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Cul es la diferencia de producir insulina en E. coli y en levadura

(rendimiento, eficacia, forma de producirla, va de sntesis).
Como se llama al ADN que se obtiene de un ARN mensajero maduro.
Tipo de cromatografa para purificar ARN mensajero maduro (tcnica,
nombre, tipo).
Cuerpos de inclusin (donde esta y en qu tipo de organismos), periplasma
(donde esta y en qu tipo de organismos) y espacio periplasmico.
Carga energtica del plsmido que evita crecer al microorganismo.

Desde el punto de vista de produccin y energtico que es ms

recomendable?, usar un promotor inducible o uno constitutivo en el
plsmido de expresin de insulina en E. coli?

La insulina se forma como cuerpo de inclusin? Y en qu parte de la

clula se localiza? (citosol, espacio periplasmico etc.)

Como se elimina la formil-metionina de la insulina?

Funcin de la resistencia al antibitico. Para que le sirve a la bacteria contar
con esta resistencia.
Definir el cultivo madre, dijo que era muy complejo. Buscar algo ms
simple.
E. coli es anaerobia, aerobia, facultativa.
ppm de oxgeno disuelto en el reactor, presin del rector, todas las
condiciones que necesita llevar el reactor.
Mtodos de purificacin (desde el buffer, ph)
Con disolventes puedes recuperar el contenido sin romper toda la
estructura, describir si es mejor o peor, y que disolventes usaras.
Uso de la urea 8 molar
Cuando se rompe las clulas se liberan las proteasas, que se va a hacer
con ellas para que no hidrolicen nuestra hormona?.
Se puede usar EDTA como inhibidor de proteasas, describir como.
El Bromuro de ciangeno se utiliza para fragmentar la preproinsulina en su
residuo de triptfano para formar proinsulina ,pero este es cancergeno y
riesgoso, como se hace despus la eliminacin de este compuesto? es
posible sustituirlo por otro?

Como se rompen los puentes disulfuro y se vuelven a unir de una manera

ms estable. Describir mecanismo.
La sntesis se hace del extremo carbonilo al extremo amino o al revs.
Describir la fase mvil y la fase estacionaria en la cromatografa. Que se
usa como fase mvil y que como fase estacionaria.
La cristalizacin se genera a partir de compuestos muy puros, se puede
sustituir.
Definir coadyuvante.
Definir la purificacin.
Como eliminas el bromuro de cianogeno

-Qu es ms conveniente realizar la lisis celular? O usar algn solvente

para extraer la insulina del espacio periplasmico si es que esta se
encuentra en este espacio