COLIFORMES TOTATES Y FECALES

OBJETIVO GENERAL: Realizar recuentos en placa de coniformes de refresco de mogonchinchi. OBJETIVO ESPECFICO: Realizar el recuento de microorganismos de las placas -1, -3, -5. Observar que placa presenta mayor cantidad de microorganismos. Realizar la siembra en caldos para determinar coliformes totales y fecales. FUNDAMENTO TERICO: MATERIALES Y MEDIOS: MATERIALES: 4 Tubos de ensayo 3 Pajas Petri 1 Mechero 1 Gradilla 1 Bolsa stomacher 2 Embaces 1 Pipeta de 10ml y 6 Pipetas de 1ml 1 Probeta de 250ml 1 balanza 2 Matraces MEDIOS: - VRBL - CVBB - Ec MUESTRA: - Refresco de mogonchinchi.

METODOLOGA: 1.- medir 25 ml de refresco de mogonchinchi en la bolsa stomacher. 2.- Preparar los medios, medir 225ml de solucin de peptona y depositarlo en la bolsa stomacher junto con la muestra, agitar para que se mezclen. 3.- Depositar 9ml de solucin peptona que est en otro matraz a cada tubo de ensayo de -1, -2,-3 y -5.

4.- Poner 1ml del diluyente a cada tubo -1,-2, -3 y -5 y a cada caja petri de igual forma, con diferentes pipetas para cada uno. 5.- Aadir a cada placa PCA y mezclar perfectamente medio e inoculo sobre la mesa de trabajo, haciendo movimientos circulares con la placa. Dejar solidificar el agar de las placas, y volver a aadir la otra capa de agar esperar que solidifique y seguidamente se introduce a una estufa a 37C durante un periodo de 24hrs. 6.- trascurriendo este tiempo de incubacin se cuentan las colonias en aquellas placas que muestran entre 15 a 150 colonias aisladas. Las colonias contadas se irn marcando para no contarlas de nuevo. 7.- Una vez contadas tomar dos cepas para sembrar en caldos CVBB y Ec, y poder determinas coliformes totales y fecales. DATOS CALCULOS Y RESULTADOS: DATOS: Caja Petri -1: INC Caja Petri -3: 10 Caja Petri -5: 0 CALCULOS Y RESULTADOS:

Se utiliz la norma ISO (15-150)

Coliformes Totales:

Coliformes Fecales:

1x104 UFC/ml 3,3x103 UFC/ML OBSERVACIONES: Se pudo observar que en cada caja petri hay diferentes cantidades de crecimiento de microorganismos. En la caja petri de -1 se observaron muchas las cuales es imposible de contarlas esto nos indica que este producto de mogonchinchi tiene muchos microorganismos que pueden daarnos la salud. En la caja Petri de -3 no se observaron muchos microorganismos y tampoco est en el rango de la norma ISO que es de (15-150), en nuestra placa solo se encontraron 10. Se tomaron dos sepas para sembrar en caldos CVBB Y Ec en el caldo CVBB se observaron presencia de gases en los tres tubos, y en el caldo Ec se observ solo en un tubo.

CONCLUSIONES: Llegamos a la conclusin de que este mtodo es muy bueno porque nos permite determinas la cantidad total de coliformes en los alimentos de nuestro medio, adems de ser muy importante porque nos permite observar la cantidad de microorganismos que pueden tener diferentes alimentos. CUESTIONARIO: 1.- Hacer un reporte de resultados con los siguientes datos obtenidos al procesar una muestra liquida. Dilucin Nro de colonias tpicas de medio del cultivo VRVL -1 INC -3 10 -5 0

Caldo VBB= 3 tubos dieron gas (+) y presentaron turbidez Caldo Ec= 1 tubo dio gas (+) y presento turbidez 2.- Cual es el rango de recuento de colonias por placa segn la norma ISO? R es de (15-150) 3.- Cual es la importancia que tiene este parmetro en la industria y en la salud del consumidor? R

4.- En qu tipo de muestras se aplica generalmente el mtodo del nmero ms probable? R

5.- si se desea determinar la presencia de Escherichicoli qu pasos debe seguirse y cul es la prueba de confirmacin que se realiza? R

6.- Detalle en forma esquemtica el mtodo de recuento en placa para el anlisis de CT y CT en alimentos incluyendo las pruebas de confirmacin?