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(DumpyPlum)
DE
DROSOPHILA
MELANOGASTER
1
1
1
PaolaArias
MarioRodriguez
AngelaTrujillo
EstudiantedelaUniversidadNacionaldeColombiaSedeBogot.FacultaddeCiencias.
DepartamentodeBiologa.
RESUMEN
El presente documento es un adelanto del trabajo experimental enelquese buscaobtener
organismosquepresentenunadoblemutacin,enestecasoDumpyPlum.
Se trabaja con
Drosophila Melanogaster
, dado que es un excelente modelo de estudio en
gentica su rpidareproduccinnospermiteobtenern
uevasgeneracionesenpocotiempo,
muchos individuos por generacin y adems ocupan muy poco espacio y se pueden criar
enelmismolaboratorio.
INTRODUCCIN
Drosophila melanogaste
r es un insecto del orden diptera, el cual ha funcionado como
modelo para experimentos genticos. Es un organismo diploide que posee cuatroparesde
cromosomas, un par de cromosomas sexualesX/Yytrespares deautosomas II,IIIyIV.Al
igual que en los mamferos , las hembras de
Drosophila son XX y los machos son XY sin
embargo el mecanismo de determinacin del sexo es muy diferente en Drosophila, el
nmero de cromosomas X es el que determina el sexo: dos cromosomas X dan como
resultadounahembrayuncromosomaXunmacho(Matta,2010).
Alserunorganismoholometbolo,Drosophilaocupadoshbitatsmuydiferentesdurantesu
ciclo de vida, el cual incluye cuatro estados de desarrollo:huevo, larva, pupa y adulto. El
ciclo de vida de Drosophila vara inversamente proporcional a la temperaturaesdecirque
amenortemperaturamayorduracin(Matta,2010).
La mosca de la fruta
,
presenta una serie de caractersticas que la hacen un excelente
material biolgico para ser utilizada como modelo experimental, como ya se mencion con
anterioridad, posee un reducido nmero de cromosomas(4pares)(Matta,2010), tieneun
ciclo de vida muy corto, distincin clara entre cada una de sus fases de desarrollo, gran
cantidad de descendientes, su mantenimiento requiere de corto espacio y es de costo
reducido
.
Los alelos dp
tienen efectos variables en la longitud y forma de las alasyenlacutculadel
trax. El efecto que se presenta en las alas es un truncamiento oblicuo que influye
principalmente el margen inferior de las alas, directamente sobre las clulas posteriores
(Matta,2010).
Por otro lado la mutacin Plum, es una mutacin de carcter dominante situado en la
posicin 104.5 del cromosoma dos. Se caracteriza porque la expresin fenotpica que la
mosca presenta es de unos ojos de coloracin casi prpura. Esta mutacin es letal en
estadorecesivo.
METODOLOGA
LaobtencindeldoblemutantePlumDumpyrequieredeunconocimientototaldelas
caractersticasdedichasmutacionesylomsbsicoconocersugenotipo,siesdominante
orecesiva,porestaraznenlaliteraturasehaencontradolainformacinnecesariapara
DumpyylosdatosdePlumesuntantoconfusayaquesepuedecatalogarcomouna
mutacinheterocigotaenalgunoscasos,recesivaenotrosyletalenestadorecesivo.Dicho
estolametodologausadahastaelmomentoes:
1. empaparsedetodaslascaractersticaseinformacindelosdosmutantesascomo
delosconceptosgenticos.
2. separacindehembrasvrgenesparacrucescontrolados,estaextraccinserealiza
aislandopupasylarvasdelosmediosoriginalesymonitoreandoelmomentoenque
eclosionenlosimagosparaserseparadosporsexosyevitarloscrucesaccidentales.
3. realizaruncrucedepruebaentreindividuosdelacepapuraPlumyalgunasmoscas
silvestresparaestablecerenlaprcticaelfenotipoconelquecuentanlasmoscas
trabajadasybasadosenestopoderestablecerloscrucesquedebemosrealizarpara
obtenereldoblemutante.Paratenermayorexactitudserealizauncruceentrelos
miembrosplumdelaF1.
4. realizarelconteoydeterminarproporcionesyeltipodegenotipoPlum.
Lametodologaqueseusarparaencontraraeldoblemutanteser:
1. realizaruncruceentreindividuosdompyyplumsinimportarelgneroyaque
ningunadelasdosmutacionesestligadaalsexo
2. contarlosindividuosdelaF1observarlosfenotiposysuponerlosgenotipos
3. cruzarindividuosdelaF1queposeanlascaractersticasquesehanplaneadoenlos
cuadrosdepunnetpropuestos(verresultadosydiscusin)
4. Aestaalturasyaseobtieneeldoblemutante,contarlosindividuosyversi
correspondenalasesperadas
5. repetirelprocesoparareproducirlaobtencindeldoblemutante.
RESULTADOSYDISCUSIN
Segn los resultados del cruce de prueba para Plum (Pm) en elcualseobtuvolamutacin
en unaproporcinde20/71= 0.2816sededucequeelestadodelasmoscasPlumdadasen
claseesheterocigotoylamutacinesdominanteperoletalenhomocigosis.
Para la mutacin Dumpy (Dp) se sabe que es autosmica recesiva. con lo anterior se
realiza el primer cruce entre una mosca Plum (heterocigota) y una Dumpy (homocigota
recesiva)contreshembrasDumpyydosmachosPlum.
F1
+
+
+
PmPmDp
Dp
xPm
PmDpDp
+
Pm
Pm
Pm
+
Pm
Pm
PmPm
Pm
+
Pm
Pm
PmPm
ProporcionesdeFenotpicas:Plum=,Silvestre=.
+
ProporcionesdeGenotpicas:(Pm
Pm)=,(PmPm)=.
Dp
Dp
+
Dp
+
Dp
Dp
+
Dp
Dp
+
Dp
+
Dp
Dp
+
Dp
Dp
ProporcionesdeFenotpicas:Silvestre=1
+
ProporcionesdeGenotpicas:(Dp
Dp)=1
F2
Para la F2 se toman las moscas con fenotipo Plum obtenidas del cruce ya que a pesar de
no expresar el fenotipo Dumpy son heterocigotas para dicho alelo y debera obtenerse el
Homocigotorecesivo(DpDp)alcruzarseentres.
+
+
+
+
Pm
PmDp
DpxPm
PmDp
Dp
+
Pm
Pm
+
Pm
+
+
Pm
Pm
+
Pm
Pm
Pm
+
Pm
Pm
PmPm
ProporcionesdeFenotpicas:Silvestre=,Plum=.
+
+
+
ProporcionesdeGenotpicas:(Pm
Pm)=,(
Pm
Pm
)=,(PmPm)=0(sepierdepor
letalidadenHomocigosis)
+
Dp
Dp
+
Dp
+ +
Dp
Dp
+
Dp
Dp
Dp
+
Dp
Dp
DpDp
ProporcionesdeFenotpicas:Silvestre=,Dumpy=.
+ +
+
ProporcionesdeGenotpicas:(Dp
Dp
)=,(Dp
Dp)=,(DpDp)=.
+
+ +
Probabilidaddeobtencindeldoblemutante(Pm
PmDp
Dp)=(2/3)(1/4)=2/12=
1/6
F3
+
+ +
Ya habindose obtenido el fenotipo deseado Plum/Dumpy (Pm
Pm Dp
Dp) se puede
realizar un nuevo cruce entre los mismos para aumentar la probabilidad de obtencin del
doblemutante.
+
+ +
+
+ +
Pm
PmDp
DpxPm
PmDp
Dp
+
Pm
Pm
+
Pm
+
+
Pm
Pm
+
Pm
Pm
Pm
+
Pm
Pm
PmPm
ProporcionesdeFenotpicas:Silvestre=,Plum=.
+
+
+
ProporcionesdeGenotpicas:(Pm
Pm)=,(
Pm
Pm
)=,(PmPm)=0(sepierdepor
letalidadenHomocigosis)
+
Dp
+
Dp
+
Dp
+ +
Dp
Dp
+
+
Dp
Dp
+
Dp
+ +
Dp
Dp
+
+
Dp
Dp
ProporcionesdeFenotpicas:Dumpy=1
+ +
ProporcionesdeGenotpicas:(Dp
Dp)=1
+
+ +
Probabilidaddeobtencindeldoblemutante(Pm
PmDp
Dp)=(2/3)(1)=
.
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFA
MattaC.NubiaE.Lamoscadelafruta:Drosophilamelanogastercomoorganismomodelo
engentica.UniversidadNacionaldeColombia.2010.