Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
COCI PATOGENI
STAPHYLOCOCCUS
Definiie, taxonomie.
Stafilococii fac parte din familia Micrococcaceae, genul Staphylococcus.
Pn n anul 1997 au fost individualizate 33 de specii, dintre care 16 specii au fost izolate
de la om: Staphylococcus aureus i 15 specii de stafilococi coagulazo negativi.
Speciile de important medical sunt: Staphylococcus aureus, Staphylococcus
epidermidis (care face parte din flora indigen), Staphylococcus saprophyticus care poate da
afeciuni n sfera uro-genital.
Caractere generale:
Caractere morfologice
Sunt coci Gram pozitivi, cu dim. de 0,8-1,5m, n diplo sau grmezi neregulate (staphylos =
ciorchine), necapsulati (cei mai multi), imobili, aerobi, facultativ anaerobi, saprofii sau patogeni.
Posed: catalaz, coagulaz, fosfataz, descompun glucoza prin fermentaie.
Caractere de cultur
Cresc pe medii simple i n special pe mediile hiperclorurate (10-15% NaCI).
Pe mediile solide formeaz colonii de tip "S" (smooth = neted).
Elaboreaz pigmenti endogeni:
- S. aureus elaboreaz pigment auriu
- S. epidermidis pigment alb i
- S. saprophyticus pigment galben.
Caractere biochimice
- elaboreaz pigmeni: auriu, alb, galben ;
- elaboreaz hemolizine alfa, beta mai puin gamma i delta;
- sunt rezisteni la NaCI pn la 15 % ;
- fermenteaz glucoza, fermenteaz manita;
- produce coagulaz, fibrinolizina, catalaz, fosfataz, mai ales tulpinile patogene pentru om.
Habitat
S. aureus colonizeaz nrile, colonul de unde contamineaz frecvent tegumentul.
S. epidermidis se gsete pe tegumente i mucoase, este prezent n infectiile intraspitaliceti
(nosocomiale) sau n infecii grave la persoane tarate.
S. haemolyticus a fost dingnosticat n: endocardit, septicemii, peritonit, ITU, plgi chirurgicale.
S. soprophyticus este diagnosticat n ITU, uretrite negonococice, prostatite, infectii ale plgilor,
uneori n septicemii.
Rezistent
- rezist la uscciune i ntuneric;
- sunt sensibili la dezinfectante i antiseptice n concentraii uzuale;
- ctig uor rezistenta la antibiotice;
- sunt distrui n 15 min la 55-60C;
- pasteurizarea este eficient.
1
Caractere de hemoliz
Dimensiunile coloniilor de streptococ sunt mult mai mici (cca. 0,5 mm) dect de
stafilococ (care au un diametru de 0,5-2 mm), sunt incolore i dau hemoliz.
n functie de elaborarea hemolizinei streptococii se mpart n 4 categorii:
1. Streptococi hemolitici (eloboreaz hemolizina ) ei metabolizeaz incomplet hemoglobino
i dau o culoare verde n jurul coloniilor.
Din aceast categorie fac parte streptococii viridans, ei sunt saprofii, condiionat patogeni.
2. Streptococii 1 hemolitici (elaboreaz hemolizina l ), ei metabolizeaz complet
hemoglobina, dar este o hemoliz n care mai sunt hematii nehemolizate - incomplet, marginile
coloniei sunt neclare.
n aceast categorie intr serogrupurile B i D streptococice, sunt saprofite sau condiionat
patogene.
3. Streptococii , hemolitici (elaboreaz hemolizina ), dau hemoliz beta, care este complet,
foarte ntins, coloniile avnd marginile clare.
Din aceast categorie fac parte serogrupurile: A(care este totdeauna patogen), C. G.
4. Streptococii , sunt nehemolitici, nu elaboreaz hemolizine, n aceasta categorie sunt multe
tulpini din serogrupul D.
Caractere biochimice
- elaboreaz hemolizine sau (, 1, , ) nu produc.
- sunt aerobi, dar pot fi si microaerofili sau chiar facultativ anaerobi cum sunt cei din grupul D
care sunt enterococii.
Rezistenta
- au rezistenta scazuta sunt distrusi de razele ultrviolete, dezinfectante si antiseptice la
concentratii uzuale;
- sunt distrusi la 55oC timp de 20 min.;
- Streptococul din grupa A este sensibil la pencilina G, care se administreaz parenteral/oral
- Streptococul din grupa B este rezistent la concentntii mari de NaCI 6.5%, la variatii mari de
temperetura, la actiunea bilei si a sarurilor biliare (ca si viridans), si la actiunea multor
antibiotice.
Structura antigenic
Streptococii au antigene somatice si solubile.
1. Antigene somatice:
a) Antigenul capsular, la cei cu capsula (formata din acid hialuronic)si care poate fi distrus de o
enzima proprie hialuronidoza.
b) Anigenul M se gaseste pe suprafata peretului, pe baza acestui antigen se imparte in 65 de
serotipuri iar organismul produce anticorpi anti- M.
c) Carbohidratul C (se gsete n profunzimea peretelui bacterian).
Pe baza atestui antigen, streptococii se mpart in 19 serogrupuri (notate de la A-W cu ex literelor
I i J), este clasificarea lui Lancefield, de aici lipsesc streptococii viridans care nu au substana
C.
2. Antigene solubile
Exotoxina se numete eritrotoxina are afinitate pentru piele, determin exantem (la nivelul
pielii), sau enantem (la nivelul mucoaselor).
4
Exotoxina apare doar cnd streptococii sunt lizogeni, deci purttori de bacteriofag. Exotoxina
determina scarlatina, exotoxina este aceeai pentru totii streptococii, de aceea anticorpii antiexotoxina, ofer protectie.
Alte antigene solubile:
- hialuronidaza,
- fibrinolizinele: streptolizina O, care va determina organismul s rspund prin formare de
anticorpi (ASLO) i streptolizina S care este responsabila de -hemoliz, proteinaze, DN- i RNoze,carbohidraze.
Diagnosticul de laborator
1. Diagnosticul bacteriologic
Se izoleaz streptococii din produsele patologice i se determind grupul seroiogic prin:
Testul la bacitracin se evideniaz grupul A (singurul sensibil la acest antibiotic). Reacia este
pozitiv cnd apare o zond de inhibiie a cresterii de 10 mm n jurul discului de bacirtracin de
0,04 UI sau 0.1 UI , dac colonia este de alt grup atunci colonia se dezvolt normal (este
rezistent).
Reacia de coaglutinare evideniaz grupurile A, B, C, G, D. Este o reacie de aglutinare pe
lam prin care anticorpii cunoscui, cuplati cu proteina A stafilococic, reacioneaz cu agentul
(antigenul) necunoscut. n acest fel complexele Ac-Ag sunt transformote n corpusculi si pot fi
vizualizai. Pentru acest test se folosete trusa STREPTIC.
Reacia de precipitare in inel se folosete pentru evidenierea grupelor serologice.
2. Diagnosticul imunologic
La 2-3 sptmni, de la debutul infeciei streptococice respiratorii acute (incorect tratate
sau netratate), se poate instala una din complicatiile grave nesupurative: glomerulonefrita acut
(GNA). reumatismul articular acut (RAA), seu febra reumatismal (FR), cardita reumatismal
(CR),coreea, eritemul nodos. Apar n urma mecanismului de hipersensibilizare de tip II
(citotoxc), III (complexe imune).
Diagnosticul imunologic se face uzual prin reacia ASLO (care reprezint titrul
anticorpilor anti streptolizin O) ea poate stabili: diagnosticul. prognosticul, eficienta
tratamentului.
Un titru mai mare de 200 u ASLO/ml arata o infectie streptococica in antecedente daca
dupa 3 saptamni de tratament nu scade titrul anticorpilor la normal, tratamentul se repet, dac
nu scade nseamn c s-a instalat reactia de hipersensibilizare, n acest caz pacientului (sub
tratament pe antibiotice de preferat penicilin) se determin lunar titrul ASLO, un titru care scade
arat vindecarea.
Patogenitate
Streptococii grup A pot da:
- infecii acute ale: tractului respirator (forma eruptiv- scarlatina, forma neeruptiv: angina,
faringita, etc)
- otita medie, sinuzita, meningita, pneumenie, bronhopneumonie, pleurezie, endocardita acuta.
Localizarea cutanat a infeciei streptococice este mai frecvent n zonele calde: intertrigo
impetigo, zablu (infecia comisurii bucale), celulite, abcese. flegmoane.
Erizipelul este o infecie streptococic cu localizare cutanat (atunci cnd exist o soluie de
continuitate): la nivelul gambelor, feei, cu caracter recidivant.
5
Virulena streptococilor piogeni este dat n special de proprietatea antifagocitar, care depinde
de prezena componentelor celulare de suprafaa: acidul hialuronic capsular i proteina M.
Streptococii viridans
Aceti streptococi dau hemoliz de tip a, n jurul coloniei i colonin vor fi verzi (dup
mentinerea peste noapte la 40 C, poate s mai apar la exterior un inel de hemoliz complet).
Sunt 5 grupuri de specii care pot da infecii umane.
Cele mai importante sunt:
- grupul mutans, cu specia S. mutans (cariogen),
- grupul salivarius, uiiele specii produc ureaz, un caracter distinct din acest gen,
- grupul sanguis, care hidrolizeaz aesculina,
- grupul mitis;
- grupul anginosus.
Localizare:
- Se gsesc n cavitatea bucal, tract urogenital, piele, sunt germeni saprofii conditionat
patogeni, ei pot da endocardita lent malign.
Nu contin n structura peretelui carbohidratul C, deci nu sunt inclui n clasificarea Lancefield.
Pentru diagnosticul diferential cu Streptococcus pneumoniae, care au acelai tip de
hemoliz (alfa), se efectueaz testul sensibilitii la optochin, al bilolizei i fermentrii inulinei,
toate sunt pozitive pentru pneumococ i negative pentru Streptococcus viridans.
Streptococii de grup D (Enterococcus)
Se mai numesc enterococi, cele mai cunoscute specii sunt: E. faecalis, E. faecium.
Pot produce hemoliz de tip a sau pe mediu de geloz-snge cca. 1/3 din tulpini, restul sunt
nehemolitici.
Pe agar cu bil-aesculin i azid de sodiu coloniile enterococilor sunt albe-cenuii cu holou
negru.
Se caracterizeaz prin:
- rezisten crescut la temperaturi ridicate (40-60oC).
- capacitate de dezvoltare la variaii mari de temperatur (ntre 10-45C).
- i la pH alcalin (9,6).
Enterococcus
- Enterococii sunt sferici, ovalari sau cocobacilari dispui n perechi sau lanturi scurte,
- Gram pozitivi, n majoritate imobili cu excepia speciilor: E-gallinarum i E.casseliflavus, care
sunt mobile.
- Ei determin infecii urinare, genitale, endocardite subacute (pn la 20 % din totalul lor).
Prezena n ap sau alimente a enterococilor arat contaminarea fecal a acestora, decelarea lor
servind ca test de poluare
Streptococcus pneumoniae (pneumococul)
Morfologie
- Sunt coci lanceolati dispui n diplo cu dimensiuni de 1/1,5m, pneumococii virulenti au
capsul care nconjur ambele celule, dispui cu capetele rotunjite fat in fat.
- Sunt imobili, nesporulai, Gram pozitivi, majoritatea sunt saprofiti, dar sunt i tulpini patogene
nu se gsesc n natur.
6
Caractere de cultur
Cresc numai pe medii ce conin snge, cei ncapsulati dau colonii de tip S'.
Sunt hemolitici, coloniile sunt mici, transparente i nconjurate de o, zon de hemoliz a, ca la
streptococii viridans.
Caractere biochimice
Sunt sensibili la bil, la optochin, fermenteaz inulina.
Rezisten
Sunt sensibili n mediul extern, se transmit prin picturile Pflugge, sunt distrui de razele
solare, de dezintectante la concentraii uzuale.
Majoritatea tulpinilor sunt sensibile la penicilin.
Structur antigenic
Are antigene somatice i solubile, cel mai important este Ag SSS (Substanta Solubil
Specific), din constituia capsulei, avnd o structur polizaharidica Ag SSS mparte
pneumococii n 83 de serotipuri (serotipul 3 d cea mai mare capsul).
Caractere de patogenitate
Pneumococii ncapsulai sunt patogeni prin multiplicare i invazivitate, nu are capacitate de
toxigenez.
Determin pneumonia franc lobar (localizat doar la nivelul unui singur lob).
Diagnosticul de laborator
Se practic diagnosticul bacteriologic, produsul patologic este sput, doar primele 14 grupuri
serologice sunt patogene.
Sputa n afeciunile pulmonare pneumococice este ruginie, puroiul este de consistent
cremoas, fibrinoas de culoare verzuie.
Frotiurile din produsele patologice se coloreaz Gram i albastru de metilen.
Se vor pune in eviden coci lanceolati, dispui in diplo sau lanuri scurte, nconjurai de
capsul, Gram pozitivi, leucocite, intra i extracelalari precum i detritusuri celulare.
Identificarea pneumococilor
Se face cu ajutorul unor teste biochimice i serologice:
Biloliza (fenomenul Neufeld) lizarea culturilor de pneumococi prin adugarea de bil, caracter
care l difereniaz de Str.viridans.
Testul sensibilitii la optochin (ethilhidrocuprein).
Pe o plac de geloz - snge se nsmnteaz un sector dintr-o cultur pur suspect, n centrul
ariei se depune un disc de optochin de 5g dup 24h la 37 C se citete rezultatul, tulpina de
pneumococ fiind foarte sensibil in jurul discului va apare o zon de inhibiie de 10 mm.
Fermentarea inulinei - se nsmnteaz o cultur pur de pneumococ n mediul Hiss ce
contine inulin, fermentarea inulinei schimb culoarea mediului, prin schimbarea pH-ului la acid
prin descompurerea zahrului. Acest caracter diferentiaz pneumococu de streptococii viridans
(Str. mitior i Str. milleri).
Identificarea serologic
Reacia de aglutinare.
Se realizeaz cu o suspensie de germeni n cultur pur, un mediu lichid care se pun n contact cu
serurile specifice de tip, la o reactie pozitiv apar aglutinine.
La noi se realizeaz identificarea serogrupurilor 1.2 i 3.
Tehnica de umflare a capsulei (reactia Neufeld), prin tratarea cu ser antipolizaharidic specific de
7
13