AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS Y OBTENCIN DE UN CULTIVO PURO

Fundamento. La mayor parte de los estudios que se realizan sobre bacterias requieren que cada cepa bacteriana est aislada de los restantes microorganismos que puedan acompaarla. Este aislamiento es un paso bsico antes de emprender algn estudio serio con bacterias en el laboratorio. Se logra mediante tcnicas sencillas de siembra en medios slidos a partir de una mezcla bacteriana. El objetivo es que tras la incubacin de dic!o medio as" inoculado aparezcan co on!a" separadas cada una de las cuales procede de una sola bacteria correspondiente a una determinada cepa de las presentes en la mezcla original. # partir de cada colonia de cada tipo presente en ese medio slido se puede aislar la cepa correspondiente obtenindose un cu t!#o $u%o.

Mate%!a $a%a e a!" am!ento en $ aca. $os cultivos puro de dos microorganismos %Echerichia coli y Micrococcus luteus) &ubos de ensayo con solucin salina estril &ubos de ensayo con medio de cultivo 'lacas de 'etri con medios de cultivo. #sa de platino (ec!ero Estu)a de cultivo

M&todo. *on el asa de platino previamente )lameada e+traer una pequea porcin de uno de los cultivos y e)ectuar una suspensin en el tubo que contiene la solucin salina. ,epetir la misma operacin con el otro cultivo. #gitar bien el tubo !asta conseguir una suspensin !omognea.

&omar una gota del tubo de ensayo con el asa de platino estril y sembrar en

estr"a sobre la super)icie de una placa de 'etri. Es muy importante realizar el m+imo nmero de estr"as para diluir la muestra y de esta manera conseguir que en las estr"as )inales se encuentren colonias aisladas.

-ncubar durante ./ !oras *omprobar que se !an obtenido colonias aisladas

M. luteus

E. coli

(#&E,-#L '#,# L# 01&E2*-32 $E 42 *4L&-50 '4,0

'lacas con colonias aisladas &ubos con agar inclinado #sa de siembra (ec!ero Estu)a incubadora

M. luteus E. coli

(6&0$0

# partir de cada una de las distintas colonias que !an aparecido en la placa de 'etri sembrar en un tubo de agar inclinado para obtener un cultivo puro de ese microorganismo y de esa )orma poder estudiarlo posteriormente. Se debe tener la precaucin de tocar con el asa de platino estril solamente una colonia e inocularla en el tubo de agar inclinado !aciendo estr"as muy juntas.

-ncubar en la estu)a ./ !oras. 'ara comprobar que el cultivo est puro se debe e)ectuar una tincin y posterior observacin al microscopio