CULTIVO DE SECRECIN FARINGEA Y EXUDADO DE HERIDAS

GENERALIDADES

MICROBIOLOGA DE LA SECRECIN FARNGEA. Los microorganismos que causan enfermedad en el tracto respiratorio superior, la nasofaringe y faringe deben entrar en contacto con el epitelio de la mucosa, adherirse y multiplicarse. N. meningitidis, Bordetella pertussis, Corynebacterium diphtheriae y muchos virus son transportados por aerosoles formados por las secreciones y llegan al nuevo husped mediante contacto ntimo, condiciones de hacinamiento o de falta de higiene. Los Mycoplasma y Streptococcus pyogenes con frecuencia se adquieren tambin de esta manera. Aunque se puede aislar gran nmero de especies de bacterias y hongos a partir de muestras tomadas del tracto respiratorio superior, son muy pocos los microorganismos que provocan una verdadera patologa en esta rea. El S. pyogenes o estreptococo betahemoltico del grupo A es la bacteria ms comnmente aislada; este agente causa secuelas postestreptoccicas como fiebre reumtica aguda y glomerulonefritis. No es infrecuente que el microorganismo provoque infecciones supurativas (piognicas) de los senos paranasales y del odo medio y celulitis como una secuela pigena secundaria luego de un episodio de faringitis. En consecuencia, la faringitis estreptoccica usualmente se trata para prevenir tanto las secuelas supurativas como no supurativas, as como para disminuir la morbilidad. Tambin se han observado casos poco frecuentes de faringitis debidos a estreptococos grupos B, C y G y a miembros no hemolticos de estos grupos (incluyendo el grupo A). Si bien una faringitis puede deberse a otras bacterias adems de los estreptococos grupo A, esto ocurre con muy poca frecuencia y por lo tanto los laboratorios no deben investigar otros agentes, excepto en circunstancias especiales y luego de una discusin con el clnico que atiende al paciente. Si bien mucho menos comn que la faringitis estreptoccica, el C. diphtheriae aun puede ser aislado de pacientes con dolor de garganta o con enfermedades sistmicas ms severas, otros Corynebacterium (C. ulcerans, C. hemolyticum y C. pyogenes) pueden provocar faringitis con formacin o no de membrana o exantema asociado, pero estas infecciones son poco frecuentes. Neisseria meningitidis puede ser aislada de la nasofaringe de

portadores aunque no causa patologa en esta localizacin, pero Neisseria gonorrhoeae puede provocar una faringitis exudativa con predominio sobre todo en los hombres homosexuales. En un proceso gonoccico diseminado el organismo tambin puede ser aislado de garganta. La faringitis gonoccica no siempre es sintomtica. Aunque Haemophylus influenzae, Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae se aslan con frecuencia de cultivos de materiales de nasofaringe y de garganta no se ha demostrado que causen faringitis, excepto en el caso de S. aureus en el paciente inmunosuprimido. La condicin de portador de alguno de estos microorganismos as como de N. meningitidis puede tener importancia clnica para algunos pacientes o sus contactos . En particular, en pacientes con fibrosis qustica, los cultivos de materiales de garganta pueden permitir el aislamiento de agentes etiolgicos de neumona que no pueden ser recuperados de esputo debido al sobrecrecimiento de las otras bacterias presentes. Como en todas las situaciones dudosas, la comunicacin entre el microbilogo y el clnico aclara la importancia de estos aislamientos. En el cultivo de muestras de la zona anterior de los orificios nasales a menudo se puede encontrar S. aureus. La frecuencia de portadores de este microorganismo es especialmente alta en el personal del rea de salud. Mycoplasma pneumoniae puede causar faringitis de escasa aparicin, siendo aislada entonces de hisopos de nasofaringe. Un hisopo de este tipo tambin es el espcimen de eleccin para el aislamiento de Chlamydia trachomatis a partir de casos de neumona, especialmente en lactantes muy pequeos. Diversos virus pueden causar faringitis o rinitis exudativa, entre ellos los virus rino, adeno, sincicial respiratorio, influenza, parainfluenza, corona, coxsackie, de la citomegalia y Epstein-Barr. Adems, el H. influenzae (y en ocasiones otros microorganismos) causan una epiglotitis grave que puede llevar rpidamente a la obstruccin de las vas areas si no es tratada. La accin conjunta de cierta flora oral anaerbica causa una faringitis exudativa denominada angina de Vincent que puede ser caracterizada por una lesin membranosa del tipo de la difteria (el olor desagradable que se presenta en los pacientes con angina de Vincent diferencia un sndrome de otro). En este sndrome son comunes los abscesos peritonsilares. La evidencia disponible sugiere que Fusobacterium necrophorum es el patgeno clave de este cuadro, pero tambin pueden estar implicados otros anaerobios.

Los pacientes inmunosuprimidos, incluyendo los neonatos, pueden desarrollar una

candidiasis oral denominada muguet. El muguet oral puede extenderse y producir una esofagitis, un hallazgo comn en pacientes con SIDA u otras inmunodeficiencias. En los pacientes granulocitopnicos, las Enterobacteriaceae, S. aureus o Candida pueden provocar mucositis oral o faringitis, que se manifiesta por edema, dolor de garganta y en algunos casos por exudado o ulceracin. El virus herpes simple causa lesiones dolorosas en la boca y la orofaringe, otra condicin que predomina entre los pacientes inmunosuprimidos. El rinoescleroma es una forma rara de una infeccin crnica, granulomatosa de los pasajes nasales, incluyendo los senos y en ocasiones la faringe y laringe, asociada con la Klebsiella rhinoscleromatis. Est caracterizada por obstruccin nasal que se desarrolla lentamente debido a un crecimiento de tipo tumoral con diseminacin local. Tambin puede recuperarse otra especie, la Klebsiella ozaenae de infecciones del tracto respiratorio superior. Este microorganismo contribuira a una condicin denominada ocena, caracterizada por una descarga crnica mucopurulenta (con frecuencia de olor ftido debido a infeccin secundaria por anaerobios).

MICROBIOLOGA DEL EXUDADO DE HERIDAS Las heridas son injurias a tejidos del cuerpo causadas por eventos tales como, quemaduras, perforaciones y mordeduras animales y humanas. Las heridas o abscesos tambin ocurren dentro de los tejidos del cuerpo como resultado de la ciruga o procedimientos dentales. Las heridas llegan a infectarse cuando los microorganismos del ambiente externo o de dentro del cuerpo de la persona, entran a la herida abierta y se multiplican. Si una herida est infectada sta se presenta enrojecida, dolorosa, inflamada y drenando pus; un proceso febril luego de un procedimiento quirrgico indica una infeccin en el lugar de la ciruga. La colonizacin de heridas es frecuentemente polimicrobiana e involucra numerosos microorganismos que son potencialmente patognicos por lo que implica siempre algn riesgo el llegar a infectarse. Las bacterias involucradas pueden ser agrupadas en dos categoras aerobias y anaerobias. Las heridas profundas, son ambientes ideales para que desarrolle una infeccin anaerobia siendo el mal olor, la produccin de gas o gangrena en el lugar de la infeccin, signos de un proceso infeccioso causado por una bacteria anaerobia. Los cultivos de rutina tpicamente slo descubren bacterias aerobias. Si el mdico pide al

laboratorio incluir cultivos para anaerobios, una porcin de la muestra ser sembrada en placas de cultivo o en tubos con caldo nutritivo apropiado e incubados en una estufa sin oxgeno. Las infecciones de piel pueden ser primarias o secundarias. Las infecciones primarias tienen caractersticas propias y son iniciadas por un nico organismo, y usualmente ocurren sobre la piel normal. Son frecuentemente causados por Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, y bacterias corineformes. Los ejemplos ms comunes son imptigo, foliculitis y eritrasma. Las infecciones sistmicas pueden tambin tener manifestaciones en la piel. Las infecciones secundarias dan lugar a una piel enferma como una condicin superimpuesta. Intertrigo y las infecciones de los tejidos de los dedos de los pies son ejemplos de infecciones secundarias. Para mejorar la curacin y prevenir la diseminacin de la infeccin a otros tejidos del cuerpo, los microorganismos infectantes deben ser eliminados. Un cultivo de las heridas descubre no slo que tipo de microorganismo es el causante de la infeccin sino que tambin mediante una prueba de susceptibilidad a antibiticos nos indica cul es el mejor para eliminarlo. En caso se sospeche que la herida est infectada con mohos o levaduras deber realizarse un cultivo para hongos as como las pruebas bioqumicas y tinciones que son utilizadas para la identificacin mictica. Microorganismos ms inusuales como Mycobacterium leprae pueden ser causa de infecciones de heridas, generalmente la solicitud para la investigacin de este microorganismo debe ser realizada por el mdico. Los resultados de la coloracin Gram deben estar disponibles el mismo da o en menos de una hora si as es requerido por el mdico. Se hace necesario que al da siguiente se tenga un reporte preliminar, ste dir si se ha encontrado algn microorganismo y cul es su reaccin al Gram. El reporte final usualmente est disponible en tres das el cual incluye una identificacin completa un estimado de la cantidad de microorganismos, ms una lista de los antibiticos para los cuales son sensibles. Cuando se realizan cultivos para hongos o bacterias anaerobias el anlisis puede tomar de dos a tres semanas. El cultivo de heridas es llamado tambin cultivo de tejidos blandos, cultivo de abscesos o cultivo de tejidos y sensibilidad.

OBJETIVO Confirmar la sospecha de infeccin nasofarngea y determinar al agente causante. Aislar e identificar el o los agentes etiolgicos de una herida infectada. Determinar la sensibilidad o resistencia de las bacterias aisladas a diferentes agentes antimicrobianos. METODOLOGA DE ESTUDIO DE LA SECRECIN FARNGEA: MATERIALES Muestra de secrecin nasofarngea Medio de transporte Amies con gel de agar y carbn Placas con Agar sangre, Chocolate, Sangre Azida, Mac Conkey, Manitol Salado, y Sabouraud con Cloranfenicol. Tubo con medio Tioglicolato. Batera bioqumica. Batera Gram. Lminas porta y cubre objeto Solucin salina estril. Hisopos de rayn.

RECOLECCIN DE LA MUESTRA

Tomar la muestra con hisopo de rayn y si permanece hmedo no deben tomarse otras precauciones para muestras que sern inoculadas dentro de las 4 h de la recoleccin. Luego de este perodo debe agregarse el medio de transporte indicado para mantener la viabilidad y evitar el sobrecrecimiento de los contaminantes. Para la deteccin de B. pertussis la mejor muestra es el aspirado de secreciones nasofarngeas recogidas con un bulbo de goma. Los materiales para aislamiento de B. pertussis debieran ser inoculados directamente en los medios de cultivo frescos,

al lado de la cama del enfermo; si esto es imposible, es aceptable el transporte no ms de 2 h. Se coloca la cabeza del paciente en hiperextensin y se iluminan las fauces en forma conveniente. Con hisopo estril se frotan ambas amgdalas (o ambos pilares en pacientes amigdalectomizados) . Si existiera un exudado visible se debera tratar de tocarlo con la punta del hisopo. En cualquier caso se deber evitar el contacto del hisopo con el paladar o la lengua, es por ello que resulta imprescindible ayudarse con un bajalenguas. El hisopo se deber colocar en un tubo con gotas de solucin fisiolgica estril o con medio de transporte (Amies con gel de agar y carbn). Como alternativa recomendada slo ante una emergencia se puede conservar seco en un tubo de ensayo estril. El hisopo seco puede conservar la viabilidad de los estreptococos -hemolticos en un alto porcentaje de casos. La conservacin de estas muestras se deber efectuar a temperatura ambiente durante el menor tiempo posible. METODOLOGA DE ESTUDIO DE LOS EXUDADOS DE HERIDAS MATERIALES Muestra de exudado de heridas Placas con Agar Sangre, Agar MacConkey y Agar Manitol Salado. Tubos con Medio Tioglicolato fluido. Hisopos de rayn con medio de transporte Batera Gram Batera Bioqumica Lminas porta y cubre objeto.

- Solucin Salina estril Solucin KOH Jeringa estril

RECOLECCIN DE LA MUESTRA.

Se prefiere que la muestra sea un aspirado o una biopsia. Cuando sea posible, tome un trozo de pared del absceso, si no lo es tome una muestra de pus de la herida.

No est permitido tocar el rea circundante a la herida debido a que muchos microorganismos viven en la piel. Para este fin se debe limpiar primero la superficie de la lesin utilizando alcohol. Si hubiere costra sobre la herida sta debe ser retirada con la hoja de un bistur. Usando una jeringa se succiona tanto pus como sea posible a partir de la herida, si la muestra es insuficiente, instilar suero fisiolgico y aspirarlo nuevamente en la jeringa. Si los procedimientos anteriores no son factibles entonces puede realizarse un frotis de las partes profundas de la herida con una torunda.

Si bien es posible que el mdico pueda comenzar el tratamiento antibitico antes del cultivo y de las pruebas de sensibilidad a antibiticos, sin embargo la muestra para el cultivo debe ser colectada antes del consumo de antibiticos. La muestra del material debe ser colocada en un contenedor estril y enviado directamente al laboratorio. Para el caso de las muestras tomadas con torundas stas pueden ser transportadas en tubos con medio de transporte (medio de Amies con agar y carbn).

Para el estudio de hongos se pueden obtener adems raspados de piel o uas infectadas en una placa de Petri estril o un sobre limpio. Las muestras deben ser procesadas en 2 h a temperatura ambiente.