Universidad Autnoma de Chiriqu

Facultad de Ciencias Naturales y Exactas

Escuela de Qumica
Laboratorio de BIO 110
Enzimas

Pertenece a: Daniel caballero (4-782-2042) y Mario Beitia (1-744-1849)

Resumen
(Martnez, 2015) Para que se lleven a cabo todas las funciones vitales en clulas es necesario que
se lleven a cabo un conjunto de reacciones que reciben el nombre de metabolismo. Esta se divide en
la fase anablica (molculas simples transformadas en complejas) que requiere del aporte de
energa para llevarse a cabo, mientras que la otra forma es el catabolismo (que transforma de
molculas complejas a simples) proceso en el cual se libera energa. Todas estas reacciones son
posibles y reguladas (rapidez y especificidad) debido a la presencia que son biocatalizadores de
naturaleza proteica que no se degradan en la reaccin. Pero como poseen naturaleza proteica se
ven afectadas por agentes fsicos (temperatura), qumicos (sales pesadas, alcohol, cidos o bases)
desnaturalizndolas y perdiendo de esta manera su funcin catalizadora o pueden ser ligeramente
alteradas.
Procedimiento:

Determinacin de la presencia de la
catalasa en tejidos animales y vegetales.
Enumere seis tubos de ensayo del 1 al 6
respectivamente, colocando en orden:
trocito de hgado, trocito de carne de
pollo, trocito de carne, trocito de tomate,
un poquito de MnO2 y en el ultimo un
poquito de arena. Luego de haber
introducido, aada 2mL de H 2O2.
Registre los resultados.
Posteriormente en un mortero macere
con arena
las muestras y coloque
respectivamente en los tubos que debe
enumerar del 5 al 8, adicinelo en el
tubo en este mismo orden: hgado
macerado, carne de pollo macerado,
papa macerado y por ultimo tomate
macerado. Terminado proceda a agregar
2 mL de H2O2 y anote los resultados
observados.
Rehso de la enzima
En un tubo de ensayo aada 2 mL de H 2O2 y
agregue un pedacito de hgado de pollo crudo.
Espere la reaccin para luego dividir el
contenido del lquido en dos tubos de ensayo
previamente rotulado con la letra a y b,
realizado equitativamente la separacin por
igual cantidad de lquido en ambos tubos,

proceda en el tubo a aada un pedacito de

hgado y en el B 1 mL de perxido de
Hidrogeno . Concluido estos pasos anote los
resultados.
Factores que afectan la actividad enzimtica.

Efecto de la temperatura

En dos morteros macere con arena un pedazo

de hgado y papa cruda. Enumere 6 tubos de
ensayo, separe tres tubos y en ellos coloque
hgado macerado, en los otros tres 3 pedacitos
de papa. Posteriormente los tubos 1 y 4
(coloque hgado y papa macerada) en bao
mara por 30 minutos. Luego los tubos 2 y 5
(hgado y papa) colquelos en hielo por 30
minutos. Y por ltimo en los tubos 3 y 6 (hgado
y papa) djelos a temperatura ambiente.
Anote los resultados obtenidos.

Efecto del pH

Corte tres pedacitos de hgado y proceda a

colocarlos en tubos previamente identificados
(A y C), al tubo A: agregue 1 mL de H2O, al
tubo B agregue 1 mL de una solucin de pH 4 y
el tubo C aada 1mL de una solucin de pH 11.
Deja reposar por 15 minutos. Posteriormente
aada 2mL de H2O2.

Efecto de la concentracin

Enumere 5 tubos de ensayo y agregue los

siguiente: Tubo 1: 3,8 mL de agua + 0,2 mL de
H2O2. Al tubo 2: 3,5 mL de agua + 0,5 mL de
H2O2. Al tubo 3: 3 mL de agua + 1 mL de H 2O2.
Al tubo 4: 2 mL de agua + 2 mL de H 2O2. Al
tubo 5: 0 mL de agua + 4 mL de H 2O2. Luego
proceda aadir nuevamente un pedacito de
hgado crudo en cada uno de los tubos. Anote
los resultados del procedimiento.

Determinacin de la enzima ptialina

(amilasa)

Enumere cuatro tubos de ensayo y aada en

orden a cada uno, 5 mL de solucin diluida de
almidn + Benedict, luego en el tubo 2: 5 mL de
solucin diluida de almidn + lugol, en el tubo
3: 5 mL de solucin diluida de almidn + saliva.
Luego de haber combinado las muestras con
los reactivos. Proceda a movilizar el tubo 1 al
bao mara, los tubos 2 y 3 en bao mara por
15 minutos y controla que la temperatura no
pase de 37C. Anote los resultados. Despus
del tiempo indicado realiza la prueba Benedict
y lugol en los tubos 2 y 3. Anote sus resultados.

Cuadro 3. Efecto de la temperatura en la

accin enzimtica.
Tubo
1

2
3

5
6

Contenido
macerado
Hgado en
bao
mara
Hgado en
hielo
Hgado a
T
ambiente
Papa en
bao
mara
Papa en
hielo
Papa a T
ambiente

Reaccin
(1-5)
1

5
5

3
2

Resultados

Cuadro 4. Efecto del pH sobre la actividad

Cuadro 1. Determinacin de la presencia deenzimtica.
la enzima catalasa en tejidos animales y
Tubo
Contenido Reaccin
vegetales.
(1-5)
Tubo
Contenido Reaccin
Hgado + 5
(1-5)
agua
1
Hgado
5
Hgado + 1
2
Musculo
4
solucin
de pollo
pH 4
3
Papa
2
Hgado + 2
4
Tomate
3
solucin
5
MnO2
5
de pH 11
6
arena
1
Cuadro 5. Efecto de la concentracin en la
Cuadro 2. Influencia del estado fsico delactividad enzimtica.
tejido en la actividad enzimtica.
tubo
Concentracin Reaccin
Tejido
Reaccin (1-5)
del
sustrato (1-5)
Sin
macerado
(mL)
macerar
0,2
2
Hgado
4
5
0,5
2
Musculo
3
4
1
3
de pollo
2
4
Papa
2
3
4
5
tomate
1
2

Cuadro 6. Determinacin de la actividad de la

amilasa salival.
tubo

1
2

Antes de calentar
Benedict
Cambio
de
coloraci
n

Despus
calentar
Lugol Benedict
No
Se
ocurr observa
i
un punto
nada amarillo
en
el
fondo del
tubo

de
Lugol
No se
produj
o nada

Discusin
(La Guia, 2015) En el cuadro 1. Partiendo como
muestra de control de le suministro MnO 2 a
todas las muestras, incluyendo al tubo que
contena arena. Ya que en procedimientos
posteriores se aadir arena con otra sustancia.
(Christen, 1977) La catalasa en una enzima que
la podemos encontrar en muchos organismos
vivos, y cataliza la reaccin de descomposicin
del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno.
Como observamos las reacciones se dieron a
distintas velocidades. Luego se procedi a
macerar las muestras y otras no. Observamos
que las muestras al ser destruidas sus
membranas celulares, las clulas quedan
expuestas y por ende la enzima tambin que
reaccionara con el perxido de hidrogeno.
En el cuadro 3, 4 y 5 veremos cmo los
factores fsicos que afectan la actividad
enzimtica, en el cuadro 3 se demuestran la
influencia de la temperatura en las enzimas,
ocasionando que se desnaturalicen, cuando se
exponen a altas o bajas temperaturas.
Posteriormente en el cuadro 4 aadimos una
solucin con pH bsico y otra con pH. acido, se
pudo notar que reaccionaron a distintas
velocidades. Todas las enzimas son protenas.
(Martnez, 2007) Por lo tanto, todas las
enzimas sufren desnaturalizacin frente al
calor. Esto quiere decir que cuando la
temperatura es muy elevada, la enzima pierde
su estructura terciaria, por lo tanto su sitio

activo tambin se desnaturaliza, y ya no puede

cumplir su funcin. Sabemos que toda enzima
trabaja especficamente a una temperatura que
le permite realizarlo ptimamente. En especial
la amilasa trabaja ptimamente. En el cuadro 4
se sabe que la eficiencia de una enzima est
ampliamente influenciada por el valor del pH
de su entorno. Experimentalmente el cuadro
demuestra como reacciona la enzima al
adicionrsele una solucin para ver la
influencia del pH. Esto es debido a la carga
de sus cambios de componentes aminocidos
con el cambio en el valor de pH. Cada enzima
se activa en un nivel de pH especfico. En
general, la mayora de las enzimas se
mantienen estables y funcionan bien en el
intervalo
de
pH
de
6
y
8.
Continuando con el procedimiento el cuadro 5
representa cmo influye la concentracin, a
continuacin explicaremos cmo influye la
concentracin del sustrato en la reaccin
enzimtica.
(Izquierdo, 2004) A una concentracin de
enzima constante, la velocidad de la reaccin
aumenta al aumentar dicha concentracin,
mientras que si esta concentracin disminuye
ocurrir lo contrario. (Martinez, 2007) La
velocidad mxima se obtiene cuando los
centros de la enzima estn saturados por el
sustrato, es decir, cuando prcticamente todo
la enzima
se encuentra en forma de
complejo enzima sustrato. Por ultimo
determinamos la actividad de la amilasa
salival con ayuda del Benedict (se emplea
para polisacridos) y el lugol (se emplea para
azucares
reductores,
monosacridos)
experimentalmente
identificamos
el
compuesto orgnico denominado amilasa.
Cuando
se
le
aplica
calor,
como
anteriormente mencionamos la temperatura,
es un factor que altera la actividad
enzimtica
de
la
enzima.
(Barrow, 1975) Cuando se aument el calor
produjo que la accin de los indicadores se
diera a mayor velocidad. As se pudo
identificar con la ayuda de la enzima
presente en la saliva, que provoco que se
convirtiera en un azcar simple, un
monosacrido o disacrido. Sabemos que la

amilasa digiere el almidn para formar

azucares ms simples como la glucosa, estas
son tan pequeas que pueden atravesar las
clulas.

Conclusiones

Comprendimos que en los tejidos

animales, encontramos la presencia de
la enzima catalasa.
Entendimos que una clula al ser
expuesta a circunstancias,
que
involucren su afectacin o dao,
provocara que todos lo que contiene se
exponga muchos ms rpido a
sustancias que le permite reaccionar a
una velocidad definida.
Definimos algunos factores que afectan
la actividad enzimtica, estos son: la
temperatura, el pH y la concentracin
del sustrato.
Identificamos en el cuerpo humano un
enzima que acta sobre los alimentos,
descomponindolo en azucares simples,
como la glucosa.
Comprendimos que las enzimas actan
a una temperatura ptima, que le
permite reaccionar de la manera
correcta sobre las sustancias en el
estado que sea, al ingresar a nuestro
cuerpo. Facilitando as el proceso de
metabolismo orgnico.

Bibliografa
Barrow,
G.
(1975).
Quimica
General.
BuenoAires, Mexico: revert, s.a.
Christen, H. R. (1977). Fundamentos de la
qumica general e inorgnica, Volumen
1. En H. R. Christen, Fundamentos de
la qumica general e inorgnica,
Volumen 1. desconocido: revert s.a .
Izquierdo, F. C. (2004). Cinetica de las
reacciones
quimicas.
Barcelona,
Espaa:
ediciones
universtarias
barcelona.
Martinez, R. (2007). Quimica de la ACS libro.
Obtenido
de

https://books.google.com.pa/books?
id=_FJ8ljXZD7IC&printsec=frontcover&
hl=es&source=gbs_ge_summary_r&ca
d=0#v=onepage&q&f=false
Martinez, J. R. (2007). Quimica: un proyecto
de la american chemical society. En J.
R. Roberto Martinez, Quimica: un
proyecto de la american chemical
society (pg. 52 y 53). Barcelona:
Reverte.
Vera, M. I. (desconocido de desconocido de
2007). google documentos. Obtenido
de
http://exa.unne.edu.ar/quimica/quimge
neral/temas_parciales/Unidad_IX_Equili
brio_Qu_mico_1_.pdf

Anexos
1. Defina los siguientes trminos:
Apoenzima: parte proteica de una
holoenzima y no puede llevar a cabo
una reaccin cataltica ya que no tiene
un cofactor enzimtico. Holoenzima:
Una holoenzima es una protena y un
cofactor enzimtico, que puede ser un
ion o una molcula compleja.
Cofactor: componente no proteico,
termoestable y de baja masa molecular,
necesario para la accin de una enzima
2. Mencione los factores que afectan la
actividad enzimtica?
Entre los factores que afectan la
actividad
enzimtica
tenemos:
temperatura, presin, humedad, pH y
concentracin.
3. La amilasa puede actuar sobre las

grasas
y
protenas?
Explica
La amilasa es alcalina, convierte
azucares complejos como el almidn, en
ms simples, como la dextrina y la
maltosa. Las grasas y protenas no se
ven afectadas por la accin de la
amilasa. Ya que son descompuestas por
sustancias cidas.