UTILIZAO DE PECTINA EXTRADA DE RESDUOS DE MARACUJ (Passiflora edulis) EM SUBSTITUIO PARCIAL DE GORDURA COMO AGENTE ESTABILIZANTE EM SORVETE

Rassa Arantes Barboza1 [voluntria PIBIT], Kenny Suemi Uehara2 [voluntria PIBIT], Maria Helene Giovanetti Canteri3 [orientadora], Msc Cleoci Beninca4 [co-orientadora]
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Graduanda do curso de Tecnologia em Alimentos- UTFPR- Cmpus Ponta Grossa Graduanda do curso de Tecnologia em Alimentos-UTFPR-Cmpus Ponta Grossa

Professora orientadora da Coordenao de Alimentos--UTFPR-Cmpus Ponta Grossa Cmpus Ponta Grossa 4 Professora co-orientadora- IFSC - Campus Canoinhas

Universidade Tecnolgica Federal do Paran - UTFPR Av. Monteiro Lobato, Km 4 - PR. raissa.barboza@hotmail.com, suemi_k25@hotmail.com, mhelene5@hotmail.com, kikalimentos4@hotmail.com. Resumo Inventado pelos chineses 250 a.C e atualmente definido como produto alimentcio, o sorvete agrega valor nutricional dieta alimentar. Porm, o alto valor calrico de produtos providos de leite e gordura, alavancou o avano da tecnologia pela indstria alimentcia, proporcionando alternativas elaborao de alimentos mais saudveis e ao reaproveitamento de resduos. Tendo em vista estes aspectos, o estudo teve como objetivo a elaborao de um sorvete com teor reduzido de gordura, substituindo-a parcialmente por pectina extrada de resduos de maracuj como agente estabilizante. Para a realizao deste trabalho foram preparadas quatro amostras de sorvete, uma com a formulao base de aplicao nos sorvetes convencionais, trs diferindo no percentual de gordura vegetal hidrogenada em relao de pectina. Foram utilizadas pectinas comerciais de alta e de baixa metoxilao, bem como a pectina extrada do maracuj nas formulaes. Anlises de viscosidade cinemtica, incorporao de ar (overrun) e do comportamento de derretimento foram realizadas em cada uma das quatro diferentes amostras. Os resultados das anlises mostraram que de modo geral, o emprego da pectina em conjunto reduo no teor de gordura proporcionou ao sorvete melhor aerao, aumento da viscosidade e melhor estabilidade durante o derretimento. Palavras-chave: sorvete; pectina; resduos; maracuj; estabilizante. Abstract The ice-cream was created by Chinese around 250 B.C. and actually it is defined as food product, with nutritional value. However the high value calories of milk derivatives and fat, allow technology advances in food industry, providing alternatives to the development of healthier foods and reuse of waste. So, this study had aimed the formulation of an ice-cream with low content of fat, replacing it partially by pectin extracted of passion fruit as stabilizing agent. To carried out this study four recipes of ice-cream was prepared , one with the formulation of syrup base commonly used in ice-creams, and the others three differing only in percentage of hydrogenated vegetable fat compared to pectin. Commercial pectins of high and low methoxylation were used as well as the pectin extracted from passion fruit. Analysis of kinematic viscosity, air incorporation (overrun) and melting behavior were conducted on each one samples. The results showed that the use of pectin together with reduction in fat content produces an ice-cream better aeration, increased viscosity and better stability during the melting. Keywords: ice cream; pectin; waste; passion fruit; stabilizing.

INTRODUO

O sorvete classificado como gelado comestvel e definido como produto alimentcio obtido a partir de uma emulso de gorduras e protenas, com ou sem adio de outros ingredientes e substncias, ou de uma mistura de gua, acares e outros ingredientes e substncias submetidas ao congelamento, em condies que garantam a conservao do produto no estado congelado ou parcialmente congelado, durante a armazenagem, o transporte e a entrega ao consumo [1]. Indcios mais antigos sobre o aparecimento do sorvete sugerem que os chineses misturavam polpa de frutas neve para preparar uma bebida apreciada pelos imperadores em 250 a.C. A Revoluo Industrial foi responsvel pelo aparecimento de novas tcnicas e pelas primeiras sorveterias artesanais, surgidas nos Estados Unidos e na Europa. No Brasil, em 1834, foi elaborado o primeiro gelado comestvel, no qual utilizava gelo transportado em navios vindos de Boston [2], e em 1941 foi inaugurada no Rio de Janeiro a primeira indstria de sorvetes do pas, a US Harkson do Brasil, na qual mais tarde foi nomeada Kibon. O consumo nacional atual deste produto consideravelmente expressivo, sendo, no ano de 2011 consumidos em mdia 1,2 milhes de litros, com per capita de 6,07 litros/ano, o que significa um aumento de 58,90% em relao ao ano de 2003 [3]. A insero deste produto na dieta alimentar cotidiana est diretamente relacionada ao seu aspecto nutricional e s suas caractersticas que influenciam sua aceitao pelo consumidor. Tais fatores so atribudos sua composio, formada por glbulos de gordura, bolhas de ar e cristais de gelo dispersos em uma concentrada soluo de protenas, sais, polissacardeos e acares [4]. Em especfico, a presena de gordura no sorvete possibilita uma textura suave, maior cremosidade, suavidade e resistncia ao derretimento e caracterstico corpo do produto. No entanto, tambm est associada ao maior grau de aglomerao de gordura que, se no controlado, pode ser responsvel por defeitos, tais como textura gordurosa, corpo fraco e tendncia ao encolhimento/contrao. Na faixa com menor teor de gordura, as percepes de sabor mudam significativamente medida que diminui a gordura e desempenham um papel menor na liberao de componentes aromticos solveis em gordura. [5] Por ser um dos principais representantes dos alimentos calricos, a indstria de sorvetes vem aprimorando suas tcnicas ao desenvolvimento de ingredientes e de novos produtos que atendam s exigncias de seus consumidores, neste caso, na busca por produtos menos calricos e mais saudveis que mantenham suas caractersticas sensoriais enquanto gelado comestvel. Na elaborao do sorvete, alm do enriquecimento nutricional, os diferentes componentes, produtos lcteos, acar, estabilizante, emulsificante, gordura vegetal hidrogenada, aromatizante, e corante exercem funes relativas qualidade do produto, como corpo, textura, cremosidade, cor, aroma e sabor [6]. No processo de fabricao do sorvete um dos fatores que podem afetar diretamente a qualidade do produto final a variao de temperatura, principalmente durante o armazenamento, fazendo com que os cristais de gelo descongelem e recristalizem, aumentando assim o seu tamanho e conferindo ao produto um aspecto arenoso. A utilizao de estabilizantes na elaborao da mistura pode ser uma medida para controle deste problema. Os estabilizantes so definidos como aditivos alimentares, cuja funo consiste em tornar possvel a manuteno de uma disperso uniforme de duas ou mais substncias imiscveis em um alimento [7], e ainda melhoram as propriedades de batimento, de derretimento, aumentam a viscosidade da calda, evitam a separao do soro e proporcionam estabilidade durante o armazenamento [8].

Entretanto estas caractersticas so obtidas somente se os estabilizantes forem utilizados nas propores corretas juntamente com os demais ingredientes propostos na formulao. Na fabricao de sorvetes os estabilizantes de maior destaque nas formulaes so os polissacardeos, devido ao baixo custo e as suas diversas atribuies, nas quais se destaca a capacidade de reteno de gua livre no alimento, que retarda e evita o crescimento exagerado de cristais de gelo e de acares no sorvete, devido ao aumento da viscosidade e diminuio da mobilidade molecular [9]. Dentre os diversos tipos de estabilizantes aplicados pela indstria alimentcia, encontra-se a pectina, objeto deste estudo, caracterizada como fibra diettica solvel, uma complexa macromolcula e um dos principais componentes da parede celular [10]. Descoberta historicamente enquanto composto qumico, por Vauquelin em 1790 e caracterizada como composto das frutas por Braconnot em 1824 [11], utilizada na fabricao de geleias, doces, preparaes de frutas para iogurtes, bebidas e sucos de frutas concentrados entre outros,. A pectina encontrada principalmente nas cascas de algumas frutas, como o maracuj e em frutos ctricos, formados por material fibroso. Ao serem extradas de forma correta, geram desde vantagens econmicas s indstrias de derivados do maracuj, como em aplicaes alimentcias e farmacuticas at ambientais, tais como a minimizao de resduos [12]. Tendo em vista o reaproveitamento de resduos antes descartados, este projeto teve como objetivo a elaborao e teste de diferentes formulaes utilizando a pectina extrada de resduos de maracuj como agente estabilizante em sorvetes.
METODOLOGIA

Material e mtodos. Este trabalho foi realizado em laboratrio na Universidade Tecnolgica Federal do Paran (UTFPR) Cmpus Ponta Grossa, no perodo de Agosto de 2011 e Julho de 2012. A pectina utilizada neste projeto foi extrada da farinha do albedo de maracuj (Passiflora edulis), pertencentes safra de 2012, adquirido no comrcio local da regio de Ponta Grossa, situada no estado do Paran, a 126 km da capital Curitiba. As pectinas comerciais de alta e baixa metoxilao foram gentilmente cedidas pela CPkelco e os demais ingredientes utilizados nas formulaes foram disponibilizados pela UTFPR Cmpus Ponta Grossa, bem como a disponibilidade dos laboratrios e uso dos equipamentos. Obteno da farinha. Uma etapa inicial de preparao da fruta fresca necessria antecedendo o processo de extrao da pectina, como a remoo das cascas ctricas, responsveis pelas quantidades significativas de pectinametilesterase nativa. Na fruta fresca ps-corte podem se desenvolver fungos produtores de enzimas pcticas desesterificantes e depolimerizantes, alm das enzimas nativas, causadoras de caractersticas indesejveis para algumas aplicaes especficas. Portanto, o processamento do fruto in natura, com branqueamento, desidratao e moagem faz-se necessrio a modo de obter-se maior rendimento na extrao da pectina. A etapa inicial caracteriza-se pela higienizao do maracuj e remoo da casca e despolpamento da fruta, no qual o albedo passa pelo processo de branqueamento, permanecendo por 3 minutos em gua em ebulio seguida de rpido resfriamento em gua corrente. O albedo centrifugado e posteriormente colocado em estufa de circulao de ar a 50 C por 24 horas para desidratao. Logo aps este processo o albedo colocado em liquidificador para a obteno da farinha. importante ressaltar que, segundo Canteri (2010), a matria-prima sem qualquer tratamento trmico favorece a degradao da pectina, em funo de que atividade enzimtica pectinoltica, detectada a partir da liberao crescente de metanol em mesocarpo fresco liofilizado, indica a necessidade de branqueamento da matria-prima.

Extrao da pectina. A metodologia aplicada foi baseada no processo de extrao cida quente descrita por Canteri (2010), em pequena escala. Para tanto, foram utilizadas cinco amostras com quatro gramas de farinha cada. Foram adicionados quatro gramas de farinha em 100 ml de gua destilada em repouso por 15 minutos. Na extrao foi utilizado 100 ml cido ntrico 50mM preparado em laboratrio. Ambos os frascos foram aquecidos em banho-maria at 80 C e misturados. A mistura obtida foi mantida nessa temperatura por mais 40 minutos em banho-maria, sendo agitada frequentemente, e em seguida resfriada em refrigerador convencional. Aps este processo, a soluo foi precipitada com 2 volumes de etanol 96 GL e obteve-se um gel, filtrado em coador de tecido sinttico, seguido pelo processo de desidratao em estufa de circulao de ar em 40 C por cerca de 12 horas. Posteriormente, foi triturado em liquidificador para obteno de um p, a pectina propriamente dita, armazenado em frascos hermeticamente fechados. Elaborao da calda base. A formulao utilizada neste trabalho para a elaborao da calda base teve como ingredientes leite integral, acar, glucose, gordura vegetal hidrogenada, creme de leite pasteurizado, leite em p, liga neutra, emustab, saborizante de creme e acrscimo de 10 ml de gua destilada, adicionada para dissoluo da pectina. Tabela 1. Formulao da calda base. Ingredientes Leite Integral Acar Glucose de milho Gordura vegetal hidrogenada Creme de leite pasteurizado Leite em p Liga neutra* Emustab* Saborizante* *Conforme recomendao do fabricante. Quantidade 0,5 l 0,075 kg 0,05 kg 0,0375 kg 0,0325 kg 0,0325 kg 0,005kg 0,005kg 0,010 kg

Preparao das amostras. Para a realizao deste trabalho foram preparadas quatro amostras de sorvete, uma apenas com a formulao da calda base de aplicao nos sorvetes convencionais, e as outras trs diferindo na porcentagem de gordura vegetal hidrogenada em relao de pectina. A amostra controle (1) seguiu a formulao da calda base representada pela Tabela 1. A formulao das amostras 2, 3 e 4 foi alterada seguindo as descries de Serenato e Chaves (2011). A quantidade de gordura vegetal hidrogenada foi reduzida de 7% a 4%, sendo adicionada a pectina em cada uma das amostras. Tabela 2 Aplicao das pectinas. Amostra 1 2 3 4 Pectina Ausente Presente Presente Presente Especificao Comercial (Alta metoxilao) Comercial (Baixa metoxilao) Extrada do albedo de maracuj

Nas formulaes com teor reduzido de gordura das amostras 2, 3 e 4 foi adicionado 1% de pectina [13], equivalente a cinco gramas, na qual a cada uma dos trs tipos diferentes de pectina foi diluda em 10 ml de gua destilada temperatura ambiente (20 C), sendo levada a 50C em estufa de circulao de ar por cerca de 24 horas. soluo de pectina hidratada foi adicionada a mistura com os ingredientes, exceto o emustab, e batida em liquidificador convencional por 4 minutos e armazenada em freezer por 24 horas. Aps isto, a mistura foi retirada do freezer e adicionada de cinco gramas de emustab, no liquidificador e no ultra freezer a -80 C por 35 minutos. Em seguida, foram adicionados os cinco gramas restantes do emustab e batido novamente no liquidificador. Anlise da viscosidade cinemtica. As anlises de viscosidade das amostras foram realizadas em viscosmetro Copo Ford e a temperatura ambiente (20 C). Cada amostra nessa temperatura foi homogeneizada em bquer de 100 ml, e inserida no viscosmetro em quantidade suficiente para completar o nvel do aparelho. Com auxilio de um basto de vidro foram retiradas pequenas bolhas de ar e com um cronmetro mediu-se o tempo de escoamento de cada amostra. Para a amostra controle (1) utilizou-se o orifcio com 2 mm de dimetro e para amostras 2, 3 e 4 foi utilizado o orifcio com 4 mm de dimetro, em funo do tempo de escoamento, que deve permanecer entre 20 e 100 s. Anlise de incorporao de ar (Overrun). A anlise de incorporao de ar foi adaptada da metodologia de Rechsteiner (2009) [14]. Esta anlise foi realizada atravs do acondicionamento de cada uma das quatro amostras em bquer graduado de 100 mL levados a estufa de circulao de ar (25-30 C) durante 12 horas. Aps este perodo, foi anotado o volume lquido resultante; atravs da diferena entre os volumes inicial (Vi) e final (Vf) obtm-se a porcentagem de ar incorporado, o clculo feito atravs da equao 1: % overrun = (Vf Vi/ Vi)*100 (1)

Anlise do comportamento do sorvete no derretimento e reteno de forma. A metodologia utilizada foi baseada na de Serenato e Chaves (2011). As amostras de sorvete (cerca de 40g) foram pesadas, , e posteriormente colocadas sobre uma tela sobreposta sobre recipientes , para coleta da calda do sorvete derretido. Este foi pesado estes a cada 5 minutos durante um perodo de 100 minutos em temperatura ambiente (15 C).
RESULTADOS E DISCUSSES

No final do processo, foram obtidas doze gramas de pectina, utilizadas em uma das formulaes de sorvete. A diferena entre a formulao base e adicionadas de pectina deve-se substituio parcial da gordura por pectina hidratada, cuja funo de estabilizante proporciona a sua ligao com a gua livre presente na formulao, melhorando as propriedades de batimento, de derretimento, aumentando a viscosidade da calda, evitando a separao do soro e proporcionando estabilidade durante o armazenamento, no qual os cristais de gelo descongelam e recristalizam, dando ao produto final um aspecto arenoso. Anlise da viscosidade cinemtica. A viscosidade analisada via Copo Ford das amostras 1,2,3 e 4 foi medida atravs da converso de segundos para mm2/s1 dada pelas expresses correspondentes aos respectivos orifcios conforme o fabricante (Metalurgia Leonardo Ltda): Viscosidade cinemtica (orifcio n2) = 2,388t 0,007t2 - 57,008 Viscosidade cinemtica (orifcio n4) = 3,846t 17,300 (2) (3)

Os resultados da anlise de viscosidade cinemtica via Copo Ford de cada uma das quatro amostras esto dispostos na Tabela 3: Tabela 3 Resultados do tempo de escoamento Amostras Mdia do Tempo de Escoamento 31,17 segundos 52,13 segundos 38,59 segundos 85,34 segundos Desvio Padro Relativo (DPR) 9,13% 22,43% 2,65% 10,31% Viscosidade (Cst)

Controle (1) Pectina comercial de baixa metoxilao (2) Pectina comercial de alta metoxilao (3) Pectina extrada do albedo de maracuj (4)

10,60 183,19 131,11 310,91

Analisando o tempo de escoamento e os resultados dos desvios padres relativos, nota-se que a amostra controle (1) a de menor viscosidade, apresentando aspecto arenoso quando congelado, enquanto que e a amostra com teor reduzido de gordura adicionada de 1% de pectina extrada do albedo de maracuj (4), apresentou a maior mdia do tempo de escoamento, considerada assim a amostra com maior viscosidade e tambm a de maior cremosidade e intensificao na colorao em relao s amostras 1, 2 e 3. As amostras 2 e 4 perderam menos ar durante o derretimento permanecendo mais aeradas e consequentemente mais viscosas em relao s outras, proporcionando assim um escoamento mais lento no viscosmetro Copo Ford. Anlise de incorporao de ar (overrun). Os resultados desta anlise, obtidos atravs da aplicao dos valores anotados na equao 1 esto dispostos na Tabela 4: Tabela 4 Anlise de Overrun. Amostra Controle (1) Pectina comercial de baixa metoxilao (2) Pectina comercial de alta metoxilao (3) Pectina extrada do albedo de maracuj (4) Overrun (%) 60 92,7 88,8 100

Conforme a tabela pode-se notar que a amostra controle apresentou a porcentagem de ar incorporado dentro dos padres esperados, descritos por Serenato e Chaves (2011), entretanto as amostras 2, 3 e 4 apresentaram altas porcentagens ar incorporado. Contradizendo Rechsteiner (2009), os resultados obtidos mostraram que a reduo do teor de gordura neste caso proporcionou uma maior incorporao de ar e melhor textura nas amostras. Percebe-se que a adio de pectina extrada do pericarpo de maracuj proporcionou melhor incorporao de ar no sorvete comparado s outras amostras analisadas. importante ressaltar que nenhuma das amostras ultrapassou o valor mximo de ar incorporado permitido pela Legislao Vigente, Portaria n 379, de 26 de abril de 1999, na qual estabelece uma densidade aparente mnima 475g/L de produto, ou seja, no mximo 110% de incorporao de ar.

Anlise do comportamento do sorvete no derretimento e reteno de forma. Os resultados obtidos nesta anlise esto apresentados no grfico 1:

Figura 1 Anlise de derretimento do sorvete. Compatvel com Serenato e Chaves (2011) e em contradio a Rechsteiner (2009) os resultados obtidos apontam que as amostras com teor de gordura reduzido apresentaram maior estabilidade e resistncia ao derretimento, mantendo sua forma por mais tempo em comparao a amostra sem reduo no teor de gordura. O resultado da anlise comparado ao comportamento das amostras revela o poder estabilizante e retentor de gua na relao entre a presena de pectina em substituio parcial ao teor de gordura.
CONCLUSES

Os resultados obtidos nas anlises permitem concluir que as amostras adicionadas de pectina extrada do pericarpo de apresentaram maior incorporao de ar (overrun) e maior viscosidade, propiciando melhor textura, devido tambm reteno de gua proporcionada pelas cadeias pcticas. A utilizao nas amostras de pectina comercial de baixa metoxilao apresentou melhor comportamento de derretimento e reteno de forma expressiva incorporao de ar, proporcionando maior textura e maior estabilidade e resistncia ao derretimento. As amostras adicionadas de pectina comercial de alta metoxilao mostraram significativa incorporao de ar e apresentaram comportamento similar s amostras contendo pectina extrada do mesocarpo de maracuj durante a anlise de derretimento e reteno de forma. Portanto, o emprego de pectina de modo geral em conjunto reduo no teor de gordura tornou possvel a elaborao de um sorvete com teor de gordura reduzido com as caractersticas apresentadas pelo sorvete convencional mais intensificadas, tais como a viscosidade, aerao e reteno de forma durante o derretimento. AGRADECIMENTOS minha orientadora Professora Dr.a Maria Helene Giovanetti Canteri pela pacincia, dedicao, compreenso, persistncia e confiana. minha co-orientadora Ms. Cleoci Beninca pela ateno e disponibilidade mesmo estando longe. UTFPR pelo auxlio e disponibilidade dos laboratrios.

 Suemi pelo companheirismo, pacincia e compreenso, mesmo nos momentos onde tudo parecia dar errado.
REFERNCIAS

[1] BRASIL. Regulamento tcnico referente a gelados comestveis, preparados, ps para o preparo e bases para gelados comestveis. Dirio Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Braslia, DF, 29 abr. 1999. Disponvel em: <http://www.anvisa.gov.br/legis/portarias/379_99.htm>. Acesso em: 03 set. 2012. [2] MIKILITA, I. S. Avaliao do estgio de adoo de boas prticas de fabricao pelas indstrias de sorvete da regio metropolitana de Curitiba: Proposio de um plano de anlises de perigos e pontos crticos de controle. Dissertao de Mestrado em Tecnologia de Alimentos, Universidade Federal do Paran, Curitiba. 2002,186p. [3] ABIS, Associao Brasileira das Indstrias de Sorvetes. Estatstica. Produo e consumo de sorvetes no Brasil. Disponvel em http://www.abis.com.br/estatistica_producaoeconsumodesorvetesnobrasil.html. Acesso em 28 ago. 2012. [4] GOFF, H.D.; VERESPEJ, E.; SMITH, A.K. A study of fat and air structure in ice cream. International Dairy Journal, Barking, Nov. 1999. , v. 9, n 11, p 817-829. [5] THARPS BRUCE. Diretrizes para formulao de sorvete lcteo. Sorvetes e casquinhas. P. 22-26. Ed. Ver. 2009. Disponvel em : http://www.insumos.com.br/sorvetes_e_casquinhas/materias/121.pdf. Acesso em 17 set. 2012. [6] ARBUCKLE, WENDELL S. Ice cream. 3a ed. USA: AVI Publishing Company, 1977. 517p. [7] ANVISA. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Portaria n 540 - SVS/MS, de 27 de outubro de 1997. Regulamento tcnico sobre aditivos alimentares. Disponvel em http://www.anvisa.gov.br/legis/portarias/540_97.htm. Acesso em 06 set. 2012. [8] BORSZCZ, V. Implantao do Sistema APPCC para Sorvetes: Aplicao na Empresa Kimyto. Dissertao de Mestrado em Engenharia de Alimentos. Universidade Federal de Santa Catarina. Florianpolis, 2002. 119f. [9] THARP, B.W. Os estabilizantes em sorvetes. Sorvetes e casquinhas. p. 48-54. Ed. ver/2009. Disponvel em http://www.insumos.com.br/sorvetes_e_casquinhas/materias /88.pdf. Acesso em 02 set. 2011. [10] CANTERI. M. H. G. Caracterizao comparativa entre pectinas extradas do pericarpo de maracuj-amarelo (Passiflora edulis f. flavicarpa). Tese (Doutorado em Tecnologia de Alimentos) -Setor de Tecnologia - Universidade Federal do Paran. Curitiba, 2010. 162 f. [11] BRAVERMAN, J. B. S.; BERK, Z. Braverman's Introduction to the Biochemistry of Foods. Elsevier, 1976. 315 p. [12] CHRISTENSEN STEEN HOJGAARD. PECTINS. IN: GLICKSMAN, MARTIN. Food Hydrocolloids. Florida: CRC Press, 1984. p. 205-229. [13] CPKELCO. Ficha do produto. Limeira (SP), 2012. 1 p. [14] RECHSTEINER, MARIANA S. Desenvolvimento de amidos fosfatados de batata doce e mandioca e aplicao como substitudos de gordura em sorvetes. Tese de Doutorado em Agronomia- rea de concentrao em Energia na Agricultura. Faculdade de Cincias Agronmicas da UNESP, Botucatu, 2009, 167f.