CROMATOGRAFA DE AMINOCIDOS

NOMBRE DE LOS INTEGRANTES: Jurez Salas Stephane,

INTRODUCIN
La cromatografa en papel, permite llevar a cabo la separacin e identificacin
de iones, trabajando con cantidades mnimas de sustancia, pertenece al tipo de
Cromatografa de particin se fundamenta en que las sustancias problema,
pueden tener diferentes coeficientes de reparto en dos disolventes de
inmiscibilidad limitada, uno permanece fijo en la superficie del papel fase
estacionaria generalmente en agua, la fase mvil constituida generalmente por
una mezcla de disolventes parcialmente miscibles en ella.[1]
La muestra se deposita en un extremo colocando pequeas gotas, luego el
disolvente empleado como fase mvil se hace ascender por capilaridad. La
separacin se realiza en funcin de la afinidad de los solutos con las dos fases,
para el caso de los aminocidos la separacin implica que los aminocidos
cuya cadena lateral (R) tenga un carcter ms apolar, tendrn tendencia a
desplazarse con la fase mvil, mientras que los aminocidos que sean polares,
ya sean con carga o sin carga, sern retenidos por la fase estacionaria. Ello es
as, porque la fase mvil est formada por solventes que son ms apolares que
el agua, que es el solvente de la fase estacionaria.[2]
Las sustancias separadas se identifican mediante diversos procedimientos
fsicos o qumicos, para visualizar las bandas de separacin de aminocidos se
utiliza la ninhidrina que es un poderoso agente reactivo.
Como medida en cromatografa sobre papel se emplea el Rf (Retention factor),
el cual se define como el cociente de dividir el recorrido de la sustancia por el
disolvente, esto es, la distancia media desde el origen hasta el centro de la
mancha dividida por la distancia que media desde el origen hasta el frente del
disolvente.[1]

MATERIAL

Cmara cromatografa
Papel para cromatografa (16 cm largo X 18 cm ancho)+
Estufa 90 c
Capilares
Lpiz
Regla
REACTIVOS

Aminocidos en solucin 0.05 M

Solvente: n-Butanol: cido actico glacial: Agua
Revelador: Solucin de Ninhidrina
Hidrxido de amonio concentrado
METODOLOGA
OBSERVACIONES
RESULTADOS
Fig. 1 Cromatografa en papel de aminocidos experimental.

Aminocido
PROLINA
SERINA
LISINA
LEUCINA
MEZCLA

Distancia recorrida
por el aminocido
1.7 cm
1.1 cm
1.3 cm
3.7 cm
3.1 cm

Distancia recorrida
por el disolvente
11.5 cm
11.5 cm
11.5 cm
11.5 cm
11.5 cm

Rf
0.147
0.095
0.113
0.321
0.269

Tabla1. Resultados experimentales de la cromatografa de aminocidos.

DISCUSIN DE RESULTADOS

CONCLUCIN
CUESTIONARIO
1. En qu orden migran los aminocidos de los diferentes grupos?
2. Es la ninhidrina un revelador selectivo? Por qu?
3. Cmo se calcula el Rf?
El Rf se calcula dividiendo la distancia que recorri el compuesto (aminocido)
por la distancia que recorri el disolvente. El factor de retencin estar entre
cero y uno. No puede ser cero porque la sustancia debe haberse movido, y no
puede ser mayor a uno porque la solucin no puede recorrer ms distancia que
el solvente.[3]
Rf =

Distancia recorrida por el compuesto

Distancia recorrida por el disolvente

BIBLIOGRAFIA:
[1].- http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf
[2].- http://www.odonto.unam.mx/pdfs/bioquimica_experimentalparte4_defiparte1.pdf

[3].- http://www.ehowenespanol.com/calcular-rf-como_450041/