ESTUDIO DE ANTRAQUINONAS PRESENTES EN EXTRACTOS DE

MUCLAGO Y HOJAS DE ALOE VERA DE PLANTAS CULTIVADAS EN LA

REGIN CAFETERA

VIVIANA SNCHEZ ARISTIZBAL

JHON FABIO SANTA CASTAO

Director
Dra. GLORIA EDITH GUERRERO LVAREZ

UNIVERSIDAD TECNOLGICA DE PEREIRA

FACULTAD DE TECNOLOGA

TECNOLOGA QUMICA

PEREIRA

2009

-1-

ESTUDIO DE ANTRAQUINONAS PRESENTES EN EXTRACTOS DE

MUCLAGO Y HOJAS DE ALOE VERA DE PLANTAS CULTIVADAS EN LA
REGIN CAFETERA

TRABAJO DE GRADO

Requisito final para optar al ttulo de Tecnlogo en Qumica

Director
Dra. GLORIA EDITH GUERRERO LVAREZ

UNIVERSIDAD TECNOLGICA DE PEREIRA

FACULTAD DE TECNOLOGA
ESCUELA DE TECNOLOGA QUMICA
PEREIRA, MAYO DE 2009

-2-

NOTA DE ACEPTACIN DE TRABAJO DE GRADO

ESTUDIO DE ANTRAQUINONAS PRESENTES EN EXTRACTOS DE

MUCLAGO Y HOJAS DE ALOE VERA DE PLANTAS CULTIVADAS EN LA
REGIN CAFETERA

Presentado por:

VIVIANA SNCHEZ ARISTIZBAL

JHON FABIO SANTA CASTAO

Los suscritos director y jurado del presente trabajo de grado, una vez realizada la
versin escrita y presenciado la sustentacin oral, decidimos otorgar la nota de:

Con la connotacin:

Para constancia firmamos en la ciudad de Pereira hoy:

Director:
Gloria Edith Guerrero lvarez

Jurado:
Jaime Nio Osorio

-3-

DEDICATORIA

Dedicado a nuestras familias, que con su esfuerzo y apoyo hicieron posible

nuestra formacin integral.

A todas las personas que de alguna manera hicieron parte de este proceso.

-4-

AGRADECIMIENTOS

Gracias a Dios por permitirnos realizar todo lo que nos proponemos.

A nuestras familias les debemos gratitud infinita por el apoyo y la confianza

incondicional que nos han brindado en toda nuestra vida.

A la Universidad Tecnolgica de Pereira y sus profesores, por la formacin

acadmica que nos fue dada.

A la Doctora Gloria Guerrero por orientarnos en la elaboracin de este proyecto,

por la confianza que nos dio, y por el inters y disposicin que demostr para
ayudarnos.

Al Profesor Jaime Nio, por estar siempre disponible para solucionar nuestras
inquietudes.

A todas las personas que nos proporcionaron los recursos necesarios para realizar
este proyecto.

En general, gracias a todas las personas que de una u otra manera contribuyeron
en la culminacin de este trabajo.

Muchas gracias.

-5-

TABLA DE CONTENIDO

ndice de tablas

ndice de figuras

1. Resumen

10

2. Abstract

12

3. Introduccin

14

4. Marco de referencia

16

4.1 Planta de Aloe vera

16

4.2 Produccin mundial

19

4.3 Generalidades del cultivo

20

4.4 Usos del Aloe vera

21

4.5 Composicin qumica de la hoja de Aloe vera

23

4.5.1 Vitaminas

23

4.5.2 Enzimas

23

4.5.3 Minerales

24

4.5.4 Azcares

24

4.5.5 Saponinas

24

4.5.6 Esteroles de planta

24

4.5.7 cido saliclico

25

4.5.8 Aminocidos

25

4.5.9 Antraquinnas

27

4.5.9.1 Distribucin

27

4.5.9.2 Generalidades

27

4.5.9.3 Deteccin

29
29

4.6 Tcnicas espectroscpicas

4.6.1 Espectroscopia Ultravioleta-Visible
4.7 Normas de calidad de productos de Aloe vera

29
31

5. Justificacin

32

6. Objetivos

35

-6-

36

7. Metodologa
7.1 Materiales y equipos

36

7.2 Muestra de anlisis

37

7.3 Pretratamiento de la muestra

37

7.4 Anlisis de las muestras

39

7.4.1 Rendimiento del muclago en las hojas

39

7.4.2 Extraccin y cuantificacin de las antraquinonas presentes

en la corteza, ltex y gel de aloe vera

39

7.4.2.1 Extraccin de antraquinonas

39

7.4.2.2 Obtencin de derivados

40

7.4.2.3 Cuantificacin de antraquinonas por

43

espectrofotometra

45

8. Resultados y discusin

45

8.1 Descripcin de los cultivos

8.1.1 Cultivo combia, Pereira (Risaralda)

45

8.1.2 Cultivo Montenegro (Quindo)

45
47

8.2 Anlisis de las muestras

8.2.1 Rendimiento del muclago en las hojas

47

8.2.2 Implementacin del mtodo de anlisis de antraquinonas

48

8.2.2.1 Extraccin y separacin

48

8.2.3 Contenido de antraquinonas presentes en la corteza, ltex

49

y gel de la planta
8.3 Aplicaciones y/o potenciales usos de de las partes de
la planta (corteza, ltex y muclago) de acuerdo al contenido
de antraquinonas

53

8.3.1 Aplicaciones y/o potenciales usos del muclago

53

8.3.2 Aplicaciones y/o potenciales usos del ltex

54

9. Conclusiones

56

10. Recomendaciones

57

11. Bibliografa

58

-7-

INDICE DE TABLAS

Tabla 1. Clasificacin botnica de la planta de A. vera

18

Tabla 2. Algunos metabolitos secundarios aislados de Aloe vera

26

Tabla 3. Datos correspondientes a la curva de calibracin del

44

estndar de alona
Tabla 4. Rendimiento del gel en las hojas de Aloe vera del
cultivo de la finca Villa Sofa ubicada en el corregimiento
de Combia (Pereira, Risaralda) y de la Hacienda Npoles
ubicada en Montenegro (Quindo)

47

Tabla 5. Determinacin del contenido de antraquinonas presente

en la corteza, gel y ltex de la planta de Aloe vera del cultivo
de la finca Villa Sofa en el corregimiento de Combia (Pereira,
50

Risaralda)
Tabla 6. Determinacin del contenido de antraquinonas presente en
la corteza, gel y ltex de la planta de Aloe vera del cultivo
de la Hacienda Npoles en el municipio de Montenegro

50

(Quindo)

-8-

INDICE DE FIGURAS

Figura 1. Planta de Aloe vera

17

Figura 2. Interior de una hoja de Aloe vera (A) y partes principales de

una hoja de A. vera (B)

18

Figura 3. Estructura general de una antraquinona, antrona, oxantrona,

28

antranol, y diantranol
Figura 4. Limpieza de las hojas de Aloe vera

37

Figura 5. Descripcin del extremo inferior de la hoja

38

Figura 6. Remocin de la corteza y separacin del muclago

38

Figura 7. Ultrasonido Ultrasonik Cleaner, Modelo 19H-W, Marca

40

Neytech
Figura 8. Procedimiento para la extraccin y cuantificacin de
antraquinonas en A. vera

41

Figura 9. Espectro de absorcin del patrn de alona

43

Figura 10. Aspecto de hojas analizadas del cultivo del corregimiento

de Combia, Finca Villa Sofa

45

Figura 11. Cultivo de Aloe vera de la Hacienda Npoles en el municipio

46

de Montenegro (Quindo).
Figura 12. Aspecto de hojas de A. vera analizadas del cultivo de

46

Montenegro (Quindo).

-9-

1. RESUMEN

En el presente trabajo se expone una tcnica analtica espectrofotomtrica para

la extraccin y cuantificacin de las antraquinonas presentes en la corteza, ltex y
gel de las hojas de la planta de Aloe vera de los cultivos que se encuentran en
Montenegro (Quindo) y Combia (Risaralda). Adems, se muestra la determinacin
del rendimiento del gel en las hojas cultivadas en estos dos municipios del eje
cafetero.

Se realiz la extraccin y obtencin de derivados antraquinnicos con base en la

metodologa propuesta por Barrese et al, [1], modificando la tcnica de extraccin;
usando ultrasonido en lugar de reflujo como proponen estos autores, la
cuantificacin de compuestos antraquinnicos en corteza, mucilago y ltex de
hojas de Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) cultivadas en la regin cafetera,
Combia (Risaralda) y Montenegro (Quindo) se determin usando una curva de
calibracin realizada con un patrn de alona marca SIGMA del 97% de pureza.

Se obtuvo un porcentaje promedio de antraquinonas en la corteza, mucilago y

ltex de hojas de A. vera cultivadas en Combia de 0.525%, 0.228% y 1.14%
respectivamente; y un porcentaje promedio de antraquinonas totales en la hoja de
1.897%. Mientras que los porcentajes promedio de antraquinonas en la corteza,
mucilago y ltex de hojas cultivadas en Montenegro (Quindo) fueron 0.581%,
0.091% y 1.58% respectivamente; el porcentaje promedio de antraquinonas
totales en la hoja fue 2.250%. Adems se obtuvieron resultados de rendimiento de
mucilago en las hojas por medio del mtodo gravimtrico de 68.71% para las
hojas de sbila cultivadas en Combia (Risaralda) y de 67.73% para las hojas
cultivadas en Montenegro (Quindo).

- 10 -

Finalmente, se logr implementar una metodologa espectrofotomtrica que

permiti cuantificar el contenido de antraquinonas en las diferentes partes de la
planta de Aloe vera mediante la obtencin de derivados. Asimismo, se obtuvieron
desviaciones estndar menores a 0.1 lo que indica que el mtodo usado y los
resultados obtenidos son reproducibles y confiables.

Palabras claves: alona, cuantificacin, derivados antraquinnicos, extraccin,

gel, ltex, mtodo gravimtrico, rotaevaporador, sbila, tcnicas espectroscpicas,
ultrasonido.

- 11 -

2. ABSTRACT

The present work deals an analytical technique for the extraction and
spectrophotometric quantification of anthraquinone present in the cortex, latex and
gel from the leaves of the Aloe vera plant the crops that are in Montenegro
(Quindo) and Combia (Risaralda ). Furthermore, it shows the determination of the
performance of the gel in the leaves grown in the two municipalities of the region
cafetera.

We performed the extraction and collection of Anthraquinone derivatives based on

the methodology proposed by Barrese et al, [1], changing the extraction technique,
using ultrasound instead of reflux as suggested by these authors, the quantification
of Anthraquinone compounds in cortex, mucilage and latex leaves of Aloe vera
(Aloe barbadensis Miller) grown in the region cafetera, Combia (Risaralda) and
Montenegro (Quindo) was determined using a calibration curve made with a
standard of alona mark SIGMA of 97% purity.

We obtained an average percentage of anthraquinone in the cortex, mucilage and

latex leaves of A. vera cultivated in Combia 0525%, 0228% and 1.14%
respectively, and an average percentage of total anthraquinone of 1.897%. While
the average percentage of anthraquinone in the cortex, mucilage and latex leaf
grown in Montenegro (Quindo) were 0.581%, 0.091% and 1.58% respectively, the
average percentage of total anthraquinone in the leaf was 2.250%. Furthermore,
results of efficiency mucilage in the leaves through the gravimetric method of
68.71% for the leaves of aloe grown in Combia (Risaralda) and 67.73% for the
leaves of aloe grown in Montenegro (Quindo).

Finally, we were able to implement a spectrophotometric method that enabled

quantify the content of anthraquinone in different parts of the plant Aloe vera

- 12 -

through obtaining derivatives. Were also obtained standard deviations less than
0.1 indicating that the method used and the results are reproducible and reliable.

Keywords: aloina, quantification, anthraquinone derivatives, extraction, gel, latex,

gravimetric method, rotaevaporador, aloe, spectroscopic techniques, ultrasound.

- 13 -

3. INTRODUCCIN

El Aloe vera es una planta perenne de la familia Aloeaceae. Debido a que la

sbila se ha naturalizado en todas las regiones de clima clido alrededor del
mundo, es difcil establecer correctamente su origen. Se piensa que puede ser
nativa del norte de frica o la regin del Nilo en Sudn. El gnero A. vera contiene
alrededor de 400 especies diferentes siendo Aloe barbadensis Miller (Aloe vera),
Aloe aborescens y Aloe chinensis las mas populares. Aloe barbadensis Miller es
considerada como la ms activa biolgicamente, [2].

Las antraquinonas se encuentran en un gran de nmero de familias de plantas,

particularmente estn ampliamente distribuidas en la subclase Asteridae, en la
cual

se

encuentran

entre

otras

familias:

Rubiaceae,

Gesneiaceae

Scrophulariaceae. Muchas especies en la familia de la Rubiaceae, son fuentes

abundantes de antraquinonas, son bien conocidas las del gnero Rubia, Galium,
Morinda y Cinchona, [3]. Las antraquinonas mas abundantes en la planta de Aloe
vera son la aloina A (Barbalona) y aloina B (Isobarbalona), [4].

El propsito de este trabajo consisti en obtener extractos del muclago, ltex y de

la corteza de la planta de Aloe vera con el fin de evaluar la presencia de
antraquinonas y contribuir al aprovechamiento integral de los cultivos de sbila en
la regin cafetera colombiana. Adems, determinar el rendimiento del gel en las
hojas y plantear algunas aplicaciones y/o usos potenciales de las partes de la
planta (corteza, ltex y muclago) de acuerdo al contenido de antraquinonas.

Para cumplir con este proyecto se adopt una metodologa propuesta por Barrese
et al, [1], modificando la tcnica de extraccin. El rendimiento de las hojas de A.
vera se determin a travs del mtodo gravimtrico y la cuantificacin de los
derivados antraquinnicos se efectu por espectrofotometra UV-Visible. Los
anlisis descritos anteriormente se realizaron por triplicado.

- 14 -

Los resultados obtenidos tuvieron buena reproducibilidad, sin embargo se

recomienda estandarizar el mtodo para la extraccin y cuantificacin de
antraquinonas con el fin de proporcionar un servicio confiable a los cultivadores y
comercializadores de la planta.

- 15 -

4. MARCO DE REFERENCIA

4.1 PLANTA DE ALOE VERA

El Aloe vera es un gnero de plantas que abarca ms de 400 especies. Suelen

tener tallos cortos, hojas carnosas lanceoladas que se disponen formando
rosetones en el extremo apical de los tallos, y flores tubulares de color rojo o
amarillo agrupadas en densos ramilletes. La altura vara de unas especies a otras,
desde algunos centmetros hasta ms de 9 metros. Se cultivan mucho como
plantas de jardn y en maceta. [2].

La planta de Aloe vera (Figura 1), presenta aspecto suculento, el rizoma es largo y
el tallo es corto, en torno al cual se agrupan un rosetn de hojas que pueden
formar de 12 a 16 niveles. Su tamao puede variar de 30 cm a 3 m dependiendo
de la variedad. Las hojas son finamente lanceoladas de 30 a 60 cm de longitud;
son turgentes, verdes, mrgenes con dientes espinosos separados. Las flores
pueden ser amarillas, anaranjadas, prpuras y rojas dependiendo de la variedad y
de 2.5 cm de largo. Presentan androceo regular y simtrico, spalos y ptalos
generalmente de color semejante. Los estambres son seis, poco ms o menos del
largo del periantio con filamentos delgados y anteras oblongas. El ovario es ssil,
trilobulado: los vulos son numerosos en cada cavidad del ovario. El fruto es
capsular, las semillas son numerosas y negras. Las plantas alcanzan su madurez
alrededor de los cuatro aos de edad y pueden llegar a vivir alrededor de unos
doce aos, [5 y 6].

- 16 -

Figura 1. Planta de Aloe vera

El Aloe vera es una planta perenne y xeroftica; la primera por que se desarrolla a
largo plazo y la segunda porque se adapta a vivir en reas de poca disponibilidad
de agua y se caracteriza por poseer tejidos para el almacenamiento de agua, por
lo tanto, prefiere las condiciones ridas muy secas.

La planta contiene dos materiales separados del jugo, un ltex amarillo (exudado),
extrado de los paquetes vasculares en la ensambladura entre la corteza y los
prendederos y un gel mucilaginoso transparente, sacado de la pulpa interna
(Figura 2), [7].

En la tabla 1 se puede observar su clasificacin botnica, [7].

- 17 -

Figura 2. Interior de una hoja de Aloe vera (A) y partes principales de una hoja de
A. vera (B), [7].

Tabla 1. Clasificacin botnica de la planta de A. vera

CLASIFICACIN BOTNICA
Reino
Vegetal
Familia

Aloaceae

Gnero

Aloe

Especie

Vera

Nombre cientfico

Aloe vera

Nombre comn

Sbila

- 18 -

4.2 PRODUCCIN MUNDIAL

De las ms de 400 especies de Aloe vera que existen, actualmente slo se

comercializan, el Aloe barbadensis Miller y el Aloe aborescens que son las ms
conocidas, [8 y 9]. La planta del gnero aloe crece en reas tropicales y no puede
sobrevivir a temperaturas de congelacin, [10].

En Estados Unidos, la mayor parte es cultivada en el Valle del Ro Grande del sur
de Tejas, en Florida y en el sur de California. Internacionalmente, el aloe se
puede encontrar en Mxico, en los pases a lo largo del pacfico, la India, Amrica
del sur, Amrica central, el Caribe, frica y Australia.

Los mercados ms

atractivos para productos de aloe son los Estados Unidos, Francia, Reino Unido,
Alemania, Italia, Canad, Japn, Espaa, Suecia y Corea, [11].

El uso comercial original de la planta de aloe estaba en la produccin de una

sustancia celuloide llamada Alona, una savia amarilla usada durante muchos
aos como laxante (Figura 2). Este producto se convirti en un sinnimo del
nombre aloe y se registr en el campo comercial, tcnico y gubernamental a
principios del siglo XX. Esta terminologa cre mucha confusin cuando el otro
ingrediente principal del aloe, el gel semislido transparente, fue estabilizado y
puesto a la venta. A comienzos de los aos 50, este gel de aloe haba ganado
importancia en la produccin de bebidas nutritivas, crema hidratante, agente
curativo en los cosmticos y los medicamentos, [12].

El mercado mundial del aloe contina en plena expansin. El mercado mundial de

aloe, produce derivados y productos con aloe; segn estimaciones privadas, tiene
un giro de negocio a nivel mundial de 27 mil millones de dlares anuales. Su valor
es muy elevado por la influencia del valor final en cosmticos que contienen aloe y
por la alta incidencia en la facturacin que presentan las 10 mayores
corporaciones

estadounidenses

en

este

- 19 -

negocio,

generando incrementos

sustanciales en el valor de mercado de los productos finales vendidos. En el

mercado

mundial

del

aloe

hay

una

alta

demanda

en

sus

diferentes

presentaciones. El comercio mundial de materias primas de aloe est estimado en

unos 180 millones de dlares. Los nmeros son imprecisos todava, dado que el
aloe no posee una clasificacin arancelaria propia y se encuentra comprendido
junto a otros saborizantes y extractos de plantas varias, no pudindose determinar
en forma fehaciente su valor de transaccin, [11].

La industria del Aloe vera en la actualidad cuenta con mucha ms fuerza; existen
industrias dedicadas a la elaboracin de todo tipo de productos para diferentes
reas: alimenticia,

farmacolgica, cosmtica, entre otras. Hoy por hoy se

comercializan infinidad de productos a base de aloe; concentrados para bebidas,

acondicionadores y shampoo, cremas para manos y cuerpo, jugos, cosmticos,
gel liofilizado, entre otros, [12 y 13].

4.3 GENERALIDADES DEL CULTIVO

El Aloe vera se cultiva en alturas de 400 a 2500 msnm, aunque en algunas

regiones se obtienen buenos rendimientos en plantaciones a alturas inferiores a
400 msnm, [7].

La sbila presenta un alto rango de adaptabilidad a diferentes condiciones

ambientales; el Consejo Internacional del aloe seala que se desarrolla
generalmente, en reas 15 grados hacia el norte y hacia el sur del ecuador,
aunque puede ser encontrada en un espectro climtico bastante amplio.

Los

climas en que se desarrolla van de tropicales y subtropicales a desrticos. Se

establecen perfectamente en reas con temperaturas medias anuales de 18C a
25C con una precipitacin media anual de 400 a 800 mm; encontrndose en sitios
hasta de 200 mm al ao, donde su desarrollo es ms lento.

- 20 -

Aunque esta planta puede encontrarse en bosques ecuatoriales, climas templados

y montaas, se adapta bien a zonas de pronunciada sequa, a la intensidad de los
rayos solares y suelos con altas concentraciones de sales, condiciones que
caracterizan a grandes superficies localizadas en las zonas ridas y semiridas.
En Mxico crece en reas con precipitacin pluvial anual entre los 200 y 800 mm,
y soporta temperaturas extremas de -5 C durante el invierno hasta 42 C en
verano, [7].

La sbila, se desarrolla en suelos de roca de origen sedimentario, principalmente

en calizas y conglomerados; puede crecer en suelos someros, pedregosos y poco
profundos, escasos en materia orgnica, bien drenados, con pH que va de alcalino
a neutro o ligeramente cido y de diferentes texturas.

Aunque se puede

establecer y sobrevivir en suelos pobres, los suelos ideales para el crecimiento de

la sbila deben ser profundos, con buen drenaje, de textura media,
preferentemente franco-arenosos y de un pH ligeramente alcalino, [7].

Es una planta que se propaga en forma sexual y asexual. La reproduccin sexual

es menos eficaz y poco utilizada. Consiste en depositar las semillas en suelos
arenosos, bien drenados, teniendo lugar la germinacin en un lapso de 3 a 4
semanas, a una temperatura de 20 C. La reproduccin asexual consiste en cortar
las hojas grandes ms viejas de la planta y trozarlas en pedazos de 10 cm, se
dejan suberizar para que al plantarlas no se pudran. Este mtodo es conocido
como estaca de hoja, [7].

4.4 USOS DEL ALOE VERA

Histricamente el aloe ha sido utilizado en la medicina tradicional para el

tratamiento de muchas enfermedades. Es conocido como un buen antiinflamatorio,
gracias a la accin de la manosa-6-fosfato presente en su gel y como un poderoso
cicatrizante del tejido epitelial, debido a la actividad de sus aminocidos que

- 21 -

estimulan la produccin de nuevas clulas y a la habilidad de sus enzimas para

promover la regeneracin de la piel, [5 y 14]. El gel de Aloe vera es usado en el
tratamiento de heridas, quemaduras e irritaciones en la piel en general, [2, 5, 15 y
16]. El A. vera tiene una extensa aplicacin en la industria cosmtica donde es
considerada como un emoliente efectivo, tanto para la piel como para el cabello,
[5, 17 y 18].

El uso del A. vera ha sido descrito en el campo de la medicina veterinaria. El

extracto del gel ha sido usado en el tratamiento de muchos animales en casos
externos tales como alergias, abscesos, infecciones por hongos, varios tipos de
inflamaciones, dolores y comezn, [5, 19 y 20].

En numerosos estudios se ha reportado el uso del aloe en la cura de las lceras

gstricas, problemas gastrointestinales y de riones, gracias a su efecto
antisptico.

Muchas evidencias cientficas sugieren adems que el A. vera

incrementa la fuerza de la contraccin cardiaca decreciendo los niveles de

colesterol y triglicridos, revirtiendo desordenes cardiovasculares y estimulando la
regeneracin celular, [5, 21 y 22].

Estudios recientes indican que el A. vera puede usarse en el tratamiento de

enfermedades como el VIH-SIDA. Esto es atribuido a las propiedades antivirales e
inmunolgicas de un grupo de polisacridos que actan directamente en las
clulas del sistema inmunolgico, activando y estimulando macrfagos, monolitos,
anticuerpos y clulas-T, [5, 20 y 23].
As mismo, el aloe se ha usado en tratamientos del cncer, donde ha demostrado
que tiene un efecto positivo en la inhibicin de crecimiento de tumores, [5 y 24].

Investigaciones realizadas en Espaa revelaron que el gel de la planta tropical

puede usarse como una capa que adems de ser comestible, protege la calidad
de las frutas frescas. El gel, que al parecer no afecta el gusto ni la apariencia de

- 22 -

los alimentos, promete ser una alternativa natural segura frente a los preservativos
sintticos. Las pruebas que se llevaron a cabo utilizando uvas, demostraron que
las que se envolvieron en el gel del aloe, se preservaron por mas de 35 das
mientras que las que no se envolvieron en el gel, empezaron a deteriorarse 7 das
despus de haber sido almacenadas, [18].

4.5 COMPOSICIN QUMICA DE LA HOJA DE ALOE VERA

Con efecto de dar una explicacin de las numerosas aplicaciones que tiene el A.
vera, es necesario examinar las propiedades fsicas y qumicas de la planta.
La planta contiene entre el 99 y 99.5 por ciento de agua con un pH promedio de
4.5.

La materia slida remanente contiene aproximadamente 75 ingredientes

diferentes

donde

se

incluyen

vitaminas,

minerales,

enzimas,

azcares,

antraquinonas o compuestos fenlicos, lignina, saponinas, esteroles, aminocidos

y cido saliclico, [8]. Se hace una descripcin mas detallada a continuacin.

4.5.1 VITAMINAS: La planta contiene muchas vitaminas, excluyendo la vitamina D

pero incluye importantes antioxidantes como las vitaminas A, C y E. Vitamina B
(Tiamina), niacina, vitamina B2 (riboflavina), colina y cido flico, estn tambin
presentes. Algunas autoridades sugieren que tambin contiene trazas de vitamina
B12, [8].
4.5.2 ENZIMAS: Cuando es tomada oralmente, varios de estos catalizadores
bioqumicos, tales como la amilasa y lipasa, pueden ayudar en la digestin
rompiendo grasas y azcares.

Una importante enzima, una carboxipeptidasa,

inactiva la bradykinina (que es una hormona que produce dolor asociado con
vasodilatacin durante el proceso inflamatorio) y produce un efecto antiinflamatorio. Por tanto, su hidrlisis reduce el dolor y vasodilatacin, y de all su
efecto analgsico, [2 y 8].

- 23 -

4.5.3 MINERALES: Se encuentran en la planta: sodio, potasio, calcio, magnesio,

manganeso, cobre, zinc, hierro y cromo.

El lactato de magnesio inhibe la

descarboxilacin de la histidina y previene la formacin de la histamina del

aminocido histidina. La histamina es liberada en muchas reacciones alrgicas y
causa intensa picazn y dolor. La prevencin de su formacin podra explicar el
efecto antipurtico del A. vera, [8].

4.5.4 AZCARES: Los azcares se encuentran en el muclago o gel y forman el

25% de la fraccin slida donde hay presencia de mono y polisacridos. Los ms
importantes son los polisacridos de cadena larga que estn constituidos por la
glucosa y la manosa, conocidos como glucomananos, [2 y 8].

4.5.5 SAPONINAS: Las saponinas son glicsidos de esteroides o de

triterpenoides, llamadas as por sus propiedades como las del jabn: cada
molcula est constituida por un elemento soluble en lpidos (el esteroide o el
triterpenoide) y un elemento soluble en agua (el azcar), y forman una espuma
cuando son agitadas en agua. Las plantas contienen saponinas muy diversas,
entre ellas la acacia, la saponaria o jabonera, el castao de Indias y muchas otras.
Las saponinas se han utilizado mucho, y an se utilizan en ocasiones, como
agentes limpiadores y, sobre todo, como espumantes, en especial en lquidos de
extincin de incendios. La hidrlisis de las saponinas, inducida por cidos o
enzimas, produce azcares (con frecuencia, glucosa) y la sapogenina, que puede
ser de tipo triterpnico o esteroidal. Ciertos azcares y saponinas son materias
primas utilizadas en la sntesis de hormonas esteroides.
Estas sustancias jabonosas forman el 3% del gel y son en general limpiadoras,
teniendo propiedades antispticas, [8 y 25].
4.5.6 ESTEROLES DE PLANTA: Estn incluidos campesterol, -sitosterol y
lupeol, [8].

- 24 -

4.5.7 CIDO SALICLICO: Se puede encontrar en el muclago. Este es el

compuesto de la comn Aspirina el cual posee propiedades anti-inflamatorias y
anti-bacteriales, [8].

4.5.8 AMINOCIDOS: El A. vera provee 20 de los 22 aminocidos necesarios

requeridos por el cuerpo humano y 7 de los 8 aminocidos esenciales los cuales el
cuerpo no puede sintetizar. Estos deben ser ingeridos en la alimentacin diaria.
Las protenas formadas por estos aminocidos tienen efectos que inhiben el
crecimiento de tumores y lceras, e incrementan la proliferacin normal de las
clulas de la piel humana, [2 y 8].

Otros metabolitos aislados del A. vera estn relacionados en la tabla 2.

- 25 -

Tabla 2. Algunos metabolitos secundarios aislados de Aloe vera, [2 y 4].

Nombre

Estructura

Aloenina
HO

OGlc

OH

CH3
OCH 3

Alona A (R1: H; R2: H; R3: H; C10: S)

HO
1

O
9

OH
8

Aloinosido A (R1:-L-Rhamnosil; R2:

H; R3: H; C10: S)

6
4

10

R 3 Glc

CH 2 OR

R2

Alona B (R1: H; R2: H; R3: H; C10: R)

OH

4-Hidroxialoina (R1: H; R2: OH; R3: H)

OH

5-Hidroxialoina (R1: H; R2: H; R3: OH;

C10: R)

6
4

Aloinosido B (R1:-L-Rhamnosil; R2:

H; R3: H; C10: R)

10

R 3 Glc

CH 2 OR 1

R2

Aloesina (R1: H; R2: H; R3: COCH3)

O

CH3

Aloeresina A (R1: H; R2: p-Coumaroil;

R3: COCH3)
R 3 CH

OR

H
OR

H
H

8-C-glucosil-7-O-methil-(S)-aloesol
(R1: CH3; R2: H; R3: CH(OH)CH3)

OH

H
OH
HO

- 26 -

4.5.9 ANTRAQUINONAS

4.5.9.1 DISTRIBUCIN
La distribucin de las antraquinonas en el reino vegetal esta limitada a una serie
de familias. Abundan en los hongos, lquenes y plantas superiores, sobre todo en
ciertas familias de dicotiledneas como Poligonaceae, Ramnaceae, Fabaceae,
Rubiaceae, Ericaceae, Euphorbiaceae, Cesalpinaceae y Escrophulariaceae. En
monocotiledneas slo se han encontrado derivados antracnicos en la familia
Liliaceae. Se encuentran en especies como los aloes (Aloe sp.) o en muchas
plantas del gnero Rhamnus. Como ejemplos estn la alona de diversas especies
de aloes, el frangulsido en la frngula (Rhamnus frangula L.), los hetersidos del
ruibarbo (Rheum officinale Baillon.), los cascarsidos de la cscara sagrada
(Rhamnus prusiana L.) o los sensidos del sen (Cassia sp.), [26].

4.5.9.2 GENERALIDADES
Son los componentes ms frecuentes entre el grupo de las quinonas vegetales.
Las antraquinonas son compuestos aromticos con dos grupos cetona,
frecuentemente en para (1,4) y en muy pocos casos en orto (1,2) (Figura 3).
Estn formadas por dicetonas insaturadas que por reduccin se convierten en
fenoles. De todos los compuestos que presentan estructura quinnica, destacan
las benzoquinnas (estructura derivada del benceno, con poco inters en
farmacia), naftoquinonas (estructura derivada del naftaleno, con poder antisptico,
de ah su inters en farmacia tanto antibacteriano y antifngico), antraquinonas (su
estructura

deriva

del

antraceno

las

1,8-dihidroxi-antraquinonas

tienen

propiedades laxantes) y fenantraquinonas (su estructura deriva del fenantreno).

La estructura qumica de las antraquinonas se caracteriza porque tienen el
sistema tricclico del antraceno, pero con el anillo central ms o menos oxidado, lo
cual

permite

diferenciar

los

distintos

tipos

de

derivados

antracnicos.

Generalmente estn en forma de hetersido. Hay O-hetersidos, C-hetersidos e

incluso O y C-hetersidos a la vez.

- 27 -

Figura 3. Estructura general de una antraquinona, antrona, oxantrona,

antranol, y diantranol, [26].

En funcin de la oxidacin del anillo central se clasifican en antraquinonas (con

dos funciones cetona en el anillo central) y oxantronas (con una funcin cetona en
el anillo central), cuya forma tautomrica son los antranoles (figura 3). Si estn
libres (genina libre), las antronas y antranoles se oxidan fcilmente a
antraquinonas. Las antronas forman a menudo diantronas, compuestos dmeros
que pueden ser homodiantronas (formadas por dos antronas iguales) o
heterodiantronas (formadas por dos antronas diferentes). La unin es 10-10. Los
dihidroantranoles tienen slo una funcin alcohol en el anillo central, son muy
inestables y se degradan con facilidad.

Las geninas antraquinnicas son slidos coloreados (amarillo, anaranjados,

rojizos) poco solubles en agua fra y ms solubles en agua caliente y mezclas
hidroalcohlicas. Son solubles en disolventes orgnicos y en alcoholes y les dan
color amarillo, as como en soluciones alcalinas, tomando entonces color rojo. Las
que tienen un grupo carboxilo se solubilizan en soluciones acuosas de bicarbonato

- 28 -

sdico. Los hetersidos son solubles en agua y mezclas hidroalcohlicas. stos

se pueden hidrolizar pero depende de si se trata de O-hetersidos, que son mas
fciles de romper (se rompe la unin heterosdica con un cido fuerte) o de Chetersidos, mas difciles de romper (se usa un medio cido fuerte y FeCl3).
Para llevar a cabo la extraccin hay que tener en cuenta el hecho de que si son Ohetersido (se usa un cido fuerte y se obtienen las geninas, que son solubles en
disolventes orgnicos como hexano y ter) o C-hetersidos (se emplea adems
FeCl3).
4.5.9.3 DETECCIN
La deteccin de las antraquinonas se lleva a cabo por medio de la reaccin de
Borntrger. Esta reaccin slo se da en las antraquinonas libres (formas oxidadas
libres), que son solubles en un disolvente orgnico (color amarillo) y si se le aade
una solucin acuosa de hidrxido de potasio, se formar una capa de color rojo
debido a las sales, que ir haciendo desaparecer el color amarillo (reaccin
positiva).

Esas sales que se forman son fenatos.

Para los hetersidos

antraquinnicos y los derivados reducidos tipo antranol, la reaccin de Borntrger

es negativa.

4.6 TCNICAS ESPECTROSCPICAS

4.6.1 ESPECTROSCOPA ULTRAVIOLETA-VISIBLE

La regin ultravioleta-visible del espectro electromagntico, que se extiende de
unos 200 a unos 800 nm, es la regin espectral ms utilizada en anlisis qumico.
Los instrumentos que se utilizan en el visible y el ultravioleta son comunes,
relativamente sencillos y bien adaptados al anlisis cuantitativo.

Existen dos

clases generales de compuestos qumicos que absorben en la regin ultravioletavisible y que se pueden determinar cuantitativamente midiendo esta absorcin. Se
trata de los compuestos orgnicos que poseen dobles enlaces conjugados o

- 29 -

anillos aromticos, y los iones de los metales de transicin, especialmente los

iones complejos formados con reactivos orgnicos, [27].
Para todo intervalo de 200 a 800 nanmetros se emplea, esencialmente, la misma
instrumentacin, aunque aparece una complicacin importante al pasar a
longitudes de onda inferiores a unos 340 nm. Por debajo de esta longitud de onda
el vidrio deja de ser transparente, y es necesario emplear cubetas, ventanas,
prismas y lentes de cuarzo. Resulta necesario, adems, emplear un foco luminoso
diferente para trabajar a longitudes de onda inferiores a 340-350 nm, [27].

Los aparatos destinados a la medicin de la absorcin de radiacin contienen una

fuente de radiacin continua. Para la luz visible, esta fuente o foco es una lmpara
de filamento de wolframio, anloga a las bombillas comunes usadas para la
iluminacin domstica, siendo las del tipo usado para los faros de automvil las
ms adecuadas para los espectrofotmetros. Para trabajar por debajo de los 350400 nm se utilizan las lmparas de descarga de gas hidrgeno. Las lmparas
fabricadas con deuterio dan una emisin mucho ms brillante que las de
hidrgeno, pero son ms caras. Estas lmparas tienen una ventana de cuarzo o
de slice fundida para permitir el paso de la radiacin ultravioleta, y son tiles
desde los 375 nm hasta los 180-200 nm, zona en que el cuarzo empieza a
absorber, [27].

El principio de la espectroscopia ultravioleta-visible involucra la absorcin de

radiacin ultravioletavisible por una molcula, causando la promocin de un
electrn de un estado basal a un estado excitado, liberndose el exceso de
energa en forma de calor. La luz visible o UV es absorbida por los electrones de
valencia, stos son promovidos a estados excitados (de energa mayor). Al
absorber radiacin electromagntica de una frecuencia correcta, ocurre una
transicin desde uno de estos orbitales a un orbital vaco. Las diferencias entre
energas varan entre los diversos orbitales. Algunos enlaces, como los dobles,

- 30 -

provocan coloracin en las molculas ya que absorben energa en el visible as

como en el UV, como es el caso del -caroteno, [27].

Cuando un haz de radiacin UV-Visible atraviesa una disolucin conteniendo un

analito absorbente, la intensidad incidente del haz (Io) es atenuada hasta I. Esta
fraccin de radiacin que no ha logrado traspasar la muestra es denominada
transmitancia (T) (T = I/Io).
Las muestras en solucin se ponen en una pequea celda de Silicio (Si).
Se utilizan dos lmparas: una de H o deuterio para la regin UV, y una de W /
halgeno para la regin visible
Se utiliza tambin una celda de referencia que contiene slo solvente.
La luz pasa simultneamente por la celda de muestra y la celda de referencia.
El espectrmetro compara la luz que pasa por la muestra con la que pasa por la
celda de referencia.
La radiacin transmitida es detectada y el espectrmetro obtiene el espectro de
absorcin al barrer la longitud de onda de la luz que pasa por las celdas, [27].

4.7 NORMAS DE CALIDAD DE PRODUCTOS DE ALOE VERA

El instituto nacional de vigilancia de Medicamentos y alimentos, INVIMA, que es el

ente dedicado al control, vigilancia, calidad y seguridad de los productos
farmacuticos y alimenticios, se acoge a lo aceptado por el internacional Aloe
Science Council (www.lasc.org) el cual acepta como mximo 50 ppm de alona en
el gel de sbila y los productos derivados, [28].

Esta cuantificacin de la alona, barbalona o productos hidroxiantracnicos en gel

de sbila o productos derivados se debe hacer mediante un mtodo
espectrofotomtrico; por ejemplo, el especificado en la European Pharmacopoeia;
4 th Edition, 2002, pginas 607-609 Directorate for the Quality of Medicines of
Council of Europe (EDQM); Council of Europe, Strasbourg, Cedes, France, [28].

- 31 -

5. JUSTIFICACIN

Durante los ltimos treinta aos se ha emprendido en diferentes partes del mundo
programas dedicados a la investigacin de la planta denominada Aloe vera,
debido a sus diversas propiedades que tienen aplicacin tanto en la industria
cosmtica como en la medicina natural, generando una gran demanda comercial
por sus derivados en el mbito mundial; especialmente en lugares como Hong
Kong, Estados Unidos, Japn y Latinoamrica, [7].

Actualmente el cultivo del Aloe vera se perfila como una nueva industria ya que
existe un mercado potencial conocedor de las propiedades benficas de ste y
sus productos. Adems, se est desarrollando un mercado atractivo para la hoja
fresca y entera, para uso domstico en preparacin de cosmticos, cremas
artesanales hidratantes, polvos, cpsulas, champs, para curacin de quemaduras
de diferente ndole, picaduras de insectos y heridas, etc, [4, 7, 21 y 29].

Tambin se usa como jugo por sus propiedades benficas debido a su buena
accin reguladora del sistema digestivo y en forma complementaria para
tratamientos de gastritis, lceras y otros, [4, 7, 21 y 29].

Otro uso importante es el de aquellos geles de aloe que contienen parte de la

alona o goma de la cscara, que se utilizan como uno de los ingredientes
principales de algunas dietas y en la preparacin de algunos alimentos, [4, 7, 21 y
29].

Entre

los

purgantes

de

origen

natural,

que

contienen

derivados

hidroxiantracnicos, el aloe es una de las ms activas. Se usa el polvo de aloe o

alona aislada, solo o combinado, en la elaboracin de diferentes preparados
farmacuticos. Sin embargo, es importante aclarar que el consumo de los
extractos antraquinnicos en altas dosis puede causar efectos secundarios como
- 32 -

dolores intestinales, diarreas, espasmos e incluso clicos. Por ello, la legislacin

europea prohbe la comercializacin de productos a base de aloe con un
contenido superior a 50 ppm de antraquinonas, [4, 7, 21 y 29].

La produccin de goma de aloe (que contiene la alona) esta menos organizada y

existen pocas compaas grandes envueltas en los procesos de produccin y
procesamiento de sta, [7].

La explotacin de la sbila tiene un papel importante en el tema de la sustitucin

de cultivos en Colombia.

Actualmente, los datos aproximados que maneja la

agremiacin indican que existen unas 250 hectreas cultivadas en los

departamentos de Atlntico, Santander, Magdalena, Antioquia, Cundinamarca,
Boyac, Caldas, Quindo y Risaralda. Igualmente, la Corporacin Colombia
Internacional (CCI), est realizando un levantamiento ms preciso, para establecer
la oferta de penca de sbila de Colombia, [7].

Actualmente en Colombia el

mercado de la sbila es constante, hay pocos compradores y productores. Se

considera que el mercado colombiano es potencial, tiende a aumentar y es un
producto promisorio que tiene alta demanda en el exterior. La industria nacional y
los comercializadores se concentran principalmente en Cali, Bogot, Medelln,
Pereira, Bucaramanga y Barranquilla, [7 y 30].

En la regin cafetera el cultivo del Aloe vera se inici en el 2004, aprovechando

las bondades del clima tropical y la excelente calidad de los suelos. Esta regin
cuenta en la actualidad con aproximadamente 86100 plantas de un ao
sembradas en los municipios de Pereira, Dosquebradas y Santa Rosa de Cabal
(Risaralda) y Montenegro (Quindo), [31].

En la actualidad, en la regin cafetera se est comercializando principalmente el

gel o muclago para consumo nacional e internacional [31]; sin embargo, al resto
de la planta no se le da uso alguno. Considerando la gran demanda de

- 33 -

compuestos activos procedentes del Aloe vera y a pesar del gran nmero de
estudios en diferentes pases sobre mltiples aplicaciones que tiene esta planta [2
y 21], en la regin cafetera hasta ahora se comenzaron algunas investigaciones
sobre el cultivo [7 y 30]. Por esto, es necesario realizar estudios que permitan
alcanzar un mayor aprovechamiento de los beneficios del Aloe vera; comenzando
por el estudio de los principales ingredientes activos reportados. En consecuencia,
este trabajo plantea iniciar la investigacin sobre el contenido de antraquinonas en
las plantas de la regin cafetera, por ser un grupo de compuestos de gran
importancia debido a su efecto laxante y cicatrizante [2 y 21], entre muchos otros,
siendo de estos el ms ampliamente conocido, la alona o acbar.

- 34 -

6. OBJETIVOS

6.1 Objetivo general

Evaluar la presencia de antraquinonas en los extractos obtenidos del muclago y

de la corteza del Aloe vera para el aprovechamiento integral de los cultivos de
sbila en la regin cafetera colombiana.

6.2 Objetivos especficos

o Determinar el rendimiento del gel en las hojas de Aloe vera de los cultivos
que se encuentran en Montenegro (Quindo) y Combia (Risaralda).
o Obtener extractos del muclago y corteza de plantas de Aloe vera cultivadas
en la regin cafetera y evaluar la presencia de las antraquinonas utilizando
las tcnicas de separacin apropiadas y cuantificarlas.
o Plantear las aplicaciones y/o usos potenciales de las partes de la planta
(corteza, ltex y muclago) de acuerdo al contenido de antraquinonas.

- 35 -

7. METODOLOGIA

7.1 MATERIALES Y EQUIPOS

Hojas de A. vera
Agua destilada
Agua corriente
KOH 1 M
HCl 0,1 M
FeCl3
ter
Cuchillo plstico
Esptula
Matraz de 100 mL
Vaso de precipitados
Embudo de separacin
Estufa
Nevera
Balanza de tres brazos
Balanza analtica
Ultrasonido
Rotaevaporador

- 36 -

7.2 MUESTRA DE ANLISIS

Se emplearon hojas frescas de Aloe vera maduras, procedentes de cultivos

ubicados en la zona cafetera colombiana. Las hojas fueron recolectadas
manualmente en forma aleatoria seleccionando plantas con aspecto sano, en las
fincas: Villa Sofa ubicada en el corregimiento de Combia (Pereira, Risaralda) y la
Hacienda Npoles ubicada en Montenegro (Quindo).
Las muestras se conservaron en bolsas plsticas y refrigeradas (4 C).

7.3 PRETRATAMIENTO DE LA MUESTRA

Se efectu un lavado con agua de la llave a las hojas de anlisis para eliminar la
contaminacin de cuerpos extraos que pudieran interferir en los anlisis (ver
figura 4). Se separ el gel o muclago, la corteza y el ltex empleando un cuchillo
plstico. Inicialmente, se hizo una incisin sobre el extremo inferior de la hoja (ver
figura 5) para obtener el ltex por gravedad y se recolect en un vaso de
precipitados. Se realiz un corte alrededor del borde de la hoja que permiti la
remocin de la corteza y finalmente se realiz la separacin del muclago (ver
figura 6).

Figura 4. Limpieza de las hojas de Aloe vera

- 37 -

Figura 5. Descripcin del extremo inferior de la hoja

Figura 6. Remocin de la corteza y separacin del muclago

La corteza y muclago se secaron en una estufa a 28 C por 5 das. El Ltex se

almacen en un vaso de precipitados y se conserv a una temperatura de 4 C
para posteriores anlisis.

- 38 -

7.4 ANLISIS DE LAS MUESTRAS

7.4.1 RENDIMIENTO DEL MUCLAGO EN LAS HOJAS

Se determin por el mtodo gravimtrico, empleando la relacin de masas de la
hoja completa recin lavada y del muclago aislado de la hoja.
Para calcular el rendimiento del muclago en las hojas se utiliz la siguiente
formula:

RENDIMIENT
O=

masa del gel

100
masa total de la hoja

La determinacin se hizo por triplicado.

7.4.2 EXTRACCIN Y CUANTIFICACIN DE LAS ANTRAQUINONAS

PRESENTES EN LA CORTEZA, LTEX Y GEL DE ALOE VERA

7.4.2.1 EXTRACCIN DE ANTRAQUINONAS

Se emplearon muestras de corteza, muclago y ltex. La extraccin se llev a
cabo por ultrasonido (ver figura 7) usando agua como solvente de extraccin
con una relacin muestra solvente 1:10 (5 g de muestra y 50 mL de agua)
durante 40 minutos a temperatura ambiente, esta tcnica se realiz con base en
la metodologa propuesta por Barrese et al, [1], con una modificacin la cual
consisti en utilizar el ultrasonido en vez de

reflujo como proponen estos

autores.

Las determinaciones se realizaron por triplicado en cada caso.

- 39 -

Figura 7. Ultrasonido Ultrasonik Cleaner,

Modelo 19H-W, Marca Neytech

7.4.2.2 OBTENCIN DE DERIVADOS

A los extractos obtenidos por ultrasonido se les adicion 10 mL de cido
clorhdrico 0,1 M y 0.6g de tricloruro frrico. La solucin fue expuesta a
ultrasonido durante 30 minutos. Posteriormente se le realizaron 3 extracciones
sucesivas con ter. Los extractos etreos fueron lavados con agua 2 veces y
posteriormente concentrados por rotaevaporacin, los residuos obtenidos se
redisolvieron con 75 mL de hidrxido de potasio 1 M. La solucin se someti a
una temperatura de 28 C en estufa durante 30 min para propiciar el desarrollo
del color rosado o rojo, se dej reposar hasta alcanzar temperatura ambiente y
se afor a 100 mL con hidrxido de potasio 1 M para su posterior anlisis. (Ver
figura 8).
La obtencin de los derivados antraquinnicos se hizo con base en la
metodologa propuesta por Barrese et al, [1].

- 40 -

Separacin de las partes de la

hoja (corteza, ltex y gel)

Secado (28 C x 5 das)

Pesado de la muestra a analizar

Adicin de Agua destilada para

hidrlisis en Ultrasonido (40 min.)

Adicin de FeCl3 y HCl 0.1 M al extracto

y Ultrasonido (30 min.)

Extraccin lquido-lquido con ter

de petrleo (x3)

Conservar la parte etrea

Lavar parte etrea con agua

destilada (x2)

- 41 -

Conservar la parte etrea

Evaporar el ter de petrleo

(Rotaevaporacin)

Redisolucin de los residuos en

KOH 1 M

Desarrollo de color
(28 C x 30 min.)

Ajuste del volumen final con KOH 1M

Lectura en espectrofotmetro
(495 nm)

Cuantificacin por medio de curva

de calibracin (Alona)

Figura 8. Procedimiento para la extraccin y cuantificacin

de antraquinonas en A. vera

- 42 -

7.4.2.3

CUANTIFICACIN

DE

ANTRAQUINONAS

POR

ESPECTROFOTOMETRA

La

cuantificacin

de

los

derivados

antraquinnicos

se

realiz

por

espectrofotometra UV-Visible, [1], empleando un espectrofotmetro Marca

SHIMADZU 1700UV.

Las muestras fueron analizadas a una longitud de onda de 495 nm la cual se

estableci a travs del valor mximo de absorcin (Ver figura 9) obtenido al
someter

el

estndar

de

alona

(SIGMA

del

97%

de

pureza)

al

espectrofotmetro y la cuantificacin se realiz utilizando una curva de

calibracin con el mismo patrn (Ver tabla 3).

Figura 9. Espectro de absorcin del patrn de alona

- 43 -

Tabla 3. Datos correspondientes a la curva de calibracin del estndar de

alona (Figura 11)

Patrn No

Concentracin (ppm)

Absorbancia

27,936

0,005

55,872

0,01

83,808

0,019

111,744

0,025

167,616

0,035

La ecuacin de regresin lineal calculada de acuerdo a los datos obtenidos en

la Tabla 3 es la siguiente:

y = 2.2058 10

-4

x - 9.1892 10

- 44 -

-4

8. RESULTADOS Y DISCUSIN

8.1 DESCRIPCIN DE LOS CULTIVOS

8.1.1 CULTIVO COMBIA, PEREIRA (RISARALDA)

El cultivo de la finca Villa Sofa ubicada en el corregimiento de Combia cuenta
con 1000 plantas sembradas en un terreno plano a una altitud de 1234 msnm,
[4]. Las tres muestras seleccionadas para realizar los anlisis presentaban un
aspecto sano y tamao mediano (ver figura 10).

Figura 10. Aspecto de hojas analizadas del cultivo del corregimiento de

Combia, Finca Villa Sofa

8.1.2 CULTIVO MONTENEGRO (QUINDO)

El cultivo de Aloe vera de la Hacienda Npoles es inclinado (ver figura 11) y
presentaba caractersticas de abandono (maleza y plantas sin deshojar) al
momento de realizar el muestreo. Este cultivo tiene aproximadamente 480
hectreas, que corresponden a 45000 plantas en su totalidad y esta localizado
a una altitud de 1294 msnm, [30]. Las hojas seleccionadas para el anlisis se
encontraban en buen estado, aunque presentaban coloraciones marrones en la
parte inferior (ver figura 12).

- 45 -

Figura 11. Cultivo de Aloe vera de la Hacienda Npoles en el municipio de

Montenegro (Quindo).

Figura 12. Aspecto de hojas de A. vera analizadas del cultivo de Montenegro

(Quindo).

- 46 -

8.2 ANLISIS DE LAS MUESTRAS

8.2.1 RENDIMIENTO DEL MUCLAGO EN LAS HOJAS

El rendimiento promedio de gel en las hojas de Aloe vera cultivadas en la finca
Villa Sofa (Combia, Risaralda) fue de 68.71%; muy similar al rendimiento de gel
en las hojas cultivadas en la hacienda Npoles (Montenegro, Quindo) que fue
de 67.73%.

Tabla 4. Rendimiento del gel en las hojas de Aloe vera del cultivo de la finca
Villa Sofa ubicada en el corregimiento de Combia (Pereira, Risaralda) y de
la Hacienda Npoles ubicada en Montenegro (Quindo).

RENDIMIENTO GEL (%)

FINCA VILLA SOFA
(COMBIA)

RENDIMIENTO GEL (%)

HACIENDA NPOLES
(MONTENEGRO)

Promedio

65,79
68,66
71,69
68,71

71,64
68,59
62,97
67,73

Desviacin
estndar

2,952

4,397

71,69
65,79

71,64
62,97

Anlisis 1
Anlisis 2
Anlisis 3

Rango superior
Rango inferior

En la tabla 4 se muestra que el rendimiento del gel en las hojas cultivadas en

Combia no presenta gran diferencia comparado con el rendimiento de las hojas
cultivadas en Montenegro. Sin embargo, existe una desviacin estndar alta en
el rendimiento de los dos cultivos, lo cual puede ser atribuido al hecho de que
para este anlisis se utiliz una balanza de tres brazos la cual presenta poca
sensibilidad. La variacin en los resultados obtenidos (0.985%), aunque no es
muy alta podra estar relacionada con las condiciones agronmicas de los
cultivos ya que el cultivo de la Hacienda Npoles ubicada en el municipio de
- 47 -

Montenegro se encontraba descuidado en el momento de hacer la recoleccin

de las muestras mientras que el cultivo de la finca Villa Sofa en Combia si
estaba en condiciones ideales.

8.2.2

IMPLEMENTACIN

DEL

MTODO

DE

ANLISIS

DE

ANTRAQUINONAS

8.2.2.1 EXTRACCIN Y SEPARACIN

En ensayos preliminares de la extraccin de las antraquinonas se evaluaron
varios mtodos soxhlet, reflujo, maceracin y ultrasonido con diferentes
solventes (acetona, metanol, metanol-agua, agua); sin embargo, la utilizacin
del ultrasonido demostr ser mucho ms simple, ms rpida y ms eficaz que
los mtodos convencionales para extraer los compuestos orgnicos de los
vegetales. El rendimiento del mtodo de ultrasonido puede verse afectado por
parmetros, como la polaridad del disolvente, el tiempo de extraccin y la
relacin masa de muestra a volumen de disolvente. De acuerdo a la bibliografa
la optimizacin de las variables en el mtodo de ultrasonido demuestra que el
aumento del tiempo de extraccin, el aumento de la polaridad y el volumen del
solvente de extraccin producen mayores rendimientos; con base a estos
resultados se decidi usar agua como solvente con el cual se obtuvieron
mejores resultados, [32 y 33].

Al efectuar la separacin se realizaron varios ensayos con diferentes tcnicas.

Inicialmente se tena un extracto verde el cual provocaba interferencias al
momento de pasar la muestra por el espectrofotmetro, por este motivo se
intent separar el compuesto de inters mediante extraccin lquido-lquido
usando como solventes hexano, cloroformo, diclorometano y metanol. Estos
extractos seguan presentando interferencias al momento de hacer la lectura en
el espectrofotmetro. Despus de esto, se intent hacer una separacin usando
cartuchos RP-18 en fase slida; los extractos obtenidos carecan de

- 48 -

antraquinonas y no arrojaban ninguna lectura en el espectrofotmetro ni en la

cromatografa en capa delgada. Debido a que estos mtodos no nos arrojaron
los resultados esperados, se opt por usar el mtodo de cuantificacin de
antraquinonas basado en la reaccin de Borntrger, [1], con algunas
modificaciones.

8.2.3 CONTENIDO DE ANTRAQUINONAS PRESENTES EN LA CORTEZA,

LTEX Y GEL DE LAS HOJAS DE A. VERA

En la elaboracin de la curva de calibracin se utilizaron dos tipos de estndar;

uno de aproximadamente 50% de pureza y el otro de 97% de pureza. Con el
estndar de aproximadamente 50% de pureza se determin el mximo de
absorcin; se realiz un barrido entre 300 y 600 nm y el mximo se encontr a
495 nm, (ver figura 9). Adems se realizaron ensayos para determinar las
concentraciones a las cuales se realizaran los patrones (diluciones). Esto se
hizo ya que slo se contaba con 25 mg del estndar de 97% de pureza.
Despus de determinar el mximo de absorcin con el estndar de alona de
aproximadamente 50% de pureza, se realiz la curva de calibracin (ver tabla
3) sometiendo las diferentes diluciones del estndar a las mismas condiciones
de anlisis de las muestras (numerales 6.3.2.1 y 6.3.2.2), la cual arroj un
coeficiente de correlacin de 0.988.

- 49 -

Tabla 5. Determinacin del contenido de antraquinonas presente en la corteza,

gel y ltex de la planta de Aloe vera del cultivo de la finca Villa Sofa en el
corregimiento de Combia (Pereira, Risaralda)

ANLISIS
1
2
3
Promedio
Desviacin
estndar
Rango
superior
Rango
inferior

CORTEZA
GEL
LTEX
ALONA
RELACIN
PORCENTAJE DE PORCENTAJE DE PORCENTAJE DE
TOTAL
LATEX/GEL
ANTRAQUINONAS ANTRAQUINONAS ANTRAQUINONAS
(%)
(%)
(%)
(%)
0,51
0,252
1,165
1,927
4,623
0,456
0,204
1,273
1,933
6.240
0,609
0,227
0,996
1,832
4.388
0,525
0,228
1,14
1,897
5.084
0,0776

0,02401

0,13961

0.609

0.252

1.273

0.456

0.204

0.996

Tabla 6. Determinacin del contenido de antraquinonas presente en la corteza,

gel y ltex de la planta de Aloe vera del cultivo de la Hacienda Npoles
en el municipio de Montenegro (Quindo)

ANLISIS
1
2
3
Promedio
Desviacin
estndar
Rango
superior
Rango
inferior

CORTEZA
GEL
LTEX
ALONA
RELACIN
PORCENTAJE DE PORCENTAJE DE PORCENTAJE DE
TOTAL
LATEX/GEL
ANTRAQUINONAS ANTRAQUINONAS ANTRAQUINONAS
(%)
(%)
(%)
(%)
0,526
0,118
1,689
2,333
14,31
0,544
0,073
1,477
2,094
20,23
0,674
0,081
1,575
2,33
19,44
0,581
0,091
1,58
2,25
18
0,08075

0,02401

0,1061

0,674

0,118

1,689

0,526

0,073

1,477

- 50 -

En la tabla 5 se puede observar que el contenido promedio de antraquinonas

presentes en las plantas de Aloe vera del cultivo de la finca Villa Sofa en el
corregimiento de Combia (Pereira, Risaralda) es 1.897%; estos compuestos se
encuentran en mayor cantidad en el ltex (1.14%) que en el gel (0.228%) y en
la corteza (0.525%). La desviacin estndar de los resultados de concentracin
de antraquinonas obtenidos para estas muestras es bajo ( 0.1) lo que indica
que la reproducibilidad fue buena y los datos son confiables.

Por otro lado, En la tabla 6 se puede observar que el contenido promedio de

antraquinonas presentes en las plantas de Aloe vera del cultivo de la Hacienda
Npoles en el municipio de Montenegro (Quindo) fue de 2.25%; a diferencia de
las plantas de A. vera cultivadas en Combia estos compuestos se encuentran
mucho mas concentrados en el ltex (1.58%) y en la corteza (0.581%), y estn
en mas baja proporcin en el gel (0.091%); La desviacin estndar de los
resultados de concentracin de antraquinonas obtenidos para las muestras del
municipio de Montenegro es bajo ( 0.1) lo que indica que hubo una buena
reproducibilidad y los datos son confiables.

Como se aprecia en las tablas 5 y 6, el contenido de antraquinonas en la

corteza de las hojas cultivadas en Combia y Montenegro no presenta una
variacin importante entre ellas (Diferencia de promedios de 0,056%). Se puede
observar que la corteza es pobre en antraquinonas confrontada con el ltex,
pero tiene un contenido superior comparndola con el gel.

La concentracin de antraquinonas en el gel de hojas cultivadas en Combia es

ms del doble con relacin al gel de las hojas cultivadas en Montenegro, esto
podra deberse a que el suelo del cultivo de Combia presenta mayor
concentracin de materia orgnica (Combia: 10.7%; Montenegro: 5.7%) [2 y 7] y
se encuentra en constante mantenimiento y fertilizacin, mientras que el cultivo
de Montenegro se encontraba abandonado al momento de recolectar las

- 51 -

muestras para el anlisis. El gel es la parte de la hoja ms deficiente en

antraquinonas; esto puede ser una ventaja para las plantas cultivadas en
Montenegro ya que se podran usar en productos alimenticios, [7 y 30].

El contenido de antraquinonas en el ltex de hojas cultivadas en Montenegro es

mayor que el contenido de antraquinonas en el ltex de hojas cultivadas en
Combia. Las antraquinonas presentes en las hojas de A. vera cultivadas en
Montenegro Quindo se encuentran concentradas principalmente en el ltex (ver
relacin ltex-gel en las tablas 5 y 6); esto representa una gran ventaja pues el
muclago con baja concentracin de estos compuestos se puede usar
fcilmente en productos para el consumo humano; por otra parte, se puede
obtener un ltex enriquecido para otro tipo de usos. En comparacin, las hojas
de Aloe vera cultivadas en Combia tienen las antraquinonas repartidas
principalmente entre el gel y el ltex; esto explica el alto contenido de estos
compuestos en el gel y la disminucin en el acbar.

Esta diferencia en la

distribucin de las antraquinonas en las plantas de los dos municipios, podra

estar relacionada con el efecto repelente que poseen estas sustancias las
cuales actan como mecanismo de defensa para alejar posibles depredadores
nocivos para ellas. Esto depende de factores que rodean a la planta; como el
ambiente, el suelo, microorganismos, insectos, entre otros. Se hace necesario
investigar sobre la fisiologa de la planta para llegar a una conclusin concreta
con base a la distribucin de la alona en la planta.

Se puede observar tambin en los resultados de las tablas 5 y 6 que la

concentracin total de antraquinonas en las hojas cultivadas en Montenegro
(Quindo) es superior al

contenido total de antraquinonas en las hojas

cultivadas en Combia, (diferencia de promedios: 0.353%). Estas diferencias

estn directamente relacionadas con las caractersticas fisicoqumicas de los
suelos; el suelo de Montenegro (Quindo) es mas rico en potasio, calcio y

- 52 -

fsforo; minerales indispensables para el crecimiento y desarrollo de

metabolitos secundarios en la planta, [7 y 30].

Segn la desviacin estndar de los valores de concentracin obtenidos en la

cuantificacin de antraquinonas en las tres partes de la planta (corteza, gel y
ltex), el grado de dispersin de los resultados obtenidos es bajo; esto indica

que los datos estn agrupados cerca a la media. Por tanto, la

reproducibilidad del mtodo de anlisis usado es confiable. Es muy
importante tener una desviacin estndar baja en un mtodo que se acaba
de implementar, ya que asegura que el mtodo usado es confiable y podra
ser aceptado por el INVIMA para prestar el servicio de cuantificacin de
alona, barbalona o productos hidroxiantracnicos en gel de sbila o
productos derivados, despus de ser estandarizado.

8.3 APLICACIONES Y/O POTENCIALES USOS DE DE LAS PARTES DE LA

PLANTA (CORTEZA, LTEX Y MUCLAGO) DE ACUERDO AL CONTENIDO
DE ANTRAQUINONAS

8.3.1 APLICACIONES Y/O POTENCIALES USOS DEL MUCLAGO

El muclago de las hojas cultivadas en Montenegro es pobre en antraquinonas,
lo cual lo hace ideal para la preparacin de bebidas o alimentos slidos que
presentan propiedades benficas debido a su buena accin reguladora del
sistema digestivo; se debe aclarar que para esto se debe lavar exhaustivamente
para reducir hasta los lmites permitidos por la ley el contenido de
antraquinonas txicas y laxantes que se encuentran en los productos
terminados y aprovechar la gran cantidad de glucsidos medicinales presentes
en este (glucomanano), [25].
El muclago de las hojas cultivadas en Combia esta enriquecido en
antraquinonas lo cual lo limita altamente para la preparacin de productos para
consumo humano; pero igualmente sigue siendo til para la preparacin de otro
- 53 -

tipo de productos cosmticos y medicinales tpicos. Puede ser usado como

antiinflamatorio y como un poderoso cicatrizante del tejido epitelial, debido a la
actividad de sus aminocidos que estimulan la produccin de nuevas clulas y
a la habilidad de sus enzimas para promover la regeneracin de la piel, [5 y 14].
Puede ser usado en el tratamiento de heridas, quemaduras e irritaciones en la
piel en general, usando la planta como tal o algn preparado, [2, 5, 15 y 16].

Tiene extensa aplicacin en la industria cosmtica donde es considerado como

un emoliente efectivo, tanto para la piel como para el cabello, [5, 17 y 18].
Puede ser til adems, en el campo de la medicina veterinaria. El extracto del
gel ha sido usado en el tratamiento de muchos animales en casos externos
tales como alergias, abscesos, infecciones por hongos, varios tipos de
inflamaciones, dolores y comezn, [5, 19 y 20]. Cuando el muclago es tomado
oralmente, algunos de los azcares presentes se unen a sitios receptores
recubriendo el intestino; esto posiblemente ayuda a prevenir el sndrome de
intestino agujerado. Otros son ingeridos enteros por un mtodo de absorcin
celular conocido como pinocitosis.

A diferencia de otros azcares que se

descomponen antes de su absorcin, los polisacridos son absorbidos

completos y aparecen en el torrente sanguneo sin ningn cambio. All, ellos
actan como inmuno-moduladores capaces de aumentar y retardar la respuesta
inmunolgica, [8].

8.3.2 APLICACIONES Y/O POTENCIALES USOS DEL LTEX

Sin importar la regin en la que se cultiven las hojas de A. vera, el ltex rico en
antraquinonas puede ser utilizado en la preparacin de purgantes y
medicamentos dermatolgicos cicatrizantes, [2 y 21]. Este ltex se condensa y
deseca para obtener una masa cerosa quebradiza, de color oscuro entre
marrn rojizo y negro, que apelmazado y en forma de terrones similares al barro
seco recibe el nombre de acbar. Pulverizado es incorporado a preparados
farmacuticos laxantes, [25].

Se propone realizar estudios de actividad

- 54 -

biolgica a este ltex enriquecido en alona; ya que en investigaciones

precedentes, se ha comprobado el efecto de diferentes antraquinonas naturales
y compuestos similares sobre diversos virus, tales como: Herpes simplex tipos 1
y 2, varicela zoster, pseudorrabia, influenza, HIV-1. Dichos productos son
aislados con solventes orgnicos como acetona, acetato de etilo, metanol y
glicerina caliente. Uno de estos componentes, la aloemodina, result activa
contra una gran variedad de virus. Sobre la base de toda la informacin
acopiada se plantea que las antraquinonas actan directamente sobre los virus
envueltos (virus de la influenza), lo que trae como resultado la prevencin de la
adsorcin del virus y su consecuente replicacin, [34].

- 55 -

9. CONCLUSIONES

Se logr implementar una metodologa espectrofotomtrica que permiti

cuantificar el contenido de antraquinonas en las diferentes partes de la
planta de Aloe vera mediante la obtencin de derivados y una lectura a una
longitud de onda de 495 nm. Se obtuvieron desviaciones estndar menores
a 0.1 lo que indica que el mtodo usado y los resultados obtenidos son
reproducibles y confiables.

El rendimiento del muclago de las plantas de Aloe vera cultivadas en el

corregimiento de Combia (Risaralda) es de 68.71% % y el contenido
promedio de antraquinonas expresado como porcentaje de alona en la
corteza, muclago y ltex fue de 0.525%, 0.228% y 1.14% respectivamente.
Mientras el rendimiento del gel de las plantas cultivadas en el municipio de
Montenegro (Quindo) fue del 67,73 y la concentracin promedio de
antraquinonas en la corteza, muclago y ltex de estas hojas fue de 0,581%,
0,091% y 1,58% respectivamente.
Las antraquinonas presentes en las hojas cultivadas en Montenegro son ms
abundantes en el ltex (18.0% de antraquinonas en el ltex por cada 1% de
antraquinonas en el gel). Mientras que en las hojas cultivadas en Combia
estas se encuentran repartidas entre el ltex y el muclago (5.08% de
antraquinonas en el ltex por cada 1% de antraquinonas en el gel).

- 56 -

10. RECOMENDACIONES

Establecer el protocolo de la determinacin de antraquinonas de Aloe vera

como venta de servicio a los cultivadores y comercializadores de la planta y
sus derivados.

Realizar anlisis de los extractos obtenidos con otro tipo de tcnicas

cualitativas y cuantitativas ms sensibles (cromatografa lquida de alta
eficiencia, espectrofotometra de masas, entre otras) que permitan comparar
la eficacia del mtodo usado.
Realizar estudios de actividad biolgica al ltex enriquecido.

- 57 -

11. BIBLIOGRAFA

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