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Belo Horizonte
2012
UFMG/ICEx/DQ.909
T.400
Belo Horizonte
2012
M188e
2012
T
AGRADECIMENTOS
A Deus, por tornar esse momento possvel, por me dar foras para seguir adiante e por
sempre me iluminar. Nossa Senhora do Carmo por sempre me proteger e Serva de Deus,
Benigna Victima de Jesus, a sua poderosa intercesso.
Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), em especial ao Departamento de
Qumica (DQ), pela oportunidade concedida.
s professoras Dra. Grcia Divina de Ftima Silva e Dra. Lucienir Pains Duarte, por
me concederem o privilgio de fazer parte da FAMLIA NEPLAM. Agradeo a confiana
depositada em mim e a oportunidade de realizao deste trabalho, a orientao dedicada, o
carinho, o incentivo e a amizade.
minha famlia, que mesmo sem entender quando optei por fazer o Doutorado,
apoiou minha deciso. Agradeo o amor dedicado a mim em todos os momentos, que me
ajudou a superar cada obstculo.
professora Dra. Rute Cunha Figueiredo, que de maneira to simples e
desinteressada, contribuiu enormemente para meu crescimento profissional e pessoal.
Ao professor Dr. Sidney Augusto Vieira Filho (Bibo) pelos ensinamentos, pelas
inmeras caronas, pelo apoio constante e amizade.
Aos professores do Instituto Universitrio de Bioorgnica Antonio Gonzlez (IUBOAG), Dra. Isabel Lpez Bazzocchi e Dr. Ignacio Antonio Jimnez Daz, pela contribuio
valiosa na realizao deste trabalho, pela co-orientao e oportunidade de fazer parte de seu
grupo de pesquisa e, sobretudo, pelo carinho e amizade.
Aos amigos Fernando, Jailton, Djalma, Marcela, Aline, Vanessa, Leandro, Grazielle,
Grasiely e demais colegas do NEPLAM e DQ, pelo companheirismo e auxlio durante a
realizao deste trabalho.
Aos amigos Juan Carlos (El Boli), Oliver, Nuria, Nayra, Gabriel e demais colegas do
IUBO-AG e de Tenerife, por tornarem o estgio na Espanha um perodo to feliz.
s tias Elaine e Neuza pelo acolhimento em sua casa, pelo carinho e cuidado para
comigo.
Ao amigo Alvimar Viana, pelo incentivo e encorajamento constante por meio de suas
sbias palavras.
Aos amigos Renato e Paola, pela oportunidade de passar o Natal em famlia, mesmo
to longe de casa. Obrigada pelo apoio e pelos momentos to agradveis!
professora Dra. Laila Moujir e ao Dr. Manuel Rodrguez Lpez (Profesor Lolo), do
Departamento de Microbiologia da Universidad de La Laguna, pela colaborao na realizao
dos ensaios de citotoxicidade. Muito obrigada pela recepo no laboratrio, pela pacincia,
ensinamentos e amizade.
Aos professores Dra. Ana Luiza Ruiz Gois e Dr. Joo Ernesto de Carvalho da
Universidade Estadual de Campinas e ao professor Dr. ngelo de Ftima, pelo auxlio na
realizao do ensaio de atividade citotxica.
s professoras Dra. Lcia Pinheiro S. Pimenta, Dra. Rosimeire Brondi Alves e Dra.
Maria Amlia Diamantino Boaventura os ensinamentos nas disciplinas cursadas.
Aos professores Dra. Henriete da Silva Vieira, Dr. Fernando Carazza e Dr. Antnio
Flvio de Alcntara pelas valiosas sugestes apresentadas durante o exame de qualificao.
Ao professor Dr. Vagner Santos, do Departamento de Clnica Patolgica e Cirurgia
Odontolgica da UFMG, pelo auxlio nos ensaios antimicrobianos.
Aos professores Dra. Ninoska Flores, Dr. Alberto Gimnez e Dr. Efraim Salamanca,
da Universidad Mayor de San Andrs, Bolvia, pelo auxlio nos ensaios de atividade
leishmanicida.
professora Dra. Jacqueline Aparecida Takahashi pelo auxlio com os ensaios de
atividade inibitria da acetilcolinesterease e atividade antimicrobiana.
Ao professor Dr. Luiz Cludio de Almeida Barbosa, pela amizade e o incentivo a
seguir adiante na ps-graduao.
Aos amigos Leandro Marcos e Rafael Augusto, companheiros de longa data, pela
cumplicidade, carinho e companheirismo.
Ftima Maffili e Joaquim Santanna, pelo incentivo e amizade.
s secretrias do Programa de Ps-Graduao em Qumica, especialmente Paulete
Gerken, pela ateno e eficincia durante todo o processo.
CAPES, FAPEMIG e ao CNPq pelo auxlio financeiro.
Maria do Carmo Mariano, por suas oraes e por me mostrar que para Deus nada
impossvel.
Enfim, a todos que de alguma forma contriburam para que mais essa vitria fosse
conquistada.
Nunca deixe que lhe digam que no vale a pena acreditar no sonho que se tem,
ou que seus planos nunca vo dar certo, ou que voc nunca vai ser algum...
Quem acredita sempre alcana.
Renato Russo
Sumrio
NDICE DE FIGURAS................................................................................................................i
NDICE DE TABELAS ........................................................................................................... ....v
LISTA DE ABREVIATURAS, SIGLAS E SMBOLOS ........................................................ ...viii
RESUMO ................................................................................................................................. ......x
ABSTRACT ............................................................................................................................. ....xii
INTRODUO....................................................................................................................... 1
Taxonomia.................................................................................................................. 5
OBJETIVOS DO TRABALHO.............................................................................................8
CAPTULO 1. ESTUDO FITOQUMICO DE MAYTENUS SALICIFOLIA................... 9
1.1. Materiais e mtodos................................................................................................ 9
1.2. Obteno do material vegetal e preparo dos extratos de M. salicifolia ........... 11
1 .2.1. Preparao dos extratos da raiz de M. salicifolia
...................................11
MS4: 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona..............................................................54
MS5: lupeol..57
MS6: betulina...60
MS7: lup-20(29)-en-3,30-diol..63
MS8: 3-oxo-15,28-di-hidroxi-lup-20(29)-eno....................................................66
MS9: -sitosterol...................................................................................................69
MS10: 4-O-metilepigalocatequina ......................................................................70
MS11: proantocianidina A....................................................................................73
MS12: tingenona...................................................................................................76
MS13: rigidenol....................................................................................................79
MS14: lupenona....................................................................................................82
MS15: ferruginol...................................................................................................83
MS16: pristimerina...............................................................................................85
MS17: gloquidona................................................................................................86
MS18: glutinol......................................................................................................88
MS19: friedelan-1,3-diona....................................................................................89
MS20: 11-hidroxigloquidona..............................................................................91
MS21: gloquidonol................................................................................................92
MS22: 29-hidroxifriedelan-3-ona..........................................................................94
MS23: pinostrobina................................................................................................97
MS24: salicassina...................................................................................................98
MS25: 30-hidroxilupenona..................................................................................108
MS26: nepeticina.................................................................................................109
MS27: 3-epigloquidiol.........................................................................................113
MS28: mistura de 7,di-hidroisoxuxuarina e isoxuxuarina
MS29: 16-hidroxipristimerina............................................................................116
MS30: 6,7-desidroferruginol.................................................................................124
MS31: abruslactona A.......................................................................................... 125
MS32: mistura de 3-oxo-olean-9(11):12-dieno e 3-oxo-ursan-9(11):12-dieno....127
MS33: 3-metoxi-4-hidroxi- trans-cinamaldedo ...............................................128
MS34: siringaldedo .............................................................................................130
MS35: 2-(2-hidroxipropil)- 4-O-metilepigalocatequina....................................131
CAPTULO 2. SNTESE DE STERES DERIVADOS DO LUPEOL.................................137
2.1. Procedimento experimental...................................................................................137
NDICE DE FIGURAS
lupeol..................................................................................................................163
ndice de tabelas v
NDICE DE TABELAS
ndice de tabelas vi
LISTA DE ABREVIATURAS
Deslocamento qumico
Comprimento de onda
ax
Axial
CC
CCDS
CCDP
COSY
Correlation Spectroscopy
Dupleto
dd
Duplo dupleto
DEPT
eq
Equatorial
EAR
ECR
EEtR
EHR
EAT
ECT
EEtT
EHT
Fig.
Figura(s)
Hex
HMBC
Hexano
Heteronuclear multiple bond correlation
HSQC
IV
Infravermelho
L.B.
Liebermann Burchard
multipleto
MHz
MM
Megahertz
Massa molar
Lista de abreviaturas ix
p.
Pgina(s)
PF
Ponto de fuso
Rf
RMN de 1H
RMN de 13C
ROESY
s
SAR
SEAT
SECT
SEHT
SVR
Tripleto
TTPC
Triterpeno pentacclico
Resumo x
RESUMO
No presente trabalho descreve-se o estudo fitoqumico do tronco e raiz de Maytenus
salicifolia Reissek (coletada em Ouro Branco, MG), cuja constituio qumica e avaliao
biolgica ainda no haviam sido relatadas na literatura. Do tronco foram isolados oito
compostos conhecidos, sendo cinco lupanos lupeol, 3-oxo-15,28-di-hidroxi-lup-20(29)eno, lup-20(29)en-3,30-diol, betulina e 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona) e trs friedelanos
(friedelina, dioxofriedelanoehidroxifriedelan-3-ona).
Da raiz foram isolados 22 compostos j descritos na literatura, sendo dois compostos
aromticos (siringaldedo e 3-metoxi-4-hidroxi-trans-cinamaldedo), dois diterpenos
(ferruginol
6,7-desidroferruginol),
um
esteroide
(-sitosterol),
trs
flavonoides
Resumo xi
lupeolila foi citotxico para a linhagem celular K-562. O caproato de lupeolila inibiu o
crescimento de H. pylori, bem como a atividade da enzima acetilcolinesterase. Esta foi inibida
tambm pelo composto 30-hidroxifriedelan-3-ona.
Os resultados obtidos contriburam para o estudo quimiotaxonmico da famlia
Celastraceae e mostram que M. salicifolia pode vir a ser uma fonte alternativa de compostos
que sejam possveis prottipos de frmacos que atuem em diferentes enfermidades.
Abstract xii
ABSTRACT
In this work it is described the phytochemistry study of stems and roots of Maytenus
salicifolia Reissek (collected in Ouro Branco city, Minas Gerais state), which chemical
constitution and biological activity have not been yet reported in the literature. It were isolated
dioxofriedelane,
30-
lupeol, betulin,
4-O-
compounds
are
new
in
the
literature:
2-(2-hydoxypropil-4-O-
Introduo
INTRODUO
A utilizao de plantas com fins medicinais para tratamento, cura e preveno de
doenas uma das mais antigas formas de prtica medicinal da humanidade (VEIGA JR e
PINTO, 2005). Nos ltimos anos tem sido verificado o aumento do interesse cientfico pelas
plantas, principalmente devido perda acelerada da biodiversidade vegetal (PREZ, 2000).
Alm disso, produtos naturais tm sido teis como compostos-modelo (lead structures) para
a obteno de novos frmacos e para o desenvolvimento de novos agroqumicos (COPPING e
DUKE, 2007).
A famlia Celastraceae pantropical e constitui-se por ervas, cips lenhosos, arbustos
e rvores que ocorrem em regies tropicais e subtropicais. A literatura lista cerca de 100
gneros, com aproximadamente 1.300 espcies (SIMMONS et al., 2008). Alm dos atributos
medicinais, plantas dessa famlia apresentam caractersticas ornamentais em funo da
semelhana de suas folhas e frutos com o azevinho, utilizado em decoraes de natal no
hemisfrio norte tendo, por essa razo, sido introduzida no paisagismo (SILVA, 2007).
As primeiras pesquisas qumicas sobre Celastrceas tiveram incio no fim do sculo
XIX, a partir do isolamento da maitansina (1), um alcaloide ansamacroldeo presente no lenho
de plantas do gnero Maytenus sp. provenientes da frica Oriental e que exibe atividade
antitumoral (KUPCHAN et al., 1972). O interesse por essa famlia foi intensificado com a
descoberta da ao antitumoral apresentada pela tingenona (2), um quinonametdeo de
natureza
triterpnica
pentacclica
(MARINI-BETTOLO,1974).
O
O
N
O
Cl
O
O
O
O
OH
O
(1)
(2)
Introduo
(MACARI
et
al.,
2006).
Atividades
antileishmania,
anti-inflamatria,
antimicrobiana e atividade moderada contra HIV-1 protease foram observadas nos extratos de
M. senegalensis (HUSSEIN et al., 1999; SOSA et al., 2007).
2
Introduo
O
HO
O
H
O
O
(3)
O
O
O
O
H
O
HO
(4)
O
Introduo
et al., 2006) e escutiona (6)de M. scutioides (GONZLEZ et al., 1996). Estes compostos
apresentaram atividade citotxica sobre clulas de carcinomas de colo de tero e laringe e
atividade inseticida (RODRIGUEZ et al., 2005; AVILLA et al., 2000).
O
C
H
O
HO
HO
(5)
(6)
Introduo
artrite que o lupeol (8) (KWEIFIO-OKAI et al., 1995). Alm disso, o linoleato de lupeolila
(9) exibiu efeito antitumoral mais relevante que o lupeol (CHATURVEDI et al., 2008).
H
H
H3 C
(CH 2) n
(7) [n=14]
HO
(8)
Tendo em vista que no NEPLAM foi obtida expressiva quantidade de lupeol a partir
do extrato hexnico das folhas de M. salicifolia (MIRANDA, 2007), tornou-se possvel
realizar transformaes qumicas deste triterpeno para obteno de derivados, principalmente
steres que possam contribuir em estudos de correlao estrutura qumica - atividade
biolgica e toxicolgica de derivados lupnicos. A obteno dos steres e a realizao de
testes biolgicos, como antitumoral e anti-inflamatrio, se justificam para estes derivados,
uma vez que estas atividades j foram verificadas em compostos anlogos (CHATURVEDI et
al., 2008).
Introduo
B
A
Magalhes, 09/2008)
C
C
Introduo
Objetivos
OBJETIVOS DO TRABALHO
Os objetivos deste trabalho consistiram na realizao do estudo fitoqumico do
tronco e raiz de Maytenus salicifolia, realizao de testes biolgicos (envolvendo
atividade antimicrobiana e antitumoral, dentre outras) com extratos, fraes e
constituintes qumicos puros isolados da planta e sntese de steres derivados do lupeol.
Este trabalho propiciou a continuidade do estudo da relao entre constituio
qumica e potencial biolgico de espcies do gnero Maytenus e outras espcies da
famlia Celastraceae, de modo a contribuir para o estudo quimiotaxonmico da mesma.
Foram feitas tambm, modificaes estruturais em um triterpeno pentacclico isolado
desta planta e, posteriormente, avaliao de atividade biolgica dos derivados.
1.1.
Materiais e mtodos
qumicos atravs
de diferentes
processos
cromatogrficos;
elucidao estrutural com o auxlio de mtodos espectroscpicos de anlise;
reaes de esterificao do triterpeno pentacclico lupeol;
realizao de testes antimicrobianos, leishmanicida, citotxicos e de inibio da
enzima acetilcolinesterase com constituintes isolados ou sintetizados.
13
Avance III 600, Bruker Avance AMX- 500 (do Instituto Universitrio de Bioorgnica
Antonio Gonzlez Espanha), Bruker Avance DRX-400 ou em Bruker Avance DPX-200
MHz. Nos experimentos de RMN foi utilizado como referencial interno, o sinal do
tetrametilsilano (TMS). Solventes deuterados utilizados encontram-se indicados em cada
caso. Os deslocamentos qumicos () foram expressos em partes por milho (ppm) e as
constantes de acoplamento (J), em Hertz (Hz).
Os espectros de massas de alta e baixa resoluo foram obtidos em espectrmetro
Micromass AutoSpec do Instituto Universitrio de Bioorgnica Antonio Gonzlez - Espanha .
10
11
Raiz moda de
M. salicifolia
(m= 678,05 g)
1- Extrao exaustiva com hexano
2- Filtrao
3- Remoo do solvente
(EHR; m= 4,20 g)
Extrato Clorofrmico
Torta 2
(ECR; m = 6,98 g)
7- Extrao exaustiva com acetato
de etila
8- Filtrao
9- Remoo do solvente
Extrato em Acetato de
etla (EAR; m = 9,65 g)
Torta 3
10- Extrao exaustiva com etanol
11- Filtrao
12- Remoo do solvente
Extrato Etanlico
Torta 4
(EEtR; m = 86,35 g)
12
Torta 1
4- Extrao exaustiva com clorofrmio
5- Filtrao
6- Remoo do solvente
Extrato Hexnico
(EHT; m = 14,65 g)
SECT
(m= 2,04 g)
Torta 2
Extrato Clorofrmico
(ECT; m = 6,99 g)
Extrato em Acetato de
etila (EAT; m = 54,75 g)
gg)
Torta 4
(EEtT; m= 180,90 g)
14
Frao 3
MS1
13,0 mg
SEHT
0,47 g
Frao 7
293,0 mg
Subgrupo
9-20
227,0 mg
MS2
227,0 mg
Subgrupo 2223
MS3
27,0 mg
Figura 5: Compostos obtidos de SEHT por cromatografia em coluna. MS1: friedelina; MS2:
3,16-dioxofriedelano; MS3: 30-hidroxifridelan-3-ona.
15
16
17
Grupo 6
MS2
86,0 mg
Grupo 7
1,70 g
MS4
30,0 mg
EHT
14,65 g
MS2
34,0 mg
Grupo 8
137,0 mg
MS5
93,0 mg
Grupo 10
25,0 mg
MS5
20,0 mg
Grupo 11
20,0 mg
MS6
13,0 mg
MS1
20,0 mg
Grupo 12
2,48 g
MS7
32,0 mg
Figura 6: Compostos obtidos de EHT por cromatografia em coluna. MS1: friedelina; MS2:
3,16-dioxofriedelano; MS4: 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona; MS5: lupeol; MS6:
betulina; MS7: lup-20(29)-en-3,30-diol.
Destes, apenas os grupos 18 (ECT18, 1,94 g) e 20 (ECT 20, 1,41 g) foram estudados, por se
mostrarem mais promissores.
Grupo 18
O material deste grupo (ECT18; 1,94 g) apresentou-se com aspecto pastoso e de cor
verde. Foi purificado por CC, tendo como sistema eluente clorofrmio, acetato de etila e
metanol, puros ou em misturas de polaridades crescentes. Foram obtidas 21 fraes de 125
mL cada. A frao 5 foi lavada com acetona e, em seguida, observou-se a precipitao de um
slido branco. A anlise por RMN e comparao com padres indicaram tratar-se de 3,16dioxofriedelano (MS2, 15,0 mg).
Grupo 20
O material deste grupo (ECT20; 1,41 g) apresentou o mesmo aspecto de ECT 18 e foi
submetido a CC de slica-gel, utilizando-se como eluentes clorofrmio, acetato de etila e
depois metanol, puros ou em misturas em ordem crescente de polaridade. Esta coluna levou
obteno de 44 fraes de 125 mL cada, que foram reunidas em 22 subgrupos. A anlise
comparativa por CCDS permitiu reunir os subgrupos 8, 9 e 10 (C28, 37,5 mg). A frao C28
foi submetida CC de slica-gel, utilizando os eluentes descritos anteriormente. Desta coluna
foram obtidas 28 fraes de aproximadamente 10 mL cada, as quais foram agrupadas aps
anlise por CCDS em dois subgrupos. O primeiro (C3A, 8,4 mg) foi purificado por meio de
cromatoplaca preparativa. Aps filtrao e secagem, foi obtido um slido branco (3,6 mg),
que foi submetido anlise por RMN e identificado como 3-oxo-1528-di-hidroxilup20(29)-eno (MS8).
Na Figura 7 esquematiza-se a elaborao de ECT, enfatizando os grupos de fraes
que levaram obteno dos compostos mencionados previamente.
ECT18
1,94 g
Frao 5
MS2
15,0 mg
ECT
6,98 g
ECT20
1,41 g
C28
37,5 mg
MS8
3,6 mg
Figura 7: Compostos obtidos de ECT por cromatografia em coluna. MS2: 3,16dioxofriedelano; MS8: 3-oxo-15--28-di-hidroxilup-20(29)-eno.
19
Foi feita CCDS de SECT (2,04 g), porm, nenhuma mancha bem definida referente a
qualquer substncia foi observada. Assim, esta amostra no foi estudada.
A anlise por CCDS de EAT e SEAT (7,73 g) mostrou que ambos possuam a mesma
constituio qumica. Assim, trabalhou-se somente EAT.
20
21
EAT
54,75 g
EA2
MS9
201,8 mg
EA4
MS10
28,4 mg
EA6
7,79 g
Fraes 20
a 28
MS10
23,0 mg
Fraes 30
a 34
MS11
20,0 mg
de aproximadamente 10 mL cada. Pela anlise comparativa das fraes coletadas foi possvel,
atravs de CCDS reuni-las em nove grupos. Entretanto, observou-se que apenas o quinto
grupo (SHR5; 856,0 mg) era mais promissor. SHR5 foi submetido a CC de slica-gel 60,
tendo como eluente hexano, clorofrmio, acetato de etila e depois metanol, puros ou em
misturas em ordem crescente de polaridade. Esta purificao deu origem a 57 fraes, que
foram reunidas em seis subgrupos, conforme a semelhana observada nas placas de CCDS.
Destes, os mais promissores foram estudados.
Subgrupo 1 (fraes 1 a 5)
Este subgrupo (133,0 mg) foi submetido a CC de slica-gel 60, tendo como sistema
eluente hexano, clorofrmio, acetato de etila e depois metanol, puros ou em misturas em
ordem crescente de polaridade. Esta deu origem a 40 fraes, que foram reunidas em quatro
subgrupos, conforme a semelhana observada nas placas de CCDS. O subgrupo mais
promissor (SR5A1; 15,0 mg) foi analisado por comparao com padres por meio de CCDS e
identificado como -sitosterol (MS9).
23
Subgrupo
1
133,0 mg
MS9
15,0 mg
SR5A1
SEHR
1,35 g
Subgrupo
2
507,0 mg
SR5B1
MS13
87,0 mg
SR5B2
MS14
30,0 mg
Frao 1
O material da frao 1 (45,0 mg) apresentou-se como um slido amarelo e, por estar
impuro, foi submetido CCDS preparativa. O sistema eluente foi a mistura C6H14 - CH2Cl2
(4:1). Contudo, no foi isolada substncia pura deste grupo.
24
Frao 2
A frao 2 (250,0 mg) apresentou-se como um slido de cor alaranjada. Foi
submetido CC de slica-gel 60, cuja fase mvel utilizada foi 15 mL da mistura
hexano:AcOEt nas seguintes propores: 1:0, 39:1, aumentando-se a concentrao de AcOEt
na taxa de 2% at 3:1. Em seguida, utilizou-se AcOEt 100%. A coluna foi finalizada com
MeOH. Foram obtidas 44 fraes, que foram agrupadas de acordo com a semelhana
apresentada na placa de CCDS. Das reunies formadas, estudou-se o subgrupo ER2.
O material deste subgrupo (fraes 2 a 6; 60,0 mg) apresentou-se como um slido
vermelho. Este foi submetido a CC de slica-gel 60, utilizando-se 15 mL da mistura hexano /
ter etlico como fase mvel nas propores de: 100:0, 98:2, aumentando-se a concentrao
de ter etlico na taxa de 1% at 90:10. Em seguida utilizaram-se as propores 88:12, 85:15 e
70:30. A coluna foi finalizada com 15 mL de AcOEt. Foram recolhidas 40 fraes,
reagrupadas segundo a semelhana apresentada nas placas de CCDS. Estes resultaram em
dois subgrupos.
Frao 3
Esta frao (2,03 g) apresentou-se como um slido vermelho e foi submetido a
coluna de sephadex LH-20; a fase mvel foi a mistura C6H14:CHCl3:MeOH (2:1:1). Foram
recolhidas 24 fraes de 20 mL cada, reunidas conforme a semelhana apresentada nas placas
de CCDS. Foram obtidos cinco subgrupos, dos quais quatro foram estudados.
25
Este subgrupo foi submetido a CC de slica-gel 60, tendo como sistema eluente 50
mL da mistura C6H14 : AcOEt nas seguintes propores: 100:0, 98:2, aumentando a
concentrao de AcOEt na taxa de 2% at 80:20. Em seguida, foram utilizadas as propores
70:30, 50:50 e AcOEt 100%. A coluna foi finalizada com 50 mL de MeOH. Foram recolhidas
61 fraes, que foram reagrupadas pelo procedimento descrito anteriormente, resultando em
quatro subgrupos. A purificao do subgrupo mais promissor dessa coluna descrita a seguir.
27
28
Frao ER5A
Esta frao (3,0 mg) apresentou-se como uma mancha bem definida, acompanhada
de uma segunda mancha mais clara na placa de CCDS. Aps anlise por RMN, concluiu-se
que ER5A constituda principalmente por 11-hidroxigloquidona (MS20).
30
Subgrupo ER6D
A purificao de ER6D (fraes 58 a 73; 20,0 mg) foi feita pelo mtodo usado no
subgrupo anterior, diferindo somente na fase mvel (hexano/ter etlico 4:1). Desta
cromatografia, foi isolada quantidade adicional de MS12 (1,8 mg).
Frao 4
A frao 4 (1,13 g) foi submetida a cromatografia em coluna de sephadex LH-20,
cuja fase mvel foi a mistura C6H14-CHCl3-CH3OH (2:1:1). Foram recolhidas 17 fraes de
20 mL cada. Estas foram agrupadas segundo o perfil apresentado na placa de CCDS,
resultando nos seguintes subgrupos:
31
32
composto, que foi analisado por RMN. Os dados observados permitiram identificar ER7B2
como 30-hidroxilupenona (MS25, 2,0 mg)
Frao 6
A frao 6 (53,7 mg) foi submetida a CC de slica-gel 60 tendo como sistema eluente
10 mL da mistura CH2Cl2-acetona nas seguintes propores: 1:0; 99:1; 49:1, aumentando a
concentrao de acetona na taxa de 2% at 9:1. Em seguida utilizou-se a mesma mistura nas
concentraes 1:1 e 0:1. A coluna foi finalizada com 10 mL de AcOEt. Foram recolhidas 38
fraes, reagrupadas em quatro subgrupos, de acordo com a semelhana observada nas placas
de CCDS. Dos subgrupos obtidos, o subgrupo ER8C (fraes 32 34; 34,0 mg) foi submetido
a CCDS preparativa, cuja fase mvel foi a mistura CH2Cl2 98:2 acetona. Desta cromatografia
foi possvel isolar MS27, que aps anlise por RMN foi identificado como 3-epi-gloquidiol
(2,5 mg).
34
MS14
(7,0 mg)
Frao 2
(250 mg)
MS16
(209,3 mg)
MS15
(1,0 mg)
MS17
(3,5 mg)
MS18
(3,0 mg)
Frao 3
(2,03 g)
MS5
(3,7 mg)
MS9
(37,9 mg)
EHR
(4,20 g)
MS13
(27,5 mg)
MS16
(3,0 mg)
MS20
(3,6 mg)
Frao 4
(1,13 g)
MS22
(2,0 mg)
MS25
(2,0 mg)
MS26
(1,5 mg)
MS12
(145,2 mg)
Frao 6
(53,7 mg)
MS27
(2,5 mg)
MS9
(19,0 mg)
MS12
(3,8 mg)
MS19
(2,2 mg)
MS20
(12,6 mg)
MS21
(2,0 mg)
MS22
(12,0 mg)
MS23
3,2 mg
MS24
4,2 mg
MS15
(1,0 mg)
Figura 10: Compostos obtidos de EHR por diversos mtodos cromatogrficos. MS1: friedelina; MS9:
-sitosterol; MS12: tingenona; MS13: rigidenol; MS14: lupenona; MS15: ferruginol;
MS16: pristimerina; MS17: gloquidona; MS18: glutinol; MS19: friedelan-1,3-diona;
MS20: 11-hidroxigloquidona; MS21: gloquidonol; MS22: 29-hidroxifriedelan-3-ona;
MS23: pinostrobina; MS24: salicassina; MS25: 30-hidroxilupenona; MS26: nepeticina;
MS27: 3-epi-gloquidiol.
35
Este grupo (782,0 mg) foi submetido cromatografia em coluna de Sephadex LH-20.
A fase mvel utilizada foi a mistura CHCl3/MeOH (1:1). Foram recolhidas 32 fraes, que
foram agrupadas segundo a semelhana apresentada nas placas de CCDS. O estudo dessas
fraes descrito a seguir.
37
38
propores 70:30; 60:40; 50:50 e 100%. A coluna foi finalizada com metanol, sendo
recolhidas 51 fraes, das quais estudou-se o subgrupo EC13E ( fraes 34 a 37, 12,0 mg).
Este foi submetido a CCDS preparativa, para a qual o sistema eluente foi a mistura
hexano/ter etlico (3:7). Dessa cromatografia foi possvel isolar MS34 (1,7 mg), que aps
anlise de seu espectro de RMN de 1H e comparao com os dados da literatura foi
identificado como siringaldedo.
41
ECR10
(258,7 mg)
MS28
(6,0 mg)
MS29
(15,0 mg)
ECR13
(782,0 mg)
MS26
(9,0 mg)
MS30
(5,0 mg)
MS12
(89,0 mg)
MS17
(1,2 mg)
MS15
(89 mg)
MS9
(5,3 mg)
ECR
(4,20 g)
ECR15
(125,0 mg)
MS12
(3,0 mg)
ECR17
(1,6 g)
MS31
(9,0 mg)
MS32
(4,8 mg)
MS13
(26,9 mg)
ECR21
(708,0 mg)
ECR22
(164,0 mg)
MS20
(7,2 mg)
MS9
(3,3 mg)
MS31
(3,0 mg)
MS13
(2,0 mg)
MS33
(9,0 mg)
MS34
(1,7 mg)
Figura 11: fraes obtidas de ECR por mtodos cromatogrficos diversos. MS9:-sitosterol;
MS12: tingenona; MS13: rigidenol; MS17: gloquidona; MS20: 11hidroxigloquidona; MS26: nepeticina; MS28: mistura de dmeros; MS29:
16hidroxipristimerina; MS30: 6,7-desidroferruginol; MS31: abruslactona A;
MS32: mistura de dienos; MS33: 3- metoxi- 4-hidroxi-trans-cinamaldedo;
MS34: siringaldedo.
42
43
EAR
9,6 g
Frao 7
13,0 mg
MS35
8,0 mg
Frao 8
293,0 mg
MS11
208,5 mg
Frao 14
MS10
417,0 mg
Figura 12- Fraes obtidas de EAR por diversos mtodos cromatogrficos. MS10: 4- Ometilepigalocatequina; MS11: proantocianidina A; MS35: 2-(2-hidroxipropil)4-O-metilepigalocatequina.
44
30
20
27
18
17
11
22
13
1
16
3
O
28
14
10
26
25
4
6
24
23
O composto MS1 apresentou-se como um slido branco amorfo com faixa de fuso
de 203 - 205 oC. O espectro de RMN de 1H de MS1 (Fig. 13) registrou sete simpletos
relativos a sete grupos metila e um dupleto (J = 6,0 Hz) em 0,87, correspondente metila
3.0
2.0
1,051
1,009
1,002
0,954
-0,0000
0,886
0,725
0,871
1,289
1,181
1,486
1,392
1,375
1,345
1,337
3.00
6.18
3.27
6.18
3.07
3.36
9.05
4.0
6.78
5.0
1.00
1.26
6.0
1.05
7.0
1,547
1,542
1.00
1.94
1.03
ppm (t1)
1,695
1,675
1,662
1,965
1,958
1,941
1,771
1,740
2,296
2,278
2,253
2,237
0,725
0,886
0,871
1,009
1,002
0,954
1,051
2,413
2,405
2,401
2,379
2,371
2,367
1,392
1,375
1,345
1,337
1,289
1,486
1,547
1,542
1,662
1,695
1,675
1,771
1,740
1,181
3.00
6.18
3.27
6.18
1.50
3.07
9.05
6.78
2.00
1.00
1.26
1.05
ppm (t1)
3.36
1,965
1,958
1,941
7,264
1.0
0.0
45
O espectro de RMN de 13C de MS1 (Fig. 14) mostrou um sinal em C 213,1, atribudo
ao carbono do grupo carbonila. Os sinais em C 14,7 e 6,8 so atribudos aos grupos metila
caractersticos da classe friedelano (C-24 e C-23, respectivamente) (MAHATO e KUNDU,
1994). Pela comparao com dados da literatura (MAHATO e KUNDU, 1994; Tabela 1,
30.519
30.010
28.178
22.289
20.263
18.665
18.252
17.953
-0.00000
6.823
14.664
36.033
35.646
35.360
35.029
32.799
32.442
32.106
31.796
39.716
39.265
38.317
37.466
42.824
42.150
41.533
41.316
53.121
58.242
59.508
213.142
29
-0.00000
6.823
17.953
14.664
18.252
20.263
18.665
30.010
28.178
22.289
31.796
30.519
32.106
32.442
35.029
32.799
35.646
35.360
36.033
37.466
38.317
39.265
42.824
42.150
41.533
41.316
39.716
53.121
59.508
58.242
30
20
27
18
17
11
22
13
1
14
10
3
O
8
25
28
16
26
6
24
23
60
ppm (t1)
200
50
40
30
150
20
10
100
50
ppm (t1)
46
13
MS1
Carbono
DEPT135
22,3
CH2
22,3
2
3
4
5
41,5
213,1
58,2
42,1
CH2
C
CH
C
41,5
213,2
58,2
42,1
41,3
CH2
41,3
7
8
9
10
18,2
53,1
37,5
59,5
CH2
CH
C
CH
18,2
53,1
37,4
59,4
11
35,6
CH2
35,6
12
13
14
30,5
39,7
38,3
CH2
C
C
30,5
39,7
38,3
15
32,4
CH2
32,4
16
17
18
36,0
30,0
42,8
CH2
C
CH
36,0
30,0
42,8
19
20
35,2
28,2
CH2
C
35,3
28,1
21
32,8
CH2
32,7
22
39,3
CH2
39,2
23
6,8
CH3
6,8
24
14,7
CH3
14,6
25
18,0
CH3
17,9
26
20,3
CH3
20,2
27
18,7
CH3
18,6
28
32,1
CH3
32,1
29
35,0
CH3
35,0
30
31,8
CH3
31,8
47
MS2: 3,16-dioxofriedelano
29
30
20
27
18
17
11
22
13
1
14
10
16
28
O
3
O
25
4
26
6
24
23
5.0
4.0
3.0
2.0
0,740
0,000
0,901
0,869
1,049
0,964
1,299
1,199
3.00
10.16
3.29
2.53
3.61
4.34
2.77
4.65
1.37
2.43
6.0
2.33
7.0
1,425
1.00
1.27
2.66
ppm (t1)
1,762
1,745
1,572
1,469
2,454
2,362
2,271
2,235
2,126
2,033
0,740
0,869
0,901
0,964
1,049
1,299
1,425
1,469
1,572
1,199
3.00
10.16
1.50
3.29
2.53
4.34
2.77
4.65
1.37
2.43
ppm (t1)
3.61
1,762
1,745
7,274
0,90, 0,96, 1,05, 1,20, 1,30 e 1,42, referentes a oito grupos metila.
1.0
0.0
13
apresentaram sinais correspondentes a 30 tomos de carbono, sendo oito CH3, dez CH2,
quatro grupos CH e oito tomos de carbono no hidrogenado. Os sinais em C 219,1 e 212,8
foram associados a grupos carbonlicos em C-3 e C-16, respectivamente. A comparao com
48
dados da literatura (Tabela 2, p.50) permitiu identificar MS2 como 3,16-dioxofriedelano. Este
22.144
20.182
18.499
14.561
6.770
16.119
17.276
27.487
27.260
28.954
31.445
30.976
30.626
37.490
35.243
38.963
41.987
41.327
40.821
40.302
43.761
45.173
57.980
52.187
50.040
6.770
14.561
17.276
16.119
18.499
20.182
22.144
27.260
28.954
27.487
30.626
30.976
31.445
35.243
38.963
37.490
41.987
41.327
40.821
40.302
43.761
45.173
50.040
52.187
59.084
57.980
59.084
212.758
219.055
composto foi isolado pela primeira vez de M. diversifolia (NOZAKI et al., 1986).
29
30
20
27
18
17
11
22
13
1
14
10
16
28
O
3
O
25
4
26
6
24
60
ppm (t1)
50
40
30
200
20
10
150
23
100
50
ppm (t1)
60
ppm (t1)
50
40
30
20
6.766
14.562
18.500
17.274
16.117
20.184
22.143
30.627
28.949
27.261
30.976
31.454
35.297
35.170
40.822
41.327
43.770
50.038
52.194
59.086
57.983
10
49
13
(CDCl3)
MS2
Carbono
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
C
22,1
41,3
212,8
58,0
42,0
40,8
18,5
52,2
37,5
59,1
35,3
29,0
39,0
40,3
50,0
219,0
45,2
43,8
35,3
27,5
31,5
30,6
6,8
14,6
17,3
20,2
16,1
27,5
31,0
DEPT135
CH2
CH2
C
C
C
CH2
CH2
CH
C
CH
CH2
CH2
C
C
CH2
C
C
CH
CH
C
CH2
CH2
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
C
22,2
41,4
212,5
58,2
42,1
41,0
18,6
52,4
37,7
59,4
35,4
29,1
39,2
40,5
50,2
218,8
45,3
44,0
35,5
27,6
31,7
30,8
6,8
14,7
17,3
20,3
16,2
27,4
31,1
30
35,2
CH3
35,2
50
MS3: (30-hidroxifriedelan-3-ona)
29
HOH2 C 30
20
27
18
17
11
22
13
1
14
10
3
O
8
25
16
28
26
6
24
23
sinal em H 3,35 (1H, d, J= 10,8 Hz) e outro em H 3,43 (1H, d, J= 10,4 Hz), que esto
relacionados a tomos de hidrognio diasterotpico em carbono oxigenado.
Foi
3.0
2.0
1,190
1,152
1,074
1,007
0,998
0,991
0,970
0,886
0,963
0,725
0,871
0,000
1,351
1,258
1,547
1,514
1,490
1,479
1,394
5.37
11.06
12.89
4.41
3.26
2.76
4.09
11.04
16.27
4.0
4.58
5.0
2.03
6.0
4.21
2.31
2.00
7.0
ppm (t1)
1,674
2,304
2,290
2,271
2,254
2,246
2,238
2,230
1,959
1,953
1,774
1,770
1,744
2,413
2,404
2,378
2,370
3,364
3,337
3,435
3,409
7,261
1.0
0.0
13
p.52), permitiu identificar a presena de 30 tomos de carbono, dentre os quais h sete grupos
CH3, 12 CH2, quatro CH e sete tomos de carbono no hidrogenado (Tabela 3, p.53). O sinal
51
em C 71,8 foi atribudo ao carbono metilnico ligado a grupo OH. A comparao de todos os
dados obtidos com a literatura permitiu identificar MS3 como 30-hidroxifriedelan-3-ona. Este
28.054
27.848
22.179
19.857
18.495
18.125
17.915
-0.094
14.559
6.736
30.408
29.870
29.615
29.218
28.840
32.025
35.812
35.454
33.265
38.254
38.011
37.323
40.131
39.676
42.593
42.050
41.405
41.155
58.100
59.350
14.559
17.915
18.495
18.125
19.857
22.179
27.848
28.054
29.615
29.218
28.840
29.870
30.408
32.025
33.265
38.011
37.323
35.812
35.454
38.254
39.676
40.131
41.155
42.050
41.405
42.593
71.810
213.221
composto foi isolado pela primeira vez de Catha cassinoides (BETANCOR et al, 1980).
29
HOH2 C 30
20
27
18
17
11
22
13
1
14
10
3
O
28
26
25
4
16
6
24
23
40.0
35.0
30.0
25.0
20.0
15.0
10.0
ppm (t1)
200
150
100
50
ppm (t1)
70
60
50
40
30
20
6.743
14.566
18.140
17.920
18.498
28.855
28.056
22.184
19.860
29.226
32.041
30.409
29.626
38.005
35.819
35.536
35.460
41.409
41.162
42.604
52.869
58.110
59.357
71.820
Figura 19- Espectro de RMN de 13C de MS3 (30-hidroxifriedelan-3-ona) (CDCl3, 100 MHz).
10
ppm (t1)
Tabela 3- Dados de RMN de 13C (100 MHz, CDCl3) de MS3 e dados de 30-hidroxifriedelan3-ona descritos na literatura (BETANCOR et al., 1980)
30-hidrofriedelan-3-ona
(CDCl3)
MS3 DEPT-135
Carbono
1
C
22,3
CH2
C
22,3
2
3
4
41,5
213,3
58,2
CH2
C
CH
41,6
212,9
58,3
5
6
7
42,1
41,2
18,2
C
CH2
CH2
42,5
41,4
18,3
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
53,0
37,4
59,4
35,6
29,7
39,8
38,3
32,1
29,7
30,0
42,7
30,5
33,4
28,2
CH
C
CH
CH2
CH2
C
C
CH2
CH2
C
CH
CH2
C
CH2
53,1
37,5
59,1
35,7
29,4
39,4
38,2
32,2
29,7
30,1
42,9
30,6
33,5
28,3
22
23
24
39,8
6,8
14,7
CH2
CH3
CH3
39,9
6,8
14,7
25
26
18,0
18,6
CH3
CH3
18,0
18,6
27
28
20,0
32,1
CH3
CH3
20,0
32,2
29
30
28,9
71,8
CH3
CH2
29,0
72,1
53
MS4: 28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona
29
H
30
20
19
22
13
11
26
25
1
14
10
17
OH
28
16
8
5
27
O
23
24
0,959
0,930
1,027
1,311
1,070
2,456
2,454
2,425
3,316
3,830
3,828
3,775
3,371
4,120
4,687
4,588
1,920
1,685
1,455
1,360
2.0
50.92
36.94
14.49
3.0
11.33
4.0
6.02
5.0
1.01
6.0
1.00
2.41
0.75
7,279
1.0
0.0
109.705
23
100
25
10
5
30
11
1
13
14
16
29
26
28
50
6.782
50
19.045
15.918
15.745
14.639
19.613
25.157
21.508
21.315
20.992
27.342
26.980
26.593
100
29.072
150
34.086
33.920
33.460
29.683
200
20
39.779
39.543
37.362
30
49.683
48.635
47.720
40
54.844
50
60.405
60
6.773
15.910
15.736
14.629
14.412
17.668
19.602
19.035
20.982
21.305
25.145
26.589
29.673
29.063
26.971
33.509
33.451
34.078
33.911
39.770
39.536
38.052
37.353
36.805
40.799
40.731
42.953
42.791
42.712
47.282
47.710
49.674
48.625
54.836
60.397
19.602
19.035
17.668
15.910
15.736
14.629
6.773
14.412
21.305
20.982
25.145
29.673
29.063
26.971
26.589
38.052
37.353
36.805
34.078
33.911
33.509
33.451
40.799
40.731
39.770
39.536
48.625
47.710
47.282
42.953
42.791
42.712
49.674
54.836
60.397
109.701
106.788
154.619
150.345
218.210
elucidado. Na Tabela 4 (p.56), foram listados valores dos tomos de carbono de maior
intensidade e estes foram comparados com a literatura (KIM et al., 2002), sugerindo para a
ppm (t1)
10
ppm (t1)
0
20
H
19
17
22
OH
O
27
24
ppm (t1)
55
13
28-hidroxilup-20(29)-en-3-ona
(CDCl3)
MS4
Carbono
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
C
39,5
33,4
218,3
47,3
54,8
19,0
34,1
40,8
49,7
36,8
21,0
25,1
37,4
42,7
26,6
29,1
47,7
48,6
47,7
150,3
29,7
33,9
27,0
21,3
15,9
15,8
14,6
60,4
109,7
19,6
DEPT135
CH2
CH2
C
C
CH
CH2
CH
C
CH
C
CH2
CH2
CH
C
CH2
CH2
C
CH
CH
C
CH2
CH2
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH2
CH2
CH3
C
39,5
33,4
218,2
47,3
54,8
19,0
34,1
40,8
49,7
36,8
21,0
25,1
37,3
42,7
26,6
29,1
47,7
48,6
47,7
150,3
29,7
33,9
27,0
21,3
15,9
15,7
14,6
60,4
109,7
19,6
56
MS5: lupeol
29
H
30
20
19
22
13
11
17
26
25
1
14
10
8
5
28
16
27
HO
24
23
2.0
0,692
0,669
-0,000
0,788
0,760
0,829
0,966
0,944
0.87
2.67
2.73
2.70
1.23
0.02
2.80
2.61
3.12
1.81
6.58
7.78
3.0
1.06
4.0
1.02
5.0
1.00
6.0
1,260
1,256
1,031
1.00
2.03
7.0
ppm (t1)
2,381
2,367
1,913
1,679
1,389
3,205
3,192
3,177
3,164
0,829
0,788
0,760
0,692
0,669
0,966
0,944
4,566
1,031
4,684
1,389
1,679
1,913
2,367
1,260
1,256
0.87
1.23
0.02
2.80
2.61
1.50
2.67
2.73
2.70
3.12
6.58
2.00
7.78
2.50
1.06
1.02
ppm (t1)
1.81
2,381
7,261
1.0
0.0
13
p.58), foram observados 30 sinais, identificados como sendo sete grupos CH3, onze CH2, seis
grupos CH e seis tomos de carbono no hidrogenado. Foram observados sinais em C 109,3 e
57
ppm (t1)
100
30
11
25
10
23
13
14
16
50
14,395
50
15,210
15,955
15,825
18,167
17,846
100
27,834
27,300
27,260
25,001
20,783
19,153
150
ppm (t1)
37,911
35,434
34,139
29,702
30
39,849
38,566
40
50,295
48,161
47,827
50
55,158
60
ppm (t1)
78,844
109,166
14,565
16,126
15,995
15,378
18,017
20,953
19,324
18,338
25,171
28,004
27,469
27,431
29,873
34,310
37,190
35,604
40,019
38,872
38,736
38,081
43,012
42,849
40,856
47,997
48,331
50,466
55,328
18,338
18,017
16,126
15,378
-0,00000
14,565
15,995
20,953
19,324
29,873
28,004
27,469
27,431
25,171
34,310
37,190
35,604
38,872
38,736
38,081
40,019
79,013
55,328
50,466
48,331
47,997
43,012
42,849
40,856
109,332
150,951
20
29
20
19
17
22
26
28
HO
27
24
58
13
Tabela 5- Dados de RMN de 13C (100 MHz, CDCl3) de MS5 e dados do lupeol descritos na
literatura (MAHATO e KUNDU,1994)
MS5
Lupeol (CDCl3)
Carbono
DEPT135
C1
38,7
CH2
38,7
C2
27,4
CH2
27,4
C3
C4
C5
79,0
38,8
55,3
CH
C
CH
78,9
38,8
55,3
C6
18,3
CH2
18,3
C7
34,3
CH2
34,2
C8
C9
C10
40,9
50,5
37,2
C
CH
C
40,8
50,4
37,1
C11
21,0
CH2
20,9
C12
25,2
CH2
25,1
C13
C14
C15
38,1
42,8
27,5
CH
C
CH2
38,0
42,8
27,4
C16
35,6
CH2
35,5
C17
C18
C19
C20
43,0
48,3
48,0
151,0
C
CH
CH
C
43,0
48,2
47,9
150,9
C21
29,9
CH2
29,8
C22
40,0
CH2
40,0
C23
28,0
CH3
28,0
C24
15,4
CH3
15,4
C25
16,1
CH3
16,1
C26
16,0
CH3
15,9
C27
14,6
CH3
14,5
C28
18,0
CH3
18,0
C29
109,3
CH2
109,3
C30
19,3
CH3
19,3
59
MS6: betulina
29
H
20
30
21
19
17
13
11
25
OH
26
28
1
15
9
10
3
27
7
HO
23
24
O composto MS6 foi isolado como um slido branco amorfo de ponto de fuso 166168,2 C. No espectro de RMN de 1H de MS6 (Fig. 27) verificaram-se seis simpletos
localizados em H 0,79; 0,82; 0,97; 0,98; 1,02 e 1,68, correspondentes a seis grupos metila. O
sinal em H 3,20 indicou a presena de um hidrognio carbinlico (H-3). Os sinais observados
em H 3,79 e 3,30, so relacionados a tomos de hidrognio metilnico diastereotpico
ligados a uma hidroxila (H-28). Apresentou, tambm, sinais em H 4,58 e 4,68, caractersticos
de lupanos.
13
p.61), foram observados 30 sinais de carbono, identificados como sendo seis grupos CH3,
60
doze CH2, seis grupos CH e seis tomos de carbono no hidrogenado. Os sinais observados
em C 150,5 e C 109,6 foram associados aos tomos de carbono C-20 e C-29, caractersticos
de lupanos. Os sinais verificados em C 78,8 e C 60,4 foram atribudos aos tomos de
carbono hidroxilado C-3 e C-28, respectivamente. Aps comparao com a literatura (Tabela
6, p.62), MS6 foi identificado como betulina.
29
H
20
30
21
19
17
13
11
25
OH
26
28
1
15
9
10
3
27
5
HO
23
24
Tabela 6- Dados de RMN de 13C (100 MHz, CDCl3) de MS6 e dados da betulina descritos na
literatura (KIM et al, 2002)
Betulina
(CDCl3)
MS6
Carbono
DEPT135
38,5
CH2
38,8
2
3
4
5
27,2
78,7
38,6
55,1
CH2
CH
C
CH
27,4
79,0
38,9
55,3
18,0
CH2
18,6
7
8
9
10
34,0
20,5
25,0
40,7
CH2
CH
CH
C
34,2
20,8
25,2
40,9
11
50,2
CH2
50,4
12
13
14
15
36,9
37,1
42,4
27,1
CH2
CH
C
CH2
37,2
37,3
42,7
27,0
16
17
18
19
20
29,4
47,5
48,5
47,5
150,6
CH2
C
CH
CH
C
29,2
47,8
48,7
47,8
150,5
21
29,6
CH2
29,7
22
33,8
CH2
34,1
23
27,6
CH3
28,1
24
15,1
CH3
15,4
25
15,8
CH3
16,1
26
15,8
CH3
16,0
27
14,5
CH3
14,8
28
60,3
CH2
60,4
29
109,4
CH2
109,4
30
18,9
CH3
19,10
62
MS7: lup-20(29)-en-3,30-diol
29
HO
20
30
21
19
17
13
11
25
26
28
1
15
9
10
3
27
7
HO
23
24
2.0
1,209
1,185
0,960
0,902
0,888
0,874
0,724
0,802
0,626
0,603
0,753
0,658
0.99
2.96
3.10
3.17
6.65
3.79
3.0
2.58
6.60
6.87
3.29
4.0
1.13
5.0
0.99
6.0
1.00
7.0
2.02
8.0
1,335
1,313
1,286
0.50
1.00
0.96
ppm (t1)
1,444
1,436
1,420
1,409
1,380
2,238
2,223
2,210
2,196
2,182
1,994
1,988
1,964
1,944
1,936
1,568
1,551
1,524
1,517
2,993
2,979
2,971
0,603
0,658
0,626
0,802
0,888
0,874
0,902
0,960
1,185
1,286
1,209
1,313
1,409
1,380
1,335
1,436
1,420
1,524
1,517
1,444
0,753
0,724
0.99
2.96
1.00
3.10
6.65
3.79
2.58
6.60
6.87
3.29
1.50
ppm (t1)
3.17
1,568
1,551
4,876
4,768
3,914
3,903
do esqueleto lupano.
1.0
0.0
13
p.64), indicou a presena de 30 tomos de carbono, sendo cinco metlicos, doze metilnicos,
seis grupos metnicos e seis tomos de carbono no hidrogenado. Constatou-se que o sinal em
63
C 155,0 estava mais desprotegido e o sinal em C 105,7, mais protegido em relao aos sinais
observados para o lupeol, devido ao efeito anisotrpico. O sinal em C 77,0 foi atribudo ao
carbono hidroxilado C-3 e o sinal em C 62,8 foi associado ao carbono metilnico C-30. Esses
dados, somados aos outros sinais visualizados no espectro de RMN de
13
C e a comparao
100
17.521
16.004
15.884
15.804
14.410
18.057
26.082
20.626
27.229
27.122
33.986
31.242
28.186
36.771
35.094
40.476
37.670
42.630
42.413
43.342
14.410
48.101
49.971
16.004
15.884
15.804
17.521
18.057
54.976
62.800
50
20.626
27.229
27.122
26.082
31.242
28.186
35.094
33.986
36.770
37.670
38.603
38.391
42.630
42.413
40.476
48.101
54.976
49.971
77.000
62.800
77.000
105.767
105.767
155.086
ppm (t1)
150
100
50
ppm (t1)
14.415
16.011
15.890
15.808
17.526
28.192
35.099
33.990
37.674
38.395
49.974
48.106
54.982
63.278
77.003
106.194
29
HO
20
30
21
19
17
13
11
25
26
28
1
15
9
10
3
27
5
HO
23
100
24
50
ppm (t1)
Tabela 7- Dados de RMN de 13C (100 MHz, DMSO/piridina) de MS7 e dados do lup-20(29)en-3,30-diol descritos na literatura (ABDEL- MOGIB,1999)
lup-20(29)-en3,30-diol (CDCl3)
MS7
Carbono
DEPT-135
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
38,5
27,2
77,0
38,4
55,0
18,1
34,0
40,0
50,0
36,8
20,6
26,1
37,7
42,6
27,2
35,1
42,6
48,1
43,4
155,0
31,2
39,9
28,2
16,0
15,9
15,8
14,4
17,5
105,7
62,8
CH2
CH2
CH
C
CH
CH2
CH2
C
CH
C
CH2
CH2
CH
C
CH2
CH2
C
CH
CH
C
CH2
CH2
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
38,7
27,4
78,7
38,9
55,3
18,3
34,3
40,8
50,3
37,1
20,9
26,5
37,9
43,0
27,4
35,4
42,7
48,8
43,8
154,9
31,7
39,8
28,0
16,1
16,0
15,5
14,5
17,7
106,3
64,4
CH3
CH2
CH2
65
MS8: 3-oxo-15,28-dihidroxi-lup-20(29)-eno
29
H
30
20
19
22
13
11
17
26
25
1
OH
28
14
15
10
8
5
27
OH
O
24
23
0.760
1.022
1.004
0.936
1.149
1.068
1.255
1.861
1.858
2.089
1.889
2.362
2.348
2.464
2.459
2.440
2.430
2.422
2.410
3.374
3.401
3.665
3.692
1.688
1.0
0.38
1.95
3.67
2.20
1.82
1.85
12.42
2.0
2.42
2.82
3.0
0.98
0.98
2.29
4.0
0.53
5.0
0.57
6.0
0.54
1.00
7.0
4.230
4.214
4.202
4.682
4.611
0.0
ppm (t1)
60
50
40
200
20
21.531
21.001
19.819
16.284
16.048
8.075
25.281
26.644
34.150
33.920
30.033
37.111
37.065
36.942
42.433
40.330
39.895
54.572
50.300
48.389
47.947
47.847
47.252
47.208
61.688
69.103
8.075
16.048
16.284
21.001
19.819
110.044
30
21.531
25.281
26.644
30.033
33.920
39.895
37.111
37.065
36.942
34.150
40.330
42.433
47.947
47.847
47.252
47.208
48.389
50.300
149.873
70
ppm (t1)
54.572
61.688
69.103
218.198
10
150
100
ppm (t1)
50
13
16.295
16.061
8.089
19.155
19.830
20.306
21.014
26.656
25.289
21.541
30.042
29.714
29.677
34.163
33.932
37.075
36.952
39.906
48.398
47.219
40.341
50.309
54.581
61.698
69.115
77.230
110.057
29
H
30
20
19
22
13
11
25
17
26
28
14
10
8
5
OH
15
27
OH
O
24
23
100
50
ppm (t1)
13
3-oxo-15,28-dihidroxi-
MS8
lup-20(29)-eno
(CDCl3)
Carbono
DEPT-135
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
39,9
34,2
218,2
47,2
54,6
19,8
36,9
42,4
50,3
37,1
21,5
25,3
37,1
47,8
69,1
40,3
47,9
48,4
47,2
149,9
30,0
33,9
26,6
21,0
16,1
16,3
8,1
61,7
110,0
19,2
CH2
CH2
C
C
CH
CH2
CH2
C
CH
C
CH2
CH2
CH
C
C
CH2
C
CH
CH
C
CH2
CH2
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH2
CH2
CH3
39,9
34,1
218,3
47,2
54,5
19,8
36,9
42,4
50,3
37,1
21,5
25,2
37,0
47,8
69,0
40,3
47,9
48,3
47,2
149,9
30,0
33,9
26,6
21,0
16,1
16,3
8,1
61,5
110,0
19,1
68
MS9: sitosterol
21
25
19
20
13
11
24
23
17
27
28
18
1
9
15
3
7
HO
1.115
1.092
1.007
0.929
0.913
0.844
0.826
0.679
0.805
1.161
1.149
1.495
1.476
1.283
1.264
1.253
1.540
1.831
1.572
1.954
1.949
1.994
1.987
3.534
3.522
3.510
2.284
2.274
2.270
2.262
2.257
2.234
2.229
2.026
2.018
0.679
0.826
0.805
0.913
1.007
0.929
1.115
1.092
1.149
1.161
1.253
1.283
1.264
1.540
1.495
1.476
1.572
1.954
1.949
1.831
0.844
3.06
4.11
4.09
2.86
2.94
1.50
5.97
2.00
9.07
1.34
3.02
2.22
1.91
2.50
1.987
2.018
1.994
2.026
2.262
2.257
2.234
2.229
2.274
2.270
2.284
5.356
5.343
1.00
ppm (t1)
1.0
3.06
4.11
4.09
2.86
2.94
5.97
9.07
2.0
1.34
3.0
3.02
4.0
2.22
5.0
1.91
6.0
1.05
1.00
7.0
ppm (t1)
0.0
69
sitosterol
MS9
Hidrognio
(CDCl3)
H
H
3
6
18
19
21
26
28
29
3,52 (dd, J= 4,8; 9,6 Hz) 3,52 (dd, J= 4,8; 9,6 Hz)
5,35 (d, J= 5,2 Hz)
5,35 ( d, J= 5,2 Hz)
0,68 (s)
1,01 (s)
0,92 (d, J= 6,5 Hz)
0,83 (s)
0,81 (s)
0,84 (s)
0,68(s)
1,01(s)
0,92 (d, J= 6,4 Hz)
0,82 (s)
0,80 (s)
0,84 (s)
MS10: 4-O-metilepigalocatequina
OH
3'
H
HO
10
5'
1'
2
9
5
OH
OH
OH
70
2.714
2.707
2.845
2.834
2.756
2.749
2.887
2.876
4.192
3.311
4.780
5.951
5.946
5.932
5.926
3.796
4.0
2.00
5.0
3.09
6.0
0.97
1.79
1.87
7.0
ppm (t1)
1.35
6.533
(1H, s, H-2) e em H 4,19 (1H, sl, H-3) foram associados aos hidrognios carbinlicos.
3.0
2.0
1.0
0.0
71
29.303
60.913
67.541
79.828
96.620
96.053
100.234
107.343
136.727
158.110
157.822
157.301
151.507
OH
3'
OCH3
H
HO
10
5'
1'
OH
2
9
5
OH
OH
150
100
50
ppm (t1)
100
28.861
60.470
67.097
79.384
95.607
96.173
106.897
50
ppm (t1)
72
13
4-O-metilepigalocatequina
MS10
(CD3OD)
C
79,8
67,5
29,3
100,2
96,6
157,3
96,0
158,1
157,8
136,7
107,3
151,5
136,3
151,5
107,3
60,9
Carbono
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1
2
3
4
5
6
OMe
C
79,8
67,6
29,3
100,2
96,6
157,3
96,0
158,1
157,9
136,8
107,3
151,5
136,3
151,5
107,3
60,9
DEPT-135
CH
CH
CH2
C
CH
C
CH
C
C
C
CH
C
C
C
CH
CH3
MS11: proantocianidina A
3'
OH
2'
8
HO
10
O
4
5'
1'
2
6
4'
H
6'
OH
OH
OH
3'''
2'''
8''
HO
10''
7''
1'''
2''
OCH3
4'''
5'''
6'''
OH
3''
6''
9''
5''
4''
OH
OH
como o sinal em H 2,89 foi atribudo a hidrognios metilnicos vizinhos a carbono aromtico.
Os sinais em H 5,14 e em H 3,89 foram associados, respectivamente, ao hidrognio metnico
vizinho a oxignio de ligao C-O e ao hidrognio metnico geminal a grupo OH.
3'
OH
2'
8
HO
10
O
4
5'
1'
2
6
4'
H
6'
OH
OH
OH
3'''
2'''
8''
HO
10''
7''
1'''
2''
OCH3
4'''
5'''
6'''
OH
3''
6''
9''
5''
4''
OH
OH
13
comparao de todos os deslocamentos qumicos com a literatura (Tabela 11, p.75) permitiu
identificar MS11 como proantocianidina A.
74
3'4'O
H
2
'
H
H
O
7810O
5
'
1
'
2
6
'
65943H
O
H
O
H
O
HH
3'4'O
C
H
3
2
'
H
O
H
76''8'190''O
2'3'1'6'5'O
5'O
H
H4' O
Proantocianidina
A
80,0
73,4
37,4
97,2
157,8
96,3
100,5
156,5
129,2
129,2
115,8
156,5
114,5
129,3
77,4
MS11
Carbono
78,1
71,7
39,5
95,1
156,2
94,1
98,6
155,8
129,7
128,2
114,5
157,8
115,8
128,2
78,1
3
4
5
6
7
8
9
10
1
2
3
4
5
6
OMe
Proantocianidina
A
67,0
29,8
96,3
157,8
107,5
100,5
156,5
132,1
107,5
151,4
136,0
151,4
107,5
60,8
MS11
65,0
28,2
94,1
156,2
106,1
98,6
155,8
132,1
106,1
150,4
134,4
150,4
106,1
59,0
75
MS12: tingenona
30
H
O
19
21
27
11
17
13
28
9
15
25
26
7
HO
23
MS12 foi obtido como um slido alaranjado de ponto de fuso 135-137 C. O espectro
de RMN de 1H de MS12 (Fig. 42) apresentou seis sinais referentes a seis grupos metila. Os
sinais observados em 7,04 (H-7)6,54 (H-1)e em6,37 (H-6)socaractersticos de
compostos da classe dos quinonametdeos. O sinal em 2,21foi associado aos hidrognios
0.872
0.863
1.005
1.000
0.984
0.972
1.833
2.216
1.868
2.508
2.492
2.475
2.886
2.922
1.665
1.504
1.343
1.250
2.96
9.31
2.0
2.86
3.90
1.90
3.39
3.0
7.14
4.0
1.46
5.0
4.03
6.0
1.13
1.06
1.00
1.04
1.37
7.0
6.539
6.536
6.378
6.361
7.038
7.035
7.020
7.017
1.0
0.0
ppm (t1)
O espectro de RMN de
13
76
150
ppm (t1)
5
30
27
19
11
13
25
100
100
50
10.282
150
15.101
10
28.521
21.565
19.733
200
20
29.952
29.704
30
32.576
32.082
40
35.517
33.793
50
43.539
41.921
39.066
60
ppm (t1)
52.555
119.796
118.152
133.667
10.261
15.080
19.711
21.545
29.683
28.503
29.932
32.062
33.774
32.555
38.180
35.497
39.044
41.900
40.625
42.722
44.646
43.521
52.533
50
19.711
10.261
15.080
21.545
28.503
32.555
32.062
29.932
29.683
33.774
35.497
38.180
39.044
40.625
41.900
42.722
43.521
52.533
44.646
117.211
118.130
119.775
127.733
133.639
146.088
168.714
164.716
178.406
213.593
obtidos e comparao dos mesmos com a literatura (GUNATILAKA et al., 1989; Tabela 12,
ppm (t1)
0
21
17
28
26
15
HO
23
77
Tabela 12. Dados de RMN de 13C (CDCl3, 100 MHz) de MS12 e dados da tingenona
descritos na literatura (GUNATILAKA, 1989)
Tingenona (CDCl3)
MS12
Carbono
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
25
26
27
28
30
C
119,8
178,4
146,1
117,1
127,8
133,7
118,2
168,7
42,7
164,7
33,8
29,9
40,6
44,6
28,5
35,5
38,2
43,5
32,1
41,9
213,6
52,5
10,3
39,0
21,6
19,7
32,6
15,1
DEPT-135
CH
C
C
C
C
CH
CH
C
C
C
CH2
CH2
C
C
CH2
CH2
C
CH
CH2
CH
C
CH2
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
C
119,8
178,4
146,1
117,1
127,8
133,5
118,1
168,6
42,7
164,7
33,8
30,0
40,6
44,7
28,5
35,5
38,2
43,6
32,1
41,9
213,5
52,5
10,3
39,1
21,6
19,7
32,6
15,1
78
MS13: rigidenol
29
30
19
22
HO
11
25
1
13
17
26
28
9
15
27
3
7
O
23
24
MS13 foi obtido como um slido branco amorfo de ponto de fuso 154-157 C. O
espectro de RMN de 1H de MS13 (Fig. 45) apresentou sinais em H 4,72 (sl) e 4,59 (d, J= 1,2
Hz), caractersticos de tomos de hidrognio metilnico de dupla ligao terminal de lupanos.
Foi observado tambm um sinal em H 3,89 (1H, dt, J= 6,0; 10,8 Hz, H-11) associados a
1.255
1.250
1.227
1.053
0.790
0.976
1.090
1.196
1.068
1.458
1.452
1.432
1.422
1.485
1.586
1.982
1.971
1.968
1.962
1.950
1.940
1.933
2.469
2.455
2.447
2.430
2.423
2.410
2.391
2.381
2.372
2.167
1.826
1.822
1.817
1.688
3.04
0.83
3.14
12.72
4.55
2.0
12.20
2.60
3.29
1.34
1.96
3.0
0.59
4.0
3.08
5.0
0.97
6.0
0.99
2.00
7.0
ppm (t1)
2.683
2.669
2.648
3.923
3.908
3.896
3.881
4.592
4.589
4.715
1.0
13
auxlio do subespectro DEPT-135 (Fig.47, p. 80) foram classificados como sendo sete
metlicos, dez metilnicos, seis metnicos e sete tomos de carbono no hidrogenado. A
79
comparao dos dados obtidos com os da literatura (Tabela 13, p.81) permitiu identificar
MS13 como rigidenol.
29
30
19
22
HO
11
25
1
13
17
26
28
9
15
27
3
5
O
23
24
Tabela 13. Dados de RMN de 13C de MS13 e dados do rigidenol descritos na literatura
(SILVA et al., 2005)
Carbono
MS13
C
DEPT
Rigidenol (CDCl3)
C
42,1
CH2
42,0
2
3
4
5
34,2
219,0
47,9
54,8
CH2
C
C
CH
34,2
218,8
47,6
54,7
19,6
CH2
19,6
7
8
9
10
34,2
42,4
54,9
38,5
CH2
C
CH
C
34,2
42,4
54,8
38,2
11
70,8
CH
70,4
12
13
14
37,5
37,2
42,7
CH2
CH
C
37,4
37,1
42,6
15
27,5
CH2
27,4
16
17
18
35,4
42,9
47,6
CH2
C
CH
35,4
43,0
47,6
19
20
47,7
150,5
CH
C
47,7
150,0
21
29,7
CH2
29,7
22
39,8
CH2
39,8
23
27,4
CH3
27,4
24
20,8
CH3
20,7
25
16,7
CH3
16,7
26
16,9
CH3
16,8
27
14,7
CH3
14,4
28
18,1
CH3
18,0
29
110,2
CH3
109,9
30
19,4
CH3
19,3
81
MS14: lupenona
29
30
19
22
13
11
25
1
17
26
28
9
15
10
O
23
27
24
2.0
1.025
0.955
0.932
1.0
0.870
0.798
1.070
1.254
1.682
2.420
2.401
2.391
2.376
2.043
4.572
3.0
3.91
6.49
4.10
4.90
6.25
9.69
4.0
4.87
7.53
5.0
6.07
2.60
6.0
2.50
2.00
7.0
19.59
26.99
4.693
4.689
comparao com amostra autntica em placa de CCDS, permitiu identific-lo como lupenona.
0.0
ppm (t1)
Tabela 14. Dados de RMN de 1H de MS14 (CDCl3, 400 MHz) e dados da lupenona descritos
na literatura (HUI e LI, 1976)
N H
3
23
24
25
26
27
28
29
30
MS14
Lupenona (CDCl3)
H
1,07 (s)
1, 02 (s)
0,93 (s)
0,96 (s)
0,87 (s)
0,80 (s)
4,69 (d, J= 1,6 Hz);
4,57(sl)
1,68 (s)
H
1,07 (s)
1,02 (s)
0,93 (s)
0,95 (s)
0,87 (s)
0,79 (s)
4,69*;
4,57*
1,68 (s)
MS15: ferruginol
16
OH
13
11
20
15
17
1
14
9
10
3
18
19
83
1.248
1.232
1.215
0.937
1.170
0.915
1.302
1.297
1.333
1.328
1.386
1.377
1.416
1.448
1.484
1.481
1.686
1.681
1.672
1.604
1.715
1.846
1.829
2.847
2.845
2.830
2.764
1.880
0.915
3.122
3.105
3.088
1.170
0.937
1.215
1.232
1.248
1.333
1.328
1.302
1.297
1.377
4.458
1.484
1.481
1.448
1.416
1.386
1.604
1.715
1.686
1.681
1.672
1.50
3.14
3.03
3.22
1.57
2.43
2.88
2.00
1.28
2.00
1.34
2.50
2.45
1.03
1.96
0.94
3.00
1.829
1.880
1.846
2.764
2.830
2.847
2.845
3.088
3.105
3.122
6.628
6.829
1.00
0.50
ppm (t1)
2.0
3.14
3.03
3.22
1.57
2.43
2.88
2.00
1.28
1.34
3.0
2.45
4.0
1.03
5.0
1.96
6.0
0.94
1.00
1.02
1.01
7.0
1.0
0.0
ppm (t1)
Tabela 15- Dados de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) observados para MS15 e dados do
ferruginol descritos na literatura (WANG et al., 2002)
N H
7
11
14
15
16
17
18
19
20
MS15
Ferruginol (CDCl3)
H
H
2,76 (m, Ha)
2,77 (ddd, J= 7,0, 10,4, 16,8 Hz, Ha)
2,84 (dd, J= 0,8, 6,8 Hz, Hb) 2,81 (ddd, J= 2,1, 6,5, 16,8 Hz, Hb)
6,62 (s)
6,63 (s)
6,81 (s)
6,82 (s)
3,11 (sept, J= 7,0 Hz)
3,11 (sept, J= 6,8 Hz)
1,22 (d, J= 7,0 Hz)
1,24 (d, J= 6,4 Hz)
1,29 (d, J= 7,0 Hz)
1,31(d, J= 7.0 Hz,),
0,89 (s)
0,92 (s)
0,93 (s)
0,94 (s)
1,15 (s)
1,17 (s)
84
MS16: pristimerina
30
29
CO 2Me
20
27
18
22
11
13
28
9
15
25
26
7
HO
6
23
O composto MS16 apresentou-se como um slido alaranjado de ponto de fuso 205207 C. O espectro de RMN de 1H de MS16 (Fig.50) revelou a presena de simpletos em
, 1,09, 1,17, 1,26 e 1,45 , atribudos a 5 grupos metila. Os sinais em 6,39 (1H, d, J =
7,2 Hz, H-7), 6,62 (1H, s, H-1) e em 7,10 (1H, d, J = 8,4 Hz, H-6) caracterizam o
esqueleto quinonametdeo de MS16 (GUNATILAKA et al., 1989). Foi observado tambm
um sinal em (3H, s)atribudo a hidrognios de grupo metoxila. O simpleto em
2,23, caracterstico de grupo metila ligado a carbono do tipo sp2 (H-23), confirma a natureza
do composto. De posse desses dados e comparao dos mesmos com a literatura (Tabela 16,
p.86), alm de comparao com amostra autntica por CCDS, MS16 foi identificado como
1.0
0.520
0.956
0.953
0.996
0.994
1.173
1.096
1.265
1.456
2.395
2.392
2.433
6.402
6.384
3.549
6.617
2.228
1.819
1.669
1.593
1.575
2.0
3.43
3.0
1.41
1.64
3.55
3.93
6.52
4.0
3.27
3.04
1.20
0.93
5.0
3.13
6.0
1.20
2.83
0.97
1.00
7.0
0.86
7.113
7.110
7.092
pristimerina.
0.0
ppm (t1)
MS16
Pristimerina (CDCl3)
H
6,53 (s)
1
6,62 (s)
6
7,10 (d, J = 8,4 Hz)
7
6,39 (d, J = 7,2 Hz),
23
2,23 (s)
25
1,46
26
1,26 (s)
27
0,53 (s)
28
1,10 (s)
OCH3
3,54 (s)
30
1,17 (s)
MS17: gloquidona
29
20
30
H
19
22
17
13
11
26
25
28
1
15
10
27
4
6
23
24
86
29
20
30
19
22
17
13
11
26
25
28
1
15
10
27
4
6
23
24
Gloquidona (CDCl3)
1,09 (s)
1,10 (s)
1,15 (s)
1,13(s)
0,98 (s)
0,83 (s)
1,07 (s)
1,08 (s)
1,13 (s)
1,11 (s)
0,96 (s)
0,81 (s)
29
30
1,71 (s)
1,69 (s)
N H
1
2
23
24
25
26
27
28
87
MS18: glutinol
29
30
20
19
27
22
17
11
13
28
9
15
25
26
5
7
HO
23
24
0.858
0.851
0.952
0.945
1.005
0.989
1.044
1.094
1.163
1.141
1.256
1.560
1.679
1.858
2.0
6.29
7.06
10.58
4.22
3.09
2.78
4.44
13.09
15.47
3.0
22.67
4.0
3.46
5.0
2.48
6.0
1.04
1.00
7.0
ppm (t1)
2.043
3.466
5.638
5.623
1.0
88
Tabela 18 Dados de RMN de 1H (CDCl3, 400 MHz) de MS18 e dados do glutinol descritos
na literatura (HUI e LI, 1976)
MS18
Glutinol (CDCl3)
H
3,47 (s)
H
3,45 (s)
5,60 (m)
1,05 (s)
1,15 (s)
0,85 (s)
1,09 (s)
1,00 (s)
1,17 (s)
0,95 (s)
0,98 (s)
N H
3
6
23
24
25
26
27
28
29
30
MS19: fridelan-1,3-diona
29
30
20
27
17
11
13
1
15
25
3
O
26
6
24
23
No espectro de RMN de 1H de MS19 (Fig. 53, p.90) foi notada a ausncia de sinais
relativos a hidrognios olefnicos, alm de ter sido observado um quarteto em H 2,58 relativo
ao hidrognio metnico (H-4) vizinho C-23 de friedelanos. Foram observados tambm dois
dupletos, em H 3,46 e em 3,25, atribudos a hidrognio de carbono metilnico unido a dois
grupos carbonila. Por meio da comparao dos dados do espectro RMN de 1H de MS19 com
a literatura (Tabela 19, p.90), a substncia foi identificada como friedelan-1,3-diona.
89
0.958
1.034
1.013
1.047
1.056
1.073
1.215
1.192
1.266
1.370
1.366
1.424
1.399
1.893
1.923
2.053
1.073
1.056
1.047
1.034
1.013
0.708
0.958
1.215
1.192
1.266
1.370
1.366
1.424
1.399
1.893
2.593
2.577
2.389
2.180
2.053
1.923
3.236
3.275
3.444
0.708
3.14
5.82
1.50
14.79
4.30
3.56
2.00
6.37
1.29
0.50
1.04
1.01
1.00
2.50
2.180
2.389
2.577
2.593
3.484
1.00
0.50
ppm (t1)
3.14
2.0
5.82
14.79
4.30
3.56
6.37
3.0
1.29
0.50
1.04
4.0
1.01
5.0
1.00
6.0
0.86
0.95
7.0
1.0
ppm (t1)
Tabela 19 Dados de RMN de 1H (CDCl3, 400 MHz) de MS19 e dados da friedelan-1,3diona descritos na literatura (KLASS et al., 1992)
N H
2
4
8
10
18
23
24
25
26
27
28
29
30
MS19
H
3,46(d, J= 16,0 Hz, H-1a);
3,25 (d, J= 15,6 Hz, H-1b)
2,58 (m)
1,27 (m)
2,39
1,57
1,07 (s)
0,69 (s)
1,21 (s)
1,05 (s)
1,04 (s)
1,19 (s)
1,01 (s)
0,94 (s)
friedelan-1,3-diona
(CDCl3)
H
3,46;*
3,24*
2,58
1,25
2,38
1,57
1,05 (s)
0,69 (s)
1,20 (s)
1,03 (s)
1,02 (s)
1,18 (s)
1,00 (s)
0,94 (s)
MS20: 11-hidroxigloquidona
29
30
20
19
HO
22
11
25
17
13
26
28
1
15
10
27
4
6
23
24
1.126
1.122
1.114
0.989
0.729
0.801
1.454
1.441
1.430
1.268
1.532
1.520
1.571
1.703
0.729
1.991
1.983
1.974
1.968
1.958
1.949
1.758
1.737
0.801
0.989
2.416
2.406
2.394
1.114
1.126
1.122
4.091
4.081
1.430
4.617
1.441
1.454
1.520
4.735
4.731
1.571
1.532
1.703
1.758
1.737
1.949
1.958
5.727
5.706
1.974
1.968
1.983
1.991
2.394
2.406
1.268
0.60
3.41
1.50
4.70
12.82
2.00
7.68
10.71
3.98
3.26
1.91
2.50
6.53
2.416
8.313
8.292
hidroxigloquidona.
1.00
ppm (t1)
4.0
3.0
2.0
0.60
3.41
4.70
12.82
6.53
7.68
10.71
3.98
5.0
3.26
6.0
1.91
7.0
1.38
8.0
2.56
1.02
1.00
9.0
ppm (t1)
1.0
Tabela 20 Dados de RMN de 1H (CDCl3, 400 MHz) de MS20 e dados da 11hidroxigloquidona descritos na literatura (REYES et al., 2006)
MS20
11-hidroxigloquidona
(CDCl3)
H
8,30 (d, J = 8,4 Hz)
5,71 (d, J = 8,4 Hz)
4,09 (d, J = 4,0 Hz)
1,15 (s)
1,15 (s)
1,26 (s)
1,14 (s)
1,01 (s)
0,82 (s)
4,73 (d, J = 1,6 Hz);
4,61 (sl)
1,70 (s)
H
8,30 (d, J= 10,4 Hz)
5,71 (d, J = 10,4 Hz)
4,05 (d, J = 4,8 Hz)
1,12 (s)
1,12 (s)
1,26 (s)
1,11 (s)
0,98 (s)
0,80 (s)
4,73 (sl);
4,61 (sl)
1,70
N H
1
2
11
23
24
25
26
27
28
29
30
MS21: gloquidonol
29
20
30
H
19
22
OH
25
13
11
17
26
28
9
15
27
3
5
O
23
24
O composto MS21 foi obtido como um slido amorfo de ponto de fuso 227-230 C.
No espectro de RMN de 1H de MS21 (Fig. 55, p.93) os sinais em H 4,68 e 4,56 foram
atribudos a hidrognios metilnicos de dupla ligao terminal de lupanos (MAHATO e
KUNDU, 1994). Observou-se tambm um sinal em H 3,90 (1H, sl, H-1) associado a
hidrognio metnico de carbono carbinlico. A comparao dos dados obtidos com os
disponveis na literatura (Tabela 21, p.93) permitiu identificar MS21 como gloquidonol.
92
0.976
0.834
0.807
0.797
1.075
1.057
1.036
1.109
2.206
2.197
1.677
1.591
1.507
1.379
1.366
1.361
1.346
3.025
3.005
2.989
2.969
2.374
2.241
2.233
0.797
3.895
0.807
0.834
0.976
4.563
1.075
1.057
1.036
1.109
1.346
1.366
1.361
1.379
1.507
1.591
1.677
2.197
2.206
2.233
2.241
2.374
4.683
4.679
29
20
30
H
19
22
OH
25
13
11
17
26
28
9
15
27
23
1.00
2.0
5.45
4.80
4.33
14.51
2.16
9.99
7.81
3.51
5.81
3.0
0.71
4.0
0.69
5.0
0.72
6.0
0.90
2.00
7.0
ppm (t1)
24
5.45
4.80
1.50
4.33
14.51
2.16
9.99
7.81
2.00
3.51
5.81
0.71
0.69
2.50
ppm (t1)
1.0
N H
1
2
23
24
25
26
27
28
MS21
Gloquidonol (CDCl3)
3,90 (sl)
2,22 (dd, J = 3,6; 14,4 Hz);
3,01 (dd, J = 8,4; 14,4 Hz)
1,05 (s)
1,04 (s)
1,04 (s)
0,98 (s)
0,98 (s)
0,98 (s)
0,98 (s)
0,84 (s)
0,84 (s)
0,80 (s)
0,78 (s)
29
4,57 (sl)
4,68 (d, J = 2,0 Hz)
4,56 (sl)
4,69 (sl)
30
1,68 (s)
1,68 (s)
93
MS22: 29-hidroxifriedelan-3-ona
OH
30
29
19
20
27
17
11
1
22
13
28
9
15
25
26
7
O
24
23
O composto MS22 apresentou-se como um slido branco de ponto de fuso 269 - 270
C. No espectro de RMN de 1H de MS22 (Fig. 56) foi observado um sinal em H 0,87 (d, J =
5,2 Hz, 3H), caracterstico de hidrognio da metila C-23 de fridelanos. O sinal em H 3,27 foi
atribudo a tomos de hidrognio metilnico de carbono carbinlico. Por meio do espectro de
RMN de
13
1.050
1.035
1.028
0.884
0.871
0.726
1.220
1.396
1.571
1.558
1.769
1.745
1.983
1.968
1.962
1.957
2.383
2.380
2.373
2.308
2.296
2.282
2.268
2.262
2.249
2.236
2.169
0.726
0.871
0.884
1.035
1.028
1.220
1.558
1.396
1.571
1.745
1.968
1.962
1.957
1.769
2.236
2.169
1.983
2.249
2.268
2.262
2.282
2.296
2.383
2.380
2.373
2.308
3.257
3.275
1.050
1.00
3.00
7.32
1.50
1.74
3.24
3.13
2.00
10.48
1.46
1.52
2.50
1.07
3.00
2.29
1.25
2.06
3.50
11.30
3.295
3.295
3.275
3.257
29-hidroxifriedelan-3-ona.
0.50
ppm (t1)
3.00
2.0
7.32
3.0
11.30
1.74
3.24
4.0
3.13
10.48
1.46
1.52
5.0
1.07
6.0
2.29
1.25
2.06
7.0
1.0
0.0
ppm (t1)
70
60
19
11
25
50
HOH 2 C
29
17
40
30
20
6.841
17.894
100
18.467
150
20.777
10
25.832
20
27.817
200
30
32.102
30.610
40
39.520
35.891
50
41.543
41.310
60
41.886
70
53.422
80
58.254
59.494
74.788
0.000
17.884
14.667
6.830
22.290
20.766
18.455
18.249
25.821
27.808
30.599
30.533
29.768
32.093
32.741
38.252
37.449
35.882
35.651
33.121
39.509
39.963
41.532
41.300
41.877
42.162
53.414
58.243
59.484
74.774
50
10
20.766
18.455
18.249
0.000
14.667
6.830
17.884
22.290
29.768
27.808
25.821
30.599
30.533
35.882
35.651
33.121
32.741
32.093
37.449
38.252
39.963
39.509
42.162
41.877
41.532
41.300
53.414
58.243
74.774
59.484
213.175
ppm (t1)
0
ppm (t1)
0
Figura 57- Espectro de RMN de 13C do composto MS22 (100 MHz, CDCl3).
20
30
27
13
22
28
26
15
23
24
ppm (t1)
95
Tabela 22- Dados de RMN de 13C de MS22 (CDCl3, 100 MHz) e dados de
29-hidroxifriedelan-3-ona descritos na literatura (BETANCOR et al., 1980)
MS22
Carbono C DEPT-135
1
22,3
CH2
29-hidroxifriedelan-3-ona
(CDCl3)
C
22,3
41,5
CH2
41,6
3
4
5
6
213,2
58,2
42,2
41,3
C
CH
C
CH2
212,2
58,3
42,2
41,4
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
18,3
53,4
37,4
59,5
35,6
29,8
40,0
38,3
32,7
35,9
CH2
CH
C
CH
CH2
CH2
C
C
CH2
CH2
18,3
53,1
37,5
59,6
35,7
29,8
40,0
38,3
32,8
36,0
17
18
19
29,8
41,9
30,6
C
CH
CH2
29,8
42,0
30,6
20
21
22
23
33,1
27,8
39,5
6,8
C
CH2
CH2
CH3
33,2
27,9
39,6
6,8
24
25
14,7
17,9
CH3
CH3
14,7
17,9
26
27
18,4
20,8
CH3
CH3
18,4
20,8
28
29
32,1
74,8
CH3
CH2
32,1
74,8
30
25,8
CH3
25,9
96
MS23: pinostrobina
2'
8
4'
5'
2
6'
H
4
5
OH
1.616
1.251
2.850
2.843
2.807
2.800
3.100
3.090
3.057
3.813
5.447
5.439
5.414
5.407
6.086
6.080
6.071
6.065
7.456
7.439
7.419
7.408
7.401
7.392
0.90
5.0
1.01
0.99
3.00
0.99
2.00
5.06
1.02
10.0
1.23
12.031
pinostrobina.
0.0
ppm (t1)
97
MS23
pinostrobina (CDCl3)
H
5,42 (dd, J= 2,8;12,8 Hz)
3,07 (dd, J= 13,2; 16,9 Hz, Ha)
2,82 (dd, J= 2,8; 16,9 Hz, Hb)
6,07 (d, J= 2,4 Hz)
6,08 (d, J= 2,4 Hz)
7,42 (m)
7,42 (m)
7,42 (m)
7,42 (m)
7,42 (m)
3,81 (s)
H
5,39 (dd, J = 2,8; 12,8 Hz )
3,06 (dd, J = 12,8; 15,1 Hz, Ha)
2,79 (dd, J = 2,8; 14.7 Hz, Hb)
6,05 (d, J = 2,7 Hz)
6,05 (d, J = 2,7 Hz)
7,41 (m)
7,41 (m)
7,41 (m)
7,41 (m)
7,41 (m)
3,79 (s)
MS24: salicassina
OH
OH
3'
1''
5'
1'''
5'''
OCOCH 3
1'
MeO
3''
3'''
16
11
15
20
1
17
14
10
O
6
18
19
p.99) foram observadas bandas de absoro em 227 e 291 nm. Esses valores foram
Transmitncia (%)
OH
OH
3'
1''
5'
1'''
5'''
OCOCH 3
1'
MeO
3''
3'''
16
11
15
20
1
17
14
10
O
6
18
19
Absorbncia
1.271
1.250
1.233
1.214
0.982
0.919
1.637
1.632
1.629
2.664
2.653
2.623
2.589
2.544
2.026
3.160
3.143
3.126
3.822
6.074
6.068
5.832
5.803
5.380
5.351
6.126
6.121
7.904
7.478
7.469
7.464
7.431
7.427
7.419
7.414
6.695
0.62
OH
3.53
11.491
OH
3'
1''
5'
1'''
5'''
OCOCH 3
1'
MeO
3''
3'''
16
11
15
20
1
17
14
10
O
6
18
19
3.00
2.75
2.34
1.20
3.61
1.49
2.82
1.14
3.41
1.18
1.14
1.26
1.10
1.15
0.78
3.03
2.57
0.76
1.19
10.0
5.0
No espectro de RMN de 13C de MS24 (Fig. 63, p.102) foram observados 38 sinais. Por
meio do mapa de contornos HSQC (Figs. 64, p.104 e 65, p.103) foi possvel identificar
tomos pertencentes unidade diterpnica, sendo visualizadas correlaes de
7,90 (H-14)
com C 124,6 (C-14), de H 1,01 (H-19) com C 21,4 (C-19) e de H 0,95 (H-18) com C 32,6
(C-18), dentre outras. No mapa de contornos COSY (Fig. 66, p.103) foram observadas
correlaes de H(H-16) e H (H-17) com H3,18 (H-15), que foram atribudas ao
grupo isopropila. Alm disso, foram observadas correlaes de H 2,63 (H-6) com H 1,85 (H5) e de H 5,85 (H-2) com H 5,40 (H-3)
As correlaes observadas no mapa de contornos HMBC (Fig. 67, p.104) de H 7,36
(H-3 e H-5) com C 129,6 (C-4), de H 5,85 (H-2) com o sinal referente ao carbono
do grupo acetoxila (C 168,5) confirmam as presena deste substituinte na posio C-2. A
100
correlao do sinal do hidrognio do grupo metoxila (H 3,76) com C 164,1 (C-5) indicou a
presena deste grupo em C-5. Foram observadas ainda, correlaes referentes unidade
diterpnica, de H 7,36 (H-14) com C 198,7 (C-7) e C 26,8 (C-15). As correlaes de
11,49 (OH-3) com C 101,9 (C-2'), 164,2 (C-3') e 94,7 (C-4') confirma a posio do grupo
OH quelado a um grupo carbonila na molcula. A correlao de 5,78 (OH-3) com C 81,3
(C-3''), indicou um grupo hidroxila na posio C-3''.
No mapa de contornos ROESY (Fig. 68, p.104), o sinal do hidrognio do grupo
metoxila (3,76) correlacionou com o sinal de H-6 (6,15) e de H-4 (6,10)
confirmando a posio do substituinte em C-5. Outras correlaes foram tambm
observadas: 5,40 (H-3) com (H-2) e H-2e ). Por meio da
representao da estrutura em trs dimenses (Fig. 69, p.105), pode-se observar a correlao
de H-2 com o hidrognio do grupo metoxila.
Por meio da anlise do espectro de massas por ionizao por eltron-spray (Fig.70,
p.105), obteve-se a frmula molecular C38H44O8 (MM 628,0 gmol-1), uma vez que foi
observado um pico em m/z 629 [M+H]. Foram observados tambm picos em m/z 651[M+Na]
e 351, relacionado unidade chalcona da molcula. No espectro de massas de alta resoluo
(Fig. 71, p.105) foi possvel observar os picos em m/z 300 (C20H28O2) e 328 (C18H16O3),
relacionados s duas unidades formadoras de MS24. Na Figura 72 (p. 107) apresentada a
proposta de fragmentao de MS24, considerando os picos observados no espectro de massas.
De posse de todos os dados espectroscpicos de MS24, sugeriu-se que a estrutura
indicada um aduto no qual um diterpeno abietano (sugiol) est unido a uma chalcona por
meio de uma ponte ter formada entre C-1 do anel A da chalcona e o C-12 do anel C do
sugiol. Este foi identificado como 12-O-[3-hidroxi-5-metoxi-2-(2-acetoxi-3-hidroxi-1oxo-3-fenil)propil-sugiol e nomeado por nosso grupo como salicassina, uma substncia
indita. importante ressaltar que a primeira vez que um aduto composto por uma chalcona
e um diterpeno isolado da famlia Celastraceae.
A ocorrncia natural de adutos terpeno-chalcona extremamente rara, tendo sido
descritos na literatura poucos exemplos, onde so reportados adutos formados por uma
chalcona e um monoterpeno (HUA et al., 2009), um sesquiterpeno (HUA et al., 2008) ou um
diterpeno labdano (NGO e BROWN, 1998). At o momento, a salicassina apresenta-se como
primeiro exemplo de um metablito envolvendo um diterpeno abietano e uma chalcona. Alm
disso, MS24 um exemplo raro de aduto em espcies da famlia Celastraceae, tendo em vista
que este formado por uma ponte ter entre as duas unidades da molcula. Para espcies
101
dessa famlia foram reportados adutos formados possivelmente por reaes hetero-DielsAlder, atravs da formao de um sistema 1-4 dioxano (NEZ et al., 2011).
Na Tabela 12 (p.108) so apresentadas todas as atribuies feitas utilizando RMN de
OH
22.432
22.303
21.335
18.851
20.296
26.749
23.201
29.684
30.944
32.535
33.249
41.308
37.846
37.830
36.015
49.420
55.836
72.389
81.333
94.694
95.655
101.844
109.887
126.514
124.556
127.335
128.741
129.550
132.609
135.127
164.098
162.148
158.230
156.407
168.502
169.248
191.671
198.641
1D e 2 D para a salicassina.
OH
3'
1''
5'
5'''
50000000
OCOCH 3
1'
MeO
1'''
3''
3'''
16
11
15
20
1
17
14
10
O
6
18
19
200
150
100
50
C-2/H-2
C-17/H-17
C-19/H-19
20
C-16/H-16
C-15/H-15
30
C-18/H-18
C-6/H-6
40
C-3/H-3
50
C-5/H-5
60
ppm (t1)
4.00
3.50
3.00
2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
Figura 64- Expanso do mapa de contornos HSQC de MS24 na regio de 0,50 a 4,30
(CDCl3, 600 MHz).
102
C-2''/H-2''
OH
C-3''/H-3''
OH
70
80
3'
1''
5'
3''
5'''
OCOCH 3
1'
MeO
1'''
11
15
20
1
90
3'''
16
C-6'/H-6'
17
C-4'/H-4'
100
14
10
C-11/H-11
6
18
110
19
C-2'''/H-2'''
C-6'''/H-6'''
C-14/H-14
120
C-3'''/H-3'''
C-4'''/H-4'''
C-5'''/H-5'''
130
ppm (t1)
8.00
7.50
7.00
6.50
6.00
5.50
5.00
1.00
H-15/H-16
1.50
H-5/H-6
2.00
2.50
3.00
H-15/H-17
3.50
4.00
4.50
ppm (t1)
4.50
4.00
3.50
3.00
2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
Figura 66- Expanso do mapa de contornos COSY de MS24 na regio de 0,50 a 4,50
(CDCl3, 600 MHz).
103
C-15/H-14
C-10/H-11
50
OH
OH
3'
1''
5'
1'
MeO
C-4/OH-3
C-2/OH-3
1'''
3''
5'''
C-3''/H-2''
OCOCH 3
3'''
16
11
15
20
1
C-5'/H-6'
17
100
C-5'/H-4'
14
C-4'''/H-3'''
C-4'''/H-5'''
10
4
C-13/H-11
6
18
19
150
C-3/OH-3
C-2''/H-3''
C-7/H-14
ppm
200(t1)
11.0
10.0
9.0
8.0
7.0
6.0
5.0
Figura 67- Expanso do mapa de contornos HMBC de MS24 na regio de 5,0 a 11,5
(CDCl3, 600 MHz).
H-6/H-(OCH3) H-4/H-(OCH3)
H-6/H-5
H-17/H-15
H-3/H-2
H-3/H-6
H(OCH 3)
H-2'
105
OH
CH3 O
OH
O
O
CH3 O
- HOH
CH3 O
OH
O
CH3 O
RD
A
O
OH
C18H16O6
328.32
O
O
C38H44O8
628.76
CH3 COO H
C16H12O4
268.26
CH3 O
O
OH
C8H6O4
166.13
C38H42O7
610.74
106
Tabela 24- Deslocamentos qumicos de RMN de 1H (600 MHz, CDCl3) e 13C (125 MHz,
CDCl3) de MS24
H (J em Hz)
DEPT H (J em Hz)
37,9 CH2
1,52; 2,20, m
1'
169,3
18,5 CH2
1,79; 1,65,m
2'
101,9
41,3 CH2
1,51; 1,29, m
3'
164,1
33,3 C
4'
94,7
CH
6,10, d (2,0)
5
6
49,4 CH
36,1 CH2
5'
6'
162,2
95,7
C
CH
6,15, d (2,0)
198,7 C
5'-OCH3
55,8
132,6 C
1''
191,7
156,5 C
2''
72,4
CH
5,85, d (11,8)
10
37,9
3''
81,3
CH
5,40, d (11,8)
11
109,9 CH
1'''
153,2
12
158,3 C
2'''
126,6
CH
7,40, d (1,8)
13
135,2 C
3'''
128,7
CH
14
124,6 CH
7,90, s
4'''
129,6
CH
15
26,8
CH
3,18,hept (7.0)
5'''
128,7
CH
16
22,3
CH3
1,27, d 7.0)
6'''
126,6
CH
7,40, d (1,8)
17
22,5
CH3
3'-OH
18
19
32,6
21,4
CH3
CH3
1,29, d(7.0)
0,95, s
1,01, s
20
23,2 CH3
DEPT
1,85;dd(13,8; 3,8)
2,59;dd(18,1; 13,8)
2,68;dd(18,1; 3,8)
C
6,70, s
3''-OH
2''-CH3CO2
3,76, s
11,49 s
20,3
168,5
5,78 s
CH3 C 2,03 s
1,25, s
107
MS25: 30-hidroxilupenona
29
30
HOH 2C
H
20
19
22
25
11
13
17
26
28
9
15
3
5
O
23
27
24
MS25 foi obtido como um slido amorfo de ponto de fuso 181-183 C. No espectro
de RMN de 1H de MS25 (Fig. 73) foram constatados 6 simpletos referentes a grupos metila
de esqueleto triterpnico, bem como dois sinais em H 4,94 e em 4,91 caractersticos de
hidrognios de dupla ligao terminal de lupanos. Observou-se a presena de sinal de H
4,12, relativo a hidrognios metilnicos vizinhos a grupo hidroxila. A comparao dos dados
do espectro com a literatura (Tabela 25, p.109) e comparao com padro por meio de CCDS
1.255
1.068
1.024
0.927
0.791
0.958
1.448
1.441
1.430
1.886
1.874
1.867
1.678
1.672
2.299
2.286
2.043
2.485
2.467
2.462
2.443
2.434
2.422
2.415
2.403
4.129
4.125
4.117
1.565
3.93
4.86
6.51
6.34
10.88
6.12
24.65
2.0
5.28
2.41
3.0
2.62
4.0
1.76
5.0
2.65
6.0
2.46
2.00
7.0
4.909
4.943
1.0
108
30-hidroxilupenona
N H
MS25
23
24
25
26
27
28
29
30
H
1,07 (s)
1,02 (s)
0,93 (s)
1,06 (s)
0,96 (s)
0,79 (s)
4,94 (sl); 4,91(sl)
4,12 (dd, J= 1,6; 4,8 Hz)
H
1,07 (s)
1,02 (s)
0,93 (s)
1,06 (s)
0,96 (s)
0,79 (s)
4,94 (sl); 4,91(sl)
4,15 (dd, J=1,4; 4,5 Hz)
MS26: nepeticina
29
20
30
19
HO
22
13
11
25
17
26
28
1
9
15
27
3
5
HO
23
24
MS26 apresentou-se como um slido branco amorfo de faixa de fuso 212 215 C.
No espectro de RMN de 1H de MS26 (Fig. 74, p.110) foram observados seis simpletos
referentes a grupos metila de esqueleto triterpnico, bem como dois sinais em H 4,72 e 4,59,
relativos a dupla ligao terminal de esqueleto lupano. Os sinais em H 3,95 (1H, dd, J = 5,2;
10,4 Hz, H-11) e 3,20 (1H, dd, J = 7,2; 16,4 Hz, H-3), foram atribudos a tomos de
hidrognio metnico de carbono carbinlico.
109
O espectro de RMN de
13
anlise do subespecto DEPT (Fig.76, p.111) foram classificados como sendo sete metlicos
CH3, dez metilnicos, sete metnicos e seis tomos de carbono no hidrogenado. A
comparao de todos os dados obtidos com a literatura (Tabela 26, p.112) permitiu identificar
0.790
0.782
0.714
0.982
0.961
1.256
1.038
1.308
1.582
1.573
1.372
1.685
1.984
1.962
1.951
1.938
2.388
2.374
2.572
2.606
3.218
3.200
3.177
3.968
3.955
3.942
3.929
4.590
0.714
0.961
0.790
0.782
1.308
1.256
1.038
0.982
1.372
1.582
1.573
1.962
1.951
1.938
1.685
1.984
2.388
2.374
2.572
2.606
3.177
3.200
3.218
3.968
3.955
3.942
3.929
4.590
4.718
4.718
29
20
30
19
HO
22
13
11
25
17
26
28
1.15
5.93
2.33
3.11
8.23
3.88
9.93
3.71
2.11
1.16
1.06
1.00
1.06
2.09
1
9
5.0
4.0
3.0
2.0
15
1.0
ppm (t1)
27
3
5
HO
24
23
1.0
1.15
5.93
2.33
3.11
8.23
3.88
9.93
2.0
3.71
2.11
3.0
1.16
4.0
1.06
5.0
1.00
6.0
1.06
2.09
7.0
ppm (t1)
0.0
110
HO
HO
100
23
30
11
25
20
13
26
50
14.532
15.540
16.404
17.259
19.371
18.130
18.085
27.692
27.447
28.294
100
35.499
35.299
29.819
150
ppm (t1)
37.060
30
41.067
39.851
37.659
40
47.756
50
55.699
55.567
60
70.537
70
ppm (t1)
78.591
109.922
14.497
15.504
16.371
17.223
18.096
18.052
19.338
27.413
28.259
27.656
29.785
37.624
37.025
35.466
35.264
38.971
39.370
41.033
39.817
42.599
42.534
43.004
47.722
55.666
55.534
70.502
50
16.371
14.497
15.504
17.223
18.096
18.052
27.656
27.413
19.338
37.025
35.466
35.264
29.785
28.259
39.817
39.370
38.971
37.624
43.004
42.599
42.534
41.033
47.722
55.666
55.534
70.502
78.555
109.883
150.243
20
29
19
17
22
28
27
15
24
ppm (t1)
111
Tabela 26- Dados de RMN de 13C (100 MHz, CDCl3) de MS26 e dados da nepeticina
descritos na literatura (AHMAD et al.,1981)
nC
MS26
C
DEPT
Nepeticina (CDCl3)
C
39,0
CH2
39,0
2
3
4
5
27,4
78,6
39,4
55,5
CH2
CH
C
CH
27,5
78,6
39,4
55,6
18,1
CH2
18,1
7
8
9
10
35,3
41,1
55,7
37,7
CH2
C
CH
C
35,3
41,1
55,7
37,7
11
70,5
CH
70,5
12
13
14
27,7
37,7
42,6
CH2
CH
C
27,7
37,7
42,6
15
27,4
CH2
27,5
16
17
18
35,5
43,0
47,7
CH2
C
CH
35,5
43,0
47,7
19
20
47,7
150,3
CH
C
47,7
150,2
21
29,8
CH2
29,9
22
39,9
CH2
39,9
23
28,3
CH3
28,3
24
15,5
CH3
15,6
25
16,4
CH3
16,1
26
17,2
CH3
17,3
27
14,5
CH3
14,5
28
18,1
CH3
18,1
29
109,9
CH2
109,8
30
19,3
CH3
19,4
112
MS27: 3-epi-gloquidiol
29
20 H
30
19
22
13
11
OH
25
17
26
28
9
15
27
7
5
HO
23
24
MS27 foi obtido como um slido amorfo de ponto de fuso 230-232 C. No espectro
de RMN de 1H de MS27 (Fig. 77) foram observados sinais em H 4,66 e em 4,53, atribudos a
tomos de hidrognio metilnico de dupla ligao terminal de esqueleto lupano.Observaramse tambm sinais em H 3,40 e 3,22, atribudos a hidrognio metnico de carbono carbinlico.
Por meio da comparao do espectro de MS27 com os dados da literatura (Tabela 27, p. 114)
e comparao com amostra autntica por meio de CCDS, MS27 foi identificado como 3-epi-
0.930
0.884
0.771
0.731
0.544
0.538
0.572
0.566
1.024
1.080
1.308
1.236
1.548
1.354
2.172
2.151
2.024
1.830
1.810
1.799
1.653
2.214
0.50
1.11
2.55
2.76
3.55
6.44
3.27
19.07
2.0
5.43
13.29
4.48
3.0
2.48
3.51
1.29
0.98
0.73
4.0
2.321
0.572
0.566
0.544
0.538
0.771
0.731
0.930
0.884
3.242
3.232
3.211
3.202
2.391
2.376
2.363
2.348
1.024
3.417
3.413
3.400
3.393
1.354
1.308
1.080
4.535
1.548
1.236
4.659
4.655
1.653
1.799
1.830
1.810
2.024
2.348
2.321
2.214
2.172
2.151
2.363
2.376
2.391
2.55
2.76
5.0
1.11
3.55
6.44
6.0
1.00
0.91
1.00
0.66
7.0
3.27
1.50
19.07
2.00
5.43
13.29
2.48
3.51
1.29
2.50
4.48
5.696
gloquidiol.
1.0
113
Tabela 27. Dados de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) de MS27 e dados do 3-epi-gloquidiol
descritos na literatura (SRIVASTAVA e KULSHRESHTHA, 1988)
N H
MS27
3-epi-gloquidiol
(CDCl3)
1
3
23
24
25
26
27
28
0,90 (s)
0,70 (s)
0,85 (s)
0,99 (s)
0,90 (s)
0,73 (s)
4,56 (sl)
4,66 (sl)
1,62 (s)
0,93 (s)
0,73 (s)
0,88 (s)
1,02 (s)
0,93 (s)
0,77 (s)
4,53 (sl)
29
30
H
1
HO
3'
HO
23
O
23'
1'
H
H
23
3'
6
H
2'
1' H
(II)
7'
7'
(I)
3
4
2'
H
1
O
23'
comparao dos dados obtidos com os da literatura (Tabela 28, p.116) permitiu propor para
MS28 as estruturas de 7,8-di-hidroisoxuxuarina A(I) e isoxuxuarina A
Este interessante grupo de substncias constitudo de duas unidades: um
quinonametdeo, derivado de pristimerina (MS16), tingenona (MS12), netzahualcayona (10)
e/ou seus anlogos, sendo uma subunidade na forma quinnica e outra na forma aromtica,
unidas por uma ponte diter em disposio cis entre os anis A de ambas subunidades ou
entre o anel A da unidade aromtica e o anel B da quinnica (PREZ, 2000). Os dmeros
isolados neste trabalho so formados pela unio 7,8-di-hidrotingenona/ -6-oxotingenol (I) e
tingenona/6-oxotingenol (II).
CO2 CH3
O
(10)
115
Tabela 28- Dados de RMN de 1H obtido da mistura MS28 e dados de 7,8-dihidroisoxuxuarina Aeisoxuxuarina A descritos na literatura (PREZ, 2000)
N H (I)
7,8-di-hidroisoxuxuarina A (II)
Isoxuxuarina A
6,03 (s)
6,01 (s)
6,13 d (J=1,6)
6
7
23
7,01 (s)
6,99 (s)
7,04
7,03 (s)
6,28 (s)
6,26 (s)
6,25 (s)
6,25 (s)
23
2,57 (s)
2,55 (s)
2,50 (s)
2,50 (s)
6,15 (s)
MS29: 16-hidroxipristimerina
O
30
O
19
27
12
28
10
25
HO
22
15
OH
23
O composto MS29 foi obtido como um slido vermelho amorfo de ponto de fuso
99,1 100,2 C. O espectro na regio do IV de MS29 (Fig. 79, p.117) exibiu bandas de
absoro em 3375 cm-1, referente a deformao axial de grupo OH e em 1645 cm-1, atribuda
a grupo C=O. Foi observada tambm uma banda em 1078 cm-1, correspondente deformao
axial de ligao C-O de lcool primrio saturado (BARBOSA, 2007).
O espectro na regio do UV-Vis de MS29 (Fig 80, p.117) exibiu banda de absoro em
421 nm, condizente com a presena de um sistema quinonametdeo (RODRIGUES, 1989).
116
Transmitncia (%)
O
30
O
19
27
12
28
10
25
HO
22
15
OH
23
A
b
s
o
r
b
n
c
i
a
117
O
30
O
19
27
12
10
25
HO
22
28
15
OH
23
13
DEPT-135 (Fig. 83, p.120) foi possvel constatar a presena de 30 carbonos, sendo sete
grupos metila, seis grupos metilnicos, cinco tomos de carbono metnico e 12 tomos de
carbono no hidrogenado (Tabela 29, p. 123).
Pela comparao de dados de RMN do esqueleto base da pristimerina (JELLER et al.,
2004) com as correlaes observadas no mapa de contornos HSQC (Fig. 84, p.120) de
HcomC 46,95 e H 2,40 e 1,39 com C 38,34 foi possvel identificar C-18 e C-22,
respectivamente, alm de outros sinais. As correlaes observadas no mapa de contornos
HMBC (Fig. 85, p.121) do sinal em H 1,09 (H-28) com o sinal em C 68,21 e do sinal em H
4,12 com C 38,34 (C-22) confirmaram que a hidroxila est ligada ao C-16. O grupo ster foi
confirmado pelo simpleto em H 3,58 (3H) atribudo metoxila deste grupo em C-29, que foi
118
confirmada pela correlao observada entre os hidrognios do grupo metila em H 1,24 (H-30)
com o carbono carbonlico do grupo ster em C 178,2 (C-29). A estereoqumica relativa de
H-16 foi deduzida pelos valores das constantes de acoplamento (J16ax-15ax= 11,70 Hz e J16ax15eq=
4,65 Hz), que confirmam a posio equatorial do grupo hidroxila. No mapa de contornos
ROESY (Fig.86, p.121), o sinal dos tomos de hidrognio H-22 (2,40) e H-27 0,49)
correlaciona com o sinal de H-16 (4,12),reafirmando a posio do grupo hidroxila em C16. No desenho da conformao dos anis D e E da molcula (Fig.87, p.121) observa-se o
efeito NOE entre H-16 e H-22 e entre H-16 e H-27.
O
30
12
1
O
19
22
28
10
25
HO
27
26
15
OH
23
C-28/H-28
C-27/H-27
C-19a/H-19a
C-22a/H-22a
C-22b/H-22b
C-29'/H-29'
C-18/H-18
C-16/H-16
Figura 84- Expanso do mapa de contornos HSQC de MS29 (CDCl3, 500 MHz).
C-28/H-16
O
30
12
1
O
C-3/H-1
C-10/H-6
C-8/H-6
19
22
28
10
25
HO
27
26
15
OH
C-4/H-23
C-5/H-23
C-3/H-23
C-25/H-10
C-8/H-26
23
C-29/H-29'
C-29/H-30
120
H-16/H-27
H-22a/H-30
O
30
H-16/H-22a
12
1
O
19
22
28
10
25
HO
27
26
15
OH
23
26
CH 3
H
OH
27 CH3
CH3
CH 3
20
CO 2CH3
16 17
H 22
Por meio da anlise do espectro de massas de alta resoluo de MS29 (Fig.88, p.122),
obteve-se a frmula molecular C30H40O5 (MM 480,0 gmol-1), uma vez que foram observados
picos em m/z 481 [M+H] e 480 [M+]. Foram observados tambm picos em m/z 202[M+Na] e
201. Na Figura 89 (p. 122) apresentada a proposta de fragmentao de MS29, considerando
os picos observados no espectro de massas.
Assim, de posse de todos os dados de RMN de 1D e 2D (Tabela, 29, p.123), concluiuse que MS29 trata-se da 16-hidroxipristimerina, nova na literatura cientfica.
121
O
O
a
CO2
OH
-H
HO
OH
m/z 436
HO
m/z 267
HO
- C2H 2
a
+H
M+ 480
O
HO
HO
HO
HO
m/z 201
+H
m/z 200
m/z 241
HO
HO
m/z 202
122
Tabela 29. Deslocamentos qumicos de RMN de 1H (500 MHz, CDCl3) e 13C (125 MHz,
CDCl3) de MS29
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
164,7
178,3
146,0
118,2
127,5
134,0
117,2
169,7
47,8
164,0
11
33,7
12
13
14
30,2
42,6
44,6
15
28,4
16
17
18
68,2
30,2
46,9
19
29,6
20
39,4
21
28,4
22
38,3
23
25
26
27
28
29
29
30
10,2
38,3
21,7
19,2
24,1
178,3
51,8
32,4
DEPTH
135
CH 6,53 (s)
C
C
C
C
CH 7,03 (d) J= 7,1
CH 6,35 (d) J= 7,1
C
C
C
2,20 (dd, J= 2,3, 13,7; Ha)
CH2
2,22 (1H, m, Hb)
CH2 1,26 (m)
C
C
2,37 (dd, J= 3,4; 12,8, Ha)
CH2
2,18 (d, J= 2,5; Hb)
CH 4,12 (dd, J= 4,6; 11,7)
C
CH 1,84 (dd, J= 1,2; 8,4)
2,40 (dd, J= 3,2; 8,2, Ha)
CH2
1,73 (d, J= 8,1, Hb)
C
2,31 (d, J= 4,6; Ha)
CH2
1,53 (d, J= 5,9; Hb)
2,40 (dd, J= 3,2; 8,2; Ha)
CH2
1,39 (dd, J= 3,4; 6,7; Hb)
CH3 2,23 (s)
CH3 1,47 (s)
CH3 1,31 (s)
CH3 0,49 (s)
CH3 1,09 (s)
C
CH3 3,58 (s)
CH3 1,24 (s)
HMBC
ROESY
C-3, C-5
C-16
C-15, C-22, C-28
C-18, C-21
H-22a; H-27
H-16
C-18
C-3, C-4, C-5
C-8, C-9, C-10, C-11
C-8, C-13, C-15
C-12, C-13,C-14, C-18
C-16, C-17, C-18, C-22
H-16
H-19a
123
MS30: 6,7-desidroferruginol
16
OH
13
11
15
17
20
1
14
10
3
18
5
19
O composto MS30 foi obtido como um slido amorfo amarelado, de ponto de fuso
53,1-54,6 C. O espectro de RMN de 1H de MS30 (Fig.90) apresentou um sinal em H 1,01
(6H, s, H-18; H-19) referente a dois grupos metila geminais e um sinal em H 1,24 referentes
a grupos metlicos geminais de grupo isopropila, caractersticos de esqueleto do tipo diterpeno
abietano. Foram observados tambm sinais em H 6,88 e em H 6,56, relativos a hidrognios
de anel aromtico, alm de sinais em H 5,84 e em 6,52 relacionados a hidrognios de dupla
ligao conjugada. De posse desses dados, comparao dos mesmos com a literatura (Tabela
30, p.125) e comparao por CCDS com amostra autntica, foi possvel sugerir para MS30 a
1.258
1.247
1.242
1.222
1.204
1.073
1.006
2.080
2.074
3.339
3.145
3.128
3.111
3.367
5.860
5.853
5.836
5.829
6.531
6.524
6.507
6.500
6.556
2.662
2.0
6.79
4.93
3.0
24.36
4.0
1.88
5.0
0.93
6.0
1.05
1.03
0.81
0.92
1.00
7.0
1.11
6.884
estrutura do 6,7-desidroferruginol.
1.0
ppm (t1)
124
N H
6
7
11
14
15
16
17
18
19
20
MS30
6,7-desidroferruginol
(CDCl3)
6,54 (s)
6,88 (s)
1,01 (s)
1,01 (s)
1,07 (s)
MS31: abruslactona A
O
30
19
21
13
11
17
28
1
9
15
3
5
HO
23
30
19
21
13
11
17
28
1
9
15
3
HO
23
N H
MS31
Abruslactona A
3
12
22
23
24
25
26
27
28
30
H
3,25 (dd, J = 4,4; 10,8 Hz)
5,32 (sl)
4,17 (d, J = 5,4 Hz)
1,22 (s)
1,09 (s)
1,01 (s)
0,96 (s)
0,95 (s)
0,88 (s)
0,80 (s)
H
3,20 (dd, J = 6,0; 9,0 Hz)
5,30 (t, J = 3,0 Hz)
4,17 (d, J = 5,0 Hz)
1,21 (s)
1,07 (s)
0,99 (s)
0,94 (s)
0,93 (s)
0,87 (s)
0,79 (s)
126
20
22
13
11
25
17
28
26
13
11
+
25
28
26
1
9
22
17
9
15
15
27
27
3
7
(I)
23
24
(II)
23
24
4.0
3.0
2.0
0.901
0.895
0.874
0.866
0.843
0.835
1.077
1.008
1.859
1.277
1.254
1.116
44.79
5.0
10.16
7.37
6.0
26.91
2.47
2.00
7.0
1.958
1.948
2.027
2.015
1.992
1.982
2.201
2.191
2.516
2.514
2.506
2.502
2.569
2.563
2.545
5.483
5.468
5.536
5.522
5.660
5.646
5.638
5.624
1.0
ppm (t1)
127
N H
11
12
23
24
25
26
27
28
29
30
MS32
3-oxo-olean9(11):12-dieno (I)
MS32
3-oxo-ursan-9(11):12dieno (II)
H
5,63 (d, J = 5,6 Hz)
5,53 (d, J = 5,6 Hz)
1,01 (s)
0,86 (s)
1,14 (s)
1,28 (s)
1,10 (s)
1,08 (s)
0,90 (s)
0,90 (s)
H
5,63 (d, J = 6,0 Hz)
5,51 (d, J = 6,0 Hz)
1,01 (s)
0,88 (s)
1,17 (s)
1,26 (s)
1,12 (s)
1,08 (s)
0,90 (s)
0,90 (s)
H
5,65 (d, J = 5,6 Hz)
5,47 (d, J = 6,0 Hz)
1,01 (s)
0,90 (s)
1,14 (s)
1,28(s)
1,10 (s)
1,08 (s)
0,86 (s)
0,90 (s)
H
5,65 (d, J = 5,6 Hz)
5,49 (d, J = 5,6 Hz)
1,01 (s)
0,89 (s)
1,17 (s)
1,24 (s)
1,13 (s)
1,08 (s)
0,83 (d, J = 6,1 Hz)
0,93 (sl)
5'
2'
HO
OCH 3
MS33 foi obtido como um slido amorfo de faixa de fuso 63- 66 C. O espectro de
RMN de 1H de MS33 (Fig. 93, p.129) apresentou sinais que sugeriram a presena de
impurezas. Porm, foi possvel caracterizar, aps comparao com a literatura (Tabela 33,
p.129), os sinais mais intensos. Foi observado um sinal em H 9,65, atribudo a hidrognio de
grupo aldedo. O sinal em 3,94 foi correlacionado a hidrognios de grupo metoxila e aqueles
observados em H 7,08, em H 6,96 e em H 7,12 foram associados aos hidrognios de anel
aromtico trissubstitudo. Os sinais observados em H 6,60 e em H 7,40 foram atribudos a
hidrognios olefnicos. Assim, de posse de todos esses dados e comparao dos mesmos com
128
4.0
3.0
2.0
1.0
N H
MS33
H
9,65 (d, J = 7,6)
1
6,60
(dd,
J = 7,6; 16,0 Hz)
2
7,40 (d, J = 16,0 Hz)
3
2
7,08 (d, J = 2,0 Hz)
6,96 (d, J = 8,0 Hz)
5
7,12
(dd, J = 1,6; 8,0 Hz)
6
3,94 (s)
OCH3
3-metoxi,4-hidroxi-trans-cinamaldedo
(CDCl3)
H
9,65 ( d, J = 7,7 Hz)
6,61 (dd, J = 7,7, 15,9 Hz)
7,41 (1H, d, J = 15,9 Hz)
7,08 (d, J = l,9 Hz)
6,98 (d, J = 8,2 Hz)
7,13 (dd, J = 1,9; 8,2 Hz)
3,97 (s)
129
0.678
0.880
0.868
1.604
1.599
1.274
1.256
1.006
3.948
5.0
2.15
6.0
4.98
3.32
7.0
1.24
8.0
1.05
1.03
1.17
1.82
1.00
9.0
7.071
7.066
6.971
6.951
6.623
6.604
6.584
6.564
7.380
7.132
7.116
7.112
7.420
9.661
9.642
MS34: siringaldedo
O
H 3CO
OCH 3
OH
MS34 foi obtido como um slido amorfo de faixa de fuso 107,0-111,0 C. Embora o
espectro de RMN de 1H de MS34 (Fig. 94) tenha apresentado sinais que comprovaram que o
composto apresentava impurezas, assim como para MS33, foi possvel caracterizar, aps
comparao com a literatura (Tabela 34, p.131), os sinais mais intensos. O sinal em H 9,84
(1H, s) caracterstico de hidrognio de grupo aldedo. O sinal em H 7,17 (2H, s) foi
atribudo a hidrognio de anel aromtico tetrassubstitudo e aquele observado em H 3,99 (6H,
s) foi associado a hidrognio de grupo metoxila. Dessa forma, sugeriu-se para MS34 a
estrutura do siringaldedo como componente majoritrio.
130
N H
MS34
Siringaldedo (CDCl3)
CHO
2
6
OCH3
H
9,84 (s)
7,17 (s)
7,17 (s)
3,99 (s)
H
9,80 (s)
7,16 (s)
7,16 (s)
3,96 (s)
4'
H
8
HO
10
O
1'
OH
2
6
8'
9
5
9'
OH
4
OH
OH
O composto MS35 apresentou-se como um slido amorfo de faixa de fuso 137,0 141,0 C. No espectro de RMN de 1H (Fig. 95, p.132) de MS35 foram observados sinais em
H 6,44 (1H, s, H-6), H 5,95 (1H, d, J= 2,4 Hz, H-8) e H 5,81 (1H, d, J= 2,0 Hz, H-6)
referentes a hidrognios de anel aromtico. A presena destes trs sinais, juntamente com
aquele em H 2,88, atribudo a hidrognios metilnicos vizinhos a carbono de dupla ligao,
sugeriu que MS35 possua a estrutura de uma flavana do tipo epigalocatequina (MIRANDA,
2007). O sinal em H 4,44 (1H, s, H-2) foi atribudo ao hidrognio metnico em carbono
oxigenado, e aquele observado em H 4,27 (1H, d, J= 3,6 Hz, H-3) foi associado ao
hidrognio metnico geminal a grupo OH. Foram observados tambm sinais em H 1,63 e
1,65, correspondentes a hidrognios de grupo CH3.
No espectro de RMN de 13C de MS35 (Fig. 96, p.132) e subespectro DEPT-135 (Fig.97,
p.133) foram observados sinais que permitiram caracterizar o esqueleto epigalocatequina. A
fim de se confirmar a posio dos substituintes na molcula, foram realizados os
experimentos bidimensionais.
131
OH
2'
4'
H
8
HO
10
O
1'
OH
2
6
8'
9
5
9'
OH
4
OH
OH
132
OH
2'
4'
H
8
HO
10
O
1'
OH
2
6
8'
9
5
9'
OH
4
OH
OH
C-4/H-4
C-8/H-8
C-9/H-9
C-3/H-3
C-2/H-2
C-8/H-8
C-6/H-6
C-6/H-6
C-2/H-6
C-7/H-8
C-7/H-9
C-2/H-6
C-2/H-8
C-2/H-9
C-4/H-10
OH
2'
4'
H
8
HO
10
O
1'
OH
2
6
8'
9
5
9'
OH
4
OH
OH
H-4/H-3
H-3/H-8
H-2/H-4
OH
2'
H-2/H-6
4'
H
8
HO
10
O
1'
OH
2
6
8'
9
5
9'
OH
4
OH
OH
135
DEPT
HMBC
NOESY
72,4
CH
4,44 (s)
C-3, C-1
H-4
64,5
CH
26,4
CH2
C-2, C-10
100,8
96,4
CH
C-7,C-10
157,3
95,7
CH
C-7,C-10
157,1
10
156,3
129,3
122,0
149,5
138,0
149,5
110,1
CH
6,44 (s)
H-2
76,8
24,2
CH3
1,65 (s)
C-7, C-9
H-3
28,3
CH3
1,63 (s)
C-8
10
60,9
OCH3
3,83 (s)
H-4
136
30
20
H2 C
29
H2 C
19
22
13
11
1
25
26
28
14
10
8
27
17
16
+ R-COOH
ou Ar-COOH
DIC
DMAP
1
CH2Cl2 ou
CHCl3 anidro
25
17
26
28
14
10
16
8
27
3
R
24
19
22
1'
23
29
13
11
HO
20
ou Ar-
O
23
24
137
2.2-Resultados
e Discusso
19
22
13
11
1
25
26
28
14
17
10
16
8
27
3
1'
8'
6'
4'
2'
O
23
24
O ster CIL (531,0 mg) foi obtido como um slido ceroso branco de ponto de
fuso 145,0-145,7 C. No espectro na regio do IV (Fig. 102, p. 140) de CIL foram
observadas bandas em 2927 e 2852 cm-1, caractersticas de deformao axial de grupo
CH, alm da banda em 1727 cm-1, correspondente carbonila de steres. Observou-se
tambm uma banda em 1179 cm-1, relacionada ao estiramento da ligao CO-O-C
(BARBOSA, 2007).
No espectro de RMN de 1H (Fig. 103, p.140) de CIL foram observados sinais
em H 4,69 e 4,58, caractersticos dos hidrognios metilnicos do esqueleto lupano,
alm de um sinal em H 4,47 (1H, dd, J= 6,8; 9,0 Hz, H-3) relacionado ao hidrognio
carbinlico. Observou-se tambm um sinal em H 2,29, caracterstico do grupo CH2
vizinho a grupo acila (SILVERSTEIN e WEBSTER, 1998). Tanto no espectro de RMN
de
13
sinais que indicaram a formao do ster, sendo estes classificados em grupos metnico,
metlico, metilnico e no hidrogenado. Os dados de RMN de 13C relacionados cadeia
139
96
721
95
914
94
1025
93
1265
1104
1008
92
1147
1217
91
1454
%T 90
2852
1381
89
88
30
H
87
976
H2 C
29
19
1179
22
86
13
11
2927
85
25
17
26
28
14
10
16
8
27
84
3
1'
8'
83
4'
6'
876
2'
23
24
1727
81,7
4000,0
3600
3200
2800
2400
2000
1800
cm-1
1600
1400
1200
1000
800
650,0
0.000
0.786
0.839
1.030
0.941
1.280
1.385
1.683
1.612
2.250
2.288
2.324
0.786
2.74
12.77
3.63
3.72
23.18
12.61
1.50
0.839
4.512
4.484
4.467
4.433
0.941
4.568
4.683
1.030
1.280
1.385
1.612
1.683
7.263
1.00
ppm (t1)
2.0
2.74
12.77
3.63
3.72
3.0
23.18
4.0
12.61
5.0
1.22
6.0
2.63
0.94
1.04
1.00
7.0
1.0
0.0
ppm (t1)
Figura 103- Espectro de RMN de 1H de CIL (caprilato de lupeolila; 200 MHz, CDCl3).
140
40.0
100
35.0
30.0
25.0
20.0
20
1'
23
26
10
13
14
50
19.268
18.189
17.986
14.503
16.150
15.959
14.041
16.551
H2 C
29
20.930
11
23.727
22.574
3
25
25.151
25.085
27.421
2'
29.121
28.915
27.948
4'
31.660
29.818
100
34.199
6'
34.840
35.558
8'
38.031
38.360
39.982
13
48.273
20.0
50.323
55.368
14.041
150
14.503
15.959
25.0
16.150
16.551
17.986
18.189
30.0
19.268
20.930
22.574
80.597
35.0
23.727
25.151
25.085
40.0
28.915
27.948
27.421
29.121
29.818
45.0
31.660
34.199
34.840
50.0
35.558
38.031
55.0
ppm (t1)
38.360
39.982
109.340
14.503
14.045
15.959
16.553
16.153
17.986
19.268
20.925
22.577
23.727
25.154
25.085
27.949
28.918
29.123
31.663
34.194
34.842
35.557
37.071
37.819
38.030
40.835
39.985
38.357
42.814
42.979
47.992
48.271
50.322
55.366
22.577
20.925
19.268
17.986
16.553
16.153
14.503
15.959
14.045
23.727
25.154
25.085
27.949
29.123
28.918
31.663
34.194
34.842
37.071
35.557
39.985
38.357
38.030
37.819
55.366
50.322
48.271
47.992
42.979
42.814
40.835
80.599
109.340
150.936
173.686
30
19
17
28
22
5
8
27
16
O
24
15.0
ppm (t1)
0
CDCl3).
ppm (t1)
15.0
ppm (t1)
50
Figura 105- Subespectro DEPT-135 de CIL (caprilato de lupeolila) (50 MHz, CDCl3).
141
Tabela 37- Dados de RMN de 13C da cadeia triterpnica dos steres alifticos
sintetizados (50 MHz, CDCl3)
Carbono
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
DEPT135
CH2
CH2
CH
C
CH
CH2
CH2
C
CH
CH
CH2
CH2
CH
C
CH2
CH2
C
CH
CH
C
CH2
CH2
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3
CH2
CH3
CIL
COL
ML
PL
EL
TAL
c
38,37
23,74
80,60
38,04
55,38
18,22
34,21
40,84
50,33
37,07
20,94
25,16
38,03
42,82
27,43
35,57
42,99
48,28
47,99
150,94
29,83
40,84
27,96
16,56
16,16
15,97
14,51
18,20
109,34
19,28
c
38,36
23,74
80,62
37,83
55,37
18,20
34,20
40,84
50,32
37,08
20,94
25,08
38,03
42,82
27,43
35,57
43,00
48,27
48,01
150,97
29,82
40,00
27,96
16,58
16,19
15,99
14,53
18,02
109,36
19,30
c
38,36
23,74
80,61
37,83
55,37
18,20
34,20
40,84
50,32
37,08
20,93
25,08
38,03
42,82
27,43
35,56
43,00
48,28
48,01
150,98
29,83
40,00
27,97
16,58
16,17
15,97
14,52
18,00
109,36
19,28
c
38,40
23,71
80,63
37,85
55,41
18,21
34,24
40,88
50,37
37,11
20,97
25,13
38,01
42,85
27,46
35,60
43,01
48,31
48,32
150,95
29,86
40,01
27,98
16,58
16,18
15,99
14,53
18,02
109,36
19,30
c
38,39
23,75
80,61
37,84
55,40
18,21
34,23
40,87
50,35
37,10
20,96
25,12
38,07
43,00
27,45
35,58
42,84
48,31
48,01
150,94
29,70
40,00
27,97
16,57
16,16
15,98
14,52
18,00
109,35
19,29
c
38,21
25,05
87,45
38,42
55,31
18,11
34,15
40,85
50,32
38,42
22,94
25,04
38,02
43,77
27,43
35,56
44,04
48,28
48,00
150,92
29,82
40,00
27,93
15,98
16,32
16,16
14,54
18,01
109,40
19,30
142
13
Carbono
1'
2'
3'
4'
5'
6'
7'
8'
9'
10'
11'
12'
13'
14'
15'
16'
17'
18'
Carbono
CIL
c
173,67
34,84
25,16
29,13
29,13
31,67
22,58
14,10
BL
COL
c
173,72
34,82
24,84
31,34
22,33
13,95
DBL
ML
c
173,67
34,87
25,18
29,48
29,37
29,65
29,60
29,60
29,60
29,60
29,27
31,93
22,70
14,13
PL
c
173,69
34,87
25,01
29,47
29,6
29,65
29,69
29,69
29,69
29,69
29,69
29,65
29,27
31,93
22,70
14,12
TBL
EL
c
173,67
34,86
25,17
29,26
29,26
29,36
29,58
14,1
29,84
29,70
29,70
29,70
29,70
29,67
29,46
31,93
22,69
14,10
NBL
TAL
c
161,68
90,54
SL
143
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
c
38,40
25,10
81,82
38,20
55,45
18,24
34,22
40,87
50,35
37,13
20,97
23,77
38,05
42,85
27,45
35,58
43,00
48,29
48,01
150,95
29,84
40,00
28,12
16,00
16,80
16,2
14,55
18,01
109,38
19,30
166,28
132,68
129,52
128,30
131,01
128,30
129,52
c
38,4
25,11
81,38
38,22
55,44
18,24
34,22
40,88
50,35
37,14
20,98
23,83
38,06
42,86
27,45
35,58
43,00
48,29
48,01
150,96
29,84
40,01
28,14
16,00
16,81
16,19
14,55
18,02
109,38
19,30
166,10
152,79
112,02
148,59
150,96
110,2
123,35
55,94
55,94
c
38,39
25,11
81,73
38,23
55,41
18,24
34,22
40,88
50,36
37,14
20,99
23,8
38,06
42,86
27,45
35,58
43,01
48,3
48,02
150,95
29,84
40,01
28,16
16,01
16,82
16,19
14,56
18,02
109,39
19,31
165,87
126,05
106,73
152,9
142,04
152,9
106,73
56,18
60,91
c
38,39
25,11
81,73
38,23
55,41
18,24
34,22
40,88
50,36
37,14
20,99
25,08
38,06
42,86
27,45
35,58
43,01
48,3
48,02
150,95
29,84
40,01
28,16
16,01
16,82
16,19
14,56
18,02
109,39
19,31
165,87
126,05
129,18
152,9
142,04
152,9
106,73
56,18
60,91
56,18
13
c
38,35
25,08
82,41
38,18
55,44
18,22
34,19
40,86
50,34
37,12
20,98
25,08
38,03
42,85
27,44
35,57
43,00
48,28
48,01
150,95
29,71
40,00
28,12
15,99
16,76
16,18
14,53
18,01
109,39
19,31
169,93
113,08
161,70
117,56
135.44
119,04
129,77
144
20
H 2C
29
19
22
13
11
25
17
26
28
14
16
10
27
3
1'
H3 C
6'
4'
2'
23
24
-1
30
H
21
20
29
19
17
13
11
25
26
28
14
10
3
27
O
12
23
24
-1
30
H
21
20
29
19
13
11
25
28
14
9
10
H3 C
CH2
17
26
27
7
O
14
23
24
145
H
21
20
29
19
26
28
1
10
H3 C
27
O
16
23
14
CH2
17
13
11
25
24
-1
30
H
29
20
21
19
26
1
10
3
27
Cl3 C
23
28
14
17
13
11
25
24
-1
30
H
29
20
21
19
13
11
25
1
O
3
2'
3'
5'
1'
14
28
10
7'
6'
17
26
27
7
O
23
24
4'
146
30
H
29
21
20
19
17
13
11
25
26
28
14
9
10
27
O
23
24
H3 CO
OCH3
30
H
29
21
20
19
17
13
11
25
26
28
14
9
10
H3 CO
27
O
23
24
H 3CO
OCH 3
30
29
20
21
19
13
11
25
1
14
28
10
3
O2 N
17
26
27
7
O
23
24
NO2
-1
H
29
20
21
19
13
11
25
1
17
26
14
28
10
3
27
7
O
23
24
OH
148
A pristimerina induz a
149
150
O
O
(11)
3.1.2-Resultados e discusso
regir com a soluo reveladora, produz um composto diazo de colorao prpura (RHEE
et al., 2001).
Os steres caprilato de lupeolila (CIL), caproato de lupeolila (COL) e o triterpeno
30-hidroxifriedelan-3-ona (MS3) apresentaram alta atividade inibitria frente enzima
acetilcolinesterase. O composto estearato de lupeolila (EL), por sua vez, apresentou
atividade moderada, enquanto os compostos 3,16-dioxofriedelano (MS2), rigidenol
(MS13), palmitato de lupeolila (PL), miristato de lupeolila (ML) e lupeol (MS5) no
inibiram a enzima (Figura 107, p. 153).
152
Inativo
Moderadamente
ativo
Ativo
30
MS1
3
20
19
H 2C
29
22
13
11
1
25
17
26
28
14
16
10
27
3
1'
8'
4'
6'
2'
EU
O
23
24
29
HOH2 C 30
MS3
30
20
20
H 2C
27
19
18
29
25
10
28
H3 C
6'
4'
2'
14
8
16
O
23
9
10
16
27
3
1'
22
13
17
26
14
17
11
22
13
11
24
MS5
MS2
25
4
26
6
24
23
Figura 107- Halos correspondentes atividade inibitria das amostras EF, PL, ML,
MS13, CIF, CIL, EU, MS2, EL, COL, MS5 e MS3 frente enzima
acetilcolinesterase, observados aps 90 minutos de reao. *
153
28
154
155
Amostras
Micro-organismos
Halos de inibio / mm (MSD)
S. mutans
S. sanguinis
12,00,00
11,50,35
12,00,00
13,00,00
12,00,00
16,50,00
MS12 0,5%
MS12 1,0%
MS12 2,0%
C. albicans
14,5 0,33
18,0 0,00
15,5 0,25
S. aureus
11,00,00
12,00,00
12,00,00
EAT 0,5%
EAT 1,0%
EAT 2,0%
12,0 0,00
11,5 0,13
10,5 1,03
13,50,55
14,50,35
12,00,00
13,00,00
13,00,00
10,50,00
12,50,35
12,00,00
13,00,00
EER 0,5%
EER 1,0%
EER 2,0%
17,6 0,82
18,0 0,00
18,0 0,00
12,31,15
12,51,05
12,30,35
11,61,26
11,31,03
14,61,08
12,00,00
12,00,00
12,61,32
EEtT 0,5%
EEtT 1,0%
EEtT 2,0%
16,3 1,03
14,5 0,13
14,0 0,00
14,00,00
14,00,00
12,30,13
10,50,33
12,31,25
11,61,44
12,51,35
12,00,00
11,00,00
MS10 0,5%
MS10 1,0%
MS10 2,0%
16,5 1,25
16,6 1,13
12,0 0,00
13,00,00
10,00,00
14,00,00
14,00,00
15,60,28
13,30,39
11,61,22
12,00,00
12,30,33
EHR 0,5%
EHR 1,0%
EHR 2,0%
19,3 0,33
14,0 0,00
13,0 0,00
16,40,22
17,00,00
17,00,00
13,30,39
14,51,26
15,00,00
11,50,13
13,00,00
13,50,55
Clor* 0,12%
Etanol 70%
D W**
14,5 0,15
0,00 0,00
0,00 0,00
18,80,14
0,000,00
0,000,00
17,60,22
0,000,00
0,000,00
15,00,00
0,000,00
0,000,00
* clorexidina
** gua destilada
156
uma centrfuga de mesa (Beckman, modelo TJ-6) a 2500 rpm. Em seguida, foram
resuspensas no volume adequado para semeadura.
A conservao das clulas foi feita em nitrognio lquido, na presena de DMSO
a 7,0% em soro fetal ou em DMEM com concentrao de soro a 20,0%. Ao descongellas, seu contedo foi diludo lentamente em meio com soro. O material celular foi ento
centrifugado a 2000 rpm e o pellet obtido foi resuspenso em 1,0 mL de meio para ser
subcultivado no meio habitual.
Br
N
H
succinato
desidrogenase
N
N
N
N
N
S
(1)
(2)
158
Controle
positivo
Controle
negativo
base
nos
resultados
obtidos,
pode-se
concluir
que
16-
Linhagens
celulares
MS29
48 h
HeLa
A-549
2,55
3,40
Tempo de incubao
Doxorrubicina*
72 h
48h
72h
2,57
3,49
1,12
0,52
0,37
0,83
100
HeLa
A-549
75
50
25
0
1,5
2,5
3,5
*antineoplsico padro
16 -hidroxipristimerina (mM)
100
HeLa
A-549
75
50
25
0
1,5
2,5
3,5
16 -hidroxipristimerina (mM)
160
Este ensaio foi realizado no laboratrio coordenado pela Professora Ana Lucia
Ruiz, da Universidade Estadual de Campinas.
O efeito dos steres caproato de lupeolila, caprilato de lupeolila, miristato de
lupeolila, palmitato de lupeolila, estearato de lupeolila e 3,4-dimetoxibenzoato de
lupeolila foi avaliado frente s linhagens celulares tumorais humanas UACC-62
(melanoma), MCF-7 (mama), NCI-ADR/RES (ovrio resistente a adriamicina), 786-0
(rim), NCI-H460 (pulmo), PC-3 (prstata), OVCAR-03 (ovrio), HT-29 (colon) e K562
(leucemia eritromieloblastide). Estas foram adquiridas do Frederick Cancer Research
& Development Center, National Cancer Institute, Frederick, MA, EUA. Culturasestoque foram desenvolvidas em 5 mL de meio RPMI 1640 (GIBCO BRL, Life
Technologies) suplementado com soro bovino fetal 5%. Penicilina / estreptomicina (100
g/mL:1000 U/mL, 1 mL/L) foram acrescentadas s culturas experimentais Utilizou-se
como controle positivo o antineoplsico doxorrubicina (11), que exibiu atividade
apresentada na Figura 111 (p.162) . As clulas foram colocadas em placas de 96 poos
(100 L clulas/poo), a 37 C e 5% CO2 e expostas por 48 h a vrias concentraes dos
steres (0,25, 2,5, 25,0 e 250,0 g/mL diludas em DMSO concentrao final de 1%).
Em seguida, uma soluo de cido tricloroactico (50% w/ V) foi adicionada a cada
poo e a placa foi levada incubao por 30 min a 4 C. As clulas foram lavadas,
161
secas e a proliferao foi determinada pelo ensaio com sulforodamina B, com medidas
feitas a 540 nm (MONKS et al., 1991). O IC50 (concentrao mnima para inibir 50% do
crescimento) e os valores de TIC (concentrao que promove 100% de inibio de
crescimento) foram determinados pela anlise da regresso no-linear. Os resultados
representados so de experimentos feitos em triplicata, com erro padro menor que 5%.
101206 Doxorrubicina
100
50
0
U251
UACC-62
NCI/ADR-RES
786-0
NCI-H460
PC-3
OVCAR-3
HT29
K-562
-50
-100
-3
10
-2
10
0,025
-1
10
0,25
10
2,5
10
25
10
Concentrao (g/mL)
(11)
162
101206 A6
101206 A1
100
50
100
0
U251
UACC-62
NCI/ADR-RES
786-0
NCI-H460
PC-3
OVCAR-3
HT29
K-562
-50
50
0
U251
UACC-62
NCI/ADR-RES
786-0
NCI-H460
PC-3
OVCAR-3
HT29
K-562
-50
O
O
-100
-100
-3
10
-2
10
0,25
-1
10
10
2,5
10
25
250
10
-3
-2
10
-1
10
10
Concentrao (g/mL)
0,25
10
101206 A4
25
10
250
10
101206 A3
100
100
50
0
U251
UACC-62
NCI/ADR-RES
786-0
NCI-H460
PC-3
OVCAR-3
HT29
K-562
-50
50
2,5
Concentrao (g/mL)
0
U251
UACC-62
NCI/ADR-RES
786-0
NCI-H460
PC-3
OVCAR-3
HT29
K-562
-50
-100
-100
10
-3
10
-2
10
-1
0,25
10
2,5
10
25
10
250
10
-3
10
-2
10
10
2,5
10
25
10
101206 A2
100
50
50
101206 A5
100
-50
0,25
Concentrao (g/mL)
Concentrao (g/mL)
U251
UACC-62
NCI/ADR-RES
786-0
NCI-H460
PC-3
OVCAR-3
HT29
K-562
-1
0
U251
UACC-62
NCI/ADR-RES
786-0
NCI-H460
PC-3
OVCAR-3
HT29
K-562
-50
-100
-100
-3
10
-2
10
10
-1
0,25
10
2,5
Concentrao ( g/mL)
10
25
10
250
10
-3
10
-2
-1
10
0,25
10
2,5
10
25
10
Concentrao (g/mL)
163
250
250
164
As
placas
foram
incubadas durante 72 h. Para determinar a IC50 foi utilizada soluo de XTT com
metossulfato Fenasin (PMS).
Cepa avaliada
Lam
Lbr
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
>50
24,6
23,6
0,25
0,1
165
166
167
Amostra*
Ampicilina
EL
CIL
COL
ML
DBL
TBL
DNL
BL
TCL
MS5
MS7
MS13
MS17
MS20
MS26
MS29
48h
72h
%Inibio (MSD)
1006
828
ND**
ND
ND
ND
216
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
ND
267
246
ND
ND
ND
ND
ND
ND
844
734
* 250 g.mL-1
** atividade no detectada
168
Concluso
CONCLUSO
O presente estudo contribuiu para o estudo quimiotaxonmico da famlia
Celastraceae. Observou-se grande variedade de compostos qumicos nos extratos estudados,
sendo
encontrados
compostos
aromticos
(3-metoxi-4-hidroxi-trans-cinamaldedo,
siringaldedo e pinostrobina), diterpenos (ferruginol e 6,7-desidroferruginol), esteroide (sitosterol) e triterpenos pentacclicos da classe dos glutinanos (glutinol), oleananos
(abruslactona A), friedelanos (friedelina, 3,16-dioxofriedelano, 30-hidroxifriedelina, 29hidroxi-friedelina, friedelan-1,3-diona) e quinonametdeos (tingenona e pristimerina), com
nfase na
epigloquidiol, lupenona, lupeol, 30-hidroxi-lup-20(29)-en-3-ona, 3,30-dihidroxi-lup-20(29)eno, betulina, rigidenol, nepeticina, gloquidona, 11-hidroxigloquidona).
Os extratos mais polares de M. salicifolia apresentaram expressivo teor de 4-Ometilepigalocatequina e proantocianidina A, compostos de reconhecida atividade
antioxidante. Isso corrobora a possibilidade de M. salicifolia vir a ser uma fonte alternativa
desses compostos.
Dois dos compostos isolados so novos na literatura cientfica, salicassina e 16hidroxipristimerina. Este exibiu promissora atividade citotxica contra Hela e A-549, alm
de alto efeito inibitrio frente bactria Helicobacter pylori. a primeira vez que se reporta,
em uma espcie da famlia Celastraceae, a ocorrncia de um aduto no qual uma unidade
chalcona unida a um diterpeno abietano por ponte ter.
A presena de compostos de reconhecida atividade antilcera, como ferruginol e
pinostrobina, alm da atividade observada para os compostos 16-hidroxipristimerina e
rigidenol frente a H. pylori no contraria o uso popular da espcie no tratamento de
problemas estomacais.
Foram sintetizados 11 steres a partir do lupeol isolado desta espcie, sendo 6
derivados alifticos (caprilato de lupeolila, caproato de lupeolila, miristato de lupeolila,
palmitato de lupeolila, estearato de lupeolila, tricloroacetato de lupeolila) e 5 aromticos
(benzoato de lupeolila, 3,4-dimetoxibenzoato de lupeolila, trimetoxibenzoato de lupeolila,
3,5-dinitrobenzoato de lupeolila, salicilato de lupeolila). O palmitato de lupeolila) foi
seletivo para a linhagem celular K-562, ao passo que o caproato de lupeolila e o caprilato de
lupeolila inibiram a atividade da enzima acetilcolinesterase.
169
Concluso
170
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