HEMATOPOIEZA

Conf. Univ. Dr. Ioana Cristina AMIHESEI

UMF Gr. T. Popa Iasi
Facultatea de Medicina
Disciplina Histologie

HEMATOPOIEZA
1. Mduva hematogen
2. Eritropoeza
3. Granulocitopoeza (formarea
granulocitelor sau PMN)
4. Trombocitopoeza
6. Limfopoeza
5. Monocitopoeza - din CFUM
7. Timusul

CFUS - nedifereniat; unitatea formatoare de colonii (celula stern) are o capacitate de

proliferare suficient pentru asigurarea fondului de celule stern necesar.
Se disting 3 sectoare:
Celula multipotent cu capacitate de autontreinere i rennoire.
Sectorul progenitor; n acest sector acioneaz factorul de selectare al coloniilor (CSF).
Celulele sunt ndreptate spre diferite programe de difereniere -celula devine treptat din
pluripotent, bipotent, monopotent.
Crete restricia spre o linie de proliferare i scade capacitatea proliferativ.

Celula monopotent este capul de serie

al unei linii sanguine, care poate fi recunoscut
n microscopie optic.
n sectorul progenitor, celulele nu pot fi
recunoscute n microscopie optic. n sectorul
multi- i pluripotent, restricia nu este nc
complet; n cazul eliberarm n cantitate mare
a unor factori care induc diferenierea celulelor
spre o linie, se poate trece de la precursorul
mieloid la cel limfoid (de exemplu).
n sectorul (3) - al elementelor
programate, care se recunosc n microscopia
optic, restricia pentru o linie este complet i
ireversibil.

Hematopoeza - ncepe la aproximativ 2 sptmni de via a embrionului; se

disting 2 etape n timpul dezvoltrii embrionare.
1. Etapa extraembrionar ncepe n mezenchimul sacului vitelin, unde apar insule de

celule, care vor forma vasele anexelor embrionului. n vase apar insule de
eritropoez, la nivelul crora se produc numai hematii, nucleate, care conin Hb
fetal. Printre ele apar CFU-stem.

2. Etapa hepato-splen-timic ncepe la 4-5 sptmni de via intrauterin, devine

maxim n lunile 5-6 ale vieii intrauterine. Are loc colonizarea cu celulele
hematopoetice din sacul vitelin, n ficat, splin, timus. Insulele hepato-splenice
conin toate tipurile de celule. n timus se dezvolt exclusiv LT.

3. Etapa medulo-ganglionar. Din luna a II-a de via embrionar apar primele piese

osoase i caviti medulare. Mediul stromal din mduv atrage celulele

multipotente. Hematopoeza medular se dezvolt progresiv, cea hepato-splenotimic scade. Hematopoeza hepato-spleno-timic se epuizeaz treptat; la natere
mai sunt insule hematopoetice n splin i ficat, care dispar n cursul lunilor 1-2 de
via.

4. Etapa postnatal presupune exclusiv hematopoeza medular.

Figura 1. Differentiation of pluripotential stem cells during hematopoiesis.

1. Mduva hematogen
Organele hematoformatoare sunt formate din:
capsul
strom -parenchim
capsula este format din esut conjunctiv dens
stroma este reprezentat printr-o reea tridimensional de fibre de reticulin, pe care
stau celule reticulare de diferite tipuri:
reticulare fibroblastice - sintetizeaz reeaua de reticulin a stromei reticulare
macrofagice - cu funcie fagocitar
reticulare dendritice
reticulare interdigitate
Aceste celule creeaz raicromediul adecvat (homing) pentru ca fiecare linie celular s se
dezvolte normal. Fiecare insul celular evolueaz spre o linie celular, inhibnd dezvoltarea
altor linii celulare.
Mduva hematogen este situat la adult n stern, coxal, corpii vertebrali. Capsula este
reprezentat de endost. Capilarele sinusoide au perete discontinuu, prin care celulele
mature trec n circulaie.
Se deosebesc 2 sectoare:
I - de multiplicare (predomin diviziunile celulare)
II - de maturare (predomin procesele de difereniere celular)

Figure 2. Drawing showing the passage of erythrocytes, leukocytes, and platelets across a sinusoid
capillary in red bone marrow. Because erythrocytes (unlike leukocytes) do not have sufficient
motility to cross the wall of the sinusoid, they are believed to enter the sinusoid by a pressure
gradient that exists across its wall. Leukocytes, after the action of releasing substances, cross the
wall of the sinusoid by their own activity. Megakaryocytes form thin processes that cross the wall of
the sinusoid and fragment at their tips, liberating the platelets.

Figure 3. Section of active bone marrow (red bone marrow) showing some of its components. Five
blood sinusoid capillaries containing many erythrocytes are indicated by arrowheads. Note the
thinness of the blood capillary wall. Giemsa stain. Medium magnification.

2. Eritropoeza

CFU-e - sub aciunea eritropoetinei va da natere celulei cap de serie a liniei

eritrocitare, numit PROERITROBLAST (vizibil n microscopia optic).
n evoluia spre hematie apar urmtoarele modificri celulare:
scderea progresiv a dimensiunilor celulare;
scderea progresiv a dimensiunilor nucleului, condensarea acestuia,
dispariia nucleolului.
activitatea progresiv de sintez mai nti de globin apoi, ncorporare de fier,
cu formarea n final a hemoglobinei. Cantitatea de hemoglobina crete n
citoplasm, pn la dispariia organitelor celulare.

Figura 4. Summary of erythrocyte maturation. The stippled part of the cytoplasm (on the left) shows the continuous
increase in hemoglobin concentration from proerythroblast to erythrocyte. There is also a gradual decrease in nuclear
volume and an increase in chromatin condensation, followed by extrusion of a pyknotic nucleus. The times are the average
life span of each cell type. In the graph, 100% represents the highest recorded concentrations of hemoglobin and RNA.

1. Proeritroblastul este o celul mare de aproximativ 15 m diametru. Are citoplasm

omogen, bazofil (datorit poliribozomilor, ribozomilor liberi). Nucleul prezint

cromatin dispersat, 1-2 nucleoli evideni. Celula are receptori pentru transferin,
protein care leag fierul.

2. Eritroblastul bazofil este o celul ceva mai mic, cu citoplasm intens bazofil,

datorit marii cantiti de ribozomi. Celula continu sinteza de Hb, endociteaz fier din
hemosiderin (de la nivelul macrofagelor) i transferin (fier plasmatic).

3. Eritroblastul policromatofil are citoplasm cenuiu-albstruie (nici bazofil, nici

acidofil) n m.e. scad ribozomii; crete cantitatea de Hb. n citoplasm apar filamente
contractile numeroase; celula nu se mai divide (ncheie sectorul mitotic) - se
matureaz.

4. Eritroblastul ortocromatic (eozinofil, normoblast)

Este o celul de 8-9 m diametru; capacitatea de sintez scade foarte mult; este o
celul eozinofil, nucleul ocup cam 50% din masa celulei, fiind dispus excentric. Sub
aciunea microfilamentelor, celula emite pseudopode, ea trece prin peretele capilarelor
sinusoide. Cea mai mare parte a masei citoplasmatice trece n lumenul capilar;
datorit filamentelor contractile i rigiditii nucleului, acesta se desprinde, rmne
extravascular, nconjurat de o pelicul fin de Hb i de membrana plasmatic, fiind
apoi fagocitat.
Insulele eritropoetice conin central o celul mare reticular macrofagic, nconjurat
de diferite stadii ale eritropoezei. Celula macrofagic furnizeaz fier pentru sinteza Hb.
n sngele periferic, n mod normal, apar aproximativ 1% reticulocite. In snge trec
numai hematiile adulte.

Factori de reglare ai eritropoezei

Eritropoetina - cel mai important factor, este sintetizat la nivel renal avnd ca
precursor o glicoprotein, cu via plasmatic de 2-3 zile. Stimuleaz formarea de
proeritroblati din CFUe.
Factori hormonali - hormonii tiroidieni, corticoizi stimuleaz eritropoeza. Hormonii
estrogeni inhib eritropoeza.
Factorul splenic - distrugerea hematiilor la nivelul splenic (rata acesteia).
Acidul folic, factorul extrinsec (vitamina B12) - pentru absorbia vitaminei B12, este
necesar factorul intrinsec al lui Castle, la nivel gastric; o cantitate suficient de fier
n alimentaie, este de asemenea necesar pentru sinteza normal a Hb. Carena
acestor factori determin anemii.
Presiunea oxigenului n aerul atmosferic.

Figure 5. Stages in the development of erythrocytes and granulocytes.

3. Granulocitopoeza (formarea granulocitelor sau PMN)

CFU-granulocitar este stimulat de leucopoetin

Figure 6. Section of stimulated red bone marrow. Note 4 mitotic figures (arrows) and a plasma cell
(arrowhead). Regions of erythropoiesis and of granulopoiesis are also evident. Most immature
granulocytes are in the myelocyte stage: their cytoplasm contains large, dark-stained azurophilic
granules and small, less darkly stained specific granules. Giemsa stain. High magnification.

1. Mieloblastul este o celul de 15-20 m diametru, cu nucleu mare, rotund, cu cromatin dispersat i 1-2

nucleoli. Celula are citoplasm bazofil. n m.e., ea prezint ribozomi, RErugos, mitocondrii. In evoluie,
apar mai nti granule azurofile i apoi granule specifice, respectiv neutrofile, bazofile, eozinofile.

2. Promielocitul este o celul mai mic n diametru dect mieloblastul. Nucleul ei este mai mic, cu nucleoli

evideni. Citoplasm bazofil conine granule azurofile, cu enzime lizozomale, dispuse mai ales periferic,
nvelite n membrane.

3. Mielocitul are nucleul excentric, ovoidal/reniform. Nu mai are nucleol (ncheie seria mitotic). n

citoplasm apar granule specifice: neutrofile, bazofile, eozinofile. Celula conine puine granule azurofile.
Granulele- specifice au dimensiuni mai mici i apar la nceput perinuclear, apoi umplu citoplasm.

4. Metamielocitul are nucleul dens, adnc edentat, ncepe schiarea lobilor, la nivelul nucleului. Conine

multe granule specifice i puine granule azurofile.

5. PMN nesegmentat are un nucleu n forma de band excentric curbat. Apare rar n sngele periferic (n

proporie de 3-5% din totalul PMN). Numrul acestor celule n sngele periferic, crete n cazul stimulrii
intense a mduvei hematogene.
Celula adult, PMN segmentat are un nucleu cu 3-5 lobi. Invaziile microbiene determin creterea mare a
numrului de PMN netrofile n esuturi. n mduv exist un compartiment de rezerv, care conine de 15
ori mai multe celule, n stare aproape de maturare, care pot trece rapid n snge. O parte din PMN
circulante, se afl la marginea vaselor (fenomen de marginalizare) pentru a putea penetra rapid n
esuturi, n infeciile bacteriene.

Figure 7. Drawing illustrating the sequence of gene expression in the maturation of granulocytes.
Azurophilic granules are blue; specific granules are pink.

Formula Arneth se refer la predominena elementelor tinere, respectiv btrne,

n sngele circulant, ceea ce reflect reactivitatea mduvei hematogene
(predominena elementelor tinere, devierea la stnga a formulei se traduce printr-o
mduv intens reactiv, n timp ce predominena elementelor mature i btrne se
traduce printr-o mduv hiporeactiv deviere la dreapta a formulei Arneth).
Granulocitopoeza este stimulat de:
leucopoetin
hormonii tiroidieni, corticoizi
Granulocitopoeza este inhibat de lactoferin, din granulele neutrofile; creterea
numrului de PMN neutrofile determin prin intermediul lactoferinei, feed-back
negativ pe mduva hematogen.

4. Trombocitopoeza
Asupra CFU - meg. acioneaz trombopoetina.
1. Megacarioblastul are diametru de 30-50 m, este o celul cu nucleu mare, ovoidal/reniform

i cu muli nucleoli; celula are citoplasm bazofil. Este o celul poliploid (cu 64 n garnituri
de cromozomi).
2. Magacariocitul bazofil are 100-150 m diametru. n citoplasm apar granule azurofile, care
vor forma cromomerii (granulomerii) viitoarelor plachete.
3. Megacariocitul granular este o celul de rezerv. n complexul Golgi se formeaz
membrane care nvelesc granulele.
4. Megacariocitul trombocitogenic prezint ratatinarea nucleului, care se micoreaz, este
expulzat n vase, unde va fi fagocitat.
Granulele azurofile se grupeaz; invaginaii ale plasmalemei marcheaz conturul fiecrei
plachete. Iniial apar canale, care fuzionnd formeaz membranele plachetelor.
Plachetele se desprind toate odat, proces numit dezagregare. Exist forme de purpur
trombocitopenic, n care apare scderea numrului de trombocite, prin defect de eliberare
a lor din megacariocit. Viaa plachetelor ajunse n circulaie, este de aproximativ 10 zile.

Figure 8. Cells of the megakaryocyte series shown

in a bone marrow smear. Note the formation of
platelets at the lower end of the megakaryocyte

5. Monocitopoeza - din CFUM

Monoblastul (care are reacii pozitive pentru esteraz) formeaz promonocitul, sub
aciunea interleukinei 3.
Din promonocit apare monocitul, care triete n snge 36-72 ore, apoi trece n
esuturi, unde devine macrofag, cu o via de 75-100 zile, cu capacitate de
diviziune celular pstrat, i resintetizeaz echipamentul enzimatic.
Astfel apare Sistemul fagocitelor mononucleate macrofagul fiind principala
celul fagocitar; principala celul prezentatoare de Ag (APC = "antigen presenting
cell") din organismul uman.

6. Limfopoeza
La adult limfocitele se dezvolt:
n mduv - limfocite B
n timus - limfocite T
n mic msur, dezvoltarea lor continu n organele limfatice secundare (ganglioni limfatici,
splin, esutul limfatic ataat mucoaselor) aceasta este limfopoeza secundar.
Limfopoeza primar:
1. Limfocitul mare (limfoblastul) este o celul de 10-12 m, cu nucleu mare, cu 1-2 nucleoli, cu
citoplasm bazofil, cu organite celulare dezvoltate, care conine i granule azurofile.
Seamn cu limfocitul activat dup contactul antigenic.
2. Limfocitul mijlociu este o celul de 8-9 m, cu citoplasm mai redus cantitativ, nucleu mai
condensat, cu nucleol greu vizibil. Numai prin difereniere, fr diviziune celular apare:
3. Limfocitul mic, matur, cu nucleu mai mic, hipercromatic; cu citoplasm puin, ca un halou
perinuclear.
n sngele circulant, n proporie redus apar limfocite mari i mijlocii.
LB este mai mare ca LT, avnd aproximativ 6,5 m diametru; LT este mai mic, de
aproximativ 5,5-6 m diametru.

Limfopoeza primar, const n diviziunea i maturarea limfocitelor n organele

limfatice primare (mduv, timus); aceasta are loc strict antigenoindependent i
policlonal. Se dezvolt clone de limfocite conform experienei imunologice
ancestrale a speciei, coninut n informaia genetic, clone capabile s
recunoasc orice fel de antigen, de pe Terra.
Acest fenomen poate fi evideniat prin contactul cu substane mitogene
(concanavalina A) sau antigene.
Limfocitele ntineresc la stadiul de limfoblast, are loc transformarea blastic, i se
divid, are loc expansiunea clonal. Limfopoeza secundar are loc n organele
limfatice secundare (ganglioni limfatici, splin, esut limfatic ataat mucoaselor);
limfopoeza secundar este antigenodependent i monoclonal.
La primul contact cu antigenul, se produc celule efectoare i celule cu memorie, LB
i LT, cu via lung, care persist n organism chiar 20-30 ani; la al II-lea contact
cu antigenul apare rspunsul imun secundar.
Rspunsul imun secundar este rapid i foarte eficient, celulele cu memorie sufer
rapid fenomenul de transformare blastic i expansiune clonal.

LB au suprafaa celular cu numeroi microvili.

LT au o suprafa celular mai neted. Aceste celule nu se recunosc n microscopia
optic.
Ele pot fi recunoscute n m.e. cu baleiaj sau prin tehnici imunologice; LT formeaz
spontan rozete cu hematiile de oaie, datorit unui marker de suprafa; aceasta este
tehnica rozetrii hematiilor de oaie.
LB au ca receptori membranari: imunoglobuline de suprafa, receptori pentru fc al
IgG i C3b complement.
LB reacioneaz la antigene solubile, circulante, se transform n plasmocite, care
secretat Ig (Ac).
Din limfoblastul B rezult limfocite B efectoare care se metaplaziaz n plasmocite,
secretante de Ig, care vor asigura aprarea antibacterian i limfocite B cu
memorie.
LB recunosc antigenul prezentat de celulele APC, n cooperare cu LT4 "helper".
Antigenele simple, de exemplu polizaharide, lipopolizaharide pot fi recunoscute
direct de LB, fr intervenia LT helper.
LT prezint ca markeri CD "clusters of differentiation", clase de difereniere. Pn
acum au fost evideniai cel puin 130 CD.
Cei mai importani markeri sunt: CD3, de activare, CD4, markerul limfocitelor T
helper sau ajuttoare i CD8, markerul limfocitelor T citotoxice i supresor.

Receptorul pentru antigen al LT este TCR, "T cell receptor", receptorul celulei T. LT
distrug mai ales antigene corpusculare, celule de grefa, tumorale, parazii, celule
infectate viral, unele bacterii intracelulare (de exemplu bacilul Koch) etc.
n organele limfoide secundare, limfocitele sunt atrase n anumite zone de factori
locali; zonele timoindependente sunt populate de LB:
- corticala superficial a ganglionului limfatic, zonele foliculare din splin etc;
caracteristic LB se dispun nodular, sub form de foliculi limfatici.
Zonele timodependente sunt populate cu LT - corticala profund a ganglionului
limfatic, teci/manoane periarteriolare n splin etc. LT se dispun difuz, n plaje de
limfocite. LT nu formeaz foliculi limfatici.
Celulele locale care atrag L n zonele respective:
celulele reticulare-dendritice sunt caracteristice zonelor timoindependente, cu
foliculi limfatici, populate de LB.
celule reticulare-interdigitate sunt caracteristice zonelor timodependente, cu L
dispuse difuz, populate de LT.
Aceste celule secret factori de micromediu pentru atragerea LB i LT n zonele
respectie. Sunt celule prezentatoare de antigen (APC).

7. Timusul
Timusul - iniial a fost considerat singurul organ limfoid primar.
Are dubl origine - endodermic i mezenchimal; n aproximativ sptmna a 8-a
a vieii intrauterine, muguri epiteliali din pungile branhiale 3 i 4, prolifereaz n
mezenchim i formeaz cuiburi de celule - care se dispun periferic sub form de
celule cuboidale, n timp ce central, vor fi celule cu prelungiri.
Aceste celule formeaz stroma epitelial a timusului, sunt celule alungite, cu
prelungiri, numite celule reticulo-epiteliale.
Timusul este singurul organ cu strom de natur epitelial.
Din mezenchim apar capsula, macrofagele timice, celule reticulare dendritice i
reticulare interdigitate.
n sptmnile 10-12 de via intrauterin, celulele precursoare ale LT colonizeaz
timusul. La natere, timusul are aproximativ 15 g i atinge maximum de dezvoltare
la 30-40 ani (40 g); apoi involueaz, transformndu-se n esut conjunctivo-grsos.

La exterior timusul prezint o capsul conjunctiv continu, fr vase limfatice, care face
parte din bariera timic, prevenind ptrunderea antigenelor.
Bariera timic devine eficient dup primele 2-3 luni de via embrionar (de la formarea
timusului) pentru ca LT s fac diferena ntre self i non-self.
Din capsul se desprind septuri conjunctive care despart zonele corticale ale lobulilor timici,
astfel nct apar lobuli incomplei, care comunic la nivelul zonelor centrale, medulare.
Lobului timic este aproximativ triunghiular (cuneiform) i prezint 2 zone: cortical, situat
periferic, intens violet n m.o. i o zon central, medular, mai palid, acidofil.
Cele dou zone nu au o limit net ntre ele. n zona medular sunt situate structuri
caracteristice pentru timus (pentru diagnosticul de organ n m.o.) numite corpusculi
Hassal, formai din celule epiteliale, dispuse concentric, care sufer un proces de
cheratinizare.
Populaia celular a lobulului timic este aceeai i n cortical i n medular, ns proporia
tipurilor celulare este diferit, n cele 2 zone. n general, cele mai numeroase sunt:
timocitele (LT), macrofagele, celulele reticulo-epiteliale. Mai puine ca numr: celulele
reticulare-dendritice, reticulare-interdigitate, celule Lagerhans, celule mioide.

Figure 9. Photomicrograph of a section of thymus showing the lobules. Two lobules show the dark
cortical and the light medullary zones. At the upper left are blood vessels and the connective tissue
capsule. Pararosaniline-toluidine blue (PT) stain. Low magnification.

LT (timocitele) predomin net n cortical, formnd aproximativ 85% din totalul

celulelor. Invers, n medular, cam 85% sunt celulele reticulo-epiteliale, aici sunt
puine LT i macrofage.
n timus, LT se divid, se matureaz imunologic, ctignd i pierznd markeri de
suprafa; n acest proces factorii de micromediu sunt foarte importani.
Celulele reticulo-epiteliale au prelungiri foarte lungi, care formeaz zone ca nite
saci, n care LT pe cale de maturare/n diviziune sunt adpostite, aceste celule sunt
numite celule doic.
Cortical timic conine celule reticulare-dendritice, celule APC, care prezint
antigene ale sistemului de histocompatibilitate de clas II i de clas I, pentru
recunoaterea self-ului de ctre LT. Aceste celule secret interleukin 1 i 2;
interleukina 1 stimuleaz diviziunea LT, interleukina 2 stimuleaz maturarea LT.

n procesul de maturare al LT, apar i dispar receptori de membran

- CD-uri. Mai nti apar CD11, 10, 9 ; CD11 i CD10 se menin, CD9 dispare i
apar CD8, 6, 4 i 1,.
Spre medular LT au CD11, CD10, CD3 i sunt CD1 i CD8 , CD4
=>2 linii: CD4 pozitiv (LT helper) i CD8 pozitiv (LT citotoxice/supresor).
n medular ajung 8-10% din LT. Majoritatea mor, fagocitate de macrofagele
santinel, situate la limita cortico-medular.
1-5% din limfocite trec direct n circulaie prin venula postcapilar, venul cu
endoteliu nalt. Pe celulele endoteliale sunt exprimai receptori care recunosc LT
mature.
Receptorul CD4 recunoate antigenul de histocompatibilitate de clas II, acestea
sunt celule T4 helper. Receptorul CD8 recunoate antigenul de histocompatibilitate
de clas I, acestea sunt celule T8: citotoxice i supresor.
Celulele reticulo-epiteliale sunt greu de difereniat de macrofage n microscopia
optic.

n m.e., celulele reticulo-epiteliale conin granule de precheratin i stabilesc ntre ele

jonciuni desmozomale. Ele sunt eseniale n formarea barierei timice, dubleaz capsula
conjunctiv i septurile, n interior, ca i vasele de snge.
Spre deosebire de celulele reticulo-epiteliale, macrofagele nu au jonciuni, ele exprim
antigenul de histocompatibilitate de clas II (APC); conin n citoplasm incluzii fagocitare
care sunt PAS .
Medulara conine celule reticulare-interdigitate care prezint antigene de
histocompatibilitate de clas I i II; adezine.
celula Langerhans exprim adezine, este celul APC- (prezint antigene de clas II);
celula mioid - seamn cu o celula muscular striat, conine miofilamente de actin
i miozin (crete numrul lor n miastenia gravis).
Vascularizaia timusului explic bariera timic; arterele dau capilare n medular i ramuri
separate la jonciunea cortico-medular.
Hormoni timici - timina, timulina, timozina sunt secretai de celule reticulo-epiteliale,
stimuleaz difereierea LT, dup mitoze.
Interleukina 1 i interleukina 2 sunt sintetizate de macrofage i celulele reticuloepiteliale (2), LT pe cale de maturare (2).
GH (STH) i hormonii tiroidieni stimuleaz timusul;
hormonii CSR i sexuali scad activitatea timic.
Involuia timic este fiziologic, dar poate fi i accidental (prin traumatism, sub influena
unor factori infecioi sau toxici).
Insuficiena CSR determin hiperplazie timic i ganglionar.

V mulumesc pentru atenie!