Universidad Andrs Bello Facultad de Ciencias de la Salud Departamento de Ciencias Biolgicas Laboratorio de Biologa Celular BIO 035

TRABAJO PRCTICO N6 Mitosis, Meiosis y Fecundacin

Alumnos: Carolina Cienfuegos Felipe Chamorro Claudia Betancourtt

Introduccin Segn el dogma central para que surja cualquier clula debe existir una preexistente, que es la forma en que la clula la unidad bsica de la vida, determina que de un ser vivo se genere otro ser vivo. Normalmente una clula se reproduce mediante una secuencia ordena de acontecimientos en los que duplica su contenido y luego se divide en dos. Este ciclo celulares el mecanismo esencial de reproduccin de las clulas. La divisin celular en clulas Eucariontes considera varias etapas, la interfase, etapa previa a la divisin en que se prepara la clula para dividirse, y la mitosis, la divisin propiamente tal. Despus de una divisin celular las clulas hijas generadas comienzan la interfase de un nuevo ciclo en la etapa G1,en la que ocurre una actividad biosinttica, luego pasa a la etapa S, en la cual la clula sintetiza ADN, que termina cuando el contenido de ADN se ha duplicado y los cromosomas se han replicado, continuando con la etapa final de la interfase, G2, en esta etapa se condensan los cromosomas ya duplicado en espera para la divisin celular. Despus de la interfase la clula se encuentra lista para la nueva divisin, en la etapa Mitosis. Esta gran etapa de divisin se divide en cuatro fases; primero, la profase, en que la cromatina se condensa para formar los cromosomas, los centriolos se ubican en los polos opuestos de la clula, y la envoltura nuclear se rompe, terminado esta etapa. La segunda fase la metafase, en que los cromosomas se alinean al centro como ecuador celular gracias al huso mittico. En la tercera fase, anafase, ocurre el movimiento de los cromosomas hacia los polos, y la cuarte fase, telofase, en la que se forma la envoltura nuclear, para finalizar ocurre la divisin citoplasmtica originando a dos clulas genticamente iguales entre s. La meiosis es la forma en que a partir de las clulas diploides (poseedoras de dos series de cromosomas o 2n) se dividen para formar gametos haploides (poseedoras de una serie de cromosomas o n), vulos en hembras y espermatozoides en machos que son las clulas sexuales. En la fecundacin se fusionan los gametos de dos individuos (macho y hembra)de la misma especie formando un huevo o cigoto. La meiosis se produce en dos divisiones nucleares y citoplasmticas, nombradas como meiosis I y Meiosis II. En la Meiosis I los ms importante es que ocurre la recombinacin gentica y permutacin cromosmica, es decir migracin de cromosomas a los polos de manera aleatoria, esto genera variabilidad gentica. En la meiosis II muy parecida a la mitosis, en la que forman clulas con una cromatida (n). Cmo se comportan los espermatozoides en presencia de un ovulo?, cmo se diferencian las clulas en distintos estados de maduracin en un tejido sea ovrico o testicular?, qu estructuras las rodean? Y de manera independiente como gameto aislado cmo se comportan y que estructuras se presentan? Objetivos: Con esta actividad esperamos Reconocer las distintas etapas la divisin celular, los procesos de fecundacin, gametognesis y morfologa de de gametos, tejidos ovrico y Testicular, aplicando conocimientos de microscopia, las observaciones pertinentes se esquematizaran.

.Los objetivos especficos son: * Utilizar cada uno de los objetivos del microscopio para observar las etapas del ciclo celular. * Identificar y describir cada etapa de mitosis y meiosis en el ciclo celular. * Realizar preparaciones frescas de gametos masculinos y femeninos, para luego obsrvalos a travs del microscopio * Poner en contacto los gametos de molusco para realizar una fecundacin in vitro. Materiales y mtodos: Se dio inicio a la actividad preparando las primera muestras de observacin de la extraccin de gametos de choritos vivos lo cuales se mantuvieron en un acuario con agua de mar filtrada con oxigenacin. Para tener acceso a las gnadas se realizaron cortes de las placas corneas con un bistur en su extremo aboral. Se identificaron las gnadas por color, de los machos de color amarillo, de las hembras de color caf oscuro. Se tomaron muestras de gametos presionando suavemente, aspirando la solucin acuosa que sala de las gnadas con una pipeta Pasteur, depositndolo en un vaso pequeo. Esto se realizo para ambos casos hembras y machos, en distintos vasos. A cada vaso se le adiciono 2 ml de agua de mar filtrada, con el objeto de re suspender y as evitar deshidratacin. Utilizando 2 gotarios se prepararon 3 muestras (portaobjetos excavados rotulados), el primero conteniendo gametos femenino (1 gota), el segundo con gametos masculinos (1 gota) y el tercero una gota de una solucin de gametos femeninos y masculinos (procurndose el contacto entre ellos en una solucin previamente realizada en un vaso precipitado pequeo). Sobre las muestras se deposit un cubreobjetos y se observaron en el microscopio a cada muestra, luego se realizaron los dibujos esquemticos de lo observado. Se realiz una observacin de una preparacin permanente de tejido vegetal de allium cepa(L.), se identificaron clulas en distintos etapas de mitosis. Aplicando los conocimiento de microscopia se observaron dos preparaciones permanentes de tejidos se rattus novergicus (berkenhout), un tejido ovrico y un tejido testicular, se identificaron distintas etapas de maduracin de clulas germinales. La ltima actividad de observacin se realiz con preparaciones permanentes de clulas espermatozoides de bos taurus (linnaeus) y espermatozoides humanos.

Resultados: Durante las observaciones se observaron distintas caractersticas que se detallan yesquematizan a continuacin: Actividad N1: Choro Maltn * Gametos Femeninos.

Observaciones:

Fig.1 Ovulo de chorito observados en microscopio a 40x La observacin realizada en la muestra de vulos de choritos, nos ha sido posible distinguir un ovulo sin movimiento, rodeado por una capa externa negra y una parte interior de color caf que son distinguidas como Zona Pelcida (a) y masa celular (ovulo)(b), respectivamente. * Gametos Masculinos Objetivos: Logramos mirar una gran cantidad de espermatozoides, de un tamao bastante inferior al de los gametos femeninos, posean gran movilidad, eran de color verde cristalino, se vean con forma de cono.

* Fecundacion in vitro Observaciones:

En esta muestra tenamos vulos y espermatozoides juntos en agua de mar filtrada, estos ltimos intentaban ingresar al vulo insistentemente. Este vulo tena distintas caracterstica al visto anteriormente, era de color caf muy claro, con un borde amarillo y mas exteriormente un borde grueso de color negro, an se puede ver rodeado por pelusas y mantiene la misma forma de crculo irregular.

Actividad N2: Mitosis Muestra: permanente

Fig. 4. tejido vegetal de allium cepa (L.) observados en microscopio a 40x En este tejido vegetal es posible observar clulas separadas por sus paredes celulares, algunas asociadas con su respectivo ncleo, sin fase de divisin aparente y otras en distintos fases de divisin celular Actividad 3: Tejidos.

Ovario de Rata:

Fig. 5. tejido de ovario de rattus novergicus (berkenhout) hembra 100x de muestra permanente En esta muestra son distinguibles algunas partes del tejido como: A) Epitelio germinal B) Folculos primarios C) Folculos secundarios D) Folculos Primordiales E) Ncleo F) Clulas foliculares G) Zona Pelcida En los folculos se logran apreciar algunas diferencias.

Testculo de Rata:

Fig.7 testiculo de rattus novergicus (berkenhout) macho 40x de muestra permanente En la observacin de la muestra de es posible distinguir unos de dominios separados por una pared de clulas (clulas mixoides), como tbulos seminferos. En el tbulo puede ver un epitelio seminfero de varias capas, se identifica un lumen y espacio sin tertubulares. Espermatozoide de Toro:

Se observan una gran cantidad de espermatozoides, en la cual se diferencian cada uno de ellos, en

diferentes planos, algunos se ven de un color ms oscuro con su respectiva cabeza, cuello y cola, otros se ven de un color ms ntido y tambin se pueden diferencia claramente sus partes. La extensin de las colas se ven de un dimetro y extensin similar. Espermatozoide de Humano:

Se observan 3 estructuras conocidas: Cabeza (a), la cual tiene una parte superior blanca y un inferior caf. Un Segmento intermedio (b), bastante difcil de apreciar y una Cola o Flagelo (c) es un filamento que puede vibrar, batir o girar impulsando al espermio.

Discusin Observamos los espermatozoides de choro maltn, tienen una gran movilidad y esto se logra gracias a un flagelo o cola que tiene el espermatozoide. A su vez observamos el ovulo, que no tiene movimiento. El proceso de fecundacin es un proceso que puede durar ms de 20 minutos, es necesario esperar a que el espermatozoide atraviese ayudado por el contenido de vescula del acrosoma, traspasando la membrana plasmtica del ovulo. As respondemos a nuestras

problemticas, ya que la duracin de la fecundacin es alrededor de 20 minutos, y en nuestro caso, no pudimos observar el momento en que el espermatozoide entra al ovulo, ya que al mirar en el microscopio ya haba sucedido. Explicamos este hecho, debido a que nuestra muestra fue preparada al comienzo de la clase, por lo que al mirar la muestra, el tiempo haba trascurrido. Corrigiendo nuestra hiptesis, puesto que el tiempo de la fecundacin depende del organismo, y en este caso, tuvo ms duracin, que un minuto. Por otra parte, la fecundacin en bivalvos es externa, es decir, los gametos son expulsados al agua (6), esta es la razn de porque la fecundacin se llev a cabo en este medio para crear un ambiente adecuado. En la fecundacin los gametos haploides se fusionan para dar origen a un organismo diploide y los ncleos de ambos se unen formando el genoma del nuevo organismo. La fecundacin solo ocurre en individuos de la misma especie (especie-especfico) es por eso que espermios y vulos se reconocen a travs de molculas especiales de adhesin, lo que impide que un espermio de cierta especie fertilice a un vulo de otra. En la segunda actividad distinguimos. PROFASE: La cromatina se condensa dentro del ncleo formando los cromosomas, una vez formados se ubican cerca de la envoltura nuclear. Los centriolos se han duplicado encontrndose en extremos opuestos de la clula. Esta etapa termina cuando la envoltura nuclear se rompe (1). Nosotras observamos slo el final de esta etapa, es decir, cuando la envoltura nuclear ya estaba rota. METAFASE: Los cromosomas condensados se ubican en el centro de la clula (ecuador) gracias al huso mittico (micro tbulos orientados de polo a polo celular cerca de los centriolos). Durante la metafase cada cromosoma est compuesto por dos cromtidas, cada una posee un cinetocoro en donde se insertan los micro tbulos (1).

Por el nivel de detalle que nos permite ver el microscopio ptico slo pudimos identificar a los cromosomas ubicados en el ecuador. ANAFASE: Tiene como caracterstica principal el movimiento de los cromosomas hacia los polos de la clula, esto se debe al acortamiento de los micro tbulos del huso mittico (1). Logramos ver perfectamente este movimiento y agrupacin de los cromosomas en cada extremo de la clula. TELOFASE: Alrededor de cada grupo de cromosomas que se encuentran en los polos de la clula se forma la envoltura nuclear. Los cromosomas se condensan y el ncleo aumenta de tamao, esto debe a la hidratacin de ste y descondensacin de la cromatina. Resultando un ncleo esfrico (1). Pudimos observar los dos ncleos resultantes de la mitosis y tambin sus respectivas envolturas nucleares. En la estructura de tejido de ovario de rata, Se aprecian diversas figuras circulares que corresponden a los folculos, y otras zonas ms teidas que corresponden a los vasos vasculares. En la estructura de tejido de testculo de rata, En el tbulo puede ver un epitelio seminfero de varias capas. Los tbulos seminferos estn separados por tejido conectivo laxo. Al examinar un corte transversal de tbulos seminferos, se observa, hacia la periferia, una capa de espermatogonios, luego, ms hacia el centro se ubican los espermatocitos primarios, que al evolucionar, se transforman en espermatocitos secundarios, luego stos dan paso a las espermtidas y al ir progresando hacia el lumen de los tbulos, las espermtidas se convierten en espermatozoides que cuando estn listos, se secretan en el lumen de los conductos para almacenarse en el epiddimo. Nos dimos cuenta que no exista diferencia aparente entre los espermios humano y toro. Sabemos que los toros no son iguales, morfolgicamente, que los humanos, por lo que explicamos que se diferencian a partir del nmeros de

cromosomas que contienen que contienen la informacin de la especie toro con 60 cromosomas (2n), sus espermatozoides 30 cromosomas (n) y en humanos 46 cromosomas, 23 cromosomas (n)para sus espermatozoides, el nmero de cromosomas de la especie no implica que el organismo sea ms o menos complejo o evolucionado que otro.

Conclusin

Los objetivos de este trabajo se lograron cumplir de manera ptima, ya que, pudimos observar y reconocer cada uno de las fases de mitosis, tambin conseguimos ver una concreta fecundacin. Con la observacin del tejido extrado de choros maltones observamos los gametos tanto como masculinos (espermatozoides) y femeninos (vulos), tambin se consigui observar las caractersticas generales de cada uno. Despus al observar la muestra que contena ambos gametos, nos dimos cuenta que ste estaba fecundado, no pudimos ver el preciso momento de la fecundacin, pero si reconocer que hubo una gracias a este vulo y sus respectivos cambios. Es importante destacar que la mitosis es un proceso correlativo, donde cada una de sus fases est finamente hilada una a la otra, por lo que es muy complicado marcar intransigentemente el fin o el comienzo de una de ellas.

Bibliografa Libros 1.- Universidad Andrs Bello. Gua de Laboratorio N6: mitosis, meiosis y

fecundacin. Curso Laboratorio de Biologa Celular BIO-035.

Pginas de internet 2.- http://docencia.izt.uam.mx/acbc/documentos/lecturas/teoria_celular.htm.pdf Fecha de ingreso: 22 de noviembre del 2013

3.- http://www.genomasur.com/lecturas/Guia12a.htm Fecha de ingreso: 22 de noviembre del 2013

4.http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap03/03_02_01. htm Fecha de ingreso: 22 de noviembre del 2013

5.- http://bioclub.tripod.com/pag3001a.htm Fecha de ingreso: 22 de noviembre del 2013

6.-http://www.asturnatura.com/moluscos/bivalvos.html Fecha de ingreso: 22 de noviembre