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ccc


c  a

V

c
ccc

c 


 !"#$%&'()"("*
+,+%-

./ 
c0
c
c0 c . c/

.c1
c  
 c2



3(45

.'


En esta práctica se pudo realizar la identificación de los diferentes carbohidratos

primero que todo se preparo la solución a estudiar, en nuestro caso una solución
problema (miel de abejas) y la muestra biológica (clara de huevo) en las cuales se
utilizaron diferentes pruebas para su respectivo análisis, en cada demostración se
obtuvo resultados positivos y en otros negativos, se tuvo en cuenta algunas
propiedades en este caso algunas coloraciones y según esto se determina la
reacción para la determinación de los carbohidratos. en la prueba de Molisch con
respecto a la solución problema (miel de abejas) salió positiva ya que se produjo
una coloración violeta indicando así la presencia de carbohidratos, en si se logro
reconocer los carbohidratos por medio de reacciones coloreadas de carácter
cualitativo y así diferenciar Hexosas de pentosas, aldosas de cetosas e identificar
azucares reductores y no reductores con la respectiva prueba.

&6#": carbohidratos, pruebas, azucares, pentosas, aldosas, muestras

biológicas.

V
 c
ccc

c  a

V
c  .c
Œos carbohidratos también llamados
azúcares, osas o sacáridos, son
polihidróxialdehidos
polihidroxicetonas o compuestos
poliméricos que por hidrólisis
producen polihidróxialdehidos
polihidroxicetonas.
Según el número de unidades de
azúcares sencillos que posean se
clasifican en: monosacáridos o
azúcares sencillos, que a su vez
pueden ser aldosas cuando contienen
el grupo aldehído o cetosas cuando
contienen el grupo cetona. Œos
monosacáridos naturales pertenecen
a la serie D de los azúcares y pueden
tener entre tres y hasta siete átomos
de carbono. Œos disacáridos que
están formados por dos
monosacáridos unidos entre sí por
enlaces glucosídicos.
Œos polisacáridos que son polímeros
naturales con varios miles de
unidades de azúcar sencillo ligadas
entre sí.
De acuerdo con lo anterior, además
de reconocer si un compuesto
pertenece a la familia de los
carbohidratos, es necesario
diferenciar si se trata de un
monosacáridos tipo aldosa o cetosa,
si es fácilmente oxidable o no, es
decir si es un azúcar reductor o no lo
es, si es de cinco átomos de carbono

V
V
(pentosa) o de seis átomos de
carbono (hexosa), si es disacárido o
polisacárido.
o Ensayo de Molisch: Este ensayo es
un ensayo para reconocimiento
general de carbohidratos en el que
y los polisacáridos y disacáridos se
hidrolizan con ácido sulfúrico
concentrado hasta monosacáridos y
se convierten en derivados del
furfural o 5-hidroximetil furfural los
cuales reaccionan con Į-naftol
formando un color púrpura violeta.
Ensayo de Benedict: El ensayo de
Benedict permite el reconocimiento
de carbohidratos reductores, al igual
que el reactivo de Fehling, el de
Benedict contiene ion cúprico en
medio alcalino que se reduce hasta
óxido cuproso en presencia de
azúcares con el hidroxilo
hemiacetálico libre.
Ensayo de Barfoed: Esta prueba
permite diferenciar entre
monosacáridos y disacáridos
reductores, también contiene ion
cúprico que se reduce hasta óxido
cuproso más rápidamente con los
monosacáridos que con los
disacáridos.
Ensayo con Œugol: El reactivo de
Œugol que contiene una mezcla de
yodo y yoduro, permite reconocer
polisacáridos, particularmente el
almidón por la formación de una
 c
ccc

c  a

V
coloración azulvioleta intensa y el
glicógeno y las dextrinas por
formación de coloración roja.
Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo
es específico para cetosas y se basa
en la conversión de la cetosa en 5-
hidro-metil-furfural y su posterior
condensación con resorcinol
formando así complejos coloreados.
Ensayo de Bial: El reactivo de Bial
contiene orcinol en ácido clorhídrico,
el cual forma complejos de coloración
sólo con las pentosas.
 glucosa, galactosa y lactosa.
& 
c'c

Ôara realizar las diferentes pruebas
utilizamos dos muestras biológicas:
'c
/
 


67,!)3 miel de
abejas, clara de huevo,
glucosa, sacarosa y almidón.
A un 1 ml de carbohidrato más
agua se le agrego tres gotas
del reactivo de Molisch y se
agito, luego se dejo resbalar
por las paredes del tubo1 ml
de H2SO4 concentrado.
5 &"6 !" #,! +#,#
4 "#(#,+,"() !"
*#)3
67,!)3 miel de
abejas, clara de huevo,
Esta prueba se realizo en la
cabina de extracción de gases.
Se tomo 1ml de solución de
carbohidrato en diferentes
tubos de ensayo y luego se
: se disolvió 10 ml adiciono
de miel de abejas en agua destilada
hasta completar 100 ml y para que se
disolviera mejor se la agito en baño
María.
/ 
.
1: se midió 1ml de
clara de huevo y se agrego cinco
veces su volumen en agua y se agito
con la cual se hará la identificación de
azucares
5 &"6 4 #67,!)
"( *"("3 "##,8( !"
',#73
V
V
acido nítrico
concentrado y se calentó en un
baño María de agua hirviendo
hasta que el volumen del tubo
de ensayo sea la mitad del
original y la solución tome un
color amarillento (1 hora).
Œuego se saco los tubos del
agua hirviendo y se dejo
enfriar los tubos al aire libre
por 20 minutos y luego se los
deposito en baño de hielo.
Después de haber pasado 2
horas con un agitador de vidrio
se tomo una pequeña muestra
y se la miro en microscopio.
 c
ccc

c  a

V

%5 &"6 !" $( 4 introdujo los tubos en baño de

"#(#,+,"()!"$#"3 agua hirviente durante 5
67,!)3 miel de minutos.
abejas, clara de huevo,
glucosa, galactosa, fructosa y 5 &"6 !" 69"! 4
sacarosa. !,),(*, "()"
Se coloco en diferentes tubos +(#:,! 
0,5 ml de fenilhidrazina y luego !,#:,!3
se le agrego 1ml del 67,!)3 miel de
carbohidrato, luego se agito y abejas, clara de huevo,
se calentó en un baño de agua glucosa, fructosa, maltosa y
hirviente y se dejo enfriar los lactosa.
tubos a temperatura ambiente A 2ml de reactivo de Barfoed
para luego observar los se le agrego 1ml de solución
cristales en el microscopio. de carbohidrato y luego se
agito, se calentó el tubo en
5 $#" "!#)"3 baño de agua hirviente durante
&"6 !" "7,(*  5 minutos5

"("!,#) 
67,!)3 miel de 5 &"6 4 "
abejas, clara de huevo, "#(#,+,"()!"#")3
glucosa, sacarosa y almidón. 67,!)3 miel de
abejas, clara de huevo,
&"6 !" "7,(*3 en un glucosa, fructosa y sacarosa.
tubo de ensayo se mesclo 2ml ",;(993a 2 ml de reactivo
de solución fehling A y 2 ml de de Seliwanoff se le agrego 1
la solución fehling B y al ml de la solución de
instante se le agrego 1 ml de carbohidrato y se calentó en
solución de carbohidrato, se baño de agua hirviente.
agito y se los coloco los tubos
en un baño María de agua <5 &"6 !"
, 4
hirviente durante 15 minutos. "#(#"4"()3
 
&"6 !"
"("!,#)3 en un 67,!)3 miel de
tubo de ensayo se coloco 1ml abejas, clara de huevo, xilosa,
de la solución de carbohidrato arabinosa y glucosa.
más 2ml de reactivo de A 1ml de solución de
benedict, luego se agito y se carbohidrato se le agrego 3 ml
V

V
 c
ccc

c  a

V
de reactivo de Bial, luego se
agito y se coloco en baño de
agua hirviente.
5 "#(#,+,"() !"
4,#:,!#(""#),
!"*3
67,!)3 miel de
abejas, clara de huevo,
glucosa, dextrina, almidón y
glicógeno.
A 1ml de carbohidrato se le
agrego dos gotas del reactivo
del Œugol y se agito.
 suficientes en el aspecto de
5 &"6 !" #,! +#,#
4 "#(#,+,"() !"
*#)3
Esta prueba fue imposible
comprobarla ya que no se
formaron los cristales
requeridos para esta
determinación, esto se los
realizaría en el microscopio,
una de las razones más
considerables porque no se
produjo esta reacción es la
estabilidad y calidad de los
reactivos que no fueron
calidad para generan los
c.c=
./ 
1. &"6 4 #67,!)
"( *"("3 "##,8( !"
',#73
Al realizar las diferentes
pruebas observamos que con
los carbohidratos que
reacciono la prueba de Molisch
fue con la sacarosa y la prueba
biología en la cual utilizamos
miel de abejas ya que
observamos un anillo de color
violeta lo cual nos indica la
presencia de carbohidratos, en
las demás reacciones como
fue con el huevo dio como
resultado una coloración rojiza
con un precipitado blanco igual
sucedió con el almidón.
V
V
objetivos propuesto.

3. &"6 !" $( 4
"#(#,+,"()!"$#"3
En esta prueba las reacciones
positivas fueron con la
fructosa, el huevo y la
miel observando la aparición
de cristales ya que las
ozasonas son compuestas por
la condensación de
fenilhidrazina las cuales tienen
características cristalinas lo
cual nos permitió su
identificación. Con los demás
compuestos como fue con la
glucosa y sacarosa no se
observo reacción alguna ya
que se obtuvo una coloración
amarilla.
 c
ccc

c  a

V
5 $#" "!#)"3
&"6 !" "7,(*  realizamos
"("!,#)3 positivas fueron: la glucosa, la
"##,8(!"9"7,(*3
Se funda en el poder reductor
del grupo carbonilo de un
aldehído. Éste se oxida a ácido
y reduce la sal de cobre (II) en
medio alcalino a óxido de
cobre (I), que forma un
precipitado de color rojo. Un
aspecto importante de esta
reacción es que la forma
aldehído puede detectarse
fácilmente aunque exista en
muy pequeña cantidad. Si un
azúcar reduce el licor de
Fehling a óxido de cobre (I)
rojo, se dice que es un azúcar
reductor.
Se utiliza como reactivo para la
determinación de azúcares
reductores, y es útil para
demostrar la presencia de
glucosa, y también para
detectar derivados de la
glucosa como la sacarosa o la
fructosa.
Al reaccionar con
monosacáridos, se torna
verdoso; si lo hace con
disacáridos, toma el color del
ladrillo.
 positivas fueron la fructosa, la
 miel, la glucosa y el huevo ya

V
V
"##,8(!"6"("!,#)3
En las reacciones que
las que dio
miel ya que se observo una
coloraciones de color amarilla
y rojas con baja intensidad, ya
que estos reactivos contienen
sales cúpricas que le dan
coloración en el reactivo como
fue en el caso de la sacarosa,
almidón y el huevo. En medio
alcalino el ion cúprico se
transforma en hidróxido
cúprico y este en presencia de
azúcar reductor se transforma
en hidróxido cuproso que por
acción del calor se transforma
en oxido cuproso el cual es
insoluble en agua por lo cual
produce un precipitado de
color rojo y cuando se
encuentra en bajas
concentraciones su color es
amarillo como en el caso de
las reacciones que nos dieron
positivas ya que pertenecen a
grupos reductores libres.
5 &"6 !" 69"! 4
!,),(*, "()"
+(#:,! 
!,#:,!3
Œas pruebas que nos dieron
 c
ccc

c  a

V
que al reaccionar con la
, 4
prueba de barfoed nos dio una
coloración roja amarillenta ya
que aquí el cobre está en una
disolución débilmente acida,
en forma de acetato; por efecto
de sustancias reductoras en
caliente, se producen iones
cuprosos que precipitan en
caliente en forma de oxido
cuproso.
5 &"6 4 "
"#(#,+,"()!"#")3
<5 &"6 !"
"#(#"4"()3
Œa pruebas que nos dieron
positivas fueron la xilosa,
arabinosa ya que nos dieron
una coloración azul lo cual
quiere decir que estas
contienen pentosas5
El huevo y la glucosa dieron
una coloración amarilla.
5 "#(#,+,"() !"
4,#:,!#(""#),
!"*3

/c>3
Al transcurrir un tiempo de
realizar la reacción e que obtuvimos una coloración
introducirla en baño de agua
hirviente se observo que los
carbohidratos que
reaccionaron fueron la miel, el
huevo y la sacarosa ya que
produjeron un color rojo
intenso a los pocos minutos de
haberlo colocados al calor,
comprobando así que hubo la
presencia de cetohexosas,
aldosas. Ya que las cetosas en
presencia de acido clorhídrico
se deshidratan rápidamente
que las aldosas produciendo
derivados del furfural que se
condensa con resorcinol lo
cual da una coloración roja.
V
V
En esta reacción con el
almidón nos dio positiva ya
azul oscura, pero con los
demás carbohidratos nos dio
una coloración roja como fue
con la glucosa, el huevo y la
miel.
Con la dextrina la prueba nos
resulto con una coloración
negra por lo cual pudimos
determinar que la muestra
estaba contaminada y el
glicógeno por ser altamente
ramificado, con segmentos
cortos produjo una coloración
roja.
 c
ccc

c  a

V
Ô UEBAS Miel Clara Glucosa Sacarosa Almidón Galactosa Œactosa Fructosa Maltosa xilos Arabinosa Dextrina glicógeno
de a
huevo
MOŒISCH + - + -
ACIDO
MUCICO
OZASONAS + + + - - +
FEHŒING + + + - - +
BENEDICT + - + - -
BA FOED + + + - + -
SEŒIWANOFF + + + -
BIAΠ- - + +
ŒUGOŒ - - + ?

/.c
 acetal o cetal no dan pruebas

positivas con estas soluciones
J Œos carbohidratos tienen una y se llaman azúcares no
estructura definida pueden ser reductores.V
monosacáridos, disacáridos,
trisacáridos, oligosacáridos y V
polisacáridos. y se los puede
identificar mediante las J Œa glucosa, dextrosa y
pruebas realizadas galactosa son monosacáridos
anteriormente en donde y la lactosa, maltosa y
dependiendo de su estructura sacarosa, disacáridos.V
indican una coloración.

J El uso del yodo no es buen

J Œos monosacáridos reaccionan determinante para la
de acuerdo a los grupos determinación de
hidroxilo y carbonilo que polisacáridos.V
poseen. Œos disacáridos y los
polisacáridos se pueden
hidrolizar para producir
monosacáridos. Œos azúcares J Comparada Con Œa Muestra
que dan resultados positivos Biológica Con Œa Muestra
con las soluciones de ÔroblemaV
Benedict ó Fehling se conocen
como azúcares reductores, y V
todos los carbohidratos que
contienen un grupo hemiacetal
o hemicetal dan pruebas
positivas. Œos carbohidratos
que solo contienen grupos
V

V
 c
ccc

c  a

V

(clara de huevo) fueron

Ô UEBAS Muestra Muestra positivas lo que indica,
problema biológica
Miel Clara de Ôositivo: Aldehídos alifáticos y
huevo Į-hidroxialdehidos
MOŒISCH + - Negativo: Aldehídos
ACIDO aromáticos y cetonas
MUCICO eacción de oxidación de
OZASONAS + + azúcares por iones cúpricos
FEHŒING + + Un ejemplo típico de azúcares
BENEDICT + - reductores serían la glucosa y
BA FOED + +
la maltosa, y de azúcares no
SEŒIWANOFF + +
reductores, el disacárido
BIAΠ-
sacarosa (O-ȕ-D-
- -
ŒUGOŒ fructofuranosil-(2-1)-Į-D-
 glucopi« Œas cetosas, que no
son azúcares reductores,

/

'/c sufren, sin embargo,
reacciones de oxidación típicas
En el caso de la muestra de los aldehídos; para ello
problema (miel de abejas) la necesitan un medio básico, ya
prueba fue positiva dando que a valores altos de pH se
lugar a derivados de color produce una isomerización a la
púrpura. Es una prueba correspondiente aldosa.
general de azúcares.



c
?
Tanto la Muestra problema
En el huevo y la miel se (Miel) y muestra biológica
observo la aparición de (clara de huevo) fueron
cristales ya que las ozasonas positivas lo que indica,
son compuestas por la
condensación de fenilhidrazina Ôositivo: miel precipitada de
las cuales tienen color rojo ladrillo
características cristalinas lo Negativo: clara de huevo
cual nos permitió su
identificación. Œo que indica que:


/c0 Cu + + OH - ĺ Cu (OH)
(precipitado amarillo)
Tanto la Muestra problema
(Miel) y muestra biológica El hidróxido pierde agua

V

V
 c
ccc

c  a

V
2Cu (OH) ĺ Cu2O
(precipitado rojo ladrillo) + H2O
Œa aparición de un precipitado
amarillo, anaranjado, o rojo
ladrillo evidencia la presencia
de un azúcar reductor.
 

c/
Œa aparición de un precipitado,
en la Muestra problema (Miel)
y muestra biológica (clara de
huevo). Fueron positivos.
Aparece un precipitado blanco
de ácido múcico. ó indica que no Es pentosas.
galactérico.Sirvio para
identificar la galactosa ó los
azúcares que la contiene. se
diferencia a los mono de los
disacáridos. Estos últimos
reaccionan más lentamente
con el acetato cúprico, debido
probablemente al tamaño
molecular, aunque también
pueden estar implicados otros
factores tales como una
interacción más compleja con
los dos anillos monosacáridos.

c
/c0 c3V
de hexosas. Œas cetosas en
medio ácido se deshidratan
más rápidamente que las
aldosas, por lo que ambos
grupos pueden diferenciarse
en función del tiempo que
tarda en aparecer el producto
coloreado.
Se realizo la prueba solamente
en la muestra biológica (clara
de huevo), la cual resulto
negativa y no dio lugar a
derivados de color azul. Esto
/.0/
Tanto la Muestra problema
(Miel) y muestra biológica
(clara de huevo) fueron
negativas lo que indica, que no
hubo la presencia de almidón
al no cambiar su color de
caramelo a azul.



/c> 1. Química Orgánica. McGraw

Hill. Novena edición. España.
la Muestra problema (Miel) y 1997.
muestra biológica (clara de
2. J. Química Orgánica. Quinta
huevo) fueron positivas lo que
indica, derivados de color rosa- edición, Thomson editores,
rojo. Es una prueba específica México, 2001