UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL FACULTAD DE TECNOLOGÍA MÉDICA Escuela Profesional LABORATORIO CLÍNICO Y ANATOMÍA PATOLÓGICA ASIGNATURA BIOQUÍMICA

II Código 4E0055

ALTERACIONES DE LA GLUCOLISIS, GLUCONEOGÉSIS
Dra. Gloria Cruz Gonzales

GLUCOLISIS

Gran cantidad de tejidos por los menos cierta cantidad de glucosa . el requerimiento es sustancial en el cerebro . La glucólisis es la vía principal para el metabolismo de la glucosa , ocurre en el citosol de todas las células .

Vía inicial del catabolismo de HC, produciéndose oxidación de la glucosa en el “citosol” para producir energía. Glucosa 2 Ac. Pirúvico 10 rx (3 carbonos)

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pulmon) .GLUCOLISIS Regulación de las enzimas de la glucolisis : •Hexoquinasa : inhibidas por G.P •Fosfofructoquinasa efectores alostericos •Piruvatoquinasa •Isoenzimas M( músculo y cerebro ). L (higado y riñon ) y A : K o M adiposos .6.

oxalato o EDTA Estable a 1-4°C por 24 Hs. espectrofotometría UV cinética 340nm.8 Adultos < 7. Método: Según Beisenherz.  Valor de referencia: (en U/L a 37 °C) Niños de 10-24 meses de 3.4 . Centrifugar y separar inmediatamente.8.5 .8 25 meses a 10 años 1.  Muestra: Suero o plasma obtenido con citrato.11. Hemólisis interfiere en la reacción.2 .

Los niveles están aumentados en distrofias musculares. La enfermedad muscular neurogénica o enfermedad de la placa motora (tal como la miastenia gravis) produce elevaciones más bajas de esta enzima. La aldolasa es una enzima de la vía glucolítica que se usa ocasionalmente como marcador para la enfermedad muscular aunque no es específica del tejido. también presente en hígado y cerebro. polimiositis y triquinosis. Los niveles disminuyen frente a enfermedades miodegenerativas crónicas con baja masa muscular. dermatomiositis. Se prefiere el uso de CK más específica del músculo esquelético Se trata de una enzima muscular.  .

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 Este déficit lo presentan los alcohólicos  Provoca Acidosis Pirúvica o Lactica  Deficiencia hereditaria de aldosa y déficit de piruvato kinasa ocasiona ANEMIA HEMOLITICA  Déficit de fosfofructokinasa muscular es baja esto es ocasionapor dietas altas en carbohidratos . Deficiencia de tiamina en al dieta ocasiona acumulación de piruvato .

 Generar moléculas de alta energía (ATP. NADH + H) como fuente de energía en la Respiración Aeróbica y Anaeróbica  Generar Piruvato Ciclo de Krebs o en ausencia de O2 Lactato  Producción de intermediarios (3C y 6C) para otros procesos. .

Hexoquinasa Fosfohexosa isomerasa Fosfofructoquinasa-1 Aldolasa Triosa fosfato isomerasa Gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (Reversible) Fosfoglicerato quinasa (Reversible) Fosfoglicerato mutasaEnolasa (Reversible) Enolasa (Reversible) Piruvato quinasa (Irreversible) .

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 Hexoquinasa (Glucoquinasa)  Fosfofructoquinasa (PFK 1) regulada por [ATP] regulada por aparición de AMP (elaborado por ATPasa)  Piruvatoquinasa .

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4. bajos niveles de 2. 2. plaquetas. el flujo de la Glucólisis y síntesis de ATP (Lisis) Aldolasa (ALD): anemia moderada por aumento de la [F1.1.6BP] en eritrocitos (isoenzima A) Triosa fosfato isomerasa (TPI): La enzima mutada de eritrocitos poca actividad y estabilidad acumulacion de “DiHidroxiAcetona Phospato”.3BPG Fosfohexosa Isomerasa (fosfoglucosa isomerasa. 5. la HK-I y la HK-R. 3-fosfoglicerato quinasa (PGK): Unica enzima de la ruta glucolitica codificada por un gen localizado en el cromosoma X. Hexoquinasa: asociada a una anemia hemolítica hereditaria. hígado y músculo (retardo mental e hipotonía muscular). 3. asociada a anemia hemolítica Piruvatoquinasa: Baja el flujo de la Glucólisis . 6. GPI) – “Inestableº y baja actividad”: leucocitos. eritrocitos dos hexoquinasas.

Ruta metabólica anabólica que permite la síntesis de glucosa a partir de precursores no glúcidos (los cuales ni provienen ni son glúcidos). LACTATO GLICEROL y “CUALQUIER INTERMEDIARIO DEL C. DE KREBS “ como fuentes de carbono para la vía metabólica . PIRUVATO. Incluye la utilización de varios Aa (excepto leucina y lisina).

la diferencia es por tres reacciones irreversibles que utilizan enzimas específicas de este proceso Estas reacciones son:  De glucosa a glucosa-6-(P).6-bisfosfato.  De fosfoenolpiruvato a ácido pirúvico. “condicionan los dos rodeos metabólicos de esta vía” .Las enzimas que participan en la vía glucolítica participan también en la gluconeogénesis.  De fructosa-6-(P) a fructosa-1.

Adiposo) Acilgliceroles (Hígado) Fructosa 1.Alanina (músculo) Glucosa (hígado) (Tej.6 bifosfato Glicerol libre Glucosa .

.1..Glucosa 6 fosfatasa 2. 6 bifosfatasa (F1.Fosfoenolpiruvato Carboxiquinasa ..Fructosa 1.6BPasa) 3.

1.Fructosa 1. causando. hiperlipemia. Piruvato Oxalacetato PEP GNG Lactato Alanina 2.. cetoacidosis..Piruvato carboxilasa: causando “acidosis láctica” y “alaninemia”. Acidosis láctica. hiperuricenia y hepatomegalia (NO HAY GNG) .6 bifosfatasa: ausencia total.

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Entre ellos se encuentran: cerebro. . testículos y otros tejidos. cristalino y córnea del ojo. parte de esta homeostasis de la glucosa depende de la síntesis de novo a partir de precursores no hexósas: GLUCONEOGÉNESIS Se han de mantener los niveles de glucosa sanguínea para permitir el metabolismo de aquellos tejidos que utilizan glucosa como sustrato primario. médula renal.GLUCONEOGÉNESIS INTRODUCCIÓN El mantenimiento de la concentración de glucosa sanguínea en los mamíferos es un proceso vital. hematíes.

En condiciones normales. acidosis o daño hepático. en situaciones tales como el ayuno. esta vía metabólica está conferida al hígado y a la corteza renal.INTRODUCCIÓN GLUCONEOGÉNESIS La gluconeogénesis permite el mantenimiento de los niveles de glucosa sanguínea. . llegando a representar por ejemplo. Sin embargo. bastante tiempo después de que toda la glucosa de la dieta se haya absorbido y oxidado completamente. el aporte de la corteza renal a la homeostasis de la glucosa es reducida. durante el ayuno prolongado en el hombre hasta el 50% de la producción total de glucosa. el papel de la corteza renal aumenta. En mamíferos.

II. son comunes en la vía gluconeogénica. .6 bifosfato en glucosa.GLUCONEOGÉNESIS ETAPAS DE LA GLUCONEOGÉNESIS • Enzimas de la vía glucolítica. además. • Pasos de la vía glicolítica son irreversibles.Transformación de fosfoenolpiruvato en fructosa 1.6 bifosfato..Trasformación de piruvato en fosfoenolpiruvato (PEP). Se considera 3 etapas distintas: I..Transformación de fructosa 1.. III.

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mediante enlace amida en el grupo e amino de restos específicos de lisina del sitio activo. La primera reacción está catalizada por la Piruvato carboxilasa y la segunda por la PEP carboxiquinasa. PIRUVATO CARBOXILASA Cataliza la conversión de piruvato a oxalaxetato. . acoplando dos reacciones que requieren compuestos con fosfato de alta energía (un ATP y un GTP).ETAPAS DE LA GLUCONEOGÉNESIS I. Cada uno de sus protómeros contiene una molécula de biotína. TRASFORMACIÓN DE PIRUVATO EN FOSFOENOLPIRUVATO El priuvato se convierte en el compuesto de alto contenido energético PEP. unida covalentemente. Es un tetrámero cuyo PM en hígado de rata es 444000 a 520000 daltons.

. Si la mencionada enzima fuera exclusivamente citoplasmática.ETAPAS DE LA GLUCONEOGÉNESIS FOSFOENOL PIRUVATO CARBOXIQUINASA El oxalaxetato formado debe convertirse en PEP. por acción de la PEP carboxiquinasa (citoplasmática y mitocondrial). el oxalacetato formado en la mitocondria riene que utilizar el mecanismo de lanzaderas del oxalacetato que permite sintetizar intermediarios que si son capaces de atravesar la membrana mitocondrial y salir al citoplasma.

.6 Bi FOSFATASA.6 BiFOSFATO EN GLUCOSA. dada su variación de energía libre estándar disponible. En su lugar se utiliza otras rutas. Tiene un requerimiento absoluto de un catión divalente: Mg+2 Zn+2 o Mn+2. Se le encuentra en te|jido hepático. con un PM aproximado de 140000 daltons.ETAPAS DE LA GLUCONEOGÉNESIS III. TRANSFORMACIÓN DE FRUCTOSA 1. músculo esquelético de contracción rápida e intestino. también irreversibles. No pueden seguirse los pasos inversos de las reacciones catalizadas por la FF1-K. Es proteína tetramérica. LA HEXOQUINASA O LA GLUCOQUINASA. catalizadas por enzimas diferentes. corteza renal. FRUCTOSA 1.

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bazo y pulmón. .GLUCOSA 6 FOSFATASA Con respecto a su localización tisular. testículos. así como en la mucosa del intestino delgado. cerebro. en las células b del páncreas y en glándula adrenal. se ha encontrado en el hígado y en riñón.

GLUCONEOGÉNESIS SUSTRATOS PRINCIPALES DE LA GLUCONEOGENESIS Lactato. piruvato. glicerol y la glutamina. . El lactato circulante deriva principalmente del músculo esquelético y es meno proporción de los eritrocitos y de la médula adrenal. piruvato. glicerol y alanina en el Hígado. En la corteza renal son: lactato.

. Si el catabolismo de los aminoácidos puede dar lugar a la formación de piruvato neto u oxalacetato neto. excepto la leucina y la lisina. entonces también puede tener lugar a la síntesis neta de glucosa a partir de aquel aminoácido.GLUCONEOGÉNESIS LA GLUCOSA SE SINTETIZA A PARTIR DE ALGUNOS AMINOÁCIDOS Todos los aminoácidos. pueden suministrar carbono para la síntesis neta de glucosa por gluconeogénesis.

GLUCONEOGÉNESIS REGULACUIÓN DE LAS ENZIMAS DE LA GLUCONEOGÉNESIS Enzimas claves : PIRUVATO CARBOXILASA FOSFOENOL PIRUVATO CARBOXIQUINASA FRUCTOSA 1.6 BIFOSFATASA GLUCOSA – 6 FOSFATASA .

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G-6-Pasa F-1.6BiPas PEPCK PC Enzimas clave de la gluconeogénesis .

GLUCONEOGÉNESIS FUNCIONES DE LA GLUCONEOGÉNESIS Mantenimiento adecuado de los niveles de glucosa sanguínea durante el ayuno prolongado o durante períodos de ingesta limitada de hidratos de carbono. Durante la acidosis metabólica. después de la desaminación de los aminoácidos. la vía gluconeogénica permite el uso de lactato de la glicósisis y glicerol de las grasas. Durante el ejercicio severo. Permite la conversión de la proteína dietaria en carbohidratos. la gluconeogénesis real. permite la excresión de un elevado número de protones. .

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 GLUCOLISIS ANAEROBICA  PENTOSA FOSFATO  GLUTATION FALLA ENZIMATICA HEMOLISIS .

.  Es la mas comun en un 80%.  Presenta un aumento de celulas jovenes. Anemia leve moderada a severa.

 Medir la actividad rápidamente . . MUESTRA  Anticoagulada con EDTA  Conservada a 4 C  No congelar  Separar adecuadamente GB y Plaquetas.  Preparar un hemolizado.

Determinación de G6P Deshidrogenasa Se mide el aumento de NADP a NADPH en reacci ón cinética a UV 340 nm. VR : 40 a 83 U/g Hb .  Determinación de Piruvato Kinasa  Mediante reacción acoplada a LDH se mide la reducción de NADH a UV a 340 nm en reacción cinética VR: 9 a 22 U/g Hb . VR : 8 a 18 U/g Hb . Determinación de G-P Isomerasa Reacción acoplada de G6PDH se mide la aparicion de NADPH cineticamente a UV a 340 nm. .

Los valores en el recién nacido son 50% más elevados.4-8. EDTA o heparina. 30°C 3.09 Ux1012 hematíes Bishop Modif. 5 días a 25°C  Valor de referencia: En eritrocitos: 12. Método: 340 nm  Muestra: Hemolisado de eritrocitos lavados (ACD.1 ± 2. Estabilidad a 4°C > de 20 días. espectrofotometría cinética UV .0 u/g de Hb 99232 U/1012 hematíes. evitar fluoruros y oxalato).

En ciertos individuos con déficit de la enzima se puede presentar un episodio hemolítico grave tras la ingesta de habas (favismo). Este defecto se asocia a anemias hemolíticas inducidas por drogas oxidantes. . El déficit de esta enzima es un defecto genético ligado al cromosoma X. infección o estrés y a anemias congénitas no esferocíticas.