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PROGRAMA DE PS-GRADUAO STRICTOSENSU DO INSTITUTO DE

ENSINO E PESQUISA DO GRUPO SANTA CASA DE BELO HORIZONTE






MARA LVIA CARVALHO DUFFLES TEIXEIRA




EFEITO DO LASER DE BAIXA INTENSIDADE NA PREVENO DE
ADERNCIAS ABDOMINAIS E CICATRIZAO DA PELE APS
PERITONIECTOMIA EM MODELO EXPERIMENTAL








BELO HORIZONTE MINAS GERAIS
2012
II


MARA LVIA CARVALHO DUFFLES TEIXEIRA





EFEITO DO LASER DE BAIXA INTENSIDADE NA PREVENO DE
ADERNCIAS ABDOMINAIS E CICATRIZAO DA PELE APS
PERITONIECTOMIA EM MODELO EXPERIMENTAL





Dissertao apresentada ao Ncleo de Ps-
graduao e Pesquisa da Santa Casa de
Belo Horizonte como requisito parcial para a
obteno do ttulo de Mestre em Medicina e
Biomedicina.

Orientador: Prof. Dr. Luiz Ronaldo Alberti
Coorientador: Prof. Dr. Leonardo de Souza
Vasconcellos






BELO HORIZONTE MINAS GERAIS
2012

III


MARA LVIA CARVALHO DUFFLES TEIXEIRA


EFEITO DO LASER DE BAIXA INTENSIDADE NA PREVENO DE
ADERNCIAS ABDOMINAIS E CICATRIZAO DA PELE APS
PERITONIECTOMIA EM MODELO EXPERIMENTAL




Dissertao apresentada ao Ncleo de
Ps-graduao e Pesquisa da Santa
Casa de Belo Horizonte como requisito
parcial para a obteno do ttulo de
Mestre em Medicina e Biomedicina.




Data da defesa: ____/____/____
Comisso Examinadora formada pelos Professores:

Dr. Geraldo Magela Gomes da Cruz


Dr. Lvio de Barros Silveira


Prof. Dr. Luiz Ronaldo Alberti Orientador


Prof. Dr. Leonardo de Souza Vasconcellos Coorientador
IV



























Ao meu marido, Cludio, pelo incentivo e companheirismo
durante todos os momentos desta caminhada.
Aos meus filhos, Gabriel, Thiago e Isabela, que
compreenderam minhas ausncias e falhas durante todo
este processo.
Aos meus pais, por tudo que fizeram por mim, para que
eu conseguisse atingir esta etapa profissional.
V


AGRADECIMENTOS

Ao meu Orientador, Dr. Luiz Ronaldo Alberti, pela amizade, apoio e
presena, que foram indispensveis ao desenvolvimento desta pesquisa.
Ao meu Coorientador, Dr. Leonardo de Souza Vasconcellos, pela amizade e
grande contribuio em todas as etapas desta pesquisa.
Ao Dr. Marcus Vinicius Lucas Ferreira, pesquisador do Centro de Tecnologia
Biomdica (CTBio-UFMG), pela orientao nos estudos do laser de baixa
intensidade.
Ao colega Tharcsio G de Oliveira, cirurgio geral, pelo auxlio nas cirurgias
experimentais.
mdica veterinria, Nelma Maria da Silva, pela orientao sobre
procedimentos anestsicos em animais.
Ao mdico anatomopatologista, Maurcio Buzelin Nunes, do Departamento
de Anatomia Patolgica da Santa Casa de Belo Horizonte, pelas anlises
histolgicas.
Sra. Ivone Marinho da Cruz e ao Professor Marcos Cludio Moreira,
ambos do Departamento de Patologia da Faculdade de Cincias Mdicas de Minas
Gerais, pela confeco das lminas histolgicas.
Aos Srs. Marcelo Moreira de Jesus e Derlim Severiano de Paula, do Ncleo
de Experimentao Animal da Faculdade de Medicina da UFMG, pelos cuidados
com os animais.
Ao Professor Marcos Rodrigues Duffles Teixeira, pela correo ortogrfica.
A todos os funcionrios do Centro de Ps-Graduao do Instituto de Ensino
e Pesquisa da Santa Casa de Belo Horizonte (IEP), que demonstraram disponveis e
acessveis sempre que necessitei.


VI


SUMRIO
AGRADECIMENTOS........................................................................................ - V -
SUMRIO ........................................................................................................ - VI -
LISTA DE TABELAS ..................................................................................... - VIII -
LISTA DE ILUSTRAES .............................................................................. - IX -
LISTA DE GRFICOS ..................................................................................... - XI -
RESUMO ........................................................................................................ - XII -
1. INTRODUO .............................................................................................. - 1 -
1.1 ADERNCIAS ............................................................................................ - 1 -
1.2 LASER ........................................................................................................ - 6 -
2. OBJETIVOS ................................................................................................. - 9 -
3. MTODO .................................................................................................... - 10 -
3.1. TICA ...................................................................................................... - 10 -
3.2. ANIMAIS .................................................................................................. - 10 -
3.3. DISTRIBUIO DOS ANIMAIS .............................................................. - 11 -
3.4. PR-OPERATRIO ................................................................................ - 11 -
3.5. TCNICA ANESTSICA ......................................................................... - 12 -
3.6. COLETA DE SANGUE ............................................................................ - 12 -
3.7 - PROCEDIMENTO OPERATRIO.......................................................... - 13 -
3.8. EQUIPAMENTO E PARMETROS DE UTILIZAO DO LASER DE BAIXA
INTENSIDADE ................................................................................................ - 16 -
3.9. CUIDADOS GERAIS DURANTE A APLICAO DO LASER DE BAIXA
INTENSIDADE NO PS- OPERATRIO ....................................................... - 19 -
3.10. NECROPSIA DOS ANIMAIS ................................................................. - 20 -
VII


3.11. ANLISE DAS ADERNCIAS .............................................................. - 20 -
3.11.1. PARMETROS QUANTITATIVOS E QUALITATIVOS ..................... - 21 -
3.12. ANLISE HISTOLGICA ..................................................................... - 22 -
3.13. ENSAIO MECNICO DE RESISTNCIA TRAO .......................... - 23 -
3.14. ANLISE ESTATSTICA ....................................................................... - 26 -
4. RESULTADOS ........................................................................................... - 27 -
4.1. ACHADOS MACROSCPICOS ............................................................. - 27 -
4.2 ENSAIOS MECNICOS ........................................................................... - 33 -
4.3. EXAMES LABORATORIAIS ................................................................... - 34 -
5. DISCUSSO ............................................................................................... - 40 -
6. CONCLUSES ........................................................................................... - 47 -
ANEXO 1 ........................................................................................................ - 53 -


VIII


LISTA DE TABELAS
Tabela 4.1.1 Presena de aderncia abdominal nos trs grupos no 14 dia ps-
operatrio....................................................................................................................................... - 27 -
Tabela 4.1.2 - Comparao entre nmero de aderncias abdominais entre animais dos trs grupos no
14 dia ps-operatrio.................................................................................................................. .- 29 -
Tabela 4.1.3 - Comparao entre reas de aderncias abdominais entre animais dos trs grupos no
14 dia ps-operatrio.................................................................................................................. - 29 -
Tabela 4.1.4 - Tenacidade das aderncias abdominais entre animais dos trs grupos no 14 dia ps-
operatrio................................................................................................................................... - 31 -
Tabela 4.1.5- Vascularizao das aderncias abdominais entre animais dos trs grupos no 14 dia
ps-operatrio................................................................................................................................ - 32 -
Tabela 4.1.6- Comparao entre a localizao das aderncias abdominais entre animais dos trs
grupos no 14 dia ps-operatrio............................................................................................. - 32 -
Tabela 4.2.1 - Limite de resistncia trao da pele entre animais dos trs grupos no 14 dia ps-
operatrio........................................................................................................................................ - 34 -
Tabela 4.2.2- Limite de resistncia trao da parede e entre animais dos trs grupos no 14 dia ps-
operatrio.............................................................................................................................. - 34 -
Tabela 4.3.1 - Resultado do Leucograma (mdia e desvio padro) dosado nos animais dos trs
grupos no pr-operatrio (D0) e no 4 dia ps-operatrio (D4)....................................................... - 35 -
Tabela 4.3.2- Intensidade do processo inflamatrio na cicatriz cirrgica entre os animais dos trs
grupos no 14 dia ps-operatrio................................................................................................... - 36 -
Tabela 4.3.3- Intensidade do processo inflamatrio nas aderncias abdominais entre animais dos trs
grupos no 14 dia ps-operatrio.................................................................................................... - 37 -




IX


LISTA DE ILUSTRAES
Figura 1 - Identificao dos animais (A) e gaiolas (B). ..................................................................... - 11 -
Figura 2 Coleta de sangue atravs da dissecao e puno da veia femoral (seta). Coleta realizada
no pr-operatrio (D0) e repetida no 4 dia ps-operatrio (D4) ...................................................... - 12 -
Figura 3 Tonsurotomia realizada na regio anterior do trax e abdome. ...................................... - 13 -
Figura 4 Laparotomia mediana longitudinal (A), abertura e afastamento por planos das bordas da
parede abdominal do coelho, (B), molde de plstico (seta), medindo 3 cm x 1 cm, utilizado para
padronizao da retirada de fragmento de peritnio da parede abdominal do coelho (C) e aparncia
da parede abdominal (seta) aps a retirada do fragmento de peritnio parietal (D). ....................... - 14 -
Figura 5 Aplicao perioperatria do laser de baixa intensidade na lateral direita (A) e esquerda (B)
da parede abdominal do coelho, logo aps a peritoniectomia. ......................................................... - 15 -
Figura 6 Sutura da ferida cirrgica em planos: aponeurose e peritnio parietal e pele, com nylon 3-0.
........................................................................................................................................................... - 15 -
Figura 7 Aparelho Twin Flex Evolution Laser , InGaIP, 658 nm, vermelho. ................................ - 17 -
Figura 8 Proteo da caneta laser com filme de PVC incolor (seta). ............................................ - 18 -
Figura 9 culos de proteo para aplicao do laser de baixa intensidade. ................................ - 18 -
Figura 10 Aplicao diria do laser de baixa intensidade no ps-operatrio, em quatro pontos
distintos, dois em cada lado da resseco peritoneal, com base no molde plstico padro, durante os
quatro primeiros dias de ps-operatrio. .......................................................................................... - 19 -
Figura 11 Esquema da inciso em U invertido na parede abdominal anterior (A). Exame da
cavidade abdominal atravs da inciso em forma de U invertido (B). ........................................... - 20 -
Figura 12 Contagem do nmero de aderncias abdominais. ........................................................ - 22 -
Figura 13 Medio da superfcie de contato entre as estruturas (A) e da espessura das aderncias
(B). ..................................................................................................................................................... - 22 -
Figura 14 Mquina universal de ensaio da marca Kratos . ......................................................... - 24 -
Figura 15 - Confeco do corpo de prova com molde plstico (*) medindo 8 cm x 2,5 cm. Indicao da
posio da cicatriz cirrgica (seta). ................................................................................................... - 24 -
Figura 16 Fragmento da pele sob trao. Observar cicatriz na parte central (seta). .................... - 25 -
Figura 17 Exame da cavidade abdominal constatando ausncia de aderncia abdominal em
animais n. 2 e 5 do GL2 (Grupo laser dose 3,6 J), respectivamente (A e B). Presena de aderncia
abdominal entre parede abdominal e intestino grosso no coelho n. 4 do GC (Grupo Controle) (C) e no
coelho n. 6 do GL1 (Grupo laser dose 0,2 J) (D). ............................................................................. - 28 -
Figura 18 Medio da superfcie de contato entre estruturas aderidas (A), coelho nmero dois do
GC (Grupo Controle) e da espessura das aderncias (B), coelho nmero trs do GC (Grupo
Controle). ........................................................................................................................................... - 30 -
X


Figura 19 - Aderncias abdominais presentes no coelho nmero cinco do CG (Grupo Controle) (seta)
classificadas como firme (necessitou tripsia para ser desfeita) (A) e frouxa (sem necessidade de
tripsia para ser desfeita) presente no coelho nmero trs do GL1 (Grupo laser dose 0,2 J ) (B). ... - 31 -
Figura 20 - Aderncia abdominal entre parede e intestino grosso (seta) no coelho nmero dois do GC
(Grupo Controle) (A) e parede e omento (seta) no coelho nmero sete do GL2 (Grupo laser dose 3,6
J) (B). ................................................................................................................................................. - 33 -
Figura 21 Microscopia da cicatriz cirrgica do coelho nmero dois, Grupo GL1 (Grupo laser dose
0,2 J). Observar presena de processo inflamatrio leve/moderado (setas) com predomnio de
polimorfonucleares (A) Aumento de 40x; (B) Aumento de 100x. Corado com hematoxilina e eosina. ... -
36 -
Figura 22 - Microscopia da aderncia abdominal do coelho nmero dois, Grupo GL1 (Grupo laser
dose 0,2 J). Observar a presena de processo inflamatrio leve/moderado (setas) com predomnio de
clulas polimorfonucleares. (A) Aumento de 40x; (B) Aumento de 100x. Corado com hematoxilina e
eosina. ............................................................................................................................................... - 38 -
Figura 23 - Microscopia da aderncia abdominal do coelho nmero 18, Grupo GL2 (Grupo laser dose
3,6 J). Observar presena de vascularizao (setas). (A) Aumento de 40x; (B) Aumento de 100x.
Hematoxilina e eosina. ...................................................................................................................... - 39 -


XI


LISTA DE GRFICOS
Grfico 1 - Resumo das avaliaes quantitativas das aderncias encontradas nos trs grupos. ... - 30 -
Grfico 2 - Resumo das avaliaes quanlitativas das aderncias encontradas nos trs grupos. .... - 33 -


XII


RESUMO
Introduo: As aderncias abdominais so frequentes aps cirurgias e so causas
de obstruo intestinal, dor abdominal crnica e infertilidade. Sua preveno
permanece um desafio para os profissionais da rea da sade, principalmente no
campo da cirurgia.

Objetivos: Avaliar os efeitos da aplicao do laser de baixa intensidade na
preveno de aderncias abdominais e cicatrizao da pele aps peritoniectomia.

Mtodo: Foram utilizados 24 coelhos machos da raa Nova Zelndia, com cerca de
2 meses de idade, distribudos aleatoriamente em 3 grupos (n=8): GC grupo
controle, no submetido ao laser, GL1 grupo com aplicao do laser na dose de
0,2 J

e GL2 grupo com aplicao do laser na dose de 3,6 J. Em todos os animais
foi realizada uma laparotomia mediana longitudinal e resseco bilateral de
fragmento peritoneais medindo 3 cm x 1 cm. Os animais abordados com laser
receberam uma aplicao, a cada 24 horas, a contar do horrio da cirurgia, por um
perodo de quatro dias. No 14 dia de ps-operatrio os animais foram sacrificados e
a formao de aderncia foi avaliada quantitativa e qualitativamente, atravs de uma
laparotomia em forma de "U" invertido que permitiu ampla verificao da parede da
cavidade abdominal e rgos. Foi realizada tambm a avaliao quantitativa e
qualitativa do tecido cicatricial e da resposta inflamatria aguda pela anlise de PCR
(protena C reativa) e leucograma. As diferenas foram consideradas significativas
para p<0,05.

Resultados: A formao de aderncia foi observada em 100% dos coelhos dos
grupos GC e GL1 e 37,5% dos animais do grupo GL2 (p<0,01). A avaliao da
tenacidade e vascularizao das aderncias entre os grupos no apresentou
diferena significativa. A comparao dos stios de localizao das aderncias, entre
os grupos, mostrou que 100% das aderncias formadas no grupo GL2 no
envolveram estruturas viscerais. J nos grupos GC e GL1, 72% e 83% das
aderncias envolveram tais estruturas, respectivamente. A resistncia trao da
XIII


pele entre os grupos no foi significativa (p=0,3106). As resistncias dos segmentos
cutneos entre os grupos GL2 e GC no foram diferentes, sendo melhores que o
GL1, (p=0,01). A intensidade do processo inflamatrio verificada por meio de
leucograma, PRC e PCR ultrassensvel no apresentou diferena entre os grupos.
A exame histolgica da ferida cirrgica e das aderncias formadas no apresentou
diferena significativa quanto intensidade do processo inflamatrio.
Concluso: A aplicao do laser de baixa intensidade na dose de 3,6 J, fluncia de
90 J/cm
2
, potncia de 40 mW e tempo de 90 s eficaz na reduo da formao,
nmero e rea de aderncias abdominais em coelhos, sem modificar as
caractersticas (tenacidade, vascularizao e inflamao) e sem comprometer a
resistncia cicatricial ps-operatria da parede abdominal.

Descritores: Aderncias peritoneais, laser fotobioestimulao, irradiao laser de
baixa potncia, terapia laser de baixa potncia, irradiao laser de baixa potncia,
terapia laser, cicatrizao, coelho, resistncia trao, PCR.


- 1 -

1. INTRODUO

1.1. ADERNCIAS

Aderncias so conexes anormais de rgos ou estruturas corporais. Essas
conexes ou pontes podem se constituir de uma fina lmina de tecido conjuntivo, de
uma lmina tecidual mais espessa contendo vasos sanguneos e nervos, ou
representar um contato direto entre a superfcie de dois rgos. Aderncias podem
ser encontradas na cavidade peritoneal, pericrdica, pleural, uterina, no interior de
articulaes ou das cmaras oculares. Aderncias na cavidade abdominal so
conhecidas como aderncias peritoneais, uma vez que o peritnio visceral ou
parietal est sempre envolvido. Sua incidncia aps ato cirrgico elevada podendo
ocorrer em at 93% das laparotomias. (1)
Os avanos da medicina possibilitaram o aumento do nmero de cirurgias, mas as
aderncias ainda ocorrem com elevada incidncia, mesmo tendo diminudo. (1) (2)
(3)
Segundo Ellis et al, 34,6% dos pacientes submetidos operao abdominal ou
plvica foram readmitidos no hospital, uma mdia de 2,1 vezes, nos 10 anos
subsequentes, devido s complicaes diretamente relacionadas s aderncias. Do
total de readmisses (n=1.209), 5,7% foram relacionadas diretamente com a
presena de aderncias, sendo que 3,8% (n=1.169) necessitaram de nova
operao. Mais de 22% de todas as readmisses ocorreram no primeiro ano, aps o
procedimento inicial. (2)
Aderncias esto associadas ao risco de vida efetivo ou potencial, pois esto
relacionadas a complicaes graves, como a obstruo intestinal. (1) (3) Tambm
podem causar dor abdominal crnica (4) e infertilidade feminina. (5)
Aderncia ps-operatria a causa mais prevalente de obstruo aguda e
recidivante de intestino delgado, estando associada a taxas de mortalidade de at
15%. (6) (2) (7) (8)

- 2 -

Moreira Jr e colaboradores (2005), avaliando pacientes atendidos em servio de
urgncia com diagnstico de obstruo intestinal, no perodo de 1999 a 2000,
concluram que as aderncias foram a causa mais comum de obstrues intestinais,
correspondendo a 37,2% dos casos. A obstruo do intestino delgado foi causada
por aderncias em 82,8% dos casos, sendo que desses, 62,66% necessitaram de
cirurgia e 37,73%, de tratamento clnico, com 30,30% de enterectomias e 9,09% de
leso acidental ao intestino delgado. Ocorreram oito bitos (sete casos operados e
um caso tratado clinicamente). Nesse estudo, a doena aderencial foi a causa mais
importante de ocluso intestinal e est associada morbimortalidade elevada, pois
so tratados, quase sempre, em situaes de emergncia e em evoluo avanada.
(9)

Vidal (2005) avaliou as principais causas de obstruo intestinal em pacientes
admitidos no servio de urgncia do Hospital Governador Joo Alves Filho-
Aracaj/SE e concluiu que a principal causa foi aderncia do delgado (44%).
Dessas, 30% apresentaram-se complicadas e 10% dos pacientes faleceram. (10)

Segundo Wiseman (2007), muito comum pensar que somente as mulheres so
propensas a aderncias, mas os homens no esto excludos do problema.
Estatsticas americanas coletadas de altas hospitalares (CID9) a partir dos dados
mais recentes disponveis (2001-2005), revelam que mais de 50 mil homens
receberam alta hospitalar em 2005, com diagnstico de aderncias peritoneais,
representando 28% do total desse diagnstico quando comparado com as altas
femininas que representaram os outros 72%. Do total de homens hospitalizados em
virtude das aderncias, 71,56% apresentaram obstruo intestinal. Mais de dois mil
homens e mulheres morrem todo ano com diagnstico de obstruo intestinal
causada por aderncia, representando 3% do total de altas com este diagnstico.
Aderncia um problema clnico significante para homens e mulheres, sendo que os
homens, com diagnstico de obstruo intestinal causada por aderncias, tm risco
ligeiramente maior de morrer do que as mulheres, bem como permanecem
hospitalizados por mais tempo, ocasionando um custo superior estimado em US$
48.000,00. (11)

- 3 -

A presena de aderncias tambm pode ser um complicador ao tratamento do
cncer. A irradiao adjuvante ou neoadjuvante e por recidiva tumoral em tecidos
alterados por cirurgia anterior tende maior morbidade uma vez que aderncias
prvias fixam segmentos intestinais quando submetidas a altas doses de radiao
subsequente. (12)

A administrao de quimioterapia intra-abdominal tambm pode ficar prejudicada na
presena de aderncias. A distribuio da droga deve ser feita de forma uniforme,
por toda a cavidade peritoneal, para otimizar e evitar a exposio excessiva em
focos restritos. (12)

No Brasil, estima-se que os gastos do Sistema nico de Sade (SUS) e os impactos
socioeconmicos oriundos da formao de aderncias e suas respectivas
complicaes tambm sejam expressivos, embora no haja dados na literatura que
contabilizem esses gastos. (9)

Trauma peritoneal (cortes, cauterizao, suturas, etc.), corpos estranhos, isquemia
tecidual e infeces de vsceras abdominais so os principais fatores associados
com a formao de aderncias ps-operatrias. (13)

A leso peritoneal causa uma reao inflamatria serossangunea que leva a
depsitos de fibrina. Bem oxigenadas, intactas, as clulas mesoteliais produzem
ativador de plasminognio, que lisa os cogulos de fibrina formados aps a leso. A
proliferao de clulas mesodrmicas regenera uma camada nica de mesotlio
novo entre trs e cinco dias aps a injria. Nas feridas experimentais, atividade
fibrinoltica foi encontrada trs dias aps a leso, antes da reconstruo da
integridade mesotelial. Esse processo rpido e, geralmente, reconstitui a parede
peritoneal sem formao de aderncias. Por outro lado, fibrinlise inadequada
permite que a proliferao de fibroblastos produza aderncias fibrosas. Com a
hipxia, a matriz fibrinosa invadida por fibroblastos, havendo estimulao de
angiognese e sntese de colgeno. Aderncias fibrosas plenamente desenvolvidas
formam-se aps 10 dias e tornam-se mximas entre duas e trs semanas aps a
injria. (12)
- 4 -


Cita-se a relao direta entre a presena de mastcitos no processo inflamatrio e o
incio do processo adesivo. Acredita-se que o mastcito se une aos fibroblastos
intestinais, desencadeando sua proliferao, mecanismo comprovado in vitro e em
modelos experimentais. (14)

A fisiopatologia especfica das aderncias permanece incerta. Segundo Henrrick e
colaboradores (2001) a formao de aderncias consequncia de uma leso
peritoneal, com isquemia local e falsa regenerao. (4)

Estudo em humanos revelou a morfologia, qualidade e composio das aderncias
peritoneais maduras, concluindo que as mesmas eram ricas em clulas
mononucleares, fibroblastos, adipcitos e endotlios. Tais achados suportam a
hiptese de que o reparo inadequado da superfcie peritoneal poderia propiciar
formao de aderncias persistentes, sendo consequncia de um processo de
remodelao e cicatrizao permanentes. (15)

Cerca de 90% dos pacientes desenvolvem aderncias aps laparotomia. Em se
tratando de cirurgia ginecolgica esse nmero pode chegar a 100%. (3)

Certamente a preveno de aderncias reduzira a incidncia e a gravidade de suas
complicaes. (16)

As medidas profilticas para reduo da formao de aderncias visam diminuir a
intensidade da resposta inflamatria e a coagulabilidade, alm de impedir o contato
prolongado entre superfcies justapostas, por meio de efeitos siliconizantes (6).

Segundo Cruz (1969), os primeiros mtodos utilizados para a preveno de
aderncias foram a instilao de ar na cavidade peritoneal, promoo de
peristaltismo intestinal precoce, uso de heparina e outros anticoagulantes na
cavidade abdominal, instilao de solues hipotnicas, hialuronidase e esteroides
na cavidade peritoneal, dentre outros. O uso da fibrinolisina como agente de
preveno reduz a formao de aderncias peritnio-viscerais contudo enseja a
- 5 -

deiscncia de suturas clicas com obtidos por peritonite, na dosagem de 195 U/g de
peso corporal (17).

Existem tambm mtodos de barreiras fsicas como telas de celulose oxidada
regenerada (ORC) que visam separar fisicamente os tecidos que potencialmente
poderiam se aderir, como o Surgigel, Seprafilm e o Interceed . Tais mtodos
podem prevenir a formao de aderncias quando em uso, sendo reabsorvidos
quando no so mais necessrios (18) (19) (20), contudo sua eficcia pode ser
significativamente reduzida na presena de sangue e processo inflamatrio
contaminado, alm do elevado custo, sua disponibilidade e a dificuldade de
manuseio do material. (21) (16)

Kumar e colaboradores (2009), em estudo de reviso que cobriu o perodo de 1966
a 2008, concluram que h evidncias de que o uso do cido hialurnico e
membrana de carboximetilcelulose pode reduzir a incidncia, extenso e gravidade
das aderncias o que, teoricamente, beneficiaria as reoperaes abdominais.
Contudo, no h evidncia de que a incidncia de obstruo intestinal ou a
necessidade de nova interveno cirrgica tenham sido reduzidas com este tipo de
tratamento. (22)

Outras tentativas baseadas no processo de sntese do colgeno tambm foram
estudadas. O colgeno diferente de todas as outras protenas, pois sofre vrias
modificaes quando atinge o ambiente extracelular. Nesse ambiente, ocorrem
cross-linking formando fibrinas e fibras de colgeno. A enzima responsvel por esta
etapa, a oxidase lisil, requer a presena de cobre e pode ser inibida pelo
b-aminopropionitrilo (BAPN) e d-penicillamina. A inibio do cross-linking do
colgeno tem sido estudada em animais e, em um grau limitado, em humanos, na
tentativa de evitar deposio excessiva de colgeno em aderncias e fibroses
subsequentes. Os resultados tm sido modestos. (12)




- 6 -

1.2. LASER

A palavra laser um acrnimo do ingls "Light Amplification by Stimulated Emission
of Radiation", o que significa "amplificao da luz pelo efeito da emisso estimulada
da radiao". A gerao da onda eletromagntica depende da excitao dos
eltrons presentes no meio condutivo (slido, lquido ou gasoso) que constitui o
laser. A energia a laser no existe na natureza e transformada a partir de algum
tipo de fonte de energia, como uma lmpada, que estimula um grande nmero de
eltrons em repouso, os quais so capazes de produzir ftons de luz. Esse processo
desencadeia uma ao repetida de emisso de energia gerando luz intensa. (23)

A luz gerada por um meio slido (por exemplo, rubi e alexandrita) ou gasoso (por
exemplo, CO
2
) para adquirir as trs principais caractersticas dos laseres, que so:
raios colimados (todos os raios de luz caminham na mesma direo, permitindo que
uma grande quantidade de energia seja transmitida a um alvo preciso), luz
monocromtica (tem uma nica cor, que corresponde a um comprimento de onda do
espectro eletromagntico) e raios coerentes (todos os raios da luz do laser
caminham paralelos no tempo e no espao). Dessa forma, tm-se diferentes tipos de
equipamentos de laser, dependendo do comprimento de onda emitido. (24)

A primeira publicao sobre Laser data de 1958, no artigo de Schawlow e Townes.
(25). Em 1960 Maiman utilizando um cristal de rubi, desenvolveu a primeira fonte de
laser. (26)

Em 1965, foi criado por Sinclair e Knol um aparelho de laser com efeito
fotobioestimulante em tecidos vivos, o chamado laser teraputico. (27)

O laser de baixa intensidade, tambm chamado de baixa potncia ou ainda
bioestimulante, tem sido usado desde o final da dcada de 1960, sendo sua
grandeza de radiao to baixa (entre 2 e 30 mW) que seus efeitos biolgicos
ocorrem devido a radiao e no como resultado do aquecimento, no sendo capaz
de elevar a temperatura do tecido vivo alm de 1 C. A penetrao do laser chega
- 7 -

apenas a poucos milmetros da pele, sendo absorvida nos seus diferentes estratos.
(23)

Em 1967, Endre Mester, mdico hngaro, publicou trabalho com a utilizao de laser
de baixa potncia (Soft Laser) He-Ne, para cicatrizao de feridas e lceras,
demonstrando que era possvel obter bons resultados teraputicos com baixa
densidade energtica (potncia mdia de 1,0 a 10,0 mW). (28)

A laserterapia de baixa potncia tem sido cada vez mais utilizada e investigada.
Fatores como o no traumatismo dos tecidos, custo reduzido, bons resultados na
cicatrizao e controle da dor parecem contribuir para seu uso contnuo e cada vez
mais frequente. (29)

Apesar de vrias investigaes, ainda no foi possvel parametrizar o uso do laser
no processo de cicatrizao. Algumas revises (30) (31) (32) e meta-anlise (33)
publicadas recentemente concluram que a laserterapia benfica cicatrizao e
ao controle da dor, mas no foi possvel estabelecer protocolos, uma vez que uma
considervel variao nos projetos de pesquisa, metodologia e parmetros de
irradiao empregados limitou a comparao dos resultados entre os estudos. (30)
(33) (31) (32)

Bjordal e colaboradores (2006) avaliaram os efeitos biolgicos e clnicos de curto
prazo (at sete dias aps injria) do laser na dor aguda em leso de tecido mole,
demonstrando que essa terapia pode modular processo inflamatrio de uma maneira
dose-dependente e capaz de reduzir significativamente a dor inflamatria aguda.
(30)

Sete artigos de reviso (30) (34) (35) (32) (36) (37) (31), publicados entre 2006 e
2010 e uma meta-anlise (33), publicada em 2009, avaliaram os efeitos do laser
sobre a cicatrizao de feridas e dor. Em nenhuma dessas publicaes foram
encontrados estudos avaliando o efeito do laser sobre a formao de aderncias.
(30) (34) (35) (33) (32) (36) (37) (31)

- 8 -

Embora o laser j seja utilizado em larga escala, com o objetivo de facilitar o
processo de cicatrizao h pelo menos 50 anos (25), ainda no foram publicados
estudos avaliando o efeito dessa terapia sobre a formao de aderncias
abdominais.


- 9 -

2. OBJETIVO

Avaliar os efeitos do laser de baixa intensidade sobre a formao, morfologia e
aspectos inflamatrios das aderncias abdominais e cicatrizao da pele aps
peritoniectomia em coelhos.


- 10 -

3. MTODO

3.1. TICA
Os aspectos legais e ticos foram observados conforme a determinao da Lei
11.794, de 8 de outubro de 2008, que dispe sobre procedimento para uso cientfico
de animais (38) e Princpios ticos para o Uso de Animais de Experimentao,
editado pelo Comit de tica e Experimentao Animal (CETEA) da Universidade
Federal de Minas Gerais. (39) O experimento foi devidamente aprovado pelo CETEA
UFMG, certificado 21/2011. (Anexo I)

3.2. ANIMAIS

Este trabalho foi realizado no Ncleo de Experimentao Animal da Faculdade de
Medicina da UFMG. Os animais foram adquiridos na Fundao de Estudos e
Pesquisa em Medicina Veterinria e Zootecnia Fazenda Veterinria da UFMG e
transportados para o Ncleo de Experimentao Animal da Faculdade de Medicina
da UFMG em gaiolas apropriadas.

Foram utilizados vinte e quatro coelhos machos Oryctolagus Cunculus, da raa
Nova Zelndia, pesando entre 2.110 g e 2.590 g. Os animais foram identificados
com marcao em suas orelhas (Figura 1 A) com caneta dermatogrfica e alocados
em gaiolas individuais, identificadas externamente com etiqueta adesiva (Figura 1
B).

Os animais permaneceram em observao por 15 dias antes do experimento para
verificar seu estado de sade, a fim de excluir afeces que pudessem interferir na
investigao.


- 11 -


Figura 1 - Identificao dos animais (A) e gaiolas (B).

3.3. DISTRIBUIO DOS ANIMAIS

Os coelhos foram distribudos, aleatoriamente, em 3 grupos (n=8) conforme a
teraputica adotada:

GC 8 coelhos, grupo controle, no irradiado com laser;
GL1 8 coelhos, grupo irradiado com laser: energia de 0,2 J, fluncia de 5
J/cm
2
, potncia de 0,005 W, tempo de 40 s por ponto

;
GL2 8 coelhos, grupo irradiado com laser: energia de 3,6 J, fluncia de 90
J/cm
2
, potncia de 0,04 W, tempo de 90 s por ponto.

3.4. PR-OPERATRIO

Os animais foram mantidos no Ncleo de Experimentao Animal da Faculdade de
Medicina da UFMG, em gaiolas especficas para este fim, em temperatura ambiente,
com livre acesso gua potvel e rao de origem industrial padronizada,
respeitando ciclo normal de dia e de noite. Antes do procedimento operatrio, os
animais foram pesados em balana eletrnica digital.




- 12 -

3.5. TCNICA ANESTSICA

O procedimento cirrgico foi realizado sob anestesia intramuscular, na regio gltea,
com cloridrato de cetamina (Cetamin, Syntec, Cotia, SP) na dose de 20mg/kg
associado a cloridrato de xilazina (Xilazin, Syntec, Cotia, SP) a 2%, na dose de
6mg/kg. Realizou-se antibioticoprofilaxia com Cefalexina monoidratada (Keflex, Eli
Lilly, So Paulo, SP) na dose de 50mg/kg atravs da administrao intramuscular,
30 minutos antes do procedimento. Durante todo o procedimento operatrio foram
avaliados os padres respiratrios e de sedao dos animais. Quando necessrio,
foi aplicada adicionalmente metade da dose inicial dos anestsicos.

3.6. COLETA DE SANGUE

Foi realizada previamente cirrgica (D0), coleta de sangue atravs da dissecao e
puno da veia femoral para anlise de protena C reativa (PCR) e leucograma. O
mesmo procedimento foi repetido no 4 dia ps-operatrio (D4) (Figura 2).


Figura 2 Coleta de sangue atravs da dissecao e puno da veia
femoral (seta). Coleta realizada no pr-operatrio (D0) e repetida no 4
dia ps-operatrio (D4)

- 13 -

A protena C reativa (PCR) foi dosada por qumica seca (VITRUS Johnson &
Johnson) (valor de referncia < 10mg/L). A Protena C Reativa Ultra-sensvel
(PCRus) foi dosada por nefelometria, no Laboratrio Hermes Pardini (Valor de
referncia < 8mg/L para doena inflamatria na fase aguda).

3.7. PROCEDIMENTO OPERATRIO

As cirurgias foram realizadas na sala de cirurgia do Ncleo de Experimentao
Animal Central da Faculdade de Medicina da UFMG. Os animais foram posicionados
em decbito dorsal. Um foco cirrgico iluminou o campo operatrio. O instrumental
cirrgico foi constitudo por bisturi de lmina descartvel, tesouras retas e de
Metzenbaum, pinas anatmicas e dente-de-rato, pinas homeostticas curvas,
retas e porta agulha. Aps a tonsurotomia de toda a regio anterior do trax e
abdome com lmina de ao inoxidvel (Figura 3), foram colocados os campos
operatrios estreis.


Figura 3 Tonsurotomia realizada na regio anterior do trax e
abdome.


- 14 -

O ato cirrgico foi realizado conforme as seguintes etapas:

1. Laparotomia longitudinal mediana medindo 7 cm de extenso, 4 cm
distalmente ao apndice xifoide (Figura 4 A);

2. Abertura da parede abdominal por planos (pele, subcutneo, aponeurose e
peritnio parietal) (Figura 4 B);

3. Resseco de fragmento de peritnio parietal, medindo 3 cm x 1 cm, situado 1
cm lateralmente as margens da inciso, com uso de molde para padronizar
o tamanho de todos os fragmento ressecados (Figuras 4 C). Aparncia da
parede abdominal aps a retirada do fragmento de peritnio parietal (Figura 4
D).


Figura 4 Laparotomia mediana longitudinal (A), abertura e afastamento por planos
das bordas da parede abdominal do coelho, (B), molde de plstico (seta), medindo 3
cm x 1 cm, utilizado para padronizao da retirada de fragmento de peritnio da
parede abdominal do coelho (C) e aparncia da parede abdominal (seta) aps a
retirada do fragmento de peritnio parietal (D).
- 15 -


4. Aplicao perioperatria do laser de baixa intensidade nos Grupos GL1 e
GL2 em quatro pontos, 1 cm distantes entre si, dois na lateral direita e dois
na lateral esquerda, nos locais onde foram retirados os retalhos (Figura 5 A e
B).


Figura 5 Aplicao perioperatria do laser de baixa intensidade na lateral direita (A) e
esquerda (B) da parede abdominal do coelho, logo aps a peritoniectomia.

5. Sutura contnua da ferida cirrgica, em planos (aponeurose e peritnio parietal e
pele) com fio de nylon 3-0 (Thecnofio, Goinia, GO) (Figura 6).

Figura 6 Sutura da ferida cirrgica em planos:
aponeurose e peritnio parietal e pele, com nylon 3-0.
- 16 -

Todos os animais do GC foram submetidos ao mesmo procedimento, porm sem a
aplicao do laser de baixa intensidade.

3.8. EQUIPAMENTO E PARMETROS DE UTILIZAO DO LASER DE BAIXA
INTENSIDADE

O aparelho utilizado no experimento foi o Twin Flex Evolution Laser (Figura 8),
fabricado pela MM Optics Ltda. Caractersticas do laser: meio condutivo InGaAIP,
comprimento de onda de 658 nm +- 10 nm, luz visvel vermelha, rea do spot igual
a 0,04 cm
2
, operao em modo contnuo, potncia mxima de sada de 40 mW +-
20%.

Os parmetros adotados para aplicao do laser de baixa intensidade foram:

GL1 - Dose: 0,2 J, fluncia de 5 J/cm
2
. Aplicado no peri e ps-operatrio,
aplicao realizada perpendicularmente ao tecido cicatricial e em contato direto
com o mesmo, com tempo de aplicao de 40 s por ponto, na potncia de 5 mW,
aplicados em 4 pontos por animal em cada sesso diria durante 4 dias;

GL2 - Dose: 3,6 J, fluncia de 90 J/cm
2
. Aplicado no peri e ps-operatrio,
aplicao realizada perpendicularmente ao tecido cicatricial e em contato direto
com o mesmo, com tempo de aplicao de 90 s por ponto, na potncia de 40
mW, aplicados em 4 pontos por animal em cada sesso diria durante 4 dias;

- 17 -


Figura 7 Aparelho Twin Flex Evolution Laser , InGaIP, 658
nm, vermelho.

A caneta de aplicao foi mantida perpendicular rea aplicada e em contato direto
com a pele do animal. A ponteira foi protegida com filme de PVC, incolor, que foi
devidamente esticado, evitando a formao de dobras que poderiam prejudicar a
transmisso do feixe de luz laser (Figura 9). O filme foi trocado a cada aplicao. As
aplicaes foram realizadas com a utilizao de culos de proteo fornecidos pelo
fabricante do equipamento (Figura 10).


- 18 -


Figura 8 Proteo da caneta laser com filme de PVC
incolor (seta).


Figura 9 culos de proteo para aplicao do laser de
baixa intensidade.



- 19 -

3.9. CUIDADOS GERAIS DURANTE A APLICAO DO LASER DE BAIXA
INTENSIDADE NO PS- OPERATRIO

Aps o ato cirrgico os coelhos permaneceram em temperatura ambiente, com livre
acesso gua potvel e rao de origem industrial padronizada. Cumpriram ciclo
normal de dia e de noite.

Os animais do GL1 e GL2 receberam, na pele, uma aplicao diria de laser de
baixa intensidade na mesma dose utilizada no peroperatrio, a partir do horrio da
cirurgia inicial, durante os quatro primeiros dias de ps-operatrio. Foi utilizado um
molde (Figura10) para padronizao da aplicao do laser. Cada aplicao foi
realizada em quatro pontos, dois na lateral direita e dois na lateral esquerda,
afastados 1,5 cm da linha mdia e com a distncia de 1 cm entre os pontos de
aplicao (Figura 10).


Figura 10 Aplicao diria do laser de baixa intensidade no ps-
operatrio, em quatro pontos distintos, dois em cada lado da
resseco peritoneal, com base no molde plstico padro, durante
os quatro primeiros dias de ps-operatrio.


- 20 -


3.10. NECROPSIA DOS ANIMAIS

Todos os animais foram sacrificados no 14 dia ps-operatrio, por pneumotrax,
aps anestesia intramuscular de cloridrato de cetamina (Cetamin, Syntec, Cotia,
SP), na dose de 50mg/kg.

A cavidade abdominal foi examinada aps uma ampla laparotomia mediana
longitudinal em forma de "U" invertido abraando a cicatriz cirrgica (Figura 11 A e
B).


Figura 11 Esquema da inciso em U invertido na parede abdominal anterior (A). Exame
da cavidade abdominal atravs da inciso em forma de U invertido (B).

3.11. ANLISE DAS ADERNCIAS

A constatao da formao ou no de aderncias foi realizada atravs da avaliao
da regio da cicatriz cirrgica no peritnio. Todas as aderncias encontradas foram
contadas e estudadas.




- 21 -

3.11.1. PARMETROS QUANTITATIVOS E QUALITATIVOS

A qualificao e a quantificao das aderncias foram baseadas no estudo de
MORENO-EGEA, AGUAYO, ZAMBUDIO e PARRILLA (1993), modificado. (40).
Foram avaliados os seguintes parmetros das aderncias:

1) Animais livres de aderncia: foram relacionados ao nmero de animais
onde no havia a formao de aderncia (Figura 17 A e B);

2) Nmero: foi relacionado quantidade de aderncias encontradas (Figura 12);

3) rea: foi mensurada atravs de paqumetro digital, tendo sido realizadas duas
medies por aderncia, a primeira referindo-se superfcie de contato entre as
estruturas aderidas (Figura 13 A) e a segunda referindo-se espessura da
aderncia (Figura 13 B). A partir dessas duas dimenses foi calculada a rea de
aderncia;

4) Tenacidade: as aderncias foram caracterizadas como frouxa (a aderncia
que se descolava facilmente, sem necessidade de disseco) e firme (quando
houvia necessidade de disseco para ser descolada);

5) Vascularizao: presena ou no de vasos sanguneos na aderncia, sem o
uso de lentes de aumento;

6) Localizao: foi classificada da seguinte forma: aderncia entre o peritnio
parietal e o omento, entre o omento e alas intestinais, entre rgos e entre
peritnio parietal e alas intestinais.


- 22 -


Figura 12 Contagem do nmero de aderncias abdominais.

Figura 13 Medio da superfcie de contato entre as estruturas (A) e da espessura
das aderncias (B).

3.12. EXAME HISTOLGICO

Foi realizado exame histolgico de segmentos da parede abdominal na regio da
cicatriz cutnea e das aderncias formadas. Todos os fragmentos foram coletados
no 14 dia ps-operatrio, fixados em soluo de formaldedo a 4% (formol a 10%).
- 23 -

De cada segmento, foram colhidos fragmentos para exame histolgico, includos em
parafina, de acordo com mtodos rotineiros do Laboratrio do Departamento de
Patologia da Faculdade de Cincias Mdicas de Minas Gerais. Foram realizados
cortes histolgicos de 4-5 m de espessura que foram corados por hematoxilina e
eosina (HE). Os exames histolgicos foram realizados, no Servio de Anatomia
Patolgica da Santa Casa de Belo Horizonte, por um nico patologista, sem
conhecimento prvio dos animais e grupos avaliados. As lminas foram examinadas
em microscpico de luz com aumentos de 40X e 100X.

Para a padronizao das avaliaes foram definidos os seguintes critrios:

1) Intensidade do processo inflamatrio (cicatriz cirrgica e aderncia):

a. Processo inflamatrio ausente (ausncia de clulas inflamatrias);

b. Processo inflamatrio leve a moderado (presena leve ou moderada de
clulas inflamatrias);

c. Processo inflamatrio intenso (presena intensa de clulas inflamatrias).

2) Vascularizao das aderncias:

a. Ausncia de vasos sanguneos;

b. Presena de vasos sanguneos.

3.13. ENSAIO MECNICO DE RESISTNCIA TRAO

Para a realizao do ensaio mecnico de resistncia trao da pele e da parede
abdominal sem a pele foi utilizada uma mquina universal de ensaio, marca Kratos
, modelo DEK 200 kgf, do Laboratrio de Anlises Mecnicas da empresa AG-
REMY Stretch Film do Brasil Ltda, Belo Horizonte/MG. Essa mquina foi equipada
com uma clula de carga de 20 kgf e interface direta a um microcomputador, com
- 24 -

software especfico, responsvel pelo comando do equipamento e plotagem do
grfico carga versus deslocamento de cada ensaio (Figura 14).


Figura 14 Mquina universal de ensaio da marca Kratos .
A parede abdominal foi retirada e um corpo de prova foi confeccionado com bisturi,
atravs de um molde plstico, visando padronizao dos mesmos (Figura 15). A
cicatriz cirrgica foi colocada no centro do molde (Figura 15, seta).


Figura 15 - Confeco do corpo de prova com molde
plstico (*) medindo 8 cm x 2,5 cm. Indicao da posio
da cicatriz cirrgica (seta).

- 25 -

Foi feita a separao da pele do restante da parede abdominal utilizando-se bisturi.
Os fragmentos da parede abdominal sem a pele e da pele foram acondicionados em
frascos, individualmente identificados e umedecidos com gaze embebida em soluo
salina. Os ensaios foram realizados no tempo mximo de 3 horas aps a preparao
dos corpos de prova.

No momento do ensaio, os fragmentos da parede abdominal sem a pele e da pele
foram acoplados ao equipamento conforme metodologia estabelecida pelo
laboratrio da empresa AG-Remy Stretch Film do Brasil Ltda, sendo que o centro da
cicatriz cirrgica foi colocado distncia mdia das duas garras. A distncia total
entre garras foi fixada em 5 cm e foi aplicada uma pr-carga de 0,100 kgf, durante o
tempo de acomodao de 3 segundos, com o objetivo de provocar acomodao do
sistema. Aps a pr-carga, o ensaio prosseguiu com velocidade de deslocamento de
100,00 mm/min, temperatura ambiente de 25C e umidade relativa de 50%. A carga
aplicada foi registrada pelo software em intervalos regulares de alongamento at que
a resistncia elstica fosse vencida, ou seja, a partir desse ponto a deformao do
tecido irreversvel (Figura 16). O resultado do limite da resistncia mxima foi
registrado em kgf/mm
2
.


Figura 16 Fragmento da pele sob trao. Observar
cicatriz na parte central (seta).
- 26 -

3.14. ANLISE ESTATSTICA

As informaes coletadas foram digitadas em planilhas eletrnicas no aplicativo
Excel. As anlises foram realizadas atravs de calculadora livre disponvel nos
endereos eletrnicos: http://faculty.vassar.edu/lowry/anova1u.html para o teste
ANOVA e Tukey HSD Test e http://faculty.vassar.edu/lowry/fisher2x3.html para o
teste Freeman-Halton, extenso do teste exato de Fisher.

Os resultados foram obtidos utilizando frequncia e porcentagens para as
caractersticas das variveis categricas e da medida de tendncia central (mdia e
mediana) e de disperso (desvio-padro) para as variveis quantitativas.
As variveis categricas foram comparadas, entre os grupos, utilizando o teste
Freeman-Halton, extenso do teste exato de Fisher. As variveis quantitativas foram
comparadas, entre grupos, utilizando o teste Anova. Quando se verificou diferena
com significncia estatstica, foi realizado o teste de Tukey HSD para verificar quais
grupos eram diferentes entre si. As anlises estatsticas foram consideradas
significativas para p<0,05.

- 27 -

4. RESULTADOS

Todos os animais recuperaram-se espontaneamente no ps-operatrio e
sobreviveram durante os 14 dias do experimento, sem intercorrncias, quando foram
sacrificados.

4.1. ACHADOS MACROSCPICOS

Feita a comparao quanto presena de aderncias abdominais observou-se que
somente trs (37,5%) coelhos do grupo GL2 apresentaram aderncias enquanto
todos os animais dos grupos GC e GL1 apresentaram este tipo de formao (Tabela
4.1.1)

Tabela 4.1.1 Presena de aderncia abdominal nos animais do trs grupos no 14 dia ps-
operatrio.
ADERNCIA

GRUPOS
Valor-p GC GL1 GL2
Presente
Ausente
8 (100%) 8 (100%) 3 (37,5%)
- - 5 (62,5%)


0,003*

GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J

; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J. Valores
expressos em nmeros absolutos e porcentagem. * Teste Freeman-Halton, extenso do teste exato
de Fisher.
- 28 -

5.
Figura 17 Exame da cavidade abdominal constatando ausncia de aderncia
abdominal em animais n. 2 e 5 do GL2 (Grupo laser dose 3,6 J), respectivamente
(A e B). Presena de aderncia abdominal entre parede abdominal e intestino
grosso no coelho n. 4 do GC (Grupo Controle) (C) e no coelho n. 6 do GL1 (Grupo
laser dose 0,2 J) (D).

Aps contagem das aderncias abdominais entre animais dos trs grupos verificou-
se que nos animais do grupo GL2 o nmero de aderncias foi significativamente
menor do que nos animais dos outros grupos (GC e GL1) (Tabela 4.1.2).

- 29 -

Tabela 4.1.2 - Comparao entre nmero de aderncias abdominais entre animais dos trs
grupos no 14 dia ps-operatrio.
NMERO DE ADERNCIAS

GRUPOS


Valor-p
ANIMAL
GC GL1 GL2
1 2 7 0
2 3 3 0
3 4 2 0
4 2 2 0
5 4 1 1
6 4 3 1
7 3 4 0
8 3 1 1
TOTAL (Mdia+-DP) 3,13+-0,83 2,88+-1,96 0,38+-0,52
0,000414*

GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J
;
GL2 = Grupo laser dose 3,6 J.
Os valores expressos em mdia +- desvio padro. * Anova (p=0,000414). Teste de Tukey para
anlise de comparao mltipla: GL2<GC=GL1.

A Tabela 4.1.3 mostra a comparao das reas de aderncia abdominal nos animais
dos trs grupos. O valor da rea corresponde multiplicao da medida da
superfcie de contato entre as estruturas aderidas e a da espessura da aderncia
(Figura 18). Observa-se que a rea de aderncia formada no grupo GL2
significativamente menor do que nos outros grupos (GC e GL1).
Tabela 4.1.3 - Comparao entre reas de aderncias abdominais entre animais dos trs
grupos no 14 dia ps-operatrio.
GRUPOS AREA (cm
2
) Valor-p
GC 1.75 0.89

GL1 2.00 0.93

GL2 0.50 0.76


0.0062*

GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J

; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J
Os valores expressos em mdia +- desvio padro. * Anova (p=0,0062). Teste de Tukey para anlise
de comparao mltipla: GL2<GC=GL1.

- 30 -


Grfico 1 Resumo das avaliaes quantitativas das aderncias encontradas nos trs grupos.


Figura 18 Medio da superfcie de contato entre estruturas aderidas (A), coelho nmero
dois do GC (Grupo Controle) e da espessura das aderncias (B), coelho nmero trs do
GC (Grupo Controle).

No foi verificada diferena quanto tenacidade da aderncia abdominal entre
animais submetidos ou no ao laser de baixa intensidade (p=0,7107) (Tabela 4.1.4).



0
5
10
15
20
25
Presente Ausente Nmero Area (cm2)
GC 8 0 25 1,75
GL1(0.2J) 8 0 23 2
GL2(3,6J) 3 5 3 0,5
Aderncias - Resumo Avaliao Quantitativa
- 31 -

Tabela 4.1.4 - Tenacidade das aderncias abdominais entre animais dos trs grupos no 14 dia
ps-operatrio.
ADERNCIA

GRUPOS
Valor-p GC GL1 GL2
Firme 9 (36%) 15(65%) 3(100%)
Frouxa 16(64%) 8(35%) -


0.7107*

GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J

; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J. Valores
expressos em nmeros absolutos e porcentagem. * Teste Freeman-Halton, extenso do teste exato
de Fisher: CG=GL1=GL2.


Figura 19 - Aderncias abdominais presentes no coelho nmero cinco do CG (Grupo
Controle) (seta) classificadas como firme (necessitou tripsia para ser desfeita) (A) e frouxa
(sem necessidade de tripsia para ser desfeita) presente no coelho nmero trs do GL1
(Grupo laser dose 0,2 J ) (B).

Quando avaliado macroscopicamente, o uso do laser no modificou a
vascularizao das aderncias, sendo as aderncias predominantemente
vascularizadas em todos os grupos, sem diferena entre eles (p=0,82) (Tabela
4.1.5).



- 32 -

Tabela 4.1. 5- Vascularizao das aderncias abdominais entre animais dos trs grupos no 14 dia
ps-operatrio.
ADERNCIA

GRUPOS


Valor-p GC GL1 GL2
Vascularizada 20 (80%) 20(86.96%) 3(100%)
Avascularizada 5(20%) 3(13.04%) -


0.8240*

GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J

; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J. Valores
expressos em nmeros absolutos e porcentagem. * Teste Freeman-Halton, extenso do teste exato
de Fisher: GC=GL1=GL2.


Quanto localizao nenhuma aderncia presente nos coelhos do grupo GL2
envolveu estruturas viscerais. Entretanto houve envolvimento de estruturas viscerais
em 72% dos animais do GC e em 83% dos animais do GL2 (Tabela 4.1.6).

Tabela 4.1. 6- Comparao entre a localizao das aderncias abdominais entre animais
dos trs grupos no 14 dia ps-operatrio.
LOCALIZAO DAS ADERNCIAS

GRUPOS
GC GL1 GL2



Parede e Omento 7 (28%) 4 (17%) 3 (100%)

Omento e Intestinos 9 (36%) - -

Entre rgos 1 (4%) 5 (22%) -

Parede e Intestinos

8 (32%) 14 (61%)
-
GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J
;
GL2 = Grupo laser dose 3,6 J. Valores expressos
em nmeros absolutos e porcentagem.
- 33 -



Figura 20 - Aderncia abdominal entre parede e intestino grosso (seta) no coelho nmero dois
do GC (Grupo Controle) (A) e parede e omento (seta) no coelho nmero sete do GL2 (Grupo
laser dose 3,6 J) (B).

Grfico 2 - Resumo das avaliaes quanlitativas das aderncias encontradas nos trs grupos.

4.2. ENSAIOS MECNICOS
No foi verificada diferena quanto ao limite de resistncia trao da pele nos
animais submetidos ou no ao laser de baixa intensidade (p=0,3106) (Tabela 4.2.1).
0
10
20
30
40
50
60
70
Firmes Frouxas Vascularizadas Avascularizadas Envolvimento
Intestinal (%)
9
16
20
5
68
15
8
20
3
61
3 3
0
Aderncias Resumo Avaliao Qualitativa
GC GL1(0.2J) GL2(3,6J)
- 34 -

Tabela 4.2. 1 - Limite de resistncia trao da pele entre animais dos trs grupos no 14 dia
ps-operatrio.
GRUPOS LIMITE DE RESISTNCIA TRAO (KGF/MM
2
) Valor-p
GC 4,23 1,20

GL1 3,10 1,79

GL2 3,42 1,25


0,3106*
GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J

; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J
Os valores expressos em mdia +- desvio padro. * Anova (p=0,3106).

Quando comparamos o limite de resistncia trao da parede, exceto pele; os
grupos irradiados com laser no apresentaram limite diferente daquele apresentado
pelo grupo controle (GC), porm GL2 obteve resultado superior ao do GL1 (p=0,001)
(Tabela 4.2.2).

Tabela 4.2. 2- Limite de resistncia trao da parede e entre animais dos trs grupos no 14
dia ps-operatrio.
GRUPOS LIMITE DE RESISTNCIA TRAO (KGF/MM
2
) Valor-p
GC 3,70 0,89

GL1 2,79 0,74

GL2 4,88 1,21



0,001*
GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J

; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J
Os valores expressos em mdia +- desvio padro. * Anova (p=0,01). Teste de Tukey para anlise de
comparao mltipla: GC=GL1, GC=GL2, GL2>GL1.

4.3. EXAMES LABORATORIAIS
A comparao entre o leucograma no pr-operatrio (D0) e no 4 dia de ps-
operatrio (D4), entre os animais dos trs grupos foi realizada e no foram
observadas diferenas entre os grupos (p<0,05) (Tabela 4.3.1).


- 35 -

Tabela 4.3. 1 - Resultado do Leucograma (mdia e desvio padro) dosado nos animais dos trs
grupos no pr-operatrio (D0) e no 4 dia ps-operatrio (D4).

TEMPO

VALORES DE
REFERNCIA
EM D0

D4
Valor-p *
DADOS
LEUCOGRAMA
GRUPOS
GC GL1 GL2

WBC 10
3
/l 2,23 +- 0,74 4,15 +- 1,95 4,14 +- 1,86 2,13 +- 0,38 0,130
NEU (%) 54,53 +- 13,29 53,23 +- 17,65 50,70 +- 8,55 48,07 +- 7,86 0,908
LYM (%) 41,99 +- 13,83 43,23 +- 13,62 42,34 +- 10,56 46,37 +- 16,40 0,964
MONO (%) 2,27 +- 0,21 2,46 +- 0,35 5,03 +- 3,15 3,61 +- 0,37 0,518
EOS (%) 0,14 +- 0,02 0,20 +- 0,02 0,67 +- 0,09 0,25 +- 0,08 0,523
BASO (%) 1,06 +- 0,02 0,88 +- 0,01 1,23 +- 0,03 1,65 +- 0,08 0,293
RBC 10
6
/l 6,02 +- 0,52 4,96 +- 0,072 5,46 +- 1,04 5,8 +- 0,59 0,228
HGB g/dL 12,53 +- 0,76 10,33 +- 0,75 10,98 +- 1,79 12,27 +- 0,49 0,339
HCT (%) 39,54 +- 2,72 30,97 +- 3,13 34,70 +- 6,16 38,10 +- 2,21 0,329
PLT 10
3
/l 361,34 +- 63,97 295,83 +- 76,25 334,52 +- 80,85 471,00 +- 93,19 0,606

GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J
DO=Coleta Prvia ao Experimento, D4=4 dia de Ps-operatrio. Os valores expressos em mdia +-
desvio padro. * Anova. WBC=Leucocitos, NEU=Neutrfilos, LYM=Linfcitos, MONO=Moncitos,
EOS=Eosinfilos, BASO=Basfilos, RCB=Eritrcitos, HGB=Hemoglobina, HCT=Hematcrito e
PLT=Plaquetas.



Quando avaliado o processo inflamatrio encontrado na cicatriz cirrgica verificou-se
que todos os animais apresentavam infiltrado inflamatrio, predominantemente
composto por polimorfonucleares (Figura 21). No foram constatadas diferenas
entre os grupos (tabela 4.3.2).



- 36 -

Tabela 4.3. 2- Intensidade do processo inflamatrio na cicatriz cirrgica entre os animais dos
trs grupos no 14 dia ps-operatrio.
PROCESSO INFLAMATRIO
GRUPOS
Valor-p GC GL1 GL2
Ausente 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%)
Leve a Moderado 4 (50%) 7 (100%) 4 (50%)
Intenso 4 (50%) 0 (0%) 4 (50%)


0.0789*
GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J

; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J. Valores
expressos em nmeros absolutos e porcentagem. * Teste Freeman-Halton, extenso do teste exato
de Fisher: GC=GL1=GL2.


Figura 21 Microscopia da cicatriz cirrgica do coelho nmero dois,
Grupo GL1 (Grupo laser dose 0,2 J). Observar presena de processo
inflamatrio leve/moderado (setas) com predomnio de
polimorfonucleares (A) Aumento de 40x; (B) Aumento de 100x. Corado
com hematoxilina e eosina.
- 37 -

A avaliao do processo inflamatrio presente nas aderncias abdominais no
apresentou diferena entre os grupos (Tabela 4.3.3). A Figura 22 ilustra o processo
inflamatrio leve/moderado na aderncia.
Tabela 4.3. 3- Intensidade do processo inflamatrio nas aderncias abdominais entre animais
dos trs grupos no 14 dia ps-operatrio.
PROCESSO INFLAMATRIO GRUPOS
Valor-p GC GL1 GL2
Ausente 1(25%) 0(0%) 0(0%)
Leve a Moderado 3(75%) 7(100%) 1(100%)
Intenso 0(0%) 0(0%) 0(0%)


0.4166*
GC= Grupo Controle; GL1 = Grupo laser dose 0,2 J

; GL2 = Grupo laser dose 3,6 J. Valores
expressos em nmeros absolutos e porcentagem. * Teste Freeman-Halton, extenso do teste exato
de Fisher: GC=GL1=GL2.







- 38 -


Figura 222 - Microscopia da aderncia abdominal do coelho nmero dois,
Grupo GL1 (Grupo laser dose 0,2 J). Observar a presena de processo
inflamatrio leve/moderado (setas) com predomnio de clulas
polimorfonucleares. (A) Aumento de 40x; (B) Aumento de 100x. Corado com
hematoxilina e eosina.

- 39 -

Todas as aderncias avaliadas microscopia de luz apresentaram vascularizao
(P=1,00). A Figura 23 ilustra a presena de vasos sanguneos.


Figura 233 - Microscopia da aderncia abdominal do coelho
nmero 18, Grupo GL2 (Grupo laser dose 3,6 J). Observar
presena de vascularizao (setas). (A) Aumento de 40x; (B)
Aumento de 100x. Hematoxilina e eosina.


- 40 -

5. DISCUSSO
Aderncias abdominais continuam a ser um desafio para os profissionais da rea da
sade, sobretudo para os cirurgies. (41) Esto relacionadas com readmisso
hospitalar aps cirurgia abdominal e plvica (2) (5) (9), obstruo intestinal (7) (6)
(10; 41), infertilidade feminina e dor (42). Alm disso, representam um considervel
custo socioeconmico para o sistema de sade de diversos pases. (1) (2) (43)

Tripsia (lise de aderncias) a nica forma de tratamento para aderncias
abdominais instaladas. No entanto, esse procedimento acarreta um risco maior de
complicao perioperatria e alta taxa de recorrncia, no impedindo a recorrncia
de aderncias que podem levar a obstruo intestinal futura. (44) (41)

Fevang e colaboradores (2004) mostraram que cerca de 30% dos pacientes
submetidos tripsia em virtude de obstruo do intestino delgado necessitaram de
outra operao para liberar aderncias recorrentes. Esses dados tambm sugerem
que a cirurgia para lisar as aderncias quase to adesiognica quanto a operao
original. Dois teros das obstrues intestinais ocorreram nos cinco primeiros anos,
quase um quarto, nos 10 anos subsequentes e mesmo aps 20 anos o risco ainda
estava presente. Isso coloca claramente aderncias na categoria de complicao de
longo prazo. (45)

A preveno da formao das aderncias deve ser ento o foco das atenes. O
trauma peritoneal a base para a formao de aderncias abdominais aps
cirurgias. (12) Segundo Arung e colaboradores (2011) somente tcnica cirurgia
minuciosa pode ser recomendada para reduzir a formao de aderncias
persistentes, morbidade e taxas de mortalidade oriundas das mesmas. (46)

Reviso realizada por Arung e colaboradores (2011) investigou vrios agentes de
preveno contra a formao de aderncias ps-operatrias. Os agentes visavam
alterar a ativao da fibrinlise, dificultar a coagulao, diminuir a resposta
inflamatria, inibir a sntese de colgeno ou criar uma barreira fsica entre superfcies
de feridas adjacentes. Os resultados so encorajadores mas a maioria deles
contraditrios e realizados em modelos animais. (46)
- 41 -


No presente trabalho, foi escolhido o coelho como modelo experimental. Na
literatura, o coelho tem sido utilizado em cerca de 35% dos estudos do complexo
musculoesqueltico, em cincias biomdicas. Apresenta como vantagem o
tamanho, a facilidade de manuseio e o fato de atingir a maturidade esqueltica logo
aps a maturidade sexual, por volta dos seis meses de idade bem como similaridade
com a pele humana. (47) (48)

A peritoniectomia modelo experimental consagrado para induo da formao de
aderncias. (14) (15) Na presente pesquisa, tal interveno foi eficaz, uma vez que
todos os animais do grupo controle (GC) apresentaram aderncias. Esse achado
consistente com a literatura que identifica a agresso ao peritnio como uma das
causas da formao de aderncias. (49) (42) A etiologia das mesmas estaria ligada
s falhas no mecanismo de reparo peritoneal, fazendo ento surgirem cicatrizes que
se desenvolvem em locais de trauma, aps uma interveno cirrgica. (50) (51)

A utilizao do laser de baixa intensidade com o objetivo de auxiliar o reparo tecidual
j pesquisada desde 1963. (28) Seis artigos de reviso (30) (34) (35) (32) (37)
(31), publicados entre 2006 e 2010 e uma meta-anlise (33), publicada em 2009,
avaliaram os efeitos do mesmo sobre a cicatrizao de feridas e para alvio da dor.
Essas investigaes demonstraram que o laser de baixa intensidade tem um papel
relevante na cicatrizao de feridas, agindo por fotobioestimulao dos tecidos
lesados (35) (32), acelerando o reparo tecidual (31), modulando o processo
inflamatrio e reduzindo a dor aguda em decorrncia de processo inflamatrio (30).
Contudo considervel variao nos projetos de pesquisa, metodologia e parmetros
de irradiao empregados limitou a comparao dos resultados entre os estudos.
(30) (33) (31) (32)

Para definio dos parmetros de aplicao do laser necessrio considerar um
grande nmero de variveis. O que determina se a luz fotobioestimulante ou lesiva
ao tecido a intensidade (I), tambm chamada de irradincia ou densidade de
potncia. Intensidade definida como sendo a potncia til do laser, expressa em
Watts (W), dividida pela rea irradiada, expressa em centmetros quadrados (cm
2
). A
- 42 -

fluncia (F), tambm chamada de densidade de energia ou ainda dose de energia
(DE), o termo utilizado para descrever a taxa de energia que est sendo aplicada
no tecido biolgico e dada pela multiplicao da intensidade (expressa em Watts
por centmetro quadrado ou W/cm
2
), pelo tempo de exposio (em segundos) sendo
expressa em Joules por centmetro quadrado (J/cm
2
). Existe ainda a energia (E),
grandeza fsica que, na aplicao do laser, representa a quantidade de luz laser que
est sendo depositada no tecido e definida multiplicando-se a potncia ptica til
do aparelho (expressa em Watts) pelo tempo de exposio (expresso em segundos).
O resultado obtido tem como representao a unidade Joule (J). (29)

A maioria dos trabalhos descreve a dose em fluncia (J/cm
2
), outros em Joule (J),
mas no informa os outros parmetros como comprimento de onda, energia
depositada no tecido, densidade de energia, rea do feixe, tempo de aplicao,
potncia de pico (modo contnuo) ou potncia mdia (modo pulsado) e densidade de
potncia. A falta de dados completos dificulta a reproduo e comparao de
resultados. (29) (52)

Segundo o WALT (World Association for Laser Therapy), necessria aplicao de
1 a 4 J de energia final para alcanar efeitos fotobioestimulantes pelo laser de baixa
intensidade, para comprimentos de onda de 780 a 904 nm, no existindo uma tabela
de referncia para o comprimento de onda de 660 nm. (52) No presente trabalho,
foram utilizadas duas doses de laser, uma fora da janela teraputica (5J/cm
2
por 40 s
= 0,2J) e uma prxima ao final da janela (90J/cm
2
por 90 s = 3,6J), com o objetivo de
saber se a janela teraputica proposta por WALT tambm se aplicaria ao laser no
comprimento de onda de 660 nm.

Uma das dificuldades em se conduzir uma pesquisa sobre formao de aderncias
tem sido a falta de uniformidade nas classificaes e interpretaes das aderncias
encontradas na literatura. (13) (15) (20). A maioria dos mtodos utiliza ndices
compostos por diversos parmetros, no informando de forma precisa a avaliao
de cada um deles. Uso de termos subjetivos como nmero reduzido (53),
aderncias generalizadas (54), vascularizao limitada (55), aderncias
- 43 -

moderadas (53), aderncias mnimas (56) tambm dificultam a comparao dos
resultados.
Na avaliao da presena ou ausncia de aderncias, o laser de baixa intensidade,
na dose de 3,6 J (dentro da janela teraputica) grupo GL2, foi capaz de reduzir
significativamente essa formao. A aplicao na dose de 0,2 J (fora da janela
teraputica) grupo GL1, teve resultado igual ao do grupo controle (GC). O ndice de
animais do grupo GL2 livre de aderncias (62,5%) foi superior ao alcanado pela
membrana reabsorvvel Seprafilm (51%) (57), considerado, atualmente, um dos
mtodos mais eficazes para diminuir a formao de aderncias. (46) No entanto, o
uso de Seprafilm aumenta significativamente a incidncia de abscessos
abdominais e deiscncias e fstulas de anastomoses em cirurgia potencialmente
contaminadas. (58)

D`Oliveira e colaboradores (2001) avaliaram o uso da Rifamicina para prevenir
aderncias no ps-operatrio de ratos submetidos apenas laparotomia. Foi
verificada mdia de 3,4 aderncias por animal, nmero superior presente
investigao. Deve-se levar em conta que, no presente trabalho, realizou-se, alm
da laparotomia, uma resseco bilateral de fragmento peritoneal, o que
provavelmente estimularia ainda mais o surgimento de aderncias. (53)
Na dose de 3,6 J

(dentro da janela teraputica), a aplicao do laser de baixa
intensidade foi eficaz em reduzir a rea das aderncias formadas. Lamentavelmente,
a medio da rea de formao de aderncia incomum nos trabalhos levantados
na Literatura, o que dificulta a comparao dos dados desse experimento. (15) (13)
(20) A dificuldade de mensurao desse parmetro tambm pode ser um fator
limitante, pois as aderncias no se apresentam de forma uniforme. No presente
trabalho, o mtodo empregado original e buscou apresentar os dados referentes
ao contato entre as superfcies aderidas. Acredita-se que novos trabalhos devam ser
conduzidos para esclarecimento dos mecanismos fisiopatolgicos dessa reduo.

A ausncia de diferena entre as tenacidades das aderncias entre os grupos
sugere que a aplicao do laser de baixa intensidade no modificou a qualidade do
tecido tratado. Embora no existam estudos semelhantes, algumas investigaes
- 44 -

demonstraram que a aplicao do laser de baixa intensidade no altera a qualidade
do tecido cicatricial formado, somente acelerando o processo de cicatrizao, o que
poderia explicar, em tese, a ausncia de diferena entre os grupos. (32) (36) (31)
(33) (35)

No presente trabalho, do total de 53 aderncias formadas, 45 (84,90%) eram
vascularizadas quando observadas a olho nu e quando a avaliao foi realizada
microscopia de luz, 100% eram vascularizadas. Esse achado est de acordo com a
literatura que descreve as aderncias como tecido altamente vascularizado,
contendo arterolas, vnulas e capilares bem desenvolvidos. (60) (4) (15)

O maior envolvimento do intestino grosso e delgado pelas aderncias semelhante
aos demais trabalhos, (1) (6) (2) (41), contudo na dose de 3,6 J

(dentro da janela
teraputica), a aplicao do laser de baixa intensidade foi capaz de minimizar esse
envolvimento. Todas as aderncias formadas no grupo GL2 (3,6J) envolveram
somente parede e omento. Segundo a literatura, o laser de baixa intensidade
acelera o processo cicatricial. possvel que a resoluo mais rpida da
cicatrizao tenha reduzido a gravidade das aderncias. Aderncias que poupam o
intestino tm menor chance de se tornarem sintomticas e causarem abdome
agudo. (33) (31) (37)
Os estudos biomecnicos tm por objetivo determinar as propriedades mecnicas
de um material e, dependendo de suas caractersticas fsicas, pode-se submet-lo
aos ensaios de trao, toro, compresso e flexo. (61) No presente trabalho, foi
realizado teste de limite de resistncia trao com o objetivo de identificar se a
aplicao do laser de baixa intensidade alteraria esse limite no tecido cicatricial da
pele e da parede abdominal exceto a pele. Buscou-se identificar o limite elstico, ou
seja, ponto no qual o tecido no sofre uma deformao definitiva. Interrompendo o
ensaio antes deste ponto e retirando a fora de trao, o corpo de prova volta sua
forma original, tal como um elstico.
A aplicao do laser, seja dentro (3,6J GL2) ou fora da janela teraputica (0,2 J
Gl1), no alterou o limite de resistncia trao da pele quando comparado ao
grupo controle (GC - sem tratamento). Esse achado est de acordo com a literatura,
- 45 -

confirmando que a aplicao do laser de baixa intensidade no altera a qualidade do
tecido cicatricial formado, o que poderia explicar a ausncia de diferena entre os
grupos. (32) (36) (31) (33) (35)

Pelo fato de no haver um suporte sseo na parede da cavidade abdominal, sua
resistncia derivada inteiramente da conformao das estruturas moles que a
compem. A resistncia da parede abdominal de grande importncia, pois o seu
enfraquecimento o principal responsvel pela formao de hrnias e eventraes.
A aplicao do laser dentro (3,6J GL2) ou fora da janela teraputica (0,2 J Gl1)
no alterou o limite de resistncia trao da parede abdominal quando comparado
ao grupo controle (GC - sem tratamento), evidenciando que a aplicao do laser no
promoveu enfraquecimento da parede abdominal, sendo seu uso seguro em
cirurgias abdominais, no tocante formao de hrnias e eventraes.

A comparao do leucograma dos animais no pr-operatrio (D0) e no 4 dia de ps-
operatrio (D4) no apresentou diferena significativa entre os grupos assim como a
avaliao do marcador de fase aguda PCR. Na avaliao da PCR, tendo em vista
que os resultados em todos os animais foram inferiores a 10 mg/L, optou-se tambm
por realizar a dosagem dessa protena por mtodo ultrassensvel, com objetivo de
avaliar se haveria ou no diferena entre os grupos. O PRC ultrassensvel no
apresentou diferena. Inadequao do Kit utilizado para dosagem em animais ou a
PCR em coelhos no ser um bom marcador para monitoramento do processo agudo
talvez possa explicar a falta de diferena entre os grupos. Reviso conduzida por
Nunes e colaboradores (2011) avaliando pacientes no ps-operatrio, de diversos
tipos de cirurgia indicou que o pico de concentrao srica de PCR ocorre entre o
segundo e terceiro dia de ps-operatrio quando cai rapidamente na ausncia de
complicaes. Talvez o comportamento da PCR em coelhos seja semelhante ao dos
humanos e o fato de se terem colhido as amostras no quarto dia de ps-operatrio
tambm possa justificar a ausncia de diferena entre os grupos. (62). De acordo
com esses dados, no se observou efeito deletrio sistmico do laser no processo
inflamatrio e nas clulas sanguneas, sendo seu uso seguro.

- 46 -

A comparao da intensidade do processo inflamatrio da ferida cirrgica no 14 dia
de ps-operatrio no apresentou diferena entre os grupos, o mesmo acontecendo
quando foi feita a avaliao da intensidade do processo inflamatrio nas aderncias
formadas. Esses resultados so divergentes da literatura que preconiza que a
terapia laser de baixa intensidade reduz o processo inflamatrio. (32) (36) (31) (33)
(35). O pequeno nmero de amostras talvez explique a ausncia de diferena entre
os grupos.

Novos estudos utilizando-se diferentes dosagens de laser e outros comprimentos de
onda devem ser realizados de maneira a se compreender melhor o mecanismo de
atuao do laser de baixa intensidade.


- 47 -

6. CONCLUSES

A aplicao do laser de baixa intensidade na dose de 3,6 J, fluncia de 90 J/cm
2
,
potncia de 40 mW e tempo de 90 s eficaz na reduo da formao, nmero e
rea de aderncias abdominais em coelhos, sem modificar as caractersticas
(tenacidade, vascularizao e inflamao) e sem comprometer a resistncia
cicatricial ps-operatria da parede abdominal.

- 48 -

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ANEXO 1

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