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COLEGIO CALASANZ DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIN AMBIENTAL

PRCTICA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Elaborado por: Juan Esteban Rincn Poveda Presentado a: Sandra

2014 10 B

INTRODUCCION Las clulas llevan a cabo simultneamente una gran cantidad de reacciones qumicas necesarias para la vida. Muchos de los productos de esas reacciones se necesitan inmediatamente, y si no fuera por la participacin de las enzimas, algunas reacciones no se produciran tan rpido. Las enzimas, en su mayora protenas o RNA (riboenzimas), son catalizadores qumicos que agilizan una reaccin que envuelve la formacin o rompimiento de enlaces qumicos. Las enzimas no se consumen en las reacciones, ni tampoco se alteran, razn por lo cual no se necesitan en grandes cantidades. Las enzimas actan sobre los sustratos formando un complejo enzima-sustrato esto ocurre en un lugar en especfico conocido como el sitio activo de la enzima. Las enzimas son muy selectivas porque pocas molculas pueden interactuar bien con este sitio Reaccin con participacin de una enzima. Se forma el complejo Enzima-Sustrato al unirse la enzima a los sustratos en lugares especficos de la enzima donde encajan los sustratos. Se forma el producto y la enzima no se altera en el proceso; quedando libre para otra reaccin. Las enzimas reducen la energa de activacin necesaria para llevar a cabo una reaccin; es decir, reducen la barrera de energa que hay que sobrepasar para que la reaccin se lleve a cabo

OBJETIVO GENERAL o Explicar qu es una enzima y cmo stas actan en reacciones intracelulares

OBJETIVOS ESPECIFICOS o o Distinguir entre inhibicin competitiva e inhibicin no-competitiva. Identificar factores que afectan la actividad enzimtica

MATERIALES Perxido de hidrgeno Papa Goteros Halogenado de hgado, papa, setas y espinaca Tubos de ensayo grandes Homogenado de hgado Bao de agua Termmetro Agarradera de tubo Hielo Congelador

Hgado
Setas Espinaca Gasa (cheesecloth) Placas de porcelana Goteros Morteros o licuadora Perxido de hidrgeno

PROCEDIMIENTO 1

- Corte en pedazos por separado las muestras de papa, hgado, setas y espinaca. - Usando un mortero, muela el material con un poco de agua hasta diluir parte de la muestra; no muela excesivamente para que no queden pedazos muy pequeos del material. - De ser necesario, filtre el macerado con una gasa - Coloque cada macerado en un tubo de ensayo. - Usando un gotero, coloque cinco gotas de cada macerado en las cpsulas porcelana y aada tres gotas de perxido de hidrgeno

PROCEDIMIENTO 2 1. Rotule tres tubos de ensayo A, B y C 2. Aada 3 mL de macerado de hgado a cada tubo. 3. Aada soluciones 3M de HNO3 y 3M de NaOH a los tubos como sigue, y agite suavemente hasta mezclar: Tubo A 3 ml de 3M HNO3 Tubo B 3 ml de 3M NaOH Tubo C control (sin cido ni base) 4. Aada 3 mL de perxido de hidrgeno a cada tubo. PROCEDIMIENTO 3 Rotule cinco tubos de ensayo del 1 al 5 y caliente un bao de agua hasta 37 C y otro hasta 80C. 2. Aada 5 mL de macerado de hgado a cada tubo. 3. Mantenga los tubos a las siguientes temperaturas: Tubo 1 = 80 C por 15 minutos Tubo 2 = 37 C por 15 minutos Tubo 3 = Temperatura ambiental Tubo 4 = Hielo por 30 minutos Tubo 5 = Congelador a 4 C por 30 minutos 4. Aada 2 mL de perxido de hidrgeno al tubo 1. 5. Mida el tiempo transcurrido desde que se aadi el perxido hasta que se comienzan a producir burbujas. 6. Repita con los dems tubos. 7. Compare sus resultados en trmino de tiempo de reaccin vs. Temperatura

MARCO TEORICO Factores que afectan la actividad enzimtica

La temperatura: Hace falta una determinada temperatura para que la reaccin comience. A partir de una determinada temperatura (temperatura crtica) la actividad enzimtica baja, y la enzima se desnaturaliza. El PH: El PH afecta mas a una enzima que la temperatura, cuando hay un pH alto se desnaturaliza pero cuando el pH es bajo tambin se desnaturaliza. La actividad enzimtica es normal al pH ptimo (caracterstico de cada enzi Sustrato: A partir de una determinada cantidad de concentracin de sustrato, ya no aumenta la velocidad de reaccin. Cuando llega a este punto, cuando la enzima se satura, la velocidad es constante y la actividad es mxima. Enzima: la concentracin de la enzima a medida que aumenta, aumenta la velocidad de reaccin; pero luego se vuelve constante.

RESULTADOS

MACERADO Agua Papas Setas Hgado

Espinaca

Reaccin al aadir gotas de perxido No hubo reaccion La catalasa separara el Oxigeno del Perxido de Oxigeno, liberando una gran cantidad de gas (O2). Produce un poco mas de burbujas que la espinaca El higado posee la enzima catalasa que desdobla a la molecula de peroxido de hidrogeno liberando oxigeno, produciendo burbujas Produce burbujas en muy poca cantidad a comparacin con el higado