PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATLICA DEL ECUADOR INFORME DE LABORATORIO FACULTAD: Bioqumica Clnica ESCUELA: Bioanlisis ASIGNATURA: Laboratorio de Bioqumica

INTEGRANTES: Carolina Lpez Mercedes Rodrguez NIVEL: Tercero PRCTICA N: 02 TEMA: Curva de titulacin de Glicina FECHA: 05 de Septiembre del 2013 1. OBJETIVOS:

Aprender a medir el Ph de una disolucin. -- Preparacin de tampones. Clculo terico y preparacin prctica. -- Conocer la estructura de los 20 aminocidos que forman parte de las protenas. Estudiar experimentalmente las propiedades acido--base de los aminocidos.

Determinar los puntos de equivalencia y los valores de pKa de un aminocido, por medio de titulacin potenciomtrica, para identificarlo.

1. MARCO TERICO:

Los aminocidos por tener al menos un grupo cido y un grupo amino pueden considerarse como anfolitos, es decir, sustancias que pueden comportarse como cidos o como bases. Todos los aminocidos poseen un punto en el que se comportan como una sal neutra. En este punto la carga neta del aminocido es nula ya que los dos grupos disociables tienen su carga de signo contrario y compensado. Este punto recibe el nombre de punto isoelctrico. En la titulacin de la glicina Se pueden realizar las siguientes observaciones: 1. A pH cido la Gly se encuentra como un cido diprtico, ya que tanto el grupo amino como el carboxilo se encuentran protonados, es decir, a pH = 1, el 100% de las molculas de aminocidos se encuentran en forma de catin. 2. Al ir aadiendo equivalentes de base, el grupo -carboxilo (-COOH) se disocia, cediendoprotones al medio y transformndose en un grupo carboxilato; este equilibrio viene descrito por elpKc. Cuando pH = pKc, la glicina se encuentra como 50% en forma de catin + 50% zwitterion. Por lo tanto,el par -COOH/-COO- puede servir como un tampn amortiguador en la regin de pH cerca del valorpKc. En cuanto a la carga, cuando pH = pKc, entonces [I] = [II] y por lo tanto la carga neta = 0.5; y cuando pH = pKc - 2; [I] / [II] = 100:1; Q = 1, es decir prcticamente slo existe la forma I e

3. En el pI, prcticamente el 100% del aminocido se encuentra como ion dipolar o zwitterion, deforma tal que el aminocido presenta una carga neta nula (el aminocido es elctricamenteneutro).
2. FORMULAS O REACCIONES:

Los aminocidos tienen curvas de titulacin caractersticas La representacin grafica de la variacin del pH de una solucin debida al agregando de una base o un acido se denomina curva de titulacin. La curva de titulacin surge entonces de la relacin entre la cantidad de acido o base agregada a una solucin y la variacin del pH de la misma. A pH acido, por ej. pH 1, podemos considerar que el 100% de las molculas aminoacidicas se encuentran como ion positivo porque estan como acido diprotico (tienen protonizado el grupo carboxilo y el amino). Si el pH aumenta, habr un valor para el cual el 50% de estar como ion positivo y el 50% como dipolo, ese valor corresponde al pKa. El valor de pH en el cual el 100% del aminoacido se encuentra como dipolo, se denomina punto isoelctrico: la molcula es elctricamente neutra, no es un ion. Por encima del PI la forma predominante del aminoacido ser la de ion negativo, hasta llegar a un pH en el que el 50% se encontrara como dipolo y el 50% como ion negativo, ese valor corresponde al pKb. A pH prximo a 14 el 100% del aminocido estar como ion negativo.

3. PARTE EXPERIMENTAL: a. Registro de datos: TABLA DE RECOLECCIN DE DATOS DE VALORACIN PONTENCIOMTRICA TABLA #01 TITULACIN DE UN ACIDO DBIL CON BASE FUERTE TITULACIN GLICINA CON ACIDO CLORHDRICO HCl 0.1N agregados pH de la Glicina Aadido 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 acumulado 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 2.02 2.13 2.30 2.61 3.15 8.84 9.63 10.22 11.36 11.77 11.94 Aadido 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 acumulado 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 12.04 12.11 12.17 12.21 12.24 12.30 12.32 12.34 12.36 12.37 12.43 HCl 0.1N agregados pH de la glicina

TABLA #01 Valoracin con NaOH (0.1 N) TITULACIN GLICINA CON ACIDO CLORHDRICO HCl 0.1N agregados pH de la Glicina Aadido 1 2 3 4 5 6 7 8 9 acumulado 0 2 4 6 8 10 12 14 16 2.02 2.13 2.30 2.61 3.15 8.84 9.63 10.22 11.36 Aadido 12 13 14 15 16 17 18 19 20 acumulado 22 24 26 28 30 32 34 36 38 12.04 12.11 12.17 12.21 12.24 12.30 12.32 12.34 12.36 HCl 0.1N agregados pH de la glicina

10 11

18 20

11.77 11.94

21 22

40 42

12.37 12.43

cido : Toda sustancia que al disolverse (disociarse) aumenta la concentracin de iones positivos del disolvente (H+ o H3O+, caso del agua). base : Toda sustancia que al disociarse, aumenta la concentracin de iones negativos del disolvente (OH-, caso del agua).
4. CLCULOS: PM. Glicina 111.5 g/mol Vol. 30 ml = 0.03L M = 0.04 mol/L http://es.slideshare.net/casaresdg/valoracin-potenciomtrica 0.04 mol 0.03 L 1L 111.5 g glicina 1mol glicina =

Fijndose en la grfica correspondiente, pH frente a Volumen, y a partir del volumen de NaOH gastado en el primer punto de equivalencia se calcula la concentracin real de problema.

Vvalorante en P.E. * Mvalorante = V inicial problema(100 mL) * Mproblema.

42 mL

5. OBSERVACIONES:

b. Anlisis de datos: Determinar cantidades en moles del vinagre

17.7 mL NaOH

1L 1000 mL

0.1 mol NaOH 1 L NaOH

1 mol CH3COOH = 1mol NaOH

Determinar la molaridad del acido actico del vinagre

Determinar el porcentaje masa sobre volumen del acido actico en vinagre 60g = 0.1062 g CH3COOH 1 mol Determinar el porcentaje masa volumen del acido actico en el vinagre

6. RESULTADOS Y DISCUSIN DE RESULTADOS

La valoracin potenciomentrica de glicina protonada, NaOH dara lugar a una curva (pH frente a volumen de valorante), caractersticas de un acido diprotico y a partir de ella se puede calcular la concentracin de glicina y los valores de las constantes de equilibrio (Ka1 y Ka2) Se puede observar los dos puntos de equivalencia con un primer salto muy brusco y un segundo salto mucho menos brusco hasta alcanzar la fomra gly

7. calculos

8. CONCLUSIONES

Se concluye que la forma mas sencilla de comprender una reaccin de neutralizacin es a travs del uso de curvas de valoracin, ya que en estas se resumen las caractersticas generales en este tipo de reacciones. El punto de equivalencia lo indica el volumen adicionado necesario de una solucin para neutralizar a otra, independiente del pH resultante. Cuando la neutralizacin se produce entre una base fuerte y un cido dbil. El anin del cido sufre una hidrlisis producindose iones hidrxido, por lo que el pH es > 7. La eleccin del indicador adecuado para determinar el punto de equivalencia depender del pH final, que tiene que estar dentro del intervalo en el que el indicador sufre el cambio de color.

9. BIBLIOGRAFA [1]http://www.uam.es/docencia/qmapcon/QUIMICA_GENERAL/Practica_15_Determin acion_de_%20la_Acidez_%20del_Vinagre_mediante_Valoracion_%20con_un_%20Indi cador_y_por_Potenciometria.pdf http://fqjmramirez.wikispaces.com/file/view/%C3%81cido-Base.pdf http://ocw.um.es/ciencias/analisis-quimico/material-de-clase-1/tema-5.pdf http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/lhh345a/VolumetriasAcido-Base.pdf http://www.quimitube.com/videos/ejercicio-24-ph-neutralizacion-de-un-acido-debilcon-una-base-fuerte/ http://www.youtube.com/watch?v=1o7DPlrpNkQ [2] Mar, G., (2009), cidos Carboxlicos, http://www.sabelotodo.org/quimica/cetonas.html, 17 de Octubre del 2012.

Para las solucione amortiguadora del acido actico con acetato de sodio Calculamos el PH del acido actico 0.1M
0.1 moles X = 5.5*10 moles
-3

1000 mL solucin 55 mL

5.5*10 moles x = 0.09 M

-3

60 mL solucin 1000 mL

Concentracin

Inicial Cambio Equilibrio

X 0.09 - x

0 x x

0 x x

[ [

][ ]

pH de solucin amortiguadora
0.1 moles X = 5.0*10 moles
-4

1000 mL solucin 5 mL

5.0*10 moles
x = 8.33 8.33 moles M

-4

60 mL solucin 1000 mL

Concentracin (moles/litro)

Concentracin Inicial Cambio Equilibrio [ [ [ ][ ][ ] ]

X 0.09 - x

0 x 0+x

0+ x x + 8.33
+0

pH terico de solucin amortiguadora agregando 1mL de hidrxido de sodio 0.01M.

0.01 moles NaO -5 X = 1*10 moles 1000 mL solucin 1 mL 1*10 moles -4 x =3.226*10 moles NaOH
-5

31 mL solucin 1000 mL

Concentracin M Concentracin M Concentracin M Inicial Cambio Equilibrio

3.226*10-4

3.226*10-4
0 x 0+x

3.226*10-4
0+ x

x 0.09 x 3.226*10-4

x+

+ 3.226*10-4

[ [

][ ]

[ ][ [