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ACCION ENZIMATICA

I.

INTRODUCCION.
Cuando se realizan reacciones qumicas a veces es necesario agregar sustancias que
aceleren o faciliten la reaccin, a estas sustancias se les llama catalizadores. Las enzimas
son protenas, tambin llamadas catalizadores biolgicos, porque son de naturaleza
orgnica, producidas por la clula para acelerar la velocidad de las reacciones qumicas,
quedando estas intactas al terminar estas reacciones.
Las enzimas actan sobre sustancias llamadas sustratos, que es la molcula que van a
transformar, son altamente especficas, variando su actividad con la modificacin del Ph,
temperatura, concentraciones de enzima y sustrato; estas pueden ser inhibidas por
sustancias llamadas venenos enzimticos.
Durante esta prctica se tratar de poner de estudiar algunos de los factores que afectan
la actividad enzimtica.

II.

OBJETIVO.

Al finalizar el laboratorio cada estudiante ser capaz de interpretar los mecanismos


subyacentes de la accin enzimtica sobre sustratos especficos

III.

MATERIAL.

3 Pinzas para sujetar tubos de ensayo


Solucin de almidn al 1%
Saliva*
Lugol enfrasco gotero
Reactivo de Benedict
1 Docena de tubos de ensayo, resistentes al calor*
Lmpara de alcohol
4 Varillas de vidrio
Pastillas de cuajo (renina)*
HCl al 10%
30 cc. de leche*
4 goteros*
4 pipetas de 5 ml.
Guantes descartables*
Crayon graso o maskin tape*

* El material marcado con asterisco (*) lo aportan los estudiantes por grupo.

IV.

PROCEDIMIENTO.

Accin de la Amilasa sobre el almidn


a. Rotule dos tubos uno con las letras SC (Saliva Cruda) y otro con las letras SH (Saliva
Hervida)
b. Agregue a cada tubo dos ml de saliva.
c. El tubo SH calintelo hasta ebullicin (Desnaturalizacin de la Amilasa)
d. Rotule 4 tubos: Uno con SCL (Lugol) ; Otro con SCB (Benedect); Otro con SHL (Lugol) y
uno ms con SHB (Benedect), agregndole 1 ml de solucin de almidn al 1 %.
e. Del tubo SC extraiga 10 gotas de saliva para el tubo SCL; y 10 gotas para el tubo de SCB.
Del tubo SH extraiga 10 gotas para el tubo SHL y otras 10 para el tubo SHB.
f. Despus de 5 minutos de haber agregado la saliva, a los 4 tubos realice pruebas de Lugol y
Benedict, a los tubos con L y B respectivamente.
g. Utilice una varilla diferente para cada tubo, al mezclar.
h. Cada vez que use goteros y pipetas lvelos con agua.
i. Observe, anote y analice sus resultados en el cuadro de registro.

Accin de la Renina sobre la Casena de la Leche

1.
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Disuelva de pastilla de cuajo (renina) en 25 ml de agua destilada.


Numere 2 tubos de ensayo (1 y 2).
En el tubo # 1 coloque 5 ml de leche.
En el tubo # 2 coloque 5 ml de leche ms 2 gotas de HCl al 10%.
Agregue 10 gotas de solucin de renina a cada tubo numerado.
Observe anote y analice sus resultados.

ACCION DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDON

TUBO
SCL
SCB
SHL
SHB

Calidad de la Enzima
ACTIVA
SALIVA CRUDA
INACTIVA
SALIVA HERVIDA

PRUEBA A LOS CINCO MINUTOS


LUGOL
BENEDECT

En base a sus observaciones qu puede concluir acerca de cmo afecta a la actividad


enzimtica el tiempo, la concentracin y la temperatura?