DETERMINACIN DE POLISACRIDOS TOTALES EN GEL LQUIDO DE

ALOE VERA L, PARA SU EMPLEO COMO MATERIA PRIMA EN

FORMULACIONES DE SUPLEMENTOS DIETTICOS.
E. A. Rodrguez, J. E. Rodrguez, Z. Pardo y V. Pavn
Centro de Investigaciones y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM). Ministerio de Salud
Pblica. Cuba.
Fuente: Revista Alimentaria No 313. Junio 2000. Madrid. Espaa.

Introduccin
Aloe vera L., comnmente conocido en Cuba como sbila, es una planta ampliamente utilizada
por la poblacin para el tratamiento de diversas enfermedades. A ella se le atribuyen propiedades
cicatrizantes, laxativas, antiasmticas, antihepatotxicas, antiblenorrgicas y antiescorbticas,
entre otras (1-6).
Su composicin qumica puede variar de una especie a otra, dependiendo de muchos factores. No
obstante, de manera general se conoce que el Aloe presenta en su composicin derivados
antraquinnicos (Alona, Homonatalona y Aloemodina, entre otros), polisacridos (compuestos por
Arabinosa, Galactosa, Manosa, Ramnosa y Glucosa, entre otros), cidos orgnicos, protenas y
minerales. Por su alto y variado contenido de nutrientes naturales, se emplea adems, como
complemento de dietas bajas en caloras, aportando la energa necesaria contra desgastes fsicos
(2, 5, 7-13).
En nuestro centro se ha desarrollado un proceso tecnolgico para la obtencin de gel lquido de
Aloe, el cual ser empleado como materia prima en el desarrollo de diferentes formulaciones para
utilizarse como suplementos nutricionales y farmacuticos. Con el objetivo de establecer el control
de calidad de dicha materia prima, se ha desarrollado un mtodo de anlisis por espectrofotometra
ultravioleta visible, basndose en la propiedad que presentan los polisacridos de formar furfural,
por hidrlisis y posterior deshidratacin de estos en presencia de cido sulfrico, que al reaccionar
con fenol forma un complejo de color amarillo naranja que presenta un mximo de absorcin a 490
nm (14).
Materiales y Mtodos
La metodologa establecida fue la siguiente: Se pasa 1 mL de gel lquido de Aloe a un matraz
aforado de 100 mL, llevndose a volumen con solucin de cloruro de sodio 0.3 mol/L.

Posteriormente se toman 2 mL de esta solucin y se llevan a un tubo para ensayo, se adiciona 1

mL de solucin de fenol al 5% y 5 mL de cido sulfrico concentrado, se agita y se deja en reposo
por 30 minutos. La absorbancia se determina a 490 nm.
Se utiliz muestra correspondiente al lote 98002 del gel, elaborado por el Departamento de
Productos Naturales de nuestro centro. Como estndar de referencia se emple la D(+) manosa,
suministrado por la firma Merck, por ser este el monmero mayoritario en el polisacrido de la
especie cubana (15).
Se elabor una curva de calibracin cuyas concentraciones oscilaron entre 10 y 120 ppm de
manosa, siguiendo para ello el mismo procedimiento descrito anteriormente.
Previamente se realiz un estudio para establecer la estabilidad del complejo formado. Para ello se
determin el valor de la absorbancia del complejo a intervalos de 10 minutos, entre los 20 y 70
minutos despus de formado el mismo.
Con el objetivo de definir la especificidad del mtodo propuesto se realiz la precipitacin de los
polisacridos presentes en la muestra segn la metodologa descrita por Quevedo (15).
Posteriormente se realiz la metodologa de anlisis a las muestras de polisacrido precipitado, del
gel lquido de Aloe y del lquido sobrenadante, determinndose el espectro de absorcin en la zona
del visible.
Para determinar la precisin del mtodo se realizaron 7 determinaciones por un analista y 6
determinaciones por otro analista, en das diferentes a una misma muestra de gel lquido de Aloe.
Se calcul la media, la desviacin estndar y el coeficiente de variacin para cada caso y los
resultados se compararon entre si mediante un test de Fisher y un test t de Student (16-18).
Para el estudio de la exactitud se aplic el mtodo de adicin de estndar. Se prepar una solucin
madre de 20 ppm de manosa y se prepararon muestras a las cuales se adicionaron
concentraciones conocidas de manosa de 2, 4 y 6 ppm. Posteriormente se realiz la metodologa
de anlisis establecida.
Para evaluar el parmetro de linealidad se realiz la curva de recobrado, determinndose la
ecuacin de la recta por el mtodo de los mnimos cuadrados.

Resultados y discusin
Se obtuvo una curva de calibracin del tipo y = 0.0068X - 0.038, con un coeficiente de
determinacin de 0.998, la cual cumple con la ley de Lambert Beer. Los factores de respuesta son
similares entre si y cercanos al valor de la pendiente, y su coeficiente de variacin es inferior al 5%.
La pendiente de la recta de regresin tiene un 95% de probabilidad de ser diferente de cero
(texp=37.99 > ttab=2.45), segn el procesamiento estadstico realizado a la misma, mientras que el
intercepto es prximo a cero (texp=2.04 < ttab=2.45) (16-18).
El estudio para establecer la estabilidad del complejo formado demostr que no existan diferencias
significativas entre los resultados obtenidos a los 20 minutos y cada una de las mediciones
realizadas a cada uno de los intervalos, por lo que las mediciones pueden ser realizadas durante el
perodo de tiempo estudiado.
Los estudios de especificidad del mtodo demostraron que se obtienen mximos de absorcin a
490 nm, caractersticos del complejo que se forma entre el polisacrido y el fenol sulfrico para los
dos primeros casos, no observndose ninguna absorcin en esa zona en el caso de la muestra de
lquido sobrenadante. Estos resultados son importantes pues se confirma que la metodologa
establecida es especfica para la determinacin de polisacridos totales, no formando complejos
con el resto de los componentes presentes en el gel.
Los resultados del estudio de la precisin del mtodo (tabla 1), demuestran que en ambos casos el
coeficiente de variacin para cada analista es menor que el 3%, lo que se considera adecuado

para este tipo de anlisis segn la literatura consultada (16-17). Por otro lado no se encontraron
diferencias significativas entre las medias de los resultados y las varianzas de cada analista
(Fexp=2.678 < Ftab=4.39, texp=0.38 < ttab=2.18 para p=0.05 y GL=12), por lo que se puede considerar
la muestra como homognea.

Los resultados del estudio de la exactitud del mtodo (tabla 2) demostraron que en todos los casos
los porcentajes de recobrado estn entre el 97 y el 103%, siendo el recobrado promedio de
101.03% y el coeficiente de variacin de 1.59%, lo que consideramos adecuado para este tipo de
anlisis.

La determinacin de la G de Cochran (G exp=0.5825 < Gtab=0.8709), demostr que las varianzas de

las concentraciones empleadas son equivalentes, pudindose asumir que la concentracin no
influye en la variabilidad de los resultados. Se comprob adems que no existan diferencias
significativas entre el valor de la recuperacin media y el 100% de recobrado (t exp=0.22 < ttab=2.31
para p=0.05 y GL=8) (16-18).
Al evaluar la linealidad del mtodo, se obtuvo una recta del tipo y= mX + b (y= 1.03X - 0.063 con
R2=0.999), siendo significativa la pendiente y no significativo el intercepto, segn los test
estadsticos realizados.
Conclusiones.
Como conclusiones de este trabajo podemos afirmar que el mtodo propuesto es ms sencillo y
rpido que el mtodo tradicional por gravimetra, quedando demostrado que el mismo cumple con
los parmetros de especificidad, precisin, linealidad y exactitud.

Bibliografa.
1. Roig, J. T. (1974). Plantas medicinales y venenosas de Cuba. De. Ciencia y Tcnica. La Habana.
698-699.
2. Fajardo, D.; Daz, M.; Galup, O., y Rosado, A. (1988). Algunos spectos sobre la composicin
qumica y posibles aplicaciones del Aloe. Revista CENIC (ciencias qumicas). 19 (1-2-3). 97-102.
3. Japan Patent 78.59.019. 27 de mayo de 1978. Appl. 76/132. 215. 2 de noviembre de 1976.
4. Japan Patent 79.119.018. 14 de septiembre de 1979. US Appl. 883.749. 6 de marzo de 1978.
5. Grindley y Reynolds (1986). The Aloe vera phenomenon: A review of the properties and modern
use of the leaf parenchyma gel. J. of Ethnopharmacology. 16. 117-151.
6. . . . (contina hasta la cita N 19)