AISLAMIENTO Y SELECCION DE LEVADURA PRODUCTORES DE ETANOL.

1. INTRODUCCION:
La produccin de alcohol a partir de sustratos azucarados o amilceos se
conoce desde tiempos inmemorables. El etanol a partir de cultivos agrcolas
bioetanol es de inters a causa de la naturaleza renovable de las materias
primas (Zuzuarregui, 2005).
Las levaduras estn ampliamente distribuidos en la naturaleza, sus hbitats
puede ser no solo las capas superiores del suelo, sino tambin muchas
materias orgnicas, sobre todo los de origen vegetal que contienen hidratos
de carbono, tambin se pueden aislar del suelo de viedos y huertos,
superficies de frutas dulces como uvas, manzanas, limn, etc., de las hojas
y otras partes de la planta, asimismo, se puede aislar de las frutas y
verduras, en los que se producen la fermentacin del azcar con
desprendimiento de CO2 y liberacin de etanol (Prescott, et al 1962).
Los sustratos o materias primas ms usadas son el de la caa de azcar y la
remolacha azucarera, sin embargo se le puede producir a partir de una gran
variedad de sustratos azucarados o amilceos, principalmente granos y
cereales (Vzquez, 2004).
Los

procesos

de

fermentacin

requieren

en

general

una serie

de

operaciones unitarias cuyo objetivo es la conversin de un sustrato dado

(fuente de carbono) en un producto final, utilizando un microorganismo
como catalizador. Estas operaciones unitarias pretenden tanto el cubrir los
requerimientos nutritivos necesarios para el crecimiento y la formacin de
productos, como el control del medio ambiente para la optimizacin del
proceso (Frazier, et al 1985).
El proceso de produccin y excrecin de etanol, as como los factores que lo
regulen, estn por ser aclarados con el conocimiento de los aspectos
fisiolgicos y genticos en la produccin de etanol por las clulas de
levaduras (Mossel, et al 2006).

Sacharomyces cerevisae es la levadura ms utilizada en dicho proceso; sin

embargo, existen diferencias entre las especies y las cepas respecto a las
condiciones en que logran su mayor rendimiento; se considera que para ello
la cepa debe tener buena velocidad de fermentacin y deber ser tolerante
a elevadas concentraciones de glucosa y de etanol (Mossel, et al 2006).
La presente practica tiene como objetivo la determinacin y aislamiento de
una variedad de Sacharomyces cerevisae, levadura productora de etanol.
2. MATERIAL Y MTODOS:
Material biolgico.
Medio litro de jugo de Chicha de Jora del mercado Mayorista de TrujilloPer.
Recoleccin y transporte de la muestra.
Las muestras se tomaron haciendo uso de botellas plsticas descartables
desinfectadas con agua clorada y manteniendo las condiciones de asepsia
en todo momento y fueron rotulados con la fecha, hora y condiciones de
muestreo; inmediatamente despus, se mantuvieron en refrigeracin hasta
que se aplicaron las tcnicas de aislamiento de levaduras productoras de
etanol, descritos ms adelante.
Aislamiento de las levaduras productoras de etanol.
El aislamiento de las levaduras se realiz por la tcnica del agotamiento de
muestra por estriado en placa petri servida con Agar Saboudarud
Sacarosado al 4% (ASS) e incubado a 24 3C por 5 das.
Las colonias que se mostraron como tpicas de levaduras y estuvieron libres
de contaminantes, se seleccionaron, anotndoles sus caractersticas y se
les asign un cdigo.
Obtencin de cultivos puros de levaduras productoras de etanol.
Cada colonia de levaduras seleccionada en el paso anterior, se analizaron al
microscopio a las cuales se les hizo una observacin en fresco finalmente

identificando la variedad de Sacharomyces cerevisae encontrada en dicha

levadura.

3. RESULTADOS:

Fig.1. Colonias sembradas por la tcnica de agotamiento obtenidas de

la muestra chicha de jora.

Fig.2. Vista al microscopio de Sacharomyces cerevisae obtenida

de la muestra de chicha de jora.

4. DISCUSIN:

Los resultados de aislamiento muestran que se obtuvo Sacharomyces

cerevisae a partir de chicha de jora indicando que los sustratos azucarados
como lo es la chicha de jora al llevar un proceso de fermentacin se puede
obtener etanol.
Existen estudios que indican que algunas levaduras pueden utilizar
parcialmente la hemicelulosa proveniente del buchn de agua hidrolizada
con cido sulfrico en medio lquido (Snchez, et al 2010).
En

los

ambientes

acuticos

se

encuentran

una

gran

variedad

de

microorganismos, la densidad y el tipo de microorganismo se relaciona con

el estado trfico y las caractersticas fisicoqumicas del agua (Riberau,
1998), sin embargo, en este estudio estos factores no tuvieron incidencia en
el nmero de aislamientos de levaduras, ya que se present un patrn
similar de recuperacin de cepas en los diferentes puntos de muestreo.
5. CONCLUSION:
De la prctica se puede concluir que se cumpli con el objetivo de
determinar y aislar Sacharomyces cerevisae, levadura productora de etanol;
obteniendo como resultados una variedad Uvarum, estos resultados fueron
constatados

utilizando

un

preparado

en

fresco

con

ayuda

de

un

microscopio.
6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
Prescott C, Dunn G. 1962. Microbiologa Industrial. 3 ed. Espaa: Edit.
Aguilar. SA.
Mossel D, Moreno B, Struijk CB. 2006. Microbiologa de los alimentos. 2da
ed. Espaa: Edit. Acribia SA.
Snchez, M. L.; Sfreddo, E.; Paladino, S.; Maza, M.; Formento, J.C.; Farrando,
S.; Bernardi, M.; Vargas, E. 2010. Creacin de un cepario de levaduras
vnicas. Revista Argentina de Microbiologa. Supl. 1. Vol. 42, pg. 195.
Riberau, P. 1998. Tratado de enologa. Tomo 1 Microbiologa del vino.
Vinificaciones. Ed. Mundi-Prensa. Madrid. Espaa. 655 p.

Frazier C, Westhoff D. 1985. Microbiologa de los Alimentos. 2da ed. Espaa:

Edit. Acribia.
Vazquez, F. 2004. Seleccin de cepas de levaduras autctonas para
vinificacin. El vino y su industria. Ao 3, N. 17, p 32-39.
Zuzuarregui, A. 2005. Caracterizacin fisiolgica y molecular de cepas
vnicas de Saccharomyces sp. Influencia en su comportamiento durante la
vinificacin. Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular. UNIVERSITAT
DE VALENCIA Servei de Publicacions, 202 p.