Tema 5 Biorreactores: Tipos, Aplicaciones y Formas de Operación

Objetivos Contenidos
Conocer los tipos de biorreactores y sus Clasificación de los Biorreactores
características. Biorreactores con biocatalizadores
Saber las aplicaciones generales de los
en suspensión: Agitación Mecánica
diferentes tipos de biorreactores
Conocer las formas de operación en los y Agitación Neumática
biorreactores con los diferentes Biorreactores con biocatalizadores
biocatalizadores. inmovilizados: Enzimas y Células.
Determinar, una vez conocido el Biorreactores especiales
biocatalizador, las posibles configura-
ciones de biorreactores para llevar a cabo
una transformación determinada.
Determinar el tipo de operación más
adecuado a emplear en la transformación.

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BIORREACTOR
Recipiente en el que se lleva a cabo una transformación en la
que interviene un biocatalizador

Características Generales

• Condiciones de operación suaves (Poco aporte energético)

• Transformación isoterma (Resolución BM y BE no acoplado)
• Productividad (actividad y estabilidad biocatalizador, rdto producto)

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 Clasificación de Biorreactores

TIPOS de BIORREACTORES

Clasificación

Forma Fases Tipo de operación

Tanques h ≅ Ø
Homogéneos Discontinuo
Tubos h >> Ø Continuo
Heterogéneos
Otros Semicontinuo

Estado Biocatalizador
Biocatalizadores en suspensión: enzimas (homogéneos) y células
(heterogéneos, G-L-S)
Biocatalizadores inmovilizados: enzimas y células, métodos
Biorreactores especiales: estado sólido, fotobiorreactores,

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Clasificación de Biorreactores

TIPOS de BIORREACTORES

Clasificación

Forma Fases Tipo de operación

Tanques h ≅ Ø
Homogéneos Discontinuo
Tubos h >> Ø Continuo
Heterogéneos
Otros Semicontinuo

Estado Biocatalizador
Biocatalizadores
Biocatalizadores en suspensión:
en suspensión: enzimas (homogéneos)
enzimas y células
(heterogéneos, G-L-S)
(homogéneos) y células (heterogéneos, G-L-S)
Biocatalizadores inmovilizados: enzimas y células, métodos
Biorreactores especiales: estado sólido, fotobiorreactores,

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 Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Distribución homogénea del catalizador: Agitación

Tipo de agitación
Agitación mecánica: equipo mecánico

Agitación neumática: gas a presión

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Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Distribución homogénea del catalizador: Agitación

Tipo de agitación
Agitaciónmecánica:
Agitación mecánica: equipo
equipo mecánico
mecánico

Agitación neumática: gas a presión

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 Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Agitación Mecánica Reactor tipo TANQUE AGITADO

Características generales
• Tipo de Flujo (ideal): Flujo en Mezcla Perfecta
• Relación h/Ø: 1
• Versátiles: permite cambios, uso multipropósito
• Los más empleados
• Agitados mecánicamente (tipos de agitadores):
consumo relativamente elevado de potencia
• Otros elementos: bafles deflectores, rompe-espumas
• Aireados (células aerobias): Distribuidores de aire
• Transferencia de calor: Serpentines, camisas
• Tipo de operación: Discontinua, Semicontinua, Continua

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Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Distribución homogénea del catalizador: Agitación

Tipo de agitación
Agitación mecánica: equipo mecánico

Agitación neumática:
Agitación neumática: gas gas a presión
a presión

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 Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Agitación Neumática Reactores tipo COLUMNA

Características generales

Relación h/Ø: > 6/1, Reactores tubulares

(COLUMNAS de BURBUJEO)
Agitados neumáticamente (gas a presión)
Aireados: Distribuidores de aire
Transferencia de calor: Serpentines,
Cambiador externo
Tipo de operación: Discontinua, Continua
Accesorios: recirculación (AIR-LIFT)
Células susceptibles daño

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Columna de burbujeo Régimen de Flujo

Flujo Homogéneo Flujo Heterogéneo

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 Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Columna de burbujeo

Características

Fase sólida (microorganismo) “disuelta” en fase líquida

Células susceptibles de daño celular
Microorganismos floculantes (Lecho fluidizado trifásico)
Procesos: Producción cerveza, vinagre,
levadura panadería, SCP, aguas residuales
Características de diseño:
- distribuidores de gas parte inferior recipiente
- Parte superior con mayor diámetro (arrastres): ↓vS
Control por velocidad de transporte de oxígeno→Sistemas bifásicos
(control película líquida)
Diseño: f (flujo en el recipiente): f (mezcla axial)⇒ Modelos de dos zonas

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Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Air-lift

Características

Fase sólida (microorganismo) “disuelta” en fase líquida

Células susceptibles de daño celular (células superiores)

Características de diseño:
- distribuidores o inyectores de gas
- Elementos mecánicos internos (externos)→Movimiento del líquido
Control por velocidad de transporte de oxígeno→Sistemas bifásicos
(control película líquida)
Diseño: f (flujo en el recipiente): f (mezcla axial)⇒ Modelos de tres zonas
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 Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Air-lift Características

Procesos: cultivo de células superiores (animales y vegetales)

tejidos u órganos de células vegetales
tratamiento aguas
SCP (a partir de metanol)
Dos ZONAS (ASCENDENTE y DESCENDENTE):
Diferente densidad: Separación gas zona superior.
Movimiento líquido ascendente y descendente separados físicamente
Gas se introducido en zona ascendente.
CONFIGURACIONES:
Recirculación interna
Recirculación externa.

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Air-lift Configuraciones: Recirculación interna

Salida gas Salida gas

Tubo o bafle

Descendente

Ascendente

Distribuidos de gas

Entrada gas (aire) Entrada gas (aire)

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 Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Salida gas
Air-lift Configuraciones
Recirculación externa

Descendente
Ascendente

Distribuidos de gas

Entrada gas (aire)

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Biorreactores con biocatalizadores en suspensión

Características

Comparación Agitación Mecánica y Neumática

Volumen Daño Transferencia

Viscosidad Potencia
reactor celular calor
Generación
elevada
Mecánica Baja y Alta Pequeño Elevada Elevado
(sistemas no muy
exotérmicos)

Generación baja
Neumática Baja Elevado Moderada Bajo (todo tipo de
sistemas)

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 Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

TIPOS de BIORREACTORES

Clasificación

Forma Fases Tipo de operación

Tanques h ≅ Ø
Homogéneos Discontinuo
Tubos h >> Ø Continuo
Heterogéneos
Otros Semicontinuo

Estado Biocatalizador
Biocatalizadores en suspensión: enzimas (homogéneos) y células
(heterogéneos, G-L-S)
Biocatalizadores inmovilizados:
Biocatalizadores inmovilizados: enzimas
enzimas y células, y células,
métodos
métodos
Biorreactores especiales: estado sólido, fotobiorreactores,

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Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Tipo de biocatalizador
Enzimas

Células

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 Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Enzimas Reactores Heterogéneos

• Elevadas producciones, calidad constante

• Mayor estabilidad E que en suspensión. Inmovilización
• Reutilización catalizador (Alto precio)
•Tanques agitados
• Lechos

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Enzimas Tanque agitado (CSTR)

• Equipos cilíndricos h≈D

• Agitación mecánica
• Mezcla perfecta (líquidos con baja viscosidad)
• Homogeneización: Elevada N (P/V)⇒posible abrasión
• Bajos costes producción
• Gran automatización
• Equipos versátiles
• Enzimas inmovilizadas: configuraciones
• partículas suspendidas (filtro)
• Partículas retenidas (agitador, bafles)
• Circulación partículas

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 Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Enzimas Tanque agitado (CSTR)

Tanque cesta Tanque (tabiques)

Tanque slurry

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Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Enzimas Reactores tubulares Lecho fijo

Lecho fijo

•Elevadas [E]
•Alto inmovilizado Lecho de fibra

•Bajos costes producción (automatización)

•Flujo pistón: f(z), no f(r)
•Enzimas inmovilizadas: configuraciones
• lecho fijo
Monolito
• lecho de fibra
• monolito

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 Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Células

Tipo de inmovilización
Pasiva

Activa

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Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

INMOVILIZACIÓN PASIVA
Células

Crecimiento células en superficies materiales rugosos

Operación en continuo

- VENTAJAS:
- No pre-producción células
Filtro biológico - Gran capacidad de TM
- Partículas reutilizables
- Cambio de escala no complicado

- DESVENTAJAS:
- No esterilidad: tratamiento residuos

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 Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Células INMOVILIZACIÓN PASIVA

Ejemplos

Células Soporte Producto

Cultivo mixto Espuma de poliuretano Tratamiento de residuos
Microorganismos metanogénicos Espuma de poliuretano Metano
E. coli Espuma de silicona Amilasa
S. cerevisiae Acero o espuma de poliester Etanol
Clostridium acetobutilicum Esponja natural Acetona, butanol, etanol
Trichoderma viride Acero Celulasa
Mucor ambiguus Espuma de poliuretano Ác γ-linolénico

Rizopus chimensis Espuma de poliuretano Lipasa

Penicillium chrisogenum Espuma de poliuretano Penicilina

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Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Células
Tanque agitado INMOVILIZACIÓN ACTIVA

- Robustez biocatalizador: diseños agitador

- Proceso aerobio: limitaciones

Lecho fluidizado
Lecho fijo
- MO aerobios y anaerobios
- VENTAJAS: - MO susceptibles de daño celular
- facilidad operación - Fácil Control y medida
- ↑velocs reacción - Introducción catalizador activo
- DESVENTAJAS: - Veloc. mínima fluidización con recirculación líquido
- Taponamiento lecho: - Pequeñas partículas con elevada área
Células no viables o resting cells - Mala estabilidad
- No gran aporte de O2 - Complejidad diseño
- Eliminación CO2 - No esterilidad
- Tratamiento L-S

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 Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Células
INMOVILIZACIÓN ACTIVA

Ejemplos

Reactor Células Inmovilización Producto

E. coli Gel poliacrilamida fumárico⇒aspártico
Lecho fijo S. cerevisiae Alginato cálcico Etanol
Brevibacterium flavum Colágeno Ácido glutámico
Lecho
Cultivo mixto --- Tratamiento aguas
fluidizado
Tanque Anticuerpos
Células animales ---
agitado monoclonales

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Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Células

INMOVILIZACIÓN ACTIVA (atrapamiento) Reactores de membrana

- Membranas preformadas: separación células del medio
-Operación continua ⇒tamaño: 0,1 y 5 µm; f(tamaño celular)
MEMBRANAS: ⇒Material: acetato y nitrato celulosa
- ultrafiltración (poliméricas) polipropileno
- cerámicas, siliconas poliacrilonitrilo, etc
- intercambio iónico ⇒Permeabilidad: f(tamaño, estructura, hidrofobicidad, carga)
⇒Forma: fibras huecas (hollow fiber

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 Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Células

INMOVILIZACIÓN ACTIVA (atrapamiento) Reactores de membrana

VENTAJAS:
- Método inmovilización no daña metabolismo: “en suspensión”
- Empleo para células viables con o sin crecimiento (resting cells)
- No wash-out
- Resting cells: combinación reacción y regeneración
- Mayor pureza producto: Down-stream
- Posibilidad de permeabilidad selectiva:
- No a inhibidores
- Componentes de fases L y G por membranas diferentes (no oxigenación L)
- Entada de nutrientes por membranas diversas
- Empleo de medios no acuosos sin emulsión (y separación de fases)
- Protección contra stress hidrodinámico

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Biorreactores con biocatalizadores inmovilizados

Células

INMOVILIZACIÓN ACTIVA (atrapamiento) Reactores de membrana

DESVENTAJAS:
- Transferencia de Materia:
- Distribución heterogénea de células, mo móviles
- Distribución heterogénea de sustratos: empleo resting cells
- Transporte por difusión.
- Compatibilidad células con membranas sintéticas: metabolismo
- Monitorización y control

Ejemplos

Células Producto
E. coli β-lactamasa
Lactobacillus delbrenkri Ácido láctico

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 Biorreactores especiales

TIPOS de BIORREACTORES

Clasificación

Forma Fases Tipo de operación

Tanques h ≅ Ø
Homogéneos Discontinuo
Tubos h >> Ø Continuo
Heterogéneos
Otros Semicontinuo

Estado Biocatalizador
Biocatalizadores en suspensión: enzimas (homogéneos) y células
(heterogéneos, G-L-S)
Biocatalizadores inmovilizados: enzimas y células, métodos
Biorreactores especiales:
Biocatalizadores especiales:
estado sólido,estado
fotobiorreactores,
sólido,
intensificación de procesos
fotobiorreactores
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Biorreactores especiales

Tipo de transformación
Fermentación en estado sólido

Fotobiorreactores

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 Biorreactores especiales

BIORREACTORES ESPECIALES Estado Sólido

Agitación Mecánica:
Tanques agitados
Fermentadores rotatorios
Biorreactores pulsantes

Operación continua o discontinua

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Biorreactores especiales

BIORREACTORES ESPECIALES Estado Sólido Reactores rotatorios

- Sustratos sólidos
- Bajos niveles de humedad (40%, <80%)
- Procesos anaerobios y microaerófilos
- Ambiente selectivo (actividad agua)⇒Mohos, bacterias, levaduras
- Excreción de enzimas extracelulares
- Procesos: Vino, Salsa de soja, Tratamiento residuos (Discontinuo)

VENTAJAS:
- Volumen pequeño (economía)
- ↓Posibilidad de contaminación (%H2O)
- Separación producto sencilla (líquido, gas, sólido)
- Desarrollo de estructuras microbianas morfológicas diferenciadas
DESVENTAJAS:
- Medio heterogéneo: mala mezcla
- Dificultad de control
- Volúmenes mayores⇒gradientes (rotura micelios)

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 Biorreactores especiales

BIORREACTORES ESPECIALES BIORREACTORES PULSANTES

- Agitación pos pulsos: movimiento elementos equipo (platos, émbolo)

- Procesos aerobios
- Elevada viscosidad
- Aplicaciones: Operación continua
Producción Metabolitos
Tratamiento de residuos

Células Producto Características proceso

Cyathus striatus Antibióticos Aerobio, elevada viscosidad
Aspergillus niger Ácido cítrico Aerobio, elevada viscosidad
Zymomonas mobilis Etanol ----
Acetobacter aceti Ácido acético Aerobio, inmovilización
Levadura SCP aerobio
Cultivo mixto Tratamiento de residuos Aerobio, anaerobio

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Biorreactores especiales

FOTOBIORREACTORES
BIORREACTORES ESPECIALES

- CO2→Metabolitos (autótrofo)
- Energía luminosa (fotótrofo)
- Compuesto dador de e- (H2O)
- Organismos fotosintéticos: bacterias fotosintéticas, microalgas, cianobacterias,

⇒Complemento alimentario (biomasa)

⇒Espacio: O2 y alimento
⇒Producción metabolitos de valor añadido
⇒Pigmentos, antioxidantes, prods farmacéuticos
⇒Medioambiente
⇒Eliminación sustancias tóxicas (metales pesados, fijación CO2)
⇒Inóculos suelos contaminados
⇒Regeneración atmósfera sistemas cerrados

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 Biorreactores especiales

BIORREACTORES ESPECIALES FOTOBIORREACTORES

ACTIVIDAD BIOSINTÉTICA:
- Eficacia sistema iluminación: µ
- Luz natural - Luz artificial

Poco gasto energético

Difícil control
Pureza
Fases luz-oscuridad
Menor productividad
Continuos
Buen control condiciones
Calidad cte producto
Permiten esterilización
Elevado gasto energético
Dificultad cambio de escala

- Veloc. Volumétrica absorción luz:

- ↑Superficie de T.E.
- ↑I luz incidente

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Bibliografía recomendada
Asenjo, J.A. y Merchuck, J.C. 1994. Bioreactor System Design. Marcel Dekker. 139-206.
Atkinson, B. 1986. Reactores Bioquímicos. Reverté. 15-45.
Atkinson, B. y Mavituna, F. 1991. Biochemical Engineering and Biotechnology
Handbook. Stockton Press. 2nd Ed., 608-624
Bailey, J.E. y Ollis, D.F. 1986. Biochemical Engineering Fundamentals. McGraw-Hill. 2ª
Ed. 535-539
Blanch H.W. y Clark, D.S. 1996. Biochemical Engineering. Marcel Dekker. 276-277, 292-
300
Doran, P. M. 1995. Bioprocess Engineering Principles. Academia Press. 336-353.
Godiá, Casasblancas, F. y López Santín, J. (eds.). 1998. Ingeniería Bioquímica.
Síntesis. 131-144, 299-230
Shuler, M.L. y Kargi, F. 2002. Bioprocess Engineering. Basic Concepts. 2ª Ed. Prentice
Hall. 245-290

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