ARTIGOS ORIGINAIS / ORIGINAL ARTICLES

Parmetros bioqumicos e microbiolgicos

e suas relaes com a experincia de crie
em adolescentes sadios
Microbiological and biochemical parameters
and their relationship with carie in healthy
teenagers

Thayza Christina Montenegro Stamford

Daniela Marinho de Souza Pereira 2
Luciana Cabral de Alcntara 3
Geraldo Bosco Lindoso Couto 4

Departamento de Odontologia Preventiva. Universidade Federal

de Pernambuco. Av. Prof. Morais Rgo, s.n. Cidade Universitria.
Recife, PE, Brasil. CEP: 50.670-420
E-mail: thayzastam@hotmail.com
2,4 Ps-graduao em Cincias Biolgicas. Universidade Federal
de Pernambuco. Recife, PE, Brasil
3 Ps-Graduao em Biotecnologia. Universidade Federal
de Pernambuco. Recife, PE, Brasil
5 Ps-graduao em Odontopediatria. Universidade Federal
de Pernambuco. Recife, PE, Brasil
1

Abstract

Resumo

Objectives: to establish a relationship between

dental caries with the degree of Streptococcus mutans
present in the salivary flow and saliva buffer ability
in 111 healthy adolescents seen at the Pediatrics
Outpatient Clinic of the Hospital das Clnicas de
Pernambuco.
Methods: Intraoral examinations were performed
and dental records filled to determine DMFS-S
(Decayed, missing teeth and filled permanent dental
surfaces). Following, saliva was collected to determined salivary flow and buffer ability. Front teeth
were scrapped to quantify Streptococcus mutans
present in the bacterial plaque.
Results: the population assessed had predominantly low caries activities with buffer ability of
normal saliva and deficiency of salivary flow. The
numbers of S mutans in the bacterial plaque exceeded
105 CFU/mg in the majority of individuals in the
population studied.
Conclusions: caries activity was inversely
proportional to the buffer capacity and directly
proportional to the presence of Streptococus mutans
in the bacterial plaque. This low carie activity could
be derived from the daily tooth-brushing with fluor
dentifrices.
Key words Dental caries, Bacteria, Streptococcus
mutans

Objetivos: verificar a relao da experincia da

doena crie com o grau de ocorrncia de Streptococcus
mutans, o fluxo salivar e a capacidade tampo da
saliva em 111 adolescentes sadios atendidos no Setor
de Puericultura do Hospital das Clnicas de
Pernambuco
Mtodos: realizou-se o exame intraoral e o
preenchimento de ficha clnica, para determinao do
ndice CPO-S (Nmero de superfcies dentrias cariadas, perdidas ou com extrao indicada e restauradas). Em seguida coletou-se a saliva para determinao do fluxo salivar e da capacidade tampo. A
raspagem dos dentes anteriores foi realizada para
quantificao de Streptococcus mutans presente na
placa bacteriana.
Resultados: a populao avaliada foi predominantemente de baixa atividade de crie, apresentando
capacidade tampo da saliva normal e fluxo salivar
deficiente. O nmero de S. mutans da placa bacteriana foi superior a 105 UFC/mg, na maioria da
populao estudada.
Concluses: a atividade de crie foi inversamente
proporcional capacidade tampo e diretamente
proporcional a presena de Streptococcus mutans
presentes na placa bacteriana. A baixa atividade de
crie na populao estudada pode ser atribuda boa
condio do meio bucal promovida pelo nmero de
escovaes dirias com dentufcios fluoretados.
Palavras-chave Crie dentria, Bactrias, Streptococcus mutans.

Rev. Bras. Sade Matern. Infant., Recife, 5 (1): 71-76, jan. / mar., 2005

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Stamford TCM et al.

Introduo
A crie dentria uma doena infecto-contagiosa e
incurvel que acomete cerca de 95% da populao
mundial de forma diferente para cada indivduo.1,2
Para a instalao da crie necessria a interao de
vrios fatores como: o hospedeiro (dente e saliva); a
microflora (placa bacteriana); o substrato cariognico
(carboidratos fermentveis) e o fator tempo.3-5
Estudos microbiolgicos demonstram que o
Streptococcus mutans um dos fatores necessrios
para o incio e a progresso da leso cariosa em
crianas, logo aps a erupo dos primeiros dentes
decduos. 6-8 Esse microrganismo considerado o
principal agente associado com o incio e o desenvolvimento da leso cariosa em humanos, embora
no seja o nico envolvido no processo.9-11
O Streptococcus mutans o principal e mais
virulento dos microrganismos cariognicos, devido
a suas caractersticas acidognicas e acidricas.8,1214 O Streptococcus mutans pela ao da enzima
glicosiltransferase sintetiza polmeros de -glucan
intracelular e extracelular, solvel e insolvel
(glucano), utilizando a sacarose como fonte de
carbono.15-17 O glucano apresenta foras repulsivas,
e, consequentemente, estabelece a ligao do
microrganismo de forma irreversvel ao dente,
favorecendo a formao da placa bacteriana. 18,19 A
permanncia da placa bacteriana na superfcie do
esmalte dentrio acarretar perda de minerais do
dente, pela ao dos cidos produzidos pelo metabolismo bacteriano, ocasionando a instalao da doena
crie.20,21
Em condies fisiolgicas as superfcies bacterianas e dentrias tm predomnio de cargas negativas, e a saliva encontra-se saturada de ons clcio
e fosfato, o que favorece o estado cristalino da
hidroxiapatita do esmalte dentrio.12,20,22 Os cidos
decorrentes do metabolismo bacteriano atuam
reduzindo o pH da placa bacteriana, e ligam-se as
hidroxilas da hidroxiapatita, favorecendo a formao
de fosfato de clcio, e a subseqente dissoluo do
esmalte dentrio. 16,20,22,23 Esse processo de desmineralizao pode ser revertido com o aumento da
concentrao de ons clcio e a normalizao do
pH.15,24,25
A caracterizao da atividade de crie uma
importante prtica que deve ser utilizada durante a
anamnese.26,27 O cirurgio dentista pode estabelecer
um melhor plano de tratamento, respeitando as
condies de cada caso, e tambm monitorar os
efeitos das medidas preventivas mais utilizadas.2,12,27,28
O presente estudo teve por objetivo verificar a

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Rev. Bras. Sade Matern. Infant., Recife, 5 (1): 71-76, jan. / mar., 2005

relao da experincia da doena crie com o grau

de ocorrncia de Streptococcus mutans, o fluxo
salivar e a capacidade tampo da saliva em adolescentes sadios.

Mtodos
A pesquisa foi realizada em 111 crianas de 12 a 14
anos de idade, saudveis, que no estavam fazendo
uso de corticides, antiinflamatrios ou drogas
antimicrobianas, atendidas, no perodo de 1 ano, de
abril de 2000 a abril de 2001, no setor de Puericultura
do Hospital das Clnicas de Pernambuco, Brasil.
Houve autorizao prvia do Comit de tica em
Pesquisa (CEP) do Centro de Cincias da Sade
(CCS), e os responsveis pelos adolescentes assinaram um termo de consentimento livre e esclarecido.
Foi utlizado um questionrio, para obteno de dados
relacionados renda familiar, dieta, escovao
dentria e uso de pasta de dente e fio dental. Para
atenuar a influncia de fatores socioeconmicos e
alimentcios, foram selecionados os pacientes com
renda familiar entre dois e quatro salrios mnimos
que realizavam escovao dentria trs vezes ao dia e
tinham uma dieta cariognica (ingesto de doces
acima de trs vezes ao dia entre as refeies).
As cepas de Streptococcus mutans foram isoladas
da placa bacteriana de acordo com a metodologia
descrita por Stamford et al.9 O material coletado foi
transportado em tubo de ensaio contendo meio
lquido de Extrato de Tripcase Cisteina Bacitracina
(TYCB), e posteriormente diludo (10-1, 10-2 e 10-3)
em soluo fisiolgica esterilizada. Para cada
diluio foram semeadas alquotas de 0,1 ml, em
triplicata, em placas de Petri contendo 15ml do meio
Agar Mitus Salivarius Bacitracin (MSB), incubadas
em anaerobiose por 48 horas, a 37 C.
As colnias de Streptococcus mutans isoladas
foram identificadas em trs etapas abrangendo as
seguintes fases: caractersticas morfolgicas, microscopia tica (microscpio Modelo Wild-M20EB)
e testes bioqumicos com o Kit API 20Strep System
(Bio Mrieux Marcy-Ltoile, France). Os sorotipos
de Streptococcus mutans foram identificados por
testes bioqumicos descritos por Shklair e Keene. 29
A contagem de S. mutans foi realizada levando-se
em considerao apenas os sorotipos "c" e "d/g", os
quais apresentam alta virulncia relacionada ao
processo carioso devido as suas caractersticas
bioqumicas.
A saliva foi coletada pelo mtodo descrito por
Krasse.2 A salivao foi estimulada pela mastigao
de uma goma de mascar de parafina (sem sabor).

Parmetros bioqumicos e microbiolgicos e crie

Inicialmente a goma foi colocada na boca do

paciente e deixada por dois minutos, sendo a saliva
acumulada nesse perodo e em seguida expelida.
Depois a goma foi mastigada pelo paciente durante
cinco minutos e toda a saliva produzida, nesse
perodo, foi expelida em tubos de plstico (50 ml)
estreis e transportadas imersas em gelo para posteriores estudos laboratoriais.
O fluxo salivar foi calculado em ml/minuto,
levando-se em considerao o tempo total (minutos)
de estimulao e a quantidade final da saliva
armazenada nos tubos de plstico estreis (ml). A
capacidade tampo foi determinada misturando-se
1,0 ml de saliva com 3,0 mL de HCl 5 mM, em tubos
de ensaio, verificando-se ento o pH final. A interpretao e a determinao dos escores atribudos foram
realizados de acordo com Krasse.2
Foi realizado exame clnico intra-oral com o
auxlio de odontoscpio e sonda exploradora estril,
sob iluminao artificial, para determinar as
condies de integridade das superfcies dentais. A
determinao do CPO-S foi realizada e analisada
como descrito pela World Health Organization
(WHO).30
Os dentes presentes na cavidade bucal foram
divididos em superfcies da seguinte forma: molares
e pr-molares, com cinco superfcies cada (oclusal,
mesial, distal, vestibular e lingual ou palatina); incisivos e caninos, com quatro superfcies cada (mesial,
distal, vestibular, lingual ou palatina). No caso de
diagnstico de extrao ou extrao indicada,
anotaram-se todas as faces nessa condio.
Superfcies que apresentavam manchas brancas
ativas ou inativas tambm foram consideradas como
comprometidas pelo processo carioso.
Os exames foram realizados por trs cirurgiesdentistas, previamente calibrados. Para esse treinamento, empregou-se a tcnica do consenso. Segundo
essa tcnica, havendo discordncia, os examinadores
discutem at chegar a um consenso quanto interpretao do critrio relativo quela condio. A
Organizao Mundial da Sase (OMS)31 considera
aceitvel, para a maioria das avaliaes, a discordncia em torno de 10% a 15%. Em relao condio
dental, as discordncias interexaminadores foram de
2,9%.
Para o clculo das discordncias interexaminadores, foram realizados 11 re-exames de um total

de 111 exames, o que equivale a 10% de elementos

amostrais re-examinados. Em relao condio
dental, as discordncias interexaminadores foram de
0,6%, valor que permite assegurar confiabilidade
estatstica aos resultados.
A anlise da significncia estatstica das dependncias entre as relaes verificadas foi realizada com
o teste qui-quadrado de Pearson. Os clculos de todos
os testes foram realizados com a ajuda do SPSS for
Windows, release 12.0 e apenas as relaes com valor
de p menor ou igual a 0,05 foram consideradas estatisticamente significantes.
O arquivo de dados foi trabalhado em funo das
variveis existentes na ficha clnica como ndice
CPO-S, fluxo salivar, capacidade tampo da saliva e
grau de ocorrncia do S. mutans sorotipo "c" e "d/g".

Resultados
Na Tabela 1 pode-se verificar que a populao
avaliada apresenta predominncia de baixa atividade
de crie (41,8%) e de alto ndice de S. mutans
(45,8%). Os adolescentes avaliados como ausentes de
crie mostram reduzido ndice de S. mutans na placa
bacteriana (13,5%). Condio oposta observada na
populao com alta atividade de crie (14,5%). Por
outro lado, 22,5% da populao com baixa atividade
de crie apresenta alto ndice da bactria. A anlise
estatstica mostra que existe uma interdependncia
proporcional (p<0,05) entre a atividade de crie e o
nmero de S. mutans presentes na placa bacteriana.
Com relao aos parmetros salivares, pode-se
observar nas Tabelas 2 e 3 que a populao estudada
apresenta predominncia de capacidade tampo
normal (71,2%) e xerostomia (43,2%). Ao relacionar
a experincia de crie com o fluxo salivar e a capacidade tampo da saliva verifica-se que 35,2% dos
adolescentes tm baixa atividade de crie a capacidade tampo normal (Tabela 2), sendo a relao
entre esses dois fatores estatisticamente significante
(p = 0,003). Entretanto, como mostrado na Tabela 3,
a populao estudada apresenta baixa atividade de
crie e xerostomia (13,5%) e baixo fluxo salivar
(18,9%) no sendo observada interdependncia
significativa entre a experincia de crie e o fluxo
salivar (p = 0,084).

Rev. Bras. Sade Matern. Infant., Recife, 5 (1): 71-76, jan. / mar., 2005

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Stamford TCM et al.

Tabela 1
Distribuio da freqncia da atividade de crie (CPO-S) em relao contagem de S. mutans presente na placa bacteriana.

Contagem de Streptococcus mutans por adolescente

Atividade de crie

Sem atividade
Baixa
Mdia
Alta
Total

Baixa

Mdia

Alta

(<100.000)

(100.000 a 1.000.000)

(>1.000.000)

Total

15
14
3
0
32

12,5
12,6
2,7
0
27,8

5
8
12
3
28

4,5
7,2
10,8
2,7
25,2

3
25
7
16
51

2,7
22,5
6,3
14,5
46,0

23
47
22
19
111

20,7
42,3
19,8
17,2
100,0

p < 0,001

Tabela 2
Distribuio da freqncia da atividade de crie (CPO-S) em relao a capacidade tampo da saliva.
Capacidade tampo por adolescente
Baixa

Normal

(<5)

(>5)

Atividade de crie

Sem atividade
Baixa
Mdia
Alta
Total

Total

4
8
9
11
32

3,6
7,2
8,1
9,9
28,8

19
39
13
8
79

17,1
35,2
11,7
7,2
71,2

23
47
22
19
111

20,7
42,4
19,8
17,1
100,0

p = 0,003

Tabela 3
Distribuio da freqncia da atividade de crie (CPO-S) em relao ao fluxo salivar.
Fluxo salivar por adolescente

Atividade de crie

Sem atividade
Baixa
Mdia
Alta
Total

Xerostomia

Baixo

Normal

(<0,5)

(0,5 - 1,0)

(>1,0)

14
15
13
6
48

12,6
13,5
11,7
5,4
43,2

4
21
6
6
37

3,6
18,9
5,4
5,4
33,3

5
11
3
7
26

4,5
10,0
2,7
6,3
23,5

23
47
22
19
111

20,7
42,4
19,8
17,1
100,0

p = 0,084

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Total

Rev. Bras. Sade Matern. Infant., Recife, 5 (1): 71-76, jan. / mar., 2005

Parmetros bioqumicos e microbiolgicos e crie

Discusso
A populao avaliada apresenta predominncia de
baixa atividade de crie e alto ndice de S. mutans.
Tal fato pode ser atribudo ao nmero de escovaes
dirias com dentifrcio fluoretado, em torno de trs
vezes ao dia, promovendo uma adequao do meio
bucal, com controle da flora bacteriana. De acordo
com Rodrigues e Guedes-Pinto 12 a prtica correta
da higiene aps as refeies reduz o acmulo de
placa bacteriana, e conseqentemente evita a ao
cariognica da placa. Naval et al. 4 constataram
diminuio da prevalncia de crie em 68,2% (ndice
CPO-D) dos escolares na faixa etria de 12 anos, no
Municpio de So Paulo entre os anos 1970-1996, e
que durante esse perodo houve um aumento dos
Programas Odontolgicos Preventivos nas escolas,
com implementao de escovdromos. Tomita et
al. 28 verificaram melhoria da higiene bucal em
adolescentes, independente de sua insero social,
quando utilizados programas educativos em sade
bucal que aplicam metodologia participativa.
Resultados concordantes foram obtidos por
Stamford et al.9 que encontraram relao entre indivduos com nveis superiores a 105 UFC/mg de S.
mutans e alta atividade de crie. Snchez Prez e
Senz Martnez14, em estudo com 60 crianas entre
8 e 10 anos de idade, verificaram correlao entre
nveis de S. mutans presente na placa dental e atividade de crie. Em contrapartida Couto et al., 6 ao
compararem o ndice de crie entre mes e filhos,
observaram que mesmo apresentando contagem
superior a 105 UFC/mL de S. mutans, as crianas
tinham baixo ndice de crie. Almeida et al. 11 em
2002 verificaram atravs de analise microbiolgica
colorimtrica em 21 escolares, ausncia de relao
entre a atividade de crie e nveis de S. mutans.
Tenrio, 10 em estudo com 101 adolescentes,
observou alto ndice de crie em indivduos com alta
taxa de placa bacteriana e menor concentrao de
fsforo e flor, contudo esses resultados no foram
estatisticamente significantes. A concentrao de
clcio na placa dental foi maior nos adolescentes
com baixa atividade, sendo esse o parmetro que
melhor se relacionou com experincia de crie.

Leito et al.,8 Velmovitsky24 e Franchini et al.25

afirmam que o fluoreto utilizado nos dentifrcios e na
gua de abastecimento previnem a desmineralizao
do esmalte dentrio e inibem a atividade de bacterias
cariognicas, principalmente o S. mutans.
Segundo Balzar et al., 22 e Chaves e Vieira-daSilva, 21 os fluoretos apresentam ao bactericida,
uma vez que, ao penetrarem na clula bacteriana,
afetam o metabolismo de carboidrato, pela inibio
da enzima enolase, atuando de forma irreversvel.
Marsh e Bradshaw 19 relatam que o flor reduz a
produo de cidos decorrentes do metabolismo
bacteriano e diminui a virulncia do S. mutans. De
acordo com Krasser2 os fluoretos atuam diminuindo
a tenso superficial da superfcie dentria e, conseqentemente, a capacidade de adeso nos dentes
pelos microrganismos, alm de atuar com efeito
antienzimtico.
Com relao aos parmetros salivares, constatouse que a capacidade tampo influencia a experincia
de crie, enquanto que o mesmo no observado com
o fluxo salivar. Soriano et al.5, em estudo com 39
crianas de 8 a 12 anos de idade, verificaram correlao entre os indicadores salivares e a experincia de
crie. Almstahl e Wikstrom 7 observaram maior
acmulo de placa bacteriana nas superfcies dos
dentes e maior atividade de crie em indivduos com
xerostomia ou secreo salivar reduzida. Por outro
lado, Tenuta et al., 20 avaliaram o efeito de fatores
salivares e da composio da placa dental na
progresso da crie in situ e concluram que a
desmineralizao do esmalte dentrio depende do
tempo e est mais relacionada composio do
biofilme formado do que com aos fatores salivares.
Segundo Krasse 2, baixo fluxo salivar e baixa
capacidade tampo no promovem a reduo dos
microrganismos e restos alimentares no meio bucal,
o que prejudica a neutralizao de cidos e reduz a
tendncia a remineralizao das leses iniciais do
esmalte dentrio, promovendo a instalao da
doena crie.

Rev. Bras. Sade Matern. Infant., Recife, 5 (1): 71-76, jan. / mar., 2005

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Stamford TCM et al.

Referncias
1. Freysleben GR, Peres, MAA, Marcenes W. Prevalncia de
crie e CPO-D mdio em escolares de doze a treze anos de
idade nos anos de 1971 e 1997, regio Sul, Brasil. Rev
Sade Pblica 2000; 34: 304-8.
2. Krasse B. Exame da saliva. In: Risco de cries: guia prtico
para controle e assessoramento. So Paulo: Quintessence;
1988.
3. Loretto NRM, Saixas ZA, Jardim MC, Brito RL. Crie
dentria no Brasil aspectos sociais, polticos e econmicos.
Rev ABO Nacional 2000; 8: 45-9.
4. Naval PC, Castellanos RA, Frazo P. Prevalncia de crie em
dentes permanentes de escolares do Municpio de So Paulo,
SP, 1970-1996. Rev Sade Publica 2001; 34: 196-200.
5. Soriano G, Doo R, Piovano S, Macucho M, Tognaccioli L,
Garcia M. Relacin entre los estdios salivares y estado
dentrio em ninas. Bol Asoc Argent Odontol Nios 2002;
31: 19-23.
6. Couto GBL, Rodrigues MJ, Ximenes EC, Vasconcelos
MVB, Silva ATO. Comparaes clnico-amnsicas e microbiolgicas entre mes e filhos relacionadas com a transmisso da doena crie. Rev Fac Odontol Univ Fed
Pernambuco 2000; 10: 14-9.
7. Almstahl A, Wikstrom M. Oral microflora in subjects with
reduced salivary secretion. J Dent Res 1999; 78: 1410-6.
8. Leito DPS, Fonseca MJV, Polizello ACM, Spadaro ACC.
Evaluation of the influence of cetylamine fluoride and
sodium fluoride on acid production by S. mutans. Rev Bras
Cienc Farm 2001, 37: 364-72.
9. Stamford TCM, Pereira DM, Grinfeld S, Reblo C. Risco
de crie e grau de conhecimento da sade oral em gestantes
do Instituto Materno Infantil de Pernambuco, IMIP. Rev
IMIP 2000; 14: 73-8.
10. Tenrio MDH. Parmetros bioqumicos, velocidade de
formao da placa dental e sua relao com a experincia de
crie em escolares de 11 a 13 de idade [tese doutorado].
Camaragibe: Departamento de Odontopediatria da Fundao
Universidade de Pernambuco; 1999.
11. Almeida RVD, Padilha WWN, Pereira MSV, Sampaio TPD.
Avaliao de teste salivar microbiolgico colorimtrico no
risco crie dentria. Rev Bras Cien Sade 2002; 6: 259-68.
12. Rodrigues CRMD, Fernandes FRC, Guedes-Pinto AC.
Crie dentria. In: Guedes-Pinto AC. Odontopediatria. So
Paulo: Santos; 2003. p. 291-322.
13. Dasanayake AP, Caufield PW, Cutter GR, Roseman JH,
Kohler B. Diferences in the detection and enumeration of
mutans Streptococci due to differences in methods. Arch
Oral Biol 1978; 40: 345-51.
14. Snchez Prez L, Senz Martnez L Cuantificacin del
grupo mutans em saliva y placa em el mdio MSB. Bol
Med Hosp Infant Mex 2001; 58: 694-702.

Recebido em 25 de agosto de 2004

Verso final apresentada em 22 de novembro de 2004
Aprovado em 28 de dezembro de 2004

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Rev. Bras. Sade Matern. Infant., Recife, 5 (1): 71-76, jan. / mar., 2005

15. Campos JADB, Campos AG. Crie e Streptococcus mutans

em ratos alimentados com sacarose e maltose. Rev Paul
Odontol 2002; 24: 34-6.
16. Wunder D, Bowen WH. Action of agents on glucosyltransferases from Streptococcus mutans in solution and adsorbed
to experimental pellicle. Arch Oral Biol 1999; 44: 203-14.
17. Marcantoni M. Ecologa de la cavidad bucal. In: Negronte
M. Microbiologia estomatolgica: fundamentos y guia
prctica. Buenos Aires: Medica Panamericana; 1999.
18. Hassan AN, Frank JF, Qvist KB. Direct observation of bacterial exopolysaccharides in dairy products using confocal
scanning laser microscopy. J Dairy Sci 2002; 85: 1705-8.
19. Marsh PD, Brandshaw DJ. The effect of fluoride on the
stability of oral bacterial communities in vitro. J Dent Res
1990; 69: 668-71.
20. Tenuta LMA, Lima JEO, Cardoso CL, Cury JA. Effect to
plaque accumulation and salivary factors on enamel
demineralization and plaque composition in situ. Pesq
Odontol Bras 2003; 17: 326-31.
21. Chaves SCL, Vieira-da-Silva LM. A efetividade do dentifrcio fluoretado no controle da crie dental: uma metaanlise Rev Sade Pblica 2002; 36: 598-606.
22. Balzar ES, Linder LE, Sund ML, Lnnies H. Effect of fluoride on glucose incorporation and metabolism in biofilm cells
of Streptococcus mutans. Eur J Oral Sci 2001; 109: 182-6.
23. Dawes C. What is the critical pH and why does a tooth
dissolve in acid? J Can Dent Assoc 2003; 69: 722-4.
24. Velmovitsky L. Inibio in vitro de microrganismos cariognicos por dentifrcios do mercado nacional [tese
doutorado]. Rio de Janeiro: Faculdade de Odontologia da
Universidade Federal do Rio de Janeiro; 2001.
25. Franchini CC, Degasperi GR, Andrade CR, Coelho CS,
Bernardes CF. Efeito da fluoretao da gua na concentrao de fluoreto salivar. Pes Bras Odontopediatr Clin Int
2002; 2: 108-12.
26. Freire MCM, Macdo RA, Silva WH. Conhecimentos,
atitudes e prticas dos mdicos pediatras em relao sade
bucal. Pesq Odontol Bras 2000; 14: 39-45.
27. Pinto VG. Sade bucal coletiva. So Paulo: Santos; 2000.
28. Tomita NE, Lauris RA, Pereira JR, Lopes ES. Educao em
sade bucal para adolescentes: uso de mtodos participativos. Rev Fac Odontol Bauru 2001; 9: 63-9.
29. Shklair IL, Keene HJ. A biochemical scheme for the separation of the five varieties of Streptococcus mutans. Arch
Oral Biol 1978; 19: 1079-81.
30. WHO (World Health Organization). Oral health surveys,
basic methods. 4th ed. Geneva; 1997.
31. OMS (Organizao Mundial da Sade). Levantamento
epidemiolgico bsico de sade bucal: manual de
instrues. 3. ed. So Paulo: Santos; 1991.