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Regularmente en el área de Parasitología, las muestras más analizadas para demostrar la presencia de
parásitos intestinales del hombre son las heces fecales; sin embargo, existen otros parásitos cuya presencia
se puede evidenciar en muestras biológicas como: bilis, jugo duodenal, esputo, secreción, biopsia o frotis
perianal, no obstante estas pruebas se harán tomando en cuenta los antecedentes clínicos específicos del
paciente. A continuación, se hará referencia a los diversos aspectos con los cuales deberán proceder las
muestras a analizar con fines parasitológicos para obtener resultados reproducibles y de esta manera ayudar
eficazmente al médico en el diagnostico pronostico, y tratamiento del paciente.
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6.c Aprender a realizar un examen coprológico de forma práctica en el laboratorio.
2.c Diferenciar y conocer la importancia de las técnicas de tinción para la observación en el
microscópico
3.c Interpretar los resultados de lo que se observa en las heces de forma macroscópica y microscópica.
4.c Identificar organismos unicelulares en distintos estados y aprender la forma reconocerlos.
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6.c Biológico:

a)c Muestra de heces fecales.

2.c Equipos:

a)c Portaobjetos: varios


b)c Cubreobjetos: varios
c)c Microscopio
d)c Aplicador
e)c Recipiente estéril para recolectar muestra
f)c Centrífuga
g)c Vaso de precipitados de 50 ml
h)c Gasa cortada en cuadros de 65 cm por lado
i)c Tubos de ensayo cónicos de 65 ml

3.c Colorantes y reactivos


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a)c Œugol parasitológico
b)c Solución salina fisiológica
c)c Formaldehído al 60%
d)c Éter
e)c Pipeta Pasteur con bulbo
f)c Embudo

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En la actualidad se cuenta con 3 métodos para detectar parasitosis y se efectúan de acuerdo al
procedimiento y el tipo de parásitos, según sus síntomas y signos.

Œos parásitos se encuentran de 3 formas trofozoitos, prequiste y quiste.

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c EXAMEN COPROPARASITARIO SERIADO
c Examen directo
c Enriquecimiento (Ritchie, Faust, Sheather)
c Coloraciones temporarias (Œugol, Clorazol, Tionina)
c Coloraciones permanentes (Frotis):
c Ziehl Neelsen modificado o Kinyoun para diagnóstico de coccidiosis intestinales
(Criptosporidiosis, Isosporosis, Ciclosporosis)
c Hematoxilina Férrica para amibiasis
c Tricrómica y Gram Cromotrope para microsporidiosis
c Examen macroscópico
c Nuevos equipos desechables que facilitan la tarea en el laboratorio
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c Sondeo duodenal (giardiasis)
c Biopsia de intestino delgado (giardiasis)

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c EN HECES: coproantígenos ( 
  ,    ) por IFI, EŒISA, IEC
c EN SUERO: anticuerpos séricos (Eh en casos de amibiasis invasiva)

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Es el más antiguo que se conoce y fue el primero utilizado por Antonio Van Œewenhooke en el siglo XVIII
observando trofosoitos de Giargia Œambía.

TÉCNICA:

En un extremo de un porta objetos se colocan 6 o 2 gotas de solución salina, en otro extremo del porta
objetos se colocan 6 o 2 gotas de lugol, después se colocan una pequeña muestra de materia fecal y luego se
esparcen hasta dejarla semilíquida y se observa en el microscopio.

      

Este es el método más usado y efectivo, en este se precipitan los parásitos por centrifugación después de
haber filtrado la muestra.

TÉCNICA:

Se desmenuza una porción de materia fecal en un tubo de ensaye y se le agrega ¾ partes de agua de la
medida del tubo, se agita y se filtra a través de una gasa. Después se centrifuga a 6500 revxmin durante 5
min. Después se decanta y el sobrante del sedimento se le agrega sulfato de zinc y con un agitador se mezcla
bien y se vuelve a centrifugar a 6500 revxmin durante 5 min. Después se coloca una gota de lugol en un
porta objetos y se toma una muestra de materia fecal en seco débil y seco fuerte.

Método de raspado anal o gram

Este método se realiza en la región perianal para obtener huevecillos de los siguientes parásitos de
Enterobius Vermicularis, Ascaris Œumbricoides, Tenia Solium, Tenia Saginata, Himenolepis nana y diminuta
además de Trichuris Trichuria.
TÉCNICA:

c Œa muestra se toma de un paciente que no se


haya bañado o defecado.

c Se toma un abatelenguas y se le coloca cinta


adhesiva con el pegamento hacia fuera.

c Se coloca al paciente en posición


genupectoral, se le abre la región perianal y se le coloca el abatelenguas alrededor, se coloca la
muestra en un porta objetos con lo que se recolecto hacia abajo y se observa al microscopio.

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Indicaciones por la docente sobre la técnica a utilizarse para la realización de la práctica.

c Colocarse material de laboratorio como guantes, mascarilla y mandil.


c En un portaobjetos limpio y desengrasado, se colocan separadamente, una gota de solución salina y
otra de lugol.
c Con el aplicador de madera se toma una muestra de 6 a 4 mg de heces 8 en muestras con sangre y
moco elegir esa parte para estudiar) y se mezcla con la solución, con el mismo aplicador se retiran
las fibras y otros fragmentos gruesos, procurando hacer una suspensión no un frotis.
c Colocar el cubreobjetos.
c Repetir estas operaciones en la gota de lugol.
c Observar al microscopio con objetivos de 60X y 40X. No es recomendable usar objetivo de
inmersión (600 x), pues se puede ensuciar el microscopio.
c Recorrerla lamina siguiendo un sentido direccional, ejemplo: de derecha a izquierda, o de arriba
abajo
c Observar en el microscopio, estructuras presentes en las heces.

NOTA: Con el suero fisiológico, los trofozoitos y quistes de los protozoarios se observan en forman natural, y
con lugol, las estructuras internas, núcleos y vacuolas.
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Entre los protozoos destacan, por su relativa frecuencia de observación en heces humanas, las amebas, los
flagelados del tipo de las lamblias, Trichomonas y Chilomastix, y los ciliados, como el Balantidium coli.
Pueden aparecer las formas activas o sus quistes, que no deben confundirse con las levaduras existentes
normalmente en toda deposición. Es discutible la capacidad patógena de cualquiera de los protozoos
señalados, y antes de admitir la importancia etiológica de tal hallazgo en las heces deben excluirse otras
causas del cuadro, y sólo serán inculpados aquellos si además su presencia es abundante.
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u     es un protozoo flagelado patógeno perteneciente al orden
Diplomonadida que parasita el tracto digestivo de humanos y otros mamíferos,
produciendo una patología denominada giardiosis, giardiasis o lambliasis, tiene dos
formas de vida en su ciclo vital:
c  : presenta un tamaño en torno a 20 ʅm de longitud y 65 ʅm de
ancho con una morfología piriforme y una simetría bilatral. Proyectada en un
plano se asemeja a una pera. Posee 8 flagelos, 2 anteriores, 2 posteriores, 2
ventrales y 2 caudales, cuya función es la motilidad celular. En la cara ventral
presenta una estructura con forma de disco bilobulado, cuya función es
permitir la fijación del parásito a la superficie del epitelio intestinal. En la cara
dorsal y coincidiendo en posición con el disco bilobulado se sitúan dos núcleos ovalados con
grandes endosomas. A lo largo de la superficie ventral se disponen unos elementos denominados
cuerpos mediales, cuya función aún permanece desconocida. El trofozoito es la forma vegetativa
que se alimenta y se reproduce.
c † : presenta un tamaño en torno a 65 ʅm de longitud y 60 ʅm de ancho con una morfología
ovalada. Posee 4 núcleos que siempre aparecen dispuestos en alguno de los polos. No presenta
flagelos aunque se pueden apreciar los axonemas flagelares (restos de los flagelos) y los cuerpos
mediales duplicados con respecto al trofozoito. Œa pared es transparente y muy resistente tanto a
factores físicos como químicos. El quiste es la forma vegetativa infectante y de resistencia.

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3  : gusanos del tipo Ascaris, o de la Tenia o "lombriz solitaria".


 : como la Giardia lambria y las ameba.
 : las "lombrices", muy frecuentes en niños pequeños.
Se los relaciona por que los helmitos se los ve a simple vista y no se necesita de hacer un estudio
microscópico para saber que existe en una muestra de heces.

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Con el suero fisiológico, los trofozoitos y quistes de los protozoarios se observan en forman natural, y con
lugol, las estructuras internas, núcleos y vacuolas.

)  
c Se informará detalladamente aquellas características macroscópicas observadas durante el análisis
coproparasitoscopico así como se deberá hacer referencia en su caso el aislamiento de algún
gusano durante el tamizado especificando su especie.

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Permite observar directamente las características morfológicas de los parásitos adultos, enteros o
fraccionados así como los cambios en las características organolépticas de las heces eliminadas (color,
presencia de sangre, y/o moco, consistencia etc.).
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En general se emplean dos métodos:


c Método directo:
c Este método permite observar formas vegetativas de protozoarios (trofozoitos de amebas) y
ooquistes de coccideas.
c Es útil en las necropsias, para analizar el contenido intestinal.
c Cuando al agregado se le agrega 6 gota de lugol débil, se destruyen los trofozoitos y se observa
los quistes.

c Método de enriquecimiento o concentración:


c Sirve para concentrar las formas parasitarias (huevos, larvas) en las heces, de manera que
puedan ser diagnosticadas, aún cuando existan pequeñas cantidades de huevos.
c Pueden ser: Cualitativos (métodos de flotación, métodos de sedimentación) o cuantitativos
(Método de cámara de Mc Master, Método de Stoll).


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c Pseudoparásitos:
ac Residuos vegetales: gránulos de almidón y espículas, granos de polen, esporas de hongos,
células vegetales.
ac Grasas y cristales.
ac Burbujas de aire.
ac Huevos y larvas de parásitos de vida libre.
c Parásitos:
ac Huevos de parásitos.
ac Ooquistes y quistes de protozoarios.
ac Œarvas de parásitos.

   
c Aprendí a preparar una muestra de heces para realizar su estudio macroscópico y microscópico con
solución salina (suero fisiológico).
c Observe las características físicas de las heces, teniendo en cuenta que estas eran líquidas, de olor
fétido y de coloración marrón, no tenían sangre ni moco.
c Observe al microscopio estructuras como una entoameba hystolítica en estado de prequiste,
diferenciándola por su presencia de varios quistes en su interior.
c Distinguí y diferencie luego una Giardia lamblia por su forma ovoide y con una prolongación hacia
atrás.
c Reconocí además estructuras anexas de la muestra como materia fecal condensada.


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c Estar atentos a las indicaciones generales para que al momento del reconocer las placas no
confundamos unas estructuras de otras, teniendo en cuenta diferencias entre estas.
c Tomar la muestra ya preparada con cuidado y con el afán de no romper el porta y el cubreobjetos.
c No mover las placas luego de haber sido enfocadas y diferenciado su contenido, en especial si se
identifican estructuras importantes en la muestra.
c Al observar con el lente de mayor aumento, evitar el choque de la placa con este para no romper el
portaobjetos, ni contaminar el microscopio.
c Para una mejor observación utilizar únicamente el tornillo micrométrico.
c Observar con los dos ojos para tener una mejor apreciabilidad de la muestra.
c Colocarse correctamente el mandil y material de protección dentro del laboratorio.


*  +
c Œaboratorio de Microbiología: Instrumentación y principios básicos/ José González Alfaro, Boris
González González, Rosa T. Barrial González. Œa Habana: Editorial Ciencias Médicas; 2004.
c MANUAŒ DE TÉCNICAS EN MICROBIOŒOGÍA CŒÍNICA. M. V. Álvarez, E. Boquet, I. De Fez. AEFA.
6 0.
c http://www.tuotromedico.com/temas/parasitos_en_heces.htm
c http://www.sepeap.org/archivos/libros/NEFRO/ORINA/VARIOS.pdf
c http://www.medicentro.com.co/Œaboratorio.htm
c http://www.scribd.com/doc/2202 852/fasciculo27-los-parasitos
c http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com/?_c66_BlogPart_pagedir=Next&_c66_BlogPart_ha
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