TREPONEMA PALLIDUM

Clostridiumspp. Anaerobic Gram-Positive Spore-Forming Bacilli Four broad types of pathogenesis: 1. Histotoxic group tissue infections (C. perfringens type A, exogenously acquired more commonly than endogenously) (C. septicum; endogenously-acquired) a. cellulilitis b. myonecrosis c. gas gangrene d. fasciitis 2. Enterotoxigenic group gastrointestinal disease a. clostridial foodbome disease (8-24h after ingestion of large numbers of organisms on con-taminated meat products, spores germinate, enterotoxin produced (C. perfringens type A) b. necrotizing enteritis (beta toxin-producing C.perfringens type C) (C. difficile endogenously-acquired or exogenously-acquired person-to-person in hospital) c. antibiotic-associated diarrhea d. antibiotic-associated pseudomembrane colitis 3. Tetanus (exogenously acquired) C. tetani neurotoxin a. generalized (most common) b. cephalic(primary infection in head, comnnonly ear) c. localized e. neonatal (contaminated umbilical stump) 4. Botulism (exogenously acquired) C. botulinum neurotoxin a. foodborne (intoxication,1-2days incubation period) b. infant (ingestion of spores in honey) c. wound (symptoms similar to foodborne, but 4 or more days incubation)
Ordinul: Spirochaetales
Familia: Spirochaetaceae
Genul: Treponema


Morfologie
Spirochete Gram-negative, subiri (0,2 m) i lungi (5-20 m),
formate din 7-13 spire regulate, cu capetele efilate
Sunt mobile, efectund micri de flexie, rsucire n jurul
axului, pendulare, translaie
Mobilitatea este asigurat de fibrile axiale, denumite flageli
periplasmici sau endoflageli
Se coloreaz prin metodele: Giemsa, Fontana-Tribondeau,
Burry, imunofluorescen
Microscopia electronic evideniaz: cilindrul protoplasmatic,
membranele de nveli intern i extern, aparatul locomotor.



Treponema pallidum-Examinare microscopica
Examinare pe fond intunecat. Serozitate din sancru
Treponeme in sange
Coloraie Giemsa
Treponeme in cordonul ombilical
Examinare ME
Rezisten la ageni chimici i fizici
TP este imobilizat i distrus rapid de:
Oxigen
Detergeni
Soluii hipotone
Spun
Compui mercuriali
Temperatur peste 41 C
TP moare n 24 h n flacoanele cu snge
conservate la 4 C
Este sensibil la penicilin, eritromicin,
preparate de bismut, mercur, arsenic

Caractere de patogenitate
Factori de virulen:
Proteinele din membrana extern cu rol n
aderen
Hialuronidaza faciliteaz infiltrarea
perivascular
Fibronectina formeaza un nveli cu rol
antifagocitar
Mobilitatea faciliteaz invazia


Patogenie
Treponemele penetreaz prin mucoase i piele cu soluie de
continuitate.
Ptrund foarte uor n celulele epiteliale, conjunctive, musculare,
endoteliale, ajutate de molecule ce se leag de suprafaa sa
(fibronectin, proteoglicani, lactoferin, transferin).
Se multiplic local, fiind transportate limfatic
Elibereaz factori chemotactici pentru neutrofile, care vor fagocita
treponemele, dar nu le vor ucide obligatoriu, aa nct ele se vor
multiplica intracelular.
Dup o perioad, treponemele nving rezistena de la poarta de
intrare, aprnd ancrul de inoculare.
n general, ostilitile de la poarta de intrare dureaz 3 sptmni,
dup care se produce invazia ganglionar i adenopatia specific.
Limfocitele vor fi stimulate i vor produce anticorpi specifici.
Concomitent sunt mobilizate macrofagele prin intermediul unor
limfokine, accetundu-se procesul de fagocitoz facilitat de IgG2.


Aspecte Clinice
Dup manifestrile clinice, sifilisul a fost mprit
n 3 forme :
Sifilis recent - cu o vechime sub 2 ani i cu
manifestri clinice de sifilis primar sau secundar
Sifilis latent - cu serologie pozitiv i fr leziuni
Sifilis tardiv - cu o vechime de peste 2 ani i cu
manifestri clinice de sifilis teriar.



Sifilis primar - ancru
n primele 3-4 sptmni de la contact, n zona de inoculare apare o leziune specific
numit ancru. Acesta crete n dimensiuni timp de cteva zile sau sptmni, evolund
spre ulceraie. Apare adenopatia regional. ancrul evolueaz spontan spre vindecare
complet, fr tratament.
Sifilis secundar
Dup 2-10 sptmni de la vindecarea ancrului boala evolueaz ctre sifilis
secundar. Apar manifestri eruptive cutanate (rozeole sifilitice), pruriginoase,
asemntoare cu cele din psoriazis sau din pityriasis rosea, localizate
predominant pe mini, trunchi, fa. Leziunile sunt contagioase.
Rozeole cutanate-sifilis
secundar
Sifilis latent
Dup stadiul secundar al bolii, se instaleaz
sifilisul latent, care poate fi latent recent (n primii
2 ani de la contaminare) sau latent tardiv (dup
aceast perioad).
Circa 40% din cazurile cu sifilis latent tardiv
progreseaz spre sifilis teriar.

Sifilisul teriar
Sifilisul teriar se caracterizeaza prin leziuni
granulomatoase n derm (tuberculi sifilitici) i n
hipoderm (gome sifilitice).
Neurosifilisul tardiv se dezvolt la peste 5 ani de la
infectare i implic sistemul nervos central
(demen, convulsii, agitaie neuromotorie etc.).
Sifilisul cardiovascular apare dup 10-40 ani de
evoluie i conduce la insuficien cardiac
Se mai poate localiza la nivelul ficatului, plmnilor,
rinichilor, splinei.

Sifilisul teriar
Sifilisul teriar
Sifilis congenital
T. pallidum poate infecta fetusul n dezvoltare
i disemina n organele acestuia
Sifilisul congenital apare prin infecia
transplacentar
Are ca rezultat: avort, moartea perinatal,
sechele tardive fizice sau mentale ca rezultat
al progresiei bolii

Sifilis congenital
Rinit hemoragic Incisivii Hutchinson
Erupii cutanate (rash) n special pe palme i plante
Infiltraie difuz i fisuri
periorale (ragade)
Leziuni veziculoase multiple, supurate, asociate cu descuamare
Sifilis congenital
Leziuni cutaneomucoase
intraorale si faciale
Leziuni secundare pe picior Incisivi Hutchinsons
Nou nascut muribund
Leziuni orale si cutanate
Nas in a
Osteomielita metafizara
Transparenta distala a
radiusului si ulnei
Keratita interstitiala
Metaphyseal osteomyelitis
Radiolucent distal radius & ulna with cupping distal ulna
Osteochondritis of femur & tibia
1-m-old . Classical Wimberger's sign of
destructive metaphysitis involving medial
aspects of distal femora and proximal tibae
Saber shins = Osteoperiostitis Tibia

Diagnostic de laborator
Examen microscopic: preparate proaspete examinate pe
fond ntunecat sau frotiuri colorate Giemsa, Fontana
Tribondeau, Burry, imunofluorescen.
Nu se poate izola pe medii de cultur, fiind un agent
patogen intracelular.
Diagnosticul serologic este de baz

Diagnostic serologic
Teste serologice cu antigene netreponemice (VDRL, RPR
carbon, RBW):

sunt nespecifice
se utilizeaz ca teste de screening, pozitivndu-se dup 1-4
sptmni de la aparitia ancrului
se utilizeaz pentru confirmarea succesului terapeutic
deceleaz anticorpii tip reagine fa de antigene cardiolipinice
pot da reacii fals pozitive n afectiuni hepatice, boli de colagen,
cancere etc.

Teste serologice cu antigene treponemice (TIT, IF, TPHA,
ELISA):
Folosesc antigene specifice de Treponema pallidum fiind folosite
pentru confirmarea diagnosticului

Non-Treponemal Vs Treponemal tests
Non-Treponemal
1. Simple, cheap
2. Distinguish between active and
non active infections
3. Require electricity,
refrigeration, trained personnel
4. Need for serum
5. False positives
6. False negatives with excess
antibody (prozone effect)

Treponemal
1. Simple
2. uses whole blood/
serum/ plasma
3. Transport at temp.<30
C
4. No prozone effect
5. Long lasting antibodies
Rapid Diagnostic Tests
Advantages
i. No trained technical staff
ii. No refrigeration
iii. No electricity
iv. Immediate results
v. Highly specific and
sensitive
vi. Emergencies for Antenatal
screening and blood
transfusion


Disadvantages
i. No distinction between
new and treated infection
ii. Some results are not
consistent with batches
iii. False positives with other
treponemes (yaws &
pinta)


Testul VDRL (Venereal Disease Research
Laboratory)
Este un test de floculare n mediu lichid. Antigenul standard n
prezena reaginelor din serul de testat formeaz complexe imune
care precipit sub form de particule fine, vizibile la microscop.
Antigenul trebuie preparat n aceeasi zi
Serul trebuie inactivat termic la 56 C 30 minute pentru distrugerea
complementului care poate da reacii fals pozitive
Poate fi efectuat pentru ser sau LCR



Reacie pozitiv Reacie negativ
RPR carbon (Rapid Plasma Reagin)
Este o reacie de aglutinare pe card folosit ca test de
screening, ce poate fi automatizat
Se folosete plasm sau ser, nu se poate efectua cu
LCR
Antigenul cardiolipinic este cuplat cu particule de
carbon
Reacie pozitiv Reacie negativ
Testul de imobilizare a treponemelor (TIT)
Anticorpii din serul pacientului (imobilizine) n prezena
complementului produc imobilizarea treponemelor
obinute de la iepuri inoculai cu TP
Microscopic se observ absena micrilor specifice
Testul TPHA (Treponema pallidum
hemagglutination assay )
Reacia se desfoar n plci de polistiren cu microgodeuri
Se folosete antigen de Treponema pallidum, tulpina Nichols
adsorbit pe eritrocite de oaie ( hematii sensibilizate).
n prezena anticorpilor specifici din serul pacientului se vor forma
complexele imune antigen-anticorp ce vor produce aglutinarea
eritrocitelor sensibilizate cu antigen.
Reacia pozitiv depunerea eritrocitelor sub forma unui sediment
neomogen
Reacia negativ eritrocitele se depun n buton omogen
Se folosesc obligatoriu martori: ser pozitiv, ser negativ, eritrocite
nesensibilizate, eritrocite sensibilizate


Testul TPHA (Treponema pallidum
hemagglutination assay )
Fluorescent Treponemal Antibody
Absorption Test (FTA-ABS)
Reacia se efectueaz pe lame de microscop care conin
antigen reprezentat de tulpina Nichols de Treponema
pallidum
Se adauga serul de cercetat i se incubeaz
Lamele se spala si se adaug conjugatul fluorescent
Dup incubare lamele se spal i se examineaz la
microscopul cu fluorescen
FTA-ABS Step 1
Teponema pallidum, the known antigen, is fixed
to a microscope slide.

FTA-ABS Step 2
If there are antibodies against Treponema pallidum in the
patient's serum, they will bind to the spirochete.
All other antibodies are washed from the slide.
FTA-ABS- Step 3
Fluorescent anti-human gamma globulin (anti-HGG) is
added to the well.
The anti-HGG will bind with human IgG antibodies bound
to the Treponema pallidum on the slide.
All unbound anti-HGG is washed from the slide.
Viewed with a fluorescent microscope, the spirochetes
will fluoresce
ELISA
Se realizeaz n plci de polistiren cu godeuri tapetate cu antigent T pallidum
Se adaug serul de cercetat i se incubeaz. Dac serul conine anticorpi specifici,
acetia se vor lega de antigenul din godeu.
Dup splare se adaug conjugatul ELISA format din IgG anti imunoglobuline
umane cuplat cu peroxidaz
Dup incubare i splare, enzima legat se detecteaz prin adaugarea substratului
(peroxidul de hidrogen), reacia producnd modificarea culorii cromogenului
Intensitatea culorii obinute este msurat spectrofotometric prin msurarea
densitii optice la o lungime de und specific
O absorban peste valoarea prag (cut-off) indic reacia pozitiv

Comparaie ntre testele imunologice
pentru sifilis
Epidemiologie
Transmitere direct: contact sexual, contact cu leziunile
cutaneomucoase, cu fluidele i secreiile infectate (sperm, secreii
vaginale, saliv, snge). Se transmite rar prin srut i transfuzii.
Transmitere vertical (transplacentar) de la mama infectata la ft
Contagiozitatea nu este foarte mare (ansa de infectare dup o expunere
este de 30%) dar rata de transmitere depinde de stadiul bolii
Perioada de incubaie este lung, timp n care gazda este necontagioas
Se recomand anchet epidemiologic pentru depistarea contacilor,
stabilirea seropozitivitii i administrarea terapiei preventive.
Factori de risc: prostituie, consum de droguri intravenos, persoane cu
profesii sau stare sociala ce predispun la relaii intime ocazionale.
Profilaxie
Profilaxia este nespecific i se realizeaz prin metode multiple i complexe:
Depistarea cazurilor seropozitive lues i tratarea lor corect
Obligativitatea efecturii investigaiilor serologice la angajare, cstorie sau
cu ocazia unor controale periodice, de rutin, la persoanele din sectorul
alimentar, sanitar etc.
Efectuarea anchetei epidemiologice n cazul depistrii unui nou caz de sifilis
Controlul obligatoriu al persoanelor care doneaz snge, conform legislaiei
sanitare n vigoare
Efectuarea unor programe prevenionale naionale care au la baz
intensificarea educaiei sanitare a populaiei, promovarea n mas a unui
mod de via sntos, a monogamiei i folosirea mijloacelor de protecie
individual.

Tratament
Penicilina antibioticul de
electie.
http://www.kmhk.kmu.edu.tw/medhome/Intra_med/med_o/search/ENdata.asp?EN_data=P