III.3.

MTODO EMPLEADO PARA LA DETERMINACIN DE FITATOS En principio para la determinacin de fitatos, se compararon las tcnicas analticas siguientes: 1. Valoracin complexomtrica del Fe3+ con EDTANa2 utilizando cido sulfosaliclico como indicador. 2. Anlisis espectrofotomtrico, basado en la combinacin del tiocianato con el in Fe3+, obtenindose una coloracin que puede medirse a una longitud onda de 508 nm.

de

Se ensayaron 20 alcuatas de una misma muestra, 10 por cada mtodo. Una vez aplicado el test de Fischer se apreci la ausencia de diferencias significativas entre ambas tcnicas. El valor de la t exp fue de 1,92, inferior a la tab 2,1, para N = 19 grados de libertad y P = 0,05. Esto se comprob adems, a travs de la representacin grfica de los resultados por complexometra frente a los espectofotomtricos, obteniendo la ecuacin de la recta siguiente: Al final nos decantamos por la tcnica complexomtrica por su mayor sencillez y menor coste. III.3.1. VALORACIN COMPLEXOMTRICA CON FE 3+ Fue propuesto por Ruiz de Lope, Garca Villanova y Garca Villanova (1982) para la determinacin de cido ftico en harinas de cereales. Se basa en la precipitacin del cido ftico con notable exceso de disolucin de Fe (III) en presencia de cido sulfosaliclico, tambin en exceso, con el propsito de impedir la adsorcin por el precipitado de parte del Fe (III) gracias a la formacin de un complejo suficientemente estable. Por otra parte, el cido sulfosaliclico sirve de indicador del punto final en la valoracin complexomtrica del exceso de Fe (III). Disoluciones empleadas Disolucin de Fe(III) 2.10-2 M en HCl 0.16 M.- 7.8432 g de sal de Mhr (Fe (NH4 )2 (SO4 )2 ) en agua desionizada y 14 ml de HCl concentrado (d= 1,18 g/ml) se oxidan con H 2 O 2 en caliente y se aaden finalmente una punta de esptula de persulfato amnico. Enrasar a 1.000 ml despus de enfriar. El ttulo se comprob de la siguiente manera: (Cl3 Fe 0,1 N exacto) HCl concentrado.

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Disolucin de SnCl2 (150 g de SnCl2 .2H2 O / en 1 litro de HCl 1:2). Disolucin de HgCl2 (al 5 % en agua).

Procedimiento: Sobre 25 ml de la muestra conteniendo adems de HCl concentrado y caliente a casi ebullicin, se aade gota a gota la disolucin de Cl2 Sn hasta que desaparezca el color amarillo de los iones frricos y 1 2 gotas ms. Enfriar la disolucin a temperatura ambiente y agregar, rpidamente 10 ml de disolucin de cloruro mercrico. El precipitado obtenido debe ser blanco, sedoso y en pequea cantidad; si es grande, indicando la presencia de mercurio elemental finamente dividido, debe descartarse la disolucin. Una vez reducido el hierro: Se valora directamente con K2 Cr2 O7 0,1 N empleando como indicador difenilamina sulfonato sdico (0,2 % en agua), pero aadiendo primero al medio 6 ml de H2 SO4 concentrado y 5 ml de H3 PO4 . Titrisol de EDTA 10-2 M.- Se prepara hasta obtener 1 litro de disolucin. Disolucin de HCl 4.10-1 con 5 % de Na2 SO4.- 34 ml de HCl concentrado (d= 1,18 g/ml) y 50 g de sulfato sdico y agua desionizada hasta 1000 ml. Disolucin de cido sulfosaliclico al 20 % .- 200 g de cido sulfosaliclico en agua desionizada hasta 1.000 ml. Descripcin del mtodo A la muestra desecada, con un peso comprendido entre 2 y 15 g, como se indicar ms adelante, se aaden 40 ml de la disolucin de HCl- Na2 SO4 en un matraz de 50- 100 ml tapado y se deja por espacio de 90 minutos agitando intermitentemente. En un tubo de vidrio neutro se ponen 20,0 ml de lquido sobrenadante transparente de la extraccin anterior (filtrar si es necesario), 20 ml de la disolucin de HCl- Na2 SO4, 20 ml de disolucin de Fe (III) y 20,0 ml de la de cido sulfosaliclico al 20%. Cerrar con un tapn de goma atravesado por un tubo estrecho de vidrio de unos 30 cm de longitud. Calentar 15 minutos en bao mara hirviente. Enfriar al chorro del grifo y dejar en posicin vertical. Comprobar la existencia del precipitado de fitato frrico. Separar del sobrenadante lmpio 20,0 ml y depositar en un vaso de precipitados de 250 ml y completar hasta unos 200 ml con agua desionizada, elevar el pH a 2,5 0,5 con glicocola (unos 0,75 g). Calentar alrededor

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de los 70 C y titular en caliente el exceso de Fe (III) con disolucin de EDTA 0,010 M hasta color amarillo brillante. Conviene emplear un agitado magntico. Clculos El porcentaje de cido ftico de la muestra se deduce de la ecuacin siguiente despus de seguir exactamente las instrucciones detalladas en la "descripcin del mtodo": cido ftico (%) = 1,32 (10 - V)/P V= volumen de disolucin de EDTA en mililitros P= peso de la muestra en gramos

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