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 En la naturaleza los microorganismos crecen en

poblaciones mixtas y complejas, que contienen varias


especies

Siembra y aislamiento
Curso de Microbiologa 2010 Facultad de
Agronoma

 Para estudiar un microorganismo en el laboratorio se

requiere tener un cultivo puro, es decir, con un solo


tipo de microorganismo.

Prctico 3

Tcnica asptica

 Tcnica asptica: tcnica usada para evitar la

contaminacin durante la manipulacin de


cultivos y de medios de cultivos

Siembra


Es la incorporacin a un medio de cultivo de una muestra


(inculo), con propsitos cuantitativos o cualitativos

Los propsitos de la siembra pueden ser: obtener un nuevo cultivo


fresco, determinar alguna propiedad del microorganismo u
obtener un cultivo puro (AISLAMIENTO)

Siembra en placa:
 Por estra
 Por inclusin
 Por extensin o baado

Siembra en tubos:
Con agar inclinado
Con medio slido horizontal
 Con medio semislido
 Con medio lquido



a.

El ansa se calienta hasta la


incandescencia y se enfra al aire,
cerca del mechero

b.

El tubo se destapa cerca del mechero

c.

Se flamea el extremo del tubo por la


llama

d.

Se extrae la muestra con el ansa


esterilizada

e.

Tras tomar la muestra, se vuelve a


flamear el extremo del tubo y la
muestra se deposita en un medio
estril

f.

Se vuelve a tapar el tubo. El ansa se


recalienta de nuevo antes de finalizar
su utilizacin

Repiques
 Objetivo: hacer crecer el microorganismo en un medio de

cultivo dado para conocer su metabolismo, su produccin


de pigmentos o simplemente conservarlo
 Transferencia de cultivos microbianos de medio slido a
slido, de medio slido a medio lquido, de medio lquido
a lquido y de medio lquido a medio slido

Ejemplo de siembra en tubos

Aislamiento
Objetivo: obtener un cultivo puro de un
microorganismo a partir de un cultivo mixto
Mtodos:
Directoestras,
inclusin o
baado
Indirecto- enriquecimiento previo

Aislamiento por agotamiento


Siembra por estra

Aislamiento por dilucin


Siembra en inclusin

 Se inocula la muestra sobre un extremo de la placa con

un ansa y se extiende formando estras sobre la


superficie en varios sentidos, cada clula aislada se
multiplicar formando una colonia independiente, cada
colonia representa un cultivo puro.

Aislamiento por dilucin


Siembra por extensin o baado
 Se extiende el inculo uniformemente con una varilla

acodada estril por la superficie del medio de cultivo.


Las clulas diseminadas sobre la superficie formarn
colonias aisladas

Enriquecimiento
 Permite aislar microorganismos que se encuentran en bajo

nmero en una muestra compleja (ejemplo: suelo, leche,


agua)
 Los mtodos de siembra pueden combinarse con el uso de
medios selectivos o diferenciales para enriquecer y aislar
microorganismos poco frecuentes

1er paso: enriquecimiento en


lquido

2 paso: siembra en slido

Todo aislamiento concluye con la


obtencin de colonias aisladas
 Pueden ser de forma y tamao variable dependiendo

del organismo, las condiciones de cultivo, suministro


de nutrientes y otros parmetros fisiolgicos.

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