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GERMINAO DE AQUNIOS DE MORANGOS E OBTENO DE SEEDLINGS IN VITRO

Bruno Gomes Trindade (PIBIC-Jr/CNPq), Suelen Cristina Uber (acadmica Agronomia),


Liziane Kadine Antunes de Moraes, Marcos Ventura Faria (Orientador Dep. de
Agronomia/UNICENTRO), e-mail: mfaria@unicentro.br
Resumo:
Aqunios obtidos de morangos maduros das cultivares Sweet Charlie, Camarosa, Dover,
Campdover, Tudla e Oso Grande receberam diferentes tratamentos (frio a 4 oC;
escarificao mecnica; imerso em solues de GA3, KNO3 e H2SO4) visando a
germinao e obteno de seedlings in vitro. Foram verificados baixos nveis de germinao
dos aqunios em funo dos tratamentos empregados, contudo o uso do cido sulfrico
mostrou-se mais promissor para promover a quebra de dormncia e a germinao.
Palavras-chave: Fragaria ananassa, quebra de dormncia, cultura de tecidos.
Introduo
A parte comestvel do morango, que considerada pelos leigos como fruto, na
realidade o receptculo hipertrofiado da flor, onde esto inseridos os verdadeiros frutos,
representados pelos pontos escuros que aparecem aderidos epiderme da polpa e so
denominados aqunios. Cada aqunio no seu interior contem uma semente que depois de
germinada origina uma nova plntula. Plantas obtidas dessa forma so importantes na
gerao de prognies a partir de hibridaes com finalidades de se fazer seleo em
programas de melhoramento gentico. A deficiente germinao das sementes tem
prejudicado a formao de seedlings nos moldes desejados. Para que haja uma melhor
germinao dos aqunios deve-se recorrer a artifcios para quebra de dormncia.
A dormncia dos aqunios de morango est relacionada principalmente ao pericarpo,
que atua como uma barreira inibindo a germinao (El Hamdouni et al., 2001). A
escarificao dos aqunios, que pode ser realizada por mtodos mecnicos, trmicos ou
qumicos, promove o rompimento ou abraso do pericarpo que envolve a semente,
permitindo a permeabilidade gua e aos gases necessrios ao processo fisiolgico de
germinao. Ainda, os aqunios podem concentrar um ou mais inibidores endgenos de
germinao e com a escarificao esses inibidores podem se difundir permitindo ento a
germinao do embrio. Algumas substncias tm sido estudadas para superar a dormncia
de sementes, entre elas, o nitrato de potssio (KNO3) (Frank e Nabinger, 1996; Gazziero et
al., 1991) e o cido sulfrico (H2SO4), concentrado ou diludo (Antnio, 1995). Uma outra
alternativa relatada por Santos (1999) para a quebra de dormncia a manuteno das
sementes sob baixas temperaturas, de 4 a 5 oC, por um determinado perodo.
Os fitohormnios, como as giberelinas, so importantes controladores endgenos da
germinao de sementes, participando tanto na superao da dormncia, como no controle
da hidrlise de reservas nutricionais (Karssen, 1995).
A germinao de sementes in vitro um procedimento que tem sido recomendado
para espcies frutferas (Bento et al., 2002), portanto o objetivo desse trabalho foi avaliar o
efeito de diferentes tratamentos em aqunios de cultivares de morango visando a
germinao e obteno de seedlings in vitro.
Material e mtodos
Os experimentos foram realizados no laboratrio de Cultura de Tecidos do
DEAGRO/UNICENTRO. Foi avaliada a germinao in vitro de aqunios obtidos de
morangos maduros, aps diferentes pr-tratamentos: a) imerso em soluo de cido
giberlico (GA3) - aqunios das cultivares Camarosa e Oso Grande foram imersos em
solues de GA3 nas concentraes de 0,55mM, 1,1mM e 1,65mM, em dois perodos de
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imerso: por 24 e 48 horas. Aqunios da cultivar Sweet Charlie foram imersos em solues
nas concentraes de 0,5 , 1,0 , 1,5 e 2,0 mM, tambm em dois perodos de imerso (24 e
48 horas). A avaliaes foram realizadas 40 dias aps a inoculao; b) imerso em
solues de nitrato de potssio (KNO3) - aqunios das cultivares Sweet Charlie e Dover
foram imersos em soluo de KNO3 nas concentraes 1, 5 e 10 mM, por 24 e 48 horas. A
contagem final do nmero de aqunios germinados foi realizada 90 dias aps a inoculao;
c) imerso em solues de cido sulfrico (H2SO4) - aqunios ds cultivares Camarosa,
Dover, Campidover, Oso Grande, Tudla e Sweet Charlie foram imersos em soluo de cido
sulfrico vaiando-se as concentraes (5, 15 e 25%) e perodos (5, 10 e 15 minutos) e as
datas de avaliaes constam na Tabela 1; d) tratamento a frio - aqunios das cultivares
Oso Grande e Dover foram envoltos em papel filtro e filme plstico e armazenados em
geladeira temperatura de 4 oC 1oC por trs perodos (15, 30 e 45dias). A contagem final
do nmero de aqunios germinados foi realizada 70 dias aps a inoculao; e)
escarificao mecnica - aqunios da cultivar Sweet Charlie foram submetidos a leve
escarificao manual utilizando-se um lixa. A contagem final do nmero de aqunios
germinados realizada 75 dias aps a inoculao.
Aps a aplicao dos tratamentos e a assepsia (imerso em etanol 70% por 2
minutos e em hipoclorito de sdio 10% por 5 minutos, seguida por tres enxagues com gua
destilada e autoclavada) os aqunios foram transferidos para frascos (10 aqunios por
frasco) contendo aproximadamente 20ml de meio de cultura bsico de MS/2 (Murashige &
Skoog, 1962), com 2% de sacarose, pH de 5,8 e autoclavado a 120 oC durante 20 minutos.
Todos os tratamentos foram realizados com repeties. Os frascos foram vedados com
papel alumnio e mantidos em sala de crescimento sob 16 horas de fotoperodo e
temperatura de 25oC 2oC.
Resultados e discusso
Houve ineficincia do GA3, independentemente da concentrao empregada, em
promover a germinao dos aqunios na cultivar Sweet Charlie. A maior taxa de germinao
obtida no tratamento dos aqunios da cultivar Dover com nitrato de potssio, aos 90 dias
aps inoculao, foi de apenas 5%. J para a cultivar Sweet Charlie a germinao foi nula.
De maneira geral no houve nveis satisfatrios de germinao dos aqunios.
Contudo, os tratamentos com cido sulfrico, ainda que tenham apresentado respostas
insuficientes, mostraram maior eficincia na germinao (Tabela 1), chegando a 50% aos 48
dias aps a inoculao (cultivar Dover, com H2SO4 a 15% por 15 minutos),
desconsiderando-se as parcelas em que houve contaminao. El Hamdouni et al. (2001)
verificaram, 6 semanas aps a inoculao, germinao de 94% e 63% para os aqunios das
cultivares Chandler e Tudla, respectivamente, tratados com soluo de H2SO4 36N por 5
minutos. No presente trabalho, considerando os valores mdios de germinao envolvendo
todos os tratamentos com H2SO4 foi verificada maior taxa de germinao para as cultivares
Dover e Campidover (Tabela 1). A variao na germinao de aqunios em funo do
gentipo foi relatada por El Hamdouni et al. (2001).
Os tratamentos com baixas temperaturas mostraram-se pouco eficientes em
promover a germinao, talvez pelo fato de que baixas temperaturas possam ser eficientes
na quebra da dormncia das sementes, porm a germinao depende tambm do
amolecimento do pericarpo dos aqunios.
Concluses
De maneira geral, no foram verificados nveis satisfatrios de germinao dos
aqunios em funo dos tratamentos empregados, contudo o uso do cido sulfrico
mostrou-se mais promissor para promover a quebra de dormncia e a germinao; Outras
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concentraes dos produtos utilizados precisam ser testadas, bem como a combinao
entre tratamentos dever ser avaliada em estudos futuros. Devem ser realizadas alteraes
na metodologia no que se refere aos procedimentos de assepsia, ao ajuste das
concentraes e ao tempo de exposio dos aqunios submetidos aos tratamentos possam
promover a germinao, principalmente quanto ao uso do H2SO4.
Tabela 1. Germinao mdia dos aqunios tratados com soluo de cido sulfrico (H2SO4)
em diferentes concentraes e tempos de imerso. Guarapuava: UNICENTRO, 2007.
Tratamento

H2SO4 05%, 05'


H2SO4 05%, 10'
H2SO4 05%, 15'
H2SO4 15%, 05'
H2SO4 15%, 10'
H2SO4 15%, 15'
H2SO4 25%, 05'
H2SO4 25%, 10'
H2SO4 25%, 15'
mdia

Oso
Sweet
Tudla
Grande
Charlie
Germinao
mdia
Inoculao Inoculao Inoculao Inoculao Inoculao Inoculao
(%)
20/11/06
20/11/06
06/12/06
08/12/06
13/12/06
15/12/06
Avaliao em 07/01/2007 (% de aquenios germinados*)
Camarosa

Dover

Campidover

35
20
20
20
43,3
20
10
0
0
18,7

20
20
33,3
23,3
30
50
33,3
20
0
25,5

20
15
46,7
20
30
23,3
20
25
13,3
23,7

30
10
3,3
16,7
16,7
10
26,7
0
10
13,7

6,7
10
6,7
6,7
10
16,7
6,7
3,3
20
9,6

0
16,7
5
0
3,3
3,3
0
0
0
3,1

18,6
15,3
19,2
14,5
22,2
20,5
16,11
8,0
7,2
15,7

*foram consideradas apenas as parcelas no contaminadas


Referncias Bibliogrficas
ANTNIO, F.G.; PENTEADO, M.I.O.; SEIFFERT, N.F. Recomendaes para quebra de
dormncia em sementes de Galactia spp. Comunicado Tcnico no. 29, Embrapa-CNPGC. 1985.
BENTO, D.M.; LOPES, A.C.J.; MARTINS, K.; DINIZ, G.E.M.; MARTINS, C.P.; MACEDO, C.E.C.;
ALLOUFA, M.A.I. Germinao in vitro de Sementes de Maracuj-Amarelo (Passiflora edulis F.
Flavicarpa) em Diferentes meios de Cultura. In: XVII Congresso Brasileiro De Fruticultura,
2002, Belm. Os Novos Desafios da Fruticultura Brasileira. 2002.
EL HAMDOUNI, E.M.; LAMARTI, A.; BADOC, A. In vitro germination of the achenes of Strawberry
(Fragaria x ananassa Duch.) cvs Chandler et Tudla. Bulletin - Societe de Pharmacie de
Bordeaux, v.140, p.31-42, 2001.
FRANK, L.B.; NABINGER, C. Avaliao da germinao de seis acessos de Paspalum notatum
Flgge, nativos do Rio Grande do Sul. Revista Brasileira de Sementes. Braslia, v.18, p.102107, 1996.
GAZZIERO, D.L.P.; KZRYZANOWSKI, F. C.; ULBRICH, A.V.; VOLL, E.; PITELLI, R.A. Estudo da
superao de dormncia de sementes de capim massambar (Sorghum halepense(L.) PERS.)
atravs de nitrato de potssio e cido sulfrico. Revista Brasileira de Sementes.Braslia: v.13,
p.21-25, 1991.
KARSSEN, C. M. Hormonal regulation of seed development, dormancy, and germination studied
by genetic control. In: KIGEL, J.; GALILI, G. (Eds.) Seed develop-ment and germination. New
York: Marcel Dekker, 1995.
MURASHIGE, T.; SKOOG F.A. Revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco
tissue cultures. Physiologia Plantarum, n. 15, p. 473-497, 1962.
SANTOS, A. M. Melhoramento gentico do morangueiro. Informe Agropecurio, Belo
Horizonte, v. 20, n. 198, p. 24-29, 1999.
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