UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

LABORATORIO DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL I

Prctica N: 7

Fecha de entrega: Viernes 5 de diciembre 2014

Integrantes: Martnez Jonathan

Torres Yessenia
Vega Ismael

Grupo: 5
Da: viernes
Hora: 9h00-12h00

1. TEMA: ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE

2. OBJETIVOS:
Examinar y operar el espectrofotmetro
Determinar hierro en una muestra por el mtodo de la ortofenantrolina.
Familiarizarse con los diferentes mtodos que existen para el clculo de la concentracin por
espectrofotometra. Ley de Beer.
3. FUNDAMENTO TERICO
3.1. Fundamento
Tres molculas de ortofenantrolina (1-10 fenantrolina) reaccionan con los iones ferrosos formando un
complejo de color anaranjado que obedece a la Ley de Beer y cuya mxima absorcin se produce a 510nm. Se
utiliza tambin cido ascrbico para reducir el Fe3+ a Fe2+, o en su defecto se puede utilizar gotas de
clorhidrato de hidroxilamina. Pueden interferir los iones cobre, zinc y nquel.
4. CONSULTA
Diseo y funcionamiento de un espectrofotmetro de un solo haz
Consta de una fuente de radiacin, un filtro o un monocromador para la seleccin de la longitud de onda,
cubetas contrastadas que pueden interponerse alternativamente en el haz de radiacin, un detector, un
amplificador y un dispositivo de lectura. Normalmente, un instrumento de haz sencillo necesita una fuente de
alimentacin estabilizada para evitar errores como resultado de los cambios en la intensidad del haz durante el
tiempo requerido para ajustar el 100 por 100 T y determinar el porcentaje T del analito. Entre los instrumentos
de haz sencillo hay grandes diferencias en cuanto a su complejidad y caractersticas de funcionamiento. El ms
sencillo y ms barato consta de una bombilla de wolframio conectada a una batera, como fuente de radiacin,
un conjunto de filtros de vidrio para la seleccin de la longitud de onda, tubos de ensayo para contener la
muestra, una clula fotovoltaica como detector, y un pequeo microampermetro como dispositivo de lectura.

Diseo y funcionamiento de un espectrofotmetro de doble haz

En este instrumento la radiacin se dispersa en una red cncava que enfoca al haz sobre un espejo en sectores
rotatorio.
Un haz pasa a travs de la disolucin de referencia y contina hasta un fotodetector, simultneamente el
segundo atraviesa la muestra hasta un segundo detector contrastado. Las dos seales de salida se amplifican y
su cociente se determina electrnicamente y se visualiza mediante un dispositivo de lectura. Con los
instrumentos manuales, la medida se realiza en dos etapas que suponen primero el ajuste del cero mediante un
obturador entre el selector y el divisor de haz. En la segunda etapa, el obturador se abre y se lee directamente
la transmitancia o absorbancia en el dispositivo de medida.
Los instrumentos de doble haz ofrecen la ventaja de compensar tanto las llamadas fluctuaciones ms cortas en
la radiacin que sale de la fuente como las derivas del detector y amplificador. Tambin compensan las
grandes variaciones en la intensidad de la fuente con la longitud de onda. Adems, el diseo de doble haz
permite el registro continuo de espectros de transmitancia o absorbancia. Como consecuencia, los instrumentos
con registrador ultravioleta y visible ms modernos son de doble haz (generalmente en tiempo). Los
espectrofotmetros de infrarrojo de barrido se basan, frecuentemente, en este diseo.
El instrumento presenta un intervalo de longitudes de onda de 195 a 850 nm, una anchura de banda de 4 nm,
una exactitud fotomtrica del 0,5 por 100 T y una reproducibilidad del 0,2 por 100 A; la radiacin parsita es
menor del 0,1 por 100 de Po a 240 y 340 nm.

Sntesis de la ortofenantrolina.

5. TABLA DE DATOS

Tabla 7-1 Preparacin de los estndares de hierro

St.
0
1
2
3
4
5
M
H2O

ml Soln.
Patrn
0,0
0,6
1,3
2,5
5,0
10,0
2,5
2,5

ml Ac.
Ascrbico
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5

ml Buffer
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

ml
Ortofenantrolina
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

ml H2O

Vol. Final

12,5
11,9
11,2
10,0
7,5
2,5
10,0
10,0

15,0
15,0
15,0
15,0
15,0
15,0
15,0
15,0

Elaborado por: Torres y otros

Tabla 7-2 Valores de comparativos de absorbancia y Transmitancia

St.

g Fe / ml

0
1
2
3
4
5
M
H2O

0.00
0.40
0.86
1.66
3.33
6.66
-

Espectrofotmetro
Absorbancia
0.000
0.049
0.115
0.195
0.275
0.593
0.511
0.015

Transmitancia
1.000
0.893
0.767
0.638
0.531
0.255
0.308
0.966

(potable)

Elaborado por: Martnez y otros

6. CALCULOS y RESULTADOS
6.1. Solucin patrn
Clculo de la cantidad de sal de Mohr necesaria para preparar la solucin patrn de 1000g/ ml de
hierro.
(

) (

(
(

6.2. Concentracin de hierro

Clculo de la concentracin de hierro en los estndares (un solo clculo modelo)
Ejemplo: Estndar 2

) (
) (

)
)

6.3. Curva de calibracin

Ajuste de los datos a una recta del tipo: y= a + b x

Tabla 7-3 Correccin de los valores de absorbancia

Estndar
0
1
2
3
4
5

Absorbancia
(Shimadzu)
Experimental
Corregido
0.000
0.021
0.049
0.055
0.115
0.095
0.195
0.163
0.275
0.305
0.593
0.589

Elaborado por: Vega y otros

6.4. Coeficiente de absortividad molar y absortividad especifica

Clculo del coeficiente
media.
Ejemplo del estndar 2
Absortividad molar:

)(

Absortividad especifica:

)(

6.5. Muestra
Clculo de la cantidad de hierro en la muestra por los siguientes mtodos:

Interpolacin grfica

Absorbancia vs gFe/ml
0.7
y = 0.0852x + 0.0213
R = 0.9875

Absorbancia

0.6
0.5
0.4

Absorbancia vs gFe/ml

0.3
Linear (Absorbancia vs
gFe/ml)

0.2
0.1
0
0

ugFe/ml

Interpolacin analtica (Recta ajustada A = A0 + KsC)

Calculo de la concentracin de hierro en la muestra

Calculo de la concentracin de hierro en agua potable

Clculo de las concentraciones utilizando y comparando con el estndar ms cercano.

Calculo de la concentracin de hierro en la muestra

Se utiliza el estndar 5 porque es el ms cercano:

Absorbancia muestra: 0.511

Absorbancia estndar 5: 0.593

Absortividad molar:

)(

Absortividad especifica:

)(

)(

)(

Calculo de la concentracin de hierro en agua potable

Se utiliza el estndar 1 porque es el ms cercano:
Absorbancia agua potable: 0.015
Absorbancia estndar 1: 0.049
Absortividad molar:

Absortividad especifica:

Tabla 7-4 Clculo de los valores de absortividad especfica

St

g Fe/ml

1
2
3
4
5

0.40
0.86
1.66
3.33
6.66
___

Molaridad
Fe

Espectrofotmetro
(l / mg cm)
(l / mol cm)

___

0.1337
0.1175
0.0826
0.0890
0.1091

7468
6566
4614
4983
6095

Elaborado por: Torres y otros

6.6. Clculo estadstico

Clculo de la sensibilidad y lmite de deteccin para el mtodo.
REPORTAR:
en el agua potable
Sensibilidad de calibracin
*

Sensibilidad analtica

Lmite de deteccin

Reportar todos los resultados como

% de Fe en agua 2 N 1

Tabla 7-5 Clculo estadstico

Mtodo

Espectrofotmetro

(agua
potable)
2.582

Elaborado por: Vega y otros

0.1091 (l/mg cm)

(
)

6095 (l/mol cm)

(
)

Ks

2
(2.538)

LD

7. DISCUSIONES:
Para calcular la concentracin del analito conocido se midi su absorbancia a una o ms longitudes de
onda y posteriormente se empleo su coeficiente de absortividad () junto con la ley de Lambert-Beer. Sin
embargo, generalmente el valor de no se conoce con precisin para las especies que se determinan en las
condiciones de la medicin.
Por lo tanto, este parmetro se puede obviar, al construir una funcin analtica o curva de calibracin
analtica. Esta ltima se obtuvo graficando la absorbancia medida a una longitud de onda fija, de diferentes
soluciones de referencia (tambin llamadas soluciones estndar o soluciones patrn) del analito en
cuestin, contra sus concentraciones conocidas. Al aplicar la ley de Lambert-Beer al graficar la
absorbancia vs. La concentracin se obtuvo una lnea recta que pasa por el origen.
A veces, puede ocurrir que todos los constituyentes en la muestra pueden no ser conocidos, de tal modo,
que no se puede preparar una solucin estndar con la misma composicin qumica. En tal caso, se utilizo
un procedimiento llamado mtodo de adicin estndar, el cual se elimino cualquier error resultante de las
absortividades molares (), siendo diferentes tanto en la solucin estndar como en la solucin de muestra.
En este mtodo cantidades conocidas del estndar se aadieron a alcuotas idnticas de la muestra y se
midi la absorbancia.
La primera lectura es la absorbancia de la muestra sola y la segunda lectura es la absorbancia de la muestra
del analito a la cual se le adicion una cantidad conocida del mismo analito y as sucesivamente. Las
lecturas obtenidas de este modo se trazan para obtener la curva de calibracin. La ley de Beer se cumpli,
es decir, se obtuvo una lnea recta; entonces se puedo obtener la concentracin desconocida de la solucin,
a travs de la extrapolacin de la curva de calibracin.
8. CONCLUSIONES:

La absorbancia es la capacidad que tiene algunos compuestos para absorber la radiacin

electromagntica, pudimos observar cmo, dependiendo de la concentracin y longitud a la cual se le
aplique un rayo, puede alcanzar un punto mximo de absorcin.
Segn la concentracin varia la absorbancia del compuesto. Variando la cantidad de solvente se puede
disminuir la absorbancia.
Se ha llegado a la conclusin de que la espectrofotometra es un mtodo analtico indirecto porque se
basa en la medicin de la absorbancia o Transmitancia de las radiaciones; es de gran utilidad en la
actualidad para la identificacin de un analito en una muestra problema.
La espectrofotometra es el mtodo ms usado, debido a que es sencillo, especfico y sensible.
Se conoci la ley de Bourguer-Lambert-Beer o ley general de la espectrofotometra que permiti
hallar la concentracin de una especie qumica a partir de la medida de la intensidad de luz absorbida
por la muestra.

9. BIBLIOGRAFA:
L.C.Wade. (2004). Estereoqumica. En L.C.Wade, Qumica Orgnica (pgs. 234,235). Madrid: Pearson
Education.
Pickering, W. F. (1980). Qumica Analtica Moderna. New York: Revert S. A.
SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin. Mc Graw
Hill. Madrid. p. 165186, 337347.