrana, apresenta trabculas entre estas membranas dando-lhe aparncia raiada e embrio hexacanto no interior da membrana interna.

c) Schsitosoma mansoni Apresenta grande espculo lateral presente na regio mais dilatada do ovo. Presena de larva miracdio no interior do ovo.

2- Nematelmintos a) Ascaris lumbricoides Presena de 3 membranas: 1) interna, delicada, de natureza lipdica; 2) mediana, grosseira, denominada casca; 3) externa, de natureza albuminide, de morfologia mamilonada, caracterstica do ovo corticado. Presena de larva no interior do ovo (frtil); O ovo infrtil no apresenta larva em seu interior; Forma arredondada (ovo frtil); Forma elptica (ovo infrtil).

b) Trichuris trichiura Ovo de formato elptico; Apresenta salincias nas regies polares (oprculos); Observa-se presena de massa germinativa no interior do ovo (no embrionado).

c) Enterobius vermicularis Ovo em forma de D; Envoltrio de dupla membrana; Presena de larva no interior do ovo.

d) Ancilostomdeo Compreende ovos de Ancylostoma duodenale e Necator americanus; Apresenta contorno ovalado; Presena de duas membranas e no interior massa germinativa, constituda pelos blastmeros.

e) Strongyloides stercoralis Estrutura presente no exame de fezes: larva filariide; Apresenta esfago longo e retilneo, terminando na metade do corpo da larva; Presena de vestbulo bucal curto; Presena de cauda com entalhe.