UNIVERSIDAD PRIVADA

ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

TEMA: CUANTIFICACION DE GLUCOSA Y GLUCOGENO EN EL
HIGADO DE UN COBAYO

CURSO: Bioqumica
NOMBRE: Vivar Balczar Adriana Lizbeth
CICLO: II
PROFESOR:
Prof. Cecilia Bardales
TURNO:
Martes 7:00 9:40 am

2015

20

I.

INTRODUCCION:
La Glucosa es un azcar que es utilizado por los tejidos como forma
de energa al combinarlo con el oxgeno de la respiracin. Cuando
comemos el azcar en la sangre se eleva, lo que se consume
desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que
es la insulina producida por el pncreas (islotes pancreticos). Esta
hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea
utilizada en forma de glucgeno, aminocidos, y cidos grasos.
Cuando la glucosa en sangre est muy baja, en condiciones
normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagn
que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre.
El tejido ms sensible a los cambios de la glucemia es el cerebro, en
concentraciones muy bajas o muy altas aparecen sntomas de
confusin mental e inconsciencia.
El glucgeno es la forma principal de almacenaje de carbohidratos
en los animales, se encuentra en proporcin mayor en el hgado
(hasta 6%) y en el msculo, donde rara vez excede de 1%. Sin
embargo, debido a su masa mayor, el msculo almacena tres a
cuatro veces la cantidad de glucgeno que tiene el hgado como
reserva. Al igual que el almidn, es un polmero ramificado de alfaglucosa.
En las clulas hepticas, el glucgeno aparece en forma de grandes
grnulos, constituidos por agrupaciones de simples molculas, muy
ramificadas, por lo que tiene un peso molecular muy elevado. A
semejanza de la amilopectina, el glucgeno es un polisacrido de la
D-glucosa con enlaces alfa 1-4, sin embargo, est ms ramificado, y
su molcula es ms reducida que la amilopectina; las ramificaciones
aparecen cada 8 a 12 residuos de glucosa.

II.

OBJETIVOS:

Determinar glucosa en el hgado y conocer su importancia en

el organismo.

Determinar el glucgeno en el hgado y conocer su

importancia en el organismo

III.

MATERIALES

IV.

Mortero
Pinza de madera y metal
mechero
2 gradillas
Pipetas
Placa petri
Higado de cobayo
Reactivo: lugol, fehling, Krebs
Acido tricloroactico

PROCEDIMIENTO
1. Sacrificamos un cobayo. Extrajimos el hgado y cortamos en trozo
de aproximadamente 1 cm y colocamos en suero tisiolgico a
0C.
2. Marcamos 3 tubos de ensayo con 0 min, 20 min, 40 min:
colocamos en cada uno de ellos 3 mL de solucin de Krebs y
colocamos 3 a 4 cortes de hgado en cada tubo
3. Extrajimos de inmediato los cortes de hgado del tubo 0 min y
colocamos en un mortero con 4 mL de cido tricloroactico,
molimos bien y centrifugamos por 5 min a 3500 rpm. Al
sobrenadante lo pasamos a un tubo limpio.
4. A los de 20 y 40 min de incubacin, repetimos el procedimiento
con los cortes de hgado de los tubos 30 mm y 60 mm
respectivamente.
5. Para obtener el glucgeno, preparamos el siguiente sistema:

Sobrenadant
e
cido TCA
Lugol 1:30

0 min

20 min

40 min

Control

1 mL

1mL

1 mL

-----

-----

-----

-----

1 mL

0,5 mL

0,5 mL

0,5 mL

0,5 mL

6. Agitamos los tubos. Observamos la coloracin de los tubos y

anotamos considerando la mayor turbidez como mayor presencia
de glucgeno.
7. Para obtener la glucosa rotulamos tres tubos de ensayo con 0,
20, 40.
8. Agregamos a cada uno 2 mL de lquido de incubacin. Aadimos
a cada uno 2 mL de Reactivo de Fehling.
9. Utilizando las pinzas, calentamos los tres tubos al mechero por 2
a 3 min, observamos el color que adquiere el lquido y la aparicin
de un precipitado rojizo, anotamos los cambios en cuadro.

V.

RESULTADOS
Coloracin

Tubo 0

Precipitado rojo
ladrillo
(+)

Tubo 20

Rojo ladrillo leve

(++)

Tubo 40

Rojo ladrillo intenso

(+++)

Turbidez

Tubo 0

Mas turbio
(+++)

Tubo 20

Turbio
(++)

Tubo 40

Menos turbio
(+)

VI.

DISCUSIN
Para poder desarrollar este experimento, la preparacin fue desde
mucho antes de sacrificar al cobayo, comenz con alimentarlo y
hacer que su hgado almacene glucgeno.
Llegado el momento de sacrificarlo, el animal al sentirse amenazado,
su organismo comenz a producir adrenalina y este neurotransmisor
estimula la enzima glucgeno fosforilasa para que degrade el
glucgeno, pero al ponerlo en hielo paramos un poco la reaccin.
Al incubarlo esperamos que la enzima siga su accin degradando al
glucgeno para convertirlo en glucosa. Esta glucosa sale al torrente
sanguneo en el organismo pero en este caso sale hacia la solucin
de Krebs y con el mtodo de fehling buscamos glucosa
evidencindola con precipitado color rojo ladrillo. Comparando los
resultados vemos que la coloracin que tomaron los primeros tubos y
observamos que el color rojo ladrillo se va acentuando a mayor fue el
tiempo de incubacin, o sea mayor tiempo de degradacin.
En caso del glucgeno, los pedazos de hgado los sumergimos en el
cido tricloroactico deteniendo la degradacin y por ltimo en el
mortero rompiendo las clulas en busca de glucgeno que an
queda,
se evidencia cuanto mayor sea el grado de turbidez del
sobrenadante.
Encontrando ms presencia de glucogeno en el tubo con menor
tiempo de incubacin.

VII.

VIII.

CONCLUSIONES
-

Normalmente, el nivel de glucosa en sangre se mantienen dentro

de lmites estrechos a lo largo del da (72-145 mg/dl; 4-8 mmol/l).
Sin embargo, sube despus de las comidas y es ms bajo por la
maana antes del desayuno.

Las principales reservas de glucgeno de los vertebrados se

encuentran en el msculo esqueltico y en el hgado. La
degradacin de estas reservas en energa utilizable, o
movilizacin del glucgeno, requiere las rupturas fosforolticas
secuenciales de los enlaces alfa 1-4, catalizadas por la glucgeno
fosforilasa.

BIBLIOGRAFIA