FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADEMICA DE TECNOLOGIA MEDICA EN LABORATORIO CLINICO Y

ANATOMIA PATOLOGICA
DIAGNSTICO MICOLGICO DE LAS MICOSIS SISTMICA Y OPORTUNISTA QUE
AFECTAN AL HOMBRE, EMPLEANDO PROCEDIMIENTOS MICROBIOLGICOS
ESTANDARIZADOS CORRESPONDIENTES PARA CADA CASO E INTERPRETANDO
ADECUADAMENTE LOS RESULTADOS OBTENIDOS
Docente de la Asignatura: Lic. Roberto Rojas L.
Estudiante:

Arrieta Calderon Ruth

Acua Roca Gerson
Davila Huertas Dante
Delgado Francesca
Flores Tito Kerly
Hurtado Quispe Melina

INTRODUCCION
Los principales agentes son: Candida albicans y otras especies de levaduras, Complejo
Cryptococcus neoformans, Pneumocystis jirovecii, Nocardia asteroides (bacteria
filamentosa) y otras especies de Nocardia, hongos miceliales hialinos (hialohifomicetes) y
de micelio coloreado (feohifomicetes) Las micosis endgenas son aquellas en que el
agente causal reside normalmente en piel o tracto digestivo del hombre (comensal) y de

all invade el resto del organismo. Esto ocurre cuando se produce la ruptura de la
integridad del revestimiento cutneo mucososo del hospedador o disminuye la resistencia
local y/o general permitiendo el ingreso a circulacin, el principal agente que utiliza este
mecanismo es C. albicans. Las micosis exgenas son aquellas en que el agente causal
reside en el medio ambiente y adems de una puerta de entrada generalmente
respiratoria, necesita de una disminucin de las defensas del hospedador. Los principales
agentes son Aspergillus fumigatus y otras especies de Aspergillus. En los cuadros
siguientes se esquematizan las entidades clnicas causadas por los agentes de micosis
sistmicas, la puerta de entrada y localizacin
Micosis oportunistas Constituyen un grupo muy heterogneo de enfermedades que tienen
en comn la situacin del paciente, la gravedad y la relativa dificultad de diagnstico. Por
otra parte, el diagnstico etiolgico es muy importante, pues la respuesta a los distintos
anti fngicos vara con las especies implicadas.
Algunas de estas infecciones se diagnostican con ms facilidad, porque los hongos crecen
en abundancia de muestras accesibles, como ocurre en la infeccin por Penicillium
marneffei, mientras que otras requieren procedimientos muy invasores y cierta dosis de
fortuna

CRIPTOCOCCUS NEOFORMANS

Cryptococcus neoformans es un hongo encapsulado que puede vivir tanto en

las plantas como en los animales. Su teleomorfo es Filobasidiella neoformans, un hongo
filamentoso que pertenece a la
clase Tremellomycetes. A menudo se

encuentra en

los excrementos de palomas. Este hongo

monomrfico

se transmite por inhalacin a partir de los

excrementos.

En el hombre puede ocasionar criptococosis

pulmonar y

neumona aguda atpica. El principal problema

clnico que

generan son las meningitis.

Cryptococcus neoformans crece como un hongo(unicelular) y se replica en ciernes. C.

neoformans

hace hifas durante

el

apareamiento,

y,

finalmente, crea basidiosporas en el extremo distal de las

hifas antes de producir las esporas. Bajo las condiciones
pertinentes de anfitrin, incluyendo glucosa baja, suero, 5%
de dixido de carbono, y bajo contenido de hierro, entre
otras, las clulas producen una
cpsula

polisacrida

caracterstica. Cuando se cultiva

como

una

levadura,

neoformans

tiene

una

prominente

compuesta

C.

cpsula
principalmente

por polisacridos.

Microscpicamente, la tincin con tinta china se utiliza para

una

fcil

visualizacin

de

la

cpsula

en

el lquido

cefalorraqudeo. Las partculas de pigmento de tinta no se

introduce la cpsula que rodea la clula de levadura esfrica, resultando en una zona de
aclaramiento o "halo" alrededor de las clulas. Esto permite la identificacin rpida y fcil
de C. neoformans. Para la identificacin en el tejido, tinte mucicarmn proporciona una
tincin especfica de polisacridos de la pared celular de Cryptococcus neoformans.
Es curioso, pero crece rpidamente por exposicin a la radiacin tal como radiacin
gamma. La radiacin parece aumentar la capacidad de transferencia de electrones de
la melanina en los hongos, aumentando su actividad metablica total.
Diagnstico
Las caractersticas de diagnstico son difciles de distinguir, como resultados visibles,
como las lesiones de la piel, pulmonares, seas o visto en rayos X tambin son
caractersticos de la histoplasmosis, toxoplasmosis, y la tuberculosis. Una tomografa
computarizada o una resonancia magntica del cerebro pueden mostrar reas de posible
infeccin, aunque muchas otras enfermedades presentes hallazgos similares tambin. Las
pruebas serolgicas de lquido cefalorraqudeo puede ser utilizado si se sospecha que el
paciente tiene una infeccin. El diagnstico definitivo depende de aislamiento del hongo a

partir de tejido del paciente o fluidos corporales o la identificacin a partir de muestras de

biopsia de tejido. Un anlisis ms detallado, tal como PCR, puede distinguir si la infeccin
es causada por C. neoformans o C. gattii.
Si la infeccin progresa a la meningitis , ms caractersticas de diagnstico estn
presentes. Estos incluyen ms rpido de la frecuencia cardaca ,
la fiebre , cambios de estado mentales y rigidez en el cuello . Si
se sospecha de meningitis, una puncin lumbar es una prueba
importante para la extraccin de una muestra de lquido
cefalorraqudeo para su posterior inspeccin.
Cultivo.
Cryptococcus neoformans/C. gattii son fciles de cultivar en los
medios convencionales (Sabouraud dextrosa, malta dextrosa,
papa dextrosa), adicionados con cloranfenicol y sin cicloheximida. Los cultivos se
mantienen a 30C y a 37C, al menos durante una semana. El cultivo levaduriforme es
inicialmente blanco, pero posteriormente se torna beige y marrn-amarillo. Si las
levaduras poseen grandes cpsulas, esto se ver reflejado en la presentacin de una
morfologa colonial de aspecto brillante, mucoide y escurrente; por el contrario, si el
material capsular es escaso, la morfologa macroscpica se traducir en colonias secas y
opacas. El medio de Nger (Staib agar), es aconsejable como primocultivo, sobre todo en
los casos del aislamiento del hongo a partir de especmenes muy contaminados, como
esputo o materia fecal. En este medio, las colonias de C. neoformanscrecen de color
marrn obscuro, distinguibles de otras levaduras como Candida spp, Trichosporon spp
o Rhodotorula spp.

Cryptococcus neoformans.
Cultivo agar dextrosa
Sabourau

Cryptococcus neoformans. Derecha: Ureasa +

Bioqumica.
C. neoformans/C. gattii, comparten con el resto de los miembros del gnero, las
siguientes caractersticas: son levaduras ureasa positivos, no reductores de nitratos a
nitritos, no fermentadores de azcares, pero son las nicas especies que crecen bien a
37C y manifiestan la presencia de laccasas (productoras de melanina) cuando crecen
sobre sustratos que contienen compuestos polifenlicos como el agar Nger o el agarDOPA. C. neoformans se diferencia con facilidad de C. gattiipues en agar CGB es sensible
a la L-canavanina y no utiliza la glicina como nica fuente de carbono y nitrgeno, asimila
la D-prolina y sus ureasas son resistentes a la accin del EDTA; C. gattii presenta las
propiedades inversas.

Crecimiento en agar Nger a 25C.

Se observa produccin de pigmento
melnico que da un color marrn
Crecimiento en agar CGB (canavanina-

obscuro a las colonias de C. gattii y

glicina-azul de bromotimol), til para

C. neoformans.

diferenciar a los agentes etiolgicos de la

criptococosis: C. neoformans (Cn)

Pneumocystis jirovecii
Es una enfermedad cosmopolita y afecta principalmente a pacientes
inmunocomprometidos, sobre todo

a aquellos

infectados por el virus de la

inmunodeficiencia humana (VIH).

Aunque

usualmente el hongo se encuentra

restringido a los

pulmones, se ha demostrado su

presencia en

rganos como ganglios linfticos,

bazo, hgado,

mdula sea y corazn.

Agente etiolgico
Pneumocystis jirovecii es un hongo ubicuo, unicelular, extracelular, que difcilmente se
desarrolla en cultivos celulares y no es cultivable en medios sintticos. Muestra marcado
estenoxenismo, es decir, existe una alta afinidad entre el hospedero y el microorganismo
parsito. Una caracterstica estructural de inters y que lo diferencia del resto de los
hongos, es la presencia de colesterol en la membrana celular. La ausencia de ergosterol
explica su resistencia natural a la anfotericina B y a los azlicos.

Morfologa:
En P. jirovecii se distinguen

principalmente

dos morfologas: formas qusticas (quiste/asca) redondeadas de 4 - 6 m de dimetro, de

pared gruesa rica en beta-1,3 D
contienen hasta ocho formas trficas
ameboides, mononucleadas, de
dimetro, con filpodos -

glucano, que
(trofozoto/ascospora)
2 - 8 m de
prolongaciones

finas de su citoplasma, pero ssiles.

Aunque el proceso de transicin
ambos estados incluye otras formas,
consideradas secundarias. La

entre
stas son
microscopia

electrnica de transmisin ha permitido distinguir tres tipos sucesivos de formas qusticas:

precoz, intermediaria y tarda,

las que pueden

ser reconocidas segn el

nmero de

ncleos, de 1 a 8 y la

estructura de

su pared celular. Se ha

observado la

formacin del complejo

sinaptonmico

en el ncleo de las formas

qusticas

precoces, caracterstica que

apoya la

existencia de un ciclo sexual.

Ciclo de vida de P. jirovecii, as como las formas infectantes para la transmisin de la

enfermedad, no han sido totalmente comprobadas. El cultivo en medios axnicos, ha
demostrado que las formas qusticas se diferencian en formas trficas las cuales son

incapaces de revertir a quistes; sin embargo, cuando animales de experimentacin son

inoculados con formas trficas puras, estas son capaces de producir quistes y viceversa.

Taxonoma.

Reino:
Filo:

Fungi
Ascomycota
Subfilo: Taphrinomycotina
(Archiascomycotina)

Clase:

Pneumocystidomycetes
Orden: Pneumocystidales
Familia:

Pneumocystidaceae
Pneumocystis
carinii, wakefieldiae

Gnero:
Especies: jirovecii,
murina y oryctolagi

Manifestaciones clnicas.

Diagnstico.
- Pruebas de laboratorio clnico.
La determinacin de LDH srica es un examen sencillo, de bajo costo y rpida ejecucin,
que puede emplearse como indicador en el diagnstico de neumocistosis aunque el
resultado no es especfico.
Diagnstico microbiolgico:
P. jirovecii no es cultivable in vitro. La base para el diagnstico de la neumocistosis es la
visualizacin de las formas trficas y qusticas de este patgeno en las muestras
obtenidas de los pacientes. Los productos tiles son lquido de lavado broncoalveolar
(LBA), esputo espontneo o inducido y la biopsia pulmonar o de otro tejido en caso de
sospecha de una infeccin extra-pulmonar. Para las pruebas serolgicas, es necesario
solicitar una muestra srica del paciente.

- Examen directo
La muestra se deposita sobre un portaobjetos con una gota de blanco de calcoflor
(solucin del fluorocromo) y una gota de KOH 10%; se mezcla y se coloca el cubreojetos.
La preparacin debe ser observada en un microscopio de fluorescencia. Esta tcnica

contrasta los elementos micticos con gran claridad, debido a la unin del fluorocromo
con la quitina de la pared fngica de P. jirovecii.
-

Frotis e histopatologa

Las preparaciones fijas de extendidos (frotes), las citologas o los cortes histolgicos,
deben ser teidos con tinciones como azul de toluidina (muestra afinidad por los
componentes de la pared de las formas qusticas, colorendolas de violeta rojizo), Giemsa
(identifica tanto formas trficas como qusticas, coloreando los ncleos de rosado los
ncleos contrastando con el azul que adquiere el citoplasma) o Gomori-Grocott (que tie
de color marrn oscuro la pared de ambas morfologas) (Fig. 3) y es una tcnica
considerada de referencia para la identificacin de P. jirovecii en los lquidos bronco
alveolares.

Serologa

Inmunoflorescencia
directa en busca de
tcnica se utilizan anticuerpos monoclonales

antgeno. Para sta

especficos unidos qumicamente

a una sustancia fluorescente (marcador), creados contra determinantes antignicos de la

pared de ambas formas de P. jirovecii. Cuando los anticuerpos marcados se unen a los
parsitos,
la reaccin
antgeno-anticuerpo
(color
y
Tincin
de Grocott
plata metenaminafluoresce
en citologa
deverde-manzana)
lquido
consecuentemente
seSe
considera
Tienede
una
sensibilidad
cercana a 100% y una
broncoalveolar.
observa positiva.
la presencia
formas
trficas,
redondeadas
y uninucleadas
de pueden
Pneumocystis
jirovecii. cruzadas con antgenos
especificidad
alrededor
del 96% pues
existir reacciones

de Aspergillus spp. Y Paracoccidioides brasiliensis.

Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).

Es la tcnica ms sensible y especfica. El gen mtLSU rRNA es uno de los ms usados

como diana atractiva para fines diagnsticos, de epidemiologa molecular y seguimiento
de la terapia aplicada a los pacientes. Recientemente la utilizacin de la reaccin en
cadena de la polimerasa en tiempo real de muestras clnicas y tejidos, facilita la obtencin
de un resultado en menos de 3 h, reduce la posibilidad de contaminacin en las muestras
y el mtodo posibilita cuantificar la carga del patgeno, lo que facilita la identificacin del
estado de colonizacin/infeccin en los pacientes.
Comercialmente se encuentra disponible la prueba de PCR en tiempo real que amplifica el
gen de la subunidad ribosomal mayor del RNA mitocondrial (mtLSU) de Pneumocysistis en
muestras pulmonares (mnimo 3.5 copias/l), teniendo una sensibilidad y especificidad del
100%.

Estudios de gabinete.

- Radiologa. En la radiografa de trax se observa un patrn retculo-intersticial bilateral

difuso que inicia con opacidades centrales o perihiliares, con predominio en lbulo medio
o inferior; suelen ser simtricas. Entre 5 y 35 % de los casos pueden tener quistes con
paredes finas o neumatoceles, pueden ser mltiples y se localizan en los lbulos
superiores. Es posible que estos quistes se desarrollen durante el tratamiento y logran
persistir a pesar de la curacin, adems pueden predisponer a que aparezca un
neumotrax.

Se pueden observar imgenes

atpicas como

infiltrados unilaterales o localizados,

lesiones

nodulares o cavitarias. Entre 10 y 39

% de los casos,

la radiografa de trax puede no

mostrar

alteraciones; esta caracterstica se

asocia con un

mejor pronstico de la enfermedad.

- Tomografa Axial Computarizada

de alta

resolucin (TAC). Es ms sensible

que la

radiografa de trax para el

diagnstico de la

enfermedad, con el hallazgo

tpico de

opacidades en vidrio

deslustrado,

bilaterales, que suelen

aparecer

acompaadas de mltiples

neumatoceles.

FEAHIFOMICOSIS
Es un conjunto de enfermedades clnicas, causada por una variedad de hongos
dematiceos. Estos se componen de elementos levaduriformes, seudohifas, hifas
moniliformes, o hifas regulares. En ciertos casos, la naturaleza dematicea de los
elementos fngicos no es evidente en los cortes de tejidos y solo se revelan mediante
cultivo. Los hongos implicados son dematiceos en alguna parte de su ciclo vital.
Etiologa, Ecologa Y Distribucin
Todos los agentes etiolgicos son formas del suelo, relacionadas con detritus vegetales, o
agentes de enfermedad de plantas. Se pueden aislar de hojas de pino, de invernaderos,
cortinas del cuarto de bao, etc. La distribucin de la enfermedad depende de la entidad
clnica especfica de que se trate. Generalmente los pacientes son trabajadores rurales

que sufrieron algn traumatismo en la piel, con astillas, espinas, ramas, etc. La proporcin
de varones: mujeres fue 23:1. Su distribucin es mundial.
Cuadro clnico de Feohifomicosis y agentes etiolgicos ms frecuentes
I-Feohifomicosis superficial: Representa la colonizacin del estrato crneo de la piel o del
tallo piloso.
1- Piedra negra: Piedraia hortae
2- Tia negra: Hortaea wernekii, Stenella araguata
II- Feohifomicosis cutnea
Representa colonizacin y proliferacin en tejido queratinizado, son crnicas y de duracin
prolongada.
1-Dermatomicosis feomictica: Scytalidium synan de Hendersonula toruloidea, y otras
especies de Scytalidium.
2- Onicomicosis: Scytalidium synan de Hendersonula toruloidea, Pyrenochaeta unguishominis

I-Feohifomicosis Superficial
Piedra negra:
Es una infeccin fngica del tallo piloso, caracterizado por la presencia de ndulos finos e
irregulares constituidos por elementos fngicos, mantienen unidos por una sustancia
cementante.
Se observan infecciones mltiples en el mismo pelo. Causada por Piedraia hortae
(estrelacionado con los Ascomycotina).
Etiologa, Ecologa Y Distribucin
Piedraia hortae est relacionada con Piedraceae una familia del orden Dothideales, de los
Loculoascomycetes.La enfermedad se manifiesta en las zonas tropicalesde Sudamrica, el
Lejano Oriente y las Islas del Pacfico, pero solo de manera espordica en Africa y en el
resto de Asia. La fuente de infeccin es el suelo.

Manifestaciones Clnicas
Los ndulos de la piedra negra son costras arenosas, duras de color pardo a negro, que
varan en tamao, desde microscpicas a varios mm. La infeccin comienza debajo de la
cutcula del tallo piloso. La masa crece encima y por fuera del cabello y envolver
completamente el tallo. En un ndulo maduro, la periferia est compuesta de hebras
hifales alineadas; en tanto que las clulas de la zona central estn juntadas con sustancia
de cemento para formar una masa seudoparenquimatosa que se asemeja a un tejido
organizado.
Identificacin de laboratorio
Examen directo
Con KOH al 10%, se observa un estroma compacto, de clulas romboidales de paredes
gruesas y de hifas mantenidas juntas por sustancia de cemento. El corte de un ndulo
revela los ascos dentro de lculos encajados en el estroma celular. Hay 8 ascosporos
fusiformes, curvados (30x 10 um) cuyos extremos se prolongan formando filamentos
espiralados
Cultivos:
Crece en agar-Sabouraud glucosa, lactrimel, juice V8 a 25C. Sus colonias son pequeas,
de color pardo oscuro a negra. En el medio se puede ver un pigmento rojo herrumbroso. El
examen microscpico revela hifas de paredes gruesas, tabicadas en tramos estrechos,
clamidoconidias y clulas hinchadas, irregulares. En el centro de la colonia se pueden
encontrar lculos en los cuales se desarrollan ascos. Los lculos globosos a ovales son de
300 a 60 um y sin pared. Ellos se abren a la superficie con un poro ostiolar. Cada lculo
contiene una o rara vez ms ascos que miden 30 a 60 um. La pared es evanescente, los
ascos son fusiformes, curvados, con un apndice.
Piedra Negra

Tia Negra
Es asintomtica, superficial, del estrato crneo, caracterizada por mculas no escamosas
de color pardo o negro. Las lesiones se manifiestan en palmas de manos, en las plantas
de los pies y en otras superficies de la piel. El agente etiolgico es Hortaea wernekii, es un
blastomicete aneldico dematiceo.
Etiologa, Ecologa Y Distribucin
Se observa en zonas tropicales y subtropicales de diversas partes del mundo. La mayora
de los casos en Amrica del Sur provienen de Brasil pero se encontr en Argentina. Se
aisla del suelo, de la arena del mar y de varias plantas. Se presenta en cualquier edad y
las mujeres son afectadas en una proporcin 3 a 1 con respecto a los hombres.

Manifestaciones Clnicas
Las lesiones son mculas indoloras. Estn bien delimitadas y suelen ser nicas, con
pigmentacin ms oscura. Sitio de infeccin: palmas, plantas de pie, cuello y trax.
Identificacin De Laboratorio
Examen Directo
Con KOH al 10% se observan clulas en gemacin e hifas septadas, de color pardo. Las
porciones terminales de las hifas suelen ser hialinas. El aspecto suele ser similar al estado
de Scytalidium de Hendersonula toruloidea. Se observan clamidoconidias, clulas
hinchadas, clulas levaduriformes e hifas fragmentadas.
Cultivos
Crece en agar-Sabouraud glucosa, lactrimel, juice V8 a 25C. La colonia es, adherente,
levaduriforme,negro verdosa. Al cabo de 3 semanas, el examen microscpico muestra
clulas levaduriformes de 2 celdas, cilndricas a fusiformes, que terminan en punta en los

extremos, los cuales muestran anillos. A medida que la colonia envejece se observa un
micelio tortuoso y con tabicaciones; se vuelve pigmentado con anelides.

II- Dermatomicosis Y Onicomicosis Feomictica

El gnero Hendersonula toruloidea pertenece a la Forma-Familia Sphaeopsidacea, FormaOrden Sphaeopsidales, Deuteromicotina. , Scytalidium es un anamorfo conidial de
Hendersonula.
Etiologa, Ecologa Y Distribucin
La fuente de infeccin exacta en humanos no es clara; se cree que es el suelo. Se
manifiesta con mayor predileccin en mujeres que en hombres.
Manifestaciones Clnicas
Sitios infectados: En pie: uas, interdigital y planta. En manos: uas y palmas.
Cuero cabelludo: caso raro. Planta del pie: se ven vesculas como en la "tia del
mocasn.Este microorganismo puede afectar todos los espacios interdigitales, a
diferencia de los dermatofitos que generalmente infectan el 4 y 5 espacio interdigital.
En uas: se parece a los dermatofitos por: placa de la ua engrosada, opacificacin y
aparente onicolisis; las diferencias son: invasin de la placa ungueal lateral solitaria,
fractura transversal de la placa ungueal proximal y paroniquia. Casi siempre estn
infectados los pies y las palmas de las manos. Se parece a la de los dermatofitos por su
cronicidad, sintomatologa y predileccin por las mujeres.
Identificacin de laboratorio
Examen directo

Con KOH al 10% del material infectado presenta hifas hialinas.

Cultivos
En agar-Sabouraud glucosa, lactrimel, juice V8 a 25C, siendo inhibida por la
cicloheximida. Las colonias son grises; el reverso es negro.
Micromorfologa:
Hifas artroconidiales septadas divididas en forma cnica o en barril. La artroconidia tiene
pared celular marrn olivceo. Reproduccin sexuada: picnidio.
III- Queratitis Mictica
Colonizacin superficial del cristalino lesionado o penetracin profunda que produce
infeccin de la crnea y estructuras adyacentes. Curvularia lunata, Exophiala jeanselmei,
Phoma oculo-humanis, Phialophora verrucosa.

IV- Feohifomicosis Subcutnea Oquiste Feomictico

En su mayora las lesiones qusticas resultan de la implantacin traumtica de hongos
producidos en el suelo. Las lesiones tienden a permanecer localizadas, pero se pueden
diseminar a otros sistemas orgnicos. Exophiala jeanselmei, Curvularia lunata,
Exserohilum (Dreschlera) rostrata.
Manifestaciones Clnicas
Presentan una masa o ndulo subcutneo solitario, aislado, asintomtico, bien
encapsulado que puede evolucionar a un proceso qustico duro. Se puede ulcerar y
expulsar pus, conteniendo hifas con pigmentacin pardusca o clulas esclerticas.
Estas lesiones persisten solitarias, pero en la poblacin con inmunosupresin, pueden
diseminarse, de manera que elpronstico es mortal. La extirpacin quirrgica suele ser
suficiente para el tratamiento.

Localizacin: pies, piernas, manos, brazos, espalda y otros sitios del cuerpo. A veces, al
hacer el examen histolgico, se observan astillas de madera dentro del ndulo.

V- Feohifomicosis invasiva generalizada y cerebral

Agentes etiolgicos ms frecuentes
Alternaria alternata y otras especies de Alternaria. Bipolaris hawaiiensis y otras especies
de Bipolaris. Cladosporium cladosporoides y otras especies de Cladosporium. Curvularia
lunata, Exserohilum (Dreschlera) rostrata. Fonsecae pedrosoi, Phoma crurishominis y otras
especies de Phoma. Exophiala jeanselmei y otras especies de Exophiala. Wangiella
dermatitidis y Cladophialophora bantiana.

Manifestaciones Clnicas
Esta es la forma ms grave y rara de la feohifomicosis. Los microorganismos implicados
son aquellos relacionados con otras formas de feohifomicosis, cromoblastomicosis,
dermatomicosis, queratitis mictica u otras enfermedades. Ocurre invasin tisular, la que
puede ser local o diseminada a otros sistemas orgnicos. Los pacientes suelen estar en
inmunosupresin. El sitio primario de infeccin, est en los pulmones, senos o en algn
lugar donde se produjo traumatismo cutneo. En algunos casos, el microorganismo se
introduce durante una ciruga, y causa endocarditis, a menudo con diseminacin, o al
aplicar inyeccin de material contaminado (medicamentos, etc.). En otros, sobre todo en
la enfermedad cerebral, no se observ algn trastorno predisponente.
Diagnstico De Laboratorio:
Feohifomicosis subcutnea y Feohifomicosis invasiva generalizada y cerebral

Materiales Biologicos: aspirado de quistes, raspado de placas y ndulos, reseccin de

abscesos y biopsias.
-Examen directo:
Con KOH al 10%, azul de lactofenol y blanco de calcofluor.
-Cultivos:
Agar-Sabouraud glucosa, lactrimel, juice V8 y Mycosel a 25C, durante 4 a 6 semanas. En
principio, algunos agentes crecen como "levaduras negras" y con el tiempo se hacen
miceliales.

MICETOMAS
Concepto:
Infeccin

granulomatosa, localizada, indolora, crnica, no contagiosa, involucra el tejido cutneo y

subcutneo, msculos, eventualmente el hueso. La infeccin se desarrolla por
implantacin traumtica con objetos contaminados (espinas, astillas de plantas, escamas
de peces, mordeduras de insectos o serpientes, cuchillos).

a. Causado:
M. Eumictico-: ocasionado por hongos (ciertos hongos)
M. Actinomictico: ocasionado por bacterias superiores, saprfitas del suelo y
restos orgnicos.
b. En general:
Pies
Manos
Espalda
Hombro
Nalgas
Cuero cabelludo
c. Husped susceptible: Predominio entre el sexo masculino, que se encuentra
expuesto (agricultores, granjeros, pescadores).
d. Caractersticas
Las lesiones que produce los micetomas se caracterizan por tener abscesos que supuran
y drenan granos a travs de tractos sinuosos.
e. Agentes

CUADRO CLNICO

GRANOS
f. DIAGNOSTICO
El diagnstico depende el examen clnico del micetoma y de laboratorio para
identificar la especie causal, adems del estudio radiolgico de la zona afectada.
Clnicamente el micetoma se diagnostica teniendo en cuenta la siguiente triada de
signos:
1. Tumefaccin (Deformidad del rea afectada)
2. Fstula
3. Granos.
Granos: pus, exudado o material de biopsia.
o
o
o
o

Tamao (desde microscpicos a 2 mm )

Color (blanco, negro, gris amarillo, rojo, etc.)
Textura (duro o blando)
Forma.

a. Examen directo
Se toma una muestra del exudado seropurulento de las lesiones y lo examinamos con
KOH 20% con el microscopio, buscando la presencia de los granos, que van a tener forma,
tamao, color, estructura y afinidad tintorial caracterstica, los cuales son diferentes de
una especie a otra.

Resultados de KOH 20%:

Actinomictico, filamentos finos (0.5-1.0 m de ) entretejido.
Eumictico, hifas septadas anchas (2-5 m de ) entretejidas y clulas
hinchadas (bizarras) hasta de 15 m de en la periferia.

b. Coloracin Gram:
- M. Actinomictico: preparacin directa de la muestra con solucin fisiolgica
Tincin gram o tincin para bacilos acido- alcohol resistente modificada.
Resultados:
o Grnulos sulfurosos: delicados filamentos ramificados gram positivos, las especies de
Norcaria pueden ser dbilmente acido-alcohol resistentes.
-

M. Eumictico: preparacin directa de la muestra con solucin fisiolgic. Tincin de

gram o montaje azul de algodn en lactofenol

Resultados
o Grnulos blancos, grisceos o negros
o Hifas verdaderas con tumefaccin focal o clamidosporas.

Otras tinciones:
Gram-Nicolle: es de utilidad para describir la micromorfologa de los elementos
actinomicticos que pueden aparecer como formas filamentosas flexuosas,
bifurcadas o ramificadas y microsifonadas, Gram (+) y rodeados de un matriz Gram
(-). La coloracin de Kinyoun se utiliza para poner en evidencia la cido-resistencia
de los elementos actinomicticos.
En un corte del material de biopsia que contenga los grnulos, coloreado con
hematoxilinaeosina, se observa el centro de los granos actinomicticos un color

claro, poco organizado, luego una zona de basofilia y eosinofilia en la periferia.

Algunas especies pueden presentar mazas en la periferia que es un material
fuertemente eosinfilo que da lobulaciones. En el corte de un grano eumictico
teido con H-E se observa un entrelazado de hifas con caractersticas propias de
acuerdo a cada agente etiolgico. En el caso de Madurella grisea los filamentos
estn incluidos en una sustancia amorfa y pigmentada llamada cemento.

CULTIVOS:
Para los
cultivos el
mejor
material es
una biopsia
profunda,
dado que
est libre de bacterias y de hongos contaminantes. El criterio a seguir con los cultivos de
la muestra, depende de lo observado en el examen directo.
1. MICETOMAS EUMICTICOS

Las muestras o grnulos que contienen eumicetos se pueden lavar en solucin salina que
contenga antibitico (excepto cicloheximida) y sembrar en medio Agar Sabouraud y
AgarSabouraud-cloranfenicol, e

incubar a 28

C. El crecimiento de los agentes

eumicticos

puede ser lento por lo que los

cultivos no

deben descartarse hasta las seis

semanas. La

identificacin se realiza a travs de la

macromorfologa y la micromorfologa

de las

colonias, principalmente por las

caractersticas del micelio vegetativo y

la produccin

de conidios (que se puede estimular con la utilizacin de medios naturales, como agar
papa zanahoria y agar harina de maz).
2. MICETOMAS ACTINOMICTICOS
Los grnulos actinomicticos se deben lavar varias veces con solucin fisiolgica
estril y se siembran en los medios apropiados como agar sangre o infusin cerebro
corazn, Lowestein Jensen, medio Czapek sin sacarosa con rifocina y anzuelo de
parafina, las cepas de Norcadia crecen bien en agar Sabouraud- extracto de levadura
sin antibiticos, se debe sembrar en varias placas a 37 c.
a)

MICETOMAS

ACTINOMICTICOS

Madurae es de crecimiento lento. A los 710 das se pueden observar colonias de

color blanco/crema, de aspecto hmedo,
ceroso y arrugado, adherentes al medio de
cultivo. El crecimiento es ptimo a 37 C en
agar dextrosa de Sabouraud o medios
bacterianos no selectivos. En la imagen, las
colonias blancas corresponden a
Actinomadura madurae, colonias amarillas
indican Nocardia asteroides y las colonias de color rojo indican
Micromonospora spp.

b) MICETOMAS EUMICTICOS
Cultivo de Madurella mycetomatis mostrando su tpico

pigmento marrn

difusible en el agar.
TRICHOSPORONOSIS
Definicin: es una infeccin oportunista causada

hongos

levaduriformes del gnero Trichosporon, que producen lesiones superficiales cutneas y

diseminadas. Tambin son responsables de un cuadro alrgico bien definido que es la
neumonitis por hipersensibilidad tipo estival (SHP)
Etiologa: Durante mucho tiempo Trichosporon beigelii fue el patgeno ms significativo
del gnero Trichosporon. T. cutaneum ha sido frecuentemente utilizado como sinnimo de
T. beigelii. A partir del ao 1992 la taxonoma del gnero Trichosporon fue revisada por
distintos autores (Gueho y col, 1992 y Sugita y col, 1995) que dieron como resultado la
reclasificacin del gnero en 25 especies. Se descart el nombre de T. beigelii, aunque T.
cutaneum fue mantenido.
De stas 25 especies solo 6 estn implicadas en patologas: T. ashaii (es el ag. etiolgico
ms importante), T. asteroides, T cutaneum, T. inkin, T. mucoides y T. ovoides.

Clasificacin taxonmica del gnero Trichosporon spp (Behrend, 1890) Si bien no se ha

detectado reproduccin sexuada es muy probable que el estado perfecto de Trichosporon
pertenezca a la subdivisin Basidiomycotina, por la gran afinidad del gnero con esta
subdivisin.
Reino: Fungi
Divisin: Basidiomycota
Subdivisin: Basidiomycotina
Orden: Sporidiales
Familia: Sporidiobolaceae
Gnero: Trichosporon
Especies: T. asahii, T. cutaneum, T. inkin, T. ovoides, T. inkin, T. mucoides
Ecologa y distribucin: Trichosporon es una levadura que puede ser aislada del suelo,
agua, vegetales, mamferos y aves.

En el ser

humano es un miembro de la flora

habitual de

la boca, piel y uas. Cuadros

clnicos y

causas predisponentes:
Trichosporon spp son agentes

causales de

piedra blanca, infecciones

superficiales

e invasivas.

Los factores que pueden predisponer a un paciente a sufrir infecciones diseminadas

incluyen: quimioterapia citotxica (que induce granulocitopenia), enfermedades

hematolgicas malignas, quemaduras extensas, tratamiento prolongado con

corticosteroides, cirugas valvulares, transplantes, dilisis peritoneal, sida, etc. Piedra
blanca: en esta infeccin se ven afectados los pelos de cuero cabelludo y pubis (menos
frecuentemente de barba y bigote). Se caracteriza por presentar a lo largo de los pelos
concreciones mltiple del tamao de la cabeza de un alfiler, generalmente blanco
amarillentos, que semejan granitos de arena adheridos a ellos. Estn asociados a la
epidermcula del pelo sin disociarla ni levantarla, respetando la porcin medular de los
mismos. Lesiones superficiales: son similares a las producidas por Candida en pliegues,
aunque son mucho menos frecuentes. Tambin pueden aparecer lesiones cutneas 2,
como manifestacin de una infeccin diseminada.

Infeccin invasiva o diseminada: es una afeccin rara pero en los ltimos aos ha ido
considerablemente en aumento debido a la mayor sobrevida de estos pacientes.
Manifestaciones clnicas: es una infeccin que progresa rpidamente en pacientes
severamente inmunocomprometidos produciendo neumona, hepatitis, encefalitis,
funguemias, septicemias, infecciones cutneas severas, endocarditis, peritonitis
asociadas con dilisis peritoneal.

Los pacientes afectados tienen un pronstico muy pobre con una elevada mortalidad
asociada que llega al 75%.
Se encontr que las cepas que producan enfermedad invasiva eran diferentes de las que
producan piedra blanca y stas de las que producen lesiones superficiales, de acuerdo al
siguiente cuadro:

Estas asociaciones no son absolutas, as por ejemplo, se ha reportado un abceso

pulmonar producido por Trichosporon inkin, (Piwoz y col) y un caso de funguemia
producido por Trichosporon asteroides (Kustimur y col). TRICHOSPORONOSIS-3
Diagnstico micolgico:
Materiales: pelos, escamas de piel, sangre, esputo, LBA, biopsia, etc.
Examen directo: Pelos: con KOH 20% se observa una vaina irregular alrededor del pelo,
que contiene una trama de clulas redondeadas u ovoides de aproximadamente 2x6-8 m
(artroconidias) y que pueden presentar brotes (artroblastoconidias). En el resto de los
materiales, se observar los mismos elementos.

Cultivos: Trichosporon es una levadura que crece rpido (48-72 hs) en medios comunes,
ASG y ASG-Cl a 28 C. Al principio las colonias son cremosas y lisas y con el tiempo se
hacen ms secas, rugosas, plegadas, cerebriformes, elevadas de color crema a gris
amarillento.

Microscpicamente, en
agar harina

de maz (AHM) se

observan

hifas con cadenas de

artroconidias, de tamao y forma variable generalmente alargadas de 2-3 x 6-9 m. Cada

artroconidia es capaz de dar por gemacin una blastoconidia (blastoartroconidias).
Trichosporon se diferencia de Candida por producir artroconidias y de Geotrichum por
producir blastoartroconidias.

Pruebas complementarias: la prueba de la ureasa es positiva para el gnero. La

diferenciacin de especies se lleva a cabo a travs de pruebas de Auxonograma y
Zimograma (son no o dbilmente fermentativos), utilizando los sistemas API 20 o ID 32 C
(Biomerieux), prueba de resistencia a la cicloheximida y capacidad de crecimiento a 37C.
Debido a la falta de reproducibilidad de algunas de las pruebas fisiolgicas, actualmente
se han desarrollado tcnicas moleculares para resolver la identificacin de las diferentes
especies y variedades dentro del gnero Trichosporon (Sugita y col, 1998, 1999). Tambin
se ha desarrollado un test de aglutinacin de partculas de ltex contra un polisacrido de
pared de Trichosporon y una prueba de nested PCR utilizando primers especficos, para la
deteccin de levaduras y DNA de Trichosporon, respectivamente, en suero de pacientes

con

probable infeccin diseminada, aunque

estas

pruebas estn todava en fase de

investigacin.(Sugita 2001).

REFERENCIA:

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