t r COLEGIO NACIONAL DE QUIMICOS FARMACEUTICOS BIOLOGOS, A.C. Métodos Analiticos Guta vE-Vatipacion —— ee COMISIDN DE VALIDACION | DE MeTones awauitiCos | a. Araceli Garcia | Evelyn Soberdn Myriam Cortés | Ramén Rodriguez | José Luis Herrera Alejandro Alcantara reir egtee ‘TAMBIEN COLABORAROK: | Amparo Charvel | Rosalinda Mota | Alfreds GarzinCRI eee eae errr PROLOGO * LAVALIDACION DE METODOS ANALITICOS es parte fundamental del desarrollo de una nuevg formulacion y de la técnica de analisis de control de calidad de una forma farmacéutica, ya que es durante esta secuencia de pruebas y andlisis, en donde el quimico se da cuenta si el estudio, el cual esta siendo evaluado sistematicamente, curmple con los propésites para los cuales fue disefiado, De acuerdo a las Buenas Practicas tanto de Fabricacién como de Laboratorio, es necesario que todos los métodos analiticos que empleamos estén validados. Bajo este marco y considerando a la validacion de métodos anatiticos como el proceso por el cual queda establecido, por estudios de laboratorio, que la capacidad de! método satisface los requisites para las aplicaciones anaiiticas deseadas, ei Colegio Nacional de Quimicos Farmacéuticos Bidlogos México,..A.C. vve con agrado, como uno de sus primeros frutos ediloriales, sigue siendo hoy una herramienta «iil para el entomno laboral analitico en la industria farmacéutica ‘Sin embargo, considerande tanto el avance cientifica y tecnolbgice de los titimos aos, como los valores que nos rigen y nuestia biisqueda constante de la excelencia, han hecho posible nuevamente que presentemos ante ustedes esta versién actualizada de la Guia de Validacidn de Métodos Analiticos, de manera lal, que salisfaga sus necesidades laborales presentes al dia de hoy, vu_G_rV El proposito principal es unificar criterios entre los profesionistas y hacer mas facil y productive el trabajo de todos los que de alguna manera, estamos invotucrados en este tipo de actividades, . No me resta mas que recomendarles ampliamente este trabajo, realizado por un grupo de expertos en el drea, quienes de manera honorifica han decidido colaborary retibuira su gremio a través de esta publicacion. Sin duga alguna, nuestra instiucion les esta entormemente ‘agradecida pot'Slis valiosas apatiaciones. © A\ dia de hoy y ante las perspectivas mundiales, las exigencias de competitvidad son muchas, debemos estar preparados para ello, las cuestiones regulatorias y de armonizacién nos obligan 2 empatar nuestros conocimientos, en este caso, analilicos en pro de un resultado de calidad. Sirva pues, esta guia para tal objetivo Atentamente, "Por la Unidad y lo Excelencia QFB. José Manuel Cardenas Presidente Colegio Necional de Quimices Farmaceuticos Bioleges México. A.C. PRrovoco eSe eee eerry z pag ; 1. Prologo (Introducciény. 2 | 2. hie campo de ate 4 2 antics 4. Detniciones Simbolos y Abreviaturas 5. ‘acidn de Métodos Analiticos ‘0s de Desempefio. & _Delerminaciones, metocotogia y criterios de aceplacion 9. Sustancias de referencia 40 10. Revaliacion a4 11. Comparacton de 2 Métodos Analiticos 4a 12. Documentacién at Z 7 a gin BORE ER pes ogowe i 4 - & “13. Coneordancia'con Guias interna toni, : 82 14. Bibliogratia Ey 15. Anexos 55= 1. CPS ee ee ee eee PROLOGO EN MUCHAS SITUACIONES, cuando se tiene interés en miedir un componente en una muestra, es necesario contar con una metodologia de medicion (método anatitico). Por ello, as empresas de transformacion (principaimente farmacéuticas) requieren de este tipo de metedologias, pudiendo utiizar metodologias farmacopeicas bien, dedicar tiempo para su desarrollo, partiendo del hecho de que deben clmplic 01 atributo de confiabilidad. Como en muchas de las actividades de la industria farmacéutica se haco uso del método cientifico para aleanzar este alributo, os necesario llevar 3 cabo en la mayoria de las ocasiones estudios experimeniales aue permitan demostrar la confiabilidad dé lo que se est’ midiendo. Un proceso ‘que permite cumplir este fin, es 1a validacién, 3 Como es bien sabido, todo producto farmacéutico debe reunir atributos Ge identidad, pureza, conceniracisn, potencia, inocuidad y disponibilidad para Cumplir con los aspectos normativos oficiales e intemos y no menos importantes, {08 éticos, por lo que si un método anaitico, que finalmente es el medidor de las Ceracteristicas erticas de calidad de! producto, no es confiable. se corre el grave "iesgo de afectar al usuario final que es un paciente. iy’ sDesde este enfoque, Ja validacign de métodos analiicgs es un sistemas: iwoluerado on los procescs de fabricacidn en el 4rea de calidad de la empresa y bajo fa flosofia de la Validacién, tas Autoridades Regulalorias verifican que las empresas sustenten estos sistemas con actividades documentadas, como se in- Gica en ta NOM-059 SSA‘ numerales 5.6.3, 5.7.4, 9.11.3, 9.44.5 y 9.12.3 y on otros lineamientos regulatorios irfternacionales, El objetivo final de un dictamen de calidad, es la liberacién 9 no Nberacion de un producto sobre la base de las especificaciones previamente establecidas. Esta decision es tomada generalmente por el profesional farmaceutico, en gran medida ests dada por los resultados obtenidos al aplicar un© 9 diversos métodos analiticas; si estos no son farmacopeicos y no estan validados, su dacisién corre el riesgo de ser erténea y afectar al usuario de! Iu rRoouccion. 2 es aryGuia_pe VaALiDAciON DE Métovo Awavitico producto y por ende, a la misma empresa. La validaci6n fe proporciona, a quien aplica la ritolodologia, una seguridad de la confiabilidad de dictios métodos y puede tomar la decision final con certeza. La validacidn de métodos analiticos también impacta en otras areas relacionadas a la calidad de un producto (estabilidad, limpieza de equipos, entre otras). Hasta este momento, las empresas que han implantado esta actividad iniciaimente se orientaron con fa Guia de Validacién de Métodos Analiticos publicada por el Colegio Nacional de Quimicos Farmacéuticos Bidlogos - México, AAC. y avalada por la Secretaria de Salud hace mas de una década. En su momento, esta Guia cubrié las necesidades que por Ia corriente de Validacion hablan empezado a surgir en la mayoria de las empresas; con el tiempo, por necesidades propias de fa validacién de procesos. la validacién de métodos se especializé al grado de convertirse en una actividad independientemente regulada. Con los avances tecnologices, aplicaciones de nuevas téenicas, tcalamiento diferente de las muestras, etc., el Colegio Nacional de Quimicos Farmacéuticos Bidlogos - México. A.C., ha visualizado la necesidad de publicar una nueva edicién de esta guia. No se puede pasar por alto el hecho de que ol factor mas importante durante la validacion de todo método analilico es siempre el criterio del profesional responsable de esta decision, criterio que es necesatio aplicar despues de tomar fen cuenta todos los factores relacionados con el, 0 10s principios activos. ‘oncenivaciones, forma farmacéutica, tipo de muesira, método de analisis, propesito de la técnica analitica, insteymentacién, sustancias relacionadas, etc, estos requisitos constituyen Unicamente una guia para daralquimico un soporte técnico adecuado para resolver cada caso particular. oe saa Asi mismo, na hay que perder de vista que ésta es Unicamente una Guia donde se establecen los requisites minimos, que es necesario salisfacer con la Validaciéa y que no limita de ninguna manera el interés.que pudiera tener el profesionista para profundizar, de manera particular, en alguno o algunos de tos. temas involucrados. EI C.NQFB. agradece de manera muy especial a todas las personas que coladoraron en a preparacién, madificacion y actualizacion de esta Guia ya la Secretaria de Salud por su apayo y aceplacion de estos Requisitos Minimos para la Validacisn de Métodos Analiticos, ya que estamos seguros de que sera en. beneficio de la comunidad cientifica det pais. InrrRooucctom 3CRIME eer ed ee eee eee 2, OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACION : Establecer lineamientos generales minimos necesarios para llevar a cabo el proceso de validacian' de métodos analiticos en aquellos establecimientos dedicados a: | b) Fabrica © laboratorié de.medicamentos o productos biolégico’ para “uso humano; ¢) Laboratorio de control quimico biolégico, farmacéutico 0 de toxicalogia, para ef estudio y experimentacion de medicamentos y materias primas, con el objeto de establecer la validez de los métodos ! analiticos utiizados para el control analitico del producto. 4d) Laboratorio de contro! auxiliar de fa regulacién, 3. JUSTIFICACION 5 Un método analitico se define como la descripcion de la secuencia de actividades. recursos materiales y parémetros que se deben cumplir, para llevar a cabo el analisis de un componente especifico de la muestra. Un analito se define como un componente especifico en una muestra a medir en un analisis; por lo que un ‘método analitico mide un componente especifico (analito) en una muestra y como todo proceso de medicién, éste debe ser confiable para ser utllizado con un propésito definido. La validacion de métodos analiticos es el proceso por el cual se demuestra, por estudios de laboratorio, que la capacidad del método salisface los requisites para la aplicacion analitica deseada, es decir cumple con su propésito, Esta actividad puede ser justificada por los siguientes aspectos: Oosetivo y Campo oe Apticacton = 4CIE meee e tee ee Tr areanrr ys 3.1. Moral y ética. El profesional farmacéutico es el responsable de los procesos farmactuticos y por lo tanto dq la calidad de estos. Todo producto farmacéutico (materias primas, producto intermedio, producto a granel y producto terminado) debe satisfacer requisitos y para ello se utilizan métodos para medi componentes especificos en <1 producto, lo cual és llevado a cabo con métados analitcos. 4.2. Asequramiento de Calidad. Los métodes anaifticas estan definidos como un sistema crilico en el Aseguramiento de Calidad en una empresa farmacéutica, ya que impactan de manera directa en la calidad de un producto. 3. Econémica, La carrera de muchas empresas por aleanzar una productividad elevada a costos, menores, esta determinada, entre otros factores, al dictamen del producto en menor tiempo, utlizando métodos de prueba de menor costo, mantenimiento o tiempo de. ‘analisis entre otros. 3.4, Regulatoria La presente guia esta justificada con base en las siguientes referencias: Reglamento de Insumos para la Salud. Publicado en el Diario Oficial el 4 de Febrero de 1998 relerente a los establecimientos que se destinena la fabricacién de insumos (medicamentos, farmacos, materias primas y aditivos), establece lo siguiente, conrenrpe? © articuto ¥-e 15 Los estabiec! de insumos, levaran el control analtice de estes. Dicho Wentos que se destinen a la fabricacion contro! debers indir IIL La validacién de las teenicas empleadas. Norma Oficial Mexicana NOM-059-SSA1-1993, Buenas practicas de fabricacién para establecimientos de la industria quimico farmacéutica dedicados a la fabricacién de medicamentos, establece los siguientes puntos referentes a fa Validacién de Métodos Analiticos, sii Justiricacionhe 7 CXYearrm eter es re NUMERA’ L DE LA NORMA CONTENIDO 56 56.3 El encargado del rea de produccién se encargara de realizar las siguientes funciones, sin perjuicio de las obligaciones y responsabilidades que correspondan al responsable sanitario, conformie a la Ley General de Salud y al Regiamento de insumos para la Salud, Que se lleven a cabo estudios de validacién de los procesos de fabricacién y de los sistemas involucrados. { 87 | 874 El encargado del érea de calidad se encargard de realizar las, siguientes funciones, sin perjuicio de ias obligaciones y responsabilidades que correspondan al responsable sanitario, conforme a la Ley Generat de Salud y al Reglamento de insumos para la Salud: ‘Que se lleven a cabo estudios de validacion de los procesos de fabricacion y de fos sistemas involucrados ons 9.123 Los métodos analiticos deben ser validados, de acuerdo con to establecido en el apartado 9.12 “control del laboratorio analitico”. Se debe contar con métodos de analisis validados para producto a ‘granel, producto terminado y materia prima en caso de no aparecer ‘en cualquier farmacopea internacional ni en la FEUM. os NUMERAL DE LA NORMA Oficial Mexicana NOM-164-SSA1-1998, Buenas practicas de fabricacien para farmacos: CONTENIDO NORMA 16.1 Los controles de laboratorio e inspecciones deben apoyarse en ‘normas, PNO's o manuales que contengan las especificaciones para garantizar ta confiabilidad de sus resultados. Tales controles deben inclu: 16.4.5 Validacién de métodos analiticos utilizados por la empresa, no farmacopeicos 0 farmacopeicos que tengan desviaciones frente a la farmacopea de referencia, Justiricacion * 6 roGuia ve Vatipacion DE Metovos AN NORMA Oficial Mexicana NOM-073-SSA1-1993, Estabilidad de medicamentos. NUMERAL DE,LA - CONTENIDO NORMA ; 55 Cuando se cambie el método analitico durante el estudio de esiabilidad, se debe demostrar que los dos métodos son equivalentes mediante el proceso de validacién. 9.102 | Informacion general, especiticaciones y métodos analiticos: 5.10.23 | informacién de ia linealidad, precision, exactitud, reproduciblidad, repatibilidad y especificidad del método analitico indicative de estabilidad 6 Farmacos : Para fines de registro de un medicamento con féemacos nuevos en Mexico, ei fabricante del medicamento debe presentar ante la Secrotaria de Salud estudios de estabilidad acelerada ylo a largo plazo de tres lotes del (los) farmaco(s) efectuados por el fabricante de los mismos, utilizando métodos analiticos validades. Lasregulaciones anteriores, determinan la obligacién de valigar métodos analitices. Estas regulaciones podrian ser modificadas, por o que es importante estar actualizados be senaty YS Justiricacion 7eee ae yOPuePEPTSTyesr Tee Pee seeks 4.DEFINICIONES 44. Adecuabilidad del sistema.- Verificaciin de que el sistema (instrumento, analista, equipo, sustancia de referencia, entre otros) opera con base a crterios preestablecidos, que permitan asegurar la confiabilidad de los resultados de un ‘método analitico. 4.2, Analito.- Componente especifico de una muestra, a medir en un andlisis, 4.3. Calitracién.- Conjunto de operaciones que determinan, bajo condiciones esoecificadas, la relacién entre los valores indicados por un instrumento 0 sistema de medicién, 0 los valores representados por una medicion material y los valores: conocidos correspondientes a un patron de referencia 4 4.4, Documentacién.- Conjunto de informacion que sustenta una actividad realizada. 4.5. Especificaciones.~ Descripcién del material, sustancia 9 producto, que incluye la definicién de sus propiedades y caracteristicas, con las tolerancias de variacion | de los parametros de calidad AS, Especificidad.- Capacidad de un metodo analitico para obtener una respuest3: debida inicamente al analito de interés y no a otros componentes de la muestra. 47. Estudio colaborativo.- Reproducibilidad realizada en distintos laboratories, por diferefités quimicos. ke Ge ite OS PR Ree ' _A8, Exactitud.- Concordancia entre un valor obtenido empieando el método y el it cade eeeno \ 49, Estabilidad analtic de la muestra Propiedad de una mucstra preparada : para su alantficacién, de conservar su ntegridad ficoquimica yla concentvacion i Gel anafto, después de almacenarse durante un tiempo dsterminado bajo \ condiciones especificas, 74.10. Intervalo.- Concentraciones inciuidas entre la concentracién superior € infe- i rior del analito (incluyendo éstas), para las cuales se ha demostrado que el método analitico es preciso, exacto y lineal : f Derinicrones © &f- Guia o& Vatioacion DE METODO EYeTinrsy) “AM1. Limite de cuantificacién.- Concentracién minima del analte, que pyede ‘ser determinada con precisién y exactitud aceptables, bajo las condiciones de operacién establecidas. * ‘412, Limite de detecgién.- Concentracién minima del analito en una muestra, ‘que puede ser detectada, perono necesariamente cuantiicada, bajolas condiciones de operacién establecidas. AAA. Linealidad, Habildad para aeegurar que los resultados obtenidos directamente 0 por medio de una transformacién matemélica definida, son proporcionales a la concentracién del analito, dentro de un intervalg deteiminado, 4.14, Motodologi de prueba.~ Procedimiento o gtupo de procedimientos, para determinar si un producto 0 materia prima cumple con las especificaciones ~ establecidas, 4.15, Método analitico.-. Descripcién de fa secuencia de actividades, recursos + materiales v pardmetros que se deben cumplir, para levar a cabo el analisis de un ‘componente especitico de la muestra. 4.16. Método analitico desarrollado internamente.- Método desarrollado por et propio laboratorio, 4.17. Método analitico indicative de estabilidad.- Metodo cuantitativo capaz de detectar variaciones en las propiedades del material evaluado, debidas las condiciones de almacenaje. 4.18. Método analitico oficial.- Método que aparece en ta literatura oficial reconocida, coca 3 IC er eee wei 4.19. Método analitico no ofici eo aparece en la literatura of reconocida 4.20. Muestra.- Porcién dei material a evaluar. 4.21, Muestra analitica.- Porcién det material a evaluar de acuerdo al método analitico, 4.22, Muestra adicionada.- Porcién representativa del material a evalvar, a la que se le adicionan cantidades conocidas det analito. 4.23. Parémetros de desempefio.- Parametro especifico a estudiar en un protocoto de validacién. Derintcrones * 9rk COUPE el ee sees ee ; 4.24. Placebo analitico.- Muestra que contiene todos los componentes de un I ° producto a excepcién del analito. 4.25, Placebo adicionado.- Muestra de un placebo anaiftica al cual se le adiciona " tuna cantidad conocida del analito, 4. 4.26. Precisién.- Grado de concordancia entre resultados analitcos individuales, cuando el procedimiento se aplica repetidamente a diferentes porciones de una muestra homogénea del producto o de una referencia. ma Pee eee. jaiaebicnitaen aa Oe ee laetiorcalealtS i ‘en un mismo laboratorio, por diferentes analistas, en distintos dias. 4.28, Proporcionalidad,- Relacion establecida por una ecuacioh matematica en- tre los resultados obtenidos por dos métodos analiticos. 4.29, Protocolo de validacién.- Descripcién de pruebas especificas para demostrar que Un praceso da resultados que cumplen con los criterios preestablecidas de manera consistento. 4.30. Recobro.- Cantidad del analito determinada en el placebo adicionada 0 muestra adicionada, empleando el método analitico. 74.31. Repetibilidad.- Precision de un método anaiitico, expresada como la cconcordancia obtenida enire determinaciones independientes realizadas por un solo analista, usando los mismos instrumentos y método, 4,32. Reproducibilidad.- Precision de un metodo anajitico, expresada como la concordancia entre determinaciones independientes realizadas por diferentes \éboraiorios. 4.33, Revalidacién.- Comprobacién de que el métddo analitico mantiene su desemperio cuando existen cambios en la composicién de! producto, en el metodo analitico, 0 cambios criticas en los procesos de fabricacién. 34, Robustez.-Capacidad de! método analitica’de mantener su desemperio al presentarse vatiaciones pequefias pero deliberadas, en los parémaros normales de operacién de! método. 4.35, Sustancia de referencia.- Sustancia dé unilormidad reconocida déstinada a.utilizarse en comprobaciones analiticas fisicas, quimicas 0 microbiologicas en el a a hall a a ee DeFriniciones 10LipAciON DE MéTopos ANALITICOS transcurso de fas cuales. sus propiedades se comparan con fa sustancia en evaluacién. 14.36 Sustancia de referencia primaria.- Sustancia que es designada reconocica por tener la mas alte calidad metrolégica, cuyas propiedades se aceptan sin referencia a otras sustancias. 4.7, Sustancia de, referencia secundaria.- Sustancia cuyas propiedades $° ‘signan por comparacién con una sustancia de referencia primatia, bien. cuando es certificada mediante un procedimiento cientificamente reconocivo. analisis de la misma muestia bajo diferentes condiciones normales de operacion como pueden ser: equipos. columnas. La robustez y Ia tolerancia son conceptos: diferentes, ya que el primero se refiere a fa influencia de factores internos del método, mientras que la tolerancia, Se refiere a factores externos al metodo. 1439, Vatidacién del método analitico.- Proceso por el cual se demuestra, Por aludios de laboratorio, que la capacidad de! método satisface los requisites pars tas aplicacion analitica deseada, Derinictones 1Cuando en esta guia se haga referencia a los siguientes simbolos o abreviaturas, AS BP BPF - : CLAR 1 cosuran -SIMBOLOS Y ABREVIATURAS | | \ oa ie «J | Authentic Substance Pendiente : Pendiente del metodo 4 Pendiente de! metodo 2 Ordenada a orgen COxdenada al rigen del método 1 1 COrdenads at origen del método 2 Briish Pharmacopoeia Buenaé practicas de abricacion | Cromatogratia de liquidos 4 deallaresolicion. =~” Comité'de Sustancias : Farmacéuticas de Referencia. f Coeficiente de variacion 0 desviacién estandarrelativa, Coeficiente de variacién « de regresién. Apreviaturas - 12Ia) Diterencia absoluta de la media : aritmética de cada condicién de almacenaje respecto de la me dia aritmética del andlisis inicial Fees Valor de ia distribucién F de Fisher asociado a una confianza : det 97.5% y a grados de libertad (gl) establecidos. Foes + Valor de la distrbucion F de Fisher ‘asociado a ung confianza del 5% Rd Eat ee oy agraddb edhvtinad (gif 7 2 i eslablecides. Fa Valorde la distribucion F de Fisher : asociado a una confianza del 2.5% y agrados de libertad (ql) establecidos. Fcc Food Chemical Codex FOA Food and Drug Administration FEUM Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, 9 Gramos a Grados de libertad. 1B) Intervalo de confianza para la pendiente poblacional. IC(B,-B,,) Intervalo de confianza para la : diferencia de 2 pendientes poblacionates, : 1a) __ Intervalo de confiagza para la “ ordenada al origen poblacional CBB.) Intervalo de conianza pafa ta diferencia de 2 ordenadas al origen poblacionales. TaATURAS © 13CHI ow) en) Les LNsP NE NIST NOM oms PNO ir Po pos ANALITicos Intervalo de confianza para la media poblacional Intervalo de confianza para la diferencia de 2 medias poblacionales, Factor capacidad Limite de euantificacién. ‘ : Birt dccad fog A eel “ Ley General de Salud. Laboratorio Nacional de Salud Poblica miligramos Numero de mediciones 0 recobros 0 blancos o muestras 0 * determinaciones. Numero de muestras det andiisis inicial Numero de mediciones del método 1 Numero de mediciones det método 2. Numero de platos tedricos. National Formulary National Institute of Standard and Techndiogy Norma Oficial Mexicana. Organizacién Mundial de fa Salud Procedimiento Normalizado t de Operacién. 1“Creare eter eit) as = tan Sh AST A esi OE s. Perret ppm” artes por millon. R Resolucion e Covficiente de determinacién. Re Reteicidn relativa s Desviacion estandar. gag ge log plancos. Desviacion estandar de la ordenada al origen, Desviacion estndar para la diferencia de 2 ordenadas al origen. Desviacién estandar de la penciente Sa Desviacion estandar para ta diferencia de 2 pendientes. s Vatianza s, Varianza del método 1 Ss, Varianza del método 2 oe \aianzs pblacona 3 Razén de 2. vyatianzas poblacionales. sref : Sustancia de Referencia SSA Secretaria de Salud : : Desviacion esténdar de Fegresion. T Factor coleo, Valor de la distibucién t de Student asociado a una confianza del 95% y bony maotos y ABREVIATURAS * 15 ah, Bkoe Métovos ANALITICOS : a grados de libertad (gl) establecidos. usp United States Pharmacopeia : uspc United States Pharmacopoeia Committe MA Validacign de métodos analiticos. Reh ce Aieieseteioiee ease 1 ew that Media antmética de y. 5, é Media aritmética del método 1 7 Media aritmética del método 2 Yor Media aritmética del analisis inicial v, Media aritmetica de cada condicién de aimacenaje. : % Porcentaje 0 por ciento, VABREVIATURAS = 16 se ————— -SIPS eer) CE ee eee 5. CLASIFICACION DE METOoDOS ANALITICOS Serres ceeeseeee ee LO Pata nes de esta gia los métodos se dasiican bajo ls siguientes etoros 1). En funcién de su estado regulatorio en: Ee : ea — Poe i: Lago gs t tei ate obi a 4 eo ME ed Sid ideo al lin oe parecen en cualquier farmacopea (FEUM, USP. BP, Europea, etc). 'D) Métodos no farmacopeicos. Aquellos métodos fo compendiados en una farmacopea, 2) En funcién de su aplicacién (NOM 059 SSA1 y NOM-073-SSA1) on: 4) Métodos para producto a granel ) Métodos para producto terminado, ©) Métodos para materia prima. : 1) Métodas indicadores de estabilidad 3). En funcién de ta naturaleza de ta respuesta analitica en: 2) Métodos fisico-quimicos. Cuando la respuesta es de caracter {isioo (absorcion de uz, emision de luz, voltae, otc.) 0 quimico (consumo de iones -OH, consumo de in acomplejante, etc) ©) Métodos biolégicos. Cuando la respuesta es de caracter Biol6gico (crecimiento de un microorganismd, proteccién, muerte, ete.) : 7 4). En funcién'de su propésito analitice en: 2) Metodos para cuantificar el analito (contenido o potencia). ©) Métodos para establecer la presencia del analito a un limite. es eat “let? an alle Saal) Saat en tS lh Ub Meld 6) Métodos para identificar el analito, CLasiricacion BE METODOS Amar 7CIR eee Sr Esta uitima clasificacién es la que se utiliza para establecer los parémetros de desempefio a estudiar en ta validacién del método analitico. En el Anexo 1 se presenta una matriz de equivalencia entre esta clasificacin y otros métodos con aplicaciones analiticas definidas de otra manera, Cualquier método analitico puede estar constituide por técnicas de separacién, extraccién, etc.. y por técnicas de medicién (espectrofotometria, volumetria, potenciomettia, etc.) que permiten medir la respuesta del analito en Wins: Ors lcci eo. eons $8. 5). En funcién de la naturaleza det sistema de medicién se clasifican en: a) Métodos en los cuales el instrumento de medicién de la respuesta analitica, permite medir una sefial de ruido (cromatografo de liquidos, cromatégrafo de gases, espectrofotémetros, etc.) b) Métodos en los cuales el instrumento de medicién no permite medir una sefal de ruido (buretas, medidor de halos, potenciometros, ete.), pat ee Ciasipicacion 0& METOD0S AnaLiticos 18LAC ee ee eee ees 7.PARAMETAOS DE DESEMPENG En funcién de fa aplicacién analitica de un método, la siguiente tabla indica tos Pardmetros de desempeno a estudiar. PARAMETRO DE DESEMPEno | CONTENIOO/ PRUEBAS DE IMPUREZAS POTENCIAG, ie ro iricdtiod -aye-vat) iCIONE |> CONTENIDO At | Sf efits PIBENTIFICAG aie VALORACION MITE PRECISION J ADECUABILIDAD si si se . DEL SISTEMA LINEALIDAD DEL SISTEMA si si No NO. ESPECIFICIDAD' sp si si si EXACTITUD Y REPETIBILIDAD si si No. NO. LINEALIDAD DEL METCDO st si NO nd PRECISION DEL METODO O a , No N PRECISION INTERMEDIA? : me ESTABILIDAD ANALITICA® , : | DELAMUESTRA No NO. LIMITE DE DETECCION NO. NO. | UMITE DE CUANTIFICACION NO. si NO. NO. ROBUSTEZ Ef 1 7 TOLERANCIA : . . : No. * PUEDE SER REQUERIDO DEPENDIENDO DE LANATURALEZA DELMETODO 1. 1 falta de especificidad de un método analitico, puede ser compensaia por , gira alternativa analfica de soporte, como por ejemmplo cromatogratia de capa * ina.” 2, También es definido como un estudio de tolerancia : ‘3. Un método que es exacto y lineal, por definicién es especifico al placebo analitico 0 a los otros componentes de la muestra - Desempeno + 19CYYEWrr metal yer Pe tet ee ee eee B.DETERMINACIONES, METODGLOGIA Y CRITERIOS DE ACEPTACION 1. Precision del Sistema, | BF MEO Ch Bw i Aad BAL ak 8.4.1. Metodologia.. Un analista debe preparar por lo menos un. sextuplicado de soluciones a la concentracién del analito que represente la concentracién de la solucién de referencia utlizada, 0 en ciertos casos, la concenteacién que represente el 100% de la muestra procesada para su medicién; preparadas por dilucién o por pesadas independientes. Medir la respuesta analitica bajo las mismas condiciones. q Calcular . S y CV de la respuesta anaiitca. Paralos sistemas biol6gicos, se deben cumplirlos criterios de validez inherentes al disefio del bioensayo. . Criterio de Aceptacién: CVS 1.5% para métodos fisico - quimicos, CVS3% para métodos biolégicos. Valores superiores deben ser justificados, Cualauier oo criterio de aceptacion, debe ser justificado. Las formulas, el procedimiento de calculo y un ejemplo, Se describen en el Anexo 2, ’ 8.2, Adecuiabilidad del Sistema (Métodos Cromatogréficos) 8.2.1. Metodologia.~ Inyectar por quintuplicado la soluciéri de adecuabilidad, Reportar la respuesta del analito, caloular el CVy para cada inyeccién informar cuando proceda: DevéhuinacioNes;Merodovocta ¥ Caitenios o€ Acertacvon’ - 20 seed ame eneewe tea REUSE ee ee eee factor de coleo (T). 822 Goterios de Acemtaciong 3s 3 CVS 2% para la respuesta analilica, Valores superiores deben ser justificados. Para cada inyeccién se recomienda K>2 R>2 T<2, , Las formulas. el procedimiento de caiculo y un ejemplo, se describen en el Anexo 3. al Laeraluacin de a aseevabicad col sistema so recomienda para todos fos métodos analitices, ya que permite verifigar que el sistema de a ‘medicion funciona apropiadamente, independientemente do las . Condiciones ambientales. Es conveniente que antes de llevar a cabo la validacién del método analit >, $e establezcan los criterios apropiados Para fa operacion del sistema de medicion, para ser evaluados en la valida In y verificados de manera rutinaria al emplear el método analitico. Por ejempio, en el caso de métodos voluméiticos, el volumen Ge la titulacion de bleacos ylo de un volumen especifico de la solucién de referencia; en el caso de métodos flométricos ta lectura de soluciones bianco; entre otros, 4 idad det Sistema, ' 8.3.1, Metodologia.- Un analista debe preparar por lo menos por ttiplicado 5 niveles de concentracién (intervato) de Ia solucién deteferencia ya sea por dilucién (a partir de una misma solucion ‘concentrada) 0 por pesadas independientes (cuando no sea posible prepararlas por dilucién). La concentracién central debe ser igual ala ‘que se prepara la solucién de referencia en el método 0 en clertos casos, la concentracién que represente el 100% en ta muestra procesada para su medicion. El intervalo debe incluir fa especificacion para ol caso de aquellos métodos ulllzados para contenido/ potencia I valoracion. Media respuesta analitica bajo tas mismas condiciones de medicion, eportar la relacién concentracion vs respuesta anata Calcular el valor de la pendiente (b,). la ordenada en el origen (b,), et fgiopte de detespingcion ("hy 2! ptervalo de gonfianza para le Re es Se ee cea HE Ks Elintervato estd en funcion del oropésite-del método, y por lo general se expresa como % de la concentracidn de la solucién de referencia ‘en funcién del contenido de! analito en la muestra procesada para Su medicion. Para contenido hpotencia / valoracién se sugiere un minimo de 20%. para contenido / vatoracion de impurezas desde.un nivel apropiado hasta un 20% por arriba de la especificacion 5 Para métodes indicadores de estabitidad desde un nivel apropiade hasta un 120% 7 Es critico que el intervato no excluya valores de concentracion que potencialmente puedan dar lugar al contenido del analito enla muestra 8.3.2. Criterios de Aceptacion: P2098 IC(B). 0 debe inclu el cero. Cuaiquier otro criterio de aceptacion debe ser justificado, r Las formulas, el procedimiento de catculo y un ejgmpio. se describen en el Anexo 4. : Es conveniente trazar la grafica la concentracion (x) vs la respuesta analitica (y), e incluir en ella la ecuacién, la linea de ajuste y el cooficiente de determinacién. . hee Dereammaciones, MeToooLosia ¥ Critenios of Acerracion * 22 eoee ae ; CIO ee eee 8.4. Especificidad, 8.4.1. Metodologia: Partiendo de la experiencia en el andlisis de ta muestra, se deben establecer las posibles sustancias interferentes, y Adicionar cantidades conocidas de éstas, solas 0 combinadas a la ‘muestra y evaluar su respuesta al método, bajo las mismas condiciones de analisis, Para métodos de identilicacién: Se deben seleccionar sustancias que fer te, P eae Sclompipgeionconbase en laestuctura,... Reel ‘oigige “cropper gee)! ARETE S Sere eae * degradativas, entre otros Para métodés de contenido / potencia / valoracién: Se deben’analizar Placebos del producto, como loindica et método, muestras de producto, y cuando proceca -sustancias relacionadas. precursores, shomélogos: yuna mezcla del producto con ellos 0 cualquiera de ellos. Para métodos de contenido / valoracion de impurezas: Si se dispone Ge las impurezas se deben adicionar éstas al analito yio a la muestra analitica en niveles que incluya la especilicacion. Analizar como lo in __dica el método. Cuando no se dispone de éstas, Ja muestra que contiene elanalito debe someterse @ condiciones que generen su inestabilidad Quimica (luz, calor, Fumedad, hidrélisis aciqc-basica y oxidacién) y aplicar el metodo a la muestra resultante, Para métodos de limite de impurezas: Proceder a analizar muestras individuales de la impureza (organicas, inorgdnicas 0 solventes residuales), el producto (de pureza aceptable) y la mezcla de estos, como to indica ef método. * Para métodos indicadores de estabilidad: En caso de contar con los Productos de degradacién. preparar muestras con placebo adicionado de Estos, el placebo adicionade de analito, et placebo adicionado de + analito y de productos de degradaciéa y analizar con el método. Dererminaciones. Metoootosia ¥ Cairerios Acerracion - 23[SUT T ee eee) adicionada, al obtener el caciente de la cantidad recuperada respecto de ta cantidad adicionada expresada en porcentaje. Catculat ot promedio aritmético ( ¥ ), la desviacién estandar (8), ef Coeficiente de variacién (CV) y elintervalo de confianza para la media Poblacional IC{y) del porcentaje de recobro 8.5.2. Criterios de Aceptacién: E1IC(x ) debe incluir el 100% 0 que el promedio aritmético del % de a aN gnclinenaps ad Tee 98 - 102% si el método es cromatogratico, 98 - 102% si ef método es volumé:rico, 97 - 103% si el método es quimicoo =spectrofotométrico, 95. 105% si el metodo es E1GV Ge porwentaje de reetve to debe Ser maya 2% set ned os eromaterac, nomayer de 2% sel modo es vlumevico ne meyer de 2% ses quimico especefetmsico Po mayor del 5% si es microbielégico! Ao mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especificacién del analiio en ia muestra Cualquier oto eriterio de aceptacion, debe ser justificado, Las formulas, ef procedimiento de caiculo y un ejemplo, se describen en el Anexo 5, 4 8.6. Linealidad dst Método: 8.6.1. Metodologia. ‘A) Se conocen los componentes de la muestra y es posible preparar un placebo analitico. inwAciones: Meroootocia ¥ Carteaios 32 AUn analista debe preparar e! placebo analitico con el tipo de componentes que generalmente estén presentes en la muestra. Ala cantidad de placebo analitico equivalente a una muestra analitica por triplicadd, adicionarle la cantidad de analito. (puede ser una sustancia de referencia secundaria) corcespondiente al 100% de Este en la muestra. Seleccionar al menos dos niveles, superior e inferior de la Cantidad del analito (Intervalo) y preparar el placebo, adicionado al menos por triplicado a cada nivel, manteniendo constante la cantidad de placebo anaiitico en, los tres niveles. Los placebos adicionados deben ser analizados por un mismo analista bajo las mismas condiciones, ulilizando como referencia, la sustancia empleada en ta adicin al placebo analitico. Determinar la cantidad recuperads REAL, 8 IN SK ck Bad Se eee 4d. ; 4 4 i 4. 4 See tania i Un analista debe analizar la muestra con el método, para determinar el contenido de! analito, El mismo analista debe preparar por fo menos 3 muestras adicionadas, por ejemplo utiizando la mitad de Ia muestra analitica que originalmente requiere ‘el método y adicionar el analito (puede ser una sustancis de referencia secundarai hasta completar to que represente el 100% de éste en la muestra, Seleccionar al menosdos niveles, superior ¢ inferior de la cantidad del analito (intervalo) y preparar fa muestra adicionada al menos por triplicado a cada nivel, manteniendo constanie a cantidad de muestra en los tres niveles. Las muestras adicionadas debed ser anaiizadas por un mismo analista bajo las mismas condiciones ulilizando como ‘referencia la sustancis empleada en la adicién de la muestra, Determinarla canticse recuperada dei anaiito. : * Cuando no sea posibte adicionar de manera directa el analito a la muestra, | adicién puede ser levada a cabo en alguna etapa del método. Se recomienda cue la adicion se leve a cabo en las primeras etapas del método. para poder asegurar {que las etapas posteriores, no den lugar a resultados incorrectos. Por ejemplo. s: “una muestra se debe extraer,filrar y dilvr, es conveniente que la adicién se lleve 5 cabo antes de extraer, ya Gue si exisliera algun prablema con la extraccion co: fitracién. y el analito se adiciona a la muestra o placebo analiico hasta antes ce Aj diluir, puede dar lugar a-resultados incorrectos. Elintervato de ta concentracién det anaiio adicionado, depende del propésita del : ‘método y debe incluir ta éspecificacién. La siguiente tabla sugiere intervalas para el estudia de inealidad, en fa cual la especificacién se maneja éoma porcentaje: como por ejemplo el 100% puede representar 100 mg! g de muesta, 10 ppm. 5 mgm, ete Deieniliwationes} Merovo.ocia y Criterios o¢ AcePracion - 27 eetPROPOSITO ESPECIFICACION INTERVALO MINIMO CONTENIDO / POTENCIA / | LIMITE INFERIOR (L), per VALORACION . LIMITE SUPERIOR (L.) EJEMPLO VALORACION 90% - 110% 80% a 120% Por lo tanto los niveles podrian ser 80%, 100%, ppp sai tiRh 2 gt CE) a Por lo tanto los niveles podrian ser 60%, 100% y 140% DISOLUCION = 75% 40% a 130% Enel caso conservador, de | Por lo tanto los niveles : llegar a tercera etapa, ninguna | podrian ser 40%. 100% y uunidad es menor a Q - 25% 130% CONTENIDO / VALORACION : PARA PRUEBAS DE LIMITE SUPERIOR (Ls) Ls -20% als +20% IMPUREZAS | : EMPLO | eee 80% a 120% Sustancias relacionadas. | No debe contener mas de 100%. oro tanto fos niveles podrian ser 80%, 100% y 120% Reportar a relacién cantidad adicionada vs cantidad recuperada. Utlizando elmétodo de estimacién por minimos cuacrados, calcular et valor deta pendiente (b,), la ordenada en elorigen (b,), el coeficierite de determinacién (1), el intervalo de confianza para ta pendiente (IC(Q)), 1 intervalo de confianza para la ordenda al orgen (IC(R)) y el covficiente de variacién de regresion (CV,,) f Calcular el porcentaje de recobro de cada placebo adicionado o muestra adicionada, al obtener el cociente de la cantidad ecuperada respecto de la cantidad adicionada ‘expresada en porcentaje. Calcular el promedio aritmético (7), la desviacién estandar (S),elcoeticienle de variacin (CV) y elintervalo de canfianza para la media poblacional 1C(u) del porcentaje de recobro Devenwinaciowes, MevoDo.ocia v Cairenios DE AcerTacion. * 28cose [ee Guia-ve VALIDAciON DE MEéTopss ANALiticos oe Criterios de Aceptacién: 8.6.2.1. Cantidad adicionada vs cantidad recuperada: P2098 ELIC( f,) debe inctuir ta unidad. Ej IC(B) debe inclir et coro. wee eee oo EIcy,, ent SC gg i, BR 8 4a a. ee BO ea aS ae . ‘no mayor de 2% si el método es volumétrico, no mayor de 3% si es quimico o espectrofotométriéo, no mayor del $% si es microbiolégico ‘no mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especificacion del analito en ta muestra. 7 8.6.2.2. Porcentaje de recobro: El IC(q) debe incluir e1 100% 0 que el promedio aritmético del % de recobro se incluya en el intervalo: 98 - 102% siel método es cromatogratico, 98 - 102% si et método es volumétrica, 97 - 103% siel método es quimico o espectrofolométrico, 95 - 105% si el métado es microbiolbgice. te” Oot See fhe? ol EICV del porcentaje de recobro: no debe ser mayor de 2% si el método es cromatografies; no mayor de 2% si el mélodo es volumético, no mayor de 3% si es quimico 0 espectrofotométrico . no mayor del 5% si es microbiolégico Deyersinactones, Merooorooia y Caiterios o¢ AcePtacion * 29no mayor a una magnitud preestablecida, acorde @ Ia especicacién del analto en la muestra. Gualquier oto criterio de aceptacién, debe ser justificado. Las f6rmulas, el procedimiento de calculo y un ejempio, se desoriben ‘en el Anexo 6. Es conveniente trazar ta grafica de la cantidac adicionada (x) vs Id cantidad recuperada (y).e incluir ta ecuacion. su linea y el coeficiente és le determinacion. St RM EE oe ate eatin dh ots 8:7. Precision del Método (Precisién Intermedia 0 Tolerancia interdia / anatista)- 8.7.1. Metodologia: [Analizar por tiplicado una muestra homogénea del producto que tenga tun nivel cercano 0 igual al 100 % (en el caso de contenico! potencia! valoraciin) ¢ una muestra homogénea cuyo contends este inclvido con of intervato lineal de concentracin de finealidad de metodo (para el caso de impurezas). en dos dias diferentes y por dos analigtas Giferentes. Uilizar de preferencia ta misma sustancia de referencia y umentos ylo equipes. Reportar elcontenido/potencid jesivas. Jos mismos i / valoracién del analito de todas las Calcutarta media antmetica (V), desviacién estandar (S) y coeficiente de vatiacién {CV) de! contenido £ potencia / valoracién, empleando todos tos resultados obtenidos 3 4.72. caterios do Aceptacén CVE 2% para métodos cromatagraficos y volumétricos. CVS 3% para métodos quimicos © espectrofotometricos. 1 GV-< 5% para métodos bioldgicos. : no mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especiicacién del anaito en la muestra. : Valores superioces deben ser justificados, - Dereaumactoues, METooOLOGtA ¥ Carvemios of AcePtacion 903 2. : a a a PS 3.8, Estabi Pay Te te Meropos ANALiTICOS Las férmulas, el procedimiento de caiculo ¥ Un ejemplo, se describe en el Anexo 7 cos resultados pueden se analzados, vlizndo oras mlccts te ooscae apropiades, ave parmian sustentar que 12 POS A iétodo es aceplable. Puede ser utilizado un modelo estadistico lineal aco expenment\ considerand como fares a STs Y ia panel onksia considera a aratiacomo unten Eras arascno at a, Ese mare permite ivestiat elec analsta ¥ deldia. oe csimaria variiigad once anos @>CEDH SE anal oe ea eB eructhnd tos variabitidad del metodo analitico: (repetibilidad. “Este analisis es de utilidad vate ae ine meres en determina lgragodeorcia eho sjestas fuontes de variacén, jtidad Anatitica de ta Muestr2 8.8.1, Metodologia El analista debe establecer ta elapa ce analisis en fa cual se desea evaluat a estabilidad, ademas de determinar sie? dicha etapa es posible (raccionar (muestras dependientes} ©? (mvestras independientes) ¥ las condiciones de almacenaie Para detenminar la establidad anaitia para rmuestas dependientes. el eaisia debe procesar hasla i etapa preestablec® POY fo menos por Trelcadounamuestranomogenes Fracconar cada una de las preparaciones dde acuerdo a as condiciones de almacenajo de teres Terminar el anaisis de una de las fracciones de cada preparacien (contenido f potencia 1 vtoracion inci’), Proseguir et anisis de cada Une de las fracciones al vermino de cada condicion de almacenie, utlizando Wo solucion de telerencia recienterente preparada,siel metodo ‘contempla el uso de una golucién de roferencia. Reportar el contenido poten svaloracionde cada fraocion. ora dterinat lo estbtidad naliia paja muesinsIndependen partir de una muestra homogene, el analista debe analizar por tipticado ‘Ginn ptenia valrecn ca), mutans Fe ta misma ta, procesar einiere de musta necesaras are 0202 condiciin oer naj nasal capa preestabiota (preparacanes) 3 Temes viplicado, Proseguicelardisis de cada una das preparacionesal téarino ve cade condeién de almaoanle, usizando ure soko” C2 referenda vecentemente preparada, sia mazodo conterpla ol uso de we sotucién de verona, Reportar olconerido/poencivaoracionde Cade preparacien fo be SBinacrones, Merooo.ocia ¥ CRITEROS DF acerracion * 34 ee : pene aiiBi bn eid BE REE a Calcul la media artmética del ands inical (7) y de cada condicion doalmacenaje (y). Calcularla diferencia absoluta de la media artmetica de cada condicién de almacenaje respecto del analisis inicial (|¢ |) 8.8.2. Criterios de Aceptacién: |¢s]<2% para métodos cromatograficas y volumétricos, |oi|<3% para métodos quimicos 0 espectrofotométricos no-mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especificacion ano vmstrumentales. Un analista debe preparer por lo mend 3 concentraciones de 1a sustancia de interés (analite, placebos ‘adicionados, ete; segtin proceda) a valores menores 0 que incluya la tespeciicacion de fa prueba de imourezas limit; ya S02 Por dilicién © por pesada independiente del anata, Medirlas respuest=® analiticas. Calculer el valor de la pendiente (b,) 1 eoeficiente de determinacion (@) la desviacién estandar de regresion (S,,)¥ intervalo de confianza signte ((C(B,)- Caloularellimite de deteccion cone iquiente & cer TE eae aioe es. 4 i 5 4 a h 3 4 a 4 Peres valor estimado LD debe ser veriicado uitizando et proce la sefial de ruido, 8.9.3.2. Criterio de Aceptacion. 220.98 IC{B). no debe inclur ! cero. ENLD debe ser menor a la especiicacion de la prueba de impurezas limite. ualquier ot citer de aceptacion, debe ser ustlicado 8.9.4. LD con base en la curva de calibracién y ta desviacién ‘estindar de la ordenada al origen. 2.9.4.1. Metodologia: : Este procedimiento aplica tanto a métodos ihstrumentales como 3 MO ce rcmales, Un analista debe preparar por fo menos ie aimpaciones de le sustancia de interés Canalo, placetos aeeor, ei, seg procega) a valores enor owe nay especificacién de ta prueba de impurezas limite; ya sea Por dilucian © cera dependents del anaito, Madris respuetas ora Heat valor dela pendnte (he cosicente de detetinacy (@), la desviacion ‘estandar de la ordenada al origen Sy el intervalo tte confanza para ta pendiente (IC(A)- Catcuar et Kink de deteccion * ‘con la siguiente ecuacion: muinaciones, Meoootocia ¥ GRITERIOS OF Acepracion * 34 oo| —_— Guia pe Vatipacion DEE eer ey 3.3x So, LD= = 5, Elvalor estimado LO debe ser verificado utilizando el procedimiento de la sefial de ruido, 8.9.4.2. Criterio de ore SD CRI a es IG(B), no debe inciir el coro EILD.debe ser menor a la especificacion de ta prueba de impurezas limite, Cualquier otro criterio de aceptacién, debe ser justificado, Las f6rmulas, e! procedimiento de caleulo y un ejemplo, considerando |os distintos procedimientos, se describen en al Anexo 9, 8.10. Limite de Cuantificacién. : Para la estimacién del limite de cuantificacién se sugieren los siguientes procedimientos: 8.10.1.1. Metodologia: Este procedimiento aplica a métodos que utiizan un insirumento para medir a respuesta analitica y que presentan una ‘seiial de ruido basal Un analsta debe determinar la seiial de muestras blanco (ceactivos, Placebos, etc. segin proceda) y la sefial anajiica de muestras (analito, placabog adicionados, segtin proceda) a concentraciones congcidas del analto,inferiores o que incluya la especificacién del contenido! valoraciér dela prueba d urezas, Determinar aquella cantidad del analito cuya sevial sea similar 0 mayor a fa de la muestra blanco en una proporcién de 10 2 4, fo que corresponde a la cantidad asociada al limite de cuantiicacion. Es necesario verificarque dicha cantidad corresponda al limite de cuantiicacién, evaluando la exacttud y repetibi éstimado, 1 8.10.1. Sefial de Ruido. fad del valor nF DetRMinaciones, MeroDoLOGIA v Cairenion ne Artorariau = a8ne snipe)» gy mags oles at Fealitacke be conoad Praeenote Basin rr 8.10.1.2. Criterio de Aceptacién: EILC dobe ser menor aa especificacién del contenido/ valoracién de la prueba de impurezas 8.10.2. LC con base en fa curva de calibracién y la desviacién estandar de los blancos. 8.0.2.4. Metodologia: Este procedimiento aplica tanto a métodos instrumentales como a no instrumentales. Un analista debe preparar Bor to menos 3 ae de la sustancia de’ interés (analito, ae ya sea por dilucién 0 por pesada independiente del analito, Simutténeamente, preparar por lo menos 5 blancos (reactivos, place- bos, etc., segiin proceda), Medir las respuestas analiticas, Caloular el valor de la pendiente (b,}, el cooticiente de determinacién (©) y el intervalo de confianza para la pendiente IC(f),). Para los blancos, calcular la desviacién estandar de los blancos. Calcular el limite de ‘cuantificacion con ta siguiente ecuacién: 10x S, 5 Evaluar la exacitud y cepetibilidad del valor estimado del limite de ‘cuantificacién. Lc= 8.10.2.2. Griterio de Aceptacién. 2> 0198 1C(fh), no debe incluir el cero. EILC debe ser menor a la especificacion del contenido / valoraci6n de la prueba de impurezas Cualquier otro criterio de aceptacién, debe ser justifcado, 8.10.3. LC con base en Ia curva dé calibracion basado en la desviacién estindar de regresién. * 8.10.3.1. Metodologia: Este procedimiento aplica tanto a métados instrumentales como ano instrumentales. Un analista debe preparar por lo menos 3 conéentraciones de la sustancia de interés (analito, placebos genes MeTopoLociA y CriteRios o€ Aceetacion 36 ar 4 oeGuia DE VatipaciOn ve Metopos Anatiticos adicionados, etc.. segtin proceda) a valores menores © que incluya la cespecificacién de contenido / valoracién de la prueba de impurezas, ya sea por dilucién © por pesada independiente del analito. Medic las rospuestas analiticas. Caleular el valor de la pendiente (b,), el coeficiente de determinacién (@), la desviacién estandar de regresidn (S,,) y el intervalo de confianza para Ia pendiente (IC{B)). Caleular el limite de cuantiticacién con la siguiente ecuacion: . Evaluar la exactitud y repetibilidad del valor estimado del limite de cudpui@adien? = “2 eB eg 8.10.3.2. Criterio de Aceptacion: P2098 IC(B), no debe incluir el cero, EI LC debe ser menor a la especilicacién de! contenido J valoracién de la prueba de impurezas. Cualquier otro criterio de aceptacién, debe ser justificado, €.10.4. LC con base en la curva de calibracién y ta des viacién esténdar de la ordenada al origen, 8.10.4.1. Metodologia: Este procedimiento aplica tanto a métodos instrumentales como a 90 instrumentales. Un analista debe preparar por lo menos 3 concentraciones de la sustancia de interés (analito, placebos adicionados, etc., segtin proceda) a valorés menores 0 que incluya la ‘especificacién de contenido / valoracién de la prueba de impurozas, ya sea por dilucién © por pesada independiente del analito. Medir las respuestas analiticas. Calcular el valor de la pendiente (b,), elcoeficiente de determinacién (f°), la desviacién pstandar de la ordenada al origen {S,,) y el intervalo de confianza para la pendiente (IC(B)). Caleular el limite de cuantificacién con la siguiente ecuacién: Evaluar la exactitud y repetibilidad del valor estimado del limite ge cvantificactin. Determinagiones, MeToootocla ¥ CurreRios 0g AcEPTACION 37POT ce eetr ee Path eee kee 8.10.4.2. Criterio de Aceptacién: > 098 (8,),no debe incluir el cero, * EILC debe ser menor ala especificacion del contenido J 7 valoracién de la prueba de impurezas. Cualquier otro criterio de aceptacién, debe ser justificado. SDL me th. SE Banat BKB 6 Beil ee Las férmulas, el procedimiento de célculo y un ejemplo, considerando : los distintos procedimientos, se describen en el Anexo 10. Metodologia: Se deben establecer aquellos factores instrumentales (temperatura de la columna, presion en la columna, velocidad de flujo. etc.) ylo factores no instrumentales (pH-de fases, vollimenes de solventes organicos para una exlraccidn, etc), relacionados al propio método, que se considere criticos. En cada condicion de operacién distinta, asi como a la condicion normal, analizat la misma muestfa por lo menos por triplicado, Reportar el contenido / potencia / valoracién det analilo para las muesiras de condicion normal de operacisn y para la(s) muestra(s) de las otra(s) condicion(es) de operacién, expresada(s) como %. Calcular la media aritmética de ta condicién normal de operacin (¥,) ¥ de cada condicién de operacion diferente a ta condicién normal (¥, ) Calcular a diferencia absoluta de fa media aritmética de cada condicién respecto a la condicién normal (]¢ |). “ 8.11.1. Critorios de Aceptacion: as] < 2% para métodos cromatografigos y volumétricos. 14] < 3% para métodos quimicos y especirofotometicos. 1a] < 5% para métodos bioldgicos ‘ no mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especificacion dele analito en la muestra. Dereruinactones, MeToDOLOGIA y Critenios of AcePracion 38Cal % be ee TY PPE ee eer Cualquier otro criterio de aceptacién, debe ser justificado. Las formulas, el procedimiento de calculo y un ejemplo, se describen en el Anexo 11 Los resultados pueden ser analizados utilizando otros métodos estadisticos apropiados. Uno de ellos es fa obtencion de intervalos de Confianza que describen ia diferencia de los resultados de una condicién specifica respecto 2 la condicién normal de operacién,-basados en la Gistibucion t de Student ( para 2 condiciones) o t de Dunnett (para 3 0 i‘ sd Gondiciones}-fcluyendo ta covidiciéd noha, “$< * AE sue 8.12, Tolerancia Metodologia: ‘Se deben establecer aquellos factores ajenos al método como diferentes equipos, lotes de reactivos, columnas, etc., que se puedan presentar al Feproducir el método en otras condiciones de uso. Fijar por io menos 2 Condiciones de uso y analizar una misma muestra por !o menos por {tiplicado a cada condicién. Reportar el contenido / potencia / valotacion del analito de todas las muestras. Calcular la media aritmética ( y }, desviacion estandar (S) y coeficiente de variacién (CV) del contenido / potencia J valoracién 8.12.1. Criterio de Aceptacién: CV S 2% para métodos cromalogralicos y volumétricos CV & 3% para métodos quimicos y espectrofotométticos. CV < 5% para métodos biolégicos. No mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especificacion del analito en ta muestra, : Cualquier otro criterio de aceptacién, debe ser justificado, Las formulas, e procedimiento de célculo y un ejemplo, se desériben en el Anexo 12 Los resultados pueden ser analizados utiizando otros métodos estadisicos apropiados. Uno de ellos es apicar un ansisis dela varianzacon un criterio de clasificacion para determinar si al menos una de las , I condiciones de uso es diferente. En caso de conciuir que al menos una { de las condiciones de uso es diferente, puede emplearse una prucba ’ estadistica de comparaciones miiltiples para identificar aquelias ’ I condiciones que dan lugar a resultados diferentes, » | | S.SUSTANCIAS DE REFERENCIA q { : | » aS OF z * . & : : as aes a re Be ore ae Rie nck tl ’ ot : Las sustancias de referencia son importantes en a validacién de métoos analticos. ya que constituyen un componente propio det método y una » herramienta en la evaluacion de fos pardmetros de desempefio, lo que ! , I permite establecer la confiabilidad de la metodologia. . > Paral soleccion y adquisiion de las sustancias de referencia se debe i I -contar con procedimientos acordes para su manejo y aplcacion correctos , dentro dl laboratorio que va.a llevar a cabo las actividades de validaciom | dde métodos, Asi mismo, se debe contar con reqistros del uso y con ta documentaciSn que avale una buena practica en el manejo de cichas sustancias, A 9.4. Manejo. if ; Para cumplir su propésito, cada sustancia de referencia debe almacenarse, manejarse yulizarse de acuerdo conlas especificaciones correspondientes. Generalmente daben almacenarse en su contenedor : oxiginal, alejadas del calor y rotegidas de a luz. Dobon evitarse lugares humedos, Cualquier indicacién sobre condiciones especiales de = bo0tat Yurra30s— eae| I CIP et et eet eee eT | I 5) Delorminar en elAnex0 20 tyyngas y cateular 1.) toms #2447 I 1C(B,) = 0.326324 2.447 x 0.00141 = 0.32288 , 0.32977 Elintervato eo incue cero r 2H eg 8.4 CURVA DE CALIBRACION BASADO EN LA DESVIACION ESTANDAR OE LA, ORDENADAAL ORIGEN, I A) FORMULAS. I PENDIENTE vimero de mediciones (concentracién ~ respuesta anaiitca ). COEFICIENTE DE DETERMINACION | J 2 Wy)-Cneyy (Ee HE Mn) fo9759-25ma ee ee UEP ee eee 5) PROCEDIMIENTO DE CALCLILO. 41) Tabular tos resultados: CANTIDAD ADICIONADA (x) ~ RESPUESTA ANALITICA (y) i MUESTRA x (ppm) y (absorbancia) Sea 0863 | oats 2 — 863 ote 3 | ___ 4.284 0417 aia 1.288 | oat 5 —.605; 0.522 6} 08 052% ae 1.926 0.828 8 1926 0.629 2) Caleular Px, By, Det, By? Zaxy y determinar 0.963 + 0.963 + .. + 1.926 = 11.556 Ly =0315 «0314+. +0629 = 3.765 Ext = 0.980" + 0.969 +... + 1.9267 = 17.72308 Zy'= 0.316" + 0.914%+ .. «0.629 = 1.88168 Bay = 0.965°0.315 + 0.963°0.314 +. + 1.976°0.629=5,77479 n=8 3) Caleularb, y 85.7479 ~11,556%¢3.765 8x17.72305 ~ 11,556" 4 = 0.32632 2. (8x5.77479 11.556 3.765) (8%17.72305 -11. 556?) x(8 «1.88164 —3, El valor es mayor de 0.98 4) Caleular by 8), ¥ Sy, 3.765 ~ 0.32632 «11.556 3 0.00075CUS Tea aT 1-88 164 0.32632 x V 0.00143 Sy = 0.00143 11356 v7.72305~ 11556 3 5) Determiner ene! finex0 20 tyyn,, 5 ~y cleular 10(B) tosngs = 2487 IC(B,) = 0.32632. 447000141 = 0.82288, 0.32977 El intervalo no inciuye el cero, 6) Calculer B ys, 1336 poe ates fran aes re 17.72305- 11336 8 0210 7) Caleviar ei limite de deteccid, 3.30.00210 032632 LD 021 ppmANEXO 10, Guia ve Vacipacion ve Méropos An rr FORMULAS Y PROCEDIMIENTO DE CALCULO CON EJEMPLO PARA LIMITE DE CUANTIFICACION 10.1 SENAL RUIDO 41) Tabular los resuttados: SENAL MUESTRA | awaurica patseg |pLACEaO ANALIICO (BLANCO O RUIDO) 3525 2 10" RUIDO 35250 ANALITO ppm 3 8 19 26260 15 3745 2 22160 25 69624 EILC se estima en 15 ppm, que cs fa cantidad de! analito, inmediatamente posterior a 10 veces el ruido, 10.2 CURVA DE CALIGRACION BASADO EN LA DESVIACION ESTANOAR DE LOS BLANCOS. A) FORMULAS PARA LA CURVA DE CALIBRACION. PENDIENTE my Dy ayers COEFICIENTE DE DETERMINACION (n(Zay)-C xZy))* OEE) OEY HEWN) INTERVALO DE CONFIANZA PARA LA PENDIENTE IC(B,) = by E6o9750-25ae a a a ik er ye Guia Se VALIDACION DE MET0008 Anatiticos gorse 7 Relerrse al Anoxo 20, para determinar el valor deta {ce Student 8) FORMULA PARA LOS BLANCOS DESVIACION ESTANDAR DE LOS BLANCOS: nel) n= niimero de blancos C) FORMULA PARA EL LIMITE DE CUANTIFICACION, os uc & D) PROCEDIMIENTO DE CALCULO PARA CURVA DE CALIGRACION 1) Tabular los resultados: CANTIDAD ADICIONADA (x) ~ RESPUESTAANALITICA (y) PLACEBO axatitico | xtppm) | y(absorbancia) ADICIONADO: |. seat 1 0.868 ois 2 0.963 ost | 3 1.264 0.417 4 1254 046 fesse 1605 05% 5 1.605 O21 7 1.926 | e 1.926 0678] 2). Caleular Bx, By, Bet, Ly! Day determinar a: Bx = 0,963+0,063 +. + 1926 = 11.855 Zy =0.319+0314+,, +0.629=3.765 Exes 0,969" + 0.963" +... + 1.926% = 17.72305 Ly? = 0,318! + 0.314? +... + 0.6288 = 1.88164 Day = 0.963°0.318 + 0,963°0.314 +... + 1.926°0.629 = 5.77479 28 3) Coteular b, y 2 TISI9~11.556%3.165 = 0.32632 8%17.72305~11,556° _Bx5.77479 = 11,556 3.765)" 39989 © @x17.72305—11 5567 )x(8 «1.88164 ~ 3.765") 7aS SP ae al Sel Ver” le Oe “te ee ee ee Se ee GUIA DE VaLipacion DE Métopos Awatiticos El valor excede 0.98 4) Calcul by Sy.¥ Sx 3.165 ~ 0,52632%11.556 € 358 = ooars 8 Sy ee aaa PCS mae 5) Determinar en et Anex0 20 ta g,.9 ¥ eateutar ICU) toons = 2447 IC(B,) = 0.32652 4 2.447 0.0014) = 0.32288, 032977 Er intervaio no incluye el cero, E) PROCEDIMIENTO DE CALCULO PARA LOS BLANCOS 1) Tabular los resultados: PLACEBO ANALITICO (BLANCOS) ¥ (Absorbancia) PLACEBO. ANALITICO |¥ (Absorbancia) (BLANCOS) 1 0.003 2 ooo | a 0.006 4 007 8 | 0006 2) Caloular Ly, By? y determinar 0 Ey = 0.003 + 0.004 +... + 0,.004= 0.019 Ey'= 0.003" + 0.004 + .. + 0,004 = 0.00008, 3) Cateular 5% 0.00008- 0.019" 29 oo48 yO 36-0 F) CALCULO DEL LIMITE DE CUANTIFICACION 1ox000148 198 0.00148 = 9045 pom a 0.32632 :roaMULAS PENDIENTE le bebe ae ay ‘nimere de madiciones (concertacién ~ respuesta anahica) COEFICIENTE DE DETERMINACION (Ey) (ExT) (HET WAL) EY) INTERVALO DE CONFIANZA PARA LA PENDIENTE ICE) = 8) Bars 851 orcas = Referirse a} ‘Anexo 26, para determingr el valor de la de Studont LIMITE DE CUANTIFICACION. 10x85 hy=e \ tipacton pe MeTooos Guia oe VA '8) PROCEDIMIENTO DE CALCULO. 4) Tabular los resultados: CANTIDAD ADIGIONADA (x) ~ RESPUESTAANALITICAYY) pate is “ PLACEBO ANALITICO x (ppm) y (absorbancia) ‘ADICIONADO 0363 ___| 0315 0.963 4.284 1.284 1.605) 95 +605 | 71.926 25 | 2) Galewiar Ex, By, Ex’, Ey", Yxy y determinar rr Ex = 0.963 + 0.983 +. + 1.926 = 11.596 Zy =0315+0:314 +. 0629 = 2785 Zit = 0.963" + 0,963 +. + 1.926" = 17.72308 Syts Oats + O34 +... +0629" = 186164 Tay =0.96370.315 +0.969°0.314 +. + 1.926°0.629 nB ma79 3) Calculer b ¥ 5.77479 1155623, $x 1772305 - 15.556" b 0.32832 _x5.77895 115563.7657___. = 9.99989 Gar 30511556") x (SH 1BIGF 3 765°) El valor excede 0.98 4) Caleular dy Sa 53,165 0.52632 «11.556 .00075 IS TSIS TI _(O0OOITX 00143 e oa ono | — rage 00141 17.72305 ~ ee 5) Detecminaren ot ANCHO 20. Nyorsa.2 ycaleviar 16(B,) tosnse = 2440 563042.447 «0.00141 = 0.32208 0.32977 ICBy Was EverardTe rirtt rere tka Cree Et intervalo ne inctuye el cere. 6) Calaulare!timte de cusntificacién. ic = 1OR.0014S = 0044 pom 0.32632 410.4 CURVADE CALIBRACION BASADO EN LA DESVIACION ESTANDAR DE LA ORDENADAAL ORIGEN, A) FORMULAS PENDIENTE n= numero de mediciones yoncentvacion ~ respuesta anaitica }. GOEFICIENTE DE DETERMINACION Eye GE HEMOEA HEN) INTERVALO DE CONFIANZA PARA LA PENDIENTE. ICP) = 61 Hostsn-250. {antas Relaitse al Anexo 20, pars determina’ el valor de ia fee Student. DESVIACION ESTANDAR DE LA ORDENADAAL ORIGEN. [tlcCSTE ESL TCI Le ESE TS 8) PROCEDIMIENTO DE CALCULO. 1) Tabular los resultados: CANTIDAD ADICIONADA (x) - RESPUESTAANALITICA(y) - > | PLaceeo ANALITICO x(ppm) | (absorbancia) ADICIONADO 4 0.983 315 2 0.983 Oia 3 1268 oar [a 284 oats | 5 1.605 0.522 6 7 1926 ce [7 1.826 2) Caleular Ex, By, Det, By!, Day y determinar n Ex $0963 +0.963 +... + 1.924 58 Ly =0.315+0.314+ 765, Eats 0969" +0060» 1 99m = 47 72808 By #0319 +0104 o0420"= 188164 Biy=08600 395 +.9ev03« +. + 19900600-577473 é . S)Catasar ye { SxS TIA79 -11$86%3.705 9 599 > sas : (8x 5.77479 gases : ~ Goi 72305 —11.5564)x (8x1 8164 3.765) Elvalor es meyer de 0.99 1 Catevar, 8,95, J. 3.965 ~03260211.556 «goon ¢ {1.88164 -0.52632 «5.77479 - (0.00075) * 3.765 _ 9 oo 143, ' Sint fo : 4 0.00141 Sy) = 0.00643 | ———— or = 0.00 ‘ 17.72305 - 3GuIA DE'VALIDACION DE’ METODOS ANALITICO 5) Determinar en el ANex0 20. tygy.x ¥ Calculer 1C(P) toms ©2447 IC(P,) = 0.32632 + 2.447 x 0.0014 | = 0.32288 , 0.32977 Et intervalo no incluye el cero, 6) Caleuiar¥y 5, L356 HOSE a 1a ? 5 17.72305 7) Caleular el limite de cuantifcacién _ 10x 0.00210 “932632 0.054 ppmMMEFO de muestas ce a condicén Rormal de operacisn MEDIAARITMETICA DEL soatiS!S DE CADA CONDICIO DE OPERACION, DIFERENTE ALA CONDICION! NORMAL REERENCIAABSOLUTADE LA NeGDIAARITMETICA DE capa. CONDICION RESPECTO De La MEDIAARITMETICA DEL CONDICION NORMAL Fa 8) PROCEDMIENTO DE CALcuLo, 1) Tabular ios resultados, NS SRACION (%) DEL AMALino) ROBUSTEZ AL % 08 yy COMPONENTE DE Larage MOVIL DE UN METODG CROMATOGRAFIOG ConDIciON | 0.34% os NORMAL ALTA w 35, = 101.88 + 101.866 104 99 2h = 99.00 « 98.74% 99 39 308.13 97.07Guia De VALIDAcION DE MEétovos ANALiticos 3) Caleular ¥ 7, Te ‘i = _ 3044 Jia OS = 14887 — _ 305.13 a - _ 297.07 01.71 103.4667, = 0.2893 El valor no excede e! 2%. jy~ ¥oj #1990233 ~ 101 4667] = 2.4433 El valor excede el 2%, JCOTY ee Te es ANEXO 12. FORMULAS ¥ PROCEDIMIENTO DE CALGULO CON EJEMPLO PARA TOLERANGIA A) FORMULAS MEDIAARITMETICA: DESVIACION ESTANDAR: ace = [2 IE y) Von COEFICIENTE DE VARIAGION cv =<100 : F "= mero de nuestra de contenizo /poiencia /valoracion, B) PROCEDIMIENTO DE CALCULO, 1) Tabular los cesultados VALORACION DEL ANALITO TOLERANCIA DE UN METODO CROMATOGRAFICO A EQUIPOS muesTRA | CLART | GLAR? L oe #681 3851 | i aoe: 978 2) Cateular Sy, Dyy determinar , By = 9869+ 9851+. +98.11 89.08 2y? = 98.69" + 98.51 ++ 98.112 = 57e32,g908 nee 2) aleiorsy = 38208 § = 98.1787 6x6) 4) Caicular el cv: i 100 =0.46% El valor no es mayor de 2%.iar hee Ths Deak HL hh ANEXO 13. ACION DE“METODOS ANALITICOS (rere FORMULAS Y PROCEDIMIENTO DE CALCULO CON EJEMPLO PARA REPETIBILIDAD EN EXACTITUD PARA COMPARACION DE 2 METODOS ANALITICOS. A) FORMULAS VARIANZA n Dy Ste ne =i) Nota: Cateular la varianza de cada método y para fines de calcu'o det intervalo de convianza para la razon de varianzas, so debe establecer vatianza menor arianza mayor : St =Releritse al Anoxo 21, para determinar el valor de la F de Fighar iti 'son grados de bertad dela varianza mayor. que corresponden a los grados FoossactactY Fomsnota fea varianza menor. que de libertad del aumerador; y n,-1 son os gradas de liberal corresponden a los grados de libertad del denominador. \imere de recabros del métoco de varlanza menor. \imero de recobtes del método de varianza mayor. 8) PROCEDIMIENTO DE CALCULO. 1} Tabular los resultados: t% OE RECOBRO PLACEBO | anatitico | METODO A METODO 8 ADICIONADO. 1 103.22 400.08, 2 99.55 100.59 3 100.39 _ 100.22 4 99.11 99.97 5 100.19, 100.47 6 100.95 99.85ee eee 2) Caleular By, y* y deteminar n, para cada método anaiilico RECARO netObOK eTObOB Sy | TB eons TOE Too 08 710050... O0RST LTE yt [101.25 00.56. « 10008" Sonar saab | WOES Ta BB espe re [ 8 o cam 5 5 3) Calevlar la vatianza de cada metodo: Método A: 6 60287 5648 - 601.427 OG) Ste Método B. 6% 602366472 601.18" _ 9 ogag 6«(6-1) 4) Determinar la varianaa mayor (§,")yla varianze menor ($,2) 5) Determinaren eiAnex021 Paice 14. ¥ Foanea ag. 4 Fonssy +014 8) Calcular et intervalo de confianza para ta razén de varianzas: 0.6657 9 4c 03. 06457 0.0830 1?” 0.0830 El intervalo de confianza no incluye el valor de 1py 5) eat eet titi ot CIR eee FORMULAS Y PROCEDIMIENTO DE CALCULO CON EJEMPLO PARA REPETIBILIDAD ba EN LINERLIDAD DEL METODO PARA COMPARACION DE 2 METODOS ANAL Troe A) FORMULAS VARIANZA Not: Calva Ia varianza de cada mio y para nes de cle entra da cconfianza para pA CATE pes cete emer ah BRK Si varanza menor Si varanza mayor INTERVALO DE CONFIANZA PARALA RAZON OE VARIANZAS 5 Fase tnt st 3 « gp omarina Se FomsactanaY Fosisnna7 Relerise at Anexo 21, para deteuminar el valor de la F de Fisher. net son grados de libertad de la varianza mayor, que coresponden alos grades de erlad del numerador:y nt son os grados de libertad dela verianza menor que cotresponden alos grados de libertad del denominador 19, = niimero de recobros del método de varianza menor ‘y= nlimero de recobros del método de varianza mayer. 8) PROCEDIMIENTO DE CALCULD, 1) Tebular los resultados: METOBOA METDOO 8 CANTIOAD CANTIDAD CANTIDAD CANTIDAD APICIONADA | RECUPERADA | ADICIONADA | RECUPERADA (ma'o) (mola) __ (mofo) (mai) 40000 392.88 400.00 407.72 40000 389.88, 400.00 | 409.24 400.00 7397.72 400.00, 398.36 400.00 393.76 400.00 50000 513.65 409.00 | — 500.00 497.20 500.00 500.60. 494.00 | 500.00 [sono 489.00 500.00 | ‘55000 | 543.02 '500.00 550.00 535.15 500.00 550.00 545.82 550.00 550.00 534.58) 550.00 . a 550.00 fee 5350.00, 550.00Cry Tore UST ees 2) Calcular el porcentaje de rec ccociente dea cantidad rect ‘bro de cada muestra en cada método (y), al obtener ef uperada respecto de la cantigad adicionada eer ot t °.% DE RECOBRO . METODO A a METODOB fee es (902.881400.00)-100=9822 | ear 721400 00)'100 01.09 : ona? wet ‘ <. Se aa EO + VWeose! a ; 5 ie 99.9 ood 378 2 3650 Ep ag ie 37.0, err : a7 0.8 {ic enEersae iat 8.8 or18 i q 97.16 +3) Calcular Sy. Sy y determinar n, para cada método analitico: 2 METODOA aE | METODO 8 a] By 98.22 +9747 +. +97.46= 1h 101.93 + 102.31 +... + 97.31 = 14969118] Be | 822° 7A FOF e886 6S TOI WORST SO . a z 5 a ‘Caan ates aoe 2 Método A: a oo oix@2=y 1 Pn 5? ae 1910034061496 9118 ary * | =15x (ISH) 5) Determinar ta varianza mayor (8,2) ya varianza menor ( $,2) 2 I $2 = 22092 7 1 S? =26672 it : [assis 02] : = fetCIR eee rear ee 6) Determinar en et Ane 21 Foose iat) Foorsactact! Foasses 7032 5 Fomssai = 336 7) Caléular el intervalo de confianza para la cazén de varianzas: ' z 2.6673 2.6673 5 22372 2.23327" oe : 039225 <40b ol Elintervalo de confanza tncluye el valor de 1ecco Guia oe VaLipaciom DE MéTovos AN ANEXO 15, FORMULAS Y PROCEDIMIENTO DE CALCULO CON EJEMPLO EN EXACTITUD PARA COMPARACION DE 2 METODOS ANALITICOS. 1.0 COMPARACION DE REPETIBILIDAD DE AMBOS METODOS 1 FORMOLAS VARIANZA, i et rye con ‘Nota: Caloutar la varianza de cada método y para fines de ealculo del intervalo de ‘confianza para la raz6n de varianzas, se debe establecer: 82 varianza menor. S2 varianza mayor INTERVALO DE CONFIANZAPARA LARAZON DE VARIANZAS 1-1 son gradios de lbeitad de Ia varianza mayor, que Corresponden alos, ‘grados de libertad del numerador; y n,-1 son los grados de literad de la varionza menor, que corresponden a los grades de libertad det denominacor. 11, = niimero de recobros del método de varianza menor. 4 12, = mimero de tecobros det método de varianza mayor i Ol lh OP Las varianzas son iguales sien e! intervalo de confianza incluye la unidad. J 2.0 IGUAL REPETIBILIDAD (VARIANZAS EQUIVALENTES) | A) FORMULAS. : MEDIA ARITMEZICA DEL METODO 1: ae fae 9 Ee om ie Oe Sen me a : is ee i MEDIA ARITMETICA DEL METODO 2: 1% i \VARIANZA DEL METODO 1 I I nSeT-Ot I y I I I rh (a VARIANZA DEL METODO 2 bs : i A f sane :r ‘1 INTERVALO DE CONFIANZA PRRA LA DIFERENCIADE 2 MEDIAS POBLACIONALES. 7 : (m - DS? +(my -S2F 1 1 FOB — #2) = (51 Fa) Hannigan tN “a : T an ] e Way om} Suorenjona” Referise al Anexo 20, para delerminar el valor delat do Student 19, = bmero de recobros del método 1 'n, = nimero de recobs del metodo 2. 8) PROCEDIMIENTO DE CALCULO 1). Tabular os resuitados: : % DE RECOBRO 2 PeRecopro PLACEBO | ; ANALiTICO :{ METOBOA | MéToDOR ADICIONADO 7 98.72 a 2 101.58 3 98.44 4 ) fo So 7 ! [eee o7.16 I | 2) Calcular Sy, Sy" y determinar n. para cada Método Enalitico: isa METODO A ae METODOS “By $8.22 + 101587 + 9716559808 |" 107889056 +. + 9917 SOUT t Eyt__| 96224 104,58" + 97.76" = 900345401 | 101.93 + b0567+ + 99.1 B0Ses FOOT 1 a é nae 6 3) Coleular a varianza de cada método: Ps . | cal mes 0 OOF PRR icc a BE peri cca : - '. : 2 : gf = 839084 5401-59560" } : 6x(6-1) b ++ Método 8 Lo ‘ §2 = §* 60647 1991-603.17" _ 9 poig 2 6x(6~1) 4) Determinar fa varianza mayor (S,t ) ya varianza menor ($,?} ‘S} = 25044 +S} 324249 '5) Determinar en et Anexo 21 F, eo25et01¥ Foorstay) Foonss #014 Fassss= 7.15 ‘iey GuIA DE VALIDACION DE Stree 8) Caleular Ey, Zy.2, Zy,, By," y dotorminar n, yng i Bye 102.15 + 98.26 + .. +99.15 = 602.38 By,3= 102.15" + 98.26" +. + 99.15" = 60500.4108 | By, = 100.93 + 99.58 +... + 99.11 = 600.16 By3= 100.99 + 99.56" +... + 99.17 = n,26 n=6 9) Calculary,,¥2 10) Caleviar $2, $,% _ 60500-4108 - 602.38" si= 6x(6-1) gh = 67 600341916 600, - 6x(6~1) 11) Caleular gi. : ni 0437s] é é [46 0.4375 6 (‘I a] et 2620-6 42) Determinar en el Anex0 20 tyyy54. ¥ calcula ICU, Hh). loons = 2487 1%, ~ uy) = 100.3967 ~ 100.0267) +2.447, y Et intervato de confianza incluye et cero.CIE eter ett ee eee 2) Cateular Zy, By*y determinar n, para cada métado analitico: METODOA. METODO B. 102.18 + 08 26 +... + 99.15 = 602.38 100.93 + $9.56 +. + 99.11 = 600.16 102.157 + 96.26 + .. + 99.15" = 608004108 | 100.93" + 99.50" + + 99.117 = 60034.1916 6 é 3), Caleular la varianza de cada método: Método A: “6x6 Secon age" ges AME es 5) Doterminar on el Ancx0 21 Fy Foorsss 014 5 ‘ons 715 md Foarsactact® 6) Calcular el inlervalo de confianza para la razén de varianzas: ' $97 01050 AB vrs 04375 0} 0.4375 isos s 1467 Elinlervaio de confianza no incluye et valor de 1 7) Tabular otra vez os resultados: METODO 1 METODO 2 102.15 100.93 98.26 99.56, 100.65 100.40) ‘9851 99.78 103.56 100.37 38.15 88.11EQREWEie eee rear) FORMULAS. MEDIA ARITMETICA DEL METODO 1: vn 2 MEDIAARITMETICA DEL METODO 2: Ds Aad eeedscivcnri Ricoh 3 vari 1c not On) mom =H) ANZA DEL METODO 2 me ng (1 =I) Si Sp Me DVEG LD Eos | to? nimero de reeobras del método 1 sumer de recobres dol métoto 2 nl mal El valor de gl, debe ser redondeado al entero iamediato anterior. Admero de recobres del métode 1. aLimero de recabros del méiodo 2. 'B) PROCEDIMIENTO DE CALCULO. 3.0 DJFERENTE REPETIBILIDAD (VARIANZAS DIFERENTES). INTERVALO DE CONFIANZA PARA LA DIFERENCIA DE 2 MEDIAS POBLACIONALES, {eferirse al Anex0 20, oara delerminar el valor de la t de Student 1) Tabular los resulades: gw Recopeo | z PLACEBO/ANALITICO ADICIONADO| = METODO 1 METODD 2 1 402.18 100.93 2 92.25 9956 | 3 100.65 10040 _| 4 98.51 9979 5 103.66 100.37 @ 98.15 99.11 ee iFORMULAS Y PROCEDIMIENTO DE CALCULO CON EJEMPLO EN LINEALIDAD. DEL METODO PARA COMPARACION DE 2 METODOS ANALITICOS. 16:1 CANTIDAD ADICIONADA (a) VS CANTIDAD RECUPERADA (y) A) FORMULAS, SUMATORIAS. METODO 2 Ei subindice, indica la sumatoria del método respectiva PENDIENTE DEL METODO 1. = ndmero de mediciones (cantidad adicionada ~ cantidad recuperada) del método 1 PENDIENTE DEL METODO 2, ‘mimeo de mediciones (cantidad adicionada — cantidad recuperada) de! método 2. ORDENADAAL ORIGEN DEL METODO + ORDERADA AL ORIGEN DEL METODO2, Dh i = bri bo i+ baba htm —4i TTT INTERVALO DE CONFIANZA PARA LA DIFERENCIA DEAS 2 PENDIENTES i i IC(Bua~ Br) = Ou ~ Bin) hao. 20, -Shy 1 Donde: Referirse al Anexo 20, para determinar el valor de la t de Student : ‘ i . Ad ee ee. teat oy oa INTERVALO DE CONFIARZAPARALADIFERENCIADE LASTOROCNADAGAL Once IC(Bo ~ Box) = (bor 8) PROCEDIMIENTO DE CALCULO. : 1), Tabular tos resultados. (METODO A _ METODO B | euro | camo | eawono | enon ADICIONADA | RECUPERADA | ADICIONADA RECUPERADA (mg/g) * (mga) (rnaig) (maa) [000 "352.88 405.00 arr 40000) 399.88 400.00 409.24 000 397.72 400.00 398.36 400.00 393.76 400,00 | 405.60 50000 513.65 400.00 398.36 | s0000) 497.20 500.00 493.05 50000 494.00 500.00 511.00 2 50000, 489,00 55000 "543.02 560.00 535.15 55000 545,82 $00.00 7534.58 493.85 393.80 497.20, 534.48 545.10 550.17 e 551.93 535.21ek Ge” Ok et Ge” 6.9 GP O° 2 Oe P2VEEECI ee ee Cee determinar n,y 0, METODO 1 100.00 + 400.00 +... + 860,00 = 5800.0000. 100.002 + 400,008 +... « $50.00? = 2850000.0000 392.88 + 389.88 + .. + 534.38 = 5726:4600 = 992.882 + 389,88" +. + $34.38? = 2778528.1070 whet Bh = 400,095302.88 + 460.00°389 88.44% séex00'sae'3e = ner METODO2 Ds = 400.00 40000. + 59 007280 of00 TEs) = 40000" 40.00%. 88000 = asesoo oceo Soy tsar 725 s0924+ 5952 = 7206200 497.72? + 400.247 + + 595.24 Ae = €D0 00°C? 72 + aoc egraaE x n= 15 3) Catcular B.. Bye BY i... 13 3547309.0000 - 7250. 0000 x 7226.2600 15% 3562500.0000 - (7250,0000)? 5726 4600 - 0.9843» $800.0000 i = 1.4445 n 7226 7600 - 0.9321 7250.0090 Is = 31.2483 4) Calcular S, y Se, EB B Sy=7.8H0 i oe Eee 1 Sica, 273800) Lone -oassr 800.0000)" 99,0000. (7230.0000)" 2850000.0000- i 1s EE acacuar Ys Lt Dx Dy. Dot. Dow. Dn. LD Det DeEQIea neers PPE TScrrreeerieiere ys 5) Deteninar en el Anex0 20 gyn caleular 1 BB) oars = 2.068 ICBn~ Pra Et iniervato incluye el cero. (0.9843 0.9321) + 2.069% 0.0457 =-0.0423 0.1467 6 Caletar i, 9 Sra. : 5, = 800.000 493.3333 ra 09.2993 i MRR SR i ald at (483.3333) - (4833553)? a i 720.0000)" rsapmnoieo- SHEA sgn. 2800 Syyeng = 22.2581 1) Cateular1C(B, Ba ICCBay - Bor 1A445 — 31.2483) 42.0699 2 1 = 75.8482, 16 2408, El intervaio incluye et cero, 16.2 PORCENTAJE DE RECOBRO. _ 1.0 COMPARACION DE REPETIBILIDAD DE AMBOS wETODOS AV FORMULAS \VARIANZA, 2 UP -Or ye n(n i + Nota: Caicular la varianza de cada mélodo y para fines de calculo de! intenvao de conianza para la razén de varianzas, se debe establecer 8} vasianza menor, S? varianza mayor INTERVALO DE CONFIANZA PARA LA RAZON DE VARIANZAS ? FeorsatinY Faansa,-1n, 1 Referese al Anexo 21, para determinar el valor de la F de Fisher, son'grados de ibertad de ta varianza mayor. que comrespondenia los grados de libertad del numarador. y n,-1 son los grados de libertad de la vatianza menor, que Cortesponden a os grados de libertad del denominador 1810 de recobros de! método de varianza menor. 1,= nero de recobros del método de varianza mayor. Las varianzas son iguales si en el intervalo de confianza incluye la unidad. Sites varianzas son iguales desarolle el punto 2. Silas varianzas no son equivalentes desamolle el punto 3.Cares CR eee 2.0 IGUAL REPETIBILIDAD (VARIANZAS EQUIVALENTES). A) FORMULAS, 7 MEDIA ARITMETICA DEL METODO 1: Dr MEDIAARITMETICA DEL METODO 2: : VARIANZA DEL METODO 1 SB ded xh Olay aie “ alm 1) VARIANZA DEL METDDO 2 gm) ns(m 1) INTERVALO DE CDNFIANZA PARA LA DIFERENCIA DE 2 MEDIAS PDBLACIONALES, FOUN Hd WN Muarsyen dO ens® Referirse al Anexo 20, para determinar el valor de tat de Sludent iméro de recobros del método 1 1, = numero de recobros de! métogo 2 3.0 DIFERENTE REPETIBILIDAD (VARIANZAS DIFERENTES}. FORMULAS, MEDIAARITMETICA DEL METDDD 1 MEDIA ARITMETICA DEL METDDO 2: VARIANZA DEL METODO 1 : 4 _ mit =D) VARIANZA DEL METODO 2tl -eavsto OF CONFIANZAPARALADIFERENCIADE HEDIS fstacinnies i foun - Ha) } I tony # Referise al Anexo 20, para determina el valor de a t de Student. Fi Va) ogtsst - he omg dobe ser redcndeado al entero inmediato anterior. w-ecadvos el metodo 4 I ‘nersfos del mélodo 2 t 8) PROCEDIMIENTO DE CALCUL : CANTIDAD ADICIONADA ~ CANTIDAD RECUPERADA - % DE'RECOBRO EN ‘tl : ANBOS ME TODOS | we ToDoa METOOO 8 | GanTioAD [CANTIDAD %DE | CANTIDAD. “| CANTIDAD | woe I ADICIONADA .! RECUPERADA*, RECOBROY) | ADICIONADA | RECUPERADA | RECOBROYy) (mag) i tena) (a) (mola) | i ; cae baci ae as om | sea.8s. 9322 | __ 400.00 407.72 101.93 | 40000 369.68 | 97.47 “400.00 409.24 70231 [000] 397.72 99.43 200.0, 396.36 [99.56 ) 700007 9376 | 88.8 200.00 08.60 101.40 500.00 513.65 10273, 00.00 398.36 39.59 ee ee £000 494.00 98.80 500.0) 311.0 102.38 I (seo00 40.00 37.80 500.00 495.65 | | | 55000, 543.02 98.73 50.00 383.80 98.76 55000 535.15 37:30 500,00 457.20 29.44 I (T000 545.82 99.28 55000, | s34aa_ [97.38 | 55000 534.38 97.16 550.00) 545.10 93.11 550.00 550.17 100.03 : 350,00 551.93 100.35 | 350.00 535.21 9731 I Y= Es el cocionte porcentuat de la catidad recuperads respecto dela cantitas | adicionada, . i 2) Caleular By, Zy* y determinar n, para cada método anal:CHIPSET eee ee eee eee TS Lape INTERVALO DE CONFIANZA PARA LA DIFERENCIA DE 2 MEDIAS PODLACIONALES. ‘ es ‘ GHD Elomsr | ene ™ 3 zi {ua # Releritse at Anexo 20, para determinar el valor delat de Student. eae : vi debe ser reddadeado al entero inmodiato anterior 1 recabron del metodo 1 “os 9sfos del metodo 2. 8) PROCEDIMIENTO DE CALCULO. 1) Tabular fos resultados - CANTIDAD ADICIONADA ~ CANTIDAD RECUPERADA. % DE RECOBRO EN * = _AMBOS METODOS METODOA «dd METODOB. «Sd i Gannibad | canTioan %0E canTioad | CANTIDAD | moe ADICIONADA | RECUPERADA | RECOBROYy) | ADICIONADA | RECUPERADA | RECOBROW) ‘moi "| (mo) (00) (roi) | ao | saa | 9822 | a0000 aor72 | 193 ‘eon eee a a ce wat 000 3772 30.43 200.00, 390.5 | 9856 0.00 39376 oB.aa 200,00 40560 01.40 [0000 513.65 102.73 400.00 398.36 99.59 50000 49720 | __ 90.44 500.00 495,95 38.79 50000 #9400 98.80 500.00 511.90 102.38 50000, 289,00 7,80 500.00 493.85 on77 | 5000 543.02 8.73 500.00 390.00 98.76 55000 535.15 97.30 500.00; 497.20 99.44 5000 545.82 2934 550.00 53449 97.18 | 5000 53438 9116 5500 545.10 | 90.1 550.00, ssa7 100.03 580.00 551.99 300.35 a 550.00" 53521 97.38 Y= Es et cociente porcentual de ts cantidad recuperada reapecto de la cantidad adicionada . | 2) Calcular By, By" y determinar n, para cada método.snatitico:tn i Guia ve VALIDACION DE Métovos Awatiticos i . re T METOOOA METODOB : Sy TL Sama sraT +... 97A6= 1168,7609 | 10193> 10231 1496.9118 Bye] bea a7ar +. + 97-167 1169960999 [104 149420:3404 a at 2 5 . 3) Calouar la varianza de cada métoso : Métodon: 125116996,0999 - 184.760: z os : 12x(12=1) Ach Eh AR wot Bin oe alee 496.9118" v 1 4) Determinar fa vardnza mayor (S,?) y13 varianza menor ( S.") 22332 26672 1 5) Determinar en el Anexo 21 F, yF, I 2 Forsren 338 > 6) Calcular el intervaio de confianza para la tazon de varianzas, Et interalo de contianza incluye el valor de 1. 10 que indica que las varianzas son iguales, por lo que es necesario desarrollar el ejemplo con base al punto 2 PSTSE TE 7CIE eee ys Pee 7) Tabular otra vez fos resultados: ‘% DE RECOBRO EN AMBOS METODOS METODOA METODOB AaLinco oe (atancos) | RECosROW) 98.22 101.93 i “ war [wea a} , ee we % 4 Et FT eg aR gE] He [asa i040 T2738 3.59 tt 38.79 t 98.80 102.38 3780 3677 | 3e73 9876 soe veut 97.16 Ce 99.11 i ‘003 10035 —] | ort 8) Caleuiar Ey, By,1Ey,.2y,? y determinar ny nz Zy.= 98.22 + 97.47 +... + 97.16 = 184.7609 98.22 +97.47° +. «97.16"* 116996,0999 101,93 + 102.31+....+97.31 = 1496. 91118, EyP= 101.93"+ 102.31" + .. + 97.91" = 149420.3404 ' na 12 8 9) Caleular 9, y¥,: 1184.7609 2 98.7301 ws S18 «69-7901 * ee ce oeCRIee eee Ct ee ee 10) Calcular Sy $2 » » y 2 12% 116996,0999-1184.7609" _» >999 12x(12-) I ’ oe 15x05-1) 11) Determinar en el Anex0 20 brn _yeatular CitcHt. , fagnszs = 208 6° Got ile. Wades xe eta aed » Cu, =, a i Seg Noa a eee » Entervao de confanzainclye 2 cero fl » Q izSEE eee Eee CTS eC ea ees = ¢ > ers ANEXO 17, FORMULAS Y PROCEDIMIENTO DE CALCUL CON EJEMPLO EN PRECISION DEL METODO PARA COMPARACION DE 2 METODOS ANALITICOS, AVFORMULAS VARIANZA nan =I) Nota: Calcula' tz varianza de cada método y para fines de caleulo del intorvalo de BRRITE 2 9p ce vasancas, so goog guna, 4 “ie vvatianza menor varianza mayor "NTERVALO DE CONFIANZA PARA LA RAZON DE VARIANZAS Pants SEE Ree tnt : os; Frccss a Fnansactq = Referrse al Anexo 21, para determinar of valor dela F de Fisher n.-1 son grados de libertad de la vananza mayor, que corresponden a los grados Ge Deas del mimeradr, yt sonios grades de eeind Sats sonore en ‘eovesponden alos rados de Weriad det deromieaen wimero de muestras analizadas del método de varianza menor. 7, = nlinnero de muestras anatizadas del método de varianza mayor, 8) PROCEDIMIENTO DE CALCULO. 1), Tabular ios resultados: MéTODO 2 ANALISTA 1 49.25 : 1 [46.22 a < < 4825 52.92 é 6 asa 2 2[__ 78.22 52.25 Bie | ga40mn 2 ‘ Ac AR AEs SK ; : ~ | 2) Calcular Ey, Sy* y determinar n, para cada método anaitco: METODOA METODO 6 zy 49.85 + 50.85 +... + 50.30 = 608.09 49.25 + 46.22 +. + 53.40 = 601.50 2 2 2) Calorie atone de cca muioda | Método 7 : 30819.6067 - 608.09" _ 9 sng | i 12x(12=1) é Método B>* # _ hes ben wih osu Weds Hs a Me Oe 1 a“ nl osha A Laine 12x(12-1) : 0 684 J ‘ 98795 : 5) Determinar en et Anex021 Foie, 5¥ Faacen san k 1 tat 70.28 ' ! Fesesun3 347 t : I ! 6) Caloular et intervalo de confianza para la razén de varianzas: L 0.4684 of | 04684 L tore ers26 i E oF L intervie de conanza no inte valor ce i ; i 2 * h =COTEM eee et ee eee eee eye FORMULAS ¥ PROCEDIMIENTO DE CALCULO CON EJEMPLO PARA PROPORCIONALIDAD DE METODOS EN ESTUDIOS DE CORRELACION PARA, COMPARACION DE 2 METODOS ANALITICOS. eas A) FORMULAS » PENDIENTE . nyy- dy , : nye -Oox) afi. x BEF 9 estas aplzptgaconal ne ‘ORDENADA AL ORIGEN ro Ero tro oro vO Lv 9F0 S¥0 S¥O SrO mre rrO Ero EO ZrO vO 90 9¥0 sro sy'0 smo FO HO Ero ZrO aro $79 970 RO S¥O S¥O Pro yO Gro EO ZrO zed 70 970 SO S¥O yO vyO Ero Cro Zr0 ero iFD S70 S70 Sy ¥rO FrO vrO EPO crO ZrO ZrO IFO SO S70 brO FyO yrO EO Er ZrO ZO LPO tro S¥O br0 Prd yrO Ero Evo ZrO ZrO IYO LPO Oro vO YO Pro erO eYO ZrO ZrO IyD IFO oF oro pro G¥0 EPO erO ZrO ZrO LvO IPO WO oo BO. ty 1¥0 OF0 oro Geo or oro, or'o aco Be0 ovo seo ‘se'0 80 geo ee0 se eco eo LEO 80 e880. LO LO LEO 460 460 Le seo 8F-0 6 980 960 sC'°0 seo cco e sco st0 v0 Feo HO Z veg fe C80 ceo ze0 9 z0 %0 io 10 1e0 8 00 oso Bz0 Bro 6z0 ’ a0 220 120 sz0_9z'0 £ TOPEUT WATER TS] He of gz ez 2 ez see ez zzz | sopeoumu® {uorzenunuog) #8 ME sey arery seenERIEarr erat reir! Seer ree eee Cit O18 0.18 O713 aT 35 ize ERIE ee ere ee ANEXO 22, COMENTARIOS RESPECTO ALOS CALCULOS Y REGLAS DE REDONDEO. 3 ‘Todos fos célculosllevadas a cabo parten de ls resultados de manera tabular, los cuales se denominan dalos pavios. a En el caso del % de recobro, por omisién 1s calculos se redondearon a 2 decimals. Los calculos segin las formulas, fueron llevados a cabo con una hoja de calcul; y se reportan hasta 2 decimales mas de los datos primarios. Puede ser ‘que al verifcar los célculos con ayuda de una ceculadora de boisilo, estos puedan deride los aqui reportados, ya que lahoja de call efectia las cperacones hasta con una precision de 15 decimals. Se sugiete que en os cdlculos que usted lee a cabo al analizar los dalos primaros y legue a ublzarcalodadora de slo, como minimo manejo 4 decimaies mas que et dels dates rimarios y que el resutado final, fo redondée como ais Bic aes” ~? oe a x2 RTE le cae es cs ‘al decimal aredondear, al cual vamos a defnir como X Por ejempio, si se va a redondear a3 decimales, x vale 3. 2) + Détexminar en of vaior, el decimal Xt. En nuestro ejemplo corresponde al decimal 4 3) Determinar el valor del decimal X+1 dal nimero. Por ejemplo el nimero 3.23456 El valor del decimal 4 de esle nimero es 5. 4) Siel valor dol decimal X+1 es 5:0 mas, el decmal X se redondea al squiente entero o sie valor del decimal X+1 es 4.0 menos, el valor del decimal X se mantene. En nuestro ejeiplo ya que el cuarto decimal es 5, el valor de! decimal 3, que en este caso es 4, se redondea al siguiente entero, por lo que el nimnero 3.23456, se redondea a 3.235, considerando redondear a 3 decimaes. , Ejemplos: 102.6731 redondeando a 2 decimals es 19267. 192.6761 redondeando 2 2 decimals os 10268, (0050 redondeano a 2 decimales es 0.01 0.0041 resondeanco a 2 decmales es 0