TEMA N 5 Espectroscopia de Resonancia magntica nuclear

5.1. Fundamentos fsicos de la espectroscopia RMN

El giro de las cargas elctricas del ncleo hace que se comporte como un pequeo imn
momento magntico ()

En presencia de un campo magntico externo B0 el ncleo es capaz de orientarse a favor o en contra Los dos estados tienen diferente energa. Esa diferencia aumenta con la intensidad del campo magntico

SE DENOMINA RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR AL FENMENO POR EL QUE UN NCLEO SALTA DE UN ESTADO DE ESPN A OTRO CUANDO ES IRRADIADO CON LUZ DE LA ENERGA (FRECUENCIA DE LARMOR) ADECUADA

La energa necesaria para producir un trnsito entre estados (resonancia) es del orden de las radiofrecuencias

Para el protn (H-1) en un campo Ho de 14 Teslas, la frecuencia de resonancia sera de 600 MHz, lo que equivale a una energa de 0.2 J/mol. Para campos magnticos ms intensos son necesarias frecuencias mayores

En ausencia de un campo magntico externo, los de los distintos ncleos pueden asumir cualquier direccin (como un imn) Al colocar un ncleo con momento angular P y momento magntico en un campo magntico externo, el momento angular se alinear respecto al campo externo, con un leve exceso alineado a favor del campo.

B0

Para un ncleo de I =

Dos estados energticos posibles: a favor o en contra del campo Bo

b Bo > 0 Bo = 0 a DE = h n

La energa necesaria para pasar de un estado de spin al otro est determinada por la siguiente ecuacin:

DE = hn = h B0 / 2 n0 = B0 / 2 ECUACIN DE LARMOR

n0 = frecuencia de Larmor
Para imanes de campo magntico entre 2.35 y 18.6 Tesla, n0 se encontrar en el rango de 100 a 800 MHz, es decir corresponder a una frecuencia de radio
rayos rayos x UV VIS IR -ondas radio

10-10

10-8

10-6 10-4 10-2 100 longitud de onda (cm)

102

En una molcula, cada ncleo magnticamente activo tiene una frecuencia de Larmor definida y caracterstica, es decir absorber radiacin electromagntica de una frecuencia determinada para cambiar de estado de spin.

Todos los ncleos manifiestan resonancia magntica nuclear? Slo tienen una EJEMPLOS N MSICO N ATMICO SEAL RMN frecuencia de resonancia 12C , 16O PAR PAR NO caracterstica (cuando se 6 8 2H , 10B , 14N someten a un campo PAR IMPAR SI 1 5 7 magntico) aquellos 13C , 17O IMPAR PAR SI 6 8 ncleos cuyo nmero 1H , 11B , 15N IMPAR IMPAR SI msico o nmero atmico 1 5 7 sea impar (o ambos) Frecuencias caractersticas a 10000 Gaus (1T)
Ncleo
1H 2H

Abundancia Natural (%) 99.9844 0.0156 1.108 100 100

Esp n 1/2 1 1/2 1/2 1/2

Momento Magntico (mag.nuc) 2.79268 0.857386 0.70220 2.6273 1.1305

Frecuencia RMN (MHz)* 42.5759 6.53566 10.705 40.055 17.236

Sensibilidad Relativa 1.000 0.00964 0.159 0.834 0.0664

Cte. .108 (SI) 2.6752 0.4107 0.6726 2.5167 1.0829

1 1 6

13C

19F 9 31P 15

Ncleo
1H

Abundancia Natural 99.985 %

I 1/2

2H
12C 13C 14N

0.015 %
98.9 % 1.1 % 99.63 %

1
0 1/2 1

15N
16O 17O 18O 31P

0.37 %
99.76 % 0.04 % 0.2 %

1/2
0 5/2 0

100 %

1/2

5.2. Instrumentacin Espectrmetro de RMN

Cmo se obtiene un espectro de RMN?

Esquema aparato de RMN

Espectrmetro de RMN

ONDA CONTINUA TECNICA DE PULSOS (FT)

13

5.3. Espectro de RMN 1H

Referencia

Espectro del tetrametil silano (TMS) Patrn universal en espectroscopia HRMN CH3
H3C

Si CH3

CH3

ppm

10

Espectro de Resonancia magntica nuclear

Bo = 2.1 Tesla Para Bo = 2.1 T no = B90.000.000 Hz (1H resuena a 90 MHz)

En un espectro de RMN no se representan frecuencias absolutas de resonancia, porque daran lugar a nmeros demasiado altos. Para evitarlo, se elige una seal como referencia y lo que se determina es la separacin entre la frecuencia de resonancia de un ncleo y una frecuencia de referencia. Esta magnitud se mide en Hz.
Reproducido de Volhardt, Organic Chemistry, 3 Ed, 1999

320 Hz

480 Hz

16 TMS (Ref)

Se trabaja con la diferencia respecto a una referencia (nseal nref)

REFERENCIA INTERNA:

ClCH2OCH3
Bo (T) 2.1

480 Hz 960 Hz

320 Hz 640 Hz

4.2

Problema: dependencia de n de Bo

Solucin:
Tetrametilsilano (TMS)

dividir por no (n aparato)

(nseal nref)

no

Para Bo = 2.1 T no = 90.000.000 Hz 480 / 90.000.000 = 5.33 x 10-6 Para Bo = 4.2 T no = 180.000.000 Hz 960 /180.000.000 = 5.33 x 10-6

Problema: nmeros muy pequeos Solucin: multiplicar por 106 (ppm)

d=

(nseal nref)

no

106
17

n depende de la envoltura electrnica

n depende de la estructura

Desplazamiento qumico (d) : Posicin de una seal en el espectro Se expresa en funcin de la de una sustancia de referencia

(nseal nref) 6 10 = no

Partes por milln (ppm)

Como patrn se utiliza TETRAMETILSILANO (TMS) Ventajas del TMS : 1) Seal nica 2) Lquido voltil 3) Aparece a n < n seales (n TMS = 0 ppm) 4) No interacciona con la muestra

18

Bo = 2.1 Tesla

Desplazamiento qumico, Para Bo = 2.1 T no = B90.000.000 Hz (1H resuena a 90 MHz)

5.33 ppm

3.55 ppm 320 Hz Observa: 1 ppm = 90 Hz ! 480 Hz

TMS (Ref)

19

Qu informacin se puede obtener de un espectro RMN 1H?

Nmero

de seales: relacionada con el nmero de diferentes de la muestra

1H

Frecuencia de las seales (d) : relacionada con el entorno molecular del ncleo.
rea de las seales (integral): relacionada con la cantidad de cada tipo de 1H. Multiplicidad de cada seal: relacionada con el nmero de 1H vecinos de cada tipo. Constantes de estereoqumica. acoplamiento (J): brinda informacin

Intercambio de 1H : indica la presencia de cierto tipo de grupos funcionales (-COOH, -OH, -NH2)

5.4. Equivalencia qumica

Normalmente se emplean tres mtodos para identificar el nmero de tipos de hidrgeno en una molcula: 1.- Mtodo de sustitucin Se sustituye cada hidrgeno por un tomo diferente (por ejemplo Cl) y se comprueba si se obtienen compuestos diferentes. Por ejemplo, en el cloroetano hay dos tipos de hidrgeno porque sustituyendo por cloro se pueden obtener dos compuestos diferentes, el 1,1-dicloroetano y el 1,2-dicloroetano 2.- Descripcin verbal Si necesita emplear distintos trminos para describir dos tomos de hidrgeno es que representan dos tipos diferentes. Por ejemplo un -OH es diferente a un -CH , un -CH3 es diferente a un -CH2- y un sp3 C-H es diferente a un sp C-H 3.- Simetra Los tomos de carbono que puedan ser intercambiados por operaciones de simetra son equivalentes

Criterio de sustitucin
Homotpicos: tomos o grupos cuya sustitucin da lugar al mismo producto Enantiotpicos: tomos o grupos cuya sustitucin da lugar a dos enantimeros

Diastereotpicos: tomos o grupos cuya sustitucin da lugar a dos diasteremeros

Ncleos equivalentes

Problemas resueltos

Veremos que sus seis protones, solo dan una seal. Los dos grupos metilo poseen protones que no solo son equivalentes entre s (protones dentro del mismo grupo metilo) sino que adems son equivalentes a los protones del otro grupo metilo de la molcula. Esto se debe a que ambos grupos metilos son uno respecto al otro como una imagen refleja o especular. La molcula de acetona tiene un plano de simetra en torno al grupo funcional (C=O) carbonilo.

0.35 0.40

0.30

CH3CH2CH2CH3

CH3
1.22

0.20

CH2

TMS

0.10

0.00

ppm

10

cualquier molcula simtrica como por ejemplo, el n-butano:

1 2 3 4

CH3 CH2 CH2 CH3

muestra un plano de simetra que pasa entre el carbono 2 y 3. Si esto es as, entonces, todos los protones de los carbonos 1 y 4 son equivalentes, al igual que todos los protones de los carbonos 2 y 3.

1.46 0.40

1.00

a b CH3CH2CHCH3 Cl

b CH3
1.67

a CH3

0.30

CH2
0.20 3.90

TMS
0.10

CH

0.00

ppm 10

0.20

O CH3CH2CCH2CH3 a b b a 3-pentanona b
3.14

1.32

0.10 0.00

TMS

0.00

ppm

10

a
0.70 1.01

O
0.60

0.50

CH3CH2CCH2CH2Cl c d a b 1-cloro-3-oxopentano

d
3.81

c
2.94

b
2.35

0.40

0.30

TMS
0.00

0.20

0.10

0.00

ppm

10

La sustitucin de un protn en el carbono 1, rompe la simetra haciendo que ahora todos los protones sean diferentes.

Problemas propuestos A continuacin se muestra el espectro RMN-H de un compuesto desconocido

Identify in the molecules below all pairs/groups of hydrogens that are homotopic, enantiotopic, or diastereotopic. When appropriate, label prochiral hydrogens as HR or HS

Exercise 1: Identify the number of signals expected in the 1H NMR spectrum of the following compounds.

1 signal 4 signals

1 signal

4 signals

2 signals

5 signals

2 signals 3 signals
51

Exercise 2: Determine whether the two protons shown in red are homotopic, enantiotopic, or diastereotopic.

diastereotopic diastereotopic

homotopic

enantiotopic

homotopic enantiotopic

52

5.4. Desplazamiento Qumico

Todos los ncleos de una muestra muestran resonancia a una misma frecuencia? Apantallamiento atmico (electrones en torno al ncleo)

Apantallamiento molecular
(entorno atmico)

El campo local no es igual al externo Cambio frecuencia

Cambio campo magntico

DESPLAZAMIENTO QUMICO Los ncleos de una muestra entran en resonancia con ondas de radio de frecuencias ligeramente diferentes. Esta circunstancia, debida a las diferencias de sus entornos qumicos, permite diferenciar unos ncleos de otros.

Factores que afectan al desplazamiento qumico de los protones

Efecto inductivo:
Si un tomo ms electronegativo retira carga elctrica que previamente estaba en torno a un protn, el campo local que se opona al externo disminuye, en consecuencia la resonancia se produce con un campo externo menos intenso. Ojo: En trminos de frecuencia diramos que se produce a mayor frecuencia, ms a la izquierda

Apantallamiento en protones
Los protones en distintos entornos qumicos estn apantallados en distintas cantidades. El protn hidroxilo no est tan apantallado como los protones metilo, por lo que el protn hidroxilo absorbe a un campo ms bajo que los protones metilo. Decimos que el protn est algo desapantallado por la presencia de tomos de oxgeno electronegativos.

Cuando los protones se encuentran en distintos entornos de la molcula y la molcula est expuesta a una frecuencia constante, los protones absorbern la radiacin a distintas intensidades del campo magntico. La RMN variar el campo magntico y representar un grfico de la absorcin de energa como funcin de la intensidad del campo magntico.

Los protones de metilo ms apantallados aparecen hacia la derecha del espectro (campo ms alto); el protn hidroxilo menos apantallado aparece hacia la izquierda (campo ms bajo).

En un espectro RMN el campo magntico aumenta desde la izquierda hacia la derecha. Las seales del lado de la derecha estn en la parte ms alta del espectro y las de la izquierda estn en la parte ms baja. Los protones apantallado aparecen en la parte alta.

Escala delta () RMN.

Utilizacin de la escala con espectrmetros de 60 y 300 MHz. El desplazamiento del TMS se define como O. La escala aumenta de derecha a izquierda (hacia el campo ms bajo). Cada unidad se diferencia 1 ppm del TMS: 60 Hz a 60 MHz y 300 Hz a 300 MHz.

El desplazamiento qumico de los protones se mide en partes pos milln (ppm), independientemente del campo y la frecuencia del instrumento utilizado. Cuanto ms altas son las frecuencias del espectrmetro, ms detallado es el espectro

Espectro de RMN del metanol

Los protones metilo absorben a = 3.4 ppm y los protones hidroxilo absorben a = 4.8 ppm.

Los tres protones metilo son equivalentes, por lo que producirn slo una seal.

Espectro de RMN de protn para un compuesto de frmula C6H12O2.

5.5. Curva integral

Curva de integracin. La intensidad relativa de una seal en la espectroscopia de RMN-H es proporcional al nmero de protones que contribuyen a la seal. La curva superpuesta a las seales del espectro, que se puede observar en la figura anterior, es la llamada curva de integracin. La altura del escaln permite calcular el nmero de tomos de hidrgeno que dan origen a cada seal.

Informacin disponible a partir de la integral

La lnea integral (verde) indica la intensidad del pico e informa del nmero de protones que producen la seal

Ejercicio: En el primer caso las dos seales estn en la proporcin 3:2. Como el nmero total de protones es de 10, una corresponde a 6 protones y la otra a 4. Y en los otros dos casos?

Se mide una altura para cada escaln 7.0 cm y 1.6 cm. Para calcular el nmero de tomos de hidrgeno que originan cada seal se procede del siguiente modo: 1. Se suman las dos integraciones y se divide por el nmero total de hidrgenos de la estructura: 7.0 cm + 1.6 cm = 8.6 cm

2. Para saber el nmero de hidrgenos de cada seal se multiplica su integracin por el valor anterior

As pues, la seal ms intensa se debe a 9 protones (tres metilos de la estructura) mientras que la menos intensa se debe a tan slo dos protones (metileno).

La molcula tiene dos tipos de protones equivalentes en una relacin 9:3. Esta relacin integral puede ser reducido a 3:1 indicado.

5.6. Acoplamiento espn-espn

La mayora de los ejemplo de acoplamiento espn-espn implican el acoplamiento entre protones que estn separados por tres enlaces, por lo que estn unidas a los tomos de carbono adyacentes.

El acoplamiento es uno de los fenmenos ms observados cuando los hidrgenos se unen a los tomos de carbono adyacentes. El acoplamiento espn-espn entre los tomos de carbono germinales se puede producir si los hidrgenos tienen distintos entornos (no equivalentes).

En la mayora de los casos de acoplamiento espn-espn implican acoplamiento entre protones que estn separados por tres enlaces, por que estn enlazados a tomos de carbono adyacentes.

Cuando los hidrgenos constan de cuatro enlaces o ms, el acoplamiento espn-espn no se suele observar. Cuando realmente tiene lugar, se denomina "acoplamiento de gran rango".

Constantes de acoplamiento de protn.

rbol de desdoblamiento del estireno.

La seal Ha del estireno est desdoblada con una Jab = 17 Hz por acoplamiento con Hb, y tambin desdoblada con una Jac = 11 Hz, por acoplamiento con Hc. En la elaboracin de un rbol de desdoblamiento es til comenzar con la constante de acoplamiento ms alta. El acoplamiento trans (J = 15 Hz) es mayor que el acoplamiento cis (10 Hz), y ambos son ms grandes que el acoplamiento germinal (2 Hz). En el caso de Ha, el rbol empieza con el acoplamiento trans, despus el cis, y por ltimo el germinal.

Espectro de RMN de protn del estireno.

El espectro muestra el desdoblamiento exacto razonado a travs del rbol de desdoblamiento

rbol de desdoblamiento del estireno.

La seal del protn Hb del estireno est desdoblada por acoplamiento con Ha (Jab = 17 Hz), y tambin por acoplamiento con Hc (Jbc = 1.4 Hz). En la elaboracin de un rbol de desdoblamiento es til comenzar con la constante de acoplamiento ms alta. El acoplamiento trans (J = 15 Hz) es mayor que el acoplamiento cis (10 Hz), y ambos son ms grandes que el acoplamiento germinal (2 Hz). En el caso de Ha, el rbol empieza con el acoplamiento trans, despus el cis, y por ltimo el germinal.

Hay tres diferentes tipos de tomos de H en el acetate de etilo.

Los Hidrgenos (H) sobre el acetato CH3COO- no se acoplan con otrosa tomos de hidrogeno y aparecen como un singulete, pero los hidrgenos del -CH2- y CH3 del grupo etilo (-CH2CH3) estan acoplados unos con otros, resultando en un cuartete y triplet respectively.

Desplazamientos qumicos ms frecuentes en el espectro de RMN de protn.

Los protones directamente enlazados a los carbonilos estn muy desapantallados y sus seales se encontrarn en el campo bajo del espectro. Las seales de los protones vinlicos se pueden encontrar centradas alrededor de 5 - 6 ppm, mientras que los protones aromticos estn en el campo ms bajo a aproximadamente 7.0 ppm.

Se ha escogido una sustancia de referencia (en el caso de los protones el tetrametilsilano, TMS). Su seal est a la derecha del espectro y a partir de ella se miden las posiciones a las que aparecen las dems seales

La posicin del resto de seales se indica mediante el desplazamiento qumico () medido de la siguiente manera:
= (f-fLOC)106/ fo (ppm)

Frecuencia del aparato

RMN de protones

Protones menos apantallados, resuenan a campos ms bajos y frecuencias ms altas

Protones ms apantallados, resuenan a campos ms altos y frecuencias ms bajas Aumenta el campo magntico a frecuencia fija Aumenta la frecuencia a campo fijo Campo alto

Campo bajo

Rangos de desplazamientos qumicos de protones*

Regin de campo alto

Regin de campo bajo

Para muestra disueltas en CDCl3. La escala es relativa a TMS = 0

Anisotropa magntica de los sistemas : Cuando los sistemas de electrones son sometidos al campo magntico externo inducen otro campo que se opone al anterior. Aromticos: el campo magntico efectivo que sienten los protones aumenta y, por tanto, lo hace la frecuencia de resonancia (resuenan a campo bajo)

Otros sistemas con electrones

INTERPRETACIN DE UN ESPECTRO RMN DE PROTONES 1.- Informacin disponible a partir del desplazamiento qumico (espectro de baja resolucin)

En el HRMN de la propanona slo hay una seal porque todos los protones son equivalentes

La seal se presenta a 2,2 ppm, zona en que resuenan los protones unidos a un carbono unido, a su vez, a un grupo carbonilo (1,5 2,5).

Ejercicio: Justifique las cuatro seales que aparecen en el HRMN del fenol

Equivalencia qumica:
Dos tomos de hidrgeno son equivalentes cuando al ser sustituidos por otro tomo dan el mismo compuesto

INTERPRETACIN DE UN ESPECTRO RMN DE PROTONES 3.- Informacin disponible a partir del acoplamiento espn-espn (espectro de alta resolucin) En muchos casos los picos aparecen como grupos de picos debido al acoplamiento que sufren los espines con ncleos vecinos

El espectro RMN del 1,1-dicloroetano presenta dos seales: = 5,9 ppm ; integracin = 1 corresponde a -CHCl2 = 2,1 ppm ; integracin = 3 corresponde a -CH3 Por qu las seales se han desdoblado y aparecen con 4 y 2 picos respectivamente?

El desdoblamiento de las seales se produce por el efecto del campo magntico vecino sobre el aplicado externamente, provocando que la frecuencia de resonancia cambie
Efecto de grupo -CH- sobre el grupo -CH3
Efecto del grupo -CH3 sobre el grupo -CH

El espn del grupo metino -CH puede adoptar dos orientaciones con respecto al campo externo aplicado. Como resultado de ello la seal del grupo -CH3 vecino se desdobla en dos lneas de igual intensidad, un doblete.

Los espines de los tres protones del grupo metilo pueden adoptar 8 combinaciones, que se pueden agrupar en cuatro opciones diferentes (en dos casos hay tres combinaciones equivalentes). Como resultado de ello la seal del grupo vecino -CH se desdobla en cuatro lneas con intensidades respectivas 1:3:3:1, un cuartete

Podemos afirmar que la proximidad de n protones equivalentes en un carbono vecino provoca el desdoblamiento de la seal en n+1 lneas, el nmero de stas se conoce como multiplicidad de la seal. Los protones equivalentes no se acoplan entre s.

Regla N + 1
N de protones equivalentes 0 1 N de picos (multiplicidad) 1 (singulete) 2 (doblete) 1 Relaciones de rea 1 1

2
3 4 5 6

3 (triplete)
4 (cuadruplete) 5 (quintuplete) 6 (sextuplete) 7 (septuplete) 1 1 6 1 5 1

1
3 4

2
3 6 10

1
1 4 10 15 5 1 1 6 1

15

20

J es independiente del campo magntico aplicado

Cuando en el acoplamiento intervienen dobles enlaces la situacin no sigue la regla del n+1

La constante de acoplamiento mide la intensidad de la interaccin entre pares de protones. Tiene el mismo valor en las seales acopladas.

Ejemplo: Espectro de 1H del estireno

Ha
Hc Ha Hb

Hb

Hc

17Hz Jab = 17 Hz Jac = 11 Hz

17Hz

11Hz

11Hz

11Hz

1.4 Hz

1.4 Hz

1.4 Hz

doble doblete

Ejercicio: A cul de las tres sustancias corresponde el RMN?

cido propanoico

Ejercicio: Qu informacin puede obtener del siguiente espectro sabiendo que la frmula molecular del compuesto es C4H8O2 ?

3 entornos diferentes para los tomos de hidrgeno Los tomos de hidrgeno en estos tres ambientes estn en una relacin 2:3:3 Como son 8 hidrgenos, hay un grupo CH2 y dos grupos CH3
El grupo CH2 de 4.1 ppm tiene junto a l un grupo CH3

El grupo CH3 de 1.3 ppm tiene junto a l un grupo CH2 El grupo CH3 de 2.0 ppm tiene junto a l un carbono sin hidrgeno

Ejercicio: Interpretacin del espectro RMN 1H:

Estn presentes 5 tipos de H en la proporcin 5 : 2 : 2 : 2 : 3. Hay un singlete de 5 H, dos tripletes de 2 H cada uno, un cuartete de 2 H y un triplete de 3 H. Cada triplete indica que hay 2H en la posicin adyacente, y un cuartete 3H en la misma posicin. Por ello los picos a 4,4 y 2,8 ppm deben estar conectados como unidad CH2CH2. Los picos a 2,1 y 0,9 ppm deben formar CH2CH3 . Usando la tabla de desplazamiento qumico los H pueden ser asignados de la siguiente manera: 7.2ppm (5H) = ArH 4.4ppm (2H) = CH2O 2.8ppm (2H) = Ar-CH2 2.1ppm (2H) = O=CCH2CH3 0.9ppm (3H) = CH2CH3

C3H6O2

3:2:1

Ejercicio: Elucidacin estructural. Teniendo en cuenta los espectros y la frmula molecular, justificar qu sustancia los produce.

C3H6O2

1:1

Ejercicio: Elucidacin estructural. Teniendo en cuenta los espectros y la frmula molecular, justificar qu sustancia los produce.

Acetato de metilo

Atomos a 2,05 ppm

Atomos a 3,65 ppm