Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
Abstrak
Youghurt merupakan minuman probiotic yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri patogen
didalam tubuh. Bakteri asam laktat merupakan bakteri probiotik yang mampu menghasilkan Anti
Microbial Peptide (AMP) yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri patogen. Bakteri asam laktat
yang diisolasi dari minuman youghurt haruslah diidentifikasi untuk mengetahui genus isolat bakteri
asam laktat yang digunakan. Cara pengidentifikasian dilakukan dengan cara pengamatan mikroskopis
bentuk sel, pewarnaan Gram, uji KOH, uji pembentukan asam dari berbagai sumber karbon, uji suhu,
uji gas, uji katalase, uji pH, uji motilitas, dan uji dekstran. Dari hasil pengamatan didapatkan dua isolat
positif bakteri asam laktat dengan menunjukkan karakter yang sama ketika dibandingkan dengan
penelitian sebelumnya, yaitu isolat Y2 dan isolat Y5.
Kata Kunci: youghurt, uji biokimia, pengamatan morfologi, prebiotik, probiotik
Abstract
Youghurt is a probiotic drink that can inhibit the growth of patogenic bacteria in the body. Lactic acid
bacteria are probiotic bacteria that are able to produce Anti-Microbial Peptide (AMP) that can inhibit
the growth of patogenic bacteria. Lactic acid bacteria isolatd from youghurt drinks must be identified
to determine the genus of lactic acid bacteria isolats used. Way identification is done by microscopic
observation cell shape , pewranaan gram, KOH test, acid test, temperature test, gas test, catalase test,
pH test, motility test, and test dextran. The Resut of observations obtained two positive isolats of lactic
acid bacteria to show character similar when use comparison with last research the other observer,
which isolats and isolats Y5 Y2.
Keywords: youghurt, biochemistry test, morfological, prebiotic, probiotic
Pendahuluan
Yoghurt merupakan salah satu minuman
kesehatan yang banyak dikonsumsi masyarakat.
Salah satu tujuannya adalah untuk mencegah atau
menurunkan kadar kolesterol, tekanan darah,
infeksi saluran pencernaan karena Helicobacter
pylori, diare, dan mengurangi resiko menderita
kanker usus [18];[15];[2];[6].
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
(a)
(c)
(b)
(d)
(e)
Gambar 1. pengamatan morfologi sel pengecatan
Gram (a) y1; (b) y2; (c) y3; (d) y4; (e)
y5
b. Uji Gram dengan KOH
Isolat yang ditumbuhkan pada media GYP
broth diambil satu ose pada gelas objek dan
ditetesi dengan KOH 10% semuwa isolat
menunjukkan hasil tidak berlendir yang
menunjukkan kelima isolat merupakan gram
positif.
Pada pengujian gram dengan KOH 10%
dilakukan untuk lebih memastikan hasil
pengecatan gram. Isolat yang ditumbuhkan pada
media GYP broth diambil satu ose pada gelas
objek dan ditetesi dengan KOH 10% setelah itu
diratakan dengan menggunakan tusuk gigi, setelah
c. Uji motilitas
Pada pengujian motilitas kultur bakteri
semuwa isolat digunakan dari hasil pemurnian
dengan menggunakan jarum inokulasi, yang
dilakukan dengan menginokulasikan dengan cara
ditusuk pada media GYP Agar lunak dan telah
diinkubasi selama 48 jam, pada suhu 30 C.
Setelah diinkubasi kelima isolat bakteri
menunjukkan motilitas negatif, kelima isolat
tersebut merupakan bakteri yang daya motilitasnya
rendah, kelima isolat hanya mampu tumbuh pada
sekitar bekas tusukan pada agar. Isolat y1, y2, y5
memiliki bentuk beaded, sedangkan pada isolat
y3, dan y4 memiliki bentuk echinulate. Hal ini
dapat mendukung bahwasanya isolat Bakteri
Asam Laktat merupakan bakteri dengan
kemampuan motilitas yang rendan ataupun tidak
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
motil [16].
Gambar
Gambar 2. Pengujian motilitas pada media agar
lunak inkubasi pada suhu 30C
selama 48 jam
d. Uji biokimiawi, terdiri dari uji katalase, uji
pembentukan
dextran,
dan
uji
pembentukan asam dari berbagai sumber
karbon.
Pada uji katalase dari kelima isolat yang
diuji, tiga isolat (y1,y3,y4) merupakan positif
katalase dengan adanya gelembung udara (O2)
yang merupakan hasil pemecahan H2O2 menjadi
H2O dan O2. Sedangkan dua isolat (y2, dan y5)
merupakan katalase negatif dengan tidak terdapat
gelembung udara saat ditetesi H2O2. Untuk isolat
y2 dan y5 dapat diduga bahwa kedua isolat
tersebut merupakan bakteri asam laktat, hal ini
didukung oleh pendapat [7] yang menyatakan
bahwa bakteri asam laktat merupakan bakteri yang
negatif menghasilkan enim katalase karena bakteri
asam laktat merupakan bakteri anaerob fakultatif
yang menghasilkan enzin peroksidase yang akan
memecah H2O2 menjadi senywa organic dan H2O,
dan tigak menghasilkan gelembung udara. Reaksi
kimiawi yang dikatalisasikan oleh enzim katalase
dan peroksidase terlihat sebagai berikut :
H2O2
H2O + O2
Katalase
H2O2
(a)
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
(b)
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
y1
y2
Isolat
y3
y4
y5
2.7
4.0
8.1
4.0
4.5
Glukosa
3.1
3.1
2.7
5.4
3.1
Fruktosa
3.1
4.0
3.6
4.5
4.0
galaktosa
1.3
4.0
1.3
2.7
3.6
sorbitol
0.9
2.2
6.3
1.3
3.6
laktosa
2.2
4.5
2.7
3.1
0.9
xylosa
0.9
1.3
0.4
0.9
1.3
sukrosa
4.3
2.7
0.9
0.4
4.9
cellobiosa
3.1
3.1
3.1
3.1
1.8
pati
0.9
2.7
1.8
0.9
1.3
manitol
4.5
2.7
1.3
1.3
3.1
keterangan : kelima isolat menunjukkan produksi
asam yang sedikit pada pati dan
xylosa karena merupakan gula
polisakarida.
Setelah dilakukan prosedur titrasi maka
didapatkan hasil kandungan asam dalam masing-
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
y4
++
++
+++
++
y5
+
++
++
keterangan : isolat y1, y2, y4, y5 tumbuh baik
pada suhu mesofil, sedangkan isolat
y3 tumbuh baik pada suhu psikrofil.
(a)
(b)
(d)
Gambar 5. Pengujian viabilitas BAL isolat y1,
y2, y3, y4, y5 pada berbagai variasi
suhu (a) 4C, (b) 30C, (c) 37C, (d)
47C dengan waktu inkubasi 48 jam
pada media miring.
Pada pengujian pengaruh pH; isolat yang
menunjukkan pertumbuhan baik pada ph
rendah/asidofil (pH 3-5.5) adalah isolat y4, isolat
yang mampu
tumbuh
baik pada pH
sedang/mesofil (pH 5.5-8) adalah isolat y3 dan y5.
Sedangkan isolat yang tumbuh baik pada pH
tinggi >9 adalah isolat y1 dan y2. Pada literature
disebutkan bahwa Bakteri asam laktat optimal
tumbuh pada media pH mesofil (pH 5.5-8) yang
nantinya pH tersebut akan menurun hingga pH 3-4
yang berfungsi untuk menekan pertumubhan
bakteri patogen [3]. Bakteri asam laktat terdapat
pada Susu sapi yang mempunyai kadar pH 5,8
6.,sedangkan pH susu kambing 6,8 - 7). Dari
kisaran nilai pH ini juga yang menjadi salah satu
faktor penyebab kemungkinan keanekaragaman
spesies
bakteri
asam
laktat
.
Selain
keanekaragaman, faktor pH habitat juga
menyebabkan bakteri ini menjadi tahan terhadap
pH tinggi.
Tabel 3. Pengaruh variasi pH pada kelima Isolat
ISOLAT
pH
y1
y2
y3
3.5
++
++
++
5.5
++
++
++
7.2
+++
+++
+++
9.5
+++
+++
++
y4
y5
+++
-
++
-
++
-
++
+
(c)
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
(a)
(b)
(c)
(d)
Gambar 6. Pengujian viabilitas BAL isolat y1,
y2, y3, y4, y5 pada berbagai variasi
pH (a)3.5, (b)5.5, (c)7.2, (d)9.5
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11
Nuryady et al., Isolasi dan identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) asal Yoghurt
[11]
[12]
[13]
Daftar Pustaka
[1]
[2]
[3]
[4]
[5]
[6]
[7]
[8]
[9]
[10]
[14]
[15]
[16]
[17]
[18]
UNEJ JURNAL Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Asal Yoghurt, Nuryady et.all , 2013, I (5): 1-11