ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DEL REACTIVO
La suspensión del antígeno siempre debe refrigerarse
RPR
Prueba Rápida de Reagina
(Sífilis)
Prueba en placa de floculación con carbón activado para la
determinación cualitativa y cuantitativa de anticuerpos
reagínicos en suero o plasma
RESUMEN Y PRINCIPIO
La prueba de RPR es una prueba de floculación no
treponémica macroscópica que es utilizada para detectar y
cuantificar reaginas, un anticuerpo anti-lipídico encontrado
en el suero o plasma de personas con sífilis y ocasionalmente
en personas con infecciones agudas o crónicas en otras
condiciones aparte de la sífilis.
El antígeno utilizado en el equipo es una modificación del
antígeno VDRL que contiene micropartículas de carbón para
realzar la diferencia entre un resultado positivo y negativo.
Si una muestra contiene reaginas, ocurre la floculación con
las partículas de carbón contenidas en la suspensión del
antígeno, la cual aparece como un cúmulo negro. Las
muestras no reactivas se observan con un ligero color gris.
PRESENTACIONES
Equipo para 50 pruebas
Equipo para 100 pruebas
Equipo para 200 pruebas
Equipo para 300 pruebas
Equipo para 500 pruebas
REACTIVOS
● Suspensión de Antígeno RPR.
● 1
Suspensión de cardiolipina , conteniendo micropar-
tículas de carbón activado.
● Control Positivo RPR.
● Control líquido estabilizado, reactivo con antígeno
RPR.
● Control Negativo RPR.
● Control líquido estabilizado, no reactivo con antígeno
RPR.
Precauciones: Unicamente para uso diagnóstico in-vitro.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO
La suspensión del antígeno debe agitarse por 5 a 10
segundos antes de abrirse, para resuspender las partículas
de carbón. Los controles están listos para su uso.
cuando no se utilice. Proteger de la luz ¡No congelar!.
El antígeno es estable sin abrir y almacenado entre 2-8°C,
hasta la fecha de caducidad marcada en su respectiva
etiqueta. Los controles son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en su etiqueta cuando se almacenan
entre 2-8°C.
Lleve a temperatura ambiente la suspensión del antígeno y
los controles antes de utilizarse.
MATERIAL PROPORCIONADO
● Aguja No. 18 sin bisel utilizada para dispensar
aproximadamente 17mL de la suspensión del
antígeno.
● Pipetas/ agitadoras utilizadas para dispensar
aproximadamente 50 mL (0.05 mL) de muestra.
● Tarjetas de Prueba (círculos de aproximadamente
18 mm). Utilice como superficie de prueba.
Se debe tener cuidado en la manipulación de las
tarjetas de prueba para evitar introducir contami-
nantes al circulo de prueba. Extienda cada muestra
sobre el total del área del círculo de prueba.
Nota: Deseche la aguja cuando el equipo se haya utilizado
completamente.
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO
PROPORCIONADOS
● Rotador (100 ± 2 rpm)
● Solución salina (0.9%)
● Cronómetro
● Lámpara
RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Las muestras pueden ser sueros activados o inactivados o
plasmas recolectados con EDTA como anticoagulante. Evite
la hemólisis. La lipemia no interfiere con la suspensión del
antígeno, sin embargo, si la muestra esta severamente
lipémica de manera que se obscurece el estado de las
partículas de antígeno, la muestra no debe ser utilizada.
ESTABILIDAD DE LA MUESTRA
Las muestras de suero se reportan estables por 5 días,
almacenadas entre 2-8°C. Los plasmas recolectados con
EDTA y almacenados entre 2-8°C se reportan estables hasta
24 hrs.2
SUSTANCIAS INTERFERENTES
Como con todos los antígenos tipo cardiolipina, pueden
ocurrir resultados falsos positivos. Estos resultados pueden
ser causados por enfermedades como lepra, lupus
eritematoso, mononucleosis infecciosa, paludismo y
neumonía viral.
Varios reportes indican la presencia de resultados falsos
positivos en el embarazo.3,4 Enfermedades autoinmunes y
adicciones narcóticas pueden dar reacciones falso-positivas.5
PROCEDIMIENTO
Procedimiento cualitativo
1. Lleve a temperatura ambiente la suspensión del antígeno
de RPR, los controles y las muestras.
2. Tome la pipeta/agitador del extremo sellado. Al tiempo
que oprime y mantiene presionado dicho extremo,
coloque la pipeta dentro de la muestra. Suelte para
permitir que la pipeta aspire un poco de muestra.
3. Sostenga en posición vertical la pipeta/agitador
directamente sobre un círculo de la tarjeta de prueba y
coloque una gota de muestra sobre esta área.
4. Utilizando el extremo plano de la pipeta/agitador,
extienda la muestra para cubrir el total de la superficie
del círculo. Deseche la pipeta/agitador. Repita el mismo
procedimiento para cada muestra.
5. Agite el frasco de la suspensión del antígeno antes de
utilizarlo. Sosténgalo en posición vertical y dispense
varias gotas en la tapa del frasco para asegurarse de
que el paso por la aguja es correcto. No limpie la aguja.
Coloque una gota de la suspensión del antígeno sobre
cada muestra. NO EXTIENDA!
6. Agite por 8 minutos a 100 rpm en un rotador mecánico.
7. Transcurrido este tiempo retire la tarjeta del rotador y
agítela breve y suavemente.
8. Lea macroscópicamente bajo una lámpara de luz
intensa.
RESULTADOS CUALITATIVOS
Reactivo: Presencia de flóculos grandes o pequeños
en el centro o la periferia del círculo de prueba.
Débil reactivo: Presencia de flóculos pequeños pero
definidos.
No reactivo: Apariencia lisa, uniforme pero sin flóculos
visibles.
Los resultados positivos deben ser confirmados mediante
pruebas de las muestras utilizando procedimientos
cuantitativos. Se recomiendan pruebas serológicas
confirmativas como el ensayo de microhemaglutinación para
anticuerpos treponémicos (MHA-TP). El diagnóstico final
debe estar en base a la correlación de los resultados de
prueba junto con otros hallazgos clínicos. (Véase
Limitaciones)
Procedimiento cuantitativo
1. Seleccione los sueros positivos obtenidos en la prueba
cualitativa.
2. Colocar en una gradilla cuatro tubos 12 x 75 mm y
numerarlos.
3. Agregar a cada uno de ellos 0.5 mL de solución salina.
4. Depositar 0.5 mL de suero problema en el tubo No. 1 y
mezclar.
5. Pasar 0.5 mL del tubo No. 1 al tubo No. 2 y mezclar.
6. Continuar esta operación hasta el tubo No. 4.
7. Depositar 0.05 mL de cada una de las diluciones sobre
anillos diferentes de la placa de reacción. Extienda sobre
el total de la superficie de cada círculo donde se
colocaron las diluciones.
8. Añadir una gota de la suspensión del antígeno
previamente resuspendido, exactamente sobre cada una
de las gotas de las diluciones anteriores utilizando el
frasco gotero al cual se le ha insertado la aguja No. 18
sin bisel.
9. Agite por 8 minutos a 100 rpm en un rotador mecánico.
10. Transcurrido este tiempo retire la tarjeta del rotador y
agítela breve y suavemente.
11. Leer el resultado macroscópicamente.
RESULTADOS CUANTITATIVOS
La última dilución que contenga agregados macroscópicos
indica el título de la muestra.
Ejemplo:
Tubo No. Dilución del suero Resultado
1 1:2 Positivo
2 1:4 Positivo
3 1:8 Positivo
4 1:16 Negativo
El título del suero problema será: 1:8.
LIMITACIONES
El diagnóstico de la sífilis no debe ser hecho basado en un
resultado positivo único de una prueba no treponémica, sin
el soporte de una historia positiva o evidencia clínica. Las
muestras de suero que son reactivas en pruebas cualitativas
deben ser cuantificadas para establecer un tratamiento en
el cual los cambios de título puedan ser determinados como
un indicador de la respuesta al mismo.
Las muestras de plasma no deben ser utilizadas para
pruebas cuantitativas. Las muestras que son no-reactivas
pero dudosas, se deben de repetir y cuantificar ya que se
pueden detectar reacciones poco frecuentes de prozona.
CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO
Se obtuvieron 625 muestras de laboratorios públicos de salud
y fueron sujetos a comparación entre la prueba de RPR Sífilis
y Tarjetas de Prueba Macro-Vue TMRPR (BBL Division of
Becton Dickinson and Company) con los siguientes
resultados:
RPR Sífilis Macro-VueTM
No-reactivo 431 433
Reactivo 194 192
Hubo una concordancia de 431 de los sueros no reactivos y
de 194 de los sueros reactivos. Esto representa un 99.4%
de concordancia.
Veinticinco (25) de los sueros reactivos probados por ambos
procedimientos fueron seleccionados al azar y comparados
en un procedimiento semi-cuantitativo descrito anteriormente.
Los títulos se extendieron de 1:4 a 1:512. Hubo concor-
dancia en la dilución final en 22 casos. Los otros 3 resultados
fueron como se mencionan a continuación:
 RPR Sífilis Macro-VueTM Rev. 11/07/02
A. 1:4 1:8 IN-118
B. 1:128 1:64
C. 1:32 1:16 Fabricado en México por:
Laboratorios Licon S.A.
Viveros del Rocío No. 33
Esto representa una concordancia dentro de una dilución en
Col. Viveros de la Loma
todos los casos.
C.P. 54080 Tlalnepantla, Edo. de México
Tel.: (55) 5362-0299
BIBLIOGRAFÍA Fax: (55) 5362-1792
1. MANUAL OF TESTS FOR SYPHILIS, 1990, APHA
publication.
2. Larsen, SA, Pettit DE, Perryman MW, Hambie EA,
Mullally R, Whittington W. EDTA-treated plasma in the
rapid plasma reagin card test and the toluidine red
unheated serum test for serodiagnosis of syphilis. J Clin
Microbiol 1983; 17:341-345.
3. Walker, An. N: Brit. Jr. Ve. Dis., 47:259-262, August 1971.
4. Garner, M.F. & Backhouse , J.L.: Med. Jr. Australia, 1:737-
739, April 1973.
5. Kaufman, R.E.: Weiss, S, Moore, J.D.; Falcone, V. And
Weisner, P.J.: Brit. Jr. Ven. Dis., 50:350-353, 1974.