Teste das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS)
O TBARS foi realizado conforme o método descrito por Vyncke (1970).
Para a construção da curva padrão de 1,3,3-tetrametoxipropano foi preparada uma solução estoque de 0,003 mol de 1,3,3-tetrametoxipropano (Sigma-Aldrich) por litro de água destilada. Esta solução foi diluída em balões volumétricos de 100 mL para a obtenção de soluções com diferentes concentrações finais. Foram adicionados 5 mL de cada uma das concentrações em tubos de ensaio contendo 5 mL de solução de ácido tiobarbitúrico (Sigma-Aldrich) 0,02 M. Os tubos foram levados a banho fervente por 40 min, observando-se o desenvolvimento de coloração rósea. A absorbância de cada solução foi medida a 538 nm em espectrofotômetro (FEMTO) e o branco preparado pela adição de água destilada em substituição as soluções diluídas. A curva padrão de 1,3,3-tetrametoxipropano foi apresentada através do gráfico de absorbância versus concentração de 1,3,3-tetrametoxipropano (mol 1,3,3-tetrametoxipropano L-1) (Apêndice I). Para a análise das amostras, cerca de 5 g de amostra foi extraída com solução de ácido tricloroacético 7,5 %. A mistura foi centrifugada e 5 mL do sobrenadante foi adicionado a um tubo de ensaio contendo 5 mL de solução de ácido tiobarbitúrico (TBA) 0,02 M. Procedeu-se com as mesmas etapas descritas para a construção da curva padrão. A concentração em mg malonaldeído por kg de amostra foi determinada pela equação obtida com a curva padrão de 1,3,3-tetrametoxipropano. As análises foram realizadas em triplicata e os resultados foram expressos em mg de malonaldeído por kg de amostra, como média ± desvio padrão.