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Estemedioestrecomendadoparaelrecuentodecoliformestotalesyfecales,porlatcnicadelnmeroms
probable.
Fundamento
Enelmediodecultivo,lapeptonaaportalosnutrientesnecesariosparaeladecuadodesarrollobacteriano,labilisy
elverdebrillantesonlosagentesselectivosqueinhibeneldesarrollodebacteriasGrampositivasyGramnegativas
aexcepcindecoliformes,ylalactosaeselhidratodecarbonofermentable.
Esunapropiedaddelgrupocoliforme,lafermentacindelalactosaconproduccindecidoygas.
Instrucciones
Frmula(engramosporlitro)
Bilisdebueydeshidratada
Lactosa
20.0
Suspender40gdelpolvodeshidratadoporlitrode
aguadestilada.Disolverydistribuir10mlportubocon
campanitadeDurham.Prepararadems,elmedioa
10.0
dobleconcentracin.Esterilizarenautoclavea121C
0.0133
durante15minutos.
pHfinal:7.20.2
10.0
Peptona
Verdebrillante
Siembra
a.Paraelanlisisdecoliformestotalesenmuestrasfluidas,sembrarportriplicado:10mlencaldodoble
concentraciny1mly0,1mlencaldosimpleconcentracin.
Nmero
detubos
3
3
3
Volumendela
muestra
10ml
1ml
0.1ml
Volumende
medio
10ml
10ml
10ml
Concentracin
delmedio
Doble
Simple
Simple
b.Paraelanlisisdecoliformestotalesenmuestrasslidas(alimentos,cosmticos,frmacos),efectuar
dilucionesseriadas10 1,10 2y10 3ysembrarcadadilucinportriplicadoenmediodecultivosimple
concentracin.
Nmero
detubos
Dilucindela
muestra
Volumendela
muestra
Volumende
medio
Concentracin
delmedio
10 1
1ml
10ml
Simple
10 2
1ml
10ml
Simple
10 3
1ml
10ml
Simple
c.Paraanlisisdecoliformesfecales,apartirdecadatubopositivoeneltestpresuntivodecoliformestotales
(provenientedeVerdeBrillanteyBilis2%CaldoMacConkeyCaldoLaurilSulfato,utilizandolatcnicadelNMP),
oapartirdecoloniaspresentesendiferentesmedios,quesepresumeseancoliformes,transferirunaansadaaun
tuboconVerdeBrillanteyBilisal2%caldofresco,incubandoa45+/0.5CyotraenAguaTriptonacon
incubacina3537C,paradetectarlaproduccindeindol.
Incubacin
aParadecoliformestotales:a3537Cdurante24horas.
bParacoliformes(fecales):a44.545.5Cdurante24horas.
Resultados
Positivo:presenciadegas.
Conelnmerodetubospositivos,calcularelnmeromasprobable.Elresultadoseexpresaporgramos100ml
deproducto
Negativo:ausenciadegas.
Microorganismos
EscherichiacoliATCC25922
Enterobacterspp.
KlebsiellapneumoniaeATCC700603
SalmonellatyphimuriumATCC14028
Bacteriasnofermentadoresdelactosa
StaphylococcusaureusATCC25923
Crecimiento
+
+
+
+
+
+**1025%decepasnegativasopositivas
#apartirdeAguaTriptona
Caractersticasdelmedio
Mediopreparado:verdeesmeralda,transparente
Almacenamiento:
Mediodeshidratado:a1035C.
Mediopreparado:a28C.
Presentacin
x100g:Cdigo:B0210705
x500g:Cdigo:B0210706
Gas
+*
+
+*
Indol#
+*
*
*
Variable