BIOSEGURIDAD Y ESTERILIZACION EN EL LABORATORIO DE

MICROBIOLOGIA.
2013-2.

BIOSEGURIDAD Y ESTERILIZACION EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA.
Zambrano, A. 1120104
1
; Libreros, C. 112058
1

1
Ingeniera Agronmica.
Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira


RESUMEN
La prctica realizada se bas en reconocer las diferentes tcnicas que se aplica para realizar una
adecuada esterilizacin de los implementos del laboratorio de microbiologa, adems de las medidas de
bioseguridad que siempre deben ser tomadas para permitir un uso adecuado de los espacios y que
permita la seguridad ante los riesgos o peligros latentes cuando se entr en contacto con los utensilios.
Con base a lo anterior, la esterilizacin se pudo realizar por diversas metodologas tales como: calor
hmedo, calor seco, filtrado; las cuales se llevaron a cabo por la utilizacin de equipos como Autoclave y
Hornos. La utilizacin en conjunto de las medidas y tcnicas conllev a una completa eliminacin de
microorganismos permitiendo la utilizacin de los instrumentos, seguros que no representa ningn foco
de contaminacin.

Palabras claves: Bioseguridad, metodologas, esterilizacin, instrumentos.

INTRODUCCIN
La bioseguridad hace referencia a medidas
preventivas que pretenden disminuir el riesgo de
contaminacin del rea de trabajo y proteger la
salud de las personas que laboran e ingresan al
laboratorio, las cuales estn expuestas a
microorganismos patgenos infecciosos para la
salud; por esta razn es de vital importancia la
esterilizacin de los materiales a utilizar y el uso
adecuado de los mismos.
Muchos de los patgenos causantes de
enfermedades en las plantas se pueden aislar y
cultivar in vitro, razn por la cual se han llevado
mltiples investigaciones en reconocimiento y
clasificacin de estos Fitopatgenos. Cuando se
hacen cultivos in vitro se debe tener un campo
libre de microorganismos que puedan
contaminar los cultivos, por lo cual es tan
importante la esterilizacin y desinfeccin. El
objetivo de la prctica fue conocer los aspectos
bsicos de bioseguridad y reconocer las
metodologas existentes para la esterilizacin,
as como aplicar algunos mtodos para
esterilizar medios de cultivo y materiales de
laboratorio.

MATERIALES Y METODOS.
Se utilizaron 5 cajas de Petri, 5 tubos de ensayo,
5 pipetas de 1mL, 2 Erlenmeyer, papel kraft,
algodn, 1 mecheros de bunsen o de alcohol,
estufa elctrica, 2 tubos con solucin glucosa,
frasco de vidrio de boca ancha, cinta de
enmascarar, asas bacteriolgicas y micolgicas,
tijeras, encendedor, isotopos, baja lenguas,1
autoclave, horno de calor hmedo y calor seco.


Se aplicaron los mtodos de esterilizacin para
los diferentes materiales a utilizar.
Se desinfecto el espacio de trabajo,
utilizando alcohol y luego se limpi con
una toalla de papel.
Se recort el papel kraft para envolver las
cajas de Petri para su respectiva
esterilizacin.
Se esterilizo las asas micolgicas y
bacteriolgicas, primero desinfectndolas
con alcohol y luego sometidas a
calentamiento a travs del mechero de
bunsen o de alcohol.
Se introdujeron los isotopos en un tubo
que posteriormente se ajust muy
levemente, para luego ser llevado a la
autoclave.
Las tijeras se introdujeron al frasco de
vidrio, e igual procedimiento se hizo con
el Erlenmeyer y las asas, las cuales se
cubrieron los bordes con el papel kraft.

RESULTADOS Y DISCUSIN.

Al someter cada uno de los materiales de
laboratorio a su respectivo mtodo de
esterilizacin, se obtuvo la destruccin completa
y una posterior inhibicin de los
microorganismos presentes, obteniendo como
resultado materiales completamente
desinfectados.

Para evitar cualquier tipo de contaminacin, se
utilizo diferentes tcnicas de esterilizacin que
garanticen una completa eliminacin de agentes
patgenos
Presentes en los materiales utilizados en la
prctica de laboratorio.

Un aspecto importante a tener en cuenta con los
microorganismos es conocer la naturaleza de
estos para saber cul es el mtodo que favorece
su eliminacin; de esa manera se obtienen
muestras con alta confiabilidad.
La desinfeccin del espacio de trabajo, se logro
eficientemente, aunque cabe recordar que este
mtodo no elimina completamente los
microorganismos.

Las normas bsicas de bioseguridad son de vital
importancia para la proteccin del personal de
laboratorio. En esta ocasin se emple
principalmente la esterilizacin para eliminar
microorganismos de los elementos de trabajo,
evitando as la contaminacin de la muestra,
recipientes y material de trabajo.
Los mtodos de desinfeccin y esterilizacin se
utilizan para garantizar que el personal est en
condiciones de utilizar el laboratorio, as como
los objetos que se utilizaron con mayor
frecuencia puedan estar limpios y adecuados
para su uso.

CUESTIONARIO
1. Liste al menos tres microorganismos
representativos para cada uno de los
cuatro niveles de contingencia en los
laboratorios de microbiologa,
mencionando la importancia que
representa para su rea de formacin.
R/ Nivel 1: Fijacin de nitrgeno Rhizobium,
descomposicin completa de materia
orgnica Nitrobacter, la produccin de cido
lctico, Lactobacillus
Nivel 2: Hepatitis B, Hepatitis A y
Salmonella. Microorganismos de riesgo
moderado humano y veterinario.
Nivel 3: Mycobacterium tuberculosis,
Brucella, virus oncognicos.
Microorganismos que pueden causar la
muerte o altos riesgos de infeccin.
Nivel 4: Virus Lassa, Machupo, Junn.
Microorganismos exticos y/o altamente
peligrosos. Saccharomyces cerevisiae

2. Qu medidas podra tomar usted para
verificar la efectividad de la esterilizacin
en autoclave?
R/ Con calor hmedo en autoclave tener los
objetos a 121C durante 20 minutos y a una
presin superior a la atmosfrica, tambin se
podra realizar con el indicador biolgico
Bacillus Estearothermophilus si la muestra
presenta un cambio de coloracin de amarillo a
violeta est indicando que la esterilizacin fue
incorrecta.
3. Defina liofilizacin?
R/ Es el proceso que remueve el agua y/o
solventes de un producto a travs de una
sublimacin y desorpcin, en donde las
propiedades biolgicas o quimias del producto
se mantienen de forma intacta.
4. Defina sonicacin?
R/ Consiste en la aplicacin de ultrasonidos a
una suspensin celular. La intensa agitacin
producida destruye las membranas celulares.
Dependiendo de la frecuencia, intensidad y
energa aplicada se pueden destruir asimismo
las estructuras subcelulares e incluso solubilizar
complejos proteicos.
5. Qu metodologa de esterilizacin es la
adecuada para cada una de las siguientes
muestras ambientales? (I) Medio de cultivo
slidos contaminados con Salmonella sp. (II)
Muestras de agua residual domestica, (III)
Hisopos utilizados en muestreo de
manipuladores de alimentos, (IV) Tejidos de
procedencia animal y origen desconocido, (V)
suelo, (VI) suelo inoculado con patgenos de
plantas y (VII) antibiticos.
R/ (I) (AUTOCLAVADO)
(II) (RADIACIONES ULTRAVIOLETA)
(III) (CALOR SECO-HORNO)
(IV) (AUTOCLAVADO)
(V) (CALENTAMIENTO, ADICIN DE
SUSTANCIAS QUMICAS COMO BROMURO
DE METILO O LUZ ULTRAVIOLETA)
(VI) (AUTOCLAVADO)
(VII) (FILTRACIN)

BIBLIOGRAFA
Libros
Madigan, et al. 2004. Biologa de los
microorganismos. Pearson educacin
S.A. 234p.
Rojas, A. 2011. Conceptos y prcticas de
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Nacional de Colombia, sede Palmira. 13
22p.
Schlegel H.G. 1997. Microbiologa
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Prats, G. 2005. Microbiologa clnica.
Edicin panamericana S.A. Madrid 219-
220p.

Pagina web
Organizacin Mundial de la Salud 2005,
Manual de Bioseguridad en el
Laboratorio. [En lnea]. Ginebra- Suiza.
Ediciones de la OMS. [Consultado
Agosto, 2012]. Disponible en internet
<http://whqlibdoc.who.int/publications/200
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