Texto Guia de Laboratorio de Microbiología UPV

MANUAL DE LABORATORIO DE
MICROBIOLOGA
TEXTO GUA PARA EL ALUMNO
Carrera de Medicina
MEDI 4032
UNIVERSIDAD PEDRO DE VALDIVIA

Carlos Ivovic Oddo
Tecnlo!o M"dico
Pro#esor de Micro$iolo!%a

FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS
Manual de Laboratorio de Mirobiolo!"a
2

&NDICE DE CONTENIDOS

Te'a P(!ina

UNIDAD )* +IOSE,URIDAD

De#iniciones 4
Si'$olo!%a 4-.
Ca/e!or%as del Ries!o 0
,es/in de Ries!os 1
Nor'as de +iose!2ridad 3
+iose!2ridad en la Pr(c/ica M"dica 3
Ori!en de las A'ena4as en +iose!2ridad M"dica 5
Red2ccin de Ries!os en +iose!2ridad )0
Medidas de Con/encin ))
+iose!2ridad en el La$ora/orio de Micro$iolo!%a )2
Niveles de +iose!2ridad )2-)3
Acciden/es de +iose!2ridad en Micro$iolo!%a )4
E6ercicios de a7licacin de con/enidos 8$iose!2ridad9 )4-).
Ac/ividad de la$ora/orio n: ) ; 2 8$iose!2ridad9 )0-)1
Desin#eccin ; an/ise7sia )3-)5
El e#ec/o de los a!en/es <2%'icos so$re los 'icror!anis'os 20-2)
E#ec/o de #ac/ores #%sicos so$re los 'icror!anis'os 22
E#ec/o de la /e'7era/2ra 22-2.
E#ec/o de las radiaciones= L24 Ul/raviole/a 2.-23
E#ec/o de las radiaciones= Radiacin ,a''a 23
Es/erili4acin 25-33
E6ercicios de a7licacin de con/enidos 8an/ise7sia= desin#eccin ; es/erili4acin9 34

UNIDAD 2* TOMA DE MUESTRAS > CULTIVO PRIMARIO

Ac/ividad de La$ora/orio n:3 al . 8aisla'ien/o de $ac/erias9 30-35
Ac/ividad de La$ora/orio n:0* o$servacin 'acrosc7ica de c2l/ivos 40-4)
Ac/ividad de La$ora/orio n:1* o$servacin 'icrosc7ica de c2l/ivos 42-44

UNIDAD 3* IDENTI?ICACI@N DE +ACTERIAS

?2nda'en/os de iden/i#icacin de en/ero$ac/erias 'edian/e 7r2e$as $io<2%'icas 4.-.0
?2nda'en/os de iden/i#icacin de Coc(ceas ,ra' 7osi/ivas aero$ias .)-.3
As7ec/os /aAon'icos !enerales .)
Pr2e$a de la ca/alasa= 7ri'era e/a7a en la 'arcBa de iden/i#icacin .4
Iden/i#icacin de Coc(ceas ,ra' 8C9 aero$ias o #ac2l/a/ivas= con ca/alasa ne!a/iva ..
Pr2e$as de Iden/i#icacin 7ara S/re7/ococc2s 7ne2'oniae .0
Ac/ividad de La$ora/orio n:3* iden/i#icacin de $acilos 00-0)
Ac/ividad de La$ora/orio n:5* de/er'inacin de ca/alasa 02
Ac/ividad de La$ora/orio n:)0* iden/i#icacin de coc(ceas ,ra' 7osi/ivas I 03
Ac/ividad de La$ora/orio n:))* Iden/i#icacin de coc(ceas ,ra' 7osi/ivas II 04
3

UNIDAD 4* PRUE+AS DE SUSCEPTI+ILIDAD A LOS ANTIMICRO+IANOS

As7ec/os !enerales 0.-00
La Concen/racin InBi$i/oria M%ni'a ; +ac/ericida M%ni'a 00-01
In/er7re/acin de las Pr2e$as* s2sce7/i$ilidad o resis/encia 01-03
El an/i$io!ra'a 7or '"/odo de di#2sin en a!ar 03-12
E6ercicios de a7licacin de con/enidos 12
Ac/ividad de La$ora/orio n:)2* el an/i$io!ra'a 7or di#2sin 13
Ta$las de de/er'inacin de la s2sce7/i$ilidad 'edian/e di#2sin en a!ar 14-1.

4

UNIDAD #
$IOSEGURIDAD

De%iniione& ' &i(bolo!"a&

Pode'os de#inir la +IOSE,URIDAD co'o el con62n/o de las 'edidas= nor'as ; 7rocedi'ien/os
#i6ados 7or 2na or!ani4acin 7ara 'ini'i4ar ;Do con/rolar el ries!o de oc2rrencia de 2n acciden/e
con a!en/es $iol!icosE

De ac2erdo a es/a de#inicin= se Bace necesario 7recisar <2e el RIES,O es el !rado de
v2lnera$ilidad de lo <2e nos in/eresa 7ro/e!er= en o/ras 7ala$ras i'7lica la eAis/encia de 2na
7osi$ilidad de <2e le oc2rra 2n daFo a lo <2e de$e'os 7ro/e!erE

El ries!o de acciden/es con c2al<2ier a!en/e 8<2%'ico= #%sico o $iol!ico9 es/( sie'7re
7resen/e= 7ero se Bace c2an/i/a/iva'en/e 'enor o 'a;or de7endiendo del !rado de con/rol de las
circ2ns/ancias <2e de/er'inan la oc2rrencia del acciden/eE Para dar 2na di'ensin o$6e/iva al
ries!o= 7ode'os darle 2na ca/e!or%a de valor $a6o= 'edio o al/oE

La eAis/encia de es/os dis/in/os a!en/es= o los acon/eci'ien/os <2e los li$eran o desencadenan son
lla'ados AMENAGASE

De ac2erdo a las condiciones de oc2rrencia <2e desencadenan a las a'ena4as= 7ode'os
dis/in!2ir dos clases*
)E A'ena4as Diri!idas* a<2ellas <2e ac/Han 7or INTENCI@N= es decir ac/os
7re'edi/ados ; diri!idos con el o$6e/o de ca2sar daFoE
2E A'ena4as No Diri!idas* son las <2e oc2rren en #or'a alea/oria= i'7redeci$le o
acciden/alE

El !rado de daFo <2e 2na de/er'inada A'ena4a es ca7a4 de in#li!ir so$re lo 7ro/e!ido
72ede ser ca/e!ori4ado 8co'o 'a!ni/2d9 ; 'edido 8co'o 7ro$a$ilidad9E A la asociacin de es/as
ca/e!or%as de 'a!ni/2d ; 7ro$a$ilidad la lla'are'os PELI,ROE

Es/e es el s%'$olo in/ernacional <2e indica la eAis/encia de 2n
a!en/e 7eli!roso 8a'ena4a9= <2e /iene la 7osi$ilidad de ca2sarnos daFo
severo o 'or/alE No se es7eci#ica c2(l es la a'ena4a= 7ero si el nivel de
daFo <2e no 72ede ca2sarE Lo 7ode'os o$servar en las e/i<2e/as de los
reac/ivos <2%'icos= a veces asociados a o/ros s%'$olosE

E6e'7los*

Cian2ro de Po/asioE
Ace/a/o de Talio 8veneno roden/icida9
?l2or2ro de Sodio 8an/icoa!2lan/e 2sado 7ara la /o'a de '2es/ras 7ara 'edicin de
niveles de !l2cosa9E
OAido de E/ileno 8a!en/e es/erili4an/e9E
?or'aldeB%do 8a!en/e conservador de /e6idos ; es/erili4an/e9E

.

Los a!en/es <2e re7resen/an 2na a'ena4a 7ara la $iose!2ridad
se iden/i#ican in/ernacional'en/e con es/e s%'$olo= el <2e de$e
considerarse co'o 2na ADVERTENCIA*

En es/e caso no se Bace 'encin al nivel de 7eli!ro= 7or
lo <2e el daFo ca2sado 7or el s272es/o a!en/e 72ede ser de c2al<2ier
'a!ni/2dE

No se es7eci#ica el /i7o de a!en/e $iol!ico= es/e 72ede ser
2na '2es/ra 7ara an(lisis de la$ora/orio= 2na s2s/ancia
con/a'inada con a!en/es $iol!icos= 2n eA/rac/o de ori!en $iol!ico= 2n a!en/e $iol!ico aislado
desconocido= o 2n a!en/e $iol!ico aisladoE La si'$olo!%a no Bace dis/incin en/re /i7os de
a!en/es* vir2s= $ac/erias= Bon!os= 7ar(si/os= s2 es/ado es/r2c/2ral ni res7ec/o de s2 ac/ividad vi/alE

Es 7osi$le o$servar es/e s%'$olo en con/enedores de /rans7or/e de '2es/ras 7ara an(lisis*
orina= san!re= secreciones= de7osiciones= $io7sias o 7ar/es 7ara es/2dio ana/o'o7a/ol!ico sin
/ra/a'ien/o con #i6adoresE Con/enedores con desBecBos <2irHr!icos= de salas de Bos7i/ali4acin o
de la$ora/orios cl%nicos= '2es/ras o c2l/ivos en /r(nsi/o= 7ar/es de seres vivos o seres de
na/2rale4a no $ien co'7rendida de$en ro/2larse con es/e s%'$olo= ade'(s de las e/i<2e/as <2e
es7eci#i<2en con/enidoE

EAis/e 2na de/allada descri7cin de las es7eci#icaciones ace7/adas in/ernacional'en/e
7ara el /rans7or/e de s2s/ancias $iol!icas <2e i'7lican ries!o de $iose!2ridadE En n2es/ro 7a%s
es/a ac/ividad es/a re!2lada 7or el Ins/i/2/o de Sal2d PH$lica de CBile= 72edes cons2l/ar la
nor'a/iva vi!en/e en IIIEis7cBEclDsi/esDde#a2l/DEEEDnor'a/ivaJTrans7JS2s/JIn#ecciosasE7d#

O/ros s%'$olos de adver/encia de ries!os son*

S2s/ancia In#la'a$le Ma/erial EA7losivo S2s/ancia Corrosiva

S2s/ancia Nociva= irri/an/e Ma/erial radiac/ivo S2s/ancia daFina
7ara el a'$ien/e

0

Cate!or"a& de Rie&!o)

Una #or'a 7r(c/ica de o$6e/ivar el nivel de ries!o ; a la ve4 es/a$lecer 2n cri/erio co'Hn
de valor en/re las 7ersonas <2e ven eA72es/as a diversas a'ena4as es asi!nar ca/e!or%as de ries!oE

Para ca/e!ori4ar el ries!o en $iose!2ridad 8; en o/ros ('$i/os9 de$en es/a$lecerse
'edian/e consenso valores ar$i/rarios 7ara las 7ro$a$ilidades de <2e se 'ani#ies/en las a'ena4as
7resen/es ; los 7eli!ros la/en/es <2e "s/as i'7licanE Para es/o es necesario 7revia'en/e cons/i/2ir
!r27os de 7ro#esionales idneos ; reali4ar 2n an(lisis de ries!o= el <2e arro6ar%a 2n res2l/ado
se'e6an/e a es/e*

Valores ar$i/rarios 7ara la 7ro$a$ilidad de a'ena4a o 7ara el daFo res2l/an/e en la
eA7osicin*

)E- a'ena4a insi!ni#ican/e= nin!Hn daFo o daFo insi!ni#ican/eE
2E- Nivel $a6o o 'enorE
3E- Nivel 'edio
4E- Nivel al/o

Co'o aBora /ene'os asi!nados valores a las a'ena4as ; s2s corres7ondien/es daFos=
7ode'os asociarlos 'edian/e 2na 'a/ri4 de n2'"rica= <2e re7resen/a 2na relacin 'a/e'(/ica
en/re el nivel de la a'ena4a ; s2 daFo res2l/an/e 87eli!rosidad9

Ca/e!or%a de Ries!o*

Valores ) a 0* ries!o $a6o
Valores 3 a 5* ries!o 'edio
Valores )2 a )0 ries!o al/o

Una ve4 es/a$lecidas es/as ca/e!or%as es 7osi$le e#ec/2ar MANEKO O ,ESTION DE RIES,O a
nivel ins/i/2cionalE
,es/in de Ries!os*
La ,es/in de Ries!os es 2n 7roceso anal%/ico= '2l/idisci7linario ; din('ico <2e /iende a
conocer el es/ado de con/rol de a'ena4as de 2n sis/e'a= en o/ras 7ala$ras a de/er'inar la
7ro$a$ilidad de oc2rrencia de daFos ; s2s ca2sasE
La !es/in de ries!os es 2na de las Berra'ien/as '(s e#icaces en la con/encin de
a'ena4as= a7reciacin de #or/ale4as ; de$ilidades= 'ediadas de red2ccin ; con/rol de ries!os ;
red2ccin de cos/os i'7l%ci/os en 7ro$le'as de $iose!2ridadE De la !es/in de ries!os e'ana
MA,NITUD DEL DALO M PRO+A+ILIDAD DE AMENAGA
1

co'o res2l/ado el con62n/o de NORMAS DE +IOSE,URIDAD= <2e cada ins/i/2cin ado7/a 7ara la
se!2ridad de s2s 7ro#esionales 8e<2i7o '"dico9 ; /ra$a6adores= de las 7ersonas $ene#iciarias de la
or!ani4acin 87acien/es9= ; del 'edio en el <2e es/( inser/a 8a'$ien/e ; sociedad9E
En el 7roceso de ,es/in de Ries!os se descri$en varias e/a7as <2e lo co'7onen= ; se
s2ceden en #or'a c%clica o se i'7le'en/an se!Hn la necesidad*
)E- Eval2acin del Ries!o*
- cons/i/2ir el !r27o de es/2dio
- de#inicin de a'ena4as
- de#inicin de daFos 7or eA7osicin a las a'ena4as
- de#inicin de 7rioridades
- reco7ilacin de in#or'acin
2E- Clasi#icacin de Ries!os se!Hn ca/e!or%asE
- Asi!nar valores ar$i/rarios a las a'ena4as iden/i#icadas
- Asi!nar valores ar$i/rarios a los daFos res2l/an/es
- Ca/e!ori4ar el ries!o en al/o N 'edio N $a6o N n2loE
3E- De/er'inar 'edidas de red2ccin de ries!os
- Des7la4a'ien/o de 7ersonas
- Ca7aci/acin
- Modi#icacin de la 7lan/a #%sica del es/a$leci'ien/o
- Pro!ra'as de 'an/eni'ien/o
- Dis7osicin de desecBos Bos7i/alarios
- Ins/alacin de Servicio de es/erili4acin
- Uso de 'edidas de $arrera
4E- Con/rol de ries!os
- ?or'acin de Co'i/" de In#eccin In/raBos7i/alaria
- Vi!ilancia e7ide'iol!ica
- Con/rol de vec/ores
- A2di/or%as de c2'7li'ien/o de nor'a/ivas
- An(lisis de #allos en c2'7li'ien/os de nor'asE

Nor(a& de $io&e!uridad
Las Nor'as de +iose!2ridad son el con62n/o de dis7osiciones es/a$lecidas 'edian/e el
7roceso de ,es/in de Ries!os= <2e /ienen co'o #inalidad PROTE,ER AL INDIVIDUO= LA
COMUNIDAD > EL AM+IENTE= del con/ac/o con a!en/es $iol!icos 7o/encial'en/e nocivosE
En !eneral= es/as nor'as 7er'i/en es/a$lecer 'ecanis'os de $arrera <2e i'7idan la
7ro7a!acin de /odo /i7o de a!en/es $iol!icos en ('$i/os /an diversos co'o la a/encin de
sal2d= la 7rod2ccin ind2s/rial de ali'en/os= 'edica'en/os= $io/ecnolo!%as= la inves/i!acin
cien/%#ica o 7olicial #orense= ; la 7ro/eccin del 'edio a'$ien/eE
3

Cada ins/i/2cin donde se 'ane6en s2s/ancias 7o/encial'en/e in#ecciosas= seres vivos o
derivados de es/os= es res7onsa$le de #i6ar s2s 7ro7ias nor'as de $iose!2ridad=
inde7endien/e'en/e del de$er de c2'7lir con las dis7osiciones <2e la A2/oridad Sani/aria
de/er'ine 7ara es/e e#ec/oE En n2es/ro 7a%s es/as nor'as son es/a$lecidas 7or el Ins/i/2/o de
Sal2d PH$lica de CBile co'o or!anis'o /"cnico del Minis/erio de Sal2d= ; el Ins/i/2/o Nacional de
Nor'ali4acin 8INN9E
EAis/en '2cBas nor'as de $iose!2ridad dis7oni$les= al!2nas de alcance '2; es7ec%#ico
relacionadas con el 'ane6o de a!en/es co'o el Vir2s OANTA= Mico$ac/eri2' /2$erc2losis= Vir2s
de la In'2node#iciencia O2'ana 8VIO9= e/cE
A 'odo de e6e'7lo 72edes cons2l/ar el Man2al de Nor'as de +iose!2ridad de Conic;/
2003 en Inves/i!acinE2acBEclDarcBivosD(anualJbio&e!uridadJ2003E7d#

$io&e!uridad en la *r+tia de la Mediina)

Los acciden/es $iol!icos en la 7r(c/ica de la Medicina /ienen direc/a relacin con la
eA7osicin a a!en/es in#ecciosos 'edian/e la a/encin de 7acien/es o 7or con/ac/o con s2s #l2idos
; /e6idosE Es/e con/ac/o ori!ina 2na con/a'inacin <2e 72ede /ener co'o consec2encia*
Con/a!io* la ins/alacin de a!en/e $iol!ico <2e
I'7lica 2n 7roceso in#eccioso en el 7ro#esional
Es/ado de 7or/ador sano
Si'7le /rans'isin del a!en/e= sea direc/a o indirec/a

La oc2rrencia de 2na in#eccin 7or con/ac/o acciden/al va a
de7ender de la conco'i/ancia de varios #ac/ores= ade'(s de las 'edidas
de $arrera <2e el 7ro#esional de$e e'7lear= en es/o de$e'os considerar
el !rado de s2sce7/i$ilidad del in#ec/ado= las 72er/as de en/rada ; el 'ecanis'o de in#eccin= la
can/idad de 'icror!anis'o in#ec/an/e ; s2s carac/er%s/icas $iol!icas 8'ecanis'os de 7a/o!enia9E
El a'$ien/e /a'$i"n 72ede condicionar la oc2rrencia de la in#eccin 8B2'edad= ven/ilacin=
/e'7era/2ra a'$ien/al9E

Co'o en c2al<2ier 7roceso in#eccioso= oc2rre 2na al/eracin del e<2ili$rio de la Tr%ada
Ecol!ica en la <2e se relaciona AM+IENTE N A,ENTE N OOSPEDEROE

5

Ori!en de la& A(ena,a& a la $io&e!uridad en Mediina)

Las #2en/es de a'ena4as en los a'$ien/es '"dicos es/(n vinc2ladas a acciones del 7H$lico
<2e reci$e a/encin= s2s aco'7aFan/es= servicios de a7o;o in/erno o eA/erno= servicios in#or'ales=
acciones del e<2i7o de sal2d ; 7ersonal ad'inis/ra/ivoE La al/a conc2rrencia al servicio Bos7i/alario
; la !ran variedad de acciones <2e all% se veri#ican es7ecial'en/e c2ando eAis/e desor!ani4acin ;
#al/a de 'edidas de con/rol #acili/an la oc2rrencia de a'ena4as a la $iose!2ridadE

En es/e caso= las #2en/es de a'ena4as 7ode'os ca/e!ori4arlas co'o*

,ENERADORES* Todo individ2o <2e 'edian/e acciones= condicin
de sal2d= e6ec2/an/e de /"cnicas o 'isiones= 72ede !enerar=
/rans'i/ir o eli'inar a!en/es $iol!icos 7o/encial'en/e
7eli!rosos al a'$ien/e Bos7i/alarioE Un !enerador 72ede ser
considerado ade'(s RESERVORIO de a!en/es in#ecciososE

TRANSMISORES* Todo individ2o <2e #or'a 7ar/e de 2na cadena
de acciones en la <2e se 'ani72lan o$6e/os con/a'inados o
'2es/ras de 7acien/es <2e 72eden con/ener a!en/es in#ecciososE

De es/a #or'a= los 7acien/es con es/ados in#ecciosos ; la dis7osicin de resid2os $iol!icos
re7resen/an 2na i'7or/an/e #2en/e de a'ena4as a la $iose!2ridadE

En/re los resid2os $iol!icos 7eli!rosos derivados de la a/encin '"dica des/acan*

Resid2os 7rovenien/es de 4onas de aisla'ien/oE
C2l/ivos de a!en/es in#ecciososE
San!re B2'ana= s2s derivados ; o$6e/os <2e la con/en!anE
Resid2os or!(nicos diversos 8orina= de7osiciones= secreciones9
Resid2os 'a/eriales con/a'inados 7rovenien/es de cir2!%a ; a2/o7siasE
Resid2os 'a/eriales con/a'inados de la$ora/orioE
Ins/r2'en/os cor/o72n4an/es 2sadosE
Resid2os de 2nidades de di(lisisE
Cad(veres de ani'ales de la$ora/orioE
Resid2os 7rovenien/es de Es/a$leci'ien/os !eri(/ricosE
Resid2os Provenien/es de Co'2nidades /era7"2/icas o Cen/ros de ReBa$ili/acin
7sico#%sica donde se realice el /ra/a'ien/o de adiccionesE

La #or'a adec2ada de 'an/ener es/as a'ena4as $a6o con/rol es 2na adec2ada ,es/in de Ries!osE

)0

Redui-n de Rie&!o& en $io&e!uridad)

El 7roceso eAi/oso de ,es/in de Ries!os de$e /ener co'o res2l/ado la !eneracin de
Nor'as de +iose!2ridad ; Medidas de Con/rolE En es/e sen/ido la direccin del es/a$leci'ien/o de
sal2d= o las res7ec/ivas 6e#a/2ras de servicio 72eden de/er'inar 2na !ran variedad de nor'as ;
'edidas des/inadas a dis'in2ir el ries!o de acciden/es relacionados con la $iose!2ridad= co'o
72eden ser*
Pro!ra'as de ca7aci/acin del 7ersonal
Vi!ilancia de la adec2ada a7licacin de /"cnicas '"dicas
Uso de 'edidas de $arrera
Vi!ilancia e7ide'iol!ica
Or!ani4acin del des7la4a'ien/o de 7ersonas
Pro!ra'as de 'an/eni'ien/o 7er'anen/e de la 7lan/a #%sica
,es/in de Ries!os 7er'anen/e
In'2ni4aciones= c2ando la na/2rale4a del a!en/e lo de/er'ine
Con/rol del es/ado de sal2d del 7ersonal '"dico ; ad'inis/ra/ivo
Con/rol de 'ani72ladores de ali'en/os
Con/rol de vec/ores
CONCIENCIA DEL RIES,O > RESPONSA+ILIDAD PERSONAL

La res7onsa$ilidad ; el AUTOCUIDADO son los 7ilares #2nda'en/ales del con/rol de ries!os
en $iose!2ridadE El co'7ro'iso 7ersonal de cada in/e!ran/e del e<2i7o de sal2d en 'an/ener s2
in/e!ridad ; en o$servar las nor'as de $iose!2ridad es la 'e6or #or'a de !aran/i4ar la
dis'in2cin de ries!osE De lo con/rario= c2al<2ier es#2er4o en es/e sen/ido 72ede ser es/"rilE

Las 'edidas de a2/oc2idado 72eden verse re#le6adas en doc2'en/os co'o las
PPRECAUCIONES UNIVERSALESQ o PPRECAUCIONES STANDARDQ= nor'as de consenso 7ara el
/ra$a6o con 7acien/es ; s2s #l2idos cor7orales des/inadas a 'ini'i4ar el ries!o de /rans'isin de
in#ecciones en/re 7acien/es ; el 7ersonal ; vice-versa= 7or con/ac/o con #l2idos de al/o ries!o=
es7ecial'en/e la san!re ; s2s derivadosE

Se consideran #l2idos de al/o ries!o en $iose!2ridad*
San!re
Se'en
Secreciones Va!inales
LecBe Ma/erna
L%<2ido de cavidades cerradas
L%<2ido Ce#alorra<2%deo
L%<2ido Ple2ral
L%<2ido Sinovial
> /odos los o/ros #l2idos <2e /en!an san!re visi$le
))

Todas las '2es/ras o #l2idos cor7orales 7rovenien/es de 7acien/es de$en considerarse
sie'7re co'o 7o/encial'en/e in#ec/an/es= inde7endien/e del 'o/ivo de cons2l/a o de dia!ns/ico
de in!reso= 7or lo <2e s2 'ani72lacin i'7lica la o$servacin 7er'anen/e de las Preca2ciones
UniversalesE

P2edes revisar doc2'en/os relacionados a es/as Preca2ciones Universales en*
B//7*DDIIIEen#er'eria6IEclD7d#D,UIACLINICAIIOPrevenciondeEA7osicionesaSan!re;'ane6oPos/-
eA7osicionJRESJ153J00J05J04E7d#

IIIEssvaldiviaEclDBos7i/alDacredi/aDEEEiiBD04R20NORMAR200Edoc

En /odo caso= el LAVADO DE MANOS an/es de la 6ornada=
en/re 7acien/es= ; al #inal de la 6ornada= re7resen/a el 'e6or
e6e'7lo de 2na e#ec/iva ; sencilla 'edida de $arrera de /rans'isin
de en#er'edadesE

Medida& de Conteni-n

Corres7onden a la a7licacin de las 'edidas res2l/an/es de la e/a7a 3SE > 4SE De la ,es/in
de Ries!os= es decir las Nor'as de +iose!2ridad ; Medidas de Con/rol 'encionadas an/erior'en/e
en la 7(!ina 0E

Pode'os clasi#icar las Medidas de Con/encin en dos !randes !r27os de7endiendo del
o$6e/ivo de a7licacin*

Medidas de Con/encin Pri'aria* es/(n diri!idas al accionar de las 7ersonas= en
('$i/os co'o la 7ro/eccin de la sal2d= el 'ane6o adec2ado de 7acien/es ; las
condiciones del a'$ien/e de /ra$a6o en el es/a$leci'ien/o de sal2dE En es/e !r27o
7ode'os 'encionar 8en/re o/ras9 la accin del Co'i/" de In#eccin
In/raBos7i/alaria= la adec2ada !es/in de a$as/eci'ien/o en ins2'os de se!2ridad=
ca7aci/acin es7ec%#ica en $iose!2ridad= e/cE

Medidas de Con/encin Sec2ndarias* es/(n diri!idas a la 7ro/eccin del a'$ien/e=
; se relacionan con el diseFo ; la calidad de la 7lan/a #%sica del es/a$leci'ien/o= ;
de la 7res/acin de servicios eA/ernos 8eA/raccin de $as2ras= dis7osicin de
resid2os Bos7i/alarios9E

)2

$io&e!uridad en el Laboratorio de Mirobiolo!"a

El La$ora/orio Cl%nico= ; es7ecial'en/e la Seccin de Micro$iolo!%a es 2na i'7or/an/e
#2en/e !eneradora de a'ena4as= de$ido a la ac/ividad 7ro7ia de es/a 2nidad asis/encialE Por es/a
ra4n= la adec2ada ca7aci/acin del 7ersonal= la descri7cin de '"/odos ; 7rocedi'ien/os= la
a2di/or%a de nor'as= los 7ro/ocolos de accin #ren/e a acciden/es= ; el diseFo de la 7lan/a #%sica
son de vi/al i'7or/ancia en el con/rol de a'ena4asE

Al in/erior de 2n La$ora/orio de Micro$iolo!%a 7ode'os o$servar varias 'edidas de
con/encin 7ri'aria= co'o lo son*

los ins2'os de se!2ridad 7ersonal 87ecBeras= !2an/es= an/i7arras= 'ascarillas9
sol2ciones de desin#eccin
con/enedores de 'a/erial cor/o72n4an/e
7ro/ocolos de reaccin #ren/e a acciden/es
#il/ros de aire de al/a e#iciencia 8OEPA9
l('7aras de l24 UVC
'ecBero
/a7as de con/encin de aerosoles 8cen/r%#2!as9
!a$ine/es de $iose!2ridad
o CLASE I* o/or!a 7ro/eccin 7ara el a'$ien/e ; e<2i7os
o CLASE II* o/or!a 7ro/eccin 7ara el a'$ien/e= e<2i7os ; '2es/ras
o CLASE III* 7ro/eccin de al/o nivel= aisla'ien/o 7ara el /ra$a6o con a!en/es
al/a'en/e 7eli!rososE

Ni.ele& de $io&e!uridad en Laboratorio& de Mirobiolo!"a)

El con62n/o de 'edidas de con/encin 7ri'arias ; sec2ndarias <2e se Ban i'7le'en/ado
en 2n La$ora/orio de Micro$iolo!%a de/er'inan el NIVEL DE +IOSE,URIDAD de es/a de7endencia=
es decir el !rado de se!2ridad ins/alada 7ara el /ra$a6o con a!en/es $iol!icosE A 'a;or 7eli!ro
re7resen/ado 7or los a!en/es= 'a;or nivel de $iose!2ridadE

Pode'os dis/in!2ir c2a/ro niveles de $iose!2ridad 7ara 2n la$ora/orio de 'icro$iolo!%a*

NIVEL )* Ins/alaciones adec2adas 7ara /ra$a6ar con a!en/es no in#ecciosos o
<2e no a#ec/an a 7ersonas ad2l/as sanasE Corres7onden a la$ora/orios de
docencia= la$ora/orios cl%nicos de $a6a co'7le6idad o de ins/alaciones $(sicasE
P2eden 'ane6arse 'icror!anis'os co'o EscBericBia coli= +acill2s s2$/ilis=
S/re7/ococc2s viridans 7or e6e'7loE

)3

NIVEL 2* Las ins/alaciones de$en 7oseer !a$ine/es de $iose!2ridad de
ac2erdo al /i7o de a!en/es <2e se 7re/ende 'ane6arE De$e eAis/ir con/rol de
accesoE Se Bace necesario el
con/ar con 7ro/ocolos ;
a7ara/os necesarios 7ara la
descon/a'inacinE Corres7onde
al diseFo de la$ora/orios de
'icro$iolo!%a cl%nica o de
inves/i!acin= donde se /ra$a6a
con '2es/ras de ori!en B2'ano=
ani'al o a'$ien/al= donde es
7osi$le 'ani72lar a!en/es
co'o Sal'onella= Vi$rio=
Neisseria !onorrBoeae= '2es/ras 7ara serolo!%a viral 8Oe7a/i/is += VIO= Vir2s
Oe7s/ein +arr9E

NIVEL 3* Es/os la$ora/orios es/(n 7re7arados 7ara el /ra$a6o con
'icror!anis'os /rans'isi$les 7or v%a a"rea= ; /ienen 7o/encial 7ara ca2sar
en#er'edades !ravesE Las $arreras de con/encin de$en ser s2#icien/e'en/e
#2er/es 7ara 7ro/e!er a los /ra$a6adores al in/erior= en (reas con/i!2as= a'$ien/e ;
co'2nidadE Es necesaria la ins/alacin de l('7aras UVC= #il/ros OEPA ; !a$ine/es
de $iose!2ridad clase II o IIIE Las ins/alaciones de$en es/ar 7re7aradas 7ara el
/ra$a6o con a!en/es co'o Mico$ac/erias ; Mico7las'asE

NIVEL 4* Las ins/alaciones del la$ora/orio es/(n 7re7aradas 7ara el /ra$a6o
con a!en/es eA/re'ada'en/e 7eli!rosos= 7ara los <2e no eAis/en /ra/a'ien/os o
vac2nas dis7oni$lesE Todo /i7o de /ra$a6o se reali4a al in/erior de !a$ine/es de
$iose!2ridad de Clase III= con ro7as o /ra6es de aisla'ien/oE La 7lan/a #%sica /iene
aisla'ien/o /o/al del a'$ien/e ; el acceso al/o nivel de con/rolE Los a!en/es <2e
all% se 'ane6an son !eneral'en/e virales 8vir2s de #ie$res Be'orr(!icas9E

Pode'os 7lan/ear la eAis/encia de 2n <2in/o nivel de $iose!2ridad 7ara el
al'acena'ien/o ; es/2dio de a!en/es creados 7or la in!enier%a !en"/ica= a!en/es $iol!icos
des/inados a 2so $"lico= a!en/es de $iolo!%a desconocida o a!en/es <2e Ban sido erradicados de la
vida li$re= 7ara los c2ales no se Ban descri/o /ra/a'ien/os de nin!Hn /i7o ; <2e 7odr%an /ener
e#ec/os ca/as/r#icos en la B2'anidadE

)4

Aidente& de bio&e!uridad en el laboratorio de (irobiolo!"a)

Los acciden/es de $iose!2ridad <2e ori!inan con/a'inacin del a'$ien/e o de n2es/ro
c2er7o 72eden oc2rrir !eneral'en/e 7or #al/a de conoci'ien/o o des/re4a= no 2sar 'edidas de
$arrera= 'an/eni'ien/o de#icien/e de a7ara/os o !a$ine/es= #al/a de ca7aci/acin= ; rela6acin en
las 'edidas de con/rolE

Las v%as de in#eccin en es/e /i7o de acciden/es son 7or inBalacin= in!es/in o 7erc2/(neaE
Acciones co'o el /ra$a6ar sin !2an/es al 'ani72lar '2es/ras o c2l/ivos= 7i7e/erar direc/a'en/e
con la $oca= ol#a/ear c2l/ivos= no 2sar 'ecBero 7ara !enerar 2n (rea 7ro/e!ida= 7asarse los
!2an/es 2sados 7or la 7iel= el 7elo o la ro7a= co'er en el la$ora/orio= no lavarse las 'anos al
/er'inar la ac/ividad= cons/i/2;en 2n ries!o de con/a'inacin ; even/2al'en/e de in#eccin con
a!en/es $iol!icos= /an/o 7ara el al2'no co'o 7ara la co'2nidadE

En el caso de oc2rrir c2al<2iera de es/os acciden/es <2e i'7li<2e con/ac/o con a!en/es
$iol!icos= el al2'no DE+E AVISAR DE INMEDIATO AL PRO?ESORE NO ACTUAR POR INICIATIVA
PROPIAE

E/eriio& de A*liai-n de Contenido&

)E- Un s26e/o li$er el con/enido de 2n #rasco con caldo de c2l/ivo de Vi$rio cBolerae en 2n
canal de re!ad%o de Bor/ali4asE Res7onde lo si!2ien/e*
SeFala dos a'ena4as eviden/es en es/e BecBo*
-
-
TU2" clases de a'ena4as son= de ac2erdo a los BecBosV

2E- La ce7a de Vi$rio cBolerae res2l/ no 7oseer el !en <2e codi#ica la en/ero/oAinaE De
ac2erdo a los BecBos ; an/eceden/es= asi!na 2n valor o$6e/ivo ; 2na ca/e!or%a al ries!o 8al/o=
'edio= $a6o9E Da dos #2nda'en/os 7ara /2 res72es/a*
-
-
3E- El 7ro#esor le en/re! a los al2'nos del ra'o de 'icro$iolo!%a 2nas 7lacas de c2l/ivo
con EscBericBia coli= S/re7/ococc2s 7;o!enes ; Neisseria 'enin!i/idisE
Averi!2a res7ec/o del 7o/encial 7a/!eno de es/os a!en/es ; ord"nalos se!Hn 7eli!ro de la
a'ena4a= de 'enor a 'a;orE
-
-
-
).

4E- A7ar/e de los 'icror!anis'os= Ba; o/ras a'ena4as la/en/es en el en2nciado= discH/elas
con o/ros al2'nos ; res7onde c2(les sonE

.E- TC2(l es la ca/e!or%a de ries!o <2e asi!nar%as a 2n !r27o de escolares <2e /iene a 2n
co'7aFero de c2rso con 'enin!i/is 'enin!occica= el <2e Ba sido dia!nos/icado co'o caso
%ndiceV
Ano/a /2s #2nda'en/osE

0E- La ce7a de Neisseria 'enin!i/idis del caso an/erior Ba sido aislada ; re#erida al Ins/i/2/o
de Sal2d PH$lica 8ISP9 'edian/e 7ro/ocolo de no/i#icacin o$li!a/oriaE TC2(l ser( la ca/e!or%a de
ries!o 7ara el 'icro$ilo!o del ISP <2e /ra$a6a con es/a ce7a= si es/( en 2n la$ora/orio de Nivel IIIV
Dale valor n2'"rico al ries!o ; #2nda'en/aE

1E- Averi!2a 2n 7oco an/es de res7onder= l2e!o 7ro7one 2n nivel de $iose!2ridad 7ara
/ra$a6ar con los si!2ien/es a!en/es o '2es/ras*
- De/er'inacin de an/ic2er7os an/i VIO
- Uroc2l/ivo
- Mico$ac/eri2' avi2'
- Vi$rio cBolerae $io/i7o El Tor
- Vir2s E+OLA
- +acill2s 72'il2s
- Variola vir2s
- Al/ernaria solani

3E- Oo; reci$is/e el Bonor de ser no'$rado Ke#e del Co'i/" de In#eccin In/raBos7i/alariaE
La En#er'era Ke#e del es/a$leci'ien/o /e Ba solici/ado 2na 'edida 2r!en/e 7ara evi/ar los
des7la4a'ien/os innecesarios del 7H$lico den/ro del es/a$leci'ien/o 7or el ries!o de in/rod2ccin
de a!en/es in#ecciososE TU2" 'edida 7ro7ones= c'o la i'7le'en/asV Se!2ra'en/e ;a es/2vis/e
en al!Hn Bos7i/al ; vis/e la a7licacin= /ra/a de acordar/eE

So; 2na a'ena4a 7er'anen/e= no lo olvidesE

)0

E/eriio& de Laboratorio

Ati.idad n0#) El a'$ien/e ; las 7ersonas co'o !eneradores de ries!o $iol!ico

O$6e/ivos* O$servar la eAis/encia de a!en/es 'icro$ianos en el a'$ien/e
De/er'inar la i'7or/ancia de la 'ani72lacin en la /rans'isin de
a!en/es in#ecciosos
Valorar el lavado de 'anos co'o 'edida de $arrera
De/er'inar la i'7or/ancia de la 'ascarilla co'o 'edida de
$arreraE

Ma/erial ; M"/odo*

30 Placas Pe/ri con A!ar San!re en +ase Col2'$ia= 'ascarillas= 6a$n ; a!2aE
Tra$a6ar en /res !r27os de cinco 7ersonasE
El '"/odo de /ra$a6o es 7or si'7le eA7osicin de 'a/erial es/"ril o 'edian/e con/ac/o
con 'a/erial es/"rilE

,r27o )* EA7oner 2na 7laca de a!ar al a'$ien/e= so$re el 'esn= d2ran/e die4
'in2/osE Colocar los dedos s2ave'en/e so$re el a!ar d2ran/e 30 se!2ndosE Cerrar ;
ro/2larE

,r27o 2* Dos al2'nos de$en reali4ar lo si!2ien/e* 'ani72lar o$6e/os d2ran/e /res
'in2/os= l2e!o colocar s2ave'en/e los dedos so$re el a!arE
En se!2ida= el 'is'o de$er( lavarse las 'anos con el 6a$n dis7oni$le d2ran/e /res
'in2/os= l2e!o de$e de6ar secar al aireE Colocar s2ave'en/e los dedos so$re el a!arE
Cerrar ; ro/2larE

,r27o 3* Un al2'no de$er( leer 2n /eA/o en vo4 al/a #ren/e a 2na 7laca a$ier/a=
d2ran/e dos 'in2/osE O/ro re7e/ir( lo 'is'o 2/ili4ando 'ascarillaE
Cerrar ; ro/2larE

Inc2$ar 43 Brs a 30:C= a/'s#era aero$iaE Re#ri!erar ; o$servar los res2l/ados en el
7aso 7r(c/ico si!2ien/eE

Disc2/e los res2l/ados con el 7ro#esor ; /2s co'7aFerosE
Ano/a /2s concl2siones*

)1

"Todo lo que aqu se
hace me parece muy
intil; los
fallecimientos se
suceden de la forma
ms simple. Se
contina operando,
sin embargo, sin
tratar de saber
verdaderamente por
qu tal enfermo
sucumbe antes que
otros en casos
idnticos".
Ignacio Felipe
Semmelweis
(1818 -1865)

Ati.idad n01) Las 'anos= 2na e#ica4 #or'a de /rans'i/ir en#er'edadesE

O$6e/ivos* Eval2ar la can/idad de $ac/erias <2e 7or/a'os en n2es/ras 'anosE
Co'7render el ries!o de /rans'isin de 'icror!anis'os 'edian/e
'ani72lacinE
Valorar el lavado de las 'anos co'o 'edida de $arreraE

Ma/erial ; M"/odo*

.00 'L de Caldo Pe7/onado es/"ril= envasado en reci7ien/es de $oca ancBaE
Pi7e/as es/"riles
Placas Pe/ri es/"riles= sin 'edio de c2l/ivo
A!ar N2/ri/ivo s/andard= envasado en /2$os 7ara #2ndirE
,radillasE
El '"/odo de /ra$a6o consis/e en o$/ener 2na '2es/ra de 2n en62a!2e de 'anos ;
reali4ar 2n rec2en/o de las $ac/erias aer$icas 'es#ilas via$les= l2e!o calc2lar el nH'ero
/o/al de $ac/erias en la 'anoE
Cada !r27o de cinco al2'nos /ra$a6a de la si!2ien/e #or'a*
)E In/rod2cir /oda la 'ano en el reci7ien/e de Caldo
Pe7/onado es/"ril= reali4ar #riccin con los dedos d2ran/e ) 'in2/oE Re/irar
la 'ano ; de6ar es/a 7re7aracin en re7oso 7or )0 'in2/os al a'$ien/e=
con el reci7ien/e /a7adoE
2E ?2ndir dos /2$os con A!ar N2/ri/ivo S/andard en 2n
vaso de 77E con a!2a corrien/e 'edian/e e$2llicinE Una ve4 #2ndido=
re/irar del calor ; es7erar a <2e se /e'7ere a la /e'7era/2ra <2e so7or/a
la 'ano 840: a 4.:C9E
3E Con 2na 7i7e/a es/"ril= /o'ar 2na '2es/ra de 0=. 'L
del Caldo Pe7/onado en <2e Bici'os el lavado de 'anos= ; colocarlo en el
cen/ro de la 7laca de Pe/riE Re7i/e en o/ra 7lacaE
4E A!re!ar c2idadosa'en/e a las dos 7lacas el A!ar
N2/ri/ivo #2ndido ; 'e4clar con las '2es/ras 'edian/e 'ovi'ien/os
ro/arios s2avesE De6ar solidi#icar en la s27er#icie del 'esn sin 'overE
.E Una ve4 slido ro/2lar e inc2$ar 7or 43 BrsE a
/e'7era/2ra a'$ien/eE Re#ri!erar Bas/a el 7aso 7r(c/ico si!2ien/eE
0E Con 2n l(7i4 'arcador 7er'anen/e= dividir las 7lacas
en c2a/ro c2adran/es 7or el lado del a!arE Con/ar el nH'ero de colonias
7resen/es en /odos los c2adran/esE C2en/a la o/ra 7laca ; 7ro'ediaE Es/o
re7resen/a la can/idad de $ac/erias vivas en la '2es/ra de 0=. 'LE
1E Calc2la aBora la can/idad de $ac/erias en la 'ano= 7lan/ea 2na #r'2la
'a/e'(/ica de es/i'acin del /o/al ; discH/ela con /2s co'7aFerosE
3E Re!is/ra /2s res2l/ados= 7lan/ea 2n de$a/e con es/as o$servacionesE
)3

De&in%ei-n ' Anti&e*&ia

+ien lo es/a$leci I!nacio Se''elIies 8)3)3-)30.9 al o$servar <2e el 2so de cier/os
a!en/es <2%'icos 7ara sani/i4ar las 'anos 7od%a red2cir las /asas de in#ecciones asociadas a la
a/encin '"dica= en /an/o <2e Kose7B Lis/er 8)321-)5)29 de'2es/ra <2e el /ra/a'ien/o /"r'ico
a7licado a ins/r2'en/ales es 2na 'edida e#ica4 7ara dis'in2ir las in#ecciones 7os/ <2irHr!icasE En
es/a "7oca= Lo2is Pas/e2r 8)322-)35.9 reci"n es/( de'os/rando la 7resencia de 'icror!anis'os en
el a'$ien/e= ca7aces de 7rod2cir 72/re#accin ; asoci(ndolos a la oc2rrencia de en#er'edades
in#ecciosasE

U2eda claro en/onces= <2e la accin de a!en/es #%sicos ; <2%'icos es H/il en la con/encin
de las en#er'edades in#ecciosasE De es/a a#ir'acin se des7renden los conce7/os de
DESIN?ECCION > ANTISEPSIAE

Lla'are'os DESIN?ECCI@N a la si'7le descon/a'inacin de 2n o$6e/o o s27er#icie de
al!o= de la <2e eli'inare'os casi /odas las #or'as ve!e/a/ivasE Es i'7or/an/e recordar <2e
72eden eAis/ir 'icror!anis'os con diversos !rados de resis/encia a los a!en/es <2%'icos
e'7leados= <2e el e#ec/o de es/os de7ender( de #ac/ores co'o la concen/racin= el /ie'7o de
eA7osicin= la na/2rale4a <2%'ica del a!en/e= la /e'7era/2ra= ; #inal'en/e la eAis/encia de
'ecanis'os de la/encia en los 'icror!anis'os 8es7oras $ac/erianas9E

ANTISEPSIA son /odos los 7rocedi'ien/os enca'inados a red2cir al '(Ai'o la 7resencia
de 'icror!anis'os so$re los /e6idos vivos 87iel= al!2nas '2cosas9 <2e es/(n en con/ac/o con el
a'$ien/e= a7licando '"/odos #%sicos o <2%'icosE El 7ro7si/o de la an/ise7sia es conse!2ir la
ASEPSIA= o a2sencia de 'icror!anis'osE

Los '"/odos #%sicos o <2%'icos e'7leados 7ara la desin#eccin ; an/ise7sia /ienen
di#erencias #2nda'en/ales* el daFo es/r2c/2ral 8en los '"/odos #%sicos9 ; la /oAicidad 8en los
'"/odos <2%'icos9E Un an/is"7/ico no de$e ser /Aico ni daFar la in/e!ridad de los /e6idosE

Los e#ec/os de los Desin#ec/an/es ; An/is"7/icos 72eden ser de dos /i7os*
+ac/erios/(/icos* si slo de/ienen la 7roli#eracin 'icro$iana=
+ac/ericidas* si 7rod2cen la '2er/e de los 'icror!anis'osE

De ac2erdo a los e#ec/os o$servados= 7ode'os clasi#icar a es/os a!en/es <2%'icos co'o de ALTO
NIVEL= NIVEL INTERMEDIO O +AKO NIVELE

)5

Los 'icror!anis'os 7resen/an dis/in/os !rados de resis/encia a es/os a!en/es= siendo los
'(s resis/en/es Priones ; los '(s s2sce7/i$les Vir2s con 'an/o o envol/2raE

El e#ec/o de c2al<2ier
an/is"7/ico o desin#ec/an/e 72ede
verse al/erado 7or la 7resencia de
s2ciedad o res/os or!(nicosE Es
i'7rescindi$le re/irar /odo eAceso
de s2ciedad an/es de la a7licacinE

La 7ersis/encia de /ierra=
res/os de ali'en/os= san!re= 72s=
secreciones 72ede i'7licar el
a2'en/o de la concen/racin o del
/ie'7o de eA7osicin al a!en/e
<2%'icoE

La eleccin del desin#ec/an/e a 2sar /iene relacin con el o$6e/o <2e nos in/eresa
/ra/arE EAis/e 2na ca/e!ori4acin de los o$6e/os de 2so cl%nico de ac2erdo al ries!o de /rans'i/ir
2na in#eccin 'edian/e s2 2soE

El e#ec/o desin#ec/an/e
de$er( ser 'a;or c2ando se a7li<2e a
o$6e/os cr%/icos= al 72n/o de lo!rar la
es/erili4acinE

Los a!en/es <2%'icos
U2e 72eden ser 2sados con e#ec/o
es/erili4an/e so$re o$6e/os cr%/icos son
7or e6e'7lo*

,LUTARALDEOIDO AL 2R
,AS OMIDO DE ETILENO
PEROMIDO DE OIDRO,ENO
ACIDO PER ACETICO AL 2R

El 2so de los 'a/eriales /ra/ados con es/os a!en/es <2%'icos no 72ede ser
in'edia/o de$ido a s2 elevada /oAicidad= 7or lo <2e el 7roceso de 7re7aracin considera 2n
/ie'7o de disi7acinE

20

El e%eto de lo& a!ente& 2u"(io& &obre lo& (iror!ani&(o&)

Los a!en/es <2%'icos e'7leados con #ines de desin#eccin ; an/ise7sia= co'o /a'$i"n los
e'7leados con #ines /era7"2/icos 8an/i'icro$ianos9= ac/Han so$re los 'icro or!anis'os con la
#inalidad de 7rod2cir 2na dis'in2cin de la car!a $ac/eriana 'edian/e la eli'inacin de las #or'as
ve!e/a/ivas 8$ac/ericidas9= i'7idiendo la '2l/i7licacin $ac/eriana 8$ac/erios/(/icos9 o
de#ini/iva'en/e eli'inando /oda /i7o de #or'a de vida 'icro$iana 8es/erili4an/es9E

El e#ec/o $ac/ericida= $ac/erios/(/ico o es/erili4an/e de7ender( de los si!2ien/es #ac/ores*

Ti7o de a!en/e <2%'ico e'7leado*
o AlcoBoles* e/anol o iso7ro7anol al 10R
o Al<2ilan/es* ?or'aldeB%do= Aido de e/ileno
o Oalo!enan/es* Oi7oclori/o= >od2ros
o S2r#ac/an/es* co'72es/os de a'onio c2a/ernario= 6a$ones= /riclos(nE
o OAidan/es* Aido de e/ileno= 7erAido de Bidr!eno= (cido 7erac"/icoE
o Co'72es/os #enlicos*
OeAacloro#eno= ClorBeAidinaE

Concen/racin ; Tie'7o de accin*
o La e#icacia de 2n a!en/e <2%'ico
a2'en/a con la concen/racin ; el
/ie'7o de eA7osicinE

Na/2rale4a del 'icror!anis'o*
o Los vir2s sin envol/2ra son '(s resis/en/es <2e los con envol/2raE
o Los 'icro or!anis'os ,ra' ne!a/ivos /ienden a ser '(s resis/en/es <2e
los ,ra' 7osi/ivos a los a!en/es <2%'icos=
o Son es7ecial'en/e resis/en/es las $ac/erias <2e #or'an endos7orasE
o A 'a;or can/idad de 'icro or!anis'o= 'a;or necesidad de concen/racin
o /ie'7o de eA7osicin del a!en/e <2%'icoE

O$6e/o 2 o$6e/ivo de a7licacin*
o Los desin#ec/an/es se 72eden a7licar so$re o$6e/os o s27er#icies
inani'adas= la concen/racin ; el /ie'7o de eA7osicin de7ender(n de la
resis/encia al e#ec/o corrosivoE
o Los an/is"7/icos son 7or de#inicin de $a6a /oAicidad= ; se a7lican so$re
/e6idos vivos 87iel ; al!2nas '2cosas9 en concen/raciones $a6as ; 7or
/ie'7o li'i/adoE
2)

Te'7era/2ra de a7licacin
o En !eneral= los e#ec/os so$re 2na 7o$lacin 'icro$iana a2'en/a con la
/e'7era/2ra
7O de la sol2cin
o El 7O adec2ado de7ender( de la na/2rale4a aninica o ca/inica del
a!en/e <2%'icoE En !eneral= el e#ec/o del 7O se relaciona con la ca7acidad
de ioni4acin /an/o del a!en/e <2%'ico co'o de las envol/2ras cel2lares
de los 'icro or!anis'os= 7or #acili/acin del /rans7or/e de iones en
sol2cin ac2osa a /rav"s de las es/r2c/2ras de envol/2raE
Presencia de s2s/ancias in/er#eren/es*
o Los desin#ec/an/es 72eden 7erder s2 e#icacia 7or con/ac/o con 'a/eria
or!(nica con/a'inan/e* san!re= secreciones= de7osiciones= res/os de
ali'en/os= AidosE
o Los an/is"7/icos /a'$i"n 7ierden e#icacia si se a7lican so$re la 7iel s2ciaE

Los e#ec/os de es/os a!en/es <2%'icos se veri#ican so$re las es/r2c/2ras de las 7ro/e%nas
#2ncionales ; es/r2c/2rales de los 'icror!anis'os= ; so$re los (cidos n2cleicosE Lo an/erior i'7lica
al/eraciones en la #2ncin 'e/a$lica= en la es/r2c/2ra ; 7er'ea$ilidad de la 'e'$rana cel2lar= ;
en la re7licacin del 'a/erial !en"/icoE

De ac2erdo a s2 e#icacia=
7ode'os ca/e!ori4ar a es/os
a!en/es <2%'icos en /res niveles de
accinE

Los a!en/es de $a6o nivel
/ienen e#ec/o li'i/ado= ; no
!aran/i4an 2na adec2ada
sani/i4acinE P2eden encon/rarse al
alcance del 7H$lico co'o 6a$ones o
sol2ciones !er'icidas de ven/a
li$reE

Los a!en/es de nivel in/er'edio /ienen 'e6or e#ec/o= 7ero no lo!ran la eli'inacin de
es7orasE Se enc2en/ran en es/e !r27o a los alcoBoles= los derivados #enlicos= los Balo!enan/es
co'o el cloro ; ;odo= ; el 7erAido de Bidr!eno en $a6a concen/racinE
Los a!en/es <2%'icos de al/o nivel son '2; /Aicos= 7or lo <2e no se 2san co'o
an/is"7/icos sino co'o desin#ec/an/es o es/erili4an/es de7endiendo de s2 concen/racin o
/oAicidadE En es/e !r27o 7ode'os ci/ar al !l2/araldeBido= (cido 7erac"/ico= Aido de e/ileno=
7las'a de 7erAido de Bidr!enoE

22

E%eto& de %atore& de orden %"&io &obre lo& (iror!ani&(o&

La ac/ividad $iol!ica /a'$i"n 72ede verse al/erada 7or e#ec/o de #ac/ores de orden #%sicoE
La si'7le accin 'ec(nica de arras/re= la a$rasin= la desecacin ; el e#ec/o de la l24 solar ac/Han
en #or'a na/2ral so$re los 'icror!anis'osE

No o$s/an/e lo an/erior= la B2'anidad Ba desarrollado /ecnolo!%as <2e 7er'i/en 'ane6ar
los #ac/ores #%sicos 7ara a7rovecBarlos con el o$6e/o de descon/a'inar ; es/erili4arE En es/e
sen/ido= son conocidas las a7licaciones de /e'7era/2ras 8es7ecial'en/e calor9= 7resin ;
radiaciones 8l24 2l/raviole/a de onda cor/a= radiacin !a''a9E

Los #ac/ores de orden #%sico /ienen los si!2ien/es e#ec/os so$re los 'icror!anis'os*

#34 E%eto de la te(*eratura)

El #r%o 7or lo !eneral /iene e#ec/o $ac/erios/(/ico= 7or lo <2e '2cBas $ac/erias 72eden
rec27erar s2 ac/ividad si se les re!resa a s2 /e'7era/2ra vi/al 7/i'aE En '2cBas de las es7ecies
$ac/erianas se o$serva al!2na ca7acidad de /olerar el con!ela'ien/o= resis/iendo a la #or'acin
de cris/ales de Bielo en el ci/o7las'aE Es/a ca7acidad de resis/encia a2'en/a c2ando es/os
or!anis'os se enc2en/ran en 2n 'edio rico en 7ro/e%nas o car$oBidra/osE

Por el con/rario= los e#ec/os del calor 72eden ser $ac/ericidas ;a <2e se veri#ican so$re las
7ro/e%nas es/r2c/2rales o #2ncionales de los 'icror!anis'osE En la 'edida <2e a2'en/a'os la
eA7osicin al calor 7or so$re los ran!os de /olerancia vi/al de 2na es7ecie $ac/eriana= co'ien4a a
oc2rrir al/eracin irreversi$le de la ar<2i/ec/2ra 7ro/eica= lo <2e i'7lica 2n cola7so es/r2c/2ral ;
#2ncionalE En las $ac/erias de i'7or/ancia '"dica las #or'as ve!e/a/ivas= es decir= las <2e son
a7/as 7ara el 'e/a$olis'o ; re7rod2ccin res2l/an des/r2idas con la eA7osicin a /e'7era/2ras
Caballeros, yo pudiera sealar a ese lquido [estril] y decirles: He tomado mi
gota de agua de la inmensidad de la creacin, y la he tomado llena de los
elementos conenientes para el desarrollo de seres in!eriores" # espero, obsero,
inquiero de ella, suplic$ndole que comience de nueo para m el hermoso
espect$culo de la primera creacin" %ero est$ muda""" muda desde el mismo
comien&o de estos e'perimentos hace arios aos( est$ muda porque la he
mantenido ale)ada de la *nica cosa que el hombre no puede producir +de los
grmenes que se alimentan en el aire+ de la ida, porque la ida es un germen y
un germen es ida" ,unca se recobrar$ la doctrina de la generacin espont$nea
del golpe mortal de este sencillo e'perimento"-
.ouis %asteur" /011 .ouis %asteur" /011 .ouis %asteur" /011 .ouis %asteur" /0112 22 2/034 /034 /034 /034
23

cercanas al 72n/o de e$2llicin del a!2a= condicin <2e solo 72eden resis/ir las es7oras
$ac/erianasE

E#ec/o del a2'en/o de la /e'7era/2ra so$re 2na
7o$lacin $ac/erianaE

El a2'en/o de la /e'7era/2ra 7or so$re el 7/i'o
necesario 7ara ac/ividad vi/al 8ran!o /"r'ico9
cond2ce a 2n r(7ido cola7so $iol!icoE

Di#eren/es $ac/erias a dis/in/as /e'7era/2ras*

A /rav"s de la evol2cin las $ac/erias Ban desarrollado ada7/aciones 7ara la vida a diversas
/e'7era/2ras= 7or lo <2e 7ode'os clasi#icarlas co'o*
+ac/erias '"s#ilas= si s2 ac/ividad vi/al se desarrolla a /e'7era/2ras en/re 2.: ;
4.:C= lo <2e incl2;e a las 7a/!enas 7ara el ser B2'anoE
+ac/erias 7sicr#ilas= si 'an/ienen ac/ividad en/re los 0: ; 20:CE En es/e !r27o se
enc2en/ran 'icror!anis'os ca7aces de desco'7oner ali'en/os d2ran/e la
re#ri!eracinE Al!2nos 7a/!enos 'es#ilos 72eden /olerar es/e ran!o de
/e'7era/2ra 8Staphylococcus aureus y Listeria monocytogenes9E Un s2$!r27o
ca7a4 de /olerar /e'7era/2ras al!o 'as al/as son deno'inadas 7sicro/ro#asE
+ac/erias /er'#ilas= si viven en/re .0: ; 10:CE Un s2$!r27o deno'inado
Bi7er/er'#ilas es ca7a4 de so$revivir a /e'7era/2ras /an al/as co'o 10: a ))0:CE

De ac2erdo a es/a clasi#icacin= cada es7ecie $ac/eriana es ca7a4 de vivir en 2n 'ar!en de
/e'7era/2ra deno'inado RAN,O TWRMICO= <2e /iene 2na a'7li/2d cercana a 3.:CE

Mar!en de creci'ien/o 7ara dis/in/os
!r27os $ac/erianos

En Staphylococcus aureus ; Listeria
monocytogenes es/os '(r!enes /ienen
'a;or a'7li/2dE

24

El /ie'7o en el <2e se veri#ica el e#ec/o le/al del calor so$re 2na 7o$lacin $ac/eriana
/iene relacin inversa con la can/idad de calor a7licadaE En o/ras 7ala$ras= 7ara 2n e#ec/o '(s
r(7ido se re<2iere 'a;or /e'7era/2raE
A es/e valor de /ie'7o se le lla'a TIEMPO DE
REDUCCI@N DECIMAL 8D9= ; corres7onde al /ie'7o
necesario 7ara de6ar solo el )0R de so$revivien/es de
2na es7ecie $ac/eriana al a7licarle 2n /ra/a'ien/o
$ac/ericida #%sico o <2%'icoE
En es/e !r(#ico= 7ara 2na es7ecie $ac/eriana PAQ=
se lo!ra de6ar el )0R via$le en )2 'in2/os a 00:CE Si se
con/inHa a la 'is'a /e'7era/2ra= el 0=)R so$revive a
los 40 'in2/osE

Si #i6a'os la /e'7era/2ra= el valor D es de7endien/e de la es7ecie $ac/eriana* Si /ra/a'os
a 2na es7ecie $ac/eriana PAQ a 00:C o$/ene'os 2n valor D de )2 'in2/os= si a7lico el 'is'o
/ra/a'ien/o a la $ac/eria P;Q 72edo o$/ener 2n valor D di#eren/eE

Es/o in/rod2ce dos n2evas de#iniciones*
TIEMPO TWRMICO MORTAL= <2e es el /ie'7o '%ni'o necesario 7ara inac/ivar el )00R de
2na 7o$lacin $ac/eriana dada a 2na /e'7era/2ra cons/an/eE
PUNTO TWRMICO MORTAL= <2e es la /e'7era/2ra '%ni'a necesaria 7ara inac/ivar
/o/al'en/e 2na 7o$lacin $ac/eriana en 2n /ie'7o #i6o de )0 'in2/osE

Con es/os /res conce7/os se de#inen las condiciones ideales 7ara la es/erili4acin 'edian/e
calor= o del /ra/a'ien/o de ali'en/os 7ara la '(Ai'a red2ccin de la car!a $ac/eriana sin
al/eracin de s2s 7ro7iedadesE

Si nos #i6a'os en el c2adro an/erior= eAis/en es7ecies $ac/erianas <2e re<2ieren
/ra/a'ien/os /"r'icos 7or so$re la /e'7era/2ra de e$2llicin del a!2a= ;a <2e 7oseen es7orasE La
'e6or #or'a de lo!rar el e#ec/o de inac/ivacin de es/os 'icror!anis'os sin al/erar los 'a/eriales
es co'$inar calor= a!2a ; 7resin= en 2n sis/e'a cerrado ; con/rolado <2e conoce'os co'o
AUTOCLAVEE

2.

La a7licacin calor ; va7or $a6o
7resin reali4ada en el a2/oclave es 2no
de los 7rocedi'ien/os de es/erili4acin
'(s 2/ili4ados en la 7re7aracin de
'a/eriales 7ara la 'edicina= ;a <2e
ase!2ra en #or'a e#icien/e la eli'inacin
de #or'as ve!e/a/ivas ; de resis/encia
8es7oras9 de /odo /i7o de 'icror!anis'os=
a la ve4 <2e des/r2;e vir2s ; 7rionesE
Es/e 7roceso es #(cil de con/rolar= es r(7ido
; e#ica4E

Es7oras de Bacillus anthracis= Tincin de ,ra' ).00A

En !eneral= los 'a/eriales a /ra/ar 'edian/e a2/oclavado se eA7onen d2ran/e ). 'in2/os a
)2):C= sin e'$ar!o es/e s/andard 72ede variar en #2ncin del vol2'en de 'a/eriales a /ra/ar o de
la na/2rale4a de es/os= de 'odo <2e sie'7re se de$e considerar el /ie'7o necesario 7ara <2e el
nHcleo de los 7a<2e/es de 'a/eriales alcance la eA7osicin necesaria= o 7ara <2e los a!en/es
'icro$ianos alcancen el /ie'7o /"r'ico 'or/alE

134 E%eto& de la& radiaione&)

La radiacin es 2na 7ro7a!acin de ener!%a en #or'a de ondas elec/ro'a!n"/icas de
dis/in/a lon!i/2dE Lla'are'os lon!i/2d de onda X a la dis/ancia <2e Ba; en/re dos 72n/os '(Ai'os
o '%ni'os de ella 8ver #i!2ra9E De ac2erdo a las dis/in/as lon!i/2des de onda de las radiaciones=
es/as se a!r27an en el ESPECTRO ELECTROMA,NETICO de e'isinDa$sorcinE
En es/e ordena'ien/o 7ode'os si/2ar en
el eA/re'o de ondas '(s lar!as a la
radiacin in#rarro6a carac/eri4ada 7or la
e'isin de calor= ; en el
eA/re'o de ondas '(s cor/as a los ra;os
cs'icosE En/re es/e a'7lio ran!o de
#rec2encias 7ode'os encon/rar a la l24
visi$le= los ra;os M ; los ra;os !a''aE

20

A'7li/2d del es7ec/ro elec/ro'a!n"/ico

La a7licacin de calor con #ines $ac/ericidas es esencial'en/e 2na #or'a de a7licacin de
radiacin= no o$s/an/e /ene'os o/ras al/erna/ivas de a7licaciones $ac/ericidas de las ondas
elec/ro'a!n"/icas= /ales co'o la l24 2l/raviole/a 8UV9 de onda cor/a 8L24 UVC9 ; la radiacin
!a''aE
La can/idad de ener!%a /rans'i/ida 7or la onda es direc/a'en/e 7ro7orcional a s2 lon!i/2d=
; es/a can/idad de ener!%a es ca7a4 de 7rod2cir ca'$ios en los c2er7os <2e la a$sor$enE De es/a
#or'a= las ondas de $a6a ener!%a co'o la l24 visi$le ; UV 7rovocan ca'$ios <2%'icos NO
IONIGANTESE En la 'edida <2e a2'en/a'os la ener!%a en la radiacin es/a se Bace '(s
7ene/ran/e ; los e#ec/os se /ornan IONIGANTES= ca7aces de ca2sar la '2er/e cel2larE

La Lu, Ultra.ioleta 5U67)

Con 2na lon!i/2d de onda 2n 7oco '(s cor/a <2e la l24 visi$le= se si/Ha en es/e es7ec/ro a
la l24 2l/raviole/a 8UV9E Todos Be'os sen/ido los e#ec/os de la l24 UV de onda lar!a UVA c2ando
n2es/ra 7iel se eA7one a la l24 solar ; se $ronceaY con al!o '(s de ener!%a la l24 UV+ la eA7osicin
7rolon!ada es ca7a4 de ca2sarnos daFo en la 7iel= ; even/2al'en/e al/eraciones cel2laresE
A#or/2nada'en/e la a/'s#era con s2 ca7a de o4ono nos 7ro/e!e de los 'or/ales ra;os de la l24
UVC <2e 7roviene del sol= ;a <2e es/os 7oseen 2na 'a;or ca7acidad de 7ene/racin ; de daFo 7or
ioni4acinE

Todos los co'72es/os <2%'icos /ienen la 7ro7iedad de a$sor$er ener!%a en #or'a de
al!2na de/er'inada lon!i/2d de onda relacionada con s2 es/r2c/2ra 'olec2larE Es/e 7rinci7io
7er'i/e 2/ili4ar a la l24 UVC con #ines $ac/ericidas de$ido a <2e la lon!i/2d de onda de es/a l24
21

8233 a 200 n'9 es coinciden/e con el '(Ai'o de a$sorcin de la 'ol"c2la de ADN ; ARN 8200 n'9
; con los '(Ai'os de a$sorcin de las 7ro/e%nas 8230 ; 230 n'9E
Los #o/ones de al/a ener!%a e'i/idos 7or 2na
#2en/e de l24 UVC son ca7aces de ro'7er enlaces de
las $ases ni/ro!enadas 7iri'%dicas 8Ci/osina C= ; Ti'ina
T9 del ADN $ac/eriano= !enerando ?OTOPRODUCTOS
<2%'icos <2e i'7osi$ili/an la correc/a re7licacin o
/ranscri7cin de la in#or'acin !en"/ica= 7or e6e'7lo=
d%'eros an'alos de T-T o C-CE

En las 7ro/e%nas= es/os #o/o7rod2c/os se ori!inan 7or la al/eracin de a'ino(cidos
aro'(/icos 8Tri7/o#ano= #enilalanina= /irosina9= o 7or r27/2ra de los enlaces 7e7/%dicosE A'$os
e#ec/os ca2san al/eraciones de la es/r2c/2ra ; #2ncionalidad 7ro/eicaE

De es/a #or'a= la ener!%a de los #o/ones UVC ca2sa e#ec/os '2/a!"nicos sec2ndarios o
e#ec/os le/ales 7or inac/ivacin del 'a/erial !en"/icoE A 7esar de es/o= eAis/en $ac/erias con la
ca7acidad de re7arar los e#ec/os de la l24 UVC 'edian/e 'ecanis'os en4i'(/icos ind2ci$lesE

A*liaione& de la Lu, U6C)

La l24 UVC /iene a7licaciones $ac/ericidas e#icaces en la es/erili4acin del aire= a!2a ;
s27er#icies= sie'7re ; c2ando la dosis de ener!%a <2e reci$en las $ac/erias sea la adec2adaE
De$e'os recordar <2e la can/idad de ener!%a dis'in2;e con res7ec/o al c2adrado de la dis/ancia
de la #2en/e de e'isin= ; <2e la can/idad de ener!%a e'i/ida de7ende de la 7o/encia de la #2en/eE
Una l('7ara UVC de O! de 40 Z de 7o/encia es e#ica4 a 2n 'e/ro de dis/ancia= en /ie'7os de
eA7osicin de se!2ndos= inac/ivando cerca del 55R de las #or'as ve!e/a/ivas $ac/erianasE

Dosis de ener!%a de L24 UVC 7ara e#ec/o le/al en al!2nos a!en/es in#ecciosos

Microor!anis'o Dosis le/al en [ZDc'\
Es7oras de Bacillus subtilis 22E000
Legionella pneumophyla )2E300
Vir2s de la Oe7a/i/is A 3E000
Salmonella typhi 1E000
Staphylococcus aureus 0E000
Escherichia coli 0E000
Vir2s de la In#l2en4a 0E000
Streptococcus sp. 3E300

Pode'os ins/alar 2na #2en/e de e'isin de l24 UVC asociada a sis/e'as de 72ri#icacin de
a!2a= o de 72ri#icacin de aire #il/rado o acondicionado= co'o 'edida de $arrera 7ara 'e6orar la
calidad sani/aria del a'$ien/eE E6e'7lo de es/o es la a7licacin de l24 UVC 7ara la inac/ivacin de
23

Legionella pneumophila en sis/e'as de acondiciona'ien/o de aire= ;a <2e es/e 7a/!eno /iene
co'o reservorio el a!2a de condensacin <2e se #or'a en es/os e<2i7osE

La l24 UVC es invisi$le al o6o B2'ano= las
#2en/es de e'isin UVC se ven il2'inadas
con 2na l24 celes/e a o Pl24 7ar(si/aQ de
'a;or X <2e corres7onde a solo el 2 a .R
de la e'isinE

Por lo an/erior= las #2en/es de e'isin UVC
son 7eli!rosas= ca7aces de 7rovocar
<2e'ad2ras en la 7iel ; daFo irreversi$le
en los o6osE

La Radiai-n Ga((a)

La radiacin !a''a es 2n /i7o de ener!%a elec/ro'a!n"/ica carac/eri4ada 7or la e'isin
de #o/ones 7rod2c/o de la desin/e!racin de ele'en/os radiac/ivos 8iso/o7os9 co'o Co
00
; Cs
)31
E
Es/a radiacin es '2; 7ene/ran/e de$ido a s2 al/o nivel de ener!%a= ; s2s e#ec/os son IONIGANTESE

La radiacin !a''a reali4a s2 accin 'edian/e el cBo<2e de los #o/ones de al/a ener!%a
con los (/o'os del 'a/erial <2e los reci$eE

Los e#ec/os de la ioni4acin de la radiacin !a''a 72eden al/erar si!ni#ica/iva'en/e el
'a/erial !en"/ico= ca2sando la '2er/e cel2larE Es/os e#ec/os 72eden ser de /res /i7os*

E#ec/o le/al direc/o* r27/2ra de enlaces de $ases ni/ro!enadas ; en/recr24a'ien/o
de las Be$ras de ADNE Oc2rre con eA7osicin a al/as dosis de radiacinE
E#ec/o le/al indirec/o= 7or ioni4acin de las 'ol"c2las de a!2a 8radiolisis del a!2a9E
Es/e e#ec/o li$era !randes can/idades de O
C
; !r27os BidroAilo OO
-
E Los radicales
OO
-
72eden co'$inarse con el ADN o con el oA%!eno li$re 7ara !enerar 7erAidos
8O
2
O
2
9 <2e ac/Han oAidando los co'7onen/es de la es/r2c/2ra $ac/erianaE
E#ec/o '2/a!"nico* ca2sado 7or dosis 'enores de radiacin= !enera al/eraciones
en el ordena'ien/o del ADN $ac/eriano ; ori!inando re7licaciones ;
/ranscri7ciones al/eradasE

Los e#ec/os ser(n 'a;ores de7endiendo del a2'en/o de la dosis de radiacinE La radiacin
a$sor$ida se 'ide en 2nidades RADS o ,i!ara; 8,;9E La ca7acidad de las $ac/erias 7ara so7or/ar la
radiacin 72ede ser '2; varia$le= 7ero $as/an/e 'a;or <2e la del ser B2'anoE La dosis le/al de
radiacin 7ara 2n B2'ano ad2l/o es cercana a los )0 ,;= en /an/o <2e 7ara las $ac/erias var%a
en/re 200 ,; ; 3000 ,;E EAis/en es7ecies $ac/erianas ca7aces de so7or/ar niveles de radiacin de
.000 o '(s ,; 8.000 ,; es . ],;9E
E<2i7o de aire acondicionado con /ra'7a de L24 UVC
25

E&terili,ai-n)

Co'o ;a Be'os vis/o= eAis/en varios 7rocesos <2e 72eden a#ec/ar la via$ilidad de los
'icror!anis'osE Pode'os dis/in!2ir a<2ellos des/inados a dis'in2ir la car!a 'icro$iana co'o lo
son la desin#eccin o an/ise7sia si es 7or '"/odos <2%'icos= ; la 7as/e2ri4acin si es 7or '"/odos
#%sicos 'edian/e /ra/a'ien/o /"r'icoE La es/erili4acin en ca'$io /iene e#ec/os le/ales so$re /oda
#or'a de vidaE

Se en/iende 7or es/erili4acin /odos los 7rocesos #%sicos= <2%'icos 8o co'$inaciones de
"s/os9 <2e /ienen co'o 7ro7si/o erradicar /oda #or'a de vida= incl2;endo es7oras= vir2s ;
7rionesE La es/erili4acin es esencial'en/e 2n conce7/o radicalE

C2al<2iera sea el 7roceso <2e eli6a'os 7ara /ra/ar n2es/ros 'a/eriales= de$e /ener co'o
re<2isi/o la eli'inacin de las #or'as '(s resis/en/es de vida 8ver 7!sE )3-23-219= sin al/erar la
es/r2c/2ra o las 7ro7iedades de los 'a/erialesE Por lo /an/o= la es/erili4acin es el RESULTADO
?INAL DEL PROCESO= ; no la 'era eA7osicin a los a!en/es <2%'icos o #%sicosE En es/e 7roceso se
c2en/an ade'(s 2na serie de e/a7as 7revias /endien/es a ase!2rar el "Ai/o= /ales co'o
descon/a'inacin= ins7eccin= 7re7aracin ; e'7a<2e de 'a/eriales= eA7osicin al 7roceso=
al'acena6e ; des7acBo de es/osE

Proe&o& 2u"(io& de e&terili,ai-n)

Consis/en en la a7licacin de a!en/es <2%'icos co'o !as OAido de e/ileno 8ETO9= va7ores
de #or'aldeBido= o !as-7las'a de 7erAido de Bidr!eno asociados a $a6as /e'7era/2ras 8.0:a
00:C9 en 2na c('ara de /ra/a'ien/o de con/rol a2/o'(/icoE Los o$6e/os a /ra/ar son 7l(s/icos con
ca7acidad de resis/ir al!o de /e'7era/2ra= l(/eA= !o'as o 7ol%'eros= o ins/r2'en/os sensi$les a
al/as /e'7era/2ras ; B2'edadE E6e'7los de 'a/eriales a /ra/ar son* sondas= endosco7ios diversosE

Parmetros de esterilizacin para Gas de ETO:

Temperatura Tiempo una vez alcanzada la temperatura, humedad
sobre el 40% y presin del gas entre 450 y 740 mg./lt.
35C 5 hrs.
55C 2,5 hrs.

Al!2nos a!en/es <2%'icos 72eden a7licarse co'o sol2cinE El !l2/araldeBido al 2R
a7licado d2ran/e 20 a 30 'in2/os ; el (cido 7erac"/ico al 0E2R d2ran/e ). 'in2/os a ..:C= l2e!o
de en62a!ado con a!2a es/"ril 7er'i/e la es/erili4acin de 7l(s/icos ; !o'as /er'osensi$les= ;
'e/ales sensi$les al calorE

30

Proe&o& %"&io& de e&terili,ai-n)

Es/os 7rocesos e'7lean #ac/ores co'o la eA7osicin a calor o radiacionesE

Des/aca en es/e /i7o de 7rocesos el AUTOCLAVADO= /ra/a'ien/o de 'a/eriales resis/en/es
al calor 'edian/e la eA7osicin a va7or a al/a 7resinE Los 'a/eriales <2e 72eden so'e/erse a es/e
7roceso son 7or e6e'7lo* ro7as= !asas= vendas= 7l(s/icos resis/en/es al calor= ins/r2'en/al
<2irHr!ico= vidrio= ; al!2nas sol2cionesE
El s/andard de /ra/a'ien/o es de ). 'in2/os a )2):C= 7ero 72ede variar en #2ncin de la
car!a de 'a/eriales en el a2/oclave= de la na/2rale4a de "s/os ; del /a'aFo de los 7a<2e/esE Un
7a<2e/e de !ran vol2'en re<2iere 'a;or /ie'7o de eA7osicin 7ara lo!rar <2e el nHcleo del
'a/erial alcance la /e'7era/2ra d2ran/e el /ie'7o necesarioE Es 7osi$le red2cir el /ie'7o de
/ra/a'ien/o a2'en/ando la /e'7era/2ra en el 7rocesoE O$serva la /a$la si!2ien/e= <2e relaciona
/ie'7o= /e'7era/2ra ; 7resin*

Tiempo desde que alcanza temperatura y
presin
Temperatura Presin
15 minutos 121C 1,5 Atm.

En la si!2ien/e /a$la 7odr(s o$servar dis/in/as 'odalidades de 7rocesos de es/erili4acin*

Material

Mtodo de
esterilizacin

Parmetros de
esterilizacin

Consideraciones

Lquidos Autoclave 134 o 135C Equipo con ciclo de lquidos
Algodones Autoclave 134 o 135C
Artculos de goma
o ltex
Algodn y gasas
Autoclave

Autoclave
121C

134 o 135C

Siliconas Autoclave 121C
Plsticos Oxido de etileno
Plasma Formaldehdo
Formaldehdo
37- 55C
50C

50 60C

Acero inoxidable Autoclave
Estufa por calor seco
134 o 135C
180C

Aluminio Autoclave
Estufa por calor seco
134 o 135C
180C

Maderas Autoclave 134 o 135C
Vidrios Autoclave 134C
Estufa por calor seco 160 180C
Aceites y
petrolatos
Estufa a calor seco 180C De preferencia utilizar
soluciones estriles de
fbrica

3)

La es/erili4acin 'edian/e va7or a al/a 7resin es 2n 7roceso se!2ro ; r(7ido= <2e ade'(s
i'7lica 'enor cons2'o de ener!%aE

O/ra al/erna/iva de /ra/a'ien/o /"r'ico 7ara lo!rar la es/erili4acin es la eA7osicin a calor
seco= 7ara lo <2e se 2/ili4a el e<2i7o co'Hn'en/e conocido co'o PUPINEL= <2e 72ede #2ncionar
'edian/e conveccin de aire calien/e= sea de /i7o !ravi/a/oria o 'ec(nicaE En es/e /i7o de e<2i7o=
el s/andard de a7licacin del 7roceso consis/e en elevar la /e'7era/2ra de la c('ara Bas/a )30:C=
l2e!o 2n 7er%odo de eA7osicin '%ni'o de 30 'in2/os ; #inal'en/e 2n /ie'7o de en#riadoE Con
/odo= es/e 7roceso 72ede /ener 2n ciclo /o/al de 2nas /res Boras ; cons2'e !ran can/idad de
ener!%a el"c/ricaE I!2al'en/e= el /ie'7o de eA7osicin es de7endien/e de la /e'7era/2ra*

Temperatura

Tiempo desde que se alcanza la
temperatura
180C 30 minutos
170C 60 minutos
160C 120 minutos
150C 150 minutos
140C 180 minutos
121C 360 minutos

Los 'a/eriales <2e 72eden es/erili4arse 'edian/e calor seco son 7olvos 8/alco9= acei/es=
7e/rola/o= vaselina= los <2e no son a7/os 7ara /ra/a'ien/o en a2/oclaveE Es/e /i7o de /ra/a'ien/o
daFa el /e'7lado del acero <2irHr!ico ; 72ede 7rovocar car$oni4acin en /eA/ilesE

Control de lo& *roe&o& ' a&e!ura(iento de alidad)

Desde el 72n/o de vis/a de la $iose!2ridad= los 7rocesos de es/erili4acin de$en ser s26e/os
de cer/i#icacinE Es/a condicin i'7lica 7oder a2di/ar ; /ra4ar /oda la a7licacin del 7roceso= desde
la rece7cin de los 'a/eriales Bas/a el 2s2ario #inal= de 'odo de 7oder !aran/i4ar la inoc2idad de
los 'a/eriales so'e/idos a es/erili4acinE

Para e#ec/o del con/rol del 7roceso= se a7lican INDICADORES DE ESTERILIGACI@N*

Indicadores Fsicos En cada ciclo de Esterilizacin
Indicadores Qumicos En cada paquete a esterilizar.
Indicadores Biolgicos

1.- Semanal en todos los equipos de
esterilizacin
2.- En todas las cargas que contienen
implantes
3.- Despus de cada reparacin del
equipo

Los indicadores #%sicos son los 'an'e/ros= /er''e/ros= Bi!r'e/ros ; re!is/ros
e'anados de los e<2i7os= ; no es/(n a la vis/a del 2s2ario #inal de los 'a/erialesE
32

Los Indicadores <2%'icos 72eden o$servarse en /odos los 7a<2e/es de 'a/eriales
so'e/idos a es/erili4acin= de$en es/ar sie'7re a la vis/a del 2s2ario <2i"n de$e o$servar el vira6e
del indicador a 'odo de con/rol vis2alE

Es/os indicadores son s2s/ancias <2e
ca'$iar(n de color c2ando se alcance la
/e'7era/2ra de /ra/a'ien/o= o la concen/racin
del a!en/e es/erili4an/eE En nin!8n a&o !aranti,an
el u(*li(iento del *roe&o o(*leto3

Lo& indiadore& biol-!io& &on la !arant"a (+& &e!ura
de la e%iaia del *roe&o= ;a <2e consis/en en dis7osi/ivos <2e
con/ienen $ac/erias vivas seleccionadas 7ara el con/rol de
es/erili4acin= las <2e de$en res2l/ar inac/ivadasE El 2s2ario de
'a/eriales es/"riles no /endr( a la vis/a es/e /i7o de con/roles=
7ero 72ede cons2l/ar la validacin del 7roceso 'edian/e cer/i#icadosE

Co'o cond2c/a se!2ra an/es de 2/ili4ar 2n 'a/erial s272es/a'en/e es/"ril= de$e'os
o$servar <2e el envol/orio 8envase9 es/" sie'7re inde'ne= <2e /en!a la #ecBa de a7licacin del
7roceso ; de venci'ien/o= ; <2e el vira6e de los indicadores <2%'icos sea ca/e!ricoE

Ernst von Bergmann
8)330 -)5019
En )350= el cir26ano ale'(n Erns/ von
+er!'ann= creador del conce7/o de ase7sia
<2irHr!ica= in/rod2ce el 2so del a2/oclave=
a7ara/o <2e 2/ili4 en #or'a 7er'anen/e 7ara
a7licar calor $a6o 7resin en el /ra/a'ien/o de
la ro7a 7ara cir2!%aE
33

Elei-n del *roe&o adeuado)

Co'o Be'os vis/o= eAis/e 2na !ran variedad de 7rocesos 7osi$les 7ara lo!rar la
es/erili4acin= la eleccin del '(s adec2ado de7ender( del /i7o de 'a/eriales a /ra/ar= de la
/oAicidad resid2al= de la e#icacia del 7roceso ; de la econo'%a de s2 a7licacinE A 'odo de !2%a
co'7ara/iva 72edes o$servar la si!2ien/e /a$la 8se eAcl2;e la radiacin ioni4an/e9*

Ventajas y limitaciones de los distintos mtodos de esterilizacin

Mtodo Ventajas Limitaciones
Autoclave a vapor Ciclos ms cortos.
Menor costo de operacin.
Efectivo frente a la eliminacin
de priones.
No presenta toxicidad para el
personal ni para el ambiente.
Certificable.
Mtodo no compatible con
Material termosensible.
No elimina pirgenos.
No esteriliza sustancias oleosas ni polvos.
Calor seco Equipamiento de menor costo
que el autoclave
Facilidad de operacin de los
equipos

Dao del material por exposicin a
temperaturas elevadas.
Tiempos de exposicin prolongados en
comparacin con la esterilizacin a vapor.
Dificultad en la certificacin del mtodo.
Costos de operacin elevados.
No hay informacin respecto a su
efectividad contra priones
Oxido de etileno Permite la esterilizacin de
material termosensible
Certificable
Buena penetracin

Requieren perodos prolongados de
proceso y aireacin.
No es un mtodo efectivo contra priones
Txico para el personal, pacientes y
ambiente
Plasma Baja temperatura.
Ciclos de corta duracin.
No txico para las personas ni
para el ambiente.
No requiere instalaciones
especiales
Incompatibilidad con algunos materiales.
Controversia respecto a su utilizacin en
artculos con lmenes largos entre 1 y 2 mt.
y angostos (entre 1 y 3mm).
No elimina priones

Acido peractico
lquido
Rpido
Efectivo en la esterilizacin
de endoscopios y
laparoscopios
Equipo automtico
estandarizado
No contamina al medio
ambiente
Slo puede ser utilizado para material
sumergible
Esteriliza un solo contenedor por ciclo por
lo que no puede ser utilizado para
cantidades mayores de material
No elimina priones
Debe ser utilizado en forma inmediata
Formaldehdo Baja temperatura.
Ciclos de corta duracin.
Certificable

Incompatibilidad con algunos materiales.
Mtodo no aprobado para su utilizacin en
USA
No elimina priones

P2edes o$/ener 'a;or in#or'acin en*
www.enfermeraspabellonyesterilizacion.cl/trabajos/plasma.pdf
juridico1.minsal.cl/RESOLUCION_1665_01.doc
34


)E- Si 7ara el lavado de 'anos 2sas 2n 6a$n !er'icida con a'onio c2a/ernario= TU2" nivel
de accin !er'icida /ieneV

2E- Dado el 2so '"dico del o$6e/o ; s2 ries!o de /rans'i/ir a!en/es in#ecciosos= TC'o
clasi#icas a 2n /er''e/roV= TC'o lo desin#ec/asV

3E- TU2" a!en/e <2%'ico 2/ili4ar%as 7ara desin#ec/ar 2n endosco7ioV= TU2" nivel de
desin#eccin de$e o$/enerseV

4E- Un /ra$a6ador a!r%cola de$e so'e/erse a Bidra/acin 7aren/eral 2r!en/eE TC2(l ser%a la
sec2encia de acciones '(s correc/a al ins/alar el /ra/a'ien/oV No'$ra los a!en/es <2%'icos a
2sarE

.E- TU2" 7reca2ciones de$en /o'arse an/es de 2sar o$6e/os es/erili4ados con Aido de
e/ilenoV

0E- TU2" '"/odo de es/erili4acin #%sico es adec2ado a7licar a 'a/eriales 7l(s/icos
sensi$les al calorV

1E- En 2n even/o de in/oAicacin ali'en/aria se de/er'in la 7resencia de Staphylococcus
aureus en 2na 7ar/ida de <2eso <2e se 'an/en%a en 2na vi/rina re#ri!erada de 2n s27er'ercadoE
Si la cadena de #rio es adec2ada= TC2(l 72ede ser el P!eneradorQ o reservorio en es/e even/oV=
TU2" carac/er%s/icas es7eciales /iene Staphylococcus aureusV

3E- Descri$e 7or <2" ra4n el /ra/a'ien/o s/andard de es/erili4acin 7or va7or $a6o 7resin
considera 2na eA7osicin de 'a/eriales d2ran/e ). 'in2/os a )2):C ; ). l$ de 7resinE

5E- EA7lica co'o la accin de los ra;os !a''a so$re las 'ol"c2las de a!2a a#ec/a
indirec/a'en/e a las $ac/eriasE

)0E- EA7lica c2(l ser%a /2 '"/odo de eleccin 7ara la es/erili4acin de ro7a <2irHr!ica de
al!odnE

3.

UNIDAD 1
TOMA DE MUESTRAS 9 CULTI6O PRIMARIO

30


Ati.idad n0:) Aisla'ien/o de $ac/erias a 7ar/ir de '2es/ras '"dicas IE
O$6e/ivos* Prac/icar la /o'a de '2es/ra #ar%n!eaE
Prac/icar la 'e/odolo!%a de sie'$ra de '2es/ras 'icro$iol!icas
en 'edios de c2l/ivo slidosE
Reconocer 'a/eriales ; es/ra/e!ias de c2l/ivoE
Prac/icar 62e!o de roles '"dico N 7acien/eE
Ma/eriales ; '"/odo* To'a de '2es/ras ; sie'$ra de secrecin #ar%n!ea so$re A!ar
San!re en $ase Col2'$iaE
Dis7oner de /r2las es/"riles 7ara /o'a de '2es/ras= $a6a len!2as=
!2an/es= 7or/ao$6e/os= 7lacas de a!ar san!re Col2'$iaE

?or'ar 2n !r27o de /ra$a6o de cinco al2'nosE

To'a de '2es/ras* EA7li<2e a s2 7acien/e <2e 7rocedi'ien/o le va a BacerE Use
!2an/esE
P%dale <2e a$ra $ien la cavidad $2cal ; sa<2e la len!2aE
De7ri'a la len!2a con 2n $a6a len!2as ; o$serve el es/ado de la
cavidad oro #ar%n!eaE +2s<2e si/ios con si!nos in#la'a/orios o la
7resencia de 72s= es7ecial'en/e cerca de las a'%!dalasE
Mien/ras 'an/iene la $oca a$ier/a ; la len!2a de7ri'ida= con 2na
/r2la es/"ril /o'e 2na '2es/ra de secrecin #ar%n!ea en #or'a
r(7ida ; 7recisa= sin daFar a s2 7acien/eE El 7rocedi'ien/o 72ede
ser al!o 'oles/oE

Sie'$ra* Dis7on!a de 2na 7laca de A!ar San!re Col2'$ia ; ro/e la /r2la en
2n 72n/o 7eri#"ricoE L2e!o di$26e 2na es/r%a so$re el a!ar con la
'is'a /r2laE Descar/e la /r2la en 2n reci7ien/e con sol2cin
cloradaE Iden/i#i<2e la sie'$ra con el no'$re de s2 7acien/e ;
l2e!o inc2$e a 3. a 31:C 7or 24 BorasE

O$serve el desarrollo de dis/in/as colonias $ac/erianas= 7on!a
a/encin a los e#ec/os del desarrollo $ac/eriano so$re la san!reE

EAa'en direc/o* Es/e 7rocedi'ien/o es 7ar/e in/e!ral del eAa'en 'icro$iol!ico de
la #arin!e ; es de '2cBa 2/ilidad= ;a <2e le 7er'i/ir( 'edian/e Tincin de ,ra' ; eval2ar
el es/ado in#la'a/orio ; la 7resencia de $ac/erias 7a/!enasE To'e o/ra '2es/ra #ar%n!ea
de ac2erdo a lo descri/o ; col<2ela en el cen/ro de 2n 7or/ao$6e/os li'7io= 'edian/e
ro/acin s2aveE Reserve 7ara reali4ar la ac/ividad n: 1E

31


Ati.idad n0;) Aisla'ien/o de $ac/erias a 7ar/ir de '2es/ras '"dicas IIE
O$6e/ivos* Prac/icar la 'e/odolo!%a de sie'$ra de '2es/ras 'icro$iol!icas
en 'edios de c2l/ivo slidosE
Prac/icar 62e!o de roles '"dico N 7acien/eE
In/en/ar el dia!ns/ico del es/ado de 7or/ador nasal de
Staphylococcus aureus.
Ma/eriales ; '"/odo* To'a de '2es/ras ; sie'$ra de secrecin nasal so$re A!ar San!re
en $ase Col2'$iaE Los 'a/eriales son los 'is'os de la ac/ividad
n:3E
To'a de M2es/ras* EA7li<2e a s2 7acien/e el 7rocedi'ien/oE Use !2an/esE
Pida al 7acien/e <2e incline la ca$e4a li!era'en/e Bacia a/r(sE
Con 2na /r2la es/"ril #ro/e el 7iso ; las 7aredes de la ven/ana
nasalE Pre7are 2na l('ina 7ara el eAa'en direc/oE

Sie'$ra* To'e o/ra '2es/ra nasal ; sie'$re 2na 7laca de A!ar san!re
Col2'$ia de ac2erdo a lo descri/o en la ac/ividad n:3E Iden/i#i<2e
con el no'$re del 7acien/e ; l2e!o inc2$e 7or 24 Boras a 3. N
31:C

O$serve el desarrollo de dis/in/as colonias $ac/erianas= 7on!a
a/encin a los e#ec/os del desarrollo $ac/eriano so$re la san!re=
es7ecial'en/e a<2ellas <2e 7resen/an 7i!'en/o dorado ; <2e
ca2san aclara'ien/o 8Be'olisis9 alrededorE

Actividad hemoltica (beta hemolisina) de
Staphylococcus aureus sobre Agar sangre Columbia.

Los a!ares san!re sin o/ros adi/ivos son
'edios de c2l/ivo n2/ri/ivos de 2so !eneral= ;
7er'i/en el desarrollo de la 'a;or%a de las
$ac/erias <2e no /ienen re<2eri'ien/os
n2/ricionales es7ecialesE So7or/an $i"n el
creci'ien/o de las $ac/erias de la 'icro$io/a
nor'al ; de la !ran 'a;or%a de los 7a/!enos 7ara
el ser B2'anoE Son e6e'7los*

A!ar san!re en $ase Col2'$ia
A!ar san!re en $ase So;a N Tri7/icasa
A!ar san!re en $ase In#2sinE
33


Ati.idad n0<) Aisla'ien/o de $ac/erias a 7ar/ir de '2es/ras '"dicas IIIE
O$6e/ivos* Prac/icar la 'e/odolo!%a de sie'$ra de '2es/ras de de7osiciones
so$re 'edios de c2l/ivo slidosE
O$servar el desarrollo de en/ero$ac/erias ; s2 ac/ividad
'e/a$licaE
Ma/eriales ; '"/odo* To'a de '2es/ras en 'edio de /rans7or/e ; sie'$ra de
de7osiciones so$re A!ar MacCon]e; o A!ar MLD 8Milosa-Lisina-
DesoAicola/o9E

To'a de '2es/ras* Use !2an/esE To'e 2na '2es/ra de de7osiciones con /r2la es/"ril
; l2e!o in/rodH4cala en 2n 'edio de /rans7or/e Car; N +lairE
Sie'$ra* Sie'$re con la /r2la 2n 72n/o 7eri#"rico so$re A!ar MacCon]e; o
A!ar MLDE V2elva la /r2la a s2 envaseE
Pre7are 2na l('ina 7ara el eAa'en direc/o= se!Hn lo descri/o en la
ac/ividad 3E C2ide de no con/a'inarE
Es/erilice 2n asa de sie'$ra 7or incineracinE Es7ere a <2e se
en#r%e ; l2e!o realice la sie'$ra SUAVEMENTE de ac2erdo a la
#i!2ra de la ac/ividad 3E
Iden/i#i<2e con el no'$re del 7acien/e e inc2$e 24 Boras a 3.-
31:CE Des72"s o$serve el desarrollo de colonias ; co'en/eE

C2l/ivo de Escherichia coli so$re A!ar
MacCon]e;E Las colonias se o$servan
rosadas 7or e#ec/o de la #er'en/acin de
la lac/osa con/enida en el 'edio de c2l/ivoE
El Balo de 7reci7i/acin <2e rodea las
colonias se #or'a 7or e#ec/o del 7O (cido
so$re las sales $iliares <2e con/iene la
#r'2laE

35

C2l/ivo de Escherichia coli so$re A!ar MLDE
Las colonias se o$servan a'arillas 7or
e#ec/o de la #er'en/acin de la Milosa=
lac/osa ; sacarosaE El Balo de 7reci7i/acin
oc2rre 7or accin del 7O (cido so$re el
desoAicola/oE
Se o$servan c2a/ro colonias ne!ras=
7rod2c/oras de O
2
S= <2e 72eden
corres7onder Proteus sp.

Salmonella typhimurium so$re A!ar MLDE
Las colonias se o$servan ne!ras 7or la 7rod2ccin de O
2
SE
Las es7ecies de Sal'onella de!radan el a'ino(cido Lisina
8Lisina decar$oAilasa9= 7or lo <2e se 7rod2ce elevacin del
7O ; vira6e Bacia el ro6oE

Los Medios de c2l/ivo A!ar MacCon]e; ; A!ar MLD son selec/ivos
7ara en/ero$ac/erias= 8,ra' ne!a/ivas <2e Ba$i/an en el in/es/ino9
;a <2e s2 co'7osicin con/iene sales $iliares <2e inBi$en el desarrollo
de $ac/erias ,ra' 7osi/ivasE El A!ar MLD /iene 'a;or concen/racin de sales $iliares= 7or lo <2e s2
e#ec/o inBi$idor es 'a;or= ; 7er'i/e 2na 'e6or rec27eracin selec/iva de en/ero7a/!enos co'o
lo son Sal'onella s7E ; SBi!ella s7E

EAis/en '2cBas #r'2las de 'edios de c2l/ivo selec/ivos= la 'a;or%a /iene 7or o$6e/o
#acili/ar la rec27eracin de a!en/es 7a/!enos 7or inBi$icin de la #lora aco'7aFan/e= 7or lo <2e
72eden 2sarse 7ara la sie'$ra 7ri'aria= es decir direc/a'en/e de la '2es/raE
Al!2nos e6e'7los de 'edios selec/ivos son*
A!ar TC+S* c2l/ivo de Vibrio cholerae
A!ar SS* c2l/ivo de Sal'onellas ; SBi!ellas
A!ar TBa;er Mar/in* c2l/ivo de Neisseria gonorrhoeae ; N. meningitidis
A!ar +aird Par]er* c2l/ivo de Staphylococcus aureus
40

Ati.idad n0=) O$servacin 'acrosc7ica de 2n c2l/ivo ; aisla'ien/o de ce7asE
O$6e/ivos* O$servar la 'or#olo!%a colonialE
O$servar los e#ec/os del desarrollo $ac/eriano so$re el 'edio de c2l/ivo
8$io<2%'ica= accin de Be'olisinas9E
A7reciar la diversidad de la 'icro$io/a ; s2s di#erenciasE
Prac/icar el aisla'ien/o a 7ar/ir de 2n c2l/ivo de #ase slida= 'edian/e asaE
Ma/eriales ; '"/odo* Use s2s c2l/ivos de la ac/ividad n:.E
Placas de A!ar san!re 8c2al<2ier #r'2la $ase9
Asas de sie'$raE
+iose!2ridad* Tra$a6a con $ac/erias no iden/i#icadas aisladas de B2'anos= no es/(
descar/ada la 7resencia de 7a/!enos en los c2l/ivosE
No ol#a/ear los c2l/ivosE
Use !2an/es= 'ecBero encendidoE
No eA7on!a los c2l/ivos innecesaria'en/eE

Desarrollo* - O$serve a/en/a'en/e el c2l/ivo ; re!is/re las carac/er%s/icas se!Hn la
/a$la ad62n/aE
- Con 2n l(7i4 'arcador= divida en dos con 2na l%nea cen/ral 2na 7laca de
a!ar san!reE
- En s2 c2l/ivo= eli6a dos colonias di#eren/es <2e le 7are4can in/eresan/esE
- Con el asa es/"ril ; #r%a= /o<2e 2na de ellas ; l2e!o sie'$re 2n sec/or del
a!ar san!reE Es/erilice el asa= en#r%e= ; re7i/a con la o/ra colonia en el o/ro
sec/orE Inc2$ar 24 Boras en/re 3.: ; 31:CE Iden/i#i<2e sie'7re s2s c2l/ivosE

Mor#olo!%a colonial $ac/eriana
4)

La o$servacin de la 'or#olo!%a colonial es
el 7ri'er 7aso orien/a/ivo a la iden/i#icacin de
es7ecies $ac/erianasE

En la 'edida <2e el $ac/erilo!o ad<2iere
eA7eriencia= es/a e/a7a del c2l/ivo le 7er'i/e
/o'ar decisiones res7ec/o de la 'arcBa de
iden/i#icacin= a la ve4 <2e a7reciar las
7ro7orciones en las <2e se desarrollan las
dis/in/as es7ecies= ; la car!a 'icro$iana de la
'2es/raE

La 7resencia de colonias 7i!'en/adas es
orien/a/iva de al!2nos 7a/!enos co'o
Staphylococcus aureus= Pseudomonas
aeruginosas, Serratia rubidea ; el anaero$io
Prevotella melaninogenica.

La accin de las Be'olisinas /a'$i"n es 2n
%ndice de 'ecanis'os de accin 7a/!enaE
M2cBas ce7as de Staphylococcus aureus son $e/a
Be'ol%/icas 8Oe'olisis /o/al9= as% co'o /a'$i"n
Streptococcus pyogenes 8S/re7/ococc2s $e/a
Be'ol%/ico del !r27o +9E

La consis/encia cre'osa nos orien/a Bacia
levad2ras= co'o Candida albicansE Si la colonia
/iene 2na consis/encia '2cosa= con /endencia a
esc2rrir o a #ila'en/ar= 7ode'os es/ar en
7resencia de al!2na $ac/eria ca7s2lada= co'o
Klebsiella pneumoniaeE

Los Bon!os 'iceliados 7rod2cen !randes
colonias #ila'en/osas= con cen/ros 7i!'en/ados de verde= ne!ro o ca#"= de$ido a la 7resencia de
s2s 'ecanis'os de re7rod2ccin aseA2ada 8es7oras #Hn!icas9E Es/a descri7cin es consis/en/e con
es7ecies de los !"neros Penicilli2'= As7er!ill2s o Al/ernaria res7ec/iva'en/eE

MORFOLOGA COLONIAL
ASPECTO DE LA COLONIA COLONIA 1 COLONIA 2

Tamao:
Grande
Mediano
Pequeo

Superficie:
Plana
Planoconvexa
Convexa
Acuminada
Umbilicada
Papilada
Lisa
Rugosa

Forma:
Puntiforme
Circular
Filamentosa
Irregular
Rizoide
Fusiforme
Cerebriforme

Borde:
redondeado (entero)
Ondulado
Lobulado
Espiculado
Filamentoso
Rizoide

Brillo:
Opaco
Brillante

Consistencia:
Hmeda
Seca
Cremosa

Pigmento (Color):
Propio
Difusible

Hemolisinas:
Alfa hemoltica
Beta hemoltica
Gamma hemoltica
42


Ati.idad n0>) O$servacin 'icrosc7ica de c2l/ivosE
O$6e/ivos* Conocer los #2nda'en/os ; 7rac/icar la Tincin de ,ra'E
O$servar la 'or#olo!%a $ac/eriana 'edian/e 'icrosco7%aE
O$servar al/eraciones es/r2c/2rales de las $ac/eriasE
Ma/eriales ; M"/odo* U/ilice los c2l/ivos de la ac/ividad n:0E
Por/ao$6e/os
î/ de Tincin de ,ra'E
Asas de sie'$ra
Placas de a!ar san!re 8c2al<2ier #r'2la9E
Microsco7ioE
+iose!2ridad* Tra$a6a con $ac/erias no iden/i#icadas aisladas de B2'anos= no es/(
descar/ada la 7resencia de 7a/!enos en los c2l/ivosE
No ol#a/ear los c2l/ivosE
Use !2an/es= 'ecBero encendidoE
No eA7on!a los c2l/ivos innecesaria'en/eE

Desarrollo* A 7ar/ir de la $ac/eria seleccionada en la ac/ividad n:0= 7re7are 2na l('ina
7ara /eFir*
- Con 2n asa de sie'$ras /o'e 2na 7e<2eFa !o/a de a!2a des/ilada ; de7os%/ela en
el cen/ro de 2n 7or/ao$6e/osE
- Es/erilice el asa en el 'ecBero ; en#r%elaE
- Con el asa /o<2e 2n 72n/o de la 7eri#eria de 2na colonia ; l2e!o ll"vela al a!2a del
7or/ao$6e/osE Oa!a 2na e'2lsin con 'ovi'ien/os circ2laresE
-
Fi/ai-n) Con el asa eA/ienda la e'2lsin so$re el
7or/ao$6e/os ; s"<2elo 2sando s2ave'en/e el
calor del 'ecBeroE No calien/e en eAceso 7ara
evi/ar daFos en la es/r2c/2ra $ac/erianaE

- Tini-n de Gra() C2$ra la #i6acin con coloran/e cris/al viole/a 7or 00 se!2ndosE
Lave $a6o cBorro de a!2aE
- C2$ra aBora con l2!ol 7or 00 se!2ndosE LaveE
- C2$ra con alcoBol-ace/ona 7or ). se!2ndos= a!i/e s2ave'en/e ; laveE Re7i/a Bas/a
22<2e ;a no sal!a '(s coloran/eE
- C2$ra con sa#ranina 7or 30 se!2ndosE LaveE
- Secar al aireE
43

- O$servar en el 'icrosco7io con a2'en/o de )000ME
- Realice 2n n2evo c2l/ivo so$re a!ar san!re 7ara 'an/ener la $ac/eria <2e
inves/i!a ; c2l/ive 7or 24 Boras a 3.-31:CE Iden/i#i<2e s2 sie'$raE

Eta*a& de la Tini-n de Gra(

La di#erenciacin en/re ,ra' Posi/ivos ; ,ra' Ne!a/ivos oc2rre d2ran/e el /ra/a'ien/o con
alcoBol ace/onaE Los ,ra' Ne!a/ivos 7ierden el co'7le6o cris/al viole/a-l2!ol 8viole/a9 en la
decoloracin ; l2e!o se /iFen con la con/ra/incin de sa#ranina 8ro6o9

Coc(ceas ,ra' 7osi/ivas en Di7lo 8)000M9 Coc(ceas ,ra' 7osi/ivas en cadena 8)000M9
44

O/ras 7osi$les i'(!enes de $ac/erias /eFidas con el '"/odo de CBris/ian ,ra'*

Corynebacterium diphtheriae 8)000M9= $acilo ,ra' 7osi/ivo=
aero$io= in'vil= no ca7s2lado= li!era'en/e c2rvado ; de
#or'a irre!2larE Posee 2na dis7osicin carac/er%s/ica en #or'a
de Ple/ras cBinasQE A!en/e ca2sal de la di#/eria 'edian/e /oAina
liso!"nicaE

Bacillus anthracis en /e6ido es7l"nico 8)000M9E +acilo ,ra'
7osi/ivo aer$ico ; #or'ador de es7oras= ca7s2lado e in'vilE
S2 reservorio na/2ral es el s2elo ; los cad(veres de ani'ales= es
ca7a4 de 7rod2cir /oAinas /an 7o/en/es <2e 72eden 2sarse
co'o ar'a $iol!ica con e#ec/os devas/adoresE

Salmonella entrica serotipo typhimurium o Salmonella
typhimurium 8)000M9= $acilo ,ra' ne!a/ivo de 'e/a$olis'o
#ac2l/a/ivo= en/ero$ac/eria ca2san/e de in#ecciones ali'en/ariasE
La serovar typhi es la res7onsa$le del s%ndro'e conocido co'o
#ie$re /i#o%deaE La 'or#olo!%a de es/e a!en/e 'edian/e la /incin
de ,ra' es indis/in!2i$le de o/ras en/ero$ac/erias co'2nesE

Neisseria meningitidis, Tincin de ,ra' en sedi'en/o de l%<2ido
ce#alorra<2ideo 8)000M9E Se o$serva s2 carac/er%s/ica dis7osicin
en di7lo= en el eA/erior e in/erior de los le2coci/os
7oli'or#on2clearesE
A!en/e e/iol!ico de la 'enin!i/is 'enin!occicaE

Candida albicans o$servada en secrecin va!inal 8)000M9E
Es/a es 2na levad2ra= se re7rod2ce aseA2ada'en/e 'edian/e
;e'acin ; #or'a 7se2do'icelios= es7ecial'en/e c2ando
ad<2iere rol 7a/!enoE A!en/e ca2sal de v2lvova!ini/isE

4.

UNIDAD :
IDENTIFICACION DE $ACTERIAS

FUNDAMENTOS DE ALGUNOS METODOS DE ESTUDIO $IO?UIMICO PARA LA IDENTIFICACION DE
ENTERO$ACTERIAS)
La a7licacin de 7r2e$as $io<2%'icas 'edian/e dis/in/os 'edios de c2l/ivo di#erenciales
nos 7er'i/e o$/ener 2na !ran can/idad de in#or'acin res7ec/o del 'e/a$olis'o $ac/eriano= lo
<2e es 2n re#le6o de la !en"/ica de !"neros ; es7ecies= ; 7or lo /an/o 2na #or'a econ'ica ;
se!2ra de iden/i#icar 2na es7ecie $ac/erianaE
Las co'$inaciones de es/as 7r2e$as se conocen co'o P$a/er%as de 7r2e$as de
iden/i#icacinQ= las <2e se eli!en de ac2erdo al /i7o de $ac/eria en es/2dioE Pode'os conce$ir
$a/er%as de 7r2e$as 7ara iden/i#icar en/ero$ac/erias= $acilos no #er'en/adores= coc(ceas ,ra'
7osi/ivas= en/re o/rasE
Para la ac/ividad n:3= en la <2e se 7re/ende iden/i#icar en/ero$ac/erias= los #2nda'en/os
de las reacciones son los si!2ien/es*
#4 AGAR TSI)
Prini*io* En el A!ar TSI se de/er'ina la ca7acidad de 2n 'icroor!anis'o 7ara
a/acar los Bidra/os de car$ono ,LUCOSA= LACTOSA ;Do SACAROSA 7resen/es en la #r'2la= con
7rod2ccin o no de !ases 8CO
2
9= 62n/o con la 7rod2ccin o no de (cido s2l#B%drico 8O
2
S9E El a!ar
TSI /iene ro6o de #enol co'o indicador de 7O el c2al vira al color a'arillo en 7resencia de acide4 ;
al color ro6o en 7resencia de alcalinidadE El 'edio de c2l/ivo /iene co'o #2en/e de a42#re el
/ios2l#a/o de Na= <2e 72ede ser de!radado 7or las $ac/erias 7rod2c/oras de O
2
SE Co'o indicador
de es/a ac/ividad= el 'edio de c2l/ivo con/iene s2l#a/o de a'onio #erroso el c2al reacciona con el
O
2
S 7rod2ciendo 2n 7reci7i/ado ne!ro e insol2$le de s2l#2ro #errosoE Para <2e se 7rod24ca O
2
S= se
re<2iere de 2n 'edio ne2/ro o alcalino 7or lo <2e dicBa reaccin !eneral'en/e es/( li'i/ada al
#ondo del 'edio= ; se o$serva con $ac/erias <2e no #er'en/an la sacarosa 8Sal'onella9= 7ero <2e
si #er'en/an !l2cosaE Por es/a ra4n= 2n #ondo ne!ro de$e leerse co'o A 8(cido9= a2n<2e el color
a'arillo es/" /a7ado 7or el color ne!roE
Inter*retai-n* Se e#ec/Ha des72"s de )3 a 24 Boras de inc2$acin a 31:CE Se ano/an las
reacciones co'o 2na #raccin de nH'eros* la reaccin oc2rrida en la s27er#icie del 'edio
corres7onde al n2'erador 87ar/e aero$ia9 ; la reaccin oc2rrida en la 7ro#2ndidad del 'edio
corres7onde al deno'inador 87ar/e anaero$ia9E La acide4 se deno'ina con la le/ra A 8color
a'arillo9 ; la alcalinidad con la le/ra ^ 8color ro6o9E
En es/e 'edio de c2l/ivo se 72eden ver las si!2ien/es reacciones $io<2%'icas*
_ ?er'en/acin de la !l2cosa sola'en/e* 8^DA9E
_ ?er'en/acin de !l2cosa= lac/osa ;Do sacaros* 8ADA9
_ No #er'en/acin de los car$oBidra/os* 8^D^9= la $ac/eria no 2/ili4a los Bidra/os de car$ono
'edian/e #er'en/acin= 7rod2ciendo a'inas <2e alcalini4an el #ondo ; la s27er#icie del 'edioE
40

Al!2nas $ac/erias no #er'en/adoras sola'en/e a/acan la 7e7/ona aer$ica'en/e dando
2n TSI ^DN= es decir s27er#icie alcalina ; no Ba; ca'$io en el #ondo del /2$oE

Ade'(s= 7ode'os o$servar
_ Prod2ccin de !as* r27/2ra del 'edio con #or'acin de $2r$26asE
_ Prod2ccin de O
2
S* enne!reci'ien/o de la col2'na del 'edio de c2l/ivoE

De i4<2ierda a derecBa*
)E- TSI ADA= CD8-9* (cido so$re (cido= !as 7osi/ivo ; O
2
S ne!a/ivoE
Es/e 7a/rn de res2l/ados 72ede o$/enerse con Escherichia coli=
Klebsiella pneumoniae= Enterobacter aer!genes= en/re o/rasE

2E- TSI ^DA= 8C9
I
D8-9* alcalino so$re (cido= !as escaso con
inc2$acin 7rolon!ada= O
2
S ne!a/ivoE Pa/rn s2!eren/e de
Shigella sp.

3E- TSI ^DA= 8-9DC* alcalino so$re (cido= !as ne!a/ivo ; O
2
S 7osi/ivo= s2!iere Sal'onella=
7osi$le'en/e Salmonella enteritidisE
4E- TSI ^DN= 8-9D8-9* alcalino so$re ne2/ro= sin 7rod2ccin de !as ni O
2
S= 7a/rn carac/er%s/ico
de al!2nos $acilos no #er'en/adores

co'o Pseudomonas aeruginosa o "cinetobacter ba#manii.

14 AGAR LIA*
Prini*io) En a!ar LIA 8L;sine Iron A!ar9 se de/er'ina la ca7acidad de 2na $ac/eria
7ara a/acar el a'ino(cido lisina 'edian/e descar$oAilacin o desa'inacin= la #er'en/acin de
!l2cosa= la 7rod2ccin o no de !ases 8CO
2
9= 62n/o con la 7rod2ccin o no de (cido s2l#B%drico 8O
2
S9E

Inter*retai-n) Se e#ec/Ha des72"s de )3 a 24 Boras de inc2$acin 843 Boras si es
necesario9 a 31:CE I!2al'en/e se re!is/ran las reacciones co'o en el A!ar TSIE La acide4 se
deno'ina con la le/ra A 8color a'arillo9 ; la alcalinidad con la le/ra ^ 8color 7Hr72ra9E

En es/e 'edio se o$servan las si!2ien/es reacciones $io<2%'icas*
?er'en/acin de la !l2cosa 8^DA9= la $ac/eria no a/aca el a'ino(cido ; solo #er'en/a la
!l2cosaE
Descar$oAilacin de la lisina* 8^D^9
Desa'inacin de la lisina* 8RDA9 se ve co'o ro6oD a'arilloE
Prod2ccin de !as* r27/2ra del 'edioE
Prod2ccin de O
2
S* enne!reci'ien/o del 'edio de c2l/ivoE

El indicador del 7O del 'edio es 7Hr72ra de $ro'ocresol= el c2al en acide4 vira al color
a'arillo ; en alcalinidad al color 7Hr72raE Por con/ener 7e<2eFa can/idad de ,l2cosa 8) !D L9 la
#er'en/acin se o$serva al #ondo del /2$o 8a'arillo9= con la s27er#icie alcalinaE

41

M2cBas $ac/erias 7oseen descar$oAilasas <2e a/acan el a'ino(cido lisina= con #or'acin
de cadaverina de reaccin alcalina ; con 7rod2ccin de CO
2
E Para <2e ac/Hen las descar$oAilasas
se re<2iere 7O (cido= el <2e se o$/iene 7or la #er'en/acin de la !l2cosa 7resen/e en el 'edioE

La desa'inacin de la lisina es 2n 7roceso oAida/ivo <2e se 'ani#ies/a 7or la a7aricin de
color ro6o en el /endido= siendo el #ondo del /2$o a'arillo 7or #er'en/acin de la !l2cosaE Tiene
co'o #2en/e de a42#re el Tios2l#a/o de Na= necesario 7ara <2e las $ac/erias 72edan 7rod2cir O
2
SE
La reaccin oc2rre solo en a'$ien/e (cido ; se o$serva co'o co'o 7rod2ccin de color ne!ro
8s2l#2ro #erroso9= 7or es/a ra4n el #ondo ne!ro i'7lica la 7resencia de (cido 8A9E

LIA ^D^= 8-9D8-9* descar$oAilacin de lisina= sin !as ni
O
2
S= s2!iere Escherichia coli= ^le$siella s7E o
Sal'onella s7E

LIA ^DA= CD8-9* descar$oAilacin ne!a/iva= Ba; !as
7ero no O
2
S= s2!iere Escherichia coli= En/ero$ac/er
o ^le$siellaE SBi!ella s7E no dar%a !asE

RDA= CD8-9* desa'inacin 7osi/iva= con !as sin O
2
S=
es 7redic/ivo de $organella morganii.

^DA= C
I
DC* descar$oAilacin de lisina= Ba; 7rod2ccin de !as ; '2cBo O
2
SE Res2l/ados s2!eren/es
de Sal'onella= Ci/ro$ac/er o EdIardsiellaE

:4 AGAR CITRATO DE SIMMONS)
Prini*io) En el a!ar Ci/ra/o de Si''ons se de/er'ina la ca7acidad de 2n
'icroor!anis'o de e'7lear el ci/ra/o co'o Hnica #2en/e de car$onoE

El 'e/a$olis'o del ci/ra/o es 2na #ase 7revia de los (cidos /ricar$oA%licos
7ara en/rar en el ciclo de ^re$sE Un or!anis'o ca7a4 de 2/ili4ar el ci/ra/o co'o Hnica #2en/e de
car$ono /a'$i"n es ca7a4 de 2/ili4ar las sales de a'onio co'o Hnica #2en/e de ni/r!enoE El
'edio de c2l/ivo con/iene ade'(s sales de a'onio inor!(nicas <2e se desdo$lan en a'oniaco
8NO
4
9 con la consi!2ien/e alcalinidad del 'edioE El indicador de 7O es el a42l de $ro'o/i'ol el c2al
en 7resencia de alcalinidad vira al color a42l indicando <2e la 7r2e$a es POSITIVAE C2ando no Ba;
ca'$io de color ni creci'ien/o $ac/eriano se dice <2e la 7r2e$a es NE,ATIVAE

Inter*retai-n) Se e#ec/Ha des72"s de )3 a 24 Boras de inc2$acin 843 Boras s% es
necesario9 a31:CE Vira6e a a42l con desarrollo* 7osi/ivoE Sin ca'$ios* ne!a/ivoE

43

En/re las en/ero$ac/erias con carac/er%s/ica ci/ra/o 8C9 se
o$servan los si!2ien/es !"neros*
Enterobacter sp= Klebsiella pneumoniae= Serratia
sp= Citrobacter sp. ; al!2nas es7ecies de SalmonellaE

Sin e'$ar!o= Escherichia= Shigella= Salmonella typhi ; son
ci/ra/o ne!a/ivasE

;4 AGAR UREA)
Prini*io) En el a!ar Urea de CBris/ensen se de/er'ina la ca7acidad de 2na $ac/eria
7ara 7rod2cir 2reasa ; de!radar la 2rea= #or'ando dos 'ol"c2las de a'oniacoE La 2reasa es 2na
en4i'a $ac/eriana cons/i/2/iva 8no re<2iere 7resencia de s2s/ra/o 7ara <2e la $ac/eria la
7rod24ca9= 7or lo <2e es 2n eAcelen/e 'arcador !en"/icoE +ac/erias del !"nero Pro/e2s 7rod2cen
!ran can/idad de 2reasa= ^le$siella s7E /a'$i"n es 7rod2c/ora de 2reasa= 7ero en can/idades
'enoresE El 'edio de c2l/ivo con/iene ro6o de #enol co'o indicador de 7O ; 2na 7e<2eFa can/idad
de !l2cosa 7ara 'e6orar la di#erencia en/re el res2l/ado 7osi/ivo ; ne!a/ivoE C2ando 2na $ac/eria
7osee 2reasa el 7O se /orna $(sico 7or e#ec/o del a'onio ; el indicador ca'$ia a ro6oE Si la
reaccin es ne!a/iva= la #er'en/acin de !l2cosa ca'$ia el 7O Bacia (cido ; el color 7asa a
a'arilloE

In/er7re/acin* Se e#ec/Ha des72"s de )3 a 24 Boras de inc2$acin a 31:CE

I4<2ierda* A!ar 2rea de CBris/ensen 7osi/ivo= Proteus vulgaris
Cen/ro* Medio de c2l/ivo sin inoc2larE
DerecBa* A!ar 2rea de CBris/ensen ne!a/ivo= Escherichia coli

La accin de la 2reasa en los Pro/e2s 72ede alcalini4ar
r(7ida'en/e el 'edio de c2l/ivo= en /an/o <2e con ^le$siellas los
res2l/ados 7osi/ivos 72eden o$servarse /ras 24 a 43 Boras de
inc2$acinE

Reaccin de la 2reasa*

CÒ8NO
2
9
2
C O
C
C 2O
2
O OCO
3
-
C 2NO
4
C

45

<4 MEDIO M3I3O*

Prini*io) En Medio MIO 8Mo/ilidad= Indol= Orni/ina9 se de/er'ina la 'o/ilidad de 2n
'icror!anis'o 87resencia de #la!elos9= la ca7acidad de 7rod2cir indol a 7ar/ir de /ri7/o#ano ; la
ca7acidad de de!radar la orni/ina 8orni/ina decar$oAilasa9E

Inter*retai-n) Se e#ec/Ha des72"s de )3 a 24 Boras de inc2$acin a 31:CE

La 7ri'era carac/er%s/ica a o$servar es la 'o/ilidad $ac/eriana= la <2e se
a7recia o$servando desarrollo $ac/eriano 8/2r$ide49 #2era de la l%nea de inoc2lacin= 72diendo
oc27ar la /o/alidad del 'edio de c2l/ivoE Si la 'o/ilidad es ne!a/iva= el desarrollo $ac/eriano se
o$serva solo en la l%nea de inoc2lacinE Para lo!rar es/a o$servacin= el 'edio de c2l/ivo es
se'islidoE

La se!2nda carac/er%s/ica o$serva$le es la decar$oAilacin de la orni/ina=
en la <2e el a'ino(cido 7ierde el !r27o car$oAilo 7or accin de la orni/ina decar$oAilasa ; se
/rans#or'a en 2n co'72es/o alcalino* la 72/rescinaE Co'o consec2encia el 'edio se alcalini4a= ; el
indicador 7Hr72ra de $ro'ocresol ca'$ia Bacia 7Hr72raE La reaccin es si'ilar a la
decar$oAilacin de la lisina en el 'edio LIA*

El 'edio MIO 7osee 2na 7e<2eFa can/idad de !l2cosa #er'en/a$le= 7ara
dis/in!2ir los res2l/ados ne!a/ivos de los 7osi/ivosE C2ando las $ac/erias no son 7rod2c/oras de
orni/ina decar$oAilasa= la #er'en/acin de !l2cosa 7rod2ce (cido ; el indicador ca'$ia a a'arilloE

La /ercera carac/er%s/ica o$serva$le 'edian/e el Medio MIO es la
#or'acin de indol a 7ar/ir del a'ino(cido Tri7/o#ano 7resen/e en !randes can/idades en la
7e7/ona /ri7/e%naE El /ri7/#ano es de!radado en 2na cadena de reacciones donde 7ar/ici7a la
en4i'a /ri7/o#anasa= donde 7ierde el !r27o a'ino 7rod2ciendo #inal'en/e indol= (cido 7irHvico ;
a'onioE

.0

El indol es reconocido a!re!ando !o/as de Reac/ivo de ôvacs= con la
#or'acin de 2n anillo de color ro6o so$re el 'edio de c2l/ivoE El indol se eA/rae con $2/anol o
alcoBol a'%lico ; l2e!o reacciona con el co'7onen/e 7-di'e/ila'ino $en4aldeB%do 7ara ori!inar
rosindol 8ro6o9 en 'edio #2er/e'en/e (cido*

+ac/erias Indol 7osi/ivas* Escherichia coli, Proteus vulgaris.
+ac/erias Indol ne!a/ivas* Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis.

EAis/e 2na !ran variedad de 7r2e$as <2e 72eden ser de 2/ilidad en la iden/i#icacin de
en/ero$ac/eriasE Median/e #er'en/acin de car$oBidra/os es7ec%#icos es 7osi$le dis/in!2ir en/re
'ie'$ros de 2n 'is'o !"nero= la 7rod2ccin de 'e/a$oli/os /er'inales co'o ace/il'e/ilcar$inol
7er'i/e carac/eri4ar !r27os $ac/erianos= ; la 7r2e$a de oAidasa nos 7er'i/e di#erenciar en/re
$ac/erias #er'en/adoras 2 oAida/ivas de los car$oBidra/osE

.)

FUNDAMENTOS DE ALGUNOS METODOS DE ESTUDIO PARA LA IDENTIFICACION DE COC@CEAS
GRAM POSITI6AS AERO$IAS)

A&*eto& taAon-(io& !enerale&)

EAis/e 2na !ran variedad de $ac/erias coc(ceas ,ra' 7osi/ivas= 7or lo <2e s2 clasi#icacin
/aAon'ica res2l/a co'7le6aE En !eneral= /ra/a'os de ordenar es/e con62n/o de $ac/erias de
ac2erdo a s2 'e/a$olis'o 8aer$ico= #ac2l/a/ivo o anaero$io es/ric/o9= a s2 dis7osicin
carac/er%s/ica 8!r27os= cadenas= 7ares= c2$os9 ; 'edian/e al!2nas carac/er%s/icas #eno/%7icas de
i'7or/ancia 8ca/alasa= Be'olisinas9E Varios !"neros de es/as $ac/erias 7er/enecen al PB;l2'
?ir'ic2/es= <2e en!lo$a a '2cBas de las $ac/erias ,ra' 7osi/ivasE Los #ir'ic2/es 72eden
7er/enecer a /res clases= ; si/2a'os a las coc(ceas ,ra' 7osi/ivas en la clase +acilliE No o$s/an/e lo
an/erior= 7ode'os encon/rar coc(ceas ,ra' 7osi/ivas en o/ros PB;l2' 8Ac/ino$ac/eria9E

El rden /aAon'ico de los !"neros '(s re7resen/a/ivos es en/onces*

Do'inio* +ac/eria
PB;l2'* ?ir'ic2/es
Clase* +acilli
Orden +acillales*
?a'ilia S/a7B;lococcaceae* ,"nero S/a7B;lococc2s
Orden Lac/o$acillales*
?a'ilia S/re7/ococcaceae* ,"nero S/re7/ococc2s
?a'ilia En/erococcaceae* ,"nero En/erococc2s

El !"nero S/a7B;lococc2s con/iene varias es7ecies= en/re las c2ales des/acan S. aureus= S.
epidermidis, S. saprophyticus y S. lugdunensis 7or Ba$er re7or/ado 7ar/ici7acin en casos cl%nicosE
O/ras es7ecies de es/e !"nero 7odr%a a7arecer co'o 7a/!enos e'er!en/esE

Las #a'ilias S/re7/ococcaceae ; En/erococcaceae es/(n es/recBa'en/e relacionadas= en
ellas se enc2en/ran 7a/!enos de reconocida i'7or/ancia ; o/ras es7ecies <2e #or'an 7ar/e de
n2es/ra 'icro$io/a= al!2nas de las c2ales ad<2ieren rol 7a/!eno co'o o7or/2nis/as o en #2ncin
de s2 carac/er%s/ica !en"/ica 8ce7a 7a/!ena9E

Pode'os ca/e!ori4ar al !"nero S/re7/ococc2s 7or s2 ac/ividad Be'ol%/ica en al#a= $e/a o
!a''a Be'ol%/icosE Es/as carac/er%s/icas 72eden o$servarse en varios !r27os a#ines de
S/re7/ococc2sE Es i'7or/an/e des/acar <2e el /i7o de ac/ividad Be'ol%/ica no es 7riva/ivo de
al!2no de los !r27os de Lance#ield= de/er'inados se!Hn la res72es/a in'2ne #ren/e al 7olisac(rido
ca7s2lar= 7or lo <2e 7ode'os o$servar la eAis/encia de es7ecies de S/re7/ococc2s al#a Be'ol%/icos
7er/enecien/es al !r27o A ; S/re7/ococc2s $e/a Be'ol%/icos /a'$i"n 7er/enecien/es al !r27o A de
Lance#ield= ; o/ras asociaciones Be'lisisD7olisac(rido ca7s2larE

.2

)E- Stre*toou& al%a Be(ol"tio& 8Be'lisis viridans o inco'7le/a9= !r27o Be/ero!"neo <2e
Ba$i/a nor'al'en/e en la oro#ar%n!e ; 72ede ad<2irir rol 7a/!eno o7or/2nis/a= incl2;e varios
s2$!r27osE

,r27o 'i/is* asociado a endocardi/is ; caries den/ales= e&*eie& de i(*ortania l"nia*
Streptococcus mitis
Streptococcus oligo%ermentans
Streptococcus oralis
Streptococcus gordoni
Streptococcus cristatus
Streptococcus in%antis
Streptococcus peroris
Streptococcus australis
Streptococcus pneumoniae

,r27o an!inos2s* asociados a a$scesos s2$c2/(neos ; de r!anos= in#ecciones del /rac/o
2ro!eni/al ; res7ira/orio= e&*eie& de i(*ortania l"nia)
Streptococcus anginosus* in#ecciones 2ro!eni/ales= a$scesos de /e6idos $landos=
a$do'inales= c2ello ; ca$e4aE
Streptococcus constellatus ssp. constellatus
Streptococcus constellatus ssp. pharingis * in#ecciones res7ira/orias
Streptococcus intermedius * asociado a a$scesos cere$rales ; Be7(/icosE
Al!2nas es7ecies del !r27o an!inos2s 72eden eABi$ir Be'olisis al#a o $e/a= incl2so ce7as no
Be'ol%/icasE Al!2nas es7ecies 7er/enecien/es a es/e !r27o se deno'inan in#or'al'en/e co'o
PStreptococcus milleriQ= no'inacin <2e 72ede o$servarse a veces en li/era/2ra '"dica= 7ero no
corres7onde a 2na es7ecie de'os/radaE

,r27o '2/ans* asociados a caries den/ales ; endocardi/is= e&*eie& de i(*ortania
l"nia)
Streptococcus mutans* 7rinci7al a!en/e de la 7laca $ac/eriana den/al= asociado a
endocardi/is= $ac/ere'ia ; caries den/alE
Streptococcus sobrinus* a!en/e sec2ndario de caries den/alesE
Streptococcus criceti
Streptococcus ratti
Streptococcus do#nei
Streptococcus macacae
Streptococcus %erus

,r27o salivari2s* asociado a caries den/ales ; endocardi/is= e&*eie& i(*ortante&)
Streptococcus salivarius* $ac/ere'ia= endocardi/is= 'enin!i/is
Streptococcsu vestibularis
Streptococcus termophylus
Streptococcus hyointestinalis

.3

,r27o $ovis* a!en/es de endocardi/is ; de in#eccin del /rac/o $iliar ; 2rinario= asociado a
c(ncer de colon*
Streptococcus infantarius ssp. infantarius
Streptococcus in%antarius ssp. coli
Streptococcus alactolyticus
Streptococcus equinus/bovis* c(ncer de colon
Streptococcus gallolyticus ssp. gallolyticus* c(ncer !as/roin/es/inal
Streptococcus gallolyticus ssp. pasteurianus* 'enin!i/is
Streptococcus gallolyticus ssp. $acedonicus

,r27o san!2isDsan!2inis* aislados de casos de $ac/ere'ia*
Streptococcus sanguis= $io/i7os )= 2 ; 3
Streptococcus parasanguis
Streptococcus gordonii
Streptococcus sinensis

2E- Stre*toou& beta Be(ol"tio& 8Be'olisis co'7le/a9= co'7rende el ,r27o Pio!"nico ; en
,r27o No Pio!"nicoE Se des/acan las es7ecies de in/er"s '"dico

,r27o 7io!"nico* con/iene es7ecies 7a/!enas 7ri'arias= se o$servan invol2crados en 2na
!ran variedad de casos cl%nicos*
Streptococcus pyogenes 5beta Be(ol"tio !ru*o A7
Streptococcus agalactiae 5beta Be(ol"tio !ru*o $7
Streptococcus e&ui ssp. E&ui
Streptococcus e&ui ssp. 'ooepidermicus
Streptococcus dysgalactiae ssp. (ysgalactiae
Streptococcus dysgalactiae ssp. Equisimilis 5beta Be(ol"tio !ru*o& AC CC G7
Streptococcus canis
Streptococus iniae
Streptococcus porcinus
Streptococcus phoaceae
Streptococcus didelphis
Streptococcus urinalis

,r27o No Pio!"nico* s2s es7ecies #or'an colonias 7e<2eFas= 72eden 7oseer
car$oBidra/os de 7ared de los !r27os A= C= ,= ?E Se o$servan ocasional'en/e invol2crados
en a$scesos= in#ecciones del SNC= in#ecciones 72l'onares ; $ac/ere'iasE
Streptococcus anginosus 5e*a& Be(ol"tia& !ru*o& AC CC GC F7
Streptococcus constellatus 5e*a& Be(ol"tia& !ru*o& AC CC F7
Streptococcus intermedius 5e*a& Be(ol"tia& !ru*o F7

P2edes revisar 2n caso cl%nico en* B//7*DDIIIEscieloEclDscieloE7B7V7id`S01)0-)0)320040003000)5ascri7/`sciJar//eA/ E PE'7ie'a
7le2ral 7or Streptococcus !r27o anginosus en 2n 7reescolar ; revisin de la li/era/2raQ Paola Pidal ME= Kaviera +asa2re OE= Priscilla Prado
DE ; Pedro Alarcn LE Oos7i/al Padre Al$er/o O2r/ado* Unidad de La$ora/orio Cl%nico 8PPM= PAL9= Unidad de ,es/in Cl%nica del NiFo
8K+O= PPD9E Rev CBil In#ec/ 2004Y 2) 839* 243-2.3E
.4

Prueba de la Catala&aC *ri(era eta*a en la (arBa de identi%iai-n)
La en4i'a ca/alasa es 2na en4i'a '2; co'Hn en/re los or!anis'os vivos= /iene 7or
#2ncin /rans#or'ar el 7erAido de Bidr!eno en a!2a ; oA%!eno*

1 D
1
O
1
1 D
1
O E O
1

El 7erAido de O es 2n 7rod2c/o resid2al del 'e/a$olis'o cel2lar= es7ecial'en/e en
or!anis'os aero$ios o #ac2l/a/ivosE La ac2'2lacin de 7erAido 72ede 7rovocar 2n es/ado cel2lar
oAida/ivo= lo <2e dis'in2;e la e#iciencia en los 'ecanis'os de /rans7or/e de elec/ronesE La
7resencia de ca/alasa en las $ac/erias es/( %n/i'a'en/e li!ada con las reacciones 'e/a$licas <2e
de/er'inan la condicin aer$ica o anaer$icaE Pode'os o$servar ac/ividad de ca/alasa en
'2cBos /i7os de $ac/eriasE

La de/er'inacin de es/a en4i'a ade'(s de la o$servacin de la dis7osicin de las c"l2las
$ac/erianas es el 7ri'er 7aso en la 'arcBa de iden/i#icacin*

Co+ea& Gra( *o&iti.a&
5aerobiaC (iroaer-%ilaC o anaerobia %aultati.a7

Catala&a 5E7 Catala&a 547

GFnero& Sta*B'loou& Stre*toou&
Miroou& Enteroou&
Otro& !Fnero& Otro& !Fnero&

Ac/ividad de Ca/alasa ; Ci/ocro'o oAidasa asociada al
/i7o de dis7osicin cel2lar

GFnero OAida&a Catala&a Di&*o&ii-n
S/a7B;lococc2s E E !r27os
Micrococc2s E E !r27os
S/o'a/ococc2s E 4 !r27os
S/re7/ococc2s 4 4 Cadenas
,lo$ica/ella 4 4 Cadenas
En/erococc2s 4 4 Cadenas
Lac/ococc2s 4 4 Cadenas
Va!ococc2s 4 4 Cadenas
Le2conos/oc 4 4 Cadenas
Aerococc2s 4 E
G
Pares o /"/radas
Alloicocc2s 4 E
G
Pares o /"/radas
,e'ella 4 4 Pares o /"/radas
Pediococc2s 4 4 Pares o /"/radas
Te/ra!enococc2s 4 4 Pares o /"/radas
Oelcococc2s 4 4 Pares o /"/radas
C* reac/ion 7osi/iva= -* reaccin ne!a/iva= C
I
* reaccin d"$ilE
CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, Oct. 1995, p. 479495 Vol. 8, No. 4
0893-8512/95/$04.0010 Copyright q 1995, American Society for Microbiology
..

La reaccin de la ca/alasa= se!Hn se descri$e en la ac/ividad de la$ora/orio n: 5 87a!E .39 se
o$serva co'o 2na e#ervescencia #2er/e= ; 7er'i/e di#erenciar clara'en/e los !"neros
S/a7B;lococc2s ; Micrococc2s de las o/ras coc(ceas ,ra' 7osi/ivasE Los !"neros Aerococc2s ;
Alloicocc2s /ienen 2na dis7osicin cel2lar di#eren/e ; dan 2na reaccin d"$il= 'edian/e la accin
de 2na en4i'a 7eroAidasa <2e 72ede ac/2ar so$re el 7erAido de O= ade'(s es/os !"neros no
con/ienen en4i'as de ci/ocro'oE Todos los !"neros de coc(ceas ,ra' 7osi/ivas con dis7osicin en
cadena no dan reaccin de ca/alasaE

Identi%iai-n de Co+ea& Gra( *o&iti.a& aerobia& o %aultati.a&C on atala&a ne!ati.a

Si la reaccin de ca/alasa es ne!a/iva= es i'7rescindi$le o$servar la dis7osicin cel2lar
'edian/e 2na /incin de ,ra'= reali4ada a 7ar/ir de 2n c2l/ivo en #ase l%<2ida 8Caldo Tio!licola/o=
7or e6e'7lo9E Las $ac/erias con dis7osicin en cadenas 72eden clasi#icarse de ac2erdo al 7a/rn
Be'ol%/ico 7ara decidir en $ase a es/e las 7r2e$as de con#ir'acinE Es i'7or/an/e recordar <2e
es/a es/ra/e!ia de es/2dio si $ien es 7r(c/ica ; r(7ida= 72ede ser ineAac/a es7ecial'en/e en
a<2ellas es7ecies con ce7as de dis/in/o co'7or/a'ien/o Be'ol%/ico= co'o los S/re7/ococc2s del
!r27o an!inos2sE

La 'arcBa de iden/i#icacin con res7ec/o al 7a/rn Be'ol%/ico ; de dis7osicin es*

Coc(ceas ,ra' 8C9= ca/alasa 8-9= en 7ares o cadenas

Al#a Be'ol%/icas $e/a Be'ol%/icas !a''a Be'ol%/icas

Pares Cadenas +aci/racina 8C9 +aci/racina 8-9 +ilis esc2lina 8-9 +ilis esc2lina 8C9

Reaccin de Streptococcus Tes/ de Ca'7 Otra& e&*eie& de
U2ell2n! 8C9 +ilis esc2lina +ilis esc2lina pyogenes Stre*toou&
S2sce7/i$ilidad a 8-9 8C9
O7/o<2ina 8C9 8C9 8-9
Sol2$ilidad en Streptococcus Otra& e&*eie& de
+ilis 8C9 Otra& e&*eie& de ,r27o D 8-9 ,r27o D 8C9 agalactiae Stre*toou& beta Be(ol"tio&
Stre*toou& .iridan&
Otro& !Fnero&
NaCl 0E.R 8-9 NaCl 0E.R 8C9 ,r27o D 8C9 ,r27o D 8-9

Streptococcus pneumoniae
Stre*toou& Enteroou& &*3
E2ui&Hbo.i&
5Gru*o D no enterooo7 NaCl 0E.R 8-9

.0

Prueba& de identi%iai-n *ara Streptococcus pneumoniae)

S/re7/ococc2s 7ne2'oniae es 2na es7ecie anaero$ia
#ac2l/a/iva= ca7n#ila 8crece en a/'s#era con 3 a )0R de CO
2
9=
!en"/ica'en/e relacionada con el !r27o 'i/is de los S/re7/ococc2s
viridansE S2s colonias son 7e<2eFas 8) a 3 ''9= '2cosas= con cen/ro
de7ri'ido 82'$ilicadas9 7or e#ec/o de la a2/olisis= no 7i!'en/adas ;
de reaccin al#a Be'ol%/icaE S2s c"l2las son ca7s2ladas= de 0E. a )E2 ['=
dis72es/as en 7ares ; de #or'a oval lanceoladaE

Las 7r2e$as de iden/i#icacin son sencillas ; se!2ras*

Sol2$ilidad en $ilis* Los Streptococcus pneumoniae se lisan en 2na sol2cin de
desoAicola/o de Na al )0RE La 7r2e$a de$e Bacerse con/ra 2n con/rol ne!a/ivoE

S2sce7/i$ilidad a la O7/o<2ina 8clorBidra/o de e/ilBidroc27re%na= disco de .[!9*
Streptococcus pneumoniae no /olera la o7/o<2ina= ;a <2e
s2s 'e'$ranas cel2lares son sensi$les al co'72es/oE
La 7r2e$a se reali4a 'edian/e la sie'$ra de 2na s2s7ensin
de $ac/erias en caldo M2eller Oin/on ; l2e!o sie'$ra so$re
a!ar san!reE Si la 4ona de inBi$icin es a;or a )4 ''= la
7r2e$a es 7osi/ivaE
Al!2nos inves/i!adores re7or/an Bas/a 2n 4R de ce7as con
resis/encia a la o7/o<2inaE

Reaccin de U2ell2n!* Al /ra/ar las ce7as de Streptococcus
pneumoniae con an/is2eros es7ec%#icos= se 72ede o$servar
'edian/e 'icrosco7%a 2n en!rosa'ien/o de la c(7s2laE

.1

Identi%iai-n de Stre*toou& .iridan&)

Descar/ando la 7resencia de S/re7/ococc2s 7ne2'oniae= res2l/a convenien/e aBora
inves/i!ar si es/a'os #ren/e a 2na es7ecie del co'7le6o Streptococcus e&uis)bovis= an/es de
a$ordar la iden/i#icacin de los o/ros S/re7/ococc2s al#a Be'ol%/icos*

.3

.5

00

Ati.idad n0I) Iden/i#icacin de +acilos ,ra' ne!a/ivos
O$6e/ivos* Conocer los #2nda'en/os 'e/odol!icos de la iden/i#icacin de
en/ero$ac/eriasE
Reconocer 'edios de c2l/ivo di#erenciales ; 7rac/icar sie'$ra en ellosE
Prac/icar la iden/i#icacin $ac/eriana 'edian/e 7r2e$as $io<2%'icasE
Ma/eriales ; '"/odo* Los al2'nos dis7ondr(n de /res en/ero$ac/erias inc!ni/as 7ara reali4ar la
iden/i#icacinE Cada !r27o de cinco al2'nos /ra$a6a con 2na ce7aE
Medios de c2l/ivo di#erenciales*
- A!ar TSI 8A!ar Oierro ; /res a4Hcares9
- A!ar Ci/ra/o de Si''ons
- A!ar LIA 8A!ar Oierro ; Lisina9
- Medio MIO 8Medio de Mo/ilidad= Indol ; Orni/ina9
- A!ar Urea de CBris/ensenE
+iose!2ridad* Tra$a6a con $ac/erias inc!ni/asE P2eden incl2irse en/ero$ac/erias
7a/!enas o de in#eccin o7or/2nis/aE
Use !2an/esE MecBero encendidoE
No ol#a/ee ni eA7on!a innecesaria'en/e los c2l/ivosE No co'aE
En caso de derra'e o con/ac/o avise al 7ro#esorE No ac/He 7or inicia/iva
7ro7iaE
L(vese las 'anos an/es de de6ar el la$ora/orioE

Desarrollo* - Pre7are en 2na !radilla 2na serie con los 'edios de c2l/ivo ci/ados
8$a/er%a de iden/i#icacin9 en el 'is'o orden de sec2enciaE Iden/i#i<2e el
7ri'er /2$o con el n: del inc!ni/o ; s2 !r27o de /ra$a6oE
- Es/erilice el asa de sie'$ra ; en#r%elaE
- To'e 2na 7e<2eFa 7orcin de c2l/ivo ; realice la sie'$ra de /2$os de la
si!2ien/e #or'a 872ede recar!ar el asa en/re /2$o ; /2$o9*
- A!ar TSI* se'$rar en es/r%a de s27er#icie ; 7icada 7ro#2ndaE
- A!ar Ci/ra/o* se'$rar en es/r%a de s27er#icieE
- A!ar LIA* se'$rar en es/r%a de s27er#icie ; 7icada 7ro#2ndaE
?i!E2E)2E
- Medio MIO* se'$rar en 7icada ver/ical cen/ral ; 7ro#2nda= sin
des7la4a'ien/os la/eralesE ?i!E2E))
- A!ar Urea* se'$rar en es/r%a de s27er#icieE

- C2l/ivar d2ran/e 24 Boras a 3.: a 31:CE L2e!o reali4ar la lec/2ra e
in/er7re/acin de res2l/ados 'edian/e la /a$la ad62n/a en la 7(!ina .)E

- Para la in/er7re/acin de cada /2$o de 7r2e$as $io<2%'icas 2/ilice la
7a2/a de #2nda'en/os <2e se incl2;en en la 7(!ina 4. a .0E

0)

Ta$la de Iden/i#icacin de $ac/erias
82so res/rin!ido a ac/ividad de docencia9

Res2l/ados de las 7r2e$as*
C * Posi/ivo en '(s del 50R de los casosE
8-9* Posi/ivo en 'enos del )0R de los casosE
V* Res2l/ados varia$les= 7osi/ivos en/re el )0R ; 50R de los casosE

La 7resen/e /a$la de iden/i#icacin /iene co'o o$6e/o e6e'7li#icar el 2so co'$inado de la
in#or'acin o$/enida 'edian/e 7r2e$as $io<2%'icas de iden/i#icacin $ac/eriana= no de$e a7licarse co'o
7a2/a de /ra$a6o en 'icro$iolo!%a cl%nica 7or<2e con/iene in#or'acin res/rin!idaE

02

Ati.idad n0J) De/er'inacin de Ca/alasaE
O$6e/ivos* Valorar la 7r2e$a de ca/alasa 7ara di#erenciar !randes !r27os $ac/erianosE
Prac/icar la iden/i#icacin de $ac/erias de ac2erdo a la ca/alasaE
Ma/eriales ; '"/odo* Los al2'nos dis7ondr(n de /res $ac/erias inc!ni/as s2 iden/i#icacinE
Cada !r27o de cinco al2'nos /ra$a6a con 2na ce7a 8no in/erca'$iar9E
L('inas 7or/ao$6e/os
Asas de sie'$ra
A!ar san!re
Sol2cin de 7erAido de Bidr!eno al 20R 8A!2a oAi!enada9
+iose!2ridad* Tra$a6a con $ac/erias inc!ni/asE P2eden incl2irse $ac/erias 7a/!enas o
de in#eccin o7or/2nis/aE
7ro7iaE
Descar/e el 'a/erial con/a'inado en sol2cin de Bi7oclori/oE
Desarrollo* - Pre7are 2na serie de /res 7or/ao$6e/os li'7ios con 2na !o/a de 7erAido
de Bidr!eno en el cen/roE
- Colo<2e el asa en el 7erAido ; o$serve si Ba; des7rendi'ien/o de !asE
- To'e 2na 7e<2eFa 7orcin de a!ar san!re sin c2l/ivar ; realice la 'is'a
o7eracin en o/ro 7or/ao$6e/osE TOa; des7rendi'ien/o de !asV
- Es/erilice el asa ; en#r%elaE To'e 2na 7e<2eFa can/idad de c2l/ivo ;
re7i/a en el /ercer 7or/ao$6e/osE Re!is/re los res2l/adosE Descar/e en
sol2cin de Bi7oclori/oE
- Ca/alasa ne!a/ivo* sin ca'$iosE Ca/alasa 7osi/ivo* e'isin de $2r$26asE

Si la $ac/eria da ca/alasa 7osi/ivo= con/inHe en la ac/ividad )0E
Si la $ac/eria da ca/alasa ne!a/ivo= con/inHe en la ac/ividad ))E

03

Ati.idad n0#K) Iden/i#icacin de Coc(ceas ,ra' 7osi/ivas ca/alasa 7osi/ivasE
O$6e/ivos* Conocer los #2nda'en/os 'e/odol!icos de la iden/i#icacin de Coc(ceas
,ra' 7osi/ivas aero$iasE
Reconocer 'edios de c2l/ivo selec/ivos ; di#erenciales ; 7rac/icar sie'$ra
en ellosE
Ma/eriales ; '"/odo* Los al2'nos dis7ondr(n de 2na $ac/eria inc!ni/a 7ara s2 iden/i#icacinE
Cada !r27o de cinco al2'nos /ra$a6a con 2na ce7aE
- A!ar Mani/ol sal
- A!ar DNAsa
- A!ar Tel2ri/o de ^
- A!ar san!re de cordero

7ro7iaE

Desarrollo* - Iden/i#i<2e los 'a/eriales con el n: del inc!ni/o ; s2 !r27o de /ra$a6oE
- To'e 2na 7e<2eFa 7orcin de c2l/ivo ; realice la sie'$ra en cada 'edio
de c2l/ivo de la si!2ien/e #or'a 872ede recar!ar el asa en/re cada 'edio9*
- A!ar Mani/ol sal* se'$rar en es/r%a de s27er#icieE -
- A!ar DNAsa* se'$rar en es/r%a de s27er#icieE 8a$2ndan/e9
- A!ar Tel2ri/o de ^* se'$rar en es/r%a de s27er#icie
- A!ar san!re* se'$rar en s27er#icie= 7oco inc2loE

in/er7re/acin de res2l/ados 'edian/e la /a$la ad62n/aE

- Para la in/er7re/acin de cada /2$o de 7r2e$as $io<2%'icas 2/ilice la
7a2/a de #2nda'en/os <2e se incl2;en en la 7(!ina

04

Ati.idad n0##) Iden/i#icacin de Coc(ceas ,ra' 7osi/ivas ca/alasa ne!a/ivasE
O$6e/ivos* Conocer los #2nda'en/os 'e/odol!icos de la iden/i#icacin de Coc(ceas
,ra' 7osi/ivas aero$iasE
Reconocer 'edios de c2l/ivo selec/ivos ; di#erenciales ; 7rac/icar sie'$ra
en ellosE
Ma/eriales ; '"/odo* Los al2'nos dis7ondr(n de dos $ac/erias inc!ni/as 7ara s2 iden/i#icacinE
Cada !r27o de cinco al2'nos /ra$a6a con 2na ce7aE No in/erca'$iar
- A!ar Sal
- A!ar +ilis esc2lina
- A!ar Tel2ri/o de ^
- A!ar san!re de cordero

7ro7iaE

Desarrollo* - Iden/i#i<2e los 'a/eriales con el n: del inc!ni/o ; s2 !r27o de /ra$a6oE
- To'e 2na 7e<2eFa 7orcin de c2l/ivo ; realice la sie'$ra en cada 'edio
de c2l/ivo de la si!2ien/e #or'a 872ede recar!ar el asa en/re cada 'edio9*
- A!ar sal* se'$rar en es/r%aE
- A!ar +ilis esc2lina* se'$rar en es/r%aE
- A!ar Tel2ri/o de ^* se'$rar en es/r%aE
- A!ar san!re* se'$rar en s27er#icie= 7oco inc2loE

in/er7re/acin de res2l/ados 'edian/e la /a$la ad62n/a en la 7(!ina

0.

UNIDAD ;
PRUE$AS DE SUSCEPTI$ILIDAD A LOS ANTIMICRO$IANOS

El 2so de diversos a!en/es <2%'icos 7ara la 7revencin ; el /ra/a'ien/o de 7ersonas
a#ec/adas 7or a!en/es in#ecciosos= $asado en #2nda'en/os cien/%#icos= co'ien4a a 'ediados del
si!lo MIME En esa "7oca las reco'endaciones de I!nacio Se''elIeis 8lavado de 'anos con clor2ro
de Ca9= ; de Kose7B Lis/er en )30. 82so del #enol 7ara la an/ise7sia ; desin#eccin9 son e6e'7los
re7resen/a/ivos de la 2/ilidad de es/as 7r(c/icasE Es/e conoci'ien/o inci7ien/e dio 2n sal/o de
e#ec/os insos7ecBados con el desc2$ri'ien/o de la 7enicilina 7or AleAander ?le'in! en )523= ; la
7rod2ccin ; 72ri#icacin de es/a s2s/ancia 7or Nor'an Oea/le;= Erns/ CBain ; OoIard ?lore;
en/re )535 ; )54)E A 7ar/ir de es/e 'o'en/o Bis/rico= a los an/i'icro$ianos de ori!en <2%'ico
ar/i#icial 8<2i'io/er(7icos9= se s2'an s2s/ancias de ori!en na/2ral* los an/i$i/icosE

Una ve4 co'7ro$ada la e#icacia de es/as n2evas s2s/ancias en el /ra/a'ien/o de
en#er'edades in#ecciosas= se Bi4o ade'(s eviden/e el #racaso en '2cBos casosE La necesidad de
en/ender el #allo en el 2so de es/as s2s/ancias de/er'in in/ensas inves/i!aciones en la
co'7rensin de la es/r2c/2ra $ac/eriana= los si/ios diana donde se veri#ica la accin de los
an/i'icro$ianos ; los 'ecanis'os de resis/encia desarrollados 7or los 'icror!anis'osE Es/as
l%neas de inves/i!acin Ban de/er'inado en la ac/2alidad 2n 2so '(s racional ; res7onsa$le de los
an/i'icro$ianos= as7ec/o #2nda'en/al 7ara ase!2rar el "Ai/o de la /era7ia= evi/ar las
co'7licaciones ; dis'in2ir el /ie'7o de Bos7i/ali4acinE En es/e 'arco de accin= se incl2;en las
7r2e$as de s2sce7/i$ilidad a los an/i'icro$ianosE

A&*eto& !enerale&)

Los '"/odos de de/er'inacin de la s2sce7/i$ilidad a los an/i'icro$ianos son 7r2e$as
reali4adas in vi/ro $a6o condiciones es/andari4adas= ; /ienen co'o 7ro7si/o #2nda'en/al
de/er'inar la condicin de s2sce7/i$le o resis/en/e de 2n 'icror!anis'o aislado= #ren/e a 2na
de/er'inada s2s/ancia de 2/ilidad /era7"2/icaE Es/e /i7o de 7r2e$as se reali4a #ren/e a $ac/erias
<2e no /ienen s2sce7/i$ilidad 7redeci$le= con el o$6e/o de ase!2rar el "Ai/o del /ra/a'ien/oE Para
es/e 7ro7si/o eAis/en varios '"/odos= <2e se eA7lican a con/in2acin*

M"/odo 7or di#2sin en a!ar 8an/i$io!ra'a9*

Es el '"/odo '(s 2/ili4ado= es rela/iva'en/e econ'ico ; de #(cil es/andari4acin= 2sado
#ren/e a los a!en/es in#ecciosos co'2nesE Se reali4a so$re A!ar M2eller Oin/on II de ac2erdo al
'"/odo descri/o 7or îr$; ; +a2er= $(sica'en/e es 2na di#2sin del an/i'icro$iano desde discos
de 7a7el en condiciones es/andari4adasE Ver de/alles '(s adelan/eE

M"/odo 7or dil2cin en a!ar 8de/er'inacin de concen/racin inBi$i/oria '%ni'a
o CIM9*

El '"/odo consis/e en 7re7arar 2na serie de dil2cin de 2n an/i'icro$iano= la <2e se
a!re!a al a!ar= 7ara l2e!o se'$rar 2na car!a cons/an/e de 'icror!anis'o ; de/er'inar en <2e
00

dil2cin 8concen/racin9 oc2rre la inBi$icin del creci'ien/oE Es el '"/odo de re#erencia 7ara
de/er'inar la CIME

M"/odo 7or dil2cin en caldo 8de/er'inacin de CIM9*

Es 2n '"/odo si'ilar al an/erior= 7ero la #ase es l%<2ida 8caldo9E Ta'$i"n 7er'i/e la
de/er'inacin de la CIME P2ede reali4arse en /2$os o en 7ocillos 8'icro7lacas9E

E-Tes/ o E7silon /es/ 8de/er'inacin de CIM 'edian/e di#2sin en a!ar9*
Es 2n '"/odo reali4ado en #ase slida 8a!ar9 'edian/e di#2sin= en es/e
caso se 2san /iras i'7re!nadas con concen/raciones decrecien/es de
an/i'icro$iano= desde 2.0 [! Bas/a 0E0)0 [!E Es el '"/odo '(s sencillo ;
econ'ico de conocer la CIM= ; res2l/a de !ran 2/ilidad 7ara conocer la
s2sce7/i$ilidad de $ac/erias co'o *aemophilus in%luen+ae= Streptococcus
pyogenes ; Streptococcus pneumoniaeE

M"/odos a2/o'(/icos 8cin"/ica de creci'ien/o #ren/e al an/i'icro$iano9*

M"/odos r(7idos <2e 7er'i/en de/er'inar la inBi$icin del creci'ien/o 'edian/e
/2r$idi'e/r%a o #l2oro'e/r%a en #ase l%<2idaE Son H/iles 7ara el es/2dio de $ac/erias de desarrollo
r(7ido= co'o en/ero$ac/eriasE

La Conentrai-n InBibitoria M"ni(a 5CIM7 ' Conentrai-n $ateriida M"ni(a 5C$M7)

La Concen/racin InBi$i/oria M%ni'a 8CIM9 es la concen/racin '(s $a6a de 2n
an/i'icro$iano= necesaria 7ara 7rod2cir 2na inBi$icin visi$le del desarrollo $ac/eriano in vi/ro=
$a6o condiciones es/andari4adasE Las condiciones de es/andari4acin de es/as 7r2e$as son
es/a$lecidas 7or 2n or!anis'o in/ernacional* CLSI 8Clinical La$ora/or; S/andads Ins/i/2/e9E Es
i'7or/an/e des/acar <2e la CIM se de/er'ina 'edian/e o$servacin vis2al= 7or lo <2e es 7osi$le
<2e al!2nos clones de la $ac/eria <2e se inves/i!a 72edan so7or/ar aHn la concen/racin <2e lo!ra
inBi$ir a la 'a;or%aE

La Concen/racin +ac/ericida M%ni'a 8C+M9 corres7onde a la concen/racin '(s $a6a
7osi$le de 2n an/i'icro$iano= necesaria 7ara inBi$ir /odos los 'icror!anis'os en 2n s2$c2l/ivo
reali4ado en 'edios eAen/os de inBi$idoresE Es/a de/er'inacin 72ede 2sarse co'o co'7le'en/o
a la CIM= ;a <2e es 7osi$le <2e al!2nos clones necesi/en dosis '(s al/as de an/i'icro$iano 7ara
lo!rar 7revenir la '2l/i7licacinE

O$servando el si!2ien/e dia!ra'a se 72ede co'7render 'e6or es/e BecBo* Si 7ro$a'os
2na $ac/eria #ren/e a 2na serie de dil2cin del an/i$i/ico M la CIM <2e se o$/iene es 2E0 [!D'L= ;a
<2e no o$serva'os '(s desarrollo en concen/raciones 'a;oresE Para co'7ro$ar la CIM=
reali4a'os 2n c2l/ivo en 'edios li$res de inBi$idores= ; o$serva'os <2e aHn se o$/iene desarrollo
en concen/raciones de 4E0 [!D'L= lo <2e se de$e a la 7resencia de clones <2e so7or/an 2na
concen/racin '(s al/a del an/i$i/ico ME

01

MIC* Concen/racin InBi$i/oria M%ni'a= M+C* Concen/racin +ac/ericida M%ni'aE

Inter*retai-n de la& Prueba&C Su&e*tibilidad o Re&i&tenia)

En la in/er7re/acin de res2l/ados de c2al<2iera de es/os '"/odos= las $ac/erias se
consideran co'o s2sce7/i$les= 'ediana'en/e s2sce7/i$les 8s2sce7/i$ilidad in/er'edia9 o
resis/en/es a los an/i'icro$ianosE

S2sce7/i$le 8S9* es/a condicin del 'icror!anis'o si!ni#ica <2e 72ede /ra/arse la
in#eccin con las dosis Ba$i/2al'en/e reco'endadasE
S2sce7/i$ilidad in/er'edia 8I9* si!ni#ica <2e el a!en/e res7onde a dosis 'a;ores
del an/i'icro$iano= cercanas a la concen/racin 7las'(/icaE En es/a condicin la
res72es/a a la /era7ia 72ede ser de#icien/e= 7ero 72ede 'e6orar con dosis 'a;ores
o en si/ios donde el an/i'icro$iano se concen/ra 8co'o las <2inolonas en la orina9E
Resis/en/e 8R9* el a!en/e in#eccioso /iene 'ecanis'os de resis/encia con/ra el
an/i'icro$iano= o el a!en/e se enc2en/ra #2era del es7ec/ro de accin del
an/i'icro$ianoE En es/e caso= el 'icror!anis'o no ser%a inBi$ido d2ran/e la
/era7iaE

La carac/er%s/ica de S= I o R de 2n a!en/e in#eccioso #ren/e a 2n an/i'icro$iano se
de/er'ina con 7ro;eccin a la concen/racin 7las'(/ica '(Ai'a alcan4ada 7or la dosis del
an/i'icro$ianoE En o/ras 7ala$ras= no 72ede considerarse s2sce7/i$le a 2n 'icror!anis'o si la CIM
es 'a;or <2e la alcan4ada en el 7las'aE

Co'o la CIM es 2n an/eceden/e <2e no sie'7re se ad62n/a al res2l/ado de la 7r2e$a de
s2sce7/i$ilidad= se Bace necesario es/a$lecer 2n consenso o P72n/o de cor/eQ 7ara es/a$lecer la
condicin S= I= o R <2e #inal'en/e a7arecer( en el in#or'e de res2l/adosE En el caso de las 7r2e$as
7or di#2sin en a!ar= el 72n/o de cor/e es la 'edida del di('e/ro del Balo de inBi$icin= en
'il%'e/ros= lo <2e es 2na 'edida indirec/a de la CIME El el caso de los '"/odos 7or dil2cin= el
72n/o de cor/e corres7onde a la 'is'a CIME P2edes ver 2n e6e'7lo de los 72n/os de cor/e en la
/a$la de s2sce7/i$ilidad ad62n/a en las 7(!inas 00 ; 0)E
03

Co'o re!la !eneral= en 2na condicin /era7"2/ica la concen/racin 7las'(/ica del
an/i'icro$iano de$e ser en/re dos ; c2a/ro veces '(s al/a <2e la CIM= 7ara ase!2rar la e#icacia
cl%nica del /ra/a'ien/oE La si!2ien/e i'a!en descri$e c'o los niveles 7las'(/icos de 2n
an/i'icro$iano eAceden el valor de la CIM ; dis'in2;en con el /ie'7o en/re dosisE

El 7acien/e /endr( 2na dosis de co$er/2ra
del an/i'icro$iano Bas/a <2e la concen/racin
7las'(/ica cai!a $a6o la CIM= 'o'en/o en el <2e
72ede ser necesario ad'inis/rar o/ra dosisE

El antibio!ra(a *or MFtodo de Di%u&i-n en A!ar)

La #or'a '(s 2sada= r(7ida ; sencilla de conocer el es7ec/ro de s2sce7/i$ilidad de 2n
a!en/e in#eccioso es el an/i$io!ra'a 7or di#2sin en a!ar descri/o 7or îr$; ; +a2erE En es/e caso=
se /ra/a de 2na 7r2e$a in vi/ro es/andari4ada= H/il 7ara el es/2dio de $ac/erias 7oco eAi!en/es de
r(7ido desarrollo ; con iden/idad <2e i'7lica 2na s2sce7/i$ilidad 7oco 7redeci$le= ca7aces de
desarrollar resis/enciaE No o$s/an/e lo an/erior= eAis/en '2cBos a!en/es $ac/erianos <2e aHn
7oseen s2sce7/i$ilidad 7redeci$le ; 7er'i/en la ins/alacin de /era7ias e'7%ricas= 7ero no se
descar/a 7ara ellos la a7aricin de resis/encia 7or lo <2e 7odr%an so'e/erse a es/e /i7o de 7r2e$aE

Ade'(s= es/e /i7o de es/2dios 72ede a7licarse co'o screenin! e7ide'iol!ico 7ara
eval2ar la resis/encia a los an/i'icro$ianos en la co'2nidad= ; 7ara la $Hs<2eda de n2evos
a!en/es inBi$idores <2e 7odr%an /ener 2so /era7"2/icoE

Es/a 7r2e$a con al!2nas 'odi#icaciones 72ede ser a7licada 7ara o/ros 'icror!anis'os de
'a;or eAi!enciaE Las condiciones de es/andari4acin se evalHan 7er'anen/e'en/e 7or el CLSIE La
reco'endacin !eneral es reali4ar el c2l/ivo 7ri'ario ; seleccionar 2na colonia del a!en/e
sos7ecBoso 7ara el es/2dioE No es aconse6a$le el es/2dio de '(s de 2n a!en/e si'2l/(nea'en/eE
El es/2dio de s2sce7/i$ilidad 7or sie'$ra direc/a de '2es/ras 7ri'arias de$e de6arse solo 7ara
a<2ellos casos de eA/re'a 2r!encia= donde la /incin ,ra' de'2es/ra la 7resencia de 2n solo
'icror!anis'o 8en '2es/ras de l%<2idos $iol!icos nor'al'en/e es/"riles= o en orina9E En es/e
caso= la 7r2e$a de$e 7os/erior'en/e re7e/irse a 'odo de con#ir'acin con el a!en/e ;a aislado
'edian/e c2l/ivoE

05

El #2nda'en/o $(sico de la 7r2e$a consis/e en la di#2sin 7asiva de an/i'icro$ianos
car!ados en discos de 7a7el en concen/raciones #i6as 87o/encia del disco9= la <2e se 7rod2ce en 2n
'edio de c2l/ivo slido 8A!ar M2eller Oin/on II9 donde se Ba se'$rado la $ac/eria en es/2dioE Tras
2n 7er%odo de inc2$acin de )2 a )3 Boras= es 7osi$le o$servar los e#ec/os de los an/i'icro$ianos
co'o Balos de inBi$icin del desarrollo $ac/erianoE

La 'edida del di('e/ro de los Balos es
2na re7resen/acin indirec/a de la CIM= la
concen/racin del an/i'icro$iano es 'enor a
'a;or dis/ancia del discoE En o/ras 7ala$ras= si
el di('e/ro es '2; !rande= la CIM es '2; $a6aE

Los discos de an/i'icro$ianos se eli!en
de ac2erdo al a!en/e 'icro$iano= el si/io de la
in#eccin ; los an/eceden/es del 7acien/eE De es/a
#or'a 7ode'os conce$ir an/i$io!ra'as 7ara a!en/es ,ra' ne!a/ivos aislados de orina= de
secreciones= 7ara ,ra' 7osi/ivos= 7ara $acilos no #er'en/adores= e/c"/eraE

De ac2erdo a lo an/erior= en el in#or'e de 2n an/i$io!ra'a /i7o de$er%a'os encon/rar
in#or'acin res7ec/o de los si!2ien/es an/i'icro$ianos 8la si!2ien/e /a$la no cons/i/2;e 2na
nor'a sino 2na orien/acin9*

An/i$io!ra'a 7ara $ac/erias co'2nes
En/ero$ac/eriaceas Pse2do'onas
ae2r!inosa
S/a7B;lococc2s s7E En/erococc2s s7E
A'7icilina Pi7eracilina o
Ticarcilina o
Me4locilina
Penicilina Penicilina
Ce#a4olina o
ce#alo/ina
Ce#/a4idi'a OAacilina A'7icilina
,en/a'icina ,en/a'icina
A'i]acina A'i]acina Eri/ro'icina o
Clari/ro'icina o
A4i/ro'icina
Line4olid
A'oAicilina acE Clav2l(nico o
A'7icilina s2l$ac/a' o
Ce#o7era4ona Vanco'icina Vanco'icina
Tri'e/o7ri' s2l#a'e/oAa4ol Ce#e7i'e Clinda'icina U2in27ris/iaDDal#o7ris/ina
Ci7ro#loAacino Ci7ro#loAacino Line4olid
Ce#o7era4ona o
Ce#oAi/ina
A4/reona' Tri'e/o7ri'
s2l#a'e/oAa4ol

I'i7ene' o
Mero7ene'
I'i7ene' o
Mero7ene'

Ce#o/aAi'a o
Ce#/riaAona
To$ra'icina
10

An/i$io!ra'a 7ara $ac/erias co'2nes= s27le'en/ario 7ara 2ro7a/!enos
En/ero$ac/eriaceas Pse2do'onas
ae2r!inosa
S/a7B;lococc2s s7E En/erococc2s s7E
Ni/ro#2ran/o%na Car$enicilina Ni/ro#2ran/o%na Ni/ro#2ran/o%na
Lo'e#loAacino o
Nor#loAacino
Levo#loAacino o
Nor#loAacino
Ci7ro#loAacino o
Levo#loAacino o
Nor#loAacino
Ce#/iAo4i'a Te/raciclina Te/raciclina

El 7ri'er !r27o de an/i'icro$ianos 8celdas a42les9 de$iera a7arecer en 2n an/i$io!ra'a
/i7o 7ara los a!en/es es/a /a$laE El se!2ndo !r27o de an/i'icro$ianos 8verde9= /a'$i"n se a!re!a
a la 7r2e$a de s2sce7/i$ilidad= 7ero se incl2;en en #or'a selec/iva 8e6e'7lo* 7ara Escherichia coli=
se in#or'ar( Ce#o/aAi'a o Ce#/riaAona= 7ara Staphylococcus aureus se in#or'ar( Eri/ro'icina o
Clari/ro'icina o A4i/ro'icina9E Es 72si$le incl2%r o/ros an/i'icro$ianos s27le'en/arios en la
7r2e$aE

En el caso de $ac/erias aisladas de orina= a los dos 7ri'eros !r27os de an/i'icro$ianos se
72eden s2'ar al!2nos adec2ados 7ara el /ra/a'ien/o de in#ecciones del /rac/o 2rinarioE

Fatore& 2ue a%etan la alidad de lo& re&ultado& del antibio!ra(a *or di%u&i-n)

A 7esar de /ra/arse de 2n '"/odo '2; $ien es/andari4ado= eAis/en varios #ac/ores <2e
72eden al/erar los res2l/ados= lo <2e 72ede llevar a errores de in/er7re/acin con e#ec/os en el
"Ai/o del /ra/a'ien/oE

Valor del 7O* El 7O del 'edio de c2l/ivo de$e si/2arse en 2n ran!o de 1=2 a 1=4E Valores
#2era de ran!o 72edan a2'en/ar o dis'in2ir la 7o/encia del an/i'icro$ianoE Los
a'ino!l2csidos= <2inolonas ; 'acrlidos dis'in2;en s2 7o/encia en 7O (cido= en /an/o
<2e la Te/raciclina a2'en/aE

O2'edad* El eAceso de B2'edad= 7or 'ala a$sorcin del inc2lo o 7or e#ec/o de
a!2a de condensacin so$re el a!ar= 72eden 7rovocar 2na al/eracin en la di#2sin del
an/i'icro$iano= !enerando Balos de inBi$icin i'7recisos o de /a'aFos a2'en/adosE

Concen/racin de Ti'ina ; Ti'idina* Una can/idad a2'en/ada de /i'ina ; /i'idina en el
'edio de c2l/ivo 72ede i'7edir la accin inBi$i/oria del Tri'e/o7ri' ; las S2l#ona'idas=
!enerando Balos de inBi$icin 7e<2eFos o an2l(ndolosE Es/a condicin 7odr%a !enerar 2n
in#or'e de #alsa resis/encia a esos an/i'icro$ianosE La 7r2e$a de calidad 7ara es/e
as7ec/o se reali4a con 2na ce7a de Enterococcus %aecalis ATCC 252)2 o ATCC 33)30= las
<2e de$en dar 2n Balo de inBi$icin s27erior a 20 ''E

1)

Concen/racin de Ca/iones divalen/es* La concen/racin de Ca
CC
; de M!
CC
72ede a#ec/ar
la 7o/encia de los a'ino!l2csidos ; /e/raciclinaE Una $a6a concen/racin de es/os
ca/iones !enera Balos de inBi$icin de 'a;or /a'aFo= ; lo con/rario oc2rre con las al/as
concen/racionesE La 7r2e$a de calidad se reali4a con Pse2do'onas aer2!inosa ATCC
213.3= <2e de$e dar 2n Balo de inBi$icin en/re )0 ; 2) ''E

Conservacin de los sensidiscos* La 7o/encia de los sensidiscos es/( es/andari4ada=
7ara 'an/enerla es necesario conservar los sensidiscos en re#ri!eracin= con!elando el
s/oc] de reservaE La 7o/encia es/( !aran/i4ada solo Bas/a la #ecBa de eA7iracin indicada
7or el #a$rican/eE

Concen/racin del inc2lo* Para reali4ar la 7r2e$a de s2sce7/i$ilidad 7or di#2sin es
necesario se'$rar 2na s2s7ensin es/andari4ada de la $ac/eria en /oda la s27er#icie el
a!arE La s2s7ensin del a!en/e se 7re7ara en Caldo M2eller Oin/on o Caldo So;a /ri7/icasa=
con 2na can/idad de $ac/erias <2e de/er'ine 2na /2r$ide4 e<2ivalen/e al S/andard
Mac?arland 0E.= o a s2 e<2ivalen/e 'edido 7or /2r$idi'e/r%a 8a$sor$ancia de 0E03 a 0E)0 a
02. n'9E La can/idad de $ac/erias <2e se o$/iene es a7roAi'ada'en/e ) a 2A)0
3
U?CD'LE

Inc2los '(s concen/rados 72eden sa/2rar la 7r2e$a ; ori!inar Balos i'7recisos o '(s
7e<2eFosE Inc2los '(s dil2idos 7rod2cen Balos de $ordes inde#inidosE

Sie'$ra del a!ar* La sie'$ra de$e c2$rir la /o/alidad de la s27er#icie= ; de$e ser
Bo'o!"neaE Es/o !enera Balos de $ordes de#inidos <2e #acili/an la lec/2ra

Pro#2ndidad del a!ar* La di#2sin oc2rre en /odos los sen/idos desde el disco i'7re!nado
con an/i'icro$ianoE Si la ca7a de a!ar es '2; !r2esa Ba; 'a;or di#2sin Bacia el #ondo ;
'enor Bacia la 7eri#eria= lo <2e !enera Balos '(s 7e<2eFosE Lo con/rario oc2rre con a!ar
'2; del!ado= donde se 7rod2cen Balos '2; !randesE El es7esor ideal del 'edio de c2l/ivo
es de .E0 CD- 0E3 ''E Es/e as7ec/o es de al/a i'7or/ancia= 7or<2e /oda la 7r2e$a se ve
a#ec/ada= !enerando #alsos s2sce7/i$les o resis/en/es si el a!ar es '2; del!ado o !r2eso
res7ec/iva'en/eE

Dis/ancia en/re los discos* Los discos de$en /ener 2na dis/ancia de 2nos 2E. c' en/re
ellos= 7ara ase!2rar <2e los Balos de inBi$icin no se so$re7on!anE Para 2na 7laca Pe/ri de
50 '' es aconse6a$le Bas/a seis discos= ; 7ara 2na de )40 '' Bas/a )0 discosE La di#2sin
oc2rre desde el 7ri'er con/ac/o con el a!ar= 7or lo <2e los discos no se de$en relocali4arE

?r'2la del 'edio de c2l/ivo ; carac/er%s/icas $iol!icas del a!en/e* El A!ar M2eller
Oin/on II es 2n 'edio de c2l/ivo con 7ocos n2/rien/es= donde las $ac/erias co'2nes
8en/ero$ac/erias= S/a7B;lococc2s9 se desarrollan sin 7ro$le'asE Para reali4ar el
12

an/i$io!ra'a con/ra $ac/erias #as/idiosas es necesario s27le'en/ar la #r'2la o 2/ili4ar
o/ros 'edios de c2l/ivo*

- A!ar M2eller Oin/on con san!re de cordero* Streptococcus pneumoniae=
S/re7/ococc2s $e/a Be'ol%/icos= S/re7/ococc2s s7E ViridansE
- A!ar M2eller Oin/on CBocola/e* Neisserias 7a/!enas= Oae'o7Bil2s s7E
- A!ar OTM* Oae'o7Bil2s s7E

Si <2ieres '(s da/os de es/e /e'a* B//7*DDIIIEis7cBEclDla$JsalDdocD'an2alJs2sce7/i$ilidadE7d# PPr2e$a de
S2sce7/i$ilidad An/i'icro$iana 7or Di#2sin en A!arE Ins/i/2/o de Sal2d PH$lica de CBileQE


)E- Un 7acien/e 7resen/a 2na in#eccin de Berida o7era/oria ca2sada 7or Enterococcus %aecalis,
TU2" an/i$i/icos no de$en #al/ar en el es/2dio de s2sce7/i$ilidad de es/e a!en/eV Para es/e caso
cl%nico= Tc2(l /e 7arece el '(s i'7or/an/eV

2E- En 2na in#eccin 2rinaria se aisla EscBericBia coli <2e se 7r2e$a
#ren/e a Ci7ro#loAacino= con 2n Balo de inBi$icin de )4 ''E Si el
7O del A!ar M2eller Oin/on es 0E3= Tc2(l ser%a la condicin S= I= o R
del a!en/eV= Tc'o lo con#ir'ar%asVE

3E- A 2n 7acien/e #e$ril se le a%sla Streptococcus pneumoniae de
2na /o'a seriada de Be'oc2l/ivos= Ten <2" 'edio de c2l/ivo se
de$e Bacer el an/i$io!ra'a 7or di#2sinV

4E- Para el caso an/erior= si <2ieres 2sar Penicilina= Tc2(l ser%a el
'"/odo '(s reco'endado 7ara de/er'inar la s2sce7/i$ilidad de
S/re7/ococc2s 7ne2'oniae #ren/e a ese an/i$i/icoV Para 2na
eAcelen/e res72es/a cons2l/a la re#erencia*
http://www.scielo.cl/pdf/rci/v17n2/art11.pdf Recomendaciones para el estudio de
susceptibilidad in vitro de Streptococcus pneumoniae

.E- EA7lica 7or <2" 2na concen/racin al/a de /i'ina ; /i'idina en
el A!ar M2eller Oin/on ori!ina Balos red2cidos con el
an/i'icro$iano Tri'e/o7ri' s2l#a'e/oAa4olE

Hay reglas sencillas para el
uso de la Penicilina:
Usarla slo para los microbios
que sean vulnerables a ella,
aplicar la dosis indicada y que
el tratamiento dure lo
suficiente para eliminar la
infeccin; siguiendo estas
reglas, todos quedarn
satisfechos; de lo contrario, el
resultado ser decepcionante!
"le#ander $leming %&''& ( &)**+
Premio ,obel de -edicina &).*

13

Ati.idad n0#1) De/er'inacin de la s2sce7/i$ilidad a los an/i'icro$ianos 'edian/e
di#2sin en a!arE M"/odo de îr$;-+a2er en A!ar M2eller Oin/onE
O$6e/ivo* Conocer ; 7rac/icar la de/er'inacin de s2sce7/i$ilidad 'edian/e el
'"/odo de îr$;-+a2erE
Ma/eriales ; '"/odo* Los al2'nos 72eden reali4ar la de/er'inacin con 2na de las /res $ac/erias
de la ac/ividad n:3E
Se re<2iere de A!ar M2eller Oin/on ; Caldo M2eller Oin/onE
Tr2las es/"rilesE
M2l/idisco de an/i'icro$ianos 8cali$rado9E
MecBeroE
Re!la 'ili'e/radaE
Ta$las de s2sce7/i$ilidad 87(!ina .1 ; .39E
+iose!2ridad* Use !2an/esE MecBero encendidoE
7ro7iaE

Desarrollo* - Con el asa de sie'$ras es/"ril ; #r%a= /o'e 2na can/idad 7e<2eFa de la
$ac/eria a 7ro$ar= ; 7re7are 2na s2s7ensin '2; s2ave en Caldo M2eller
Oin/onE
- I'7re!ne 2na /r2la es/"ril con la s2s7ensin 'icro$iana= ; c2$ra con "s/a
/oda la s27er#icie del A!ar M2eller Oin/onE No de$e de6ar nin!Hn es7acio sin
sie'$raE Es7ere a <2e la s27er#icie es/" secaE
- Colo<2e 2n '2l/idisco de an/i'icro$ianos 8los discos de 7a7el en con/ac/o
con el a!ar9 de #or'a cen/rada en la 7lacaE Presione li!era'en/e 7ara
ase!2rar el con/ac/oE
- Inc2$ar 24 Boras a 3.: a 31:CE
- Mida el di('e/ro de los Balos de inBi$icin ; co'7are las 'edias con la
/a$la de s2sce7/i$ilidad <2e se ad62n/aE
- In#or'e la s2sce7/i$ilidad 7ara cada an/i'icro$iano* S 8s2sce7/i$le9 o R
8resis/en/e9E

An/i$io!ra'a 7or el '"/odo de di#2sin en
a!ar se!Hn îr$;-+a2erE

14

PUNTOS DE CORTE
HALOS DE INHIBICION ESTANDARES (segn N. C. C. L. S.)*

REVISION ENERO 2004 ,M00!S4 VOL.24 N"
AGENTE ANTIMICROBIANO SIGLA POTENCIA RESISTENCIA SUSCEPTIBLE
AMIKACINA AK 30 mcg
14 mm 17 mm
AMPICILINA A 10 mcg
13 mm
(28)*(18)H(1)E(23)S!
17 mm
(2")*(22)H(17)E(24)S!
AMPICILINA#SULBACTAM SAM 10$10 mcg
11 mm (1")H 1% mm (20)H
AMO&ICILINA A& 2% mcg
11 mm 14 mm
AMO&# AC'CLA(ULANICO AMC 20$10 mcg
13 mm (1")* (1")H 18 mm (20)*(20) H
ACI)O NALI)I&ICO * 30 mcg
13 mm 1" mm
ACI)O O&OLINICO O 2 mcg
10 mm 11 mm
ACI)O PIPEMI)ICO PI 20 mcg
13 mm 1" mm
A+ITROMICINA A+T 1% mcg
13 mm (11)H 18 mm (12)H
A+TREONAM A+ 30 mcg
1% mm (2%)H 22 mm (2)H
CE,A)RO&ILO CPH 30 mcg
14 mm 18 mm
CE,ALE&INA CN 30 mcg
14 mm 18 mm
CE,ALOTINA C, 30 mcg
14 mm 18 mm
CE,A+OLINA CE+ 30 mcg
14 mm 18 mm
CE,AMAN)OL CMA 30 mcg
14 mm 18 mm
CE,EPIME CPM 30 mcg
14 mm
(30)N(2%)H(23)S!(21)S-
18 mm
(31)N(2)H(24)S!(24)S-
CE,I&IMA C,M % mcg
1% mm (20)H(30)N 1" mm (21)H(31)N
CE,OPERA+ONA C,P 7% mcg
1% mm 21 mm
CE,OTA&IMA CT& 30 mcg
14 mm
(2%)H(30)N(23)S!(2%)S-
23 mm
(2)H(31)N(24)S!(28)S-
CE,O&ITINA C&A 30 mcg 14 mm (23)N 18 mm (28)N
CE,PRO+IL CPR 30mcg 14mm
18mm
CE,RA)INA C) 30 mcg
14 mm 18 mm
CE,TA+I)IMA CA+ 30 mcg
14 mm
(2%)H(30)N(17)B
18 mm (2)H(31)N(21)B
CE,TRIA&ONA CTR 30 mcg
13 mm
(2%)H(24)S-(23)S!(34)N
21 mm
(2)H(27)S-(24)S!(3%)N
CE,URO&IMA . - C&M 30 mcg
14 mm (1)H(2%)N 18 mm (20)H(31)N
CIPRO,LO&ACINO CIP % mcg
1% mm (20)H(27)N 21 mm (21)H(41)N
CLARITROMICINA CLR 1% mcg
13 mm
(10)H(1)/(1)S
18 mm (13)H(21)/(21)
CLIN)AMICINA ) 2 mcg
14 mm (1%)S(1%)/ 21 mm (1")S(1")/
CLORAN,ENICOL C 30 mcg
12 mm
(17)S(2%)H(20)/
18 mm (21)S(2")H(21)/
CLO&ACILINA C& 1 mcg
10 mm 13 mm
COLISTIN CL 10 mcg
8 mm 11 mm
)ICLO&ACILINA )& 1mcg
10 mm 13mm
)O&ICICLINA )&S 30mcg
12 mm 1 mm
ENO&ACINO E 10 mcg
14 mm (31)N 18 mm (3)N
1.

bNa/ional Co''i//ee #or Clinical La$ora/or; S/andardsE
Es/a /a$la de de/er'inacin de s2sce7/i$ilidad se incl2;e con #ines did(c/icos= 7ara e#ec/os de 2so cl%nico de$en cons2l/arse los
'an2ales ac/2ali4ados 7or el CLSI 8Clinical La$ora/or; S/andards Ins/i/2/e9E Los 72n/os de cor/e de s2sce7/i$ilidad ; resis/encia se
revisan an2al'en/eE
ERITROMICINA EM 1% mcg
13 mm (1%)S(1%)/ 23 mm (21)S(21)/
ESTREPTOMICINA S 10 mcg
11 mm 1% mm
,OS,OMICINA ,O 200 mcg
12 mm 1 mm
,LERO&ACINO ,L& % mcg
1% mm (18)H(28)N 1" mm (1")H(3%)N
,URA+OLI)ONA ,+ 100 mcg
14 mm 17 mm
GENTAMICINA GE 10 mcg
12 mm 1% mm
KANAMICINA K 30 mcg
13 mm 18mm
LE(O,LO&ACINO L(& % mcg
13 mm (1)H 17 mm
LINCOMICINA L 2 mcg
1 mm 21 mm
LINE+OLI) L+) 30 mcg
20 mm 21 mm (23)E
MEROPENEM MRP 10 mcg
13 mm (19)H(15)B 1 mm(20)H(20)B
MO&I,LO&ACINO M&, % mcg
1% mm (17)H(14)/ 1"mm (18)HS/
NEOMICINA N 30 mcg
12 mm 17 mm
NITRO,URANTOINA NIT 300 mcg
14 mm 17 mm
NOR,LO&ACINO NOR 10 mcg
12 mm 17 mm
O,LO&ACINO ,L& % mcg
12 mm(24)N 1 mm(31)N
O&ACILINA OX 1 mcg
1" mm/ (10)*(17)** 20 mm/(13)*(18)**
PENICILINA P 10 UO,
1" mm (28)*(2)N
(14)E(23)S!
20 mm
/(2")*(47)N(1%)E(24)S!
PIPERACILINA PE 100 mcg
17 mm 21 mm (18)P
PIPERAC$TA+OBACTAM T+ 100$10 MCG
17 mm 21 mm (18)P(18)*
RI,AMPICINA R % mcg
1 mm 20 mm(1")/
RO&ITROMICINA R&T 1% mcg
13 mm 23 mm
SUL,ATRIMETOPRIM S& 2% mcg
10 mm (1%)/ 1 mm (1")/
SUL,ONAMI)A S, 2%0 mcg
12 mm 17 mm
SULPERA+ONA S,P 30$7% mcg
1% mm 21 mm
TEICOPLANINA TEI 30 mcg <10 mm >14 mm
TETRACICLINA T 30 mcg
14 mm
(18)S(18)/(30)N(2%)H
1" mm
(23)S(23)/(38)N(2")H
TOBRAMICINA TB 10 mcg
12 mm 1% mm
TRIMETOPRIM TMP % mcg
10 mm 1 mm
(ANCOMICINA (A 30 mcg
1 mm(14)*(14)E(14)S 17 mm/(1%)*(1%)S
b S/a7B;lococc2s s7E
bb S/a7B;lococc2s coa!2lasa 8-9
E En/erococc2s s7E
S S/re7/ococc2s s7E
O Oae'o7Bil2s s7E
N Neisseria !onorrBoeae
P PsE aer2!inosa Sv S/re7/ococc2s s7E Viridans S$ S/re7/ococc2s +e/a Oe'oli/icos
c S/re7/ococc2s 7ne2'oniae + +E Ce7acia

Texto Guia de Laboratorio de Microbiología UPV

Hochgeladen von

Dokumentinformationen

Copyright

Verfügbare Formate

Dieses Dokument teilen

Dokument teilen oder einbetten

Freigabeoptionen

Stufen Sie dieses Dokument als nützlich ein?

Sind diese Inhalte unangemessen?

Copyright:

Verfügbare Formate

Texto Guia de Laboratorio de Microbiología UPV

Hochgeladen von

Copyright:

Verfügbare Formate

MANUAL DE LABORATORIO DE

Das könnte Ihnen auch gefallen