Acción Bacteriostatica Selectiva Del Cristal Violeta

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta
2010
Accin oligodinmica de los metales pesados
ACCIN BACTERIOSTTICA SELECTIVA

DEL CRISTAL VIOLETA
1. Objetivos:
Observar la accin de cristal violeta sobre
microorganismos, bacterias.
Comprender cmo acta el cristal violeta para
que tenga carcter bacteriosttico selectivo.
2. Fundamento terico:
CONTROL DEL CRECIMIENTO BACTERIANO
El control de los microorganismos es importante
para la prevencin de enfermedades en el
hombre, en animales y plantas, para la industria
alimentaria evitando el deterioro de los
alimentos, para evitar la contaminacin tanto en
procesos industriales que requieran cultivos
puros, como en laboratorios de diagnstico o
investigacin.
Las sustancias usadas para matar o inhibir el
crecimiento
de
los
microorganismos
se
denominan agentes antimicrobianos. Algunas de
estas, denominadas desinfectantes se usan para
reducir el nmero de microorganismos en
superficies inanimadas (pisos, mostradores,
utensilios de comer o se aaden al agua para
potabilizarla.
Otras
sustancias
llamadas
antispticos, se aplican sobre tejido biolgico (en
el cuerpo), usndose en heridas, en abrasiones
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en la piel para prevenir infecciones, en soluciones

para gargarismo como enjuagues bucales.
Algunas
sustancias
qumicas
matan
microorganismos (agente bactericida), mientras
que otras solo inhiben su crecimiento (agente
bacteriosttico); adems, unas actan contra
muchas especies microbianas y se dice que son
de amplio espectro, mientras que otras, solo
afectan
a
unas
pocas
especies.
Desafortunadamente, no existe una agente
qumico que sea optimo para todos los
propsitos, para ello hay que determinar con
antelacin cul agente trabajar mejor en una
situacin particular.
Uno
de
los
mtodos
de
control
de
microorganismos
ms
empleados
en
los
laboratorios de microbiologa y en el rea
hospitalaria es la denominada tcnica asptica,
que combina el lavado de manos, el uso de
antispticos
y
desinfectantes,
barreras
protectoras y protocolos para la manipulacin de
utensilios, entre otros aspectos. Este conjunto de
acciones es esencial para la seguridad del
personal y de los pacientes (rea hospitalaria).
Qu es el efecto o accin bacteriosttica?
La accin bacteriosttica se fundamenta en la
inhibicin del desarrollo microbiano mediante el
bloqueo de diferentes factores de reproduccin.
No las mata directamente, pues una poblacin de
bacterias sin capacidad de reproduccin o con
capacidad disminuida para la misma es una
poblacin condenada a su desaparicin. En
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cambio un agente bactericida es aquel capaz de

matar a las bacterias.
Gracias a esta accin bacteriosttica en la
medicina se aplica para elegir el antibitico
correcto para tratar cierta enfermedad; pues al
aplicarse el antibitico en el paciente se efecta
la
accin
bacteriosttica
produciendo
un
enlentecimiento de la multiplicacin de los
grmenes patgenos, con lo que se tornan ms
vulnerables ante los procesos defensivos
humorales y celulares del organismo.
As tenemos antibiticos con accin bactericida y
bacteriosttica propuestos por Jawetz.
Grupo I:
Antibiticos habitualmente bactericidas a las
dosis habituales:
- Betalactaminas
- Oligosacridos
- Polimixinas
Grupo II:
Antibiticos habitualmente bacteriostticos a
las dosis usuales:
- Cloramfenicol
- Tetraciclinas
- Eritromicina
- Oleoandomicina
- Novobiocina
Qu es accin bacteriosttica selectiva?
Es aquel efecto que slo inhibe el crecimiento o
reproduccin
de
cierto
grupo
de
microorganismos, mientras que no afecta o
afecta en menos proporcin a otro grupo de
microorganismos.
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Es por ello que se agregan a medios de cultivos

agentes bacteriostticos para que stos tengan
carcter selectivo.
Hay ciertos factores que tienen que ser
considerados a la hora de aplicar agentes
qumicos
o
fsicos
para
el
control
de
microorganismos. Estos son:
Concentracin
del
agente
qumico:
Mientras ms concentrado est el agente
qumico, ms rpido se destruirn los
organismos.
Intensidad del agente fsico: Cuanto ms
intenso es el agente fsico (calor o radiacin),
rpidamente mata a los microorganismos
Tiempo de exposicin: A mayor tiempo de
exposicin, mayor es el nmero de organismos
destruidos.
Temperatura: A mayor temperatura
acelera la destruccin de los organismos.
se
Nmero de organismos: Mientras mayor sea

el nmero de microorganismos, ms tiempo se
requiere para destruirlos.
Clase de organismo: Las clulas vegetativas
(las que estn metablicamente activas) son
ms susceptibles que las esporas bacteriales.
Estado fisiolgico de las clulas: Mientras
ms viejas sean las clulas, ms rpido se
destruyen.
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Naturaleza del medio ambiente: Algunos

ambientes no favorecen la destruccin rpida
de los microorganismos, como por ejemplo los
medios viscosos.
Factores fsicos para el control de
microorganismos:
Los factores fsicos actan generalmente como
agentes selectivos, porque determinan el tipo de
microorganismo capaz de crecer y su influencia
sobre la tasa de crecimiento en otros
microorganismos.
Temperatura: cada microorganismo es capaz
de crecer solamente en un rango especfico de
temperaturas. Para cada microorganismo existe
una temperatura mnima por debajo de la cual
no existe crecimiento; una temperatura optima,
en la cual hay crecimiento y una temperatura
mxima a la cual no existe crecimiento.
Como podemos darnos cuenta la temperatura
es de suma importancia para el crecimiento de
los organismos. A medida que esta aumenta,
llega a estar por encima de la temperatura
ptima, por tanto, mayor es la velocidad de
muerte de los microorganismos. Es por ello
que altas temperaturas se usan en el control
microbiolgico.
Las temperaturas altas pueden aplicarse de
dos formas: calor hmedo (con agua) o calor
seco. El calor hmedo es mucho ms eficiente
que el calor seco, ya que este acta mediante
la coagulacin de las protenas celulares, por
otro lado el calor seco destruye la clula por la
oxidacin de agentes qumicos de la clula.
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Contrario al calor, las temperaturas bajas o el

fro no desnaturalizan las protenas. Las bajas
temperaturas hacen que la reproduccin de los
microorganismos se detenga, pero no las mata.
Se dice que las temperaturas bajas son
microbiostticas,
mientras
que
las
temperaturas altas son microbicidas.
Desecacin: La falta de agua detiene los

procesos vitales en los microorganismos, por lo
cual el crecimiento se detiene. La desecacin
se logra evaporando el agua presente para lo
cual se usa aire caliente. La preservacin de
alimentos por secado an se utiliza.
Esta
tcnica tiene un efecto microbiosttico, pues
detiene el crecimiento bacterial, pero no mata
los organismos. De hecho los microorganismos
pueden preservase por secado. Cuando se seca
junto con congelacin el proceso se llama
liofilizacin.
Presin osmtica: La pared celular de las
bacterias las protege de cambios en la presin
osmtica del medio, pero si la presin osmtica
25

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externa es mucha, el organismo puede morir;

esto sucede si las concentraciones de solutos
en el medio en que crece el organismo son
extremos. Altas concentraciones de sal
interrumpen los procesos de transporte a
travs de la membrana y desnaturalizan las
protenas,
en
cambio
hay
otros
microorganismos
que
requieren
concentraciones salinas muy altas (15-30% de
cloruro sdico) para crecer, estas son halfilos
extremos.
Los
que
crecen
en
altas
concentraciones de azcar osmfilos y en
ambientes muy secos xeroflicos.
Radiacin: Ciertas formas de radiacin
pueden matar los microorganismos.
1. Radiacin ionizante: Los rayos X y gamma
tienen un gran poder de penetracin y matan
los microorganismos formando iones txicos.
Estos iones afectan toda la bioqumica de la
clula. Las esporas bacteriales son ms
resistentes a los diferentes tipos de
radiacin.
2. Luz ultravioleta (UV): La luz UV no tiene
poder de penetracin, por lo que es til para
matar microorganismos en las superficies.
Las radiaciones de luz UV ms germicidas
son las de onda langa de 260 nm. El principal
modo de accin de la luz UV es la formacin
de dmeros de timina en la molcula de DNA.
La luz UV se utiliza para: esterilizar salas de
hospitales, para el mantenimiento de cuartos
aspticos para el envasado de medicinas en
la industria farmacutica y para el
tratamiento de superficies contaminadas en
la industria de alimento y de leche.
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Ondas
ultrasnicas
(sonicacin):
En
general, los microorganismos suspendidos en
un lquido y sometidos a la accin de ondas
ultrasnicas de altas intensidades (20,000
ciclos/seg.) durante cierto tiempo se destruyen
porque se rompe la pared celular y se pierde el
contenido de la clula.
Filtracin: La filtracin se emplea para
esterilizar lquidos o soluciones que se afectan
si se les aplica calor (sueros, algunas enzimas,
vitaminas, antibiticos). Generalmente se usan
filtros que tienen unos poros de 0.2 micras de
dimetros. Los poros de este tamao retienen
las bacterias, pero no los virus.
Factores qumicos para el control de
microorganismos:
Los factores qumicos pueden o no ser selectivos,
ya que el carbono y el nitrgeno se usan y se
requieren en formas especficas, el Mg y Fe son
usados en la misma forma por todos los
microorganismos,
es
pequeas
cantidades
pueden ejercer una presin selectiva.
pH- Alcalinidad y acidez: se expresa es una

escala en la que la neutralidad es 7. Cada
organismo tiene un rango de pH dentro del
cual es posible el crecimiento y normalmente
posee un pH ptimo muy bien definido. La
mayora de los ambientes naturales tienen pH
de 5.9, slo pocos crecen a pH menores de 2 y
mayores de 10, Los que crecen a pH menores
de 2 son acidfilos, los hongos tienden a
soportar la acidez ms que las bacterias. Los
25

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microorganismos que poseen un pH mayor de

10 se denominan alcalfilos, se encuentran
generalmente
en
suelos
altamente
carbonatados, son importantes industrialmente
ya
que
poseen
proteasas
alcalinas.
Independientemente del pH extracelular, el pH
intracelular debe permanecer cercano a la
neutralidad, con el objetivo de impedir la
destruccin de las macromolculas. En
acidfilos o alcalfilos extremos el pH debe
variar en 1.0 y 1.5 unidades respecto a la
neutralidad, pero para los neutrfilos (pH 6-8),
el pH del citoplasma es neutro o casi neutro.
Las sustancias acidas o bsicas usadas como
desinfectantes y antispticos actan alterando
la permeabilidad y coagulando las protenas.
En general los cidos son ms eficaces que los
lcalis.
El fenol y sus derivados: El fenol se adhiere
a superficies inertes y proporciona lo que se
llama una desinfeccin residual. Su accin se
prolonga por varias horas. Los compuestos de
fenol pueden actuar como microbicidas o
microbiostticos
dependiendo
de
la
concentracin que se utilice. Los fenoles
poseen efecto germicida pues daan la
membrana y desnaturalizan las protenas
bacteriales. Uno de los derivados del fenol se
llama cresol; stos tienen un efecto germicida
superior al fenol. Los cresoles se usan en
jabones lquidos (ej. lysol es un jabn ms un
cresol). Otro derivado del fenol es el
hexaclorofeno, el cual se usa en jabones para
las manos (en ciruga y hospitales). Un ejemplo
de este ltimo es el Phisohex. El fenol y sus
derivados por lo general no matan esporas.
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Los alcoholes: Los alcoholes daan la

membrana, desnaturalizan las protenas,
disuelven lpidos y deshidratan la clula. La
concentracin ms efectiva de alcohol es el
70% y los ms utilizados son el alcohol etlico e
isoproplico. No destruyen esporas y tienen
una accin germicida lenta. El poder
bactericida aumenta a medida que crece la
longitud de la cadena carbonada, pero los
alcoholes con peso molecular superior al del
proplico (3C) no se mezclan en todas las
proporciones con el agua, no se utilizan como
desinfectantes.
Halgenos: Los halgenos actan sobre los
microorganismos oxidando las protenas y
enzimas esenciales. No matan las esporas. Los
halgenos ms comnmente usados son el
cloro y el iodo.
1. El cloro: Es uno de los desinfectantes ms
usados y es microbicida contra la mayora de
los microorganismos. Se usa para limpiar las
aguas contaminadas y se aplica en agua
potable.
2. El iodo: Se utiliza comnmente como un
antisptico y es uno de los mejores que hay
para la piel. Se aplica principalmente como
tintura de iodo. Es microbicida para la
mayora de los organismos. El iodo tambin
se emplea como iodforo (compuesto de
iodo con otros agentes). Los iodforos no
manchan ni irritan, un ejemplo es el
betadine.
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Jabones y detergentes: Un jabn es una sal

de sodio o de potasio de un cido graso. Los
agentes que reducen la tensin superficial del
agua (surfactantes) y que se emplean
principalmente para la limpieza de superficies
se llaman detergentes (el jabn es un ejemplo
de un detergente). Los detergentes se
clasifican en catinicos, aninicos y no-inicos.
Los detergentes catinicos son mejores
desinfectantes que los dems. Otro nombre
con que se conocen a los detergentes
catinicos es cuaternario de amonio. Estos son
bacteriostticos a bajas concentraciones y
bactericidas a concentraciones mayores.
Ejemplos de estos compuestos son el Zephiran
y el Roccal, que se usan como antispticos
para la piel, adems de usarse para el
saneamiento
de
lecheras
y
plantas
elaboradoras de alimentos. Estos compuestos
no matan esporas.
Metales pesados y sus compuestos: La

accin antimicrobial de los metales pesados y
sus compuestos se debe a la combinacin del
in metlico con protenas y las enzimas del
microorganismo, daando as el sistema. La
capacidad que tienen los metales pesados
para ejercer actividad antimicrobiana se
denomina accin oligodinmica.
1.Compuestos de mercurio: Los ms
importantes de este grupo son los orgnicos
como: mercurocromo, metiolato y metafen.
Todos estos se usan como antispticos y son
principalmente microbiostticos.
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2.Compuestos de plata: El ms que se usa

es el nitrato de plata en solucin al 1% y se
usa en los ojos de los recin nacidos para
prevenir infecciones gonoccicas.
3.Compuestos de cobre: El sulfato de cobre
se usa como algicida en los recipientes
abiertos que contienen agua. Tambin es
fungicida por lo que se utiliza para controlar
las infecciones fngicas de plantas
4. Compuestos de zinc: Son fungicidas por lo
que se utilizan para tratar el pi de atleta.
Colorantes: Los colorantes se utilizan

ampliamente en bacteriologa para tincin y
como indicadores.
La incorporacin de un colorante a un medio
de cultivo con frecuencia lo torna selectivo.
La accin bacteriosttica de los colorantes se
debe a la modificacin del potencial de xidoreduccin del medio, lo que inhibe el desarrollo
de los microorganismos. En general, son ms
activos contra bacterias gran positivas y
algunos hongos.
Los principales colorantes son los derivados de
la acridina (Proflavina), y los derivados del
trifenilmetano (verde brillante, cristal violeta).
Los derivados de la acridina interfieren en la
sntesis de cidos nucleicos y protenas. Este
se inserta entre dos bases sucesivas del ADN
25

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separndolas
fsicamente,
provocando
errores es la duplicacin del ADN.
Los derivados del trifenilmetano interfieren
en la sntesis de la pared celular. Para lograr
su objetivo bloquean la conversin del cido
UDP-acetilmurmico en UDP-acetilmuramilpptido.
Cristal violeta:
El violeta cristal es un colorante bsico
bacteriosttico potente perteneciente al
grupo
trifenilmetano,
estos
colorantes
presentan
una
marcada
accin
bacteriosttica selectiva sobre las bacterias
Gram
positivas,
en
diluciones
que
aparentemente no afectan a las Gram
negativas. Esta propiedad se aprovecha
mediante la incorporacin de alguno de esos
colorantes en medios de cultivo con el fin de
facilitar el aislamiento de bacterias Gram
negativas.
Otros colorantes usados con estos propsitos
son: fucsina bsica, verde brillante y verde
malaquita.
3. Materiales:
1. Medio agar nutritivo.
2. Solucin cristal violeta de
1/1000.
3. Agua destilada.
4. 4 placas petri esterilizadas.
25
concentracin

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5. Tubos de ensayo.
6. Pipetas de 1ml.
7. Microorganismos a inocular.
4. Procedimiento:
1. Preparar medio agar nutritivo y esterilizarlo
en el autoclave.
2. Invertir la placa y con un marcador dividir en
dos partes iguales, rotular las cuatro placas
petri segn el modelo:
3. Contar con solucin acuosa de cristal violeta

de concentracin 1/1000 (0.1%), si no se
contara con esta solucin y s con
concentracin al 100% seguir los siguientes
pasos:
- Traspasar 1 ml de concentracin al 100% a
un tubo que contiene 9 ml de agua,
obteniendo as concentracin 1/10.
- Pasar 1ml de concentracin 1/10 a otro
tubo que contiene 9 ml de agua, para
contar con concentracin 1/100.
25

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- Por ltimo, para obtener concentracin de

1/1000 trasladar 1 ml de solucin 1/100 a
otro tubo que contiene 9 ml de agua,
obteniendo lo deseado 1/1000.
4. Ya obtenido la solucin de cristal violeta de

1/1000, transferir 1 ml a un tubo con 9 ml de
agua destilada, obteniendo as una dilucin
de 1/10000.
5. Con la misma pipeta usada anteriormente,
trasladar 1 ml de solucin 1/10000 a una
placa petri, sta placa y las dems estarn
previamente esterilizada.
25

2010
6. Con otra pipeta trasladar 1 ml de solucin

con concentracin 1/10000 a un tubo con 9
ml de agua, obteniendo la concentracin
1/100000.
7. Con
la
pipeta
usada
para
obtener
concentracin 1/100000, trasferir 1ml de
dicha solucin a otra placa petri.
8. Trasladar 1ml de concentracin 1/100000 a
otro tubo con 9 ml de agua, obteniendo
concentracin 1/1000000.
9. Trasferir 1 ml de concentracin 1/1000000 a
una placa petri, con la misma pipeta usada
anteriormente.
10. Verter medio agar nutritivo a las diferentes
placas,
que
contienen
las
distintas
concentraciones de cristal violeta.
11. Verter el cuarto tubo que contiene medio
agar nutritivo a una cuarta placa petri que no
contiene colorante (cristal violeta).
25

2010
12. Esperar a que solidifique el agar para

inocular en la zona A de la placa el cultivo A y
en la zona B el cultivo B; no se inocular por
el mtodo de las estras, se tomar cierta
cantidad de cultivo A con el inoculador y se
pondr esta cantidad sobre el agar
solidificado en la zona A, el mismo
procedimiento se realizar para el cultivo B.
13. Invertir la placa e incubarla a 37C por 48
horas.
5. Resultados y observaciones:
Resultados de la accin bacteriosttica del
cristal violeta:
25

2010
CRECIMIENTO
Gru Gru Gru
po 2 po 3 po 4
A B A B A B
+ + + + + +
+ + + + + +
+ + + + + +
CONCENTRACI Gru
N
po 1
A B
CRISTAL
1/10000
+ +
VIOLET
1/100000
+ +
1/1000000
+ +
A
CONTR
Sin colorante + + + + + + + +
OL
(+) Hay crecimiento.
(-) No hay crecimiento.
Observaciones:
Para inocular las bacterias en el medio agar
nutritivo con cristal violeta no se analiz si
eran bacterias Gram positivas o Gram
negativas, ya que no se cont con
microscopios.
Se cumpli con el tiempo de incubacin del
medio con cristal violeta, que era de 48 horas
a 37C.
Las fotos que muestran los resultados de este
laboratorio se presentan en los anexos.
Las muestras que se utilizaron para inocular
en el medio de cultivo se extrajeron de:
25
GRUP
O
INOCULO
ZONA A
INOCULO
ZONA B
Tubo A
Tubo B
MUESTRAS DEL
EXPERIMENTO
Fermentacin de
carbohidratos del
grupo 1 Estanque
de Arquitectura.
Gru
po 5
A B
+ +
+ +
+ +
+ +

2010
Tubo A
Tubo B
Zona A
Zona B
Tubo A
Tubo B
Tubo A
Tubo B
Fermentacin de
carbohidratos del
grupo 2 Estanque
de Arquitectura.
Hidrlisis del
almidn, placa del
grupo 5 Estanque
de Arquitectura
Fermentacin de
carbohidratos del
grupo 5 Estanque
de Arquitectura.
Fermentacin de
carbohidratos del
grupo 5 Estanque
de Arquitectura.
6. Conclusiones:
El hecho que nuestras muestras tenga el
mismo resultado se debe a que, sin
percatarnos todos los grupos sembramos
bacterias del un mismo lugar.
Basndonos en la teora concluiremos que las
bacterias inoculadas son Gram negativas,
porque el cristal violeta no inhibi su
crecimiento. Ya que el cristal violeta slo
inhibe el crecimiento de bacterias Gram
positivas.
El cristal violeta tiene accin bacteriosttica
selectiva porque inhibe el crecimiento de
bacterias gran positivas sin afectando menos
a las bateras gran negativas.
Podemos observar en los resultados que la
placa control tiene menos crecimiento que
las placas que contienen cristal violeta, esto
25

2010
puede deberse a que no se sembr igual

cantidad de inoculo en las placas.
Comparando las placas que contienen cristal
violeta podemos concluir que efectivamente
el cristal violeta inhibe en menor grado el
crecimiento de las bacterias si estas son
Gram negativas, pues mientras se va
elevando la concentracin de cristal violeta
en las placas se va reduciendo el crecimiento
La accin bacteriosttica del cristal violeta y
en general de los colorantes se debe a la
modificacin del potencial de xido-reduccin
del medio, lo que inhibe el desarrollo de los
microorganismos.
El cristal violeta se adiciona en medios de
cultivo para que el medio tenga carcter
selectivo, con el fin de facilitar el aislamiento
de bacterias gran negativas.
El cristal violeta tiene accin bacteriosttica
ya que no mata a los microorganismos, slo
inhibe su crecimiento.
<
7. Recomendaciones:
Inocular la misma cantidad de microorganismo
en las placas.
Tapar bien los tubos de ensayo al momento de
llevar el agar nutritivo al autoclave, pues podra
introducirse agua en vapor en gran cantidad lo
cual
malograra
el
medio
de
cultivo.
Ocasionando que el medio de cultivo no
solidifique bien.
Realizar rpidamente pero con las precauciones
correspondientes los experimentos, ya que el
agar nutritivo se solidifica impidiendo realizar
correctamente el experimento.
25

2010
8. Bibliografa:
Bacteriologa general- principios y prcticas de
laboratorio. Evelyn Rodriguez Cavallini, Maria
del
Mar
Gamboa
Coronado,
Francisco
Hernandez Chavarra, Jorge Danilo Garca
Hidalgo. Pg. 371.
Microbiologa Estomatologa- fundamentos y
gua prctica. 2 Edicin. Negroni. Pg. 114.
http://docencia.udea.edu.co/bacteriologia/Micro
biologiaAmbiental/microbiologia_2.pdf ...
Factores de crecimiento microbiolgico.
http://bc.inter.edu/facultad/yserrano/factoresfisic
osqui.htm
...
Factores
de
crecimiento
microbiolgico.
http://www.edeca.una.ac.cr/files/carlosmicrobiol
ogia/Clases%20Laboratorio
%20Microbiologia/Manual%20Laboratorio
%20Microbiologia.pdf Accin bacteriosttica
del cristal violeta.
9. Anexo:
1. Fotos de los resultados de la accin
bacteriosttica selectiva del cristal violeta:
Grupo 1
25
1:10000
1:100000
1:1000000
Sin cristal violeta

(Control)

2010
Grupo 3
1:10000
1:100000
1:1000000
Sin cristal violeta

(Control)
Grupo 4
1:10000
25
1:100000

2010
1:1000000
Sin cristal violeta

(Control)
2. Accin Bacteriosttica de las lagrimas

Titulo: Accin Bacteriosttica de las lagrimas
Planteamiento del problema: Muchas veces el
ser humano, habitualmente no conoce como a
totalidad su cuerpo y por consiguiente todos
aquellos procesos que se llevan a cabo para que
su medio interno interacte de forma recproca
junto con el medio externo que lo rodea. Es por
eso que para que haya la armona necesaria en
los dos medios citados anteriormente, las clulas
del cuerpo humano las cuales estn encargadas
de producir anticuerpos que van a ayudar a
25

2010
mantener protegido nuestro sistema de los

microorganismos, de la invasin no deseada y la
infeccin. Existen muchas sustancias fabricadas
orgnicamente por nuestro cuerpo que cumplen
esta funcin una de ellas es la secrecin de
lgrimas. En el pasado se han realizado estudios
en donde se ha descrito la composicin de las
lgrimas y como componente de su mecanismo
de defensa al cuerpo, esta la presencia de
Lisozima, la cual es antisptica; Esta sustancia
puede
eliminar
al
protoplasma,
porcin
subyacente a la pared celular, al tratar algunas
bacterias con esta sustancia. Por eso, surge la
gran necesidad de tratar de demostrar la Accin
bacteriosttica de las lgrimas para as,
comprobar su efecto sobre aquellas bacterias a
las que el cuerpo humano est expuesto
diariamente.
Justificacin: Hoy en da las personas conocen
las bacterias
como organismos
vegetales
unicelulares que se encuentran difundidas en el
aire, agua y suelo, en animales y plantas, as
como tambin en la materia orgnica muerta. Por
consiguiente son agentes de fermentacin y
putrefaccin, adems causan enfermedades al
hombre los animales y las plantas. A lo largo de
los aos, las bacterias han producido este efecto
en el ser humano, debido a esto nuestro
organismo se ha encargado de la produccin de
ciertas sustancias como es el caso de las lgrimas
las cuales participan en la defensa de nuestro
cuerpo al frente de bacterias, que en este caso las
que se encuentran en el aire, elemento que
establece estrecha relacin con el ojo. He aqu la
importancia de la demostracin de la accin
bacteriosttica de las lgrimas como proceso por
25

2010
el cual lleva a cabo el organismo para as

disminuir el crecimiento de una bacteria. El
comprobar lo anteriormente dicho, permitira
saber si las lgrimas ayudan a mantener el ojo
limpio de bacterias polvo, entre otros, y adems
saber si ellas son suficientes para cumplir dicha
funcin. Evitando as que constantemente
suframos infecciones.
ACCIN OLIGODINMICA DE LOS

METALES PESADOS
1.
Objetivos:
Demostrar y observar el efecto (la accin
oligodinmica) que causan los metales
pesados a los microorganismos.
2.
Fundamento terico:
En
el
laboratorio
anterior
(Accin
bacteriosttica selectiva del cristal violeta) ya
hemos visto que metales pesados y sus
componentes son ideales para controlar el
crecimiento microbiolgico, es esta parte
tocaremos ms a fondo el tema.
Ciertos metales pesados o sus combinaciones
qumicas ejercen efecto antimicrobiano a
concentraciones muy bajas (1 parte en 20
millones), esta accin recibe el nombre de
accin oligodinmica; los ms activos son el
mercurio, la plata y el cobre. Los mercuriales
poseen propiedad antisptica y desinfectante.
Su
actividad
antibacteriana
se
reduce
fuertemente en presencia de suero y de
25

2010
protenas tisulares. Los organomercuriales son

menos txicos y custicos que las sales
inorgnicas.
La accin antimicrobiana se debe a la
combinacin del in metlico con los grupos
sulfhdricos de ciertas protenas que se
desnaturalizan de la clula microbiana; stas se
inactivan, precipitan y, finalmente, producen la
muerte.
Qu es la accin oligodinmica?
Es la propiedad que tienen
especialmente la plata, de
letales sobre las bacterias
pequesimas. El trmino
palabras griegas: oligos, que
dynamis, fuerza o poder.
ciertos metales,
ejercer efectos
en cantidades
deriva de dos
significa poco y
Este fenmeno puede demostrarse en el

laboratorio si se coloca un trozo pequeo de
metal (plata, cobre) limpio sobre una placa con
inculo bacteriano. Despus de la incubacin
se presenta una zona de inhibicin (no
crecimiento) alrededor de la pieza metlica,
esta es la zona oligodinmica; con frecuencia
las colonias en el borde del halo de inhibicin
son de mayor tamao que en el resto de la
placa, debido a que tuvieron una mayor
disponibilidad de nutrientes que no fueron
utilizados en la zona sin crecimiento.
La cantidad de metal que produce este efecto
inhibitorio es extraordinariamente pequeo y
25

2010
puede expresarse en partes por milln. Se

supone que la actividad de estas pequesimas
cantidades de metal se debe a la elevada
afinidad de ciertas protenas celulares por el
ion metlico.
Pero cul es la caracterizacin de la moneda
para que tenga esta accin oligodinmica en el
experimento?
Peso: 3.50 g.
Material: Latn.
Dimetro: 20.47 mm.
Anverso: Escudo Nacional de Armas en
octgono.
Reverso: Denominacin flanqueada por los
diseos dentro de octgono.
Canto: liso.
Como sabemos el latn es una aleacin de
cobre y zinc, justamente metales pesados que
tienen accin oligodinmica.
El cobre y en especial el sulfato de cobre son
ms usados contra algas y hongos que contra
bacterias para controlar el crecimiento en
reservorios de agua.
As podemos observar en el siguiente esquema
las zonas que presenta la placa petri donde se
llev a cabo la accin oligodinmica.
Zona
oligodinmic
25

2010
Crecimiento
Zona de estimulacin:
presenta un
crecimiento
3.
Materiales:
1. Moneda de 10 cntimos.
2. cido ntrico al 10%.
3. Agua destilada.
4. Vaso de precipitado.
5. Pinza.
6. Medio
agar
nutritivo
(un
aproximadamente 15 ml).
7. 1 placa petri esterilizada.
8. Microorganismo a inocular.
4.
tubo
con
Procedimiento:
1. Verter en un vaso de precipitado poca

cantidad de cido ntrico, tal que cubra la
moneda de 10 cntimos.
25

2010
2. Sumergir la moneda dentro de la solucin al

10% de acido ntrico.
3. Con una pinza sacar la moneda de la solucin

de acido ntrico (10%) y lavarla con agua
destilada para eliminar el cido.
4. Colocar la moneda dentro de una placa petri.
5. Inocular
el tubo que
contiene agar nutritivo, agregando una gotita
25

2010
del cultivo problema, mover suavemente para

homogenizar la muestra.
6. Agregar el agar inoculado dentro de la placa
petri que contiene la moneda.
7. Dejar solidificar el agar.

8. Invertir la placa e incubarla a 37C por 48
horas.
5.
Resultados y observaciones:
En el experimento de accin oligodinmica no

se pudo observar placa petri alguna con todas
las zonas de crecimiento (Zona de inhibicin,
zona de mayor crecimiento y la zona de normal
crecimiento).
A lo mximo se pudo observar placas petri con
dos zonas: la zona oligodinmica y la zona de
crecimiento normal (Grupo 4 y grupo 5).
Las placas petri de los dems grupos no
tuvieron los resultados deseados ya que el agar
nutritivo no solidific.
25

2010
El tiempo de incubacin de las placas petri para

demostrar la accin oligodinmica fue de 3
das.
6.
Conclusiones:
Las colonias en el borde del halo de la zona
de inhibicin (zona oligodinmica) son de
mayor tamao que en el resto de la placa,
debido
a
que
tuvieron
una
mayor
disponibilidad de nutrientes que no fueron
utilizados en la zona sin crecimiento.
El que no sea visible las diferentes zonas de
crecimiento en la placa donde est la
moneda, puede deberse a que no se elimin
por completo las impurezas de la moneda.
La accin oligodinmica se debe a que los
iones metlicos se combinan con los grupos
sulfhdricos de ciertas protenas que poseen
los
microorganismos,
produciendo
la
desnaturalizacin de las protenas presentes
en ellos, por tanto evitando el crecimiento
de los microorganismos.
Los metales pesados son activos en muy
bajas concentraciones.
La actividad antibacteriana de los metales
pesados se reduce fuertemente en presencia
de suero y de protenas tisulares.
7.
Recomendaciones:
La moneda debe de estar limpia para evitar
impedimentos en la prueba a realizar.
25

2010
Realizar con sumo cuidado el lavado de la

moneda con cido ntrico.
8.
Bibliografa:
Microbiologa Estomatologa- fundamentos y
gua prctica. 2 Edicin. Negroni. Pg. 114.
Compendio esencial de Qumica
farmacetica. A. Korolkovas, J.H. Burckhalter.
Pag. 566.
http://www.edeca.una.ac.cr/files/carlosmicro
biologia/Clases%20Laboratorio
%20Microbiologia/Manual%20Laboratorio
%20Microbiologia.pdf Accin
oligodinmica de metales pesados.
CUESTIONARIO
Accin bacteriosttica selectiva del cristal
violeta:
1.Agente bacteriosttico:
La accin bacteriosttica se fundamenta en la
inhibicin del desarrollo microbiano mediante el
bloqueo de diferentes factores de reproduccin.
25

2010
No las mata directamente, pues una poblacin

de bacterias sin capacidad de reproduccin o
con capacidad disminuida para la misma es una
poblacin condenada a su desaparicin. En
cambio un agente bactericida es aquel capaz de
matar a las bacterias.
2.Accin bacteriosttica selectiva:
Es aquel efecto que slo inhibe el crecimiento o
reproduccin
de
cierto
grupo
de
microorganismos, mientras que no afecta o
afecta en menos proporcin a otro grupo de
microorganismos.
Es por ello que se agregan a medios de cultivos
agentes bacteriostticos para que stos tengan
carcter selectivo.
3.Aplicaciones:
El NaOH se utiliza en la industria del vino
para limpiar las cubas de madera.
El ozono es utilizado desde antes para
tratamiento de agua, ahora se ha extendido
su utilizacin y se aplica para tratar
ambientes e incluso podemos tratar
directamente sobre el organismo con fines
teraputicos (concentraciones de 0.01 ppm a
menos).
Los antibiticos son usados para preservar los
alimentos, as tenemos las tetraciclinas.
Agentes bacteriostticos se utilizan en la
industria textil como proteccin de
materiales. En la industria del maquillaje para
las cremas, lociones para despus de afeitar,
en perfumes.
25

2010
Accin oligodinmica de los metales pesados:

1.Accin oligodinmica:
Ciertos metales pesados o sus combinaciones
qumicas ejercen efecto antimicrobiano a
concentraciones muy bajas (1 parte en 20
millones), esta accin recibe el nombre de
accin oligodinmica; los ms activos son el
mercurio, la plata y el cobre. Los mercuriales
poseen propiedad antisptica y desinfectante.
Su
actividad
antibacteriana
se
reduce
fuertemente en presencia de suero y de
protenas tisulares. Los organomercuriales son
menos txicos y custicos que las sales
inorgnicas.
2.Aplicaciones:
Se estn haciendo estudios sobre un cepillo
de dientes con una parte del cepillo que
presenta un portacerdas y unas cerdas es el
mismo, con la particularidad de que la parte
del cepillo est provista de componentes a
base de un material de accin olidobinmica
(capa plateada).
El nitrato de plata en solucin 1% es utilizado
para prevenir infecciones gonoccicas.
Sulfato de cobre, zinc son fungicidas.
25

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Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

ACCIN BACTERIOSTTICA SELECTIVA

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

en la piel para prevenir infecciones, en soluciones

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

cambio un agente bactericida es aquel capaz de

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Es por ello que se agregan a medios de cultivos

Nmero de organismos: Mientras mayor sea

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Naturaleza del medio ambiente: Algunos

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Contrario al calor, las temperaturas bajas o el

Desecacin: La falta de agua detiene los

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externa es mucha, el organismo puede morir;

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

pH- Alcalinidad y acidez: se expresa es una

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

microorganismos que poseen un pH mayor de

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Los alcoholes: Los alcoholes daan la

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Jabones y detergentes: Un jabn es una sal

Metales pesados y sus compuestos: La

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

2.Compuestos de plata: El ms que se usa

Colorantes: Los colorantes se utilizan

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

petri segn el modelo:

3. Contar con solucin acuosa de cristal violeta

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

- Por ltimo, para obtener concentracin de

4. Ya obtenido la solucin de cristal violeta de

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

6. Con otra pipeta trasladar 1 ml de solucin

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

12. Esperar a que solidifique el agar para

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

puede deberse a que no se sembr igual

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Sin cristal violeta

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Sin cristal violeta

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

Sin cristal violeta

2. Accin Bacteriosttica de las lagrimas

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

mantener protegido nuestro sistema de los

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

el cual lleva a cabo el organismo para as

ACCIN OLIGODINMICA DE LOS

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

protenas tisulares. Los organomercuriales son

Este fenmeno puede demostrarse en el

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

puede expresarse en partes por milln. Se

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta

1. Verter en un vaso de precipitado poca

Accin bacteriosttica selectiva del cristal violeta