Instituto Tecnolgico de Pachuca.

Anlisis Instrumental.
Ing. Mara Juana Arriaga Gmez.
Grupo: 4Y6A
Ingeniera Qumica
Resumen de la Unidad I:
Generalidades del anlisis Instrumental.
Equipo: 2
Cabrera Olvera ngel de Jess
Espinoza Jurez Yael
Jimnez Misael
Hernndez Cruz Mayra Diane
Islas Snchez Amrica Anabel
Reyes Quijano Mara del Socorro
1.1.- Mtodos clsicos e instrumentacin:

Mtodos clsicos, que se basaban en propiedades qumicas del analito. Se incluyen
las gravimetras, las volumetras y los mtodos de anlisis cualitativo clsico.
Mtodos instrumentales, basados en propiedades qumico-fsicas. La clasificacin
de los mtodos instrumentales se realiza en base a la propiedad que se mide
(espectroscpicos, electro analticos, trmicos...).

1.2.- Clasificacin de las tcnicas instrumentales.

Las tcnicas analticas instrumentales las podemos clasificar en dos grupos:
- Tcnicas totales, donde la seal es proporcional a la cantidad absoluta de analito.
- Tcnicas instrumentales o de concentracin, donde la seal es proporcional a la
concentracin del analito. stas las podemos clasificar en:

MTODOS PTICOS: Los mtodos pticos de anlisis cubren un amplio campo de
aplicacin, incluyndose bajo su denominacin todos aquellos que implican la medida
de la radiacin electromagntica emitida por la materia o que interacciona con ella.
Podemos clasificar estos mtodos en:

un intercambio de energa
entre la radiacin electromagntica y la materia. En estos mtodos miden transiciones
entre distintos niveles energticos.

Absorcin: Niveles moleculares: UV- visible, IR, microondas.Niveles atmicos:
absorcin atmica, rayos X.

Emisin: Niveles moleculares: luminiscencia (fluorescencia, fosforescencia). Niveles
atmicos: espectrometra de emisin, fotometra de llama ICP, fluorescencia de rayos
X, fluorescencia atmica.
gar el intercambio de
energa como consecuencia de la interaccin materia-radiacin electromagntica. No
se producen transiciones entre los diferentes estados energticos, sino que lo que
realmente ocurre son cambios en la direccin o en las propiedades fsicas de la
radiacin electromagntica.

Los primeros pueden basarse en procesos de absorcin y emisin, mientras que las
transiciones entre distintos niveles energticos pueden tener lugar a nivel atmico o
molecular. En los segundos, los principales mecanismos de interaccin implicados son
la dispersin (turbidimetra, nefelometra), difraccin (rayos X, electrones), refraccin
(refractometra, interferometra), rotacin ptica (polarimetra, dicrosmo circular).

MTODOS ELECTROANALTICOS: Los mtodos electroqumicos o electroanalticos
son menos utilizados que los espectroscpicos o los cromatogrficos, aunque ofrecen
ciertas ventajas como: mayor especificidad para un determinado estado de oxidacin,
informacin sobre la actividad de una especien qumica y son relativamente baratos.

adelante se busca la
separacin de los componentes de una muestra en dos fases: una estacionaria y otra
mvil.

1.3.- Sensibilidad y lmites de deteccin.

La sensibilidad de un mtodo analtico, S, se define como la pendiente, m, de la curva
de calibracin , ya que sta define la razn de cambio de la propiedad medida por
unidad de concentracin.
Para los mtodos espectrofotomtricos, S =m
cal
=D A/ D C de la curva de calibracin
Absorbancia vs. Concentracin.

Lmite de deteccin (LOD, del ingls Limit of detection) es la menor cantidad de
un analito cuya seal puede ser distinguida de la del ruido.
El lmite de deteccin (LDD) se define habitualmente como la cantidad o concentracin
mnima de sustancia que puede ser detectada con fiabilidad por un mtodo analtico
determinado. Intuitivamente, el LDD sera la concentracin mnima obtenida a partir de
la medida de una muestra (que contiene el analito) que seramos capaces de
discriminar de la concentracin obtenida a partir de la medida de un blanco, es decir,
de una muestra sin analito presente.

Lmites de confianza.

La media de la poblacin o media verdadera (m) de una medicin es una constante
que es siempre desconocida. Sin embargo, en ausencia de errores sistemticos,
pueden estimarse ciertos lmites dentro de los cuales cabe esperar que caiga la media
de la poblacin con una cierta probabilidad. Los lmites as obtenidos se llaman lmites
de confianza de la media muestral. Los lmites de confianza derivan de la desviacin
estndar de la muestra, s y dependen de la certidumbre con que se la conozca. Si sta
desviacin estndar se obtiene a partir de una buena cantidad de rplicas, ser una
buena aproximacin de la desviacin estndar de la poblacin, s, y entonces los lmites
de confianza sern mas estrechos que si la estimacin de s se basa en slo dos o tres
mediciones.

El lmite de deteccin mnimo (LD) la concentracin mnima detectable
Es un parmetro estadstico que ha sido muy controvertido. Diferentes autores han
dado diversas definiciones y metodologas para su determinacin experimental.
Actualmente, algunos autores lo definen como la cantidad o concentracin mas
pequea del analito que produce una seal X
L
significativamente diferente de la seal
del ruido de fondo X
b
.
El criterio utilizado para que la concentracin mnima detectable sea distinguible con
certeza (significativamente diferente o estadsticamente diferente) del ruido de fondo es
que la diferencia entre la seal del analito, de concentracin muy baja, y la seal de los
blancos sea igual a tres veces la desviacin estandar de la seal de los blancos,
utilizados para medir el ruido de fondo. Es decir que:

en donde X
L
es la seal lmite, obtenida para la concentracin mnima detectable de
analito, X
b
es la seal promedio de los blancos, y s
b
es la desviacin estndar de las
lecturas del blanco.
Experimentalmente, el lmite de deteccin se determina involucrando todos los factores
que afectan la medida y se define , en general, para obtenerlo en unidades de
concentracin como:
LD = 3s
b
/ m
cal
bajas concentraciones
Donde, s
b
= desviacin estandar de los blancos, m
cal
es la pendiente de una curva de
calibracin del sistema, preparada a muy bajas concentraciones. Este criterio es
recomendado por IUPAC.
Aplicado a los mtodos espectrofotmtricos, entonces, s
b
= desviacin estndar de los
blancos en absorbancia y m
cal
pendiente de la curva de calibracin (A vs C) en
unidades de Absorbancia/Concentracin, por lo tanto, al calcular la relacin el lmite de
deteccin se obtiene en unidades de concentracin.
El lmite de deteccin mximo:
Se define como la mxima concentracin de un analito que se puede analizar.
Generalmente, lo que ocurre, es que las soluciones se hacen tan concentradas, que en
el caso de los mtodos espectrofotomtricos, toda la luz es atrapada por el analito y
tenemos una situacin equivalente al ajuste del 0 % de transmitancia. En este caso, el
detector no diferencia dos soluciones de concentraciones altas. La determinacin
queda limitada a concentraciones menores del valor de lmite de deteccin mximo,
pero en este caso, a diferencia del lmite de deteccin mnimo, el problema se
soluciona facilmente mediante una dilucin adecuado. En el caso del lmite de
deteccin mnimo, las soluciones son concentrar la muestra o usar otra tcnica con
lmite de deteccin menor. El lmite de deteccin mximo, se puede obtener de la parte
superior de la curva de Ringbom, como se ver ms adelante.
Lmite de cuantificacin
Corresponde a la cantidad o concentracin del analito a partir de la cual es confiable
realizar determinaciones cuantitativas y se define como:
Lmite de cuantificacin = LQ = 10s
b
/ m
cal bajas concentraciones

1.4.- Relacin seal-ruido.

La relacin seal/ruido se define como la proporcin existente entre la potencia de la
seal que se transmite y la potencia del ruido que la corrompe. Este margen es medido
en decibelios.
Rango dinmico y relacin seal/ruido para referirse a este margen que hay entre el
ruido de fondo y nivel de referencia, pueden utilizarse como sinnimos. No ocurre lo
mismo, cuando el rango dinmico indica la distancia entre el nivel de pico y el ruido de
fondo.
Que en las especificaciones tcnicas de un equipo, aparezca la relacin seal/ruido
indicada en dB, no significa nada si no va acompaado por los puntos de referencia
utilizado y las ponderaciones.
Para indicar correctamente el margen dinmico, la medida en dB debe ir acompaada
por:
la curva de ponderacin.
el nivel de referencia.
Por ejemplo, en el caso de un magnetfono en unas especificaciones tcnicas
encontraramos:
60 dB, CIR 468-3 (ref. 1 kHz, 320 nWb/m-1).
CIR 468-3 es la curva de ponderacin
1 kHz es el nivel de referencia
320 nWb/m-1 es el nivel magntico en que se ha grabado el nivel de referencia.
Evidentemente, para poder comparar equipos en lo que se refiere a su respuesta en
frecuencia, los equipos deben haber medido esta relacin seal/ruido utilizando la
misma curva de ponderacin y nivel de referencia.

Factor de ruido
La magnitud del ruido generado por un dispositivo electrnico, por ejemplo
un amplificador, se puede expresar mediante el denominado factor de ruido (F), que es
el resultado de dividir la relacin seal/ruido en la entrada (S/R)ent por la relacin
seal/ruido en la salida (S/R)sal, cuando los valores de seal y ruido se expresan en
nmeros simples :

Sin embargo, como los valores de la relacin seal/ruido suelen expresarse en forma
logartmica, normalmente en decibelios, el factor de ruido en decibelios ser, por tanto,
la diferencia entre las relaciones S/R en la entrada y en la salida del elemento bajo
prueba ya que:

En lugar de , tambin es comn efectuar la medida del factor de ruido en
decibelios A ( )ponderados en funcin de la (curva A)
El factor de ruido es un parmetro importante en los sistemas de transmisin, ya que
mientras el ruido externo nunca se podr eliminar totalmente, la reduccin del ruido
generado por los equipos depende del cuidado de su diseo. La expresin figura de
ruido es una traduccin errnea del trmino ingls Noise Figure.
La relacin seal/ruido cuantifica la bondad de un instrumento para realizar un anlisis
componental empleando el mismo. Segn la IUPAC se define el lmite de deteccin
como 3 veces la desviacin estndar de los blancos (el ruido producido por el
instrumento) entre la pendiente de la recta de calibrado del instrumento. El motivo de
esta definicin es sencillo: debido a que slo se puede detectar aquel componente que
produzca una seal superior a 3 veces la seal producida por el instrumento sin
componente, el qumico se asegura de que la seal estudiada es debido a la muestra.
Sin embargo esto impide determinar componentes cuya concentracin genere seal de
menor intensidad, esto se conoce como prdida de sensibilidad.

1.5.- Calibracin de los mtodos instrumentales.

Una calibracin (estandarizacin) adecuada de los instrumentos es esencial para
obtener anlisis exactos, la eleccin de una tcnica de calibracin depende del mtodo
instrumental, de la respuesta del instrumento, de las interferencias presentes en la
matriz de la muestra y del numero de muestras por analizar , 3 de las tcnicas de
calibracin ms comnmente utilizadas son la curva analtica o grafica de trabajo, el
mtodo de adiciones estndares y el mtodo de estndar interno.
Calibracin por curva-Calibracin por grafica analtica.
En la tcnica de la curva analtica 8 o de trabajo) se preparan varias soluciones
estndares que contienen concentraciones conocidas del analito, dichas soluciones
deben cubrir el intervalo de concentraciones de inters, as como tener una
composicin matricial, tan parecida como se pueda a la de las soluciones de la
muestra, tambin se analiza una solucin de fondo (blanco de reactivos), que contiene
solo la matriz del disolvente y las lecturas netas se graficaran contra las
concentraciones de las soluciones estndares, a fin de obtener la grfica de calibracin
de trabajo, si se obtiene una grafica no lineal, como ocurre con frecuencia, puede
usarse equipo electrnico o programas computacionales para compensar la curvatura y
producir una salida que sea una funcin lineal de la concentracin, en regiones no
lineales el numero de soluciones estndares analizadas debe aumentarse para obtener
la exactitud del anlisis de las muestras problema.

En algunos anlisis tambin puede alcanzarse la linealidad variando parmetros
instrumentales, en el anlisis espectrofotomtrico, cambiar la longitud de onda utilizada
para obtener las lecturas de absorcin puede producir una grfica de trabajo ms lineal,
es de mayor importancia registrar todos los parmetros instrumentales empleados para
obtener los datos de la curva de calibracin, porque incluso pequeas variaciones en
estos parmetros pueden afectar la pendiente de la grafica, la curva de calibracin
debe ser revisada peridicamente, haciendo uso de soluciones de concentracin
conocida, para detectar cualquier cambio en la respuesta instrumental.
Calibracin por el mtodo de adiciones estndares:
Cuando es imposible suprimir interferencias fsicas o qumicas en la matriz de la
muestra puede usarse el mtodo de adiciones estndares, la respuesta del instrumento
debe ser funcin lineal de la concentracin del analito, en el intervalo de
concentraciones y tambin debe tener una ordenada al origen en cero (seal cero para
concentracin cero), una pequea cantidad de solucin del analito de concentracin
conocida se aade a una alcuota de una solucin de muestra analizada previamente y
el anlisis se repite usando reactivos, parmetros del instrumento y procedimientos
idnticos.
Las lecturas pueden ser corregidas para cualquier seal de fondo, siempre es
aconsejable revisar el resultado con al menos otra adicin estndar, las adiciones
estadsticamente optimas de analito son iguales al doble o la mitad de la cantidad del
analito en la muestra original, todas las soluciones deben ser diluidas al mismo
volumen final para que cualquier interferente en la matriz de la muestra tenga un efecto
idntico en cada solucin, debe dejarse transcurrir suficiente tiempo entre la adicin del
estndar y el anlisis final para que el estndar agregado alcance el equilibrio con los
interferentes de la matriz.
El mtodo de adiciones estndares es ampliamente utilizado en la qumica electro
analtica para obtener resultados mas exactos que los que resultan usando curvas de
calibracin, como las soluciones problema y estndar se miden en idnticas
condiciones, las tcnicas voltamperimetricas sensibles a la matriz (como la redisolucin
andica) dependen casi exclusivamente de las adiciones estndares para resultados
cuantitativos, la absorcin atmica y la espectrofotometra de emisin de flama, usan
este mtodo con matrices de muestras complejas, en donde la viscosidad, la tensin
superficial, los efectos de flama y otras propiedades de la solucin muestra no pueden
reproducirse con exactitud en las soluciones de calibracin, los resultados de las
adiciones estndares tambin proporcionan un medio sistematico de identificar fuentes
de error en los anlisis, tales como la deplecin o degradacin de los reactivos de
prueba, un instrumento defectuoso o soluciones estndares inexactas.
Calibracin por el Mtodo del Estndar Interno: Se emplea un estndar interno para
minimizar las diferencias en las propiedades fsicas de un conjunto de soluciones
muestra que contiene el mismo analito, este mtodo, una cantidad fija de una sustancia
pura se aade tanto a las soluciones muestra como a las soluciones estndares, se
determinan luego las respuestas del analito y del estndar interno, cada una corregida
por el fondo y se calcula el cociente de las dos respuestas, si se controlan los
parmetros que afectan las respuestas medidas, la respuesta de la lnea del estndar
interno ser constante, por supuesto que la concentracin del estndar interno no es
fija, sin embargo, si varia uno o mas de los parmetros que afectan las respuestas
medidas, dichas respuestas del analito y del estndar interno deben ser afectada por
igual, por lo tanto el cociente de respuestas ( del analito al estndar interno) depende
solamente de la concentracin del analito.
1.6.- Curvas de calibracin.

Una curva de calibracin es una funcin de transferencia que relaciona la entrada con
la salida. Es empleado para medir la concentracin de una sustancia en una muestra
por comparacin con una serie de elementos de concentracin conocida. Se basa en la
existencia de una relacin en principio lineal entre un carcter medible (por ejemplo
la absorbancia en los enfoques de espectrofotometra) y la variable a determinar
(concentracin). Para ello, se efectan diluciones de unas muestras de contenido
conocido y se produce su lectura y el consiguiente establecimiento de una funcin
matemtica que relacione ambas; despus, se lee el mismo carcter en la muestra
problema y, mediante la sustitucin de la variable independiente de esa funcin, se
obtiene la concentracin de esta. Se dice pues que la respuesta de la muestra puede
cuantificarse y, empleando la curva de calibracin, se puede interpolar el dato de la
muestra problema hasta encontrar la concentracin del analito. Las curvas de
calibracin suelen poseer al menos una fase de respuesta lineal sobre la que se realiza
un test estadstico de regresin para evaluar su fiabilidad.
1.6.1.-Mtodo de estndar externo.
Este mtodo de anlisis se aplica en la determinacin de un analito, en el cual los
componentes de la matriz de la muestra como tambin los reactivos usados en la
preparacin de la misma no interfieren en el anlisis, es decir no se tiene un efecto de
la matriz en la seal medida.

Tambin se puede emplear en condiciones tales que la contribucin de los
interferentes, sobre las medidas se mantiene constante, con lo cual se puede realizar la
oportuna correccin del error determinado por el interferente.
Los estndares de calibrado seleccionados deben aproximarse tanto en la
concentracin del analito como en su composicin de los diferentes componentes
qumicos, presentes en la matriz de la muestra. Este requerimiento es aplicado en
todos los mtodos de calibracin propuestos.

Seal analtica (y) = constante x concentracinestndares + SealBlanco


1.6.1.-Mtodo de estndar interno.
La calibracin con estndar patrn interno se utiliza para compensar errores
aleatorios y sistemticos como interferencias no espectrales de componentes de la
matriz, fluctuaciones debidas del mtodo y errores instrumentales .Entre estas se tiene;
variacin de la velocidad de nebulizacin, del tamao de gota, fluctuaciones de las
presiones gaseosas, de la viscosidad y tensin superficial. Se aplica este mtodo en
tcnicas instrumentales que permitan la determinacin multielemental.
Se selecciona como estndar interno, una sustancia diferente del analito que presente
propiedades similares a las del analito, tal que ambos sean afectados similarmente
durante el anlisis. Tambin puede seleccionarse un componente mayoritario que este
presente en la muestra, y el cual se adiciona a los patrones a elevada concentracin
para considerarse constante. La matriz debe estar libre de estndar interno. El paso
ms importante en este mtodo, es la seleccin adecuada del estndar interno.
Considerando que se determina la intensidad de emisin de una analito (IA) y un patrn
interno (IP) a concentraciones determinadas (CA y CP) y conocidos los valores de
energa necesaria para que transcurra la transicin electrnica respectiva ( EA y EP) al
medir la relacin de intensidades IA/IP; s se cumple que EPEA el segundo trmino
de la Ec. 18 tiende a uno y la relacin de intensidades es independiente de la
temperatura.

= constante de proporcionalidad.
La aplicacin de este mtodo consiste en realizar medidas simultneas de la respuesta
del instrumento al analito y al estndar interno. El estndar interno, se aade en una
cantidad conocida y constante a la muestra, y a los estndares del analito. En la grfica
de calibrado se representa la relacin Seal analito/Seal de estndar interno en
funcin de la concentracin del analito en los estndares. De esta manera la respuesta
del instrumento o la seal analtica es independiente, de la fluctuacin debida al
mtodo de anlisis. Para la muestra la relacin entre la seal (SealM) y la
concentracin (CM) viene dada por:

Similarmente, para el estndar interno se tiene:

Dividiendo

Donde, f corresponde al factor de respuesta f=kM/kEI este debe ser constante en un
determinado intervalo de concentracin. Adems, f tambin viene dado por el producto
de la pendiente de la curva de calibrado por la concentracin del patrn interno, cuando
se grfica la relacin de las seales versus la concentracin del estndar. Mientras que
si se grfica la relacin de las seales versus la relacin de las concentraciones, la
pendiente es directamente el factor de respuesta. Re-escribiendo la Ec. 21 en trminos
de los estndares del analito (CS, SealS), se tiene la expresin que describe la curva
de calibrado, dada por: